Teigiamas Thymelaea Hirsuta poveikis kasos salelių degeneracijai, inkstų fibrozei ir kepenų pažeidimams

Sanae Abid, Hassane Mekhfifi, Abderrahim Ziyyat, Abdekhaleq Legssyer, Mohammed Aziz ir Mohamed Bnouham

Bioresursų, biotechnologijų, etnofarmakologijos ir sveikatos laboratorija, Mokslų fakulteto Biologijos katedra,

Universitetas Mohamed Ist, Bd: Mohamed VI, BP: 717, Oujda 60000, Marokas

Kontaktas:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Tikslas. Maroke plius ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) yra vaistinis augalas, plačiai naudojamas diabetui gydyti ir jo profilaktikai. Šiuo tyrimu buvo siekiama įvertinti vidutinės trukmės vandeninio ekstrakto (AqTh) ir Th etilacetato frakcijos (EaTh) antidiabetinį poveikį ir ištirti galimą jų apsauginį poveikį kasos salelių degeneracijai, diabetinei nefropatijai ir kepenų pažeidimams streptozotocine (STZ). - Diabetinės žiurkės. Metodai. Eksperimentinis diabetas žiurkėms buvo sukeltas vienkartine intraperitonine 50 mg/kg STZ injekcija. Gydymo laikotarpiu (4 savaites) STZ diabetu sergančioms žiurkėms kasdien buvo skiriama 200 mg/kg AqTh ir 50 mg/kg EaTh. Buvo tiriama parametrų grupė, įskaitant gliukozės kiekį kraujyje nevalgius, biocheminius parametrus ir žarnyno gliukozidazės slopinimą. Be to, histologinis kasos tyrimas,inkstas, kepenys ir aorta taip pat buvo realizuoti. Rezultatai. Gydymo pabaigoje ir AqTh, ir EaTh gliukozės kiekis kraujyje nevalgius normalizavosi iki atitinkamai 1,08 ir 1,25 g/l. AqTh taip pat sumažino kreatinino ir HbAc1 kiekį šlapime. EaTh parodė slopinamąjį poveikį žarnyno gliukozidazei, o AqTh neturėjo tokio slopinamojo poveikio. Be to, kasos hematoksilino ir eozino dažymas parodė, kad AqTh arba EaTh apsaugo nuo kasos salelių ląstelių degeneracijos. Kaip tas patsinkstas, Massono dažymas trichromu parodė reikšmingą prevencijąinkstųAqTh arba EaTh gydytų diabetu sergančių žiurkių fibrozė. Kita vertus, kepenų hematoksilino ir eozino dažymas parodė, kad AqTh ir EaTh apsaugo nuo kepenų pažeidimo. Išvada. Darome išvadą, kad vidutinis AqTh ir EaTh vartojimas daro didelį antihiperglikeminį poveikį STZ diabetu sergančioms žiurkėms, galbūt dėl ​​žarnyno gliukozidazės slopinimo ir apsaugos nuo kasos salelių ląstelių pažeidimo. Be to, gydymas AqTh ir EaTh apsaugo nuo nefropatijos ir kepenų komplikacijų žiurkėms, sergančioms STZ diabetu.

Cistanche žolėgali gydytiinkstų fibrozė

Įvadas

Cukrinis diabetas yra labiausiai paplitusi endokrininė liga. Sergamumas šia liga didėja nerimą keliančiu greičiu (4-5 proc.) [1]. Negydomas arba nekontroliuojamas, nuo insulino nepriklausomas 2 tipo cukrinis diabetas (DM2) gali sukelti keletą komplikacijų, tokių kaip širdies ir kraujagyslių ligos bei diabetinė nefropatija, ir gali sukelti nuo insulino priklausomą 1 tipo diabetą (DM1).

Diabetinė nefropatija yra viena iš svarbiausių diabeto komplikacijų ir pagrindinė priežastis, dėl kurios didėja pacientų, kuriems yra galutinė stadija.inkstųliga (ESRD) [2], kurioms reikiainkstasdializė arba ainkstastransplantacija, kad pacientas galėtų gyventi.

Todėl diabeto valdymas tampa labai svarbus siekiant išvengti rimtų jo metabolinių pasekmių, tokių kaip nefropatija.

Šiais laikais diabeto gydymas apima dietos kontrolę, mankštą, insulino ir (arba) hipoglikeminių vaistų vartojimą, taip pat vaistinių augalų, kaip papildomos alternatyvios medicinos, naudojimą. Keletas vaistinių augalų turi itin svarbų antihiperglikeminį poveikį su minimaliu šalutiniu poveikiu [3–5]. Dėl šios priežasties Pasaulio sveikatos organizacija (PSO) atkreipė dėmesį į racionalų tradicinių ir natūralių vaistų vartojimą gydant diabetą [6].

Maroke daugiau nei 100 vaistinių augalų naudojama diabeto gydymui ir profilaktikai [7–10]. Daugelio šių augalų ekstraktų ir produktų (Ammi visnaga Lam., Globularia alum, Nigella sativa ir Olea europaea var.) antihiperglikeminis ir antidiabetinis aktyvumas buvo patvirtintas[9].

T. hirsuta yra vaistinis augalas, tradiciškai naudojamas diabeto profilaktikai ir gydymui šiaurės rytų Maroke [8]. Ankstesni farmakologiniai tyrimai parodė ūmų antihiperglikeminį AqTh ir EaTh poveikį [11–13]. Tačiau šių dviejų T. hirsuta ekstraktų vidutinės trukmės antidiabetinis poveikis dar nenustatytas. Todėl šio tyrimo tikslas – pirmą kartą įvertinti vidutinės trukmės antidiabetinį AqTh ir EaTh aktyvumą ir ištirti jų numatomą apsauginį poveikį kasos salelių degeneracijai, diabetinei nefropatijai, kepenų steatozei ir aortos komplikacijoms sergant STZ- sukeltos diabetinės žiurkės.

2. Medžiagos ir metodai

2.1.Cheminės medžiagos ir reagentai.

Glucose Autokit buvo nupirktas iš BioSystems (Ispanija). STZ pirktas iš Sigma Aldrich (Kinija). Akarbozė (Glucor 50) buvo gauta iš Bayer Schering Pharma (Kasablanka, Marokas). Sacharozė buvo nupirkta iš Prolabo (Rhone-Poulenc grupė) (EEB). Pentobarbitalis buvo gautas iš CEVA Sante Animale (LaBallasti`ere). „Anthrone“ (C14H10O) buvo pirktas iš „Organics“. Paraffifino vaškas pirktas iš FlukaChemika (Šveicarija). Eozinas (C20H6Br4Na2O5) buvo gautas iš Riedel-de Haen (Seelze), o hematoksilinas – iš BDH Chemicals Ltd. (Poole England). Fuksino rūgštis buvo įsigyta iš Acros Organics (New Jersey, JAV), fosfomolibdo rūgštis buvo įsigyta iš Sigma-Aldrich (PF, Steinheim), o šviesiai žalia - iš Sigma-Aldrich (MO, JAV).

2.2. Gyvūnai.

Abiejų lyčių žiurkės Wistar, iš pradžių svėrusios 150–250 g (8-9 savaites), buvo gautos iš Mokslų fakulteto Biologijos katedros gyvūnų namų (Oujda, Marokas). Tyrimas buvo atliktas vadovaujantis „Laboratorinių gyvūnų priežiūros principais“ [14]. Jie buvo laikomi standartinėmis laboratorinėmis sąlygomis (šviesos/tamsos ciklas 12/12 h ir temperatūra 23 plius 2 laipsniai su 3 žiurkėmis viename narve su prieiga prie maisto ir vandens. Norint surinkti šlapimą ir nustatyti vandens bei maisto suvartojimą, žiurkės buvo laikomos medžiagų apykaitos narveliai.

2.3. Cukrinio diabeto sukėlimas.

Po 14 valandų nevalgius žiurkėms į pilvaplėvės ertmę buvo sušvirkšta viena STZ dozė (50 mg/kg KM), paruošto šviežiame ir šaltame natrio citrato buferyje (0,1 M citrinos rūgštis ir 0,1 M trinatrio citrato dihidrato), kai pH 4,5, diabetui sukelti [15]. Po 1 savaitės žiurkės, kurių gliukozės kiekis kraujyje nevalgius buvo 1,26–2 g/l, buvo laikomos 2 tipo diabetu ir buvo įtrauktos į tyrimą.

2.4. Augalų mėginio paruošimas.

T. hirsuta buvo įsigyta iš tradicinio Oujda (Rytų Maroko) turgaus ir buvo patvirtinta Botaniko Biologijos katedroje (Mokslų fakultetas, Oujda, Marokas), o kupono pavyzdys (HUMPOM137) buvo deponuotas augalų skyriuje Herbarium University Mohamed Premier of Oujda, Marokas (HUMPO).

T. Hirsutos antenos dalys iš pradžių buvo išvalytos ir nuplaunamos vandeniu, o po to per naktį džiovinamos 40 laipsnių temperatūroje orkaitėje. AqTh paruošimui 140 g T. hirsuta anteninių dalių buvo infuzuojama į 2 l distiliuoto vandens 3 valandas. AqTh išeiga buvo 4,53 proc. EaTh buvo paruoštas taip, kaip aprašyta ankstesniame mūsų tyrime [13].

2.5. Eksperimentinis dizainas.

Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į penkias grupes (po 5 arba 6 žiurkes grupėje): normalios kontrolinės žiurkės (vartojamos tik distiliuotu vandeniu), diabetinės žiurkės (vartojamos tik distiliuotu vandeniu), diabetinės žiurkės, gydytos 10 mg /kg KM akarbozės (standartinis hipoglikeminis vaistas), cukriniu diabetu sergančios žiurkės, gydomos 50 mg/kg EaTh, ir diabetinės žiurkės, gydomos 200 mg/kg AqTh. Optimalios dozės buvo nustatytos remiantis mūsų ankstesniais tyrimais [13] ir preliminariais bandymais. Visos žiurkės buvo gydomos kartą per dieną 4 savaites. Kūno svoris buvo registruojamas kiekvieną dieną. Vandens ir maisto suvartojimas bei šlapimo kiekis buvo stebimas prieš gydymą ir po jo, o gydymo pabaigoje išmatuota glikozurija. Gliukozės kiekis kraujyje nevalgius buvo tiriamas prieš gydymą (0 savaitė) ir po 1, 2, 3 ir 4 gydymo savaičių. Gliukozidazės slopinimas in vivo buvo tiriamas dieną prieš žiurkių numarinimą. Po 4 gydymo savaičių visi gyvūnai buvo anestezuoti 50 mg/kg pentobarbitalio po 14 valandų badavimo. Tada kraujas buvo paimtas širdies punkcija ir nedelsiant centrifuguojamas 3000 turų / min 10 minučių. * serumas buvo laikomas –20 laipsnių temperatūroje iki biocheminės analizės (bendras cholesterolis ir trigliceridai). Theinkstas, pašalintos kepenys, aorta, širdis ir kasa, pasvertas (inkstaskepenys ir širdis), o po to fiksuotas (inkstai, kepenys, aorta ir kasa) 10 procentų formalino histologiniam tyrimui. Kepenų mėginys buvo laikomas –20 laipsnių temperatūroje glikogeno kiekio tyrimui.

cistachedėlinkstų funkcija

2.6. Gliukozės kiekio kraujyje nustatymas nevalgius.

Gydymo laikotarpiu glikemija nevalgius buvo kiekybiškai vertinama kas savaitę. Po 14 valandų badavimo iš uodegos venų buvo pašalintas kraujas, taikant lengvą eterio anesteziją, naudojant mikrokapiliarus. Tada jis buvo centrifuguojamas 5000 × g greičiu 10 minučių, o glikemija serume buvo įvertinta naudojant komercinį gliukozės rinkinį (BioSystems, Ispanija), pagrįstą gliukozės oksidazės peroksidazės metodu [16].

2.7. - Gliukozidazės slopinimas, in vivo tyrimas.

Dieną prieš paaukojimą žiurkės, kurios 14 valandų nevalgė, buvo naudojamos -gliukozidazės slopinimui in vivo stebėti. Likus 3 0 min. iki geriamosios sacharozės įkrovos (2 g/kg), kiekvienai grupei buvo skiriama dozė, atitinkanti jos gydymą. Kraujas buvo paimtas iš uodegos, venos, naudojant mikrokapiliarus, prieš pat bandomosios dozės skyrimą (–30 min.), prieš pat sacharozės apkrovą (0 min.) ir 30, 60 ir 120 min po sacharozės įkrovos. Po centrifugavimo 5000 × g/10 min., gliukozės kiekis plazmoje buvo nustatytas gliukozės oksidazės peroksidazės metodu [17].

2.8. Kepenų glikogeno ekstrahavimas ir nustatymas.

Glikogenui ekstrahuoti pagal Ong ir Khoo[18] buvo panaudoti pasverti visų grupių kepenų audinių mėginiai ({0}},3–0,5 g). Kepenų mėginiai pirmiausia buvo susmulkinti, homogenizuoti su 2 ml 30 procentų kalio hidroksido (KOH) ir virti 100 laipsnių / 30 min. Tada glikogeno nusodinimui mišinys buvo du kartus apdorotas 4 ml 95 procentų etanolio ir kiekvieną kartą mišinys buvo laikomas 4 laipsnių / 30 min. Po centrifugavimo 3000 sūkių/min./15 min., granulės buvo plaunamos 8 ml 95% etanolio ir centrifuguojamos 3000 turų/min/15 min. Gautas glikogenas ištirpinamas 1 ml distiliuoto vandens. Glikogeno koncentracija buvo stebima naudojant antrono reagentą. Optinis tankis buvo nuskaitytas esant 625 nm.

2.9. Biocheminiai tyrimai.

Glikozurija buvo matuojama komerciniu Autokit (BioSystems, Ispanija), pagrįstu gliukozės oksidazės peroksidazės metodu. Glikozilintas hemoglobinas (HbA1c) buvo įvertintas naudojant komercinį rinkinį (Cal-tech diagnostika, INC, JAV), o cholesterolis buvo nustatytas naudojant komercinius tyrimų rinkinius (SGM-Italia, Roma, Italija). Trigliceridų ir šlapimo kreatinino kiekis buvo įvertintas naudojant komercinius tyrimų rinkinius (Bio Sud Diagnostic SRL, Ricerca, Italija).

2.10. Histopatologija.

Po 3 ± 1 dienos fiksacijos 10 procentų formaline kasa,inkstas, kepenų ir aortos audiniai buvo plaunami distiliuotu vandeniu 20 min. Tada jie buvo dehidratuoti didėjančiu etanolio pavadinimu (atitinkamai 30 procentų 30 minučių, 70 procentų 30 minučių, 95 procentai 30 minučių ir 2 × 100 procentų 60 minučių). Po apšvietimo etapo toluene (2 × 120 min.), organai buvo įtraukti į parafintolueno mišinį (1 V / 1 V) 90 minučių, tada - parafinu (2 × 120 min.). Galiausiai organai buvo įterpti į parafiną prieš supjaustant 7 μm (mikrotomas Leitz 1512). Kasos ir kepenų sekcijos buvo nudažytos hematoksilinu ir eozinu.Inkstasir aortos pjūviai buvo nudažyti Massono trichromu, kad būtų parodyta fibrozė / kolagenas.

Prieš dažant hematoksilinu ir eozinu, sekcijos buvo deparafinuotos ir inkubuojamos toluene (2 × 5 min.), po to hidratuojamos sumažinant etanolio pavadinimą (atitinkamai 100 proc., 95 proc. ir 70 proc.) 5 minutes. Tada, norint dažyti hematoksilinu ir eozinu, po 20 minučių plovimo ląstelių branduoliai buvo nudažyti panardinti į hematoksiliną 5 minutes, po to 15 minučių plauti vandeniu. Norint nudažyti citoplazmą, sekcijos buvo panardintos į 1 procentą eozino 5 minutes, po to plaunamos 2 minutes. Po dažymo sekcijos buvo dehidratuotos 100 procentų etanoliu (2 × 1/2 min.) ir toluenu (2 × 2 min.). Massono dažymas trichromu po hidratacijos,inkstas, o aortos sekcijos buvo fiksuotos Bouino tirpale 1 valandą / 56 laipsnius. Tada, po 10 minučių plovimo, sekcijos buvo nudažytos Weigerto geležies hematoksilinu 2 minutes. Po 10 min skalavimo sekcijos buvo panardintos į fuksino rūgštį 3 min., o po 10 min plovimo 15 min diferencijuojamos fosfomolibdo rūgštis. Norėdami nudažyti kolageną, sekcijos buvo perkeltos tiesiai į šviesiai žalią 15 min. Po 2 minučių diferenciacijos 1 procento acto rūgštyje, sekcijos buvo dehidratuotos 95 procentų ir 100 procentų etanoliu 1 minutę, o po to nuvalytos toluene (2 × 1 min.) [19–21].

Galiausiai ant lamelių nudažytos sekcijos buvo sumontuotos itin svarbios. Po džiovinimo mikroskopinis stebėjimas buvo atliktas naudojant OlympusTokyo (Japonija) šviesos mikroskopo 40x objektyvų akių sistemą.

Norint nustatyti vaisto poveikį kasos audiniams, buvo apskaičiuotas kasos salelių ląstelių skaičius ir skersmuo. Norint nustatyti kolageno kiekįinkstassekcijų rezultatai buvo vertinami nuo nulio iki trijų (0: nėra kolageno, 1: silpnas kolagenas, 2: vidutinio sunkumo kolagenas ir 3: stiprus kolagenas) [22]. Gydymo poveikis aortai buvo įvertintas išmatavus aortos skersmenį, o kepenų pažeidimai išaiškinti lipidų lašelių atsiradimu.

2.11. Statistinė analizė.

Visos vertės buvo išreikštos kaip vidurkis ± SEM. Statistinė analizė ir vidurkių palyginimas buvo atliktas naudojant nesuporuotą Studento testą dviejų grupių vidurkiams palyginti ir suporuotą Stjudento testą, kad būtų galima palyginti du tos pačios grupės vidurkius. Norint nustatyti apsauginį vaisto poveikįinkstusir kepenų, buvo naudojamas chi kvadrato testas. p reikšmės<0.05 were="" considered="">

3. Rezultatai

3.1. Gydymo vaistais poveikis gliukozės kiekiui kraujyje nevalgius sergant STZ-

Sukeltos diabetinės žiurkės. Negydytoms kontrolinėms žiurkėms, sergančioms cukriniu diabetu, buvo pastebėtas reikšmingas gliukozės kiekio kraujyje padidėjimas nevalgius, palyginti su įprastomis kontrolinėmis žiurkėmis. Gydymas 200 mg/kg AqTh sumažino gliukozės kiekį kraujyje nuo 1-osios vartojimo savaitės, o šis poveikis buvo reikšmingas 3-ią (p < 0,001)="" ir="" 4-ąją.="" savaitę="" (p="">< 0,05),="" palyginti="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis.="" gydymas="" 50="" mg/kg="" eath="" sumažino="" hiperglikemiją="" nuo="" 2-osios="" savaitės,="" o="" šis="" poveikis="" buvo="" reikšmingas="" (p="">< 0,05)="" 3="" ir="" 4="" savaites.="" 2,="" 3="" ir="" 4="" savaites="" ea*="" poveikis="" buvo="" statistiškai="" panašus="" į="" 10="" mg/kg="" akarbozės="" (1="">

3.2. Vaistų poveikis gliukozidazės aktyvumui, in vivo tyrimas.

Įprastų kontrolinių žiurkių gliukozės kiekis kraujyje buvo padidintas iki 1,48 g/l.3{11}} min. po sacharozės pakrovimo, o po 120 min. grįžta į normalią vertę, o negydytų diabetu sergančių žiurkių glikemija buvo padidinta iki 2,76 g/l esant sacharozės įkrovai 30 min., kad būtų pasiekta 2,85 g/l 120 min. 50 mg/kg EaTh reikšmingai (p < 0,05)="" apsaugojo="" nuo="" hiperglikemijos,="" kurią="" sukėlė="" sacharozės="" įkrova="" 30="" ir="" 60="" min.,="" palyginti="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis.="" 200="" mg/kg="" aqth="" grupėje="" buvo="" parodytas="" antihiperglikeminis="" poveikis.="" gliukozės="" kiekis="" kraujyje="" atitinkamai="" pasiekė="" 2,63="" g/l="" ir="" 2,70="" g/l="" po="" 30="" ir="" 60="" min.,="" o="" po="" 120="" min="" sumažėjo="" iki="" 2,21="" g/l.="" 10="" mg/kg="" akarbozė="" reikšmingai="" (p="">< 0,01)="" apsaugojo="" nuo="" hiperglikemijos,="" kurią="" sukelia="" sacharozės="" įkrova="" 30,="" 60="" ir="" 120="" min.,="" palyginti="" su="" diabeto="" kontrole.="" akarbozės="" poveikis="" buvo="" statistiškai="" panašus="" į="" eaththeffffect="" (2="">

3.3. Vaisto poveikis

Gydymas pagal kūno svorį, maistą ir vandens suvartojimą. Negydytų diabetu sergančių žiurkių kūno svorio padidėjimas buvo reikšmingai (p < {0}}.05)="" mažesnis,="" palyginti="" su="" įprastomis="" žiurkėmis.="" aqth="" reikšmingai="" (p="">< 0.05)="" užkirto="" kelią="" kūno="" svorio="" kritimui,="" palyginti="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis.="" eath="" ir="" akarboze="" gydytos="" žiurkės="" reikšmingai="" (p=""> 0.05) nepakeitė kūno svorio padidėjimo, palyginti su negydytomis diabetu sergančiomis žiurkėmis. Gydymo pabaigoje negydytų cukriniu diabetu sergančių žiurkių, AqTh, EaTh ir akarbozės grupių, vandens suvartojimas nepasikeitė, palyginti su duomenimis prieš gydymą, tuo tarpu diabetu sergančių žiurkių ir AqTh, EaTh ir akarboze gydytų žiurkių maisto suvartojimas buvo žymiai didesnis. (atitinkamai p < 0,05,="" p="">< 0,05,="" p="">< 0,05,="" a="" dp="">< 0,01),="" palyginti="" su="" prieš="" vaisto="" vartojimą="" (1="">

3.4. Vaistų gydymo įtaka šlapimo parametrams.

Po {{0}}savaitės gydymo, kreatinino ir glikozurija šlapime reikšmingai padidėjo (atitinkamai p < 0.05="" ir="" p="">< 0,001)="" negydomoms="" diabetu="" sergantiems="" žiurkėms,="" palyginti="" su="" normalios="" žiurkės.="" išgėrus="" aqth,="" kreatinino="" kiekis="" šlapime="" reikšmingai="" sumažėjo="" (p="">< 0,05),="" lyginant="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis,="" tačiau="" reikšmingo="" glikozurijos="" skirtumo,="" lyginant="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis,="" nepastebėta.="" gydymas="" eath="" užkirto="" kelią="" kreatinino="" kiekio="" padidėjimui="" šlapime,="" palyginti="" su="" įprastomis="" žiurkėmis;="" tačiau="" eath="" reikšmingai="" nepakeitė="" glikozurijos.="" kita="" vertus,="" aqth="" ir="" eath="" poveikis="" kreatininui="" ir="" glikozurijai="" šlapime="" buvo="" statistiškai="" panašus="" į="" 10="" mg/kg="" akarbozės.="" galiausiai,="" lyginant="" duomenis="" prieš="" ir="" po="" gydymo="" aqth,="" eath="" ar="" akarboze,="" šlapimo="" tūris="" reikšmingo="" skirtumo="" nebuvo="" (2="">

3.5. Gydymo vaistais poveikis biocheminiams parametrams.

Po {{0}}savaitės gydymo HbA1c reikšmingai padidėjo (p < 0,05)="" negydytų="" cukriniu="" diabetu="" sergančių="" žiurkių,="" palyginti="" su="" įprastomis="" žiurkėmis.="" išgėrus="" aqth,="" buvo="" išvengta="" hba1c="" padidėjimo,="" palyginti="" su="" įprastomis="" žiurkėmis.="" gydymo="" laikotarpio="" pabaigoje="" glikogeno="" kiekis="" kepenyse="" buvo="" reikšmingai="" sumažėjęs="" (p="">< 0,05)="" negydytų="" cukriniu="" diabetu="" sergančių="" žiurkių,="" palyginti="" su="" normaliomis="" žiurkėmis.="" gydymas="" aq*="" ir="" ea*="" neparodė="" reikšmingo="" poveikio="" kepenų="" glikogenui,="" palyginti="" su="" negydytomis="" diabetinėmis="" žiurkėmis,="" o="" gydymas="" akarboze="" nepakeitė="" kepenų="" glikogeno="" kiekio,="" palyginti="" su="" įprastomis="" žiurkėmis.="" galiausiai,="" bendrojo="" cholesterolio="" ir="" trigliceridų="" rezultatai="" rodo,="" kad="" po="" gydymo="" aqth,="" eath="" ar="" akarboze="" reikšmingų="" pokyčių,="" palyginti="" su="" normaliomis="" ir="" diabetinėmis="" žiurkėmis,="" nėra="" (3="">

3.6. Gydymo vaistais poveikis organų svoriui.

4 lentelėje parodytos kepenys,inkstasir širdies svorį gydymo laikotarpio pabaigoje. Rezultatai rodo, kadinkstasnegydytų cukriniu diabetu sergančių žiurkių svoris buvo žymiai padidėjęs, palyginti su įprastomis žiurkėmis. Gydymas 200 mg/kg AqTh arba 50 mg/kg EaTh nepakeitė kepenų, inkstų ir širdies svorio, lyginant su negydytomis diabetu sergančiomis žiurkėmis, tuo tarpu akarboze gydytų žiurkių kepenų ir širdies svoris žymiai padidėjo, palyginti su negydytomis diabetu sergančiomis žiurkėmis. .

3.7. Histopatologinis stebėjimas

3.7.1. Kasos pokyčiai.

Šviesos mikroskopinis įprastų žiurkių kasos salelių ląstelių stebėjimas rodo normalią histologinę išvaizdą su dideliu skersmeniu ir dideliu granuliacijos tankiu (3 pav.). Negydytų diabetu sergančių žiurkių skersmuo ir salelių ląstelių skaičius sumažėjo (atitinkamai p < 0.001="" ir="" p="">< 0.01="" )="" buvo="" pastebėtas.="" gydymas="" 200="" mg/kg="" aqth="" reikšmingai="" neleido="" sumažinti="" langerhanso="" salelės="" skersmens="" ir="" ląstelių="" skaičiaus="" (atitinkamai="" p="">< 0,01="" ir="" p="">< 0,05).="" tuo="" pačiu="" metu="" 50="" mg/kg="" eath="" turi="" reikšmingai="" (p="">< 0,05)="" apsaugotą="" skersmenį="" ir="" ląstelių="" skaičių="" nuo="" sumažėjimo.="" gydymas="" 10="" mg/kg="" akarbozės="" leido="" reikšmingai="" (p="">< 0,05)="" sumažinti="" salelių="" ląstelių="">

3.7.2. Inkstų pokyčiai.

Massono dažymo žymės yra mėlynos/žalios kolageno skaidulose, ruduose branduoliuose, raudonųjų raumenų skaidulų citoplazmoje ir oranžinėse kraujo ląstelėse. Normalioje grupėje buvo pastebėtas minimalus tubulointersticinio kolageno kiekis (4 pav.). Negydytų diabetu sergančių žiurkių tubulointersticinio kolageno kiekio padidėjimas (p < 0.01)="" buvo="" nustatytas.="" gydymas="" 20{{10}}="" mg/kg="" aqth="" ir="" 50="" mg/kg="" eath="" reikšmingai="" užkirto="" kelią="" (atitinkamai="" p="">< 0,001="" ir="" p="">< 0,05)="" tubulointersticiniam="" kolagenui,="" palyginti="" su="" negydytomis="" diabetu="" sergančiomis="" žiurkėmis,="" tačiau="" gydymas="" 10="" mg/kg="" akarboze="" reikšmingai="" nepakito="" (p=""> 0,05). Kita vertus, glomerulų kolagenas buvo pastebėtas 33,3 proc. normalių žiurkių. Diabetu sergančių žiurkių glomerulų kolagenas buvo aptiktas visose žiurkėse (100 proc.). Gydymas 200 mg/kg AqTh žymiai sumažino (p < 0,05)="" glomerulų="" kolageno="" kiekį="" iki="" 40="" proc.,="" tačiau="" ea*="" ir="" akarbozės="" nesumažėjo="" (4="">

3.7.3. Kepenų pokyčiai.

Hematoksilinu ir eozinu dažytų pjūvių tyrimas parodė, kad normalios žiurkės turi normalią histologinę išvaizdą. Negydytoms diabetu sergančioms žiurkėms buvo pastebėti svarbūs degeneraciniai kepenų audinio pokyčiai. Lipidų lašelių atsirado visose žiurkėse (100 proc.). Gydymas 200 mg/kg AqTh ir 50 mg/kg EaTh reikšmingai (p < 0,05)="" susilpnino="" šį="" poveikį.="" apsaugos="" procentas="" buvo="" atitinkamai="" 60="" ir="" 50="" procentų.="" tačiau="" gydymas="" akarboze="" 10="" mg/kg="" šio="" kepenų="" pažeidimo="" nesumažino="" (5="">

3.7.4. Aortos pokyčiai.

Šviesos mikroskopinis stebėjimas rodo, kad negydytų diabetu sergančių žiurkių aortos skersmuo buvo normalus, palyginti su įprastomis žiurkėmis. Gydymas 200 mg/kg AqTh, 50 mg/kg EaTh arba 10 mg/kg akarbozės reikšmingai nepakeitė aortos skersmens, palyginti su normaliomis ir diabetinėmis žiurkėmis (6 pav.).

4. Diskusija

Šiame tyrime pirmą kartą įrodėme vidutinės trukmės (4 savaites) T. hirsuta antidiabetinį poveikį ir jo prevenciją.inkstųir kepenų komplikacijos STZ sukeltoms diabetinėms žiurkėms.

Mūsų rezultatai parodė, kad vidutinės trukmės gydymas 200 mg/kg AqTh arba 50 mg/kg EaTh žymiai sumažina STZ gydytų diabetinių žiurkių gliukozės kiekį kraujyje nevalgius, palyginti su STZ negydytomis diabetinėmis žiurkėmis. EaTh parodė panašų gliukozidazę slopinantį aktyvumą, lyginant su 10 mg/kg akarbozės, tačiau AqTh neslopino gliukozidazės aktyvumo po sacharozės pakrovimo. Šie rezultatai rodo, kad vidutinės trukmės antihiperglikeminis Ea* poveikis yra susijęs su žarnyno gliukozidazės slopinimu. Taigi, šis atradimas patvirtina mūsų ankstesnius rezultatus [13], nors atrodo, kad Aq* antidiabetinis poveikis yra susijęs su kitu mechanizmu, o ne su gliukozidazės keliu. Be to, mes pastebėjome, kad Aq* gydytų diabetinių žiurkių HbAc1 kiekis sumažėjo, o gydymas Ea* nepakeitė HbAc1 lygio, palyginti su negydytomis diabetinėmis žiurkėmis. Tai paaiškina, kodėl -gliukozidazės inhibitoriai dažnai skiriami kartu su kitais vaistais nuo diabeto gydant diabetą.

Histopatologinis kasos skyrių tyrimas parodė, kad 4 savaites vartojant AqTh ir EaTh, Langerhanso salelėse žymiai padidėja skersmuo ir ląstelių skaičius. Panašūs tyrimai įrodė, kad daugelis augalų ekstraktų reikšmingai atstato diabetu sergančių žiurkių salelių skersmenį ir ląstelių skaičių [23–25].

Todėl tikėtinas AqTh veikimo mechanizmas kontroliuojant gliukozės kiekį kraujyje gali būti insulino sekrecijos iš kasos ląstelių padidėjimas. Kaip ir kiti galimi mechanizmai, AqTh gali jautrinti insulino receptorius insulinui arba stimuliuoti Langerhanso salelių kamienines ląsteles STZ sukeltų diabetinių žiurkių kasoje [25].

Todėl darome išvadą, kad antihiperglikeminiai fitocheminiai junginiai, esantys AqTh, skiriasi nuo EaTh.

Daugelis tyrimų įrodė, kad antriniai metabolitai, tokie kaip flavonoidai, taninai ir terpenoidai, gali slopinti alfa-gliukozidazę [26–28]. Ankstesniame mūsų komandos tyrime polifenolių turtinga T. hirsutahas frakcija parodė stiprų antidiabetinį poveikį diabetu sergantiems žiurkėms[29]. Taigi, EaTh gliukozidazę slopinantis poveikis tikriausiai yra dėl flavonoidų buvimo.

Gerai žinoma, kad diabetas yra susijęs su makrovaskulinėmis ir mikrovaskulinėmis komplikacijomis, tokiomis kaip nefropatija. Statistika parodė, kad 2001 m. diabetu sergančių pacientų buvo 20,6 proc., 1995 m. – 13,1 proc., o 1989 m. – 6,9 proc. Dializuotų pacientų mirtingumas diabetu sergančių pacientų yra nežymiai didesnis nei nesergančių diabetu (241,4/1000 ir 91000/91000). asm. metų) [30]. Vidutinis 2 tipo cukrinio diabeto, pradėjus dializę, išgyvenamumas yra maždaug 3 metai [31, 32]. Diabetinė nefropatija pasižymi kai kurių baltymų, tokių kaip kolagenas, kaupimasis glomerulų mezangiume ir tubulointersticinėje erdvėje, dėl kuriosinkstųfibrozė ir paninkstųnesėkmė [33–35]. Šiame tyrime parodėme, kad vidutinės trukmės geriamojo 200 mg/kg AqTh arba 50 mg/kg EaTh dozė apsaugo nuo kreatinino padidėjimo šlapime ir kanalėlių intersticinio inkstų kolageno, palyginti su negydytomis diabetu sergančiomis žiurkėmis, kaip parodytainkstashistopatologiniai rezultatai. Šie radiniai rodo, kad AqTh ir EaTh gali apsaugoti nuo inkstų fibrozės, nes slopina ekstraląstelinės matricos (ECM) baltymų kaupimąsi. Šie rezultatai yra panašūs į kitus etnofarmakologinius tyrimus, kurie parodė, kad česnakai ir sklerocaryabirrea pagerina inkstų fibrozės procesą sergant diabetine nefropatija [36, 37]. Apsauginis poveikis nuo inkstų ECM baltymų kaupimosi atsiranda dėl rapamicino (PKB/mTOR) signalizacijos kelio baltymų kinazės B / žinduolių taikinio slopinimo [38]. Naujausi tyrimai parodė, kad PKB aktyvinimas sukelia mTORC1 ir jo pasroviui esančio baltymo p70S6K aktyvavimą, kurie yra svarbūs ląstelių augimo, ląstelių proliferacijos ir baltymų sintezės reguliatoriai [39, 40].

Poveikiscistanchepagerintiinkstų funkcija

Vadinasi, cukrinio diabeto gydymas AqTh ir EaTh junginiais gali turėti teigiamą poveikį.inkstųfunkcija diabetu sergantiems pacientams

Įrodymai rodo, kad žiurkėms, sergančioms diabetu, buvo pastebėtas sudėtingas antioksidacinių fermentų aktyvumo pokytis [41]. Šis pakitimas sukelia audinių pažeidimus ir vaidina svarbų vaidmenį diabeto komplikacijų patogenezėje. Šiame tyrime kepenų histopatologiniai rezultatai rodo, kad negydomoms diabetinėms žiurkėms išsivysto kepenų steatozė, kuriai būdingi lipidų lašeliai. Kiti tyrimai parodė, kad STZ sukeltų diabetu sergančių žiurkių kepenys buvo nekrotizuotos [42]. STZ laikomas klasikiniu diabeto indukcijos modeliu, nes sukelia toksiškumą kasos ląstelėms ir ląstelių mirtį [43], dėl ko atsiranda hipoinsulinemija ir hiperglikemija. Insulinas vaidina svarbų metabolinį vaidmenį kaip lipolizės slopintuvas riebaliniame audinyje [44]. Taigi, hipoinsulinemija sergant cukriniu diabetu padidina laisvųjų riebalų rūgščių (FFA) išsiskyrimą kraujyje [45] ir rūgščių patekimą į kepenis. Intrahepatinis trigliceridų kaupimasis įvyksta, kai lipidų antplūdis į kepenis viršija kepenų pajėgumą eksportuoti trigliceridus į kraują [45], o tai sukelia kepenų steatozės vystymąsi kaip diabeto komplikaciją [46].

Šiame tyrime histopatologiniai duomenys rodo, kad vidutinės trukmės geriamojo 200 mg/kg AqTh arba 50 mg/kg EaTh dozės žymiai apsaugo kepenis su steatoze, nes sumažėja lipidų lašelių kaupimasis. Panašius rezultatus pranešė Eliza ir kt. [47]kur Costus speciosus sumažino kepenų sutrikimą. Be to, kiti tyrimai parodė, kad Camellia oleifera sėklos pagerina kepenų steatozę, nes reguliuoja FFA [48], o kurkuminas sumažina steatohepatitą ir lipidų nusėdimą, nes yra antioksidantas ir veikia priešuždegimiškai bei laisvųjų radikalų šalintojai [49]. Tačiau gydymas akarboze neturėjo šios kepenis saugančios savybės. Tai patvirtina šalutinį šio vaisto poveikį kepenims [50].

Be to, T. hirsuta yra sterolių, kumarinų, terpenų, taninų, alifatinio alkoholio, laktono, alkanų ir alkanolių [51]. Įdomu tai, kad AqTh ir EaTh antihiperglikeminis ir antidiabetinis poveikis gali atsirasti dėl šių fitocheminių medžiagų ar kitų nežinomų junginių.

5. Išvados

Apibendrinant, mūsų tyrimas parodė, kad vidutinės trukmės T. hirsuta AqTh ir EaTh vartojimas gali sumažinti STZ sukeltų diabetinių žiurkių gliukozės kiekį kraujyje. Antihiperglikeminį EaTh poveikį iš dalies galima paaiškinti žarnyno gliukozidazės aktyvumo slopinimu. O AqTh antihiperglikeminis aktyvumas gali būti siejamas su insulino sekrecijos stimuliavimu iš kasos salelių ląstelių. Be to, AqTh ir EaTh parodė svarbų prevencinį poveikįinkstųfibrozės ir kepenų steatozės komplikacijos. Taigi, šie atradimai rodo, kad AqTh ir EaTh gali būti laikomi veiksmingu geriamuoju antidiabetiniu gydymu. Šiuo metu mūsų tyrimai yra skirti aktyvių EaTh ir AqTh junginių, atsakingų už antidiabetinį T poveikį, išskyrimui ir identifikavimui. hirsuta.

Santrumpos

AqTh: plius ymelaea hirsuta vandeninis ekstraktas

DM1: 1 tipo cukrinis diabetas

DM2: 2 tipo cukrinis diabetas

EaTh: Plus ymelaea hirsuta etilacetato frakcija

ECM: Ekstraląstelinė matrica

ESRD: galutinis etapasinkstųliga

FFA: laisvosios riebalų rūgštys

mTOR: žinduolių rapamicino taikinys

PKB: baltymų kinazė B

STZ: Streptozotocinas

T. hirsuta: plius ymelaea hirsuta

UMPO: Herbarium University Mohamed Premier of

Oujda, Marokas

PSO: Pasaulio sveikatos organizacija.

Duomenų prieinamumas

Duomenys, naudojami šio tyrimo išvadoms pagrįsti, yra prieinami autorių prašymu.

Interesų konfliktai

Autoriai pareiškia, kad interesų konfliktų nėra.

Padėkos

Autoriai nori išreikšti savo dėkingumą Ramdaoui Karimui ir Badraoui Mustaphai už techninę pagalbą.

cistanche bienfaitsdėlinkstas

Iš: „Teigiamas Thymelaea hirsuta poveikis kasos salelių degeneracijai, inkstų fibrozei ir kepenų pažeidimams“ Sanae Abid

---The Scientific World Journal