Antioksidacinio aktyvumo pokyčiai fermento fermentacijos metu

4 skyrius antioksidacinio aktyvumo pokyčiai fermento fermentacijos metu

Vaisiuose gausu maistinių medžiagų ir būna įvairių veislių. Medžiagų gamyba fermentacijos metu yra sudėtinga ir įvairių, ir yra daugybė tyrimų apie jų tyrimusAntioksidacinis aktyvumas. Žmonės visada tyrinėja ir atranda, ieško maisto, kuris yra naudingasŽmogaus sveikata, Taigi fermentai pastaraisiais metais tapo karšta tema. Tradicinis fermentų gamybos procesas yra gauti fermentus natūraliai fermentuojant vaisius ir daržoves. Remiantis ankstesniais tyrimais, šis straipsnis prideda 4 naudingas fermentacijos bakterijas. Pačios bakterijos taip pat egzistuoja fermente. Po papildomo bakterijų pridėjimo keičiamas mikroorganizmų skaičius ir tipas fermentacijos procese. Kokį poveikį šis pokytis bus susijęs su jo antioksidaciniu aktyvumu? Ankstesniame skyriuje mes pasirinkome obuolius kaip išsamaus paaiškinimo pavyzdį. Palyginus eksperimentinės grupės ir kontrolinės grupės antioksidacinį aktyvumą skirtingose ​​fermentų koncentracijose, parodė, kad eksperimentinės grupės fermento antioksidacinis aktyvumas buvo didesnis nei kontrolinės grupės. Antioksidacinio aktyvumo intensyvumas tam tikru būdu atspindi fermento patikimumą.

Naujos žolelės cistanche su stipria antioksidantine galia

 

Palaikomoji „Wecistanche“ paslauga-didžiausia cisranche eksportuotoja Kinijoje:
El. Paštas: wallence.suen@wecistanche.com
WhatsApp/Tel: +86 15292862950

 

Šis skyrius prideda įprastas vaisių kriaušes ir citrusinius vaisius į originalų eksperimentą, seka ir nustato jų pokyčius jųAntioksidacinis aktyvumasFermentacijos metu. Remdamiesi išlaidų sumažinimu, atliekant eksperimentus, tikimės išsamiau atspindėti fermentų biologinį aktyvumą pridėjus bakterijas, ir pateiks tam tikrą teorinį pagrindą ir duomenų palaikymą mikrobų fermentų B gamybai gamybai B gamybai B gaminti B mikrobų fermentų B gamybą By dirbtinis padermių pasėjimas.

 

 

 

4.1 Medžiagos ir metodai

4.1.1 Medžiagos

(1) Eksperimentinės medžiagos

Nuplaukite šviežius obuolius, kriaušes ir citrusinius vaisius su steriliu vandeniu steriliomis sąlygomis, natūraliai nusausinkite ant sterilios operacinio stalo, nulupkite juos ir supjaustykite vėliau. Į sterilizuotą stiklinį indelį įpilkite baltojo cukraus ir vaisių, kai masės santykis yra 1: 1. Suaktyvinkite eksperimentą reikalingas bakterijas ir pasodinkite jas į fermentą pagal optimalią schemą (šis operacijos žingsnis praleidžiamas kontrolinei grupei), uždarykite ją ir padėkite vėsioje ir sausoje vietoje. Paimkite mėginius skirtingu fermentacijos laikotarpiu kambario temperatūroje, kad gautumėte visą fermento skystį, kuriame yra vaisių minkštimo, ir filtruokite. Paimkite supernatantą kaip eksperimentinį mėginį ir naudokite jį atitinkamiems duomenims išmatuoti po to, kai centrifuguojant 10, 000 rpm greitaeigiu centrifuge 15 minučių. Verta paminėti, kad gaminant fermentus, siekiant išvengti nereikalingo užteršimo, visos mūsų operacijos vykdomos steriliomis sąlygomis.

(2) Pagrindiniai instrumentai

Eksperimentui reikalingi instrumentai yra tokie patys kaip 3.1.1 (2).

 

4.1.2 metodai

(1) Bendro fenolio kiekio pokyčiai fermentacijos metu

Distiliuotu vandeniu buvo įpilta 450 μl mėginio tirpalo, kad būtų gautas 46 ml tūris, o tada pridėta 1 ml Folin-fenolio reagento. Gerai išmaišykite ir reaguokite į 3min. Tada buvo pridėta 3ML 20% NACO3. Mišinys buvo sukrėstas į nuolatinę temperatūros vandens vonią 25 laipsnių 2 val. Distiliuotas vanduo buvo naudojamas kaip tuščias valdymas. Absorbcija A buvo matuojama 760 nm spektrofotometru. Kiekvienam gydymui buvo atlikti trys pakartojimai. Bendras fenolio kiekis buvo apskaičiuotas pagal standartinę kreivės lygtį.

(2) Redukuojančios galios pokyčiai fermentacijos metu

Įpilkite 45 0 μl mėginio iki 2,5 ml fosfato buferio, kurio koncentracija 0. (W/V), kai masės koncentracija yra 10%, centrifuga esant 3000 aps/min 10 minučių, išimkite ir nedelsdami nupieškite 2,5 ml supernatanto į tūrinę kolbą, įpilkite 2,5 ml distiliuoto vandens ir 0,5 ml geležies chlorido (m/v), o masės koncentracija yra 0,1%. Naudokite distiliuotą vandenį kaip tuščią valdymą ir išmatuokite absorbciją A, kurio bangos ilgis yra 700 nm, naudojant spektrofotometrą. Kiekvienam gydymui atlikite 3 pakartojimus. Sumažintos galios stiprumas nustatomas atsižvelgiant į absorbcijos vertę.

 

(3) Superoksido anijonų radikalių šalinimo galimybių pokyčiai fermentacijos metu
Padėkite 4,5 ml 0. {{1 0}}} 5 mol/l pH 8,2 Tris-HCl buferis pastovioje temperatūros vandens vonioje ir sureguliuokite temperatūrą iki 25 laipsnių. Po 20 minučių įpilkite 1 ml fermento mėginio tirpalo ir 0,4 ml pirogallolio tirpalo, kurio molinė koncentracija yra 25 mmol/L. Gerai išmaišykite ir 5 minutes įdėkite į 25 laipsnių vandens vonią. Įpilkite 1,0 ml 8 mol/L HCl, kad nutrauktumėte reakciją. Naudokite TRIS-HCL buferį kaip etaloną ir naudokite spektrofotometrą, kad būtų galima išmatuoti absorbciją A esant 299 nm esant 299 nm, kad apskaičiuotumėte šalinimo greitį. Tuščioje kontrolinėje grupėje vietoj mėginio naudojama 1 ml tirpiklio. Superoksido anijonų radikalų kaupimo greitis apskaičiuojamas pagal 4.1 formulę: Superoksido anijonų radikalų skonio greitis (%)=(A 1-} A2)/A1 × 100 (4.1) Kur: A1 yra tuščia kontrolinės grupės absorbcija; A2 yra eksperimentinės grupės fermento mėginio tirpalo absorbcija.

 

(4) Hidroksilo radikalios gebėjimo pokyčiai fermentacijos metu

 

Įpilkite vandens į 45 0 μl mėginio tirpalo į 2ml, tada įpilkite jį į 1,4 ml vandenilio peroksido, kurio molinės masės koncentracija yra 6 mmol/L 1h. Nulis su distiliuotu vandeniu ir išmatuokite absorbciją A, esant 562 nm bangos ilgiui spektrofotometru. Kiekvienam gydymui buvo atlikti trys pakartojimai. Hidroksilo radikalų kaupimosi greitis buvo apskaičiuotas pagal 4.2 formulę: hidroksilo radikalų kaupimo greitis (%)=[(a {1- a2)/a1] × 100 (4.2) Kur: a1 yra vidutinis ruošinio absorbcija; A2 yra vidutinė mėginio tirpalo absorbcija.

 

(5) DPPH laisvųjų radikalų gebėjimo pokyčiai fermentacijos metu
Tiksliai perkelkite 2 ml fermento mėginio tirpalo į 1 0 ml tūrio kolbą, tada įpilkite 2 ml 80% dpph etanolio vandeninio tirpalo į tūrio kolbą, o molinės masės koncentracija yra 2 × 10-4 mol/l. Gerai išmaišykite ir leiskite stovėti kambario temperatūroje 30 min. Paimkite 80% etanolio tirpalą kaip etaloninį ir išmatuokite mėginio absorbciją esant 517 nm bangos ilgiui, kuris užregistruotas kaip A1. Sumaišykite 2 ml DPPH tirpalo ir 2 ml 80% etanolio tirpalo ir išmatuokite jų absorbciją tuo pačiu bangos ilgiu, kuris registruojamas kaip A0. Sumaišykite 2 ml fermento tirpalo ir 2 ml 80% etanolio tirpalo ir išmatuokite jų absorbciją tuo pačiu bangos ilgiu, kuris registruojamas kaip A2. Kiekvienam gydymui buvo atlikti trys pakartojimai. Apskaičiuokite DPPH laisvųjų radikalų šalinimo greitį pagal 4.3 formulę:
DPPH laisvųjų radikalų kaupimo greitis (%) {{0}}} [{1- (a 1-} a2)/a 0] × 100 (4,3) Kur: a1 yra vidutinis 2 ml dpph 80% etanolio oro tirpalo ir 2 ml tirpalo. A2 yra 2 ml fermento tirpalo absorbcija ir 2 ml 80% etanolio mišraus tirpalo; A0 yra 2 ml dpph tirpalo absorbcija ir 2 ml 80% etanolio mišraus tirpalo.

(6) ABTS pokyčiai Laisvųjų radikalų gebėjimas fermentacijos metu
8 μL mėginio tirpalas buvo papildytas 10 μl fosfato buferiu (5 mmol/l pH 7,4), o po to tolygiai sumaišytas su 10 ml kalio sulfato ir ABT mišriu tirpalu, kad būtų galima reaguoti į 30 laipsnių reakcijos temperatūrą, o reakcijos laikas - 5 min. Nulio tirpalas distiliuotu vandeniu ir išmatuokite absorbciją A, esant 734 nm bangos ilgiui, naudojant spektrofotometrą. Kiekvienam gydymui buvo atlikti trys pakartojimai. ABTS laisvųjų radikalų šalinimo greitis buvo apskaičiuotas pagal 4.4 formulę:
ABTS laisvųjų radikalų šalinimo greitis (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4.4) Kur: A1 yra tuščios valdymo grupės absorbcija; A2 yra eksperimentinės grupės mėginio absorbcija.