Anastatica Hierochuntica etanolinių ir vandeninių ekstraktų antioksidacinis aktyvumas, fenolio profilis ir nefroprotekcinis potencialas prieš CCl{0}}sukeltą nefrotoksiškumą žiurkėms

Prašau susisiektioscar.xiao@wecistanche.comdaugiau

Santrauka:Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica L.) plačiai naudojamas įvairioms sveikatos problemoms gydyti, ypač siekiant palengvinti gimdymą ir palengvinti su reprodukcine sistema susijusius sutrikimus. Šiuo tyrimu buvo siekiama įvertinti A. hierofantinio etanolio (KEE) ir vandeninio (KAE) ekstrahavimo CCl4- sukeltą oksidacinį stresą ir nefrotoksiškumą žiurkėms, naudojant biocheminius inkstų funkcijos irantioksidantasbūklės taip pat histopatologiniai inkstų audinio tyrimai.A. hierofhantic buvo 67,49 mg GAE g−1 visofenoliniai junginiai(TPC), atitinkamai 3,51 µg g-1 bendro karotinoidų (TC) ir 49,78 ir 17,45 mg QE g-1 bendro flavonoidų (TF) ir bendro flflavonolių (TFL). Gauta 128,71 µmol TE g-1 DPPH-RSA ir 141,92 µmol TE g-1 ABTS-RSA. A. hierophantic pasižymi puikiu antioksidaciniu aktyvumu, nes slopina linolo rūgšties radikalus ir sudaro chelatinius oksidacinius metalus. HPLC analizė parodė 9 ir 21fenolio rūgštysir 6 bei 2flavonoidųKEE ir KAE, kur vyrauja sinapo ir siringo rūgštys, atitinkamai. Injekcija į raumenis vit. E plius Se ir peroralinis KEE, KAE ir KEE plus KAE vartojimas esant 250 mg kg-1 kūno svorio reikšmingai atkūrė kreatinino, karbamido, K, bendro baltymų ir albumino kiekį serume. Be to, jie sumažino malondialdehidą (MOD), atkūrė redukuotą glutationą (GSH) ir padidino superoksido dismutazės (SOD) lygį. KEE, KAE ir KEE plus KAE apsaugojo inkstus nuo CCl4-nefrotoksiškumo, nes daugiausia susilpnino sukeltą oksidacinį stresą. Bendra nefroprotekcija buvo atitinkamai apie 83,27 proc., 97,62 proc. ir 78,85 proc. KEE, KAE ir KEE plius KAE. Tiek vit.E plius Se, tiek A. hierofantiniai ekstraktai susilpnino CCl{10}}gydytų žiurkių histopatologinius pokyčius. Apibendrinant galima teigti, kad A. hierophantic, ypač KAE, turi potencialų gebėjimą atkurti oksidacinį stabilumą ir pagerinti inkstų funkciją po ūminio CCl4 inkstų pažeidimo nei KEE. Todėl A. hierophantic gali būti naudingas terapinis agentas gydant vaistų sukeltą nefrotoksiškumą.

Raktiniai žodžiai:Kaff-e-Maryam; polifenoliai; biologinis aktyvumas; antriniai metabolitai; inkstų žymenys;antioksidaciniai fermentai; inkstų funkcijos sutrikimas

Norėdami sužinoti daugiau, spustelėkite čia

Įvadas

Inkstų liga yra 9-a pagrindinė mirties priežastis: daugiau nei 1 iš 7, ty 15 procentų JAV suaugusiųjų arba 37 milijonai žmonių, serga lėtine inkstų liga (LIL) [1]. Pažymėtina, kad 2015 m. užfiksuota dažniausia ŠKL priežastis yra cukrinis diabetas, po kurio seka aukštas kraujospūdis ir glomerulonefritas [2]. Kitos CKD priežastys yra idiopatinės (dažnai susijusios su mažais inkstais inkstų ultragarsu) [3]. Anksčiau CCl4 buvo naudojamas metalų nuriebalinimui, sausam valymui, audinių dažymui, gesintuvų skysčiams ir grūdų fumigacijai [4]. Jis sukelia sunkius kepenų, plaučių ir sėklidžių bei kraujo sutrikimus, generuodamas aktyvius laisvuosius radikalus [5]. Remiantis Ogeturko ir kt. [6], šio tirpiklio poveikis sukelia ūminį ir lėtinį inkstų pažeidimą. Manoma, kad laisvųjų radikalų sukelta lipidų peroksidacija yra viena iš pagrindinių ląstelių membranų pažeidimo priežasčių, sukeliančių įvairias patologines sąlygas [7]. Reaktyvių radikalų susidarymas buvo susijęs su CCl4-sukeltam nefrotoksiškumui, kuris yra susijęs su lipidų peroksidacija ir disfunkcinių baltymų kaupimu, dėl kurio pažeidžiami inkstai [8]. Nuostabus, tradicinis vaistinių augalų panaudojimas pastaraisiais metais išaugo, o daugybė tyrimų patvirtino jų gydomąjį vaidmenį kovojant su keliomis ligomis [9–12]. Kaff-e-Maryam (Anastatica hierochuntica) yra dykumos vaistinis augalas, priklausantis Brassicaceae šeimai. Auga įvairiuose pasaulio regionuose, ypač arabų šalyse (pvz., Saudo Arabijoje, Egipte, Omane, Libijoje, Irake, Jungtiniuose Arabų Emyratuose, Kuveite), taip pat kai kuriose Azijos, Europos ir Afrikos šalyse. Manoma, kad A. hierophantic turi didesnį medicininį potencialą ir pageidautina, kad jis būtų vartojamas esant įvairioms sveikatos būklėms [13]. Jis daugiausia naudojamas gimdymo procesui palengvinti ir reprodukcinės sistemos bei medžiagų apykaitos sutrikimams, daugiausia cukriniam diabetui, gydyti [14]. Jis naudojamas kaip analgetikas ir kaip epilepsijos, virškinimo trakto sutrikimų, artrito, bronchinės astmos, burnos opų, maliarijos ir psichinės depresijos gydymas [15–17]. A. hierophantic sudėtyje yra daug mineralų, tokių kaip Mg, Ca, Mn, Fe, Cu ir Zn, kurie yra panašūs arba didesni nei daugelio žolinių augalų, kurie gali suteikti metalams kompleksonų savybių [18]. Yoshikawa ir kt. [19] padarė išvadą, kad flavanonų, tokių kaip Anastasia A ir B, buvimas koreliuoja su stipriu hepatoprotekciniu poveikiu, nes slopina D-galaktozamino sukeltą citotoksiškumą pirminiuose auginamų pelių hepatocituose. Reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) ir citokinų, pvz., naviko nekrozės faktoriaus ir interleukino{30}} gamyba kepenyse Kupfferio ląstelėse prisideda prie hepatocitų naikinimo esant D-galaktozamino hepatotoksiniam poveikiui [20]. A. hierophantinių komponentų antioksidacinės ir priešuždegiminės savybės gali padėti sumažinti D-galaktozamino sukeltą hepatotoksiškumą [21]. A. hierophatic gali sau leisti ekstraktą, priklausomai nuo apsaugos nuo CCl4-hepatotoksiškumo [22]. Tačiau, nepaisant literatūros, kurioje pateikiamos daug žadančios galimybės, susijusios su A. hierophantic naudojimu, A. hierophantic etanolinių (KEE) ir vandeninių (KAE) ekstraktų nefroprotekcinis potencialas turi būti atidžiai išnagrinėtas. Be to, literatūros apžvalgoje daugiausia buvo pabrėžtas A. hierophantic hepatoprotekcinis efektyvumas, tačiau nefroprotekcinis potencialas iki šiol nebuvo ištirtas, todėl šis darbas buvo motyvuotas. Todėl šiuo tyrimu siekiama stebėti antioksidacinių gynybos fermentų pokyčius, aptikti inkstų mikroskopijos pokyčius po CCl4 vartojimo žiurkėms ir ištirti galimą apsauginį A. hierophantinių ekstraktų poveikį nuo CCl4-sukelto inkstų pažeidimo.

Cistanche seksualumui gerinti

2. Medžiagos ir metodai

2.1. Mėginio paruošimas Kaff-e-Maryam (A. hierophantic L.) augalo pavyzdys buvo įsigytas iš vietinės rinkos Buraidos mieste, Kasimo regione, Saudo Arabijoje. Augalinę medžiagą patvirtino Saudo Arabijos Kasimo universiteto Žemės ūkio ir veterinarijos medicinos koledžo Augalų auginimo ir apsaugos departamentas. Mėginys buvo nuplautas švariu vandeniu iš čiaupo, kad būtų pašalintas smėlis ir nešvarumai nuo lapų, o po to ore išdžiovinta augalinė medžiaga (28 ± 1 ◦ C temperatūroje 48 val.) buvo mechaniškai sumalta į miltelius ir laikoma nepermatomuose polietileno maišeliuose 4 ± 1 ◦ C temperatūroje. iki naudojimo. 2.2. Etanolio ir vandeninio ekstrakto paruošimas Maždaug 200 g džiovintų A. hierophantic buvo ekstrahuoti su 3{{1{{106}}4}}0 ml 7{{150}} procentų etanolio Soksleto ekstraktoriuje, kad paruoštumėte ekstrakciją etanoliu (KEE). Ekstraktas koncentruojamas rotaciniu garintuvu 40 °C temperatūroje, kad išgaruotų likęs tirpiklis, tada iki sausumo N2 srove. Vandeninis ekstrahavimas (KAE) buvo atliktas taip, kaip aprašyta Asuzu [23] su nedideliais pakeitimais. Du šimtai gramų džiovintos augalinės medžiagos įpilama į 500 ml karšto sterilaus distiliuoto vandens. Tada mišinys gerai suplakamas ir paliekamas 1 val. Tada prie kolbos buvo prijungtas grįžtamasis kondensatorius ir 10 minučių kaitinamas iki švelnaus virimo, atvėsinamas, gerai sukratytas ir filtruojamas per Whatman Nr. 1 filtravimo popierių. Filtratas išgarinamas rotaciniu garintuvu, po to iki sausumo N2 srove. Alkoholiniai ir vandeniniai ekstraktai (250 mg ml-1) buvo šviežiai paruošti distiliuotame vandenyje, kad būtų galima vartoti per burną. 2.3. Bendras fenolio kiekis (TPC) TPC kiekis A. hierophantic buvo nustatytas pagal pritaikytą metodą, kurį pateikė Bettaieb ir kt. [24]. Rezultatai buvo lyginami su nubraižyta galio rūgšties (GA) standartine kreive, sudaryta 50–500 mg ml-1 (R2=0.99) intervale, o TPC buvo apskaičiuotas gallo rūgšties ekvivalento mg (GAE). ) vienam gramui A. hierofhantic (mg GAE g−1 ). 2.4. Bendras karotenoidų (TC), bendrų flavonoidų (TF) ir flavonolių (TFL) kiekis Kaip pranešė Al-Qabba ir kt. [10], 5 g A. hierophantic buvo pakartotinai ekstrahuoti acetono ir petrolio eterio mišiniu (1:1, v/v). Bendras karotinoidų (TC) kiekis buvo nustatytas spektrofotometriškai ties 451 nm. TC buvo išreikštas mg g-1 DW. TF kiekis A. hierophantic buvo ištirtas pagal aprašytą Mohdaly ir kt. protokolą. [25]. TF kiekis buvo apskaičiuotas kaip mg kvercetino ekvivalento (QE) 100 g-1 dw. Tame pačiame kontekste buvo atliktas TFL turinys [26]. Buvo užfiksuota absorbcija ties 440 nm, o TFL buvo apskaičiuotas kaip mg kvercetino ekvivalento (QE) 100 g-1 DW. 2.5. Antioksidacinės talpos nustatymas DPPH radikalų pašalinimo testas: RSA buvo išbandytas spektrofotometriškai, priklausomai nuo DPPH purpurinės spalvos tirpalo balinimo pagal pakeistą techniką Lu ir kt. [27]. Antiradikalinis pajėgumas buvo pateiktas kaip µmol Trolox ekvivalentų (TE) vienam gramui A. hierophantic (µmoL TE g-1 ). ABTS radikalų šalinimo aktyvumas: A. hierophantic RSA prieš ABTS radikalus buvo išbandytas pritaikytu Lu ir kt. metodu. [27]. Rezultatai buvo išreikšti µmoL TE g-1. -karotino-linolo rūgšties balinimo tyrimas: A. hierophantic antioksidacinis procentas buvo įvertintas balinimo karotenu požiūriu, lyginant su butilinto hidroksianizolu (BHA), taikant pritaikytą spektrofotometrinį protokolą, kurį nurodė Koleva ir kt. [28]; rezultatai buvo pateikti kaip su BHA susiję procentai. Chelatinis A. hierophantic poveikis geležies jonams: A. hierophantic kompleksonų aktyvumas buvo išmatuotas pagal Zhao et al. protokolą. [29]. Ferrozino-Fe2 ir komplekso susidarymo, kaip metalo kompleksonų, slopinimo procentas buvo išmatuotas ir pateiktas mg ml-1, kai kaip teigiama kontrolė buvo naudojama etilendiaminotetraacto rūgštis (EDTA). 2.6. A. hierofhantic vandeninių ir etanolinių ekstraktų frakcionavimas polifenoliniais junginiais Polifenolių nustatymas iš etanolinių ir vandeninių ekstraktų buvo atliktas HP1100 (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, JAV) HPLC sistema su automatiniu mėginių ėmikliu, ketvirčio matrica ir diodų siurblys. detektorius (Hewlett Packard 1050), naudojant kolonėlę (Altima C18 150 × 4,6 mm, 5 µm) su 5 mm Altima C18 apsaugine kolonėle (Alltech, Nettetal, Vokietija) pagal Goupy ir kt. [30]. Naudota tirpiklių sistema buvo A (acto rūgštis 2,5 proc.), B (acto rūgštis 8 proc.) ir C (acetonitrilas) gradientas. Tirpiklio greitis buvo 1 ml min-1, o atskyrimas buvo atliktas 35 °C temperatūroje. Sušvirkštas tūris buvo 10 µl. Fenoliniai junginiai buvo tiriami išoriniu standartiniu kalibravimu ir išreikšti mg g-1 DW ekvivalentų (plius)-katechino flavan{85}}oliams ir ekvivalentišku kumarinu poliniams aromatiniams junginiams. 8 procentų kintamumas buvo nustatytas penkiems fenolio ekstraktams iš to paties mėginio. Visos vertės buvo dvigubų injekcijų vidurkis. Polifenoliai ir jų dariniai buvo identifikuoti ir kiekybiškai įvertinti ties 280 ir 320 nm, o flavonoidai – ties 360 nm. 2.7. Eksperimento planas Visi eksperimentai buvo patvirtinti Institucinio gyvūnų etikos komiteto (IAEC) KSA (Nr. 15-4-2017), KSA, kurį reglamentuoja Eksperimentų su gyvūnais kontrolės ir priežiūros tikslas (CPCSEA) komitetas pagal Nacionalinis bioetikos komitetas (NCBE), Gyvų būtybių tyrimų etikos įstatymo įgyvendinimo taisyklės. Šiame tyrime iš viso buvo panaudoti 36 žiurkių patinai albinosai, suskirstyti į 6 grupes po 6 gyvūnus ir gydomi taip: I grupei (kontrolei) buvo sušvirkšta į pilvaplėvės ertmę (ip) alyvuogių aliejaus (1,0 ml kg-1 du kartus per. savaitę) ir 0,5 ml distiliuoto vandens per burną / kasdien 21 dieną iš eilės. Pagal Al-Qabba ir kt., II grupė gavo ip injekciją šviežio vienodo tūrio CCl4 ir alyvuogių aliejaus mišinio (po 1,0 ml kg-1 du kartus per savaitę) ir 0,5 ml distiliuoto vandens per burną / kasdien. [10] su nedideliais pakeitimais. III grupė (referencinė grupė) gavo į raumenis (im) 50 mg kg-1 vit. E plius Se (Selepherol, Vetoquinol Co., Magny-Vernois, Prancūzija) du kartus per savaitę, pasak Asuka ir kt. [31] ir El-Desoky ir kt. [32] ir 0,5 ml distiliuoto vandens per burną / kasdien. IV grupė buvo bandymas ir gavo 250 mg kg-1 KEE per burną / kasdien kartu su CCl4 ip du kartus per savaitę. V grupė gavo 250 mg kg-1 KAE per burną / kasdien kartu su CCl4 ip du kartus per savaitę. VI grupė gavo 250 mg kg-1 KEE ir KAE (1:1) per burną / kasdien kartu su CCl4 ip du kartus per savaitę. Praėjus dvidešimt keturioms valandoms po paskutinio gydymo (21 diena), žiurkės buvo anestezuotos mišiniu (alkoholis:chloroformas:eteris, 1:2:3). Visiems gyvūnams buvo paimti širdies punkcijos kraujo mėginiai, o serumas atskiriamas centrifuguojant 4000 aps./min 10 min. ir laikomas –20 ◦C temperatūroje biocheminiam tyrimui. 2.7.1. Inkstų biocheminė analizė Kreatinino, karbamido, bendro baltymų ir albumino koncentracijos serume buvo nustatytos automatizuotais spektrofotometriniais metodais (BM/Hitachi autoanalyzer-911; Boehringer Mannheim, Vokietija) pagal gamintojo nurodymus. Kalio kiekis buvo nustatytas liepsnos fotometrija esant 766 nm. 2.7.2. Inkstų antioksidacinio aktyvumo įvertinimas Paėmus kraujo mėginius visų grupių gyvūnai buvo numarinti; dešinieji inkstai buvo greitai izoliuoti ir nuplauti lediniu fiziologiniu tirpalu. Tada audinys buvo nukirptas, nuplaunamas šaltu fiziologiniu tirpalu, nusausinamas ir nedelsiant dedamas ant ledo. Naudojant elektrinį audinių homogenizatorių, audinio dalys (1,0 g) buvo pasvertos ir homogenizuotos 9 tūriais ledo šalto 0,05 M fosfato buferio, kurio pH 7,4. Ląstelių liekanos buvo pašalintos centrifuguojant 12 000 aps./min (4 ◦C) 20 min., siekiant surinkti supernatantus malondialdehido (MDA) koncentracijai [33], superoksido dismutazės (SOD) aktyvumui [34] ir sumažintam glutationo (GSH) kiekiui nustatyti. 35]. Baltymų koncentracija inkstų homogenate buvo nustatyta Bradfordo metodu [36]. 2.7.3. Nefroprotekcijos procentas Nefroprotekcijos (F) procentas vit. E plius Se, KEE, KAE ir KEE plius KAE buvo apskaičiuoti kiekvienam biocheminiam parametrui atskirai pagal Wakchaure ir kt. [37] naudojant šią lygtį: F procentas=[1 − (T − N) (C − N)] × 100 (1) čia T=vidutinė gydymo grupės vertė, C {{ 171}} vidutinė teigiamos kontrolinės grupės vertė ir N= vidutinė neigiamos kontrolinės grupės vertė. Be to, su juo buvo lyginamas bendras nefroprotekcijos procentas (TFP proc.). E plius Seas seka TFP procentą=F procentų kiekvieno ekstrakto biocheminių parametrų suma, F procentų jo biocheminių parametrų suma. E plius Se × 100 (2) 2.7.4. Histopatologiniai tyrimai Autopsijos mėginiai buvo paimti iš atskirų žiurkių grupių kairiojo inksto ir fiksuoti 10 procentų formalino fiziologiniame tirpale 24 valandas. Po plovimo vandentiekio vandeniu buvo dehidratuojama serijiniu alkoholio (metilo, etilo ir absoliutaus etilo) skiedimu. Mėginiai buvo išvalyti ksilene ir įterpti į parafiną 24 valandas 56 ◦ C karšto oro krosnyje. Bičių parafino vaško audinių blokai buvo paruošti, kad juos būtų galima supjaustyti 4-mikrono storiu, naudojant rogučių mikrotomą. Audinių griežinėliai buvo surinkti ant stiklinių stiklelių, deparafinuoti ir nudažyti hematoksilinu ir eozinu, kad būtų galima reguliariai tikrinti šviesos elektriniu mikroskopu [38]. 2.8. Statistinė analizė Rezultatai rodomi kaip vidurkis ± standartinė paklaida (SE). Vidurkių skirtumų reikšmė įvairiose grupėse buvo ištirta naudojant vienpusę dispersijos analizę (ANOVA), po to Duncan testą, o p-reikšmė tarp vidurkių buvo pateikta esant p < 0,05="" lygiui="" [39].="" 3.="" rezultatai="" 3.1.="" fitocheminės="" medžiagos="" ir="" a.="" hierophantic="" antioksidacinė="" talpa="" atlikta="" kiekybinė="" a.="" hierophantic="" fitocheminių="" medžiagų="" ir="" susijusių="" antioksidacinių="" veiklų="" analizė,="" naudojant="" dpph="" ir="" abts="" radikalų="" pašalinimą,="" -karotino-linolo="" rūgšties="" balinimo="" veiklą="" ir="" chelatinį="" gebėjimą="" (ca).="" kaip="" aiškiai="" matyti="" 1="" lentelėje,="" tpc="" kiekis="" buvo="" 67,49="" mg="" gae="" g-1.="" tc="" kiekis="" buvo="" 3,51="" µg="" g-1.="" tf="" ir="" tl="" kiekis="" buvo="" atitinkamai="" 49,78="" ir="" 17,45="" mg="" qe="" g-1.="" be="" to,="" dpph-rsa="" ir="" abts-rsa="" buvo="" naudojami="" antioksidacinės="" veiklos="" progresavimui="" matuoti.="" rezultatai="" parodė="" atitinkamai="" 128,71="" µmol="" te="" g-1="" ir="" 141,92="" µmol="" te="" g-1="" atitinkamai="" dpph-rsa="" ir="" abts-rsa.="" be="" to,="" a.="" hierophantic="" antioksidacinis="" aktyvumas="" (aoa)="" pateiktas="" 1="" lentelėje.="" linolo="" rūgšties="" radikalų="" slopinimo="" procentas="" buvo="" apskaičiuotas="" kaip="" 45,74="" proc.,="" palyginti="" su="" bha,="" naudojant="" -karotino="" balinimo="" (-cb)="" testą.="" be="" to,="" įvertinus="" metalo="" kompleksono="" aktyvumą,="" nustatyta="" 42,89="" mg="" g-1,="" kuris,="" atrodo,="" gali="" trukdyti="" fe2="" plius="" –="" ferrozino="" komplekso="" susidarymui,="" o="" tai="" rodo,="" kad="" jis="" gali="" chelatuoti="" oksidacinius="" metalus.="" 1="" lentelė.="" bendras="" fenolio="" kiekis,="" bendras="" karotenoidų="" kiekis,="" bendras="" flavonoidų="" kiekis,="" bendras="" flflavonolių="" kiekis="" ir="" santykinis="" potencialus="" antioksidacinis="" aktyvumas="" a.="" hierophantic="" (vidurkis="" ±="" se),="" n="">

3.2. A. hierofantinių fenolinių junginių kiekybinis nustatymas Atlikta kiekybinė fenolinių junginių KEE ir KAE analizė HPLC analize, o duomenys pateikti 2 lentelėje. Devynios atskirtos fenolio rūgštys ir šeši flavonoidai buvo nustatyti aptinkamais kiekiais iš A KEE. hierofantiškas. Gausiausios fenolio rūgštys buvo hidroksicinamono rūgštys, tokios kaip sinapo rūgštis (28,704 mg 1{{50}}0 g−1), po to kavos rūgštis (6,621 mg 1{). {63}}0 g-1 ), rozmarino rūgštis (2,884 mg 100 g-1 ), ferulo rūgštis (1,854 mg 10{{85} } g−1 ), ir cinamono rūgštis (0.094 mg 100 g−1 ); ir hidroksibenzenkarboksirūgštys, tokios kaip p-hidroksibenzenkarboksirūgštis (3,440 mg 100 g-1), protokatecho rūgštis (1,811 mg 100 g-1), vanilinė rūgštis (3,326 mg 100 g-1) ir siringo rūgštis (1,083 mg 100 g). −1). Flavonoidai, tokie kaip miricetinas (16,269 mg 100 g-1), D-katechinas (2,410 mg 100 g-1), kaempferolis (0,434 mg 100 g-1), rutinas (0,539 mg 100 g-1), apigeninas{{58} }gliukozido (0,192 mg 100 g−1 ), ir kvercetino (0,184 mg 100 g−1 ) buvo aptikti neįkainojami kiekiai. Taip pat buvo nustatyti A. hierophantic KAE fenoliniai junginiai, o duomenys pateikti 2 lentelėje. Siringo rūgštis buvo užfiksuota kaip didžiausia fenolio rūgštis tarp 21 identifikuoto fenolio. Katecholio ir pirogalolio buvo atitinkamai 2,526 ir 1,589 mg 100 g-1. Duomenys parodė, kad kai kurių fenolio rūgščių, pvz., kavos, katechino, chlorogeno, epikatechino, e-vanilino, p-hidroksibenzenkarboksirūgšties ir protokatecho rūgščių, buvo aptikta vidutiniškai 0,725, 0,256, 0,136, 0,193, 0,42404, 40 mg. g−1, atitinkamai. Tame pačiame kontekste nedidelis kiekis 3,4, 5-trimetoksicinamono, 4-aminobenzenkarboksirūgšties, benzenkarboksirūgšties, cinamono, kumarino, ellaginės, ferulinės, galinės, izoferulinės, kumarino, p-kumarino ir salicilo rūgštys buvo kiekybiškai įvertintos po to, kai buvo identifikuotos. Epikatechinas ir D-katechinas kaip flavonoidai taip pat buvo kiekybiškai įvertinti A. hierophantic KAE.

3.3. Kreatinino, karbamido, K, bendro baltymų ir albumino kiekis serume CCl4 injekcija žymiai padidino GII žiurkių kreatinino, karbamido ir k koncentraciją serume, palyginti su kontrolinėmis žiurkėmis (GI). Ir atvirkščiai, CCl4-gydytose žiurkėse bendras baltymų ir albumino kiekis gerokai sumažėjo (3 lentelė). Vit. E plius Se ir A. hierofantiniai ekstraktai (G III, IV, V ir VI) iš esmės sumažino kreatinino ir karbamido pokyčius, atsiradusius dėl CCl4 injekcijos, o padidino albumino ir bendrųjų baltymų kiekį, kad jie būtų artimi normalioms GI reikšmėms (3 lentelė). ). CCl4-gydytų žiurkių (GII) serumo k lygis buvo žymiai padidėjęs, palyginti su GI (3 lentelė). Suleidžiama vit. E plius Se ir A. hierofhantic alkoholinių ir vandeninių ekstraktų (G IV, V ir VI) vartojimas taip pat teigiamai pagerino k lygį, palyginti su GI (3 lentelė).

3.4. Inkstų antioksidantų biomarkeriai Kaip parodyta 4 lentelėje, CCl4 skyrimas žymiai sumažino SOD ir GSH lygį ir padidino MDA lygį GII inkstų homogenato audinyje. Tačiau, lyginant su GI, žiurkės, gydytos tiek vit. E plius Se ir A. hierofantiniai ekstraktai (GIII, VI, V ir VI) iš esmės pagerino antioksidantų fermentų SOD ir GSH aktyvumą, taip pat sumažino MDA lygį (4 lentelė). A. hierofantinis alkoholinis ekstraktas (GIV) pralenkė A. hierofhantinį vandeninį ekstraktą (GV) ir sujungęs A. hierofhantinį alkoholinį ir vandeninį ekstraktą sumažino antioksidantų kiekį, o kovojant su autoksidacijos procesu, MDA lygis buvo žemas, palyginti su GI.

3.5. Nefroprotekcijos procentas Inkstų funkcijų, tokių kaip kreatininas, karbamidas, k, TP ir albuminas, nefroapsaugos procentas (palyginti su neigiama kontrole (GI) ir teigiama (GII) grupe), taip pat antioksidacinis aktyvumas inkstų homogenate (MDA, SOD, GSH). ) parodyta 5 lentelėje. Nefroprotekcijos procentas užfiksavo didžiausią reikšmę kaip kreatininas, karbamidas, k GIII, TP ir albuminas GV, MDA ir GSH GIII ir SOD GV (5 lentelė). Bendras nefroprotekcijos procentas, palyginti su vit. Gydymas E plius Se užregistravo didžiausią koncentraciją KAE gydytoje grupėje (GV, 97,62 proc.), tada KEE (GIV, 83,27 proc.), o vėliau KEE plius KAE (GVI, 78,85 proc.), kaip parodyta 5 lentelėje.

Diskusija

aukščiausios kokybės antioksidantai. Manoma, kad polifenolinės medžiagos turi antikancerogeninių ir antimutageninių savybių žmonėms [40]. Vertingas TPC kiekis A. hierophantic buvo šiek tiek didesnis nei gautas Mohamed ir kt. [21] kaip 51,97 mg GAE g-1 A. hierochuntica žolėje ir AlGamdi et al. [41], kuris A. hierofantinėse sėklose rado 4 mmol L−1 GAE. Neseniai Zin ir kt. [42] nurodė taninų buvimą A. hierophantic kaip bioaktyvų junginį ir rekomendavo jo biologinį aktyvumą, kurį reikia nuodugniai ištirti. Karotino kiekis, kaip bendro karotinoidų dalis, buvo 2,27 µg g-1, kaip nurodė Mohamed ir kt. [21], ir net dabartiniai rezultatai parodė, kad bendras karotenoidų kiekis yra 3,51 µg g-1. Panašius flavonoidų ir flavonolio kiekio atradimus nurodė Mohamed ir kt. [21]. Biologiškai aktyvūs komponentai, tokie kaip fenoliniai junginiai, pasižymi antioksidaciniu aktyvumu kaip lipidų oksidacijos grandininių reakcijų suskaidymas, suteikdami vandenilį aktyviems laisviesiems radikalams. Šis fenolių pašalinimo potencialas slopinti radikalus buvo išaiškintas jų fenolio hidroksilo grupėmis [8, 10, 22]. Ši fenolio rūgštis buvo aprašyta kaip veiksmingas antioksidantas, įskaitant vandenilio peroksidą, hidroksilo radikalą ir superoksido anijoną [43]. Atrodo, kad A. hierofantinis metalo kompleksonų sudarymas yra įgudęs trukdyti „Fe2 plius – ferrozino“ komplekso konstrukcijai, o tai rodo, kad jis gali užfiksuoti „geležies jonus“ prieš „feroziną“. Teigiamas ryšys tarp fenolinių junginių kiekio padidėjimo tiesiogiai rodomas jų antioksidacinėmis savybėmis [42]. Andjelković ir kt. [44] nustatė daugelio fenolio rūgščių aktyvumą formuojant kompleksus su metalais. Vertingas TPC ir atitinkamas antioksidacinis aktyvumas, naudojant skirtingus matavimo metodus, suteikia aiškią plokštelę ir patvirtina A. hierochuntica kaip vaistinio augalo, skirto maistui ar gėrimams, biologinį aktyvumą. Biologiškai aktyvūs komponentai, tokie kaip fenolio junginiai, pasižymi antioksidaciniu aktyvumu kaip lipidų oksidacijos grandininių reakcijų suskaidymas, paaukodami vandenilį aktyviems laisviesiems radikalams [45]. Buvo išaiškintas šis fenolių pašalinimo potencialas slopinti radikalus

veiksmingas antioksidacinis komponentas, įskaitant vandenilio peroksidą, hidroksilo radikalą ir superoksido anijoną [43,45,47]. HPLC būdu nustatyti ir kiekybiškai įvertinti A. hierophantic KAE junginiai buvo didesni nei identifikuotų junginių A. hierophantic KEE, tačiau identifikuoti junginiai A. hierophantic KEE buvo pateikti didesniais kiekiais [22]. Rezultatai atspindi, kad vartojantis A. hierophantic gali turėti daug komponentų tiek polinėmis, tiek nepolinėmis formomis. Šiuos rezultatus panašiai pateikia AlGamdi ir kt. [41], nes jie identifikavo ir kiekybiškai įvertino 20 polifenolinių junginių A. hirerochuntica sėklose. Ekstrakte buvo chlorogeninių rūgščių ir hidroksibenzenkarboksirūgščių, tačiau pagrindiniai komponentai buvo flavono C-glikozidai, C-glikozidai, O-glikozidai ir O-glikozidų-C-glikozidai, daugiausia susidarę kaip liuteolino konjugatai. Be to, 14 iš 20 A. hierophantinio ekstrakto junginių pasižymėjo antioksidaciniu aktyvumu, naudojant HPLC on-line antioksidantų aptikimo sistemą [41]. Įdomu tai, kad dabartiniai duomenys patvirtino, kad A. hierophantic yra daug fitocheminių junginių ir yra geras natūralių antioksidantų, galinčių turėti naudos sveikatai, šaltinis, kaip buvo mažai pabrėžta sėklose [41]. Taigi arbata, paruošta iš viso augalo miltelių, yra tradicinė vartojimo forma; duomenys iliustravo naujus identifikuotus biologiškai aktyvius junginius A. hirerochuntica KEE ir KAE, kurie skyrėsi nuo AlGamdi ir kt. [41] Daugelyje tyrimų CCl4-sukeltas nefrotoksiškumas naudojamas kaip pavyzdinė augalų ekstraktų / vaistų nefroprotekcinio poveikio tikrinimo sistema [48, 49]. Dabartiniame tyrime buvo nagrinėjamas A. hierophantinių ekstraktų poveikis CCl4-sukeltam inkstų pažeidimui, taip pat jo inksto apsauga ir antioksidacinis potencialas žiurkėms. Dabartiniame tyrime CCl4 gydymo (GII) grupė žymiai padidino kreatinino, karbamido ir k kiekį ir sumažino bendrą baltymų ir albumino koncentraciją, palyginti su GI. Taip gali būti dėl to, kad apsinuodijimas CCl4 yra pagrindinis laisvųjų radikalų gamybos šaltinis daugelyje organų, įskaitant kepenis, inkstus, plaučius, smegenis ir kraują [50]. Taip pat pastebėta, kad po CCl4 injekcijos žiurkėms CCl4 koncentracija inkstuose pasiskirsto tolygiau nei kepenyse [51], nes inkstai turi didelį afinitetą CCl4 ir turi citochromo P450, daugiausia žievėje. Dažniausi laisvieji radikalai iš CCl4 yra trichlormetilo radikalas (CCl3• ) ir trichlormetilperoksilo radikalas (CCl3O2• ) [52]. Šie radikalai prisijungia prie tarpląstelinio baltymo, ląstelės membranos lipidų ir DNR, sukeldami baltymų denatūraciją, lipidų peroksidaciją ir oksidacinį DNR pažeidimą, dėl kurio miršta ląstelė [53]. Priešingai, gydyti CCl{38}}žiurkes. E plius Se (GIII) ir A. hierofantiniai ekstraktai (GVI: VI) veiksmingai sumažino kreatinino ir karbamido koncentracijos padidėjimą, taip pat padidino albumino ir bendrųjų baltymų kiekį serume, kad jie būtų labai artimi jų lygiui GI. Tai gali būti dėl antioksidacinių savybių ir gausaus fenolio kiekio A. hierofantiniuose ekstraktuose bei jo antioksidacinio pajėgumo ir kompleksonų sudarymo. E plius Se, kuris sulaiko laisvuosius radikalus ir taip slopina inkstų pažeidimą. Fitocheminės medžiagos yra veiksmingiausios laisvųjų radikalų gaudyklės ir laikomos geriausiomis augalų antioksidantais [54]. Gausiausi fenolio junginiai buvo hidroksicinamono rūgštys, tokios kaip sinapo rūgštis, tarp devynių nustatytų fenolio junginių KEE, o siringo rūgštis buvo didžiausia fenolio rūgštis tarp 21 identifikuotos fenolio rūgšties KAE. Šeši flflavonoidai buvo nustatyti KEE ir du KAE naudojant HPLC analizę [55]. Be to, kaip antioksidantas, jis. Manoma, kad E apsaugo audinius nuo žalos, kurią sukelia reaktyvūs deguonies metabolitai. Selenas taip pat yra gerai žinomas kaip esminis mikroelementas žmonių sveikatai, apsaugantis ląsteles nuo žalingo laisvųjų radikalų poveikio [22]. Dabartiniame tyrime CCl4 vartojimas žymiai sumažino GSH ir SOD ir padidino MDA lygį inkstų homogenatuose, palyginti su GI. Vit. E plius Se ir A. hierofantiniai ekstraktai pagerino įvairų CCl4 poveikį, atkurdami pakitusį antioksidantų, tokių kaip SOD ir GSH, aktyvumą ir gali deaktyvuoti MDA gamybos procesą, kaip buvo neseniai pranešta [15,21,40,41]. . GSH yra nefermentinis antioksidantas, randamas visose žinduolių ląstelėse. Oksiduota forma, GSSG, GSH veikia kaip daugelio detoksikuojančių fermentų (GPx, GST ir kitų) kofaktorius prieš oksidacinį stresą ir palaiko ląstelių redokso pusiausvyrą [47]. Ši išvada atitinka Khan ir Siddique [56] bei Makni ir kt. [57], kurie pranešė, kad CCl4 sumažino GSH lygį žiurkių inkstuose. Gydymas juo. E plius Se ir A. hierofantiniai ekstraktai parodė apsaugą nuo CCl4 sukelto GSH lygio sumažėjimo. Tame pačiame kontekste SOD katalizuoja dviejų superoksido anijono (*O2) molekulių dismutaciją į vandenilio peroksidą (H2O2) ir molekulinį deguonį (O2), todėl potencialiai žalingas superoksido anijonas tampa mažiau pavojingas [58, 59]. CCl4 intoksikacija keičia genų ekspresijos lygį, mažindama inkstų SOD [60]. SOD aktyvumo sumažėjimas yra jautrus ląstelių pažeidimo indeksas. Mūsų išbandyti A. hierophantiniai ekstraktai sumažino toksiškumą inkstams, sumažindami SOD lygį. Jis dalyvauja įvairiuose fermentiniuose procesuose, kad sumažintų rūgštinimo reakcijų koncentraciją [61]. MDA yra pirmasis lipidų peroksidacijos produktas ir vienas iš svarbių oksidacinio streso žymenų. A. hierofantiniai ekstraktai sumažino MDA lygio padidėjimą ir atkūrė bendrą antioksidacinę galią CCl4-gydytų žiurkių inkstuose. Šį apsauginį poveikį gali lemti stiprus antioksidacinis A. hierophantinių ekstraktų aktyvumas [15,21,40,41]. Šie rezultatai taip pat rodo, kad A. hierofantiniai ekstraktai gali susilpninti oksidacinį stresą, mažindami lipidų peroksido kiekį CCl{70}}atsegtuose žiurkių inkstuose ir užkirsti kelią inkstų pažeidimui. Šie rezultatai sutapo su Zn antioksidacinio aktyvumo CCl4-sukeltam ūminiam nefrotoksiškumui rezultatais [62,63]. A. hirerochuntica ekstraktai parodė vertingą nefroapsauginį pajėgumą, atsižvelgiant į inkstų funkcijos tyrimus (kreatininas, karbamidas, K, TP ir albuminas) ir inkstų homogenato antioksidacinį aktyvumą (GSH, SOD, MDA) atitinkamai GIV, V ir IV. Bendras nefroprotekcijos procentas, palyginti su vit. Gydymas E plius Se užregistravo didžiausią koncentraciją KAE gydytoje grupėje (GV, 97,62 proc.), tada KEE (GIV, 83,27 proc.), o vėliau KEE plius KAE (GVI, 78,85 proc.) atitinkamai mažėjimo tvarka. Tai gali būti dėl fenolio ir antioksidantų kiekio ir kokybės skirtumų A. hirerochuntica ekstraktuose, kurie yra susiję su antioksidaciniu pajėgumu [15,19,22,40,42]. Histopatologiniai inkstų radiniai atitinka tirtų eksperimentinių grupių biocheminius įvertinimus. CCl4 vartojimas (GII) sukėlė glomerulų ir kanalėlių pažeidimą su vazokongezija inkstuose. Dogukan ir kt. [64] atrado panašų histologinį modelį žiurkės inkstų audinyje, reaguojant į ilgalaikį gydymą CCl4. Taip pat manoma, kad histologinius pokyčius sukelia funkcinis nefronų perkrovimas, dėl kurio atsiranda inkstų funkcijos sutrikimas [65], ir (arba) dėl audinių sunaikinimo, kurį sukelia laisvųjų radikalų susidarymas per CCl4 metabolizmą [56, 66]. . Jo poveikis. E plius Se ir A. hierofantiniai ekstraktai, skirti atkurti ir atkurti inkstų sunaikinimo CCl4 poveikį, buvo pastebimi. Tai gali būti dėl to. E plius Se (kaip stiprus antioksidantas) veikia CCl4 sukeltą ROS [67]. A. hierofantiniai ekstraktai slopina CCl4-sukeltą ūminį nefrotoksiškumą dėl fenolinių junginių, esančių A. hirerochuntica ekstraktuose, antioksidacinio vaidmens ir laisvuosius radikalus sulaikančių savybių [22]. Mūsų išvados atitinka kitų tyrėjų, kurie įrodė, kad įvairūs augalų dariniai turi farmakologinį poveikį, pašalindami piktnaudžiavimą CCl4 ir sugrąžindami normalumą [6].

Išvados

Šio tyrimo rezultatai aiškiai parodė, kad A. hierophantiniame augale gausu polinių ir nepolinių fenolinių junginių, pasižyminčių geresnėmis antioksidacinėmis savybėmis, o tai tiesiogiai priklauso nuo fitocheminių medžiagų kiekio. A. hierofantinis (ypač vandeninis ekstraktas) apsaugo žiurkes nuo CCl4-sukelto oksidacinio streso ir ūminio inkstų pažeidimo, kaip rodo reikšmingas MDA lygio sumažėjimas ir padidėjęs GSH bei SOD aktyvumas, taip pat biocheminių ir histologinių tyrimų nutraukimas. pakitimai inkstuose. Apsauginis veiksmingumas gali atsirasti dėl fenolio junginių, esančių A. hierofhantic ekstraktuose, antioksidacinių ir laisvuosius radikalus sulaikančių savybių. Šios savybės padeda paaiškinti augalo kaip vaistažolių vaistinio preparato veiksmingumą. Reikia daugiau tyrimų, kad būtų galima visiškai apibūdinti aktyvius A. hierophantic principus, o šis tyrimas yra skirtas paskatinti išsamesnius susijusius tyrimus, kad būtų pateikta pakankamai duomenų ir rekomendacijų, kaip apibrėžti jo mechanizmus ir saugias dozes.

Nuorodos

1. Statistics, KD Chronic Kidney Disease Jungtinėse Amerikos Valstijose. 2021 m. Prieiga per internetą: https://www.cdc.gov/kidneydisease/pdf/ Chronic-Kidney-Disease-in-the-US-2021-h.pdf (prieiga 2021 m. liepos 20 d.).
2. Ku, E.; Glidden, DV; Johansenas, KL; Sarnakas, M.; Tighiouart, H.; Grimes, B.; Hsu, CY Ryšys tarp griežtos kraujospūdžio kontrolės lėtinės inkstų ligos metu ir mažesnio mirtingumo prasidėjus galutinės inkstų ligos stadijai. Kidney Int. 2015, 87, 1055–1060. [CrossRef] [PubMed]
3. Tumlinas, JA; Madaio, parlamentaras; Hennigar, R. Idiopatinė IgA nefropatija: patogenezė, histopatologija ir gydymo galimybės. Clin. J. Am. Soc. Nefrolis. 2007, 2, 1054–1061. [CrossRef] [PubMed]
4. Olah, G.; Reddy, VP; Prakašas, GS; Reakcijos, FC Kirk-Othmer cheminių technologijų enciklopedija. Kontaktiniai lęšiai 1978, 720–742.
5. Ozturkas, F.; Ucar, M.; Ozturkas, IC; Vardi, N.; Batcioglu, K. Anglies tetrachlorido sukeltas nefrotoksiškumas ir betaino apsauginis poveikis Sprague-Dawley žiurkėms. Urology 2003, 62, 353–356. [CrossRef]
6. Ogeturkas, M.; Kus, I.; Colakoglu, N.; Zarašis, I.; Ilhanas, N.; Sarsilmaz, M. Kofeino rūgšties fenetilo esteris apsaugo inkstus nuo anglies tetrachlorido toksiškumo žiurkėms. J. Ethnopharmacol. 2005, 97, 273–280. [CrossRef]
7. Slater, TF Laisvųjų radikalų mechanizmai audinių pažeidime. Ląstelių funkcija ir ligos; Cañedo, LE, Todd, LE, Packer, L., Jaz, J., red.; Springeris: Bostonas, MA, JAV, 1988 m.; 209–218 p. [CrossRef]
8. Chanas, MR; Rižvi, W.; Chanas, GN; Chanas, RA; Shaheen, S. Anglies tetrachlorido sukeltas nefrotoksiškumas žiurkėms: Digera muricata apsauginis vaidmuo. J. Ethnopharmacol. 2009, 122, 91–99. [CrossRef]
9. Afsaras, T.; Chanas, MR; Razakas, S.; Ullah, S.; Mirza, B. Acacia hydaspica R. Parker karščiavimą mažinantis, priešuždegiminis ir analgezinis aktyvumas ir jo fitocheminė analizė. BMC papildymas. Altern. Med. 2015, 15, 1–12. [CrossRef]
10. Al-Qabba, MM; El-Mowafy, MA; Althwab, SA; Alfheeaid, HA; Aljutaily, T.; Barakat, H. Chenopodium quinoa daigų fenolio profilis, antioksidacinis aktyvumas ir pagerinantis veiksmingumą prieš CCl4 -sukeltą oksidacinį stresą žiurkėms. Nutrients 2020, 12, 2904. [CrossRef]