Cistanche glikozidų poveikis D-galaktozės sukeltų senėjimo modelių pelių imuninei funkcijai

Kontaktai: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 El. paštas:audrey.hu@wecistanche.com

〔Abstraktus〕 Tikslas:

Ištirti Cistanche glikozidų anti-senėjimo poveikio D-galaktozės sukeltoms senėjimo pelėms imunologinį mechanizmą.Metodai: Limfocitų transformacijos gebėjimui nustatyti naudotas 3 H-TdR inkorporavimo metodas, pelių pilvaplėvės makrofagų fagocitinė funkcija – neutralios raudonos spalvos testu, limfocitų pogrupiams aptikti – imunofluorescencinis metodas, radioimuninis tyrimas – nustatyti. IL-2 kiekis periferiniame kraujyje. , Trace NAG fermento atpalaidavimo metodas NK ląstelių aktyvumui matuoti.Rezultatai: D-galaktozės sukeltų senstančių pelių imuninė funkcija buvo reikšmingai susilpnėjusi, o tai pasireiškė gebėjimu transformuotis limfocitais, periferinio kraujo IL-2 kiekiu, CD4 plius T ląstelių ir CD8 plius T ląstelių kiekiu, fagocitu. pilvaplėvės makrofagų funkcija ir NK ląstelių aktyvumas. Sumažėti (p<>glikozido cistanchegali pagerinti limfocitų transformacijos gebėjimą, periferinio kraujo IL-2 kiekį, pilvaplėvės makrofagų fagocitinę funkciją, NK ląstelių aktyvumą, CD4 plius T ir CD8 plius T ląstelių kiekį (P<0.05). 0.="" 05).="">Išvada: glikozido cistanka gali žymiai sustiprinti D-galaktozės sukeltų senstančių pelių imuninę funkciją, atkurti arba priartėti prie jaunų pelių būklės ir sulėtinti senėjimą.

[Raktiniai žodžiai]: Cistanche bendrieji glikozidai; D-galaktozė; senėjimo modelis; imunitetas

Glikozido cistanche:anti-senėjimo

Cistancheyra dažniausiai naudojamas vaistas nuo senėjimo ir ilgaamžiškumo formulėse. Cistanche bendrieji glikozidai (GCS) yra bendras terminas feniletanoidinių glikozidų klasei cistanche ir yra pagrindinis biologinis aktyvumas, išgaunamas iš druską gaminančios cistanchos šiauriniame Sindziango komponente [1]. Įrodyta, kad GCS turi antilipidų. peroksidacijos efektas [2], tačiau apie jį yra nedaug tyrimų ataskaitųanti-senėjimo imuninis mechanizmas.

1. Medžiagos ir metodai

1. 1 Gyvūnų grupavimas ir medicina

60 Kunmingo pelių, patinų ir patelių, 3 mėnesių amžiaus, sveriančių 18-21 g, pateikė Sveikatos apsaugos ministerijos Biologinių produktų instituto Gyvūnų kambarys. Kiekvienos grupės pelės buvo laikomos tame pačiame kambaryje atskiruose narvuose ir galėjo laisvai valgyti ir gerti. Gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į tris grupes: jaunimo kontrolinę grupę, senėjimo modelio grupę ir modelio administravimo grupę, kiekvienoje grupėje po 20 gyvūnų. GCS ištraukė ir identifikavo Jiamusi universiteto Farmacijos mokyklos Fitochemijos katedra pagal literatūrą [1].

Pagerinti imunitetąCistanche papildas

1.2 Metodas

Jaunų žmonių grupė 30 dienų kiekvieną dieną buvo švirkščiama įprasto fiziologinio tirpalo po oda į kaklą ir 15 dienų nuo 15 dienos šilto vandens. Senėjimo modelių grupės pelėms kiekvieną dieną buvo švirkščiama D-galaktozė (autoklavuota) 100 mg/kg po oda ant sprando. Kūno svoris 30 dienų iš eilės. Vartojimo modelio grupėje D-galaktozė 100 mg/kg kūno svorio buvo švirkščiama po oda ant sprando kiekvieną dieną, o GCS 125 mg·kg-1·d-1 laiko nuo 15 dienos, o vartojimas buvo nuolat vartojamas 15 dienų. Visi gyvūnai buvo numarinti tuo pačiu metu 30 dieną ir nustatyti įvairūs stebėjimo rodikliai.

1. 2. 1 Limfocitų transformacijos eksperimentas

Pelės blužnies ląstelių suspensija buvo sureguliuota iki 2 × 106 ląstelių koncentracijos, o Con A buvo naudojamas kaip stimulas, skirtas kultivuoti in vitro 5 dienas, o jos transformacijos gebėjimas buvo išbandytas 3 H-Td R įtraukimo metodu. Rezultatai išreiškiami stimulo indeksu SI (SI=ConA stimuliacijos grupė / kontrolinė grupė).

1. 2. 2 Pelės pilvaplėvės makrofagų fagocitinė funkcija (neutralios raudonos spalvos testas [3])

Surinkite pelės pilvaplėvės skystįmakrofagassuspensija aseptiškai. Po centrifugavimo plūduriuokite nuosėdas ląstelių auginimo terpėje. Naudokite hemocitometrą, kad suskaičiuotumėte ir nustatytumėte tirpalo ląstelių koncentraciją iki 2 × 106. Įdėkite jį į 37 laipsnių inkubatorių 2 valandoms. , Supernatantą ir neprilipusias ląsteles išmeskite. Paimkite sienelės makrofagus ir įpilkite 0,1 procento neutralaus raudono fiziologinio fiziologinio tirpalo iki 37 laipsnių ir toliau kultivuokite 30 min., išmeskite neutralų raudoną ir pakartotinai plaukite makrofagus 37 laipsnių PBS, praskieskite 50 procentų acto rūgšties ir 50 procentų etanolio, nustatykite 722. Spektrofotometras, kolorimetrinis esant 540 nm bangos ilgiui, išmatuota absorbcijos A vertė.

1. 2. 3 Limfocitų pogrupių nustatymas

Paimkite 0,1 ml 1 × 107/mllimfocitų suspensija, pridėkite atitinkamai 10 ul pelių anti-pelės CD3, CD4 ir CD8 monokloninių antikūnų, gerai išmaišykite, inkubuokite 4 laipsnių temperatūroje 30 min., 1 proc. FC S PBS (0,2 M, pH 7,4) Nuplaukite 3 kartus, srauto citometrijos aptikimas: lazerinis srauto citometras (FACScan, JAV BD kompanija), argono lazeris, sužadinimo bangos ilgis 488 nm, FITC aptikimo spektras 480-630 nm, ląstelių skaičius 800/s, 200,000 ląstelių iš viso. Rezultatai buvo analizuojami ir užfiksuoti kompiuteriu HP340 ir profesionalia programine įranga LYSI SⅡ.

1. 2. 4 IL-2 nustatymas periferiniame kraujyje radioimuniniu tyrimu

Paimkite 1 ml kraujo iš pelės akių obuolių į mėgintuvėlį. Po koaguliacijos serumas atskiriamas. Pagal komplekto veikimą MUT skaičius matuojamas skaitiklyje.

1. 2. 5 NK ląstelių aktyvumas

Aseptiškai paimkite pelės akies kraują ir įpilkite heparino antikoaguliacijai. Daugiau informacijos rasite literatūroje [4]. 1.3 Statistinis apdorojimas Eksperimentiniai duomenys išreiškiami x±s, apdorojami S AS programine įranga ir analizuojami dispersine analize, F testu ir t-testu.

cistanche nauda: gerina imunitetą

2. rezultatai

2.1 GCS poveikis limfocitų ir T ląstelių pogrupių transformacijos gebėjimui kiekvienoje pelių grupėje parodytas 1 lentelėje.

1 lentelė. GCS poveikis limfocitų ir T ląstelių pogrupių transformacijos gebėjimui kiekvienoje pelių grupėje (n= 16,x±s)

Palyginti su Ⅰ: 1) P<0.05, 2)="" p.="" 05;="" compared="" with="" ⅱ:="" 2)="" p=""><0.05; the="" same="" as="" the="" table="">

2.2 GC poveikis kiekvienos pelių grupės pilvaplėvės makrofagų fagocitinei funkcijai, IL-2 kiekiui ir NK ląstelių aktyvumui parodytas 2 lentelėje.

2 lentelė. GCS poveikis fagocitų funkcijai, NK ląstelių aktyvumui ir IL-2 kiekiui pilvaplėvės makrofaguose kiekvienoje pelių grupėje (n= 16,x±s)

3. Diskusija

Šio eksperimento metu sumažėjo senstančio modelio pelių pilvaplėvės makrofagų fagocitinė funkcija ir NK ląstelių aktyvumas (P<0.05). gcs="" can="" increase="" the="" phagocytic="" function="" and="" nk="" cell="" activity="" of="" peritoneal="" macrophages="" in="" aging="" model="" mice=""><0.05), which="" is="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" from="" this,="" it="" can="" be="" inferred="" that="" gcs="" can="">pagerinti organizmo nespecifinį ląstelinį imunitetą ir imuninės reguliavimo funkcijas, irsustiprinti priešnavikinį ir antiinfekcinį poveikįsenstantis organizmas yra vienas iš senėjimo atidėjimo būdų [4]. IL-2 yra nepakeičiamas citokinas T limfocitų proliferacijai ir diferenciacijai, galintis reguliuoti limfocitų, monocitų-makrofagų ir NK ląstelių funkcijas. IL-2 gali skatinti T limfocitų proliferaciją ir diferenciaciją, reguliuotiImuninis atsakas, skatina Tc aktyvumą ir skatina antikūnų bei interferono gamybą.Jis vaidina svarbų vaidmenį imuninėje sistemoje. Šio eksperimento metu senstančių modelių pelių IL{0}} kiekis sumažėjo (P<0.05). after="" gcs="" were="" given,="" the="" il-2="" content="" increased=""><0.05), which="" was="" close="" to="" the="" youth="" model="" group,="" indicating="" that="" gcs="" produced="" il="" by="" increasing="" t="" lymphocytes.="" -2,="" enhance="" the="" immune="" function="" of="" elderly="" mice="" and="" achieve="" the="" effect="" of="" delaying="" immune="" aging.="" the="" content="" of="" cd4+="" t="" cells="" and="" cd8+="" t="" cells="" decreased="" significantly="" with="" increasing="" age.="" the="" low="" t="" cell="" function="" was="" also="" manifested="" by="" the="" decline="" of="" specific="" antigen="" and="" mitogen="" con="" a,="" and="" the="" decline="" of="" the="" ability="" of="" t="" cells="" to="" divide="" repeatedly.="" in="" this="" experimental="" model,="" the="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4+="" t="" cell="" and="" cd8+="" t="" cell="" content="" of="" the="" mouse="" was="" reduced="" (p=""><0.05), and="" gcs="" increased="" the="" mouse="" lymphocyte="" transformation="" ability,="" cd4="" +="" t="" cell="" and="" cd8="" +="" t="" cell="" content="" (p=""><0.05). 05),="" close="" to="" the="" youth="" model="" group.="" it="" shows="" that="" gcs="" can="" make="" the="" body="" resist="" aging="" and="" tend="" to="" be="" younger="" by="" promoting="" the="" proliferation="" of="" lymphocytes="" and="">pagerinti specifinę pelių imuninę funkciją.

Imuniteto gerinimo cistanche papildas

4. Literatūra

1. Du Niansheng, Wang Hong. Fenoksietanolio glikozidų išskyrimas ir identifikavimas iš Cistanche [J]. Gamtinių produktų tyrimai ir plėtra, 1993; 5(4): 7-8.

2. Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei ir kt. Bendrų Cistanche 〔J〕 glikozidų antilipidų peroksidacijos ir anti-radiacijos poveikis. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997; 22(6): 364-367.

3. Xu Shuyunas, Bianas Rulianas. Eksperimentinė farmakologijos metodika [M]. 2-asis leidimas. Pekinas: Liaudies sveikatos leidykla, 1994: 1221.

4. Liu Xiongbo, Liu Caiyu, Yang Xiuyun ir kt. NK ląstelių aktyvumo nustatymas mikro-NAG atpalaidavimo metodu [J]. Klinikinių laboratorijų mokslo žurnalas, 1996; 14(2): 66-67.