Santrauka:Ultravioletinis (UV) spinduliavimas sukelia odos fotosenėjimą, dėl kurio oda susiraukšlėja ir suglemba gaminant reaktyviąsias deguonies rūšis (ROS). Dėl šios priežasties apsauga nuo fotosenėjimo yra svarbi kosmetikos ir dermatologijos gaminių savybė. Natūralių produktų kilmės biomedžiagos yra labai pageidaujamos kaip galimos būsimos sudedamosios dalys, nes šios biomedžiagos dažnai yra saugios ir veiksmingos. Šiuo tyrimu siekėme apibūdinti Pradosia multisite, tradiciškai naudojamo saulės nudegimui ir eritemai gydyti, odos apsauginį aktyvumą. Mes nustatėme Pradosia multisite (Pm-ME) metanolio ekstrakto laisvųjų radikalų šalinimo, anti-melanogeninį ir drėkinamąjį poveikį keratinocituose (HaCaT ląstelėse), melanocituose (B16F10 ląstelėse) ir fibroblastuose (žmogaus odos fibroblastuose (HDF)). necitotoksinės koncentracijos. Pradosia daugiavietėje metanolio ekstrakte yra kumarino rūgšties kaip pagrindinio komponento, o ekstraktas pasižymi apsauginiu aktyvumu nuo UVB ir H2O{8}}sukelto citotoksiškumo. Šis ekstraktas taip pat slopino metaloproteinazių (MMP) ir ciklooksigenazės (COX) -2 ekspresiją HaCaT ląstelėse. Sirt-1 ekspresijos sumažėjimas UVB ir H2O2-apdorotomis sąlygomis HaCaT ląstelėse buvo atkurtas Pm-ME. Remiantis 2,20 -kazino-bis (3-etilbenzotiazolino-6-sulfonrūgšties) diamonio druskos (ABTS) tyrimu, šis ekstraktas parodė reikšmingą laisvųjų radikalų šalinimo aktyvumą. Pm-ME taip pat padidino hialurono rūgšties sintazės (HAS) ir transglutaminazės -1 (TGM-1) ekspresijos lygį HaCaT ląstelėse, o tai rodo tariamą drėkinamąjį aktyvumą. Įdomu tai, kad 1 tipo kolageno (Col1A1) geno ekspresija ir jo promotoriaus aktyvumas, įvertinti reporterio geno tyrimu, padidėjo HDF ir HEK293 ląstelėse. Panašiai Pm-ME padėjo atkurti kolageno kiekį po UVB ir H2O2 gydymo HDF, taip pat sumažino melanino sintezę ir sekreciją iš B16F10 melanomos ląstelių, o tai gali rodyti naudingą balinančią kosmetinę vertę. P38 inhibitorius SB203580 ir JNK inhibitorius SP600125 slopino MMP-9 ir COX-2 ekspresiją H2O2-apdorotose HaCaT ląstelėse. Panašiai ERK inhibitorius U0126 slopino HAS-2 Pm-ME/H2O2-apdorotose HaCaT ląstelėse. Šie radiniai rodo, kad Pm-ME gali būti nukreiptas į JNK ir p38 slopinimą ir ERK aktyvavimą. Todėl Pm-ME gali turėti anti-fotosenėjimo ir anti-melanogeninių savybių, reguliuodamas mitogeno aktyvuotą baltymų kinazę, o tai gali būti naudinga kosmeceutikos pramonėje.

Remiantis atitinkamais tyrimais,cistancheyra dažnasžolėžinomas kaip „stebuklingas augalas, prailginantis gyvenimą“. Jo pagrindinis komponentas yracistanozidas, kuris turi įvairų poveikį, pvzantioksidantas, priešuždegiminis, irimuninės funkcijos skatinimas. Mechanizmas tarp cistanche irodos balinimasslypi antioksidaciniame cistanche glikozidų veikime. Melaniną žmogaus odoje gaminaoksidacijatirozino, kurį katalizuojatirozinazė. Theoksidacijos reakcijai reikalingas deguonies dalyvavimas, todėl laisvieji radikalai organizme tampa svarbiu veiksniu, turinčiu įtakosmelaninogamyba. Cistanche yra cistanozido, kuris yra antioksidantas ir gali sumažinti jo susidarymąlaisvieji radikalaiorganizme, todėl slopinama melanino gamyba.

Spustelėkite „Cistanche Tubulosa“ papildą balinimui

Paprašyk daugiau:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Įvadas

Oda yra didžiausias kūno organas, kuris tarnauja kaip barjeras tarp organizmo ir aplinkos ir yra atsakingas už odos homeostazės palaikymą ir galiausiai lemiamą organizmo išlikimą [1]. Odą sudaro epidermis, derma su priedinėmis struktūromis ir poodiniai riebalai [2]. Be to, oda yra svarbi nuolatiniam ryšiui su imunine, nervų ir endokrinine sistemomis [3], ji dažniausiai apsaugo nuo patogenų, cheminių medžiagų, fizinių sužalojimų ir ultravioletinių (UV) spindulių [4]. Ultravioletiniai spektrai skirstomi į tris zonas: UVC (200–280 nm), UVB (280–320 nm) ir UVA (320–400 nm) [5]. Iš jų UVB daugiausia sugeria viršutiniai odos epidermio sluoksniai ir papiliarinė derma, o UVA spinduliai prasiskverbia į tinklinę dermą 1000 kartų mažesniu efektyvumu, sukeldami įvairius biologinius efektus, palyginti su UVB [5]. Nors UVC yra labai reaktyvus ir absorbuojamas raginio sluoksnio, jį daugiausia pašalina ozono sluoksnis ir atmosfera. UVB, kaip pagrindinis UV spinduliuotės šaltinis, gali sukelti reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS), pvz., vandenilio peroksido (H2O2) gamybą, aktyvinant ROS generuojančius fermentus, įskaitant NADPH oksidazę, ksantino oksidazę ir D-aminorūgšties oksidazę [6– 8] ir odos fotosenėjimo indukcija, dėl kurios oda susiraukšlėja ir suglemba [9,10]. Be to, buvo pranešta, kad oksidacinis streso atsakas sukelia įvairius ląstelių komponentų pažeidimus, tokius kaip ląstelių membranos lipidai, baltymai ir nukleino rūgštys [11]. Šios pažeistos odos ląstelės gali sukelti uždegiminį atsaką, dėl kurio gali atsirasti žala, pasireiškianti chroniškai atviroje odoje [12].

Oksidacinis stresas skatina uždegiminių ir redoksui jautrių transkripcijos faktorių, branduolinio faktoriaus (NF)-κB ir aktyvatoriaus baltymo (AP) -1 ir jų signalizacijos fermentų, įskaitant mitogenų aktyvuotas baltymų kinazes (MAPK), pvz., tarpląstelinių, aktyvavimą. signalu reguliuojama kinaze (ERK), p38 ir c-Jun-N-galo kinaze (JNK) AP-1 kelyje arba kaip κB (IκB ), IκB kinazės (IKK / ) inhibitorius ir AKT NF-κB kelyje, susijęs su uždegimo sukėlimu ir raukšlių susidarymu [13]. Tarpląstelinio signalo reguliuojama kinazė paprastai tarpininkauja ląstelių atsakams, susijusiems su augimo faktoriais, JNK, ir p38-tarpininkaujantiems ląstelių atsakams, susijusiems su citokinais ir fiziniu stresu [14]. Mitogeno aktyvuotos proteinkinazės taip pat gali paskatinti proteolitinių matricos metaloproteinazių (MMP) gamybą [15], kurios skatina kolageno skaidymą, taip sumažindamos odos elastingumą [16]. Kalbant apie šiuos komponentus, antioksidacinius komponentus arba ekstraktus, tokius kaip ginsenozidas, kurkuminas, epikatechinas, asiaticozidas, zijuglikozidas I, magnololis, galo rūgštis, hidroksichavikolis, hidroksicinamono rūgštys, glicirizo rūgštis, mangiferinas, mirko, rozmarino rūgštis, GF1K tektorigeninas ir, Spartium junceum L. sekėjų hidroalkoholinis ekstraktas buvo naudojamas kuriant odos senėjimą stabdančius produktus [17–21]. Kadangi oksidacinis stresas yra žinomas kaip pagrindinė žmonių ligų ir senėjimo proceso, turinčio įtakos ilgaamžiškumui, priežastis, antriniai bioaktyvūs metabolitai žmonių mitybojeaantioksidacinės savybėsyra laikomi vertingais ingredientais [22,23].

Kiti su fotosenėjimu susiję genai yra ciklooksigenazė-2 (COX-2) ir Sirt-1. Ciklooksigenazė-2 paprastai per daug ekspresuojama esant priešvėžiniams UV sukeltiems odos pažeidimams [24], o jos slopinimas gali sumažinti piktybinę transformaciją epidermyje [25]. Sirt-1 ekspresija gali užkirsti kelią ląstelių apoptozei ir padidinti ląstelių išgyvenimą [26]. Kitas apsaugos nuo UVB spinduliuotės mechanizmas yra melanino, pigmento, susintetinto melanocituose ir toliau išskiriamo į epidermio sluoksnio keratinocitus, gamyba [1]. Melaninas susidaro oksiduojant L-tiroziną ir po jo paverčiant L-dihidroksifenilalaninu (L-DOPA) [6], katalizuojantis nuo vario priklausomu fermentu tirozinaze [27]. Nepaisant apsauginės funkcijos, per didelė melanino gamyba gali sukelti amžiaus dėmes [28], melizmą ir hiperpigmentaciją [29]. Dėl dabartinės tendencijos, kai grožio etalonu laikomi šviesūs veido atspalviai, farmacijos ir kosmetikos pramonėje labai populiarūs odos balinimo preparatai, kuriais pasiekiamas arba hiperpigmentinių pažeidimų balinimas, arba odos balinimas [29]. Taigi daug pastangų buvo dedama kuriant preparatus, mažinančius melanino sintezę [30]. Kadangi odos senėjimas yra susijęs su odos drėgmės praradimu, svarbus veiksnys norint išlaikyti sveiką odą yra pakankamas drėkinimas [31]. Hialurono rūgštis (HA), didelės molekulinės masės glikozaminoglikanas, pasižymintis hidrofilinėmis savybėmis, prisideda prie odos drėkinimo ir plastinių savybių, reguliuodama hialurono rūgšties sintezių (HAS) ekspresiją [32]. Kitas svarbus odos genas yra kolagenas, kuris palaiko epidermio struktūras [33], todėl yra atsakingas už odos stiprumą ir atsparumą [34] ir kurio degradacija sukelia odos suglebimą ir susiraukšlėjimą. Be to, transglutaminazė-1 (TGM-1) yra epidermio konstituciškai išreikštas fermentas, katalizuojantis ragenuotų epidermio ląstelių apvalkalo susidarymą ir padedantis išvengti vandens praradimo [35,36].

Sapotaceae šeima yra paplitusi daugiausia atogrąžų ir subtropikų Azijos ir Mesoamerikos regionuose. Daugelis Sapotaceae šeimos rūšių duoda didelės ekonominės vertės valgomus vaisius. Šie vaisiai buvo naudojami medicininiais tikslais. Visų pirma, sėklose yra daug maistinių medžiagų, augalinių riebalų, baltymų ir kitų naudingų junginių. Pavyzdžiui, mamey aliejus tradiciškai buvo naudojamas odos priežiūrai, nudegimams ir eritemai gydyti [37]. Pradosia muzika yra Sapotaceae šeimos narys, kurio aliejus tradiciškai buvo naudojamas odos randams gydyti [38]. Tačiau jo savybės dar turi būti moksliškai įrodytos. Todėl šio tyrimo tikslas buvo nustatyti galimą P. mutisii vertę odos priežiūroje, kosmetologijoje ir farmakologijoje.

2. Rezultatai

2.1. Pm-ME apibūdinimas ir jo poveikis ląstelių gyvybingumui

Pm-ME neužblokavo gyvybingumo iki 100 µg/ml, bet šiek tiek sumažino gyvybingumą esant 200 µg/mL HaCaT, B16F10 ir žmogaus odos fibroblastų (HDF) ląstelėse, remiantis 3-(4,{{). 7}}dimetiltiazolo-2-il)-2,5-difeniltetrazolio bromido (MTT) tyrimas (1a–c pav.). Naudojant ultraaukšto slėgio skysčių chromatografiją (UHPLC) ir skysčių chromatografiją (LC) / masės spektrometriją, nustatyta, kad pagrindinis Pm-ME junginys yra kumarino rūgštis 4, 27 min. (1d pav.).

2.2. Apsauginis Pm-ME poveikis nuo UVB ir H2O2 pažeidimų

Norint nustatyti, ar Pm-ME apsaugo HaCaT ląsteles nuo UVB ir H2O2-sukelto fotosenėjimo pažeidimo, ląstelės buvo iš anksto apdorotos skirtingomis Pm-ME koncentracijomis (0–100 µg/mL) prieš veikiant UVB arba H2O2. 2a paveiksle parodyta, kad UVB švitinimas sumažino prilipusių HaCaT ląstelių skaičių, o Pm-ME padidino ląstelių sukibimą. Be to, H2O2 sukeltas ląstelių pažeidimas buvo atkurtas Pm-ME esant 100 µg/mL (2b pav.). Siekiant išsiaiškinti, ar Pm-ME susilpnino UVB ir H2O2-sukeliamą raukšlių susidarymą, MMP-1 ir MMP-9 ekspresijos lygiai buvo išmatuoti po apdorojimo UVB arba H2O2, kai yra arba nėra Pm-ME. Pm-ME slopino MMP-1 ir MMP-9 ekspresiją abiem sąlygomis (2c, d pav.). Toliau ištyrėme, ar Pm-ME slopina laisvųjų radikalų sukeltą uždegiminį atsaką, matuodami COX-2 mRNR lygį. UVB arba H2O2-apdorotomis sąlygomis Pm-ME stipriai slopino COX-2 mRNR lygį esant 100 µg/ml (2e, f pav.). Tada išmatavome senėjimą stabdančio geno Sirt{40}} mRNR lygį, kad nustatytų jo poveikį fotosenėjimui. Ir UVB, ir H2O2 sumažino Sirt-1 ekspresiją, o Pm-ME nepaprastai atkūrė savo ekspresiją esant 50 ir 100 µg/mL (2g, h pav.). Kadangi Pm-ME slopino tam tikrus molekulinius ir ląstelių atsakus HaCaT ląstelėse, apdorotose UVB arba H2O2, toliau ištyrėme, ar šis ekstraktas turi tiesioginį antioksidacinį aktyvumą, naudojant 2,2′-kazino-bis (3-etilbenzotiazoliną{{57). }}sulfonrūgštis) ABTS tyrimas, kuriame Pm-ME parodė nuo dozės priklausomą laisvųjų radikalų šalinimo aktyvumą (2i pav.).

2.3. Drėkinantis ir kolageno kiekį didinantis Pm-ME poveikis

Pm-ME sustiprino su drėkinimu susijusių genų, tokių kaip HAS-2 ir TGM-1, ekspresiją HaCaT ląstelėse (3a pav.). Norėdami nustatyti, ar Pm-ME gali sustiprinti kolageno geno (Col1A1) ekspresiją, pirmiausia HDF ląsteles apdorojome Pm-ME (0–100 µg/mL) ir tada nustatėme Col1A1 ekspresijos lygį. Kaip parodyta 3b paveiksle, padidėjusi Col1A1 geno ekspresija Pm-ME gydymo sąlygomis buvo stebima priklausomai nuo dozės. Šie rezultatai buvo dar patvirtinti naudojant reporterio geno tyrimą su Col1A1-Luc konstrukcija, transfekuota HEK293 ląstelėse ir HDF ląstelėse. Tikimasi, kad Pm-ME padidino Col1A1 geno promotoriaus aktyvumą priklausomai nuo dozės abiejose ląstelėse (3c, d pav.). Be to, nustatyta, kad Pm-ME atkuria kolageno geno lygį, kuris sumažėjo tiek UV spinduliuote, tiek H2O2 gydymo sąlygomis (3e, f pav.).

2.4. Anti-melanogeninis Pm-ME poveikis

Kadangi mūsų tikslinė koncentracija atitiko 100 µg/mL, nustatėme, ar Pm-ME galėjo slopinti melanino sekreciją ir jo ląstelių turinį. Norėdami tai nustatyti, B16F10 melanomos ląstelės buvo stimuliuojamos -melanocitus stimuliuojančiu hormonu (-MSH), esant Pm-ME arba arbutinui arba arbutinui (teigiama kontrolė) arba jo nebuvimo. Tada buvo išmatuotas melanino kiekis. Pm-ME sumažino melanino sekreciją iki 75 procentų esant 100 µg/ml (4a, b pav.). Pm-ME taip pat sumažino melanino kiekį MSH apdorotose B16F10 ląstelėse iki 30 procentų esant 100 µg/mL, o melanino kiekis esant 50 µg/mL nebuvo reikšmingai sumažintas, palyginti su teigiama kontrole (-MSH) (4c pav.). . Galiausiai, norėdami nustatyti Pm-ME poveikį melaniną gaminančių fermentų aktyvumui, atlikome tirozinazės fermento tyrimą. Įdomu tai, kad Pm-ME (0–400 µg/mL) reikšmingai sumažino tirozinazės aktyvumą esant didesnei nei 200 µg/mL koncentracijai, o kontroliuojamas vaistas Kojic rūgštis (KA) stipriai sumažino tirozinazės aktyvumą (4d pav.).

2.5. Pm-ME tarpininkaujamo antifotosenėjimo ir drėkinimo efektų molekuliniai mechanizmai

3. Diskusija

Dėl savo turtingumo maistinėmis medžiagomis ir vitaminais įvairios Sapotaceae šeimos rūšys buvo naudojamos tradicinėje medicinoje [39]. Tačiau galimas P. mutisii panaudojimas kosmetikos ir farmacijos pramonėje dar neištirtas. Dėl šios priežasties tyrėme P. mutisii odos apsauginį aktyvumą keratinocituose ir fibroblastuose odą žalojančiomis sąlygomis. Taip pat įvertinome jo tinkamumą kosmetiniams preparatams. Kadangi toksiškumo tyrimai, siekiant nustatyti galimą riziką žmonėms, yra būtinas ir svarbus žingsnis tiek vaistų, tiek kosmetikos pramonėje [40], P. mutisii citotoksiškumas buvo išbandytas HaCaT, B16F10 ir HDF ląstelėse. Pradosia mutisii pasižymėjo mažu toksiškumu iki 200 µg/mL, o esant 100 µg/mL HaCaT, B16F10 (1a, b pav.) ir HDF ląstelėse toksiškumo nebuvo (3c pav.). Naudojant UHPLC/MS analizę (1c pav.), buvo įrodyta, kad Pm-ME yra didelė kumarino rūgšties, fenolio rūgšties, koncentracija [41,42]. Polifenoliai yra antriniai augalų metabolitai ir paprastai yra susiję su apsauga nuo UV spinduliuotės arba patogenų infekcijos. Įrodyta, kad žmogaus organizme polifenoliai apsaugo nuo vėžio, širdies ir kraujagyslių ligų, diabeto, osteoporozės ir neurodegeneracinių ligų vystymosi [1]. Įrodyta, kad kumarino rūgštis turi antioksidacinių ir priešuždegiminių savybių [43].

Ultravioletinė spinduliuotė yra viena iš pagrindinių laisvųjų radikalų (pvz., ROS) gamybos odoje priežasčių. Laisvieji radikalai gali sukelti odos senėjimą ir vėžį, jei jie kaupiasi ilgą laiką [44]. Yra žinoma, kad laisvųjų radikalų sukeltas oksidacinis stresas ir žala gali pakenkti ląstelių išlikimui, proliferacijai, diferenciacijai ir metabolizmui [45, 46]. Remiantis ankstesnėmis ataskaitomis [47, 48], mes taip pat nustatėme, kad UVB spinduliuotės sukeltas ląstelių pažeidimas HaCaT ląstelėse. Žala apėmė sumažėjusį proliferaciją, padidėjusią apoptozę ir molekulinius atsakus, įskaitant genų, susijusių su uždegimu, raukšlių susidarymu ir senėjimu, ekspresiją (2 ir 3 paveikslai). Kadangi UVB sukelti radikalai yra pagrindiniai veiksniai, pažeidžiantys ląsteles, audinius ir organus, buvo nustatyta, kad kai kurie endogeniniai junginiai, tokie kaip melatoninas ir jo metabolitas [49–52] bei bilirubinas [53], yra susiję su toksinių radikalų šalinimu, nes jiems būdingas antioksidantas. , apsaugančios nuo foto ir mūsų kūno senėjimą stabdančios savybės. Iki šiol šie junginiai taip pat buvo sukurti kaip labai vertingos biomedžiagos, kurias farmacijos pramonė gali pritaikyti mūsų kūnams [54]. Nepaisant to, vitaminas C, kofermentas Q10 ir tokoferolis tampa geriausiais pasaulyje parduodamais produktais žmonių sveikatai dėl savo reikšmingų antioksidacinių savybių. Farmacijos ir kosmetikos įmonių tyrimų laboratorijos ir toliau daug dėmesio skiria veiksmingų antioksidacinių vaistų ir natūralių junginių nustatymui ir kūrimui. Savo tyrime pastebėjome, kad Pm-ME turėjo stiprų antioksidacinį aktyvumą, kai buvo išbandytas naudojant ABTS testą (2i pav.). Panašiai Pm-ME panaikino laisvųjų radikalų sukeltą ląstelių sukibimo slopinimą, branduolio pažeidimo indukciją ir pakitusią genų, tokių kaip MMP-1, MMP-9 ir COX{27}, ekspresiją. } UVB ir H2O2 sąlygomis priklausomai nuo dozės (2a–f pav.). Pažymėtina, kad Pm-ME atkūrė Sirt-1 geno lygį (2g, h pav.), kuris dalyvauja užkertant kelią apoptozei ir didinant ląstelių išgyvenimą oksidacinio streso sąlygomis [26]. Šie rezultatai aiškiai reiškė, kad ląstelių senėjimas buvo susijęs su oksidaciniu stresu dėl Sirt1 ekspresijos sumažėjimo. Pm-ME antioksidacinės savybės leido atkurti Sirt1 ekspresiją. Tai gali apsaugoti nuo odos pažeidimų ir senėjimo natūraliomis UVB spinduliuotės sąlygomis in vivo. Be to, yra galimybė, kad Pm-ME taip pat gali apsaugoti UVC sukeltus ląstelių atsakus, nes mūsų UV spinduliavimo sąlygos gali būti užterštos UVC, nors mes naudojome filtrų sistemą, kad pašalintume visus bangos ilgius, mažesnius nei 290 nm. Koncepcija, kad antioksidacinės biomedžiagos gali pagerinti ląstelių ir molekulių pažeidimus oksidacinio streso sąlygomis, paskatino komercinę įvairių produktų, tokių kaip BIOGF1K, ginsenoside Ro, EGCG, Fraxinus chinensis ekstraktas ir tam tikrus sintetinius antioksidantus, gamybą. Kosmetikos pramonėje plačiai pranešta apie šiuose ir kituose produktuose esančių biomedžiagų priešraukšles ir senėjimą stabdantį poveikį [48,55,56].

Tinkamo odos hidratacijos palaikymas [31] ir naujo kolageno gamyba [57] yra svarbūs sveikos odos procesai. Drėkinamųjų (HAS2, TGM-1) (3a pav.) ir kolageno (Col1A1) genų ekspresija buvo pastebimai padidinta Pm-ME (3b – d pav.) ir padėjo atkurti kolageno kiekį po UVB poveikio ir gydymo H2O2. 3e, f pav.). Todėl tai rodo, kad Pm-ME gali būti veiksmingas ingredientas palaikant sveiką odą. Melanino slopinimas Pm-ME taip pat naudingas jį naudojant kosmetiniuose preparatuose. Nors melaninas yra vertingas saugant odą nuo UV spindulių, nes daugelis moterų nori pašviesinti odą, balinimas anti-melanogenine veikla yra naudinga kosmetinių medžiagų savybė [29]. Pm-ME (100 µg/mL) pasižymėjo stipriu slopinamuoju aktyvumu melanogenezės metu, įvertinus melanino kiekius iš išskiriamos terpės ir melanino sekrecijos lygio sumažėjimą (4a–c pav.). Be to, Pm-ME (200 µg / ml) reikšmingai slopino tirozinazės fermento aktyvumą (4d pav.), o tai reiškia, kad didesnė koncentracija yra tiesiogiai veiksminga slopinant fermentų aktyvumą, o mažesnė koncentracija yra susijusi su melanino sekrecijos reguliavimu. Todėl dėl savo antioksidacinių, anti-fotosenėjimo, raukšlių, drėkinančių ir anti-melanogeninių savybių Pm-ME gali būti laikomas geru kosmetikos kandidatu. Norėdami toliau ištirti šią galimybę, būsimuose tyrimuose planuojame įvertinti jo klinikinį veiksmingumą.

Atlikome tyrimus, siekdami nustatyti molekulinius mechanizmus, kuriais Pm-ME veikė antioksidacinį ir drėkinamąjį poveikį keratinocituose. Mes sutelkėme dėmesį į su MAPK susijusius fermentus (ERK, JNK ir p38), nes šie fermentai atlieka svarbų vaidmenį odos keratinocitų ir melanocitų senėjimui ir melanogenezei [58, 59]. Pavyzdžiui, ERK kelias tarpininkauja ląstelių atsakams į transformuojantį augimo faktorių- 1, padidindamas kolageno [60] ir HA sintezės kelius keratinocituose [61]. JNK vaidina pagrindinį vaidmenį oksidacinio streso sukeltoje keratinocitų apoptozėje [62]. Fermentas p38 yra svarbus palaikant žmogaus odos homeostazę [63]. JNK ir p38 keliai tarpininkauja ląstelių atsakams į citokinus ir fizinį stresą [14]. Šiuos kelius suaktyvina UVB ir ROS sukeltas įtempis. Šie būdai gali padidinti proteolitinių MMP ir COX-2 genų gamybą [15], kurie atitinkamai susiję su kolageno skaidymu ir odos uždegimu [64]. Pažymėtina, kad oksidacinis stresas blokavo ERK fosforilinimą, o p38 ir JNK buvo fosforilinti, kai buvo apdoroti H2O2 (5a pav.). Priešingai, Pm-ME padidino ERK fosforilinimą ir sumažino p38 ir JNK fosforilinimą (5a paveikslas), o tai reiškia, kad šie fermentai gali skirtingai dalyvauti Pm-ME tarpininkaujamoje farmakologinėje veikloje. Siekiant geriau suprasti funkcinį MAPK vaidmenį stabdant senėjimą, anti-melanogeninį ir priešuždegiminį Pm-ME poveikį UVB apšvitintuose ir H2O{36}}stimuliuotuose keratinocituose, buvo naudojami specifiniai MAPK inhibitoriai. 5b paveikslo rezultatai aiškiai rodo, kad Pm-ME slopindamas p38 ir JNK, atsirado raukšlių ir priešuždegiminis poveikis, nes p38 inhibitorius (SB203580) ir JNK inhibitorius (SP600125) blokavo MMP ekspresiją{45 }} ir COX-2. Be to, Pm-ME sukeltas ERK fosforilinimas sukėlė genų, susijusių su drėkinimu, ekspresiją, nes gydymas Pm-ME sukėlė HAS -2 ekspresiją, o U0126 ją slopino (5c pav.). Šie rezultatai rodo, kad su MAPK susiję fermentai prisidėjo prie PM-ME tarpininkaujamos senėjimo, raukšlių ir priešuždegiminės veiklos. Yra žinoma, kad UVB švitinimas padidina kitas signalizacijos kaskadas, tokias kaip susietos su NF-κB ir STAT3 [65, 66]. Vis dar reikia ištirti, ar Pm-ME gali reguliuoti šiuos signalizacijos kelius.

Apibendrinant, mes nustatėme, kad kumarino rūgšties turtingas Pm-ME pasižymi antioksidaciniu, priešraukšliniu, drėkinamuoju ir anti-melanogeniniu poveikiu odos ląstelėse, apšvitintose UVB arba apdorotose H2O2. Pm-ME padidino ERK fosforilinimą priklausomai nuo dozės, bet sumažino p38 ir JNK fosforilinimą (6 pav.). Mūsų rezultatai tvirtai parodė, kad Pm-ME gali būti veiksminga odą apsauganti biomedžiaga. Kadangi oksidacinio streso sąlygomis Pm-ME parodė labai daug žadančią veiklą tiek vėžinėse odos ląstelėse (HaCaT ir B16F10 ląstelėse), tiek normaliuose žmogaus keratinocituose, todėl siūlome naudingus Pm-ME naudojimo kosmetiniuose preparatuose vaidmenis. Tačiau melanomos ląstelės turi nenormalių savybių, pvz., sutrikusi ląstelių ciklo kontrolė, nenormalūs genų ekspresijos modeliai ir riboti diferenciacijos pajėgumai [67], todėl reikia atlikti papildomą darbą su pirminiais melanocitais, kad būtų galima tiksliai suprasti Pm-ME ir jo anti-melanogenezės aktyvumą. molekulinis mechanizmas. Be to, tos pačios šeimos (Sapotaceae) arba genties (Pradosia spp.) augalai bus tiriami dėl panašios odos apsaugos veiklos.

Klauskite daugiau: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501