Cistanozidas A tarpininkauja p38/MAPK keliu, slopindamas osteoklastų aktyvumą Ⅱ
May 16, 2024
2 Rezultatai Rezultatai
2.1 Cistanchesidas A slopina RANKL sukeltą osteoklastų diferenciaciją.
TRAP dažymo rezultatai parodė, kad lyginant su kontroline grupe, osteoklastų skaičius buvo žymiai didesnis, kaiCistancheside Abuvo 5, 10, 20, 40, 80 ir 160 μmol/L. sumažėjo, irCistanchesidas A turėjo stipriausią slopinamąjį poveikį osteoklastogenezeiesant 160 μmol/L koncentracijai (1A, B pav.). CCK-8 citotoksiškumo eksperimento rezultatai parodė, kad cistanchesidas A neturėjo toksinio poveikio kaulų čiulpų makrofagams, kai koncentracija mažesnė nei 160 μmol/L (1C pav.).
2.2 Cistancheolis
A slopina aktino žiedų susidarymą osteoklastų paviršiuje irosteoklastų kaulų rezorbcijos funkcija. Žr. 2 pav. Faloidino ir DAPI fluorescencinio dažymo rezultatai parodė, kad, palyginti su teigiama kontroline grupe, osteoklastų aktino žiedų plotas mažos ir didelės cistanchesido A dozės grupėse buvo žymiai sumažintas, o osteoklastų aktino žiedų plotas didelės. - Cistanchesido A dozės grupė buvo žymiai sumažinta. Žiedo plotas buvo mažesnis neiCistanchesidas Mažos dozės grupė(2A, C pav.). Kaulų šlifavimo diskų dažymo toluidino mėlynumu rezultatai parodė, kad, palyginti su teigiama kontroline grupe, mažos ir didelės Cistancheol A dozės grupėse kaulų šlifavimo diskų kaulų spragų plotas buvo žymiai sumažintas, o kaulų spragų plotas. didelės dozės Cistancheol A grupėje žymiai sumažėjo. Plotas buvo mažesnis neiCistanchesidas Mažos dozės grupė(2B, D pav.).
1 pav. Cistanozidas A (Cis A) slopina osteoklastų diferenciaciją, kurią sukelia branduolinio faktoriaus kappa-B ligando (RANKL) receptorių aktyvatorius.
2 paveikslas ｜ Cistanozidas A (CisA) slopina F-aktino žiedo susidarymą osteoklastuose ir kaulų rezorbcijos funkciją
2.3 Cistanchesidas A sumažina pagrindinių osteoklastų genų ekspresiją.
Naudojant vidutinį GAPDH geno ekspresijos lygį kaip kontrolinį standartą, rezultatai parodė, kad, palyginti su teigiama kontroline grupe, mažos cistanchesido A dozės grupė gali žymiai sumažinti su osteoklastų reguliavimo diferenciacija susijusių genų TRAP, Nfatc ekspresijos lygių reguliavimą. {2}}, DC-STAMP ir su kaulų rezorbcija susiję genai c-Fos ir ctsk (3 pav.).
2.4 Cistanchesidas A slopina pasroviui esančių JNK/MAPK kelio baltymų ekspresiją. Western blot rezultatai rodo, kad, palyginti su teigiama kontroline grupe, cistanchesidas A, kurio koncentracija yra 40, 80 ir 160 μmol/L, gali reikšmingai slopinti Nfatc1 ir c-Fos baltymų ekspresiją. kiekis, o šis poveikis priklausė nuo dozės (4 pav.).
2.5 Cistanche A slopina p-JNK baltymo ekspresiją. Western blot rezultatai rodo, kad laiko gradiente 0, 5, 10, 20, 30 ir 60 min., p-JNK baltymo ekspresija rodo pirmąją tendenciją. didelis, o paskui mažas, ir Palyginti su teigiama kontroline grupe, 160 μmol/L koncentracijos cistanchesidas A gali reikšmingai slopinti p-JNK baltymo ekspresiją po 10, 20, 30 ir 60 minučių intervencijos (P < 0,01, P < 0.{19}}), žr. 5 pav.
5 pav. Cistanozidas A (Cis A) slopina p-JNK baltymo ekspresiją
