Cistanche Deserticola polisacharidų komponentų analizė ir antioksidacinis aktyvumas

Anotacija: šiame darbe polisacharidai išgaunami išCistanche deserticola, Cistanche deserticolaneapdorotaspolisacharidasCLP išgryninamas DEAE celiuliozės kolonėlės chromatografija ir gaunamas neutralus cukrus CLP ir rūgštinis Cistanche deserticola cukrus CLP2. Bendro cukraus, urono rūgšties ir baltymų kiekisCistanche deserticola neapdorotas polisacharidasCLP, Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLPl irCistanche deserticola rūgštus cukrusCLP2 nustatomas UV spektriniu skenavimu, taip pat nustatoma polisacharidų molekulinė masė ir monosacharidų sudėtis. Tuo pačiu metu analizuojamas Cistanche deserticola žalio polisacharido CLP, Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLP1 ir Cistanche deserticola rūgštinio cukraus Cl.P2 DPPH radikalų šalinimo pajėgumas ir bendras antioksidacinis pajėgumas. Išmatuoti duomenys rodo, kad Cistanche deserticola žaliavinio polisacharido CLP, Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLP1 ir Cistanche deserticola rūgštinio cukraus CLP2 komponentai yra panašūs, tačiau jų kiekis labai skiriasi, Keli eliuavimo smailės gali būti gaunamos, kai Cistanche deserticola neutralus cukrus CLP1 ir Cistanche deserticola rūgštus cukrus CLP2 yra atskirtas ir išgrynintas DEAE celiuliozės chromatografine kolonėle, o molekulinės masės pasiskirstymas yra 0~10 000 Da, o tai rodo, kad pagrindiniai Cistanche deserticola polisacharidų komponentai yra mažos molekulinės masės cukrus. Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLPl monosacharidų nustatymo rezultatai rodo, kad Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLP1 monosacharidai daugiausia yra manozė, galakturono rūgštis, gliukozė, galaktozė ir arabinozė. Cistanche deserticola rūgštinio cukraus CLP2 monosacharidų nustatymo rezultatai rodo, kad Cistanche deserticola rūgštiniame cukruje CLP2 yra monosacharidų. rūgštinis cukrus ClP2 daugiausia yra ramnozė, galakturono rūgštis, gliukozė ir galaktozė. DPPH radikalų šalinimo eksperimento ir Cistanche deserticola polisacharidų bendro antioksidacinio pajėgumo eksperimento rezultatai rodo, kad Cistanche deserticola neutralaus cukraus CLPl antioksidacinis pajėgumas yra didesnis nei Cistanche deserticola polisacharidas. CLP ir Cistanche deserticola rūgštus cukrus CLP2.

Raktiniai žodžiai:Cistanche deserticola; polisacharidai; komponentų analizė;antioksidacinis aktyvumas; absorbcija.

Gaukite Cistanche Tubulosa ekstrakto, kad pasiektumėte tikslinį poveikį

Cistancheyra žolinis parazitinis augalas, kuriame yra daugfenolio glikozidass, biosintezė,feniletanoidiniai glikozidai, cukrus ir alkoholis. Glikanai daugiausia yra polisacharidų pavidalu. Cistanche polisacharidas turi stiprią imuninę veiklą reguliuojančią funkciją [1-2].

Kaip tarpiniai metabolitai žmogaus gyvenime, laisvieji radikalai yra nestabilios stabilios būsenos ir turi didelį oksidacinio aktyvumo intensyvumą, todėl gali susidaryti biologinės makromolekulės, todėl natūralaus antioksidanto naudojimas Todėl natūralių antioksidacinių medžiagų naudojimas laisviesiems radikalams pašalinti yra tapti pagrindine dabartinių maisto tyrimų kryptimi. Polisacharidų sudėtisCistancheturi stiprų antioksidacinį poveikį, kuris gali skatinti laisvųjų radikalų pašalinimą žmogaus organizme. Cistanches polisacharidų sudėtis turi stiprų antioksidacinį poveikį ir gali skatinti laisvųjų radikalų pašalinimą žmogaus organizme [3].

Šiame dokumente,polisacharidaiCistanche stanikai buvo išgauti ir klasifikuojami pagal didelio efektyvumo gelio pralaidumą. Polisacharidų molekulinė masė Cistanche buvo nustatyta aukštos kokybės gelio pralaidumo chromatografija. Cistanche polisacharidų molekulinė masė buvo nustatyta didelio efektyvumo gelio pralaidumo chromatografijos būdu, o polisacharidų sudėtis taip pat buvo nustatyta. analizuojama.

Cistanche antioksidacinis aktyvumas buvo analizuojamas nustatant laisvųjų radikalų šalinimo galią ir bendrą polisacharidų komponentų antioksidacinį pajėgumą. Mes taip pat nustatėme Cistanch polisacharidų komponentų laisvųjų radikalų šalinimo gebėjimą ir bendrą antioksidacinį pajėgumą bei pateikėme teorinį pagrindą Cistanche ir jo pridėtinės vertės kūrimui ir panaudojimui.

1 Mėginių paruošimas ir polisacharidinių medžiagų ekstrahavimas iš Cistanche

Pasverkite 2,5 kg Cistanche, supjaustykite griežinėliais, įpilkite 12,5 l distiliuoto vandens ir virkite 3 valandas. Po virinimo 3 valandas filtratas surenkamas filtruojant ir supilamas į 75% etanolį ir paliekamas pastovėti 24 valandas. Po virinimo filtratas surenkamas filtruojant, įpilamas į 75% etanolį ir paliekamas pastovėti 24 val., centrifuguojamas 4000 aps./min. greičiu 30 min., o nuosėdos surenkamos. Nuosėdos buvo surinktos, užšaldytos ir išdžiovintos, kad būtų gautas Cistanche neapdorotas polisacharidas CLP [4]. Nuosėdos buvo išdžiovintos šaldant, kad būtų gautas neapdorotas Cistanche polisacharidas CLP [4]. DEAE celiuliozė buvo paimta, išmirkyta ir išbrinkinta, degazuota. Ji buvo įkelta į DEAE celiuliozės anijonų mainų kolonėlę ir subalansuota distiliuotu vandeniu ir NaCl tirpalu. Pusiausvyrai buvo naudojamas vanduo ir NaCl tirpalas. Sveriantis 100 mg neapdoroto Cistanche tubulosa CLP polisacharido, buvo ištirpintas 10 ml distiliuoto vandens, o eliuatas buvo surinktas po eliuavimo distiliuotu vandeniu.

Eliuatas buvo surinktas po eliuavimo distiliuotu vandeniu ir liofilizuotas koncentruojant, kad gautų neutralų Cistanche cukrų CLP1; Eliuatas buvo surinktas po eliuavimo NaCl tirpalu, o po to sukoncentruotas ir po dializės išdžiovintas šalčiu, kad gautų Cistanche rūgštinį cukrų CLP1. Išplovus NaCl tirpalu, eliuatas buvo surinktas ir sukoncentruotas dializės būdu ir liofilizuotas, kad gautų Cistanche rūgštinį cukrų CLP2 [5].

Cistanche tubulosa neutralus cukrus CLP1 ir rūgštinis cukrus CLP2 buvo paruošti atitinkamai 1 mg / kg. Polisacharidų tirpalai buvo paruošti esant 1 mg/ml koncentracijai, o polisacharidai buvo analizuojami UV spektroskopijos metodu, naudojant spektrofotometrą esant 210-600 nm. UV spektrai buvo nuskaityti naudojant spektrofotometrą ties 210-600 nm, o kai smailė pasirodė ties 260-280 nm Kai smailė pasirodė ties 260-280 nm, buvo įrodyta, kad tirpale yra baltymų ir nukleino rūgšties. [6].

2 Cistanche polisacharidinės medžiagos sudėties nustatymas

Bendram cukraus kiekiui Cistanche mėginiuose nustatyti buvo naudojamas fenolio-sieros rūgšties metodas. Išmatuoti 0,1 mg/mL, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 ir 1 ml gliukozės tirpalai stikliniuose mėgintuvėliuose ir buvo pridėta distiliuoto vandens, kad tūris būtų 1 ml. Tada į mėgintuvėlius įpilta 0,5 ml fenolio reagento ir 2,5 ml koncentruotos sieros rūgšties, kurios koncentracija yra 6 proc., gerai suplakti ir atšaldyti iki kambario temperatūros. Sugertis buvo išmatuota esant 490 nm, naudojant spektrofotometrą, o standartinė kreivė buvo nubraižyta su cukraus kiekiu kaip horizontali koordinatė ir absorbcija kaip vertikalia koordinate, ir buvo apskaičiuota regresijos lygtis [7-8].

Baltymų kiekis Cistanche mėginiuose buvo nustatytas Komas Brilliant Blue metodu. Baltymų kiekis mėginiuose buvo matuojamas spektrofotometru esant 495 nm, o baltymų kiekis apskaičiuotas pagal standartinės kreivės lygtį [9].

Glioksalato kiekis Cistanche mėginiuose nustatytas m-hidroksifenilo metodu. Į mėgintuvėlį su 2,5 ml koncentruotos sieros rūgšties buvo įpilta skirtingų koncentracijų etaloninio ir 0,4 mL mėginio tirpalo, kurio koncentracija yra 0,1 mg/mL, suplakti.

Į mėgintuvėlį įpilama m-hidroksibifenilo koncentracijos ir 0,5 proc. natrio hidroksido tirpalo, gerai suplakama ir paliekama 30 min. Sugertis ties 525 nm buvo išmatuota spektrofotometru, o glioksalato kiekis mėginyje buvo apskaičiuotas pagal standartinės kreivės lygtį [10-11]. Cistanche polisacharidų santykinė molekulinė masė buvo nustatyta didelio efektyvumo gelio chromatografijos būdu, o Cistanche monosacharidų sudėtis – didelio efektyvumo skysčių chromatografijos būdu. Cistanche monosacharidų sudėtis buvo nustatyta aukštos kokybės skysčių chromatografijos būdu [12].

3 Cistanche Tubulosa polisacharidinės sudėties rezultatai ir analizė

Iš 1 pav. matyti, kad Cistanche Tubulosa neutralus cukrus CLP1 parodė akivaizdžią absorbcijos smailę ties 280 nm, o Cistanche Tubulosa rūgštinis cukrus CLP2 neturėjo akivaizdžios absorbcijos smailės ties 260-280 nm, tačiau UV sugerties spektras buvo didesnis. Kadangi baltymuose esantis triptofanas ir tirozinas turėjo didesnes UV absorbcijos vertes esant 280 nm, galima spręsti, kad Cistanche neutraliame cukruje CLP1 buvo glikoproteinų, tačiau nebuvo galima spręsti, ar Cistanche rūgštiniame cukruje CLP2 yra nukleorūgščių ir baltymų.

Neįmanoma nustatyti, ar Cistanche rūgštiniame cukruje CLP2 yra nukleino rūgščių ir baltymų.

DEAE celiuliozės neigiamos jonų mainų chromatografijos kolonėlės analizė gali adsorbuoti jonines medžiagas ir priemaišas ant kolonėlės, kad būtų galima atskirti polisacharidines medžiagas, o sukoncentravus ir išdžiovinus distiliuoto vandens eliuatą, iš viso buvo gauta 34,68 mg Cistanche neutralaus cukraus CLP1, o po to naudojant NaCl tirpalą eliuavimui ir koncentravimui bei išdžiovinimui, iš viso buvo gauta 16,52 mg Cistanche rūgštinio cukraus CLP2. Bendro cukraus kiekio, baltymų kiekio ir glioksilato standartinės kreivės lygtis standartinė kreivė. Gauti Cistanche bendrojo cukraus, baltymų ir glioksilato matavimai. Bendras cukraus, baltymų ir gliukurono rūgšties kiekis Cistanche buvo išmatuotas ir parodytas 1 lentelėje.

Fotometro UV spektro skenavimo kreivė nuo 210 iki 600 nm parodyta 1 paveiksle.

Iš 1 pav. matyti, kad Cistanche neutrofilinis cukrus CLP1 parodė aiškią absorbcijos smailę ties 280 nm, o Cistanche rūgštinis cukrus CLP2 parodė absorbcijos smailę ties 260-280 nm. o Cistanche Tubulosa rūgštinis cukrus CLP2 parodė aiškią absorbcijos smailę ties 260-280 nm. Nors ties 260-280 nm akivaizdžios sugerties smailės nebuvo, UV sugerties spektras buvo didesnis. Kadangi baltymuose esantis triptofanas ir tirozinas turėjo didesnę UV absorbcijos vertę esant 280 nm, galima spręsti, kad Cistanche neutrofiliniame cukruje CLP1 buvo glikoproteinų, tačiau nebuvo įmanoma nustatyti, ar Cistanche rūgštiniame cukruje CLP2 yra nukleino rūgščių ir baltymų. . Nukleino rūgščių ir baltymų buvimo Cistanche CLP2 nepavyko nustatyti.

DEAE celiuliozės neigiamos jonų mainų chromatografijos kolonėlės analizė gali adsorbuoti jonines medžiagas ir priemaišas į kolonėlę. Polisacharidinės medžiagos buvo atskirtos adsorbuojant jonines medžiagas ir priemaišas ant kolonėlės. Distiliuoto vandens eliuatas sukoncentruotas ir išdžiovintas, kad gautų neutralų Cistanche cukrų. Sukoncentravus ir išdžiovinus distiliuoto vandens eliuatą, iš viso gauta 34,68 mg CLP1, o sukoncentravus ir išdžiovinus NaCl tirpalu, gautas rūgštus cukrus CLP1. Cistanche rūgštinis cukrus CLP2 buvo gautas kaip 16,52 mg. Gauta Cistanche bendrojo cukraus kiekio, baltymų kiekio ir glioksilato kiekio standartinė kreivė lygtis. ir glioksilato standartinės kreivės lygtis. Gauti Cistanche bendrojo cukraus, baltymų ir glioksilato matavimai. Bendras cukraus, baltymų ir gliukurono rūgšties kiekis Cistanche buvo išmatuotas ir parodytas 1 lentelėje.

1 lentelė Bendrojo cukraus, baltymų ir urono rūgšties kiekis Cistanche deserticola

Standartinio mėginio molekulinę masę ir smailės plotą galima nustatyti, o regresijos regresijos lygtį galima gauti pakeitus tiriamo mėginio šviesos emisijos signalą į regresijos lygtį. Galima gauti tiriamo mėginio molekulinę masę. Bandinių, kuriuos reikia tirti, molekulinę masę galima gauti pakeitus tiriamų mėginių šviesos emisijos signalo reikšmes į regresijos lygtį. Gauta Cistanche Tubulosa CLP1 ir Cistanche Tubulosa CLP2 vidutinė molekulinė masė, vidutinė sunkioji molekulinė masė ir dispersijos koeficientas. Cistanche neutralus cukrus CLP1 ir Cistanche rūgštus CLP2 buvo nustatyti aukštos kokybės gelio pralaidumo chromatografija. Laikymo trukmės ir molekulinės masės skaičiavimo rezultatai pateikti 2 lentelėje. Molekulinio pasiskirstymo pločiui nurodyti buvo naudojamas sunkiosios vidutinės molekulinės masės ir skaitinės vidutinės molekulinės masės santykis. Sunkiosios vidutinės molekulinės masės ir skaitinės vidutinės molekulinės masės santykis naudojamas molekulinio pasiskirstymo pločiui nurodyti.

Paprašyk daugiau:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

WhatsApp / Tel: plius 86 15292862950