B ląstelių ir T ląstelių anomalijos pacientams, kuriems trūksta selektyvaus IgA

Abstraktus

Fonas

Selektyvus IgA trūkumas (SIgAD) yra labiausiai paplitusi įgimta imuniteto klaida, kurios etiologija beveik nežinoma. Šiuo tyrimu buvo siekiama ištirti limfocitų pogrupių klinikines diagnostines ir prognostines vertes bei funkciją simptominiams SIgAD sergantiems pacientams.

Metodai

Į šį tyrimą buvo įtraukta iš viso 30 turimų SIgAD pacientų iš Irano registro ir 30 pagal amžių atitinkančių sveikų kontrolinių asmenų. Mes išanalizavome B ir T ląstelių periferinius pogrupius ir T ląstelių proliferacijos tyrimą srauto citometrija SIgAD pacientams, kuriems yra lengvas ir sunkus klinikinis fenotipas.

Rezultatai

Mūsų rezultatai parodė, kad SIgAD sergantiems pacientams labai padidėjo naivių ir pereinamųjų B ląstelių skaičius ir smarkiai sumažėjo į ribines zonas panašių ir perjungtų atminties B ląstelių. Mes nustatėme, kad naivių ir centrinės atminties CD4+ T ląstelių pogrupių, taip pat Th1, Th2 ir reguliuojančių T ląstelių, žymiai sumažėjo. Kita vertus, reikšmingai sumažėjo centrinės ir efektorinės atminties CD8+ T ląstelių pogrupių, tuo tarpu abiejų (CD4+ ir CD8+) dalis galutinai diferencijavo efektorinės atminties T ląstelių. (TEMRA) mūsų pacientams buvo žymiai padidėjęs. Nors kai kurie T ląstelių pogrupiai, sergantys sunkiu SIgAD, buvo panašūs, sunkios SIgAD pacientų ribinės zonos ir perjungtos atminties B ląstelių sumažėjimas ir CD21 žemo B ląstelių skaičiaus padidėjimas buvo šiek tiek ryškus. Be to, CD4+ T ląstelių proliferacijos aktyvumas buvo labai sutrikęs SIgAD sergantiems pacientams, kurių fenotipas buvo sunkus.

Išvada

SIgAD sergantiems pacientams būdingi įvairūs ląstelių ir humoraliniai trūkumai. Todėl T ląstelių ir B ląstelių įvertinimas gali padėti geriau suprasti nevienalytę ligos patogenezę ir prognozę.

Raktažodžiai

Įgimtos imuniteto klaidos, pirminis imunodeficitas, selektyvus IgA trūkumas, B ląstelių pogrupiai, T ląstelių pogrupiai, srauto citometrija, proliferacijatyrimas

cistanche tubulosa - stiprina imuninę sistemą

cistanche ekstraktas

Įvadas

Selektyvus IgA trūkumas (SIgAD) yra labiausiai paplitęs pirminis imunodeficito sutrikimas (PID) arba įgimtos imuniteto paklaidos (IEI), nustatomas pagal IgA koncentraciją serume, mažesnę nei 7 mg/dl ir normalią IgG ir IgM koncentraciją vyresniems nei ketverių metų pacientams. . Dauguma SIgAD pacientų yra besimptomiai, nors kai kuriems iš jų pasireiškia skirtingos klinikinės apraiškos, įskaitant virškinimo trakto ir kvėpavimo takų infekcijas, alergines ligas ir autoimuninius sutrikimus. Buvo pranešta apie ligos progresavimą iki bendro kintamo imunodeficito (CVID) pasirinktoje SIgAD pacientų grupėje, turinčioje IgG poklasių trūkumą arba autoimuninius sutrikimus [1]. Jokių specifinių SIgAD patogenezės priežasčių dar nepranešta. Tačiau neišspręstais atvejais buvo nustatyti IgA klasės komutatoriaus rekombinacijos (CSR), IgA gamybos ir sekrecijos proceso defektai, taip pat ilgalaikis IgA, perjungtos atminties B ląstelių ir SIgAD pacientų plazmos ląstelių išgyvenimas [2] ]. Šių imunologinių procesų defektai yra susiję su SIgAD pacientų limfocitų anomalijomis. Taigi limfocitų, ypač B ląstelių ir T ląstelių pogrupių, įvertinimas gali būti vertingas ir naudingas. Keletas tyrimų parodė B ląstelių ir T ląstelių anomalijas kai kuriose SIgAD pacientų grupėse [3, 4]. Kalbant apie B ląstelių pogrupius, buvo pranešta apie SIgAD pacientų perjungtų atminties B ląstelių, IgA plazmos ląstelių ir pereinamojo laikotarpio IL-10+ reguliuojančių B ląstelių skaičiaus sumažėjimą [5–8]. Kita vertus, buvo pranešta apie kai kurių SIgAD atvejų T ląstelių pogrupių defektus, kurie yra susiję su nepakankamu IgA gaminančių B ląstelių kiekiu [5, 8, 9]. Srauto citometrinis imunofenotipų nustatymas gali atlikti svarbų vaidmenį diagnozuojant, prognozuojant, klasifikuojant ir gydant pacientus, sergančius SIgAD. Taigi pirmą kartą siekėme ištirti pagrindines B ir T limfocitų subpopuliacijas kartu su T ląstelių funkcijos įvertinimu, kad išsiaiškintume ryšį tarp imunologinių charakteristikų ir klinikinių apraiškų pacientams, sergantiems SIgAD.

Medžiaga ir metodai

Pacientai

Į šį tyrimą buvo įtraukta iš viso 30 simptominių SIgAD pacientų (iš Irano IEI registro [10, 11]) ir 30 pagal amžių atitinkančių sveikų kontrolinių asmenų (HC). Atlikus klinikinius ir laboratorinius tyrimus buvo patvirtinta, kad HCs neturi imunodeficito ar jokios pagrindinės ligos. Pacientai buvo nukreipti į Vaikų medicinos centrą (Pediatrijos kompetencijos centrą, susijusį su Teherano medicinos mokslų universitetu, Teheranas, Iranas). Europos imunodeficitų draugijos duomenimis, visiems pacientams buvo diagnozuotas SIgAD [12]. Tyrimą patvirtino Teherano medicinos universiteto etikos komitetas ir iš visų asmenų buvo gautas raštiškas sutikimas (IR.TUMS.VCR.REC.1396.2018). Pacientų demografinės, klinikinės apraiškos ir imunologiniai duomenys buvo dokumentuojami anketos formoje.

Pacientų klasifikacija

Siekiant palyginti demografinius, klinikinius ir imunologinius duomenis, pacientai buvo suskirstyti į dvi grupes: sunkus ir lengvas (remiantis klinikiniais požymiais), taip pat giminingų ir negiminingų grupes (remiantis tėvų giminingumu). Minimalūs įtraukimo kriterijai, kad pacientas būtų laikomas simptominiu, buvo dešimt Jeffrey Modell fondo įspėjamųjų ženklų. Pacientai buvo suskirstyti į dvi grupes: lengvas ir sunkus, nes pacientai, sergantys sunkiomis infekcijomis (pvz., kraujotakos, centrinės nervų sistemos ir giliai įsišaknijusiomis infekcijomis, pvz., osteomielitu ir artritu), autoimunite ar piktybiniais navikais, buvo suskirstyti į sunkią grupę, o kitos komplikacijos. buvo laikomi švelnia grupe. Kadangi pneumonija ir kitos kvėpavimo takų infekcijos yra dažnos SIgAD sergantiems pacientams, norėjome tai patikrinti kaip parametrą tarp sunkių ir lengvų grupių, todėl neskirstėme jo į sunkią grupę.

cistanche papildo privalumai – kaip stiprinti imuninę sistemą

Spustelėkite čia norėdami pamatyti Cistanche Enhance Immunity produktus

【Klauskite daugiau】 El. paštas:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Limfocitų pogrupių tyrimas

Periferinės kraujo mononuklearinės ląstelės (PBMC) buvo atskirtos nuo 8 ml kraujo mėginių, surinktų natrio heparino mėgintuvėliuose, naudojant Ficoll-Hypaque tankio gradiento centrifugavimą 600 g 25 min 22 laipsnių temperatūroje. Ekstraląsteliniam dažymui PBMC buvo suskirstyti į 5- skydelio frakcijas ir 20 minučių nudažyti 2–8 laipsnių temperatūroje tamsioje vietoje, kiekviename kokteilyje esant optimalioms koncentracijoms monokloninių antikūnų. B1 skydelis buvo naudojamas nustatant naivią (CD19+CD27-IgM+IgD+), tik IgM atmintį (CD19+CD27+ IgM++IgD-), perjungtą atmintis (CD19+CD27+IgM−IgD−) ir į kraštinę zoną panašios B ląstelės (CD19+CD27+IgM++IgD+). B2 skydelis buvo naudojamas CD21-mažo B ląstelių (CD19+CD21−/low CD38−/lowIgM+++), plazmablastų (CD19+CD21−/lowCD38++/{ {34}}IgM−) ir pereinamosios B ląstelės (CD19+CD21+CD38++IgM+). T1 skydelis buvo naudojamas klasifikuoti naivią (CD4+ arba CD8+ ir CD45RA+CCR7+), efektorinę atmintį (CD4+ arba CD8+ ir CD45RA−CCR7−), centrinė atmintis (CD4+ arba CD8+ir CD45RA−CCR7+) ir TEMRA (galutinai diferencijuota efektorinė atmintis) T ląstelės (CD4+ arba CD8+ ir CD45RA+CCR7−). T2 skydelis buvo naudojamas reguliuojančioms T ląstelėms klasifikuoti (TregsCD4+CD25+FOXP3+CD127−/low). Intraląsteliniam dažymui, po paviršiaus molekulių dažymo, jie buvo fiksuoti ir permeabilizuoti visame FOXP3 / Permeabilizacijos buferyje (eBioscience, JAV) pagal gamintojo instrukcijas dėl šių: Anti-Human FOXP3 (PE), Anti-Human IL{67} } (PE), Anti-Human IL-4 (APC) ir Anti-Human IFN- (FITC). Visi antikūnai ir izotipų kontrolė buvo įsigyti iš JAV korporacijos eBioscience. Norint įvertinti T pagalbines ląsteles (įskaitant T1, T2 ir T17), Roswell Park Memorial Institute (RPMI 1640) ląstelių auginimo terpėje buvo kultivuojama 1 × 106 (ląstelė/ml) PBMC, po to stimuliuojama forbolio miristato acetatu (PMA). , 50 ng/mL, Sigma-Aldrich, JAV) / jonomicino (1 ug/mL, Sigma-Aldrich) ir esant brefeldinui (5 ug/mL, eBioscience). Tada ląstelės buvo inkubuojamos 37 laipsnių temperatūroje 5% CO2 ir 95% drėgmės inkubatoriuje 5 valandas. Stimuliuojamos ląstelės buvo plaunamos fosfatiniu buferiniu fiziologiniu tirpalu (PBS), o paviršius nudažytas anti-žmogaus CD4 (PerCp)-Cy5.5. Intraląsteliniai citokinų dažymo antikūnai (anti-IFN-FITC, anti-IL-17 PE ir anti-IL-4 APC, skirti įvertinti T pogrupius ir anti-FoxP3 PE įvertinti Treg) buvo pridėti ir inkubuojami. kambario temperatūroje 30 min. Ląstelės buvo plaunamos pralaidumo buferiu ir resuspenduojamos šaltame dažymo buferyje, o skaičiai buvo nustatyti naudojant BD FACSCalibur srauto citometrą (BD Biosciences) (1 papildomas failas: S1 lentelė). Vartojimo strategija yra panaši į mūsų ankstesnį tyrimą [13, 14].

T-ląstelių proliferacijos tyrimas

Norint įvertinti T ląstelių proliferaciją, PBMC buvo kultivuojami naudojant fluorescencinį 5,6-karboksifluoresceino sukcinimidilo esterią (CFSE, Biolegend, JAV). CFSE pradinis tirpalas buvo paruoštas ištirpinant CFSE dimetilsulfokside (DMSO), kurio koncentracija 5 mM/L, remiantis gamintojo instrukcijomis. Šios atsargos buvo užšaldytos mažomis alikvotinėmis dalimis, kad būtų išvengta per didelio užšalimo ir atšildymo ciklų. CFSE buvo pridėta į skersinį falcon mėgintuvėlį, kuriame yra 500 μL PBMC suspensijos (5 × 106 ląstelių / ml) RPMI 1640 ląstelių auginimo terpėje, kurioje yra 10% FBS (galvijų vaisiaus serumas, Biosera, Prancūzija), kurios galutinė koncentracija yra 5 μM ir 2 mM. L-glutaminas, 100 V/mL penicilino ir 100 ug/ml streptomicino (Lymphosep; Biosera, Prancūzija). Vamzdis greitai pasisuko ir maišomas, kad būtų užtikrintas homogeniškas pasiskirstymas. Po ženklinimo ląstelių suspensija buvo inkubuojama 5 minutes 37 laipsnių temperatūroje. Tada į ląstelių suspensiją buvo pridėta 9 ml RPMI1640, turinčio 10% FBS, ir centrifuguojama 500 g 5 minutes. Ląstelės buvo plaunamos tris kartus ir pridėta 1 ml RPMI1640 su 10% FBS. Kalbant apie specifinę T ląstelių stimuliaciją ir proliferaciją, anti-CD3 antikūnas (1 µg/ml) buvo pridėtas į 500 µl sterilaus PBS ir plokštelė 2 valandas inkubuojama 37 ˚C temperatūroje. Padengta plokštelė buvo du kartus plaunama steriliu PBS ir pažymėtos ląstelės buvo tiesiogiai pridėtos, ir galiausiai, kaip T ląstelių stimuliatorius, buvo pridėtas anti-CD28 antikūnas (2 µg/ml). Plokštelė buvo inkubuojama 37 ºC temperatūroje 5 % CO2 ir 95 % drėgmės inkubatoriuje 96 valandas [15–17]. Nestimuliuojamas šulinys buvo laikomas neproliferacinių ląstelių kontrole. Po 96 valandų ląstelės buvo surinktos ir nuplaunamos. Po dažymo Anti Human CD4 (PerCPCy5.5), ląstelės galiausiai buvo analizuojamos naudojant BD FACSCalibur™ srauto citometrą ir CellQuest Pro programinę įrangą (BD, Biosciences, San Chosė, CA, JAV). Proliferacijos analizė buvo atlikta lyginant tris kriterijus, įskaitant padalintų ląstelių procentą (padalijus %), vidutinį ląstelių dalijimųsi skaičių (dalijimosi indeksą) ir vidutinį ląstelių dalijimųsi skaičių visoje pirminėje ląstelių populiacijoje. (Proliferation Index) pagal FlowJo 7.6 programinę įrangą.

Statistinė analizė

Statistinei analizei buvo naudojama SPSS programinė įranga (Windows versija 16.0; SPSS Inc., Chicago, IL, US). Mes panaudojome Kolmogorovo – Smirnov testą, kad įvertintume, ar duomenys buvo paskirstyti įprastai. Išvados buvo pateiktos kaip medianos (tarpkvartilis diapazonas [IQR], pateiktas kaip diapazonas su 25–75 procentiliais). Palyginimui buvo naudojamas chi kvadrato testas arba tikslus Fišerio testas. Palyginti daugiau nei dvi grupes, jei duomenų pasiskirstymas buvo normalus, buvo naudojama ANOVA, o jei duomenų pasiskirstymas buvo nenormalus, buvo naudojamas Kruskal Wallis testas. Te skirtumai buvo laikomi statistiškai reikšmingais P vertėms, kurios buvo<0.05.

cistanche nauda vyrams - stiprina imuninę sistemą

Rezultatai

Demografiniai, imunologiniai ir klinikiniai radiniai

Iš visų registruotų Irano SIgAD pacientų šiame tyrime buvo įdarbinta 30 pacientų (23 vyrai ir septynios moterys). Pacientų amžiaus mediana (IQR) tyrimo metu buvo 11 (7,3–16) metų. Tėvų giminystė buvo nustatyta 16 (53,3 proc.) pacientų. Plaučių uždegimas (42,3 proc.) buvo dažniausias tirtų pacientų klinikinis pasireiškimas, piktybinis navikas šioje grupėje nebuvo diagnozuotas. Demografinės, klinikinės ir imunologinės pacientų charakteristikos apibendrintos 1 lentelėje. Suskirstę pacientus pagal sunkų ir lengvą fenotipą, buvo lyginami demografiniai, klinikiniai ir imunologiniai duomenys (1 lentelė, 1 pav.). Pacientams, kuriems buvo sunkus fenotipas, pasireiškė daugiau kvėpavimo komplikacijų nei lengva grupė. Kiti parametrai reikšmingo skirtumo neparodė. Tie patys palyginimai buvo atlikti su pacientais, turinčiais giminingumą ir be jo, ir nė vienas iš jų neturėjo reikšmingo skirtumo. Priešingai, pacientams, turintiems lengvą fenotipą, buvo šiek tiek didesnis alergijos ir virškinimo trakto pasireiškimų dažnis, padidėjus IgE koncentracijai serume, o tai rodo didesnį perėjimą prie IgE gamybos.

1 lentelė SIgAD pacientų, kuriems yra sunkus ir lengvas fenotipas, demografinių, klinikinių ir imunologinių duomenų palyginimas

1 pav. Klinikinių sunkių ir lengvų SIgAD apraiškų palyginimas

B ląstelių pogrupiai

SIgAD sergantiems pacientams nustatytas reikšmingai padidėjęs CD{{0}} B ląstelių dažnis [11,2% (9,4–13.07%), palyginti su 7,2% (6–8,6%), p < 0.001], su padidėjusiu naivių B ląstelių kiekiu [71 % (63,7–80 %), palyginti su 66,5 % (56,2–71,1 %), p=0.036] ir pereinamųjų B ląstelių skaičių [ 8 % (3,6–13,5 %), palyginti su 4,8 % (2,6–9,5 %), p=0,032], palyginti su HC. Priešingai, į kraštinę zoną panašių [2,3 % (2–3,5 %), palyginti su 3,4 % (2,3–4,8 %), p=0.022) ir perjungtų atminties B ląstelių procentas [3,5 % (1,9) –5,5 proc., palyginti su 6 proc. (3,5–8,4 proc.), p=0,006] buvo žymiai mažesni nei HC. Tačiau sumažėjusi tik IgM atmintis ir plazmablastai bei padidėjęs CD21 mažas B ląstelių kiekis pacientams, palyginti su HC, nebuvo reikšmingas (2 pav.). Įdomu tai, kad kai kurie palyginimai tarp pacientų klinikinių grupių buvo reikšmingi. CD19+ B ląstelių procentas tiek lengvo, tiek sunkaus fenotipo atveju buvo žymiai didesnis nei HC [11,6 % (8,7–13), palyginti su 7,2 % (6–8,6), p < 0,0001, 10,8 % (9,6–13,2). ) palyginti su 7,2 % (6–8,6), p < 0,0001]. Sunkiais SIgAD sergantiems pacientams reikšmingai padidėjo CD21 mažo B ląstelių skaičiaus procentas [1,5 % (1–2,2) palyginti su 2,7 % (1,6–5,6), p=0,025] ir reikšmingai sumažėjo procentas. tiek ribinės zonos, tiek perjungtos atminties B ląstelių pogrupių [3,4 % (2,3–4,8) palyginti su 2,2 % [2, 3], p=0.040, 6 % (3,5–8,4) ir 2,7 % ( 1,7–4,7), p=0.003]. Lengva SIgAD sergančių pacientų pereinamųjų B ląstelių procentas buvo didesnis nei HC [10,7 % (3,9–13,8) ir 4,8 % (2,6–9,5), p=0,047] (3 pav.). Tik IgM atminties procentas buvo žymiai didesnis pacientams, turintiems giminingumą, nei tiems, kurie neturėjo giminystės. Mes taip pat suskirstėme SIgAD pacientų B ląstelių pogrupių dažnį į tris kategorijas: normalų, sumažėjusį ir padidėjusį pagal normalų HC diapazoną (2 lentelė). Remiantis šia analize, didžiausias B ląstelių pogrupių sumažėjimas yra susijęs su perjungtomis atminties B ląstelėmis (23%), o didžiausias padidėjimas yra susijęs su naivomis B ląstelėmis (27%) pacientams, sergantiems SIgAD. Išskyrus padidėjusį CD21 mažo B ląstelių skaičiaus padidėjimą sunkiu SIgAD sergantiems pacientams, palyginti su lengva SIgAD pacientais.

2 pav. Kiekybinė B ląstelių ir T ląstelių pogrupio procentų analizė SIgAD sergantiems pacientams ir sveikiems kontroliniams asmenims. Mediana pavaizduota horizontalia linija. Duomenys buvo analizuojami naudojant Mann-Whitney U testą. *p<0.05, statistical significance between patients and HCs. HC Healthy control

T ląstelių pogrupiai

CD4+ T ląstelių pogrupis atskleidė reikšmingą bendro CD4+ T ląstelių skaičiaus sumažėjimą [36,5 % (30,8–41,2 %), palyginti su 40,1 % (37,3–47,2 %), p{{14 }}.038)], centrinės atminties ląstelės [11 % (7,3–13,1 %), palyginti su 24,5 % (16–29 %), p.<0.0001), T1 [7.7% (5.2–9.9%) vs. 12% (7.8–16%), p=0.002], T2 [0.3% (0.2–0.4%) vs. 0.6% (0.4–1.3%), p<0.0001] and Tregs [0.3% (0.03–0.7%) vs. 1.4% (1.1– 1.6%), p<0.0001] in patients compared with HCs. Oppositely, the percentage of TEMRA [9.5% (5.7–16.4%) vs. 2% (1.3–6.2%), p<0.0001] was meaningfully higher than HCs. Moreover, decreased effector memory and T17, and increased naïve helper T cells in patients in comparison with HCs were not significant (Fig.  2). Regarding the percentage of CD8+ T cell subsets, central memory [0.6% (0.3–0.8%) vs. 3% (2–6%), p<0.0001] and effector memory [12.3% (7.6–22.1%) vs. 23.9% (19.5– 27.2%), p<0.0001] were markedly diminished in patients compared with HCs. On the other hand, the percentage of cytotoxic TEMRA [44.1% (28.4–55.7%) vs. 24.4% (20– 31%), p<0.0001] was significantly higher than HCs. However, increased total CD8+ T cells and decreased naïve CD8+ T cells were not significant in patients compared to those in HCs (Fig. 2). Regarding the comparison of the percentage of CD8+ T cells subsets between severe SIgAD patients with HCs, naïve T cells, effector, and central memory cells demonstrated a significant reduction. Also, there was a significant decrease in the percentage of total CD4+ T-cells, central memory, T1, T2, and regulatory T cells, whereas TEMRA in both CD4+ and CD8+ T cells demonstrated an increase. On the other hand, the percentage of effector and central memory cells within CD8+ T cells, as well as central memory, TEMRA, T1, and regulatory T cells within CD4+ T cell subsets demonstrated a significant decrease in mild forms of SIgAD compared to HCs. In contrast, we found an increase in TEMRA CD8+ T cells and T2 CD4+ T cells in mild patients compared to controls (Fig.  3). Comparisons of the percentages of all T cell subsets between SIgAD patients with and without consanguinity have not indicated any significant difference. We also categorized the frequency of T cell subsets of SIgAD patients into three categories: normal, decreased, and increased based on a normal range of HCs (Table  2). Based on this analysis, the most decrease in T cell subsets is related to Tregs (67%), while the most increase is related to CD8+ TEMRA (37%) in SIgAD patients. Flow cytometry results of B cell and T cell subsets in 30 SIgAD patients have shown separately in Additional file 1: Tables S2 and S3. To evaluate the impact of the T cell subset on the switching process of B cells and the production of different Ig subtypes we performed a correlation analysis. Surprisingly only IgG but not IgM and IgE were significantly associated with specific T cell subsets (negative association with naïve CD4 and naïve CD8 T cells and positive association with CD4+ TEM and T17 cells, Additional file 1: Table S4) indicating the independent association of IgM to IgE from co-stimulation of T cell subsets in our patient cohorts. Moreover, correlation analysis of absolute counts and percentage of subsets should significant direct correlation in all measured parameters (Additional file 1: Table S5).

3 pav. Kiekybinė B ląstelių ir T ląstelių pogrupio procentų analizė sunkios ir lengvos SIgAD pacientų organizme. Mediana pavaizduota horizontalia linija. Duomenys buvo analizuojami naudojant Mann-Whitney U testą. *p<0.05, statistical signifcance between severe and mild patien

2 lentelė. Įprastų, padidėjusių ir sumažėjusių T ląstelių ir B ląstelių pogrupių proporcijų pasiskirstymas visiems SIgAD sergantiems pacientams. N=30

T ląstelių proliferacija

Duomenys, gauti naudojant CFSE pažymėtas kultūras, buvo analizuojami siekiant kiekybiškai įvertinti CD4+ T ląstelių proliferaciją. Pasidalijimo indeksas (DI), proliferacijos indeksas (PI) ir procentinis padalijimas (PD) tarp SIgAD pacientų ir HC reikšmingo skirtumo (4 pav.). Įdomu tai, kad palyginę šiuos indeksus tarp SIgAD sergančių pacientų, sergančių sunkiu ir lengvu fenotipu, nustatėme, kad sunkių SIgAD pacientų vidutinės DI ir PD, palyginti su lengvais atvejais, buvo reikšmingai panaikintos [0.1 (0). .08–0.4) palyginti su 0.5 (0.3–0,8), p=0.019 ir 12,2 (8,4–) 26,4), palyginti su 42,5 (26,8–52,6), atitinkamai p=0,009]. Tačiau reikšmingo PI skirtumo tarp sunkių ir lengvų grupių nebuvo (4 pav.). Kita vertus, DI, PI ir PD palyginimai tarp SIgAD pacientų, sergančių giminingumu ir be jo, nebuvo reikšmingi.

4 pav. T limfocitų proliferacijos indeksų palyginimas pacientams, sergantiems sunkiu ir lengvu SIgAD. Mediana pavaizduota horizontalia linija. *p<0.05, statistical significance between severe and mild patients

Diskusija

SIgAD yra labiausiai paplitęs IEI su įvairiomis klinikinėmis apraiškomis. Šie pacientai turi skirtingą klinikinių apraiškų spektrą. Atitinkamai, imunologiniai tyrimai pacientams, turintiems skirtingą klinikinių apraiškų spektrą, yra naudingi. Labiausiai paplitęs klinikinis IEI, ypač SIgAD, pasireiškimas yra pasikartojančios kvėpavimo takų infekcijos [18–20]. Mes nustatėme, kad pneumonija yra dažniausia mūsų užsiregistravusių simptominių pacientų komplikacija. Pasikartojančios kvėpavimo takų infekcijos dažniausiai pasireiškia viršutinių kvėpavimo takų infekcijomis ir gali likti nediagnozuotos keletą metų; tačiau kai kuriems SIgAD sergantiems pacientams pasireiškia sunkesni fenotipai, pvz., bronchektazė arba obliteruotas bronchiolitas, dėl ko šiems pacientams reikia atlikti imunologinį tyrimą [21]. Atsižvelgiant į tai, kad pasikartojančios kvėpavimo takų infekcijos buvo pranešta kaip svarbiausia IEI sergančių vaikų sergamumo ir mirties priežastis, ypač dėl pirminių antikūnų trūkumo [22, 23], ankstyva su SIgAD susijusių kvėpavimo sutrikimų diagnostika ir gydymas yra labai svarbūs [24, 25]. . Nustatyta, kad kai kuriems SIgAD sergantiems pacientams pastebimi B ląstelių pogrupių anomalijos [3, 4]. Mūsų rezultatai parodė, kad žymiai padidėjo naivių ir pereinamųjų B ląstelių skaičius ir smarkiai sumažėjo į ribines zonas panašių ir perjungtų atminties B ląstelių. Šis nenormalus B ląstelių modelis rodo galutinių B ląstelių diferenciacijos stadijų defektus, panašius į CVID sergančius pacientus [26]. Atsižvelgiant į tai, kad CVID ir SIgAD turi beveik panašų genetinį pagrindą ir gali susikaupti kaip keli atvejai šeimoje, šis panašumas yra nuspėjamas. Apskritai, daugiau nei pusė IEI pacientų, registruotų Irano registre, turi tėvų giminystės ryšį, tačiau šis rodiklis vis dar retesnis SIgAD sergantiems pacientams. Irano SIgAD pacientams, palyginti su Vakarų pacientais, giminingumas yra labiau paplitęs. Nors gali egzistuoti monogenetinės priežastys, jos dar nenustatytos, nepaisant kai kuriems pacientams nustatytos naujos kartos sekos [27]. Mes nustatėme ribinių zonų tipo ir perjungtų atminties B ląstelių sumažėjimą, ypač sunkiems SIgAD pacientams, kaip buvo pranešta anksčiau [28]. Neseniai pranešėme apie panašų ribinių zonų tipo ir perjungtos atminties B ląstelių sumažėjimą pacientams, sergantiems CVID [14].

cistanche papildo privalumai - padidina imunitetą

Kita vertus, nors pastebėjome reikšmingą perjungtos atminties sumažėjimą pacientams, sergantiems ataksija telangiektazija (AT), tačiau buvo pastebėtas staigus į kraštinę zoną panašių B ląstelių padidėjimas [29]. SIgAD sergantys pacientai, ypač grupė pacientų, kuriems pasireiškė sunkios klinikinės apraiškos (pasikartojanti ir intensyvi infekcija bei autoimunitetas), yra mažesnis perjungtos atminties B ląstelių skaičius [28, 30, 31]. Buvo manoma, kad perjungtos atminties B ląstelių subpopuliacijos sumažėjimą lėmė antikūnų klasės keitimo rekombinacijos (CSR) proceso lygio defektai, kuriuos sukelia fermentų trūkumas, arba citokinų tinklų ir jų receptorių anomalijos [28]. Kai kurie SIgAD pacientai, turintys sunkų fenotipą, progresuoja iki CVID, kuris atspindi šį SIgAD pogrupį, gali turėti bendrą CVID imuninę patogenezę, ypač kuriant CSR etapą. Atitinkamai, perjungtos atminties B ląstelės yra laikomos pacientų diagnostiniu biomarkeriu [28]. Tačiau perjungtų atminties B-ląstelių dažnis tarp mūsų tiriamosios populiacijos vaikų yra normalus, o sumažėjimas buvo labiau pastebėtas suaugusiems pacientams; tai rodo, kad senėjimas tikriausiai lemia SIgAD progresavimą iki CVID, ypač pacientams, kuriems yra sunkių klinikinių apraiškų (duomenys nerodomi). Kita vertus, ribinės zonos B ląstelės yra specializuota B ląstelių populiacija, kuri gamina IgM, kad apsaugotų nuo infekcijų, ypač kapsuliuotų bakterijų [32]. Nors ankstesni tyrimai parodė, kad į kraštinę zoną panašių B ląstelių skaičius pacientams, sergantiems SIgAD, nesiskyrė, palyginti su įprastomis kontrolinėmis grupėmis [33], vis dėlto mūsų atvejais pastebėjome reikšmingą į kraštinę zoną panašių B ląstelių sumažėjimą, panašų į ankstesnė ataskaita apie CVID sergančius pacientus [34]. Ribinių B ląstelių pogrupių sumažinimas kitiems pacientams, turintiems antikūnų gamybos defektų, gali būti susijęs su padidėjusia infekcijos rizika, pvz., pneumonija ir IgM koncentracijos serume sumažėjimu, panašiai kaip CVID sergantiems pacientams [35]. Mes nustatėme, kad CD21low B ląstelių skaičius padidėjo, palyginti su kontroline, daugiausia sunkių SIgAD pacientų. Ankstesni tyrimai pranešė apie CD21 mažo B ląstelių skaičiaus padidėjimą tiek SIgAD [3], tiek CVID [36] sergantiems pacientams ir kitoms autoimuninėms ligoms [37]. Neseniai taip pat buvo pranešta apie CD21 žemo lygio padidėjimą AT sergantiems pacientams [29]. Mažų CD21 ląstelių skaičiaus padidėjimas yra tiesiogiai susijęs ne tik su autoimunitetu, bet ir su infekcija [36]. Kita vertus, lėtinis virusinės infekcijos poveikis gali sukelti antigenams reaktyvių B ląstelių pavertimą nereaguojančiomis CD21low B ląstelėmis [38]. Išsiaiškinti išsiplėtusių CD21low B ląstelių priežastį; būtina atlikti tolesnius šios B ląstelių subpopuliacijos tyrimus. Atsižvelgiant į didelę CD21low B ląstelių subpopuliaciją tarp CVID sergančių pacientų ir kai kurių pacientų, sergančių SIgAD, progresavimą iki CVID, didesnė tikimybė, kad CVID išsivystys sunkioje SIgAD pacientų grupėje, kurioje padidėjęs CD21low B ląstelių skaičius. Todėl juos reikia reguliariai stebėti, kad būtų galima įvertinti ligos eigą. Pereinamosios B ląstelės yra tarpinėje vystymosi stadijoje tarp nesubrendusių kaulų čiulpų ląstelių ir subrendusių B ląstelių blužnyje [39]. Šiame tyrime pastebėjome reikšmingai padidėjusį pereinamųjų B ląstelių padidėjimą mūsų SIgAD sergantiems pacientams, ypač sunkiems SIgAD sergantiems pacientams, nors pereinamųjų B ląstelių skaičius vaikams, sergantiems SIgAD, buvo normalus (duomenys nerodomi). Neseniai pastebėjome reikšmingą pereinamųjų B ląstelių AT sumažėjimą [29]. Priešingai nei ankstesniuose tyrimuose, kurie parodė sumažėjusį pereinamųjų B ląstelių skaičių [8, 28, 40], suaugusiems pacientams buvo nustatytas šiek tiek padidėjęs pereinamųjų B ląstelių kiekis. Be to, Lemarquis ir kt. parodė pereinamųjų B ląstelių funkcinio aktyvumo sumažėjimą, pagrįstą IL-10 gamyba ir CpG stimuliacija [40]. Atsižvelgiant į SIgAD galutinių B ląstelių stadijų defektą, atrodo, kad mūsų pacientų pereinamųjų B ląstelių ir naivių B ląstelių padidėjimas atsiranda dėl kompensacinio mechanizmo, kuris padidina ankstyvą B ląstelių vystymąsi. Kalbant apie skirtingus mūsų ir kitų tyrimo rezultatus, atrodo, kad šis skirtumas atsirado dėl skirtingų atrankos procesų, nes visi mūsų pacientai buvo simptominiai, o kiti tyrinėjo nevienalyčiai besimptomius ir simptominius SIgAD pacientus. Kalbant apie T ląstelių pogrupius, pastebėjome, kad sumažėjo bendras CD4+ T ląstelių, T1, T2 ir Treg ląstelių skaičius ir padidėjo TEMRA tiek CD4+, tiek CD8+ ląstelėse. Remiantis mūsų rezultatais, ankstesni tyrimai parodė atitinkamai CD8+ ir CD4+ T limfocitų populiacijos padidėjimą ir sumažėjimą [4]. Taip pat nustatėme, kad SIgAD sergantiems pacientams sumažėjo tiek CD4+, tiek CD8+ T ląstelių centrinė atmintis ir CD8+ T limfocitų efektorinė atmintis, palyginti su HC. Pastebėjome reikšmingą TEMRA ląstelių pogrupio padidėjimą tiek CD4+, tiek CD8+ limfocitų populiacijoje, ypač sunkių SIgAD pacientų. TEMRA yra trečiasis T ląstelių atminties pogrupis periferiniuose uždegiminiuose audiniuose, kurie ekspresuoja CD45RA, bet neturi CCR7 arba CD27 ekspresijos. Žmonėms TEMRA ląstelių kaupimąsi veikia lėtinės infekcijos, tokios kaip CMV [41, 42]. Šių nutrauktų T ląstelių pogrupių padidėjimą gali lemti lėtinis šių pacientų ląstelių atsakas į infekcijas; tačiau reikia atlikti tolesnius šio reiškinio tyrimus. Remiantis mūsų rezultatais, Nechvatalova ir kt. parodė, kad SIgAD sergantiems pacientams padidėjo CD4+ ir CD8+ TEMRA ląstelės, kurios buvo susijusios su CMV infekcija [43]. Mes netyrėme CMV infekcijos pacientams, sergantiems SIgAD, tačiau TEMRA ląstelių skaičiaus padidėjimas mūsų pacientams gali būti susijęs su lėtinėmis infekcijomis. Neseniai įvertinome specifinius antikūnų atsakus į PPSV-23 pacientams, sergantiems SIgAD ir AT, ir nustatėme, kad 18,6 % SIgAD ir 81,3 % AT pacientų atsakas buvo nepakankamas. Plazmablastų, ribinės zonos B ląstelių, pereinamųjų B ląstelių, naivių CD8+ T ląstelių ir CD8+ T ląstelių, IgM atminties B ląstelių ir perjungtos atminties B ląstelių procentas SIgAD sergantiems pacientams buvo: reikšmingai mažesnis nereaguojančių asmenų grupėje nei respondentų grupėje. Nors specifinių antikūnų trūkumas AT sergantiems pacientams yra dažnesnis nei SIgAD sergantiems pacientams [44]. Reguliuojančios T ląstelės vaidina svarbų vaidmenį gaminant IgA antikūnus, transformuodamos augimo faktoriaus beta (TGF-) sekreciją [45–47]. Mes nustatėme, kad mūsų pacientams reikšmingai sumažėjo Tregs, atitinkantis ankstesnius paskelbtus tyrimus [48], nors viename tyrime buvo pranešta apie padidėjusį Tregs SIgAD pacientams [43]. Taip pat buvo pranešta apie ryšį tarp sumažėjusių Treg ląstelių ir SIgAD ligos sunkumo, ypač asmenims, turintiems autoimuninį sutrikimą, ir IgA CSR trūkumo pacientams, kuriems yra sunkių klinikinių apraiškų [30, 48]. Mažas Treg ląstelių ir kitų T ląstelių pogrupių, įskaitant T1 ir T2, dažnis mūsų pacientams gali būti dėl mažo užkrūčio liaukos emigrantų skaičiaus, kurį sukelia nepakankama timopoezė ir (arba) padidėjusi šių ląstelių apoptozė [49]. T-ląstelių funkcinis tyrimas naudojant mitogeninę ar antigeninę stimuliaciją yra svarbus požymis diagnozuojant įvairius imuninius sutrikimus ir imunodeficitus [50]. Tradiciškai yra vienas T ląstelių funkcijos įvertinimo protokolas, pagrįstas [3H] timidino pasisavinimu po PHA stimuliacijos naudojant radioaktyvius komponentus, kuriems reikia specifinių laboratorinių sąlygų, be to, jis nėra specifinis T ląstelėms, nes gali stimuliuoti keletą kitų imuninių ląstelių, pvz. gerai. Kita vertus, svarbiausias trūkumas yra tai, kad nebuvo galima gauti informacijos apie konkrečius ląstelių pogrupius. CFSE proliferacijos tyrimas yra praktiškas pasirinkimas vertinant T ląstelių atsaką į antigeną arba mitogeną IEI sergantiems pacientams, ypač SIgAD, kad būtų galima atlikti tolesnę šių pacientų galimų T ląstelių defektų analizę [51]. Iki šiol yra nedaug pranešimų apie T-ląstelių atsako defektus pacientams, sergantiems SIgAD. Kaip ir tikėtasi, mūsų tyrimas neatskleidė jokio reikšmingo T ląstelių atsako skirtumo tarp pacientų ir kontrolinių asmenų. Tačiau kai mes suskirstėme pacientus į dvi grupes pagal sunkius ir lengvus fenotipus, sunkūs pacientai nurodė sumažėjusį T ląstelių proliferaciją, palyginti su lengvais pacientais. Šis rezultatas gali būti svarbus atradimas skirstant SIgAD pacientus į kategorijas, siekiant žinoti paciento prognozę. Neseniai pranešėme, kad T ląstelių proliferacija buvo žymiai sutrikusi, palyginti su sveikų pacientų, sergančių CVID ir AT, kontrolėmis [29, 52]. Be to, tai rodo, kad SIgAD pacientai, kurių T-ląstelių proliferacija yra sutrikusi, turėtų būti toliau stebimi, kad būtų galima tiksliai gydyti. Rekomenduojame atlikti tolesnius tyrimus, kad būtų galima įvertinti T ląstelių funkcijos poveikį SIgAD sergantiems pacientams, remiantis sunkiais ir lengvais fenotipais kituose tyrimuose. Eksperimento apribojimai apėmė nedidelį simptominių pacientų skaičių, daugelio jų ir e neprieinamumą ir net kai kurių pacientų pagerėjimą.

Išvados

Mūsų rezultatai parodė reikšmingus B ląstelių modelių sutrikimus, panašius į CVID pacientų. Atsižvelgiant į tai, kad CVID ir sunkios SIgAD formos turi beveik panašius klinikinius ir imunologinius fenotipus ir greičiausiai genetinį pagrindą, ši sąvoka yra nuspėjama. Remdamiesi fenotipų analize, pastebėjome dar keletą anomalijų SIgAD sergantiems pacientams, sergantiems sunkiais fenotipais, tokiais kaip didelė CD21low B ląstelių subpopuliacija ir T ląstelių proliferacijos defektas. Atitinkamai, sunkūs pacientai pasireiškia didesniu kvėpavimo takų infekcijų skaičiumi, palyginti su lengvu SIgAD, ir daug pacientų, sergančių sinusitu, otitu, pneumonija ir b, bronchektazija, o tai rodo tolesnį šių pacientų stebėjimą ir tikslesnį gydymą. Šio tyrimo tėvai teigia, kad B ir T ląstelių pogrupių tyrimas gali būti naudingas siekiant geriau suprasti ligos patogenezę ir prognozę.

Nuorodos

1. Aghamohammadi A, Mohammadi J, Parvaneh N, Rezaei N, Moin M, Espanol T ir kt. Selektyvaus IgA trūkumo progresavimas iki bendro kintamo imunodeficito. Int Arch Allergy Immunol. 2008;147(2):87–92.

2. Bagheri Y, Sanaei R, Yazdani R, Shekarabi M, Falak R, Mohammadi J ir kt. Heterogeninė selektyvaus imunoglobulino trūkumo patogenezė. Int Arch Allergy Immunol. 2019;179(3):232–46.

3. Nechvatalova J, Pikulova Z, Stikarovska D, Pesak S, Vlkova M, Litzman J. B-lymphocyte subpopulations in patients with selective IgA deficiency. J Clin Immunol. 2012;32(3):441–8.

4. Litzman J, Vlková M, Pikulová Z, Štikarovská D, Lokaj J. T ir B limfocitų subpopuliacijos ir aktyvacijos / diferenciacijos žymenys pacientams, kuriems yra selektyvus IgA trūkumas. Clin Exp Immunol. 2007;147(2):249–54.

5. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Pereinamosios B ląstelės ir TLR9 atsakai yra netinkami dėl selektyvaus IgA trūkumo. Priekinis imunolis. 2018;9:909.

6. Celiksoy M, Yildiran A. B ląstelių pogrupių palyginimas su pirminiais imuniniais trūkumais progresuoja su sveikais vaikais, kurių antikūnų trūkumas atitinka. Alergolis imunopatolis. 2016;44(4):331–40.

7. Marasco E, Farroni C, Cascioli S, Marcellini V, Scarsella M, Giorda E ir kt. B-ląstelių aktyvinimas naudojant CD40L arba CpG matuoja B ląstelių pogrupių funkciją ir nustato specifinius imunodeficito pacientų defektus. Eur J Immunol. 2017;47(1):131–43.

8. Lemarquis AL, Theodors F, Einarsdottir HK, Ludviksson BR. Su sIgAD susietų signalizacijos kelių žemėlapis atskleidžia, kad IL-21-sukeltas STAT3 B ląstelių aktyvavimas yra sutrikęs. Priekinis imunolis. 2019; 10:403.

9. Borte S, Pan-Hammarstrom Q, Liu C, Sack U, Borte M, Wagner U ir kt. Interleukinas{2}} atkuria imunoglobulino gamybą ex vivo pacientams, kuriems yra įprastas kintamas imunodeficitas ir selektyvus IgA trūkumas. Kraujas. 2009;114(19):4089–98.

10. Abolhassani H, Kiaee F, Tavakol M, Chavoshzadeh Z, Mahdaviani SA, Momen T ir kt. Ketvirtasis Irano nacionalinio pirminių imunodeficitų registro atnaujinimas: molekulinės diagnostikos integravimas. J Clin Immunol. 2018;38(7):816–32.

11. Aghamohammadi A, Rezaei N, Yazdani R, Delavari S, Kutukculer N, Topyildiz E ir kt. „Consensus“ Vidurio Rytų ir Šiaurės Afrikos registras dėl įgimtų imuniteto klaidų. J Clin Immunol. 2021;41(6):1339–51.

12. Seidel MG, Kindle G, Gathmann B, Quinti I, Buckland M, van Montfrans J ir kt. Europos imunodeficitų draugijos (ESID) registro darbiniai apibrėžimai, skirti klinikinei įgimtų imuniteto klaidų diagnostikai. J Allergy Clin Immunol Pract. 2019;7(6):1763–70.

13. Shad TM, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P ir kt. Kintami T ir B ląstelių pogrupių anomalijos esant ataksijai telangiektazijai. J Clin Immunol. 2020: 1–13.

14. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Bagheri Y ir kt. Limfocitų pogrupiai, susiję su klinikiniu profiliu CVID sergantiems pacientams, neturintiems monogeninių defektų. Ekspertas Rev Clin Immunol. 2021;17(9):1041–51.

15. Moeini Shad T, Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P ir kt. Kintami T ir B ląstelių pogrupių anomalijos esant ataksijai telangiektazijai. J Clin Immunol. 2021;41(1):76–88.

16. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Ghanavatinejad A, Noorbakhsh F ir kt. Cirkuliuojančių T pagalbininkų pogrupių ir reguliuojančių T ląstelių disbalansas pacientams, kuriems yra LRBA trūkumas: koreliacija su ligos sunkumu. J Cell Physiol. 2018;233(11):8767–77.

17. Azizi G, Mirshafey A, Abolhassani H, Yazdani R, Jafarnezhad-Ansariha F, Shaghaghi M ir kt. Cirkuliuojantys pagalbinių T-ląstelių pogrupiai ir reguliuojančios T ląstelės pacientams, sergantiems įprastu kintamu imunodeficitu be žinomos monogeninės ligos. J Investig Allergol Clin Immunol. 2018;28(3):172–81.

18. Reisi M, Azizi G, Kiaee F, Masiha F, Shirzadi R, Momen T ir kt. Plaučių komplikacijų įvertinimas pacientams, sergantiems pirminiais imunodeficito sutrikimais. Eur Ann Allergy Clin Immunol. 2017;49(3):122.

19. Cerutti A, Chen K, Chorny A. Imunoglobulino atsakai gleivinės sąsajoje. Annu Rev Immunol. 2011;29:273–93.

20. Bagheri Y, Babaha F, Falak R, Yazdani R, Azizi G, Sadri M ir kt. IL-10 skatina TGF sekreciją, TGF receptorių II padidėjimą ir IgA sekreciją B ląstelėse. Eur Citokinų tinklas. 2019;30(3):107–13.

21. Ozkan H, Atlihan F, Genel F, Targan S, Gunvar T. IgA ir (arba) IgG poklasio trūkumas vaikams, sergantiems pasikartojančiomis kvėpavimo takų infekcijomis, ir jo ryšys su lėtiniu plaučių pažeidimu. J Investig Allergol Clin Immunol. 2005;15(1):69–74.

22. Tavakol M, Jamee M, Azizi G, Sadri H, Bagheri Y, Zaki-Dizaji M ir kt. Diagnostinis požiūris į pacientus, kuriems įtariamas pirminis imunodeficitas. Endocr Metab imuninių sutrikimų vaistų taikiniai. 2020;20(2):157–71.

23. Resnick ES, Moshier EL, Godbold JH, Cunningham-Rundles C. Sergamumas ir mirtingumas nuo bendro kintamo imunodeficito per 4 dešimtmečius. Kraujas. 2012;119(7):1650–7.

24. Yazdani R, Abolhassani H, Asgardoon M, Shaghaghi M, Modaresi M, Azizi G ir kt. Infekcinės ir neinfekcinės plaučių komplikacijos pacientams, sergantiems pirminiais imunodeficito sutrikimais. J Investig Allergol Clin Immunol. 2017;27(4):213–24.

25. Ahmadi M, Nouri M, Babaloo Z, Farzadi L, Ghasemzadeh A, Hamdi K ir kt. Gydymas intraveniniu imunoglobulinu (IVIG) moduliuoja periferinio kraujo Th17 ir reguliuojančias T ląsteles pasikartojančių persileidimų pacientams: neatsitiktinis, atviras klinikinis tyrimas. Immunol Lett. 2017;192:12–9.

26. Yazdani R, Seify R, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Eskandari N, Golsaz-Shirazi F ir kt. Įvairių klasifikacijų palyginimas pacientams, sergantiems įprastu kintamu imunodeficitu (CVID), naudojant B ląstelių pogrupių matavimus. Allergol Imunopathol (Madr). 2017;45(2):183–92.

27. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Rezaei N. Pirminės imunodeficito ligos Irane: praeitis, dabartis ir ateitis. Arch Iran Med. 2021. https://doi. org/10.34172/aim.2021.18.

28. Aghamohammadi A, Abolhassani H, Biglari M, Abolmaali S, Moazzami K, Tabatabaeiyan M ir kt. Perjungtos atminties B ląstelių analizė pacientams, kuriems yra IgA trūkumas. Int Arch Allergy Immunol. 2011;156(4):462–8.

29. Yousef B, Amirifar P, Delavari S, Rae W, Kokhaei P, Abolhassani H ir kt. Kintami T ir B ląstelių pogrupių anomalijos esant ataksijai telangiektazijai. J Clin Immunol. 2020. https://doi.org/10.1007/s10875-020-00881-9.

30. Abolhassani H, Gharib B, Shahinpour S, Masoom SN, Havaei A, Mirminachi B ir kt. Autoimunitetas pacientams, kuriems yra selektyvus IgA trūkumas. J Investig Allergol Clin Immunol. 2015;25(2):112–9.

31. Arkwright PD, Abinun M, Cant AJ. Autoimunitetas sergant žmogaus pirminio imunodeficito ligomis. Kraujas. 2002;99(8):2694–702.

32. Cerutti A, Cols M, Puga I. Ribinės zonos B ląstelės: įgimtų antikūnus gaminančių limfocitų savybės. Nat Rev Immunol. 2013;13(2):118–32.

33. Bukowska-Straková K, Kowalczyk D, Baran J, Siedlar M, Kobylarz K, Zembala M. B-ląstelių skyrius vaikų, turinčių įvairių tipų pirminį humoralinį imunodeficitą, periferiniame kraujyje. Pediatr Res. 2009;66(1):28–34.

34. Karaman SBES, Gülez N, Genel F. B-ląstelių pogrupių reikšmė pacientams, sergantiems neklasifikuota hipogamaglobulinemija ir susijusi su intraveninio imunoglobulino pakeitimo poreikiu. Iranas J Immunol. 2018;15(1):1–13.

35. Patuzzo G, Mazzi F, Vella A, Ortolani R, Barbieri A, Tinazzi E ir kt. Imunofenotipinė B limfocitų analizė pacientams, sergantiems įprastu kintamu imunodeficitu: CD23, kaip naudingo ligos apibrėžimo žymeklio, nustatymas. ISRN imunol. 2013. https://doi.org/10. 1155/2013/512527.

36. Patuzzo G, Barbieri A, Tinazzi E, Veneri D, Argentino G, Moretta F ir kt. Autoimunitetas ir infekcija esant bendram kintamam imunodeficitui (CVID). Autoimmun Rev. 2016;15(9):877–82.

37. Rakhmanov M, Keller B, Gutenberger S, Foerster C, Hoenig M, Driessen G ir kt. Cirkuliuojančios CD21low B ląstelės, esant bendram kintamam imunodeficitui, panašios į audinius, įgimtas B ląsteles. Proc Natl Acad Sci. 2009;106(32):13451–6.

38. Isnardi I, Ng YS, Menard L, Meyers G, Saadoun D, ​​Srdanovic I ir kt. Komplemento receptoriaus 2/CD21-žmogaus naiviose B ląstelėse daugiausia yra autoreaktyvių nereaguojančių klonų. Kraujas. 2010;115(24):5026–36.

39. Sims GP, Ettinger R, Shirota Y, Yarboro CH, Illei GG, Lipsky PE. Cirkuliuojančių žmogaus pereinamųjų B ląstelių identifikavimas ir apibūdinimas. Kraujas. 2005;105(11):4390–8.

40. Lemarquis AL, Einarsdottir HK, Kristjansdottir RN, Jonsdottir I, Ludviksson BR. Pereinamosios B ląstelės ir TLR9 atsakai yra netinkami dėl selektyvaus IgA trūkumo. Priekinis imunolis. 2018. https://doi.org/10.3389/fmmu.2018. 00909.

41. Willinger T, Freeman T, Hasegawa H, McMichael AJ, Callan MF. Molekuliniai parašai išskiria žmogaus centrinę atmintį nuo efektorinės atminties CD8 T ląstelių pogrupių. J Immunol. 2005;175(9):5895–903.

42. Martinas MD, Badovinaco viceprezidentas. Atminties CD8 T ląstelės apibrėžimas. Priekinis imunolis. 2018;9:2692.

43. Nechvatalova J, Pavlik T, Litzman J, Vlkova M. Pacientams, kuriems yra bendras kintamasis imunodeficitas ir selektyvus IgA trūkumas, padaugėja galutinai diferencijuotų atminties T ląstelių. Cent Eur J Immunol. 2017;42(3):244–51.

44. Khanmohammadi S, Shad TM, Delavari S, Shirmast P, Bagheri Y, Azizi G ir kt. Specifinių antikūnų atsakų įvertinimas pacientams, sergantiems selektyviu IgA trūkumu ir ataksija telangiektazija. Endocr Metab imuninių sutrikimų vaistų taikiniai. 2022;22(6):640–9.

45. Cazac BB, Roes J. TGF receptoriai kontroliuoja B ląstelių reakciją ir IgA indukciją in vivo. Imunitetas. 2000;13(4):443–51.

46. ​​Van Vlasselaer P, Punnonen J, De Vries J. Transforming growth factor-beta directs IgA switching in human B cells. J Immunol. 1992;148(7):2062–7.

47. Cerutti A, Rescigno M. Žarnyno imunoglobulino A atsakų biologija. Imunitetas. 2008;28(6):740–50.

48. Soheili H, Abolhassani H, Arandi N, Khazaei HA, Shahinpour S, Hirbod Mobarakeh A ir kt. Natūralių reguliuojančių T ląstelių įvertinimas tiriamiesiems, turintiems selektyvų IgA trūkumą: nuo vyresnio amžiaus idėjos iki naujų galimybių. Int Arch Allergy Immunol. 2013;160(2):208–14.

49. Yazdani R, Fatholahi M, Ganjalikhani-Hakemi M, Abolhassani H, Azizi G, Hamid KM ir kt. Apoptozės vaidmuo bendrame kintamo imunodeficito ir selektyvaus imunoglobulino A trūkumo atveju. Mol Immunol. 2016;71:1–9.

50. McCusker C, Warrington R. Pirminis imunodeficitas. Visi Asth Clin imuniniai. 2011;7 (1 priedas):S11.

51. Marits P, Wikström AC, Popadic D, Winqvist O, Thunberg S. T ir B limfocitų funkcijos įvertinimas klinikinėje praktikoje, naudojant srauto citometrija pagrįstą proliferacijos tyrimą. Clin Immunol. 2014;153(2):332–42.

52. TofghiZavareh F, Mirshafey A, Yazdani R, Keshtkar AA, Abolhassani H, Mahdaviani SA ir kt. Imunofenotipinė ir funkcinė limfocitų pogrupių analizė pacientams, sergantiems kintamu imunodeficitu, be monogeninių defektų. Scand J Immunol. 2022;96(1):e13164.