Krešėjimas, proteazės aktyvuoti receptoriai ir diabetinė inkstų liga: ENOS trūkumo pelių pamokos

Didelio riebumo dieta ir eNOS trūkumas sinergiškai padidina TF diabetu sergantiems pelėms

Daugelis tyrimų parodė ryšį tarp nutukimo ir trombozės (Samad ir Ruf 2013). Dėl egzaminople, TLR{0}}NF-kB kelio reguliavimas pagalmedžiagų apykaitos ligasąlygos padidina TF lygį (Lv ir kt. 2009; Owens ir kt. 2012; Rogero ir Calder 2018). Be to, sočiųjų riebalų rūgščių palmitatas skatina histono H3 išsiskyrimą per nuo ROS ir JNK kelio priklausomus mechanizmus bei tarpląstelinius histonus, kurie padidina TF ekspresiją monocituose (Shrestha ir kt., 2013). Dėmesys ryšiui tarp krešėjimo, eNOS irdislipidemija, mūsų ankstesnis tyrimas parodė bendrą eNOS trūkumo ir riebios dietos poveikį TF ekspresijai (Li ir kt., 2010). Tyrimo metu eNOS nulinės pelės buvo gydomos mažomis STZ dozėmis, kad išsivystytų DM, ir buvo šeriamos riebia dieta. eNOS ekspresijos trūkumas padidino albumino išsiskyrimą su šlapimu irhistologiniai sužalojimai, kurias dar labiau sustiprino riebi dieta. TF ekspresija ir aktyvumas padidėjo pelių inkstuose dėl eNOS ekspresijos trūkumo ir riebios dietos.sinergetiniu būdu. Įdomu tai, kad kolokalizacijos eksperimentai su glomerulų monocitų / makrofagų žymekliu parodė imunoreaktyvaus TF lygio padidėjimą.

Neutralizuojantys antikūnai prieš TF pagerina diabetinių inkstų uždegimą eNOS-Knockout pelėse

Nuo TF priklausomos krešėjimo padidėjimas yra susijęs su padidėjusiu uždegimu (Witkowski ir kt., 2016). Pagerėjo nuo TF priklausomos krešėjimo sistemos slopinimasuždegiminės ligos, pavyzdžiui, LPS sukeltas sepsis (Pawlinski ir kt., 2010). Norėdami išsiaiškinti priežastinį ryšį tarp uždegimo ir TF sergant DKD, ištyrėme trumpalaikį neutralizuojančių antikūnų prieš TF poveikį uždegimuidiabetiniai inkstaipelėms, kurioms trūksta eNOS (Li ir kt., 2010). Rezultatai parodė, kad anti-TF antikūnų skyrimas žymiai sumažino su uždegimu ir fibroze susijusių genų, tokių kaip Tnfa, Ccl2, Tgfb ir Col4 mRNR, inkstų ekspresijos lygius pelių inkstuose praėjus keturioms dienoms po TF neutralizavimo.

SPUSTELĖKITE ČIA, KAD GAUTI NATŪRALIŲ EKOLOGIŠKŲ CISTANČIŲ EKSTRAKTĄ, SU 25% ECHINAKOZIDU IR 9% AKTEOZIDU, TURINČIŲ INKSTU FUNKCIJĄ

„Wecistanche“ – didžiausio cistansų eksportuotojo Kinijoje – pagalbinė tarnyba:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

WhatsApp / Tel.:+86 15292862950

Įsigykite daugiau specifikacijų:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-parduotuvė

Koaguliacijos FXa inhibitorius pagerina inkstų pažeidimą diabetu sergančioms pelėms, kurioms trūksta eNOS

Koaguliacija FXa, esanti pasroviui nuo TF / VIIa, taip pat prisideda prie uždegimo per nuo PAR priklausomą kelią. Jo vaidmuo DKD buvo įrodytas keliuose gyvūnų modeliuose. Sumi ir kt. (2011) parodė, kad fondaparinuksas, FXa inhibitorius, sumažino baltymų kiekį šlapime, glomerulų hipertrofiją ir fibrino nusėdimą db/db pelėms. FXa slopinimo terapinį poveikį DKD pelėms, kurioms trūksta eNOS, įrodė mūsų grupė (Oe ir kt., 2016). eNOS-/- buvo skiriamas edoksabanas (50 mg/kg/per parą), geriamasis FXa inhibitorius; Ins2Akita/+ pelėms tris mėnesius, o rezultatai parodė, kad pagerėjo histologiniai sužalojimai, tokie kaip mezangialinės matricos proliferacija. Edoksabanas sumažino uždegiminių genų ekspresijos lygius inkstuose (1 lentelė). FXa suaktyvina ir PAR1, ir PAR2. Norėdami išsiaiškinti FXa sukelto inkstų pažeidimo mechanizmą, parodėme, kad FXa inhibitorių priešuždegiminis poveikis yra panašus į tą, kuris nustatytas PAR2-/- pelėms ir PAR2-/- pelėms su FXa inhibitoriais. . Šie radiniai rodo, kad FXa greičiausiai sukėlė uždegimą dėl PAR2-priklausomo DKD mechanizmo. Priešingai, redokso draudimas nepagerino glomerulų pažeidimo esant eNOS+/+; Ins2Akita / + pelės, o tai rodo, kad terapinis FXa slopinimo poveikis buvo susijęs su nuo eNOS priklausomu hiperkoaguliacija I tipodiabetinės pelės.

Kiti DKD krešėjimo veiksniai

Kadangi trombinas nukreiptas į PAR1, kuris progresuojakraujagyslių uždegimas(Chen ir Dorling 2009),trombinas greičiausiai pablogina DKD. Tačiau buvo įrodytas apsauginis arba žalingas trombino vaidmuo DKD patogenezėje; mažos dozės trombinas (50 pM) užkirto kelią, o didelės dozės trombinas (20 nM) pablogino,gliukozės sukelta apoptozėpodocituose (Wang ir kt. 2011b). Ateityje turėtų būti išaiškintas trombino inhibitorių, tokių kaip dabigatranas, poveikis diabetu sergančioms pelėms, kurioms trūksta eNOS.

Fibrinogenas dalyvauja įvairioseuždegiminės būklės. Įdomu tai, kad dalinis fibrinogeno sumažėjimas arba jo nebuvimas buvo naudingas inkstų išemijos-reperfuzijos modeliams arba obstrukcinei inkstų fibrozei (Sörensen ir kt., 2011; Craciun ir kt., 2014). Kadangi glomerulų fibrino nusėdimas padidėja diabetu sergančioms pelėms, kurioms trūksta eNOS (Nakagawa ir kt., 2007; Li ir kt., 2010; Wang ir kt., 2011a), paaiškinant jo vaidmenįDKD patogenezėnusipelno tolesnio tyrimo.

PAR1 ir PAR2 ekspresija diabetinėse pelėse, kurioms trūksta eNOS

Padidėjusi PAR ekspresija yra susijusi su inkstų pažeidimu. Mes ir kiti įrodėme, kad Par1 ir (arba) Par2 mRNR ekspresijos lygis padidėjo gyvūnų modeliuose su diabetine nefropatija, adenino sukelta inkstų pažeidimu, obstrukcine inkstų fibroze ir cisplatinos sukeltu inkstų pažeidimu (Chung ir kt., 2013; Hayashi ir kt. 2016 m., Oe ir kt., 2016 m., Watanabe ir kt., 2019 m.). Be to, glomerulų PAR2 baltymų kiekis buvo padidėjęs db/db pelėms, kurioms būdingas II tipo DM modelis (Sumi ir kt., 2011). Įrodėme ryšį tarp PAR ekspresijos ir eNOS trūkumo diabetu sergančiose pelėse (Oe ir kt., 2016). Par1 mRNR ekspresijos lygis buvo žymiai didesnis eNOS−/−; Ins2Akita/+ pelėms nei eNOS−/−; Ins2Akita/+ ir ne DM pelėms. Panašiai, Par2 ekspresija buvo žymiai didesnė eNOS−/−; Ins2Akita/+ pelėms nei ne DM pelėms. Priešingai, Par4 mRNR lygiai tarp genotipų nesiskyrė. eNOS trūkumas sustiprina DKD uždegimą (Wang ir kt., 2011a). Kadangi teigiama, kad priešuždegiminiai citokinai padidina PAR (Nystedt ir kt., 1996), padidėjęs uždegimas, kurį sukelia eNOS trūkumas, greičiausiai sukelia inkstų Pars ekspresiją sergant DKD. Apibendrinant, mūsų tyrimų rezultatai rodo, kad PAR1 ir PAR2 ekspresijos lygis, panašiai kaip TF atveju, buvo padidėjęs diabetu sergančių inkstų atveju, kai trūko eNOS (2 pav.).

PAR2 ištrynimas pagerino diabeto inkstus

Pelių sužalojimas su sumažėjusiu eNOS

Ankstesniuose tyrimuose mes ir kiti nagrinėjome PAR2 vaidmenį DKD. Par2 delecija neturėjo įtakos glomerulų pažeidimui diabetu sergančių laukinio tipo Akita pelių (Ins2Akita/+) su eNOS (Oe ir kt., 2016). Be to, STZ sukeltos diabetinės pelės, neturinčios PAR2, sumažino albuminurija, palyginti su diabetu sergančiomis laukinio tipo pelėmis, bet padidino vidutinį tikslo išsiplėtimą (Waasdorp ir kt., 2017). Visi šie rezultatai rodo, kad ankstyvuose ir lengvuose DKD modeliuose PAR2 slopinimo terapinis poveikis inkstų pažeidimui nėra arba yra nedidelis. Priešingai, mes įrodėme PAR2 trūkumo poveikį DKD diabetu sergančių Akita pelių su sumažėjusia eNOS ekspresija (eNOS+/-; Ins2Akita/+) (Oe ir kt., 2016). PAR2 trūkumas žymiai sumažino albumino išsiskyrimą su šlapimu, mezangialinį išsiplėtimą ir GBM storį. Pelių inkstuose taip pat sumažėjo priešuždegiminių ir su fibroze susijusių genų, įskaitant Tnfa, Tgfb ir Col4, ekspresijos lygiai. Šie radiniai rodo, kad PAR2 yra patogeniškas ne ankstyvoje, o santykinai pažengusioje diabetinėje glomerulų traumoje, kurią sukelia eNOS trūkumas (1 lentelė).

Dviguba PAR1 ir PAR2 blokada diabetu sergančioms pelėms su sumažintu eNOS kiekiu

Įrodėme, kad PAR1 ir PAR2 kartu prisideda prie DKD patogenezės (Mitsui ir kt., 2020). Šiame tyrime kaip DKD modelis buvo naudojami I tipo cukriniu diabetu sergančių Akita pelių patinai, heterozigotiniai eNOS atžvilgiu (Ins2Akita/+; eNOS+/-). Šios pelės buvo gydomos nešikliu, PAR1 antagonistu (E5555, 60 mg/kg per dieną), PAR2 antagonistu (FSLLRY, 3 mg/kg per dieną) arba E5555 + FSLLRY 4 savaites. Vien PAR1 arba PAR2 antagonisto skyrimas susilpnino glomerulų pažeidimus, pvz., mezangialo išsiplėtimą ir IV kolageno nusėdimą, palyginti su nešiklio skyrimu. Buvo pastebėtas sinergetinis terapinis PAR1 ir PAR2 slopinimo poveikis, o albumino ir kreatinino santykis šlapime žymiai sumažėjo, kai ir PAR1, ir PAR2 buvo blokuoti E5555 + FSLLRY, palyginti su nešiklio vartojimu. Be to, dviguba PAR1 ir PAR2 blokada E5555 + FSLLRY sinergiškai pagerino histologinius pažeidimus, įskaitant mezangialų išsiplėtimą, glomerulų makrofagų infiltraciją ir IV tipo kolageno nusėdimą. Taip pat sumažėjo su uždegimu ir fibroze susijusių genų ekspresijos lygis inkstuose (1 lentelė).

Mes sutelkėme dėmesį į uždegimą skatinantį PAR1 ir PAR2 agonistų poveikį žmogaus endotelio ląstelėms (Mitsui ir kt., 2020). Rezultatai parodė, kad stimuliavimas tiek PAR1, tiek PAR2 agonistais sinergiškai padidino MCP1 ir PAI1 mRNR ekspresijos lygius. PAR1 agonisto poveikį blokavo NF-κB inhibitorius, o PAR2 agonisto poveikį blokavo NF-kB ir MAPK inhibitoriai. PAR1 ir PAR2 bendrai prisideda prie kraujagyslių uždegimo ir DKD per skirtingus signalizacijos kelius (3 pav.).

Išvada

Šioje apžvalgoje mes sutelkėme dėmesį į ryšį tarp krešėjimo proteazės-PAR kelio ir eNOS trūkumo diabetu sergančiose pelėse. Maža eNOS gamyba yra susijusi su hiperkoaguliacija ir padidėjusiu PAR signalizavimu, kurie kenkia DKD. Šie radiniai gali rodyti jų patologinį vaidmenį pažengusioje ar vėlesnėje DKD fazėje (pvz., sergant inkstų nepakankamumu ir (arba) masine proteinurija). Geriamieji FXa inhibitoriai plačiai naudojami trombozės profilaktikai (Patel ir kt., 2011; Robertson ir kt., 2015). Jų naudojimas gydant DKD yra perspektyvus pasirinkimas. Be to, kai kurie PAR1 antagonistai, įskaitant atopaksarą ir vorapaksarą, gali būti naudojami antitrombocitų terapijoje, siekiant išvengti ūminio koronarinio sindromo (Goto ir kt., 2010; Tricoci ir kt., 2012). Be to, pastebima pažanga kuriant PAR2 antagonistus (Lim ir kt., 2013; Cheng ir kt., 2017; Jiang ir kt., 2018), ir jie gali būti naujos terapinės galimybės gydant DKD sergančius pacientus.

Padėkos

Šį tyrimą palaikė Gonryo medicinos fondas. Norėtume padėkoti Editage (https://www. editage.com) už redagavimą anglų kalba.

Interesų konfliktas Autoriai pareiškia, kad nėra interesų konflikto.

Nuorodos

Afkarian, M., Sachs, MC, Kestenbaum, B., Hirsch, IB, Tuttle, KR, Himmelfarb, J. & de Boer, IH (2013) Inkstų liga ir padidėjusi mirtingumo rizika sergant 2 tipo cukriniu diabetu.J. Am. Soc. Nefrolis., 24, 302-308. 

Azushima, K., Gurley, SB & Coffman, TM (2018) Diabetinės nefropatijos modeliavimas pelėms.Nat. Kunigas Nefrolis., 14, 48-56. Brosius, FC, Alpers, CE, Bottinger, EP, Breyer, MD, Coffman, TM, Gurley, SB, Harris, RC, Kakoki,

M., Kretzler, M., Leiter, EH, Levi, M., McIndoe, RA, Sharma, K., Smithies, O., Susztak, K. ir kt. (2009) Pelių diabetinės nefropatijos modeliai.J. Am. Soc. Nefrolis., 20, 2503-2512. Camerer, E., Huang, W. & Coughlin, SR (2000) Nuo audinių faktoriaus ir faktoriaus X priklausomas proteazės aktyvuoto receptoriaus 2 aktyvinimas VIIa faktoriumi.Proc. Natl. Akad. Sci. JAV, 97, 5255-5260. 

Chen, D. ir Dorling, A. (2009) Kritiniai trombino vaidmenys esant ūminiam ir lėtiniam uždegimui.J. Thromb. Haemost., 7 1 priedas, 122-126. Cheng, H., Wang, H., Fan, X., Paueksakon, P. & Harris, RC (2012) Endotelio azoto oksido sintazės aktyvumo gerinimas lėtina diabetinės nefropatijos progresavimą db/db pelėms.Inkstai Int., 82, 1176-1183. Cheng, RKY, Fiez-Vandal, C., Schlenker, O., Edman, K., Aggeler, B., Brown, DG, Brown, GA, Cooke, RM, Dumelin, CE, Doré, AS, Geschwindner, S. , Grebner, C., Hermansson, NO, Jazayeri, A., Johansson, P. ir kt. (2017) Struktūrinė įžvalga apie proteazės aktyvuoto receptoriaus 2 allosterinį moduliavimą.

Gamta, 545, 112-115. Chung, H., Ramachandran, R., Hollenberg, MD ir Muruve, DA (2013) Proteinazės aktyvuotas receptorius-2 epidermio augimo faktoriaus receptorių transaktyvavimas ir transformuojantis augimo faktorius. receptorių signalizacijos keliai prisideda prie inkstų fibrozės.J. Biol. Chem., 288, 37319-37331. Coughlin, SR (2005) Proteazės aktyvuoti receptoriai hemostazės, trombozės ir kraujagyslių biologijos srityse.J. Thromb. Haemost., 3, 1800-1814. Craciun, FL, Ajay, AK, Hoffmann, D., Saikumar, J., Fabian, SL,

Bijol, V., Humphreys, BD & Vaidya, VS (2014) Farmakologinis ir genetinis fibrinogeno išeikvojimas apsaugo nuo inkstų fibrozės.Esu. J. Physiol. Inkstų fiziol., 307, 

F471- 484. Cunningham, MA, Rondeau, E., Chen, X., Coughlin, SR, Hold sworth, SR & Tipping, PG (2000) Proteazės aktyvuotas receptorius 1 tarpininkauja nuo trombino priklausomam ląstelių sukeliamam inkstų uždegimui sergant pusmėnulio glomerulonefritu.J. Exp. Med., 191, 455-462.