Penkių junginių kiekio nustatymas spermoje Rehmanniae ir jo HPLC pirštų atspaudų nustatymas

3 lentelė Atkūrimo testo rezultatai (n{1}})

2.4 Mėginio nustatymas

Surinktos šešios Rehmannia partijos buvo paruoštos pagal "2.2.2" metodą, paimti mėginiai ir nustatyti pagal "2.1" chromatografines sąlygas. Turinio nustatymo rezultatai pateikti 4 lentelėje. Rezultatai rodo, kad iš penkių komponentų rehmannia glikozido D kiekis yra didžiausias – nuo ​​0,460% iki {{1 0}},730 %; leonurio glikozido kiekis yra antras, svyruojantis nuo 0,100% iki 0,270%, o šių dviejų komponentų kiekis mėginiuose iš skirtingų gamybos vietovių labai nesiskiria. SX1 mėginyje, išskyrus echinakozidą, kitų keturių komponentų kiekis yra žymiai didesnis nei kitose mėginių partijose; echinakozido, cistanchesido A ir verbaskozido kiekis Rehmannia glutinosa iš skirtingų auginimo vietovių yra gana skirtingas ir nereguliarus.

CISTANČŲ ŽOLĖ SUGEROS KOKYBĖS nuoseklumas

2.5 Rehmannia glutinosa HPLC pirštų atspaudų nustatymas ir panašumo įvertinimas

Daugiakomponentinio kiekio nustatymo Rehmannia glutinosa chromatogramos ir duomenys buvo importuoti į "Kinijos vaistažolių medicinos chromatografinių pirštų atspaudų panašumo vertinimo sistemos (2012 Edition)" programinę įrangą ir pasirinkta SX1 tiriamojo mėginio chromatograma. kaip atskaitos spektras. Laiko lango plotis buvo nustatytas į 0.10 min., o medianos metodas buvo naudojamas sudėjusiems spektrams ir etaloniniams spektrams generuoti. Iš viso buvo nustatytos 23 bendros smailės (žr. 3 pav.). Rehmannia glutinosa mėginio pirštų atspaudų panašumas su etalonu buvo 0,904–0,950, o tai rodo, kad Rehmannia glutinosa mėginiai iš skirtingų gamybos vietovių ir tarp žalios Rehmannia glutinosa ir virtos Rehmannia glutinosa buvo panašūs ir geros kokybės konsistencija.

4 lentelė 5 komponentų kiekio nustatymo rezultatai Semen Rehmanniae/%

13. rehmaniozidas D; 17. leonuridas; 19. echinakozidas; 20. kastanozidas A; 21. akteozidas

3 pav. Dengimo HPLC chromatogramos iš 6 Semen Rehmanniae partijų (SX1-SX4, HN1, HN2) ir etaloninės (R)

3 Diskusija

3.1 Chromatografinių sąlygų parinkimas

Šiame tyrime buvo ištirtos keturios judriųjų fazių sistemos – acetonitrilas-vanduo, acetonitrilas-0,1 % skruzdžių rūgšties tirpalas, metanolis-vanduo ir metanolis -0,1 % skruzdžių rūgšties tirpalas. Rezultatai parodė, kad penki komponentai turėjo gerą atskyrimo poveikį acetonitrilo sistemoje; lyginant su acetonitrilo-vandens judrios fazės sistema, rehmannia glutinosa ir motininės žolės glikozidų smailės acetonitrilo -0.1 % skruzdžių rūgšties tirpalo judriojoje fazėje buvo siauresnės ir turėjo gerą smailių simetriją. Tuo pačiu metu dėl skirtingų penkių komponentų ultravioletinių spindulių sugerties komponentų kiekis labai skiriasi. Siekiant tiksliau nustatyti kiekvieno komponento kiekį ir užtikrinti, kad penkių komponentų sugerties intensyvumas būtų tolygiai pasiskirstęs toje pačioje chromatogramoje, ultravioletinių spindulių sugertisRehmannia glikozidas D, buvo analizuojamas motininės žolės glikozidas, echinakozidas, cistanchesidas A ir verbaskozidas ir pasirinktas kintamo bangos ilgio nustatymas, ty 0-24 min., pirmasis atskirtas rehmanijos glikozidas buvo nustatytas esant 203 nm, ir 24-40 min. atskirtas echinakozidas, cistanchesidas A ir verbaskozidas buvo nustatyti ties 330 nm. Be to, šiame tyrime taip pat buvo tiriamas metanolio, 70% metanolio tirpalo, 50% metanolio tirpalo ir 50% acetonitrilo tirpalo kaip ekstrahavimo tirpiklio ekstrahavimo poveikis. Rezultatai parodė, kad 70% metanolio tirpalas kaip ekstrahavimo tirpiklis gali geriau ištirpinti tiriamus komponentus, o ekstrahuotame mėginyje yra mažiau priemaišų. Todėl šiame tyrime kaip ekstrahavimo tirpiklis pasirinktas 70 % metanolis, judriosios fazės sistema – acetonitrilo -0.1 % skruzdžių rūgšties tirpalas ir naudojamas kintamasis bangos ilgis penkių Rehmannia komponentų turiniui nustatyti.

3.2 Mėginio nustatymo rezultatų analizė

Iš nustatymo rezultatų matyti, kad po virinimo garuose, išskyrus šiek tiek padidėjusį echinakozido kiekį, kitų keturių komponentų kiekis žymiai sumažėjo, ypač leonurido ir cistanchesido A kiekis; rehmannia glikozido D ir cistanchesido A kiekis Rehmannia glutinosa iš tos pačios auginimo vietos šiek tiek skyrėsi, o leonuriido, echinakozido ir verbaskozido kiekis labai skyrėsi; echinakozido kiekis Rehmannia glutinosa iš Henan auginimo zonos buvo žymiai didesnis nei mėginiuose iš Shanxi gamybos vietovės, o kitų keturių komponentų kiekis šiek tiek skyrėsi. Tuo pačiu metu, remiantis HPLC pirštų atspaudais, nustatytais šiame tyrime, 6 Rehmannia mėginių partijų ir kontrolinio piršto atspaudo panašumas buvo 0,904~0,950, o tai rodo, kad pagrindinė cheminė medžiaga 6 Rehmannia mėginių partijų komponentai prieš ir po apdorojimo buvo labai nuoseklūs.

Apibendrinant galima teigti, kad šiame tyrime nustatytas turinio nustatymo metodas ir HPLC pirštų atspaudai yra tikslūs, patikimi ir turi gerą specifiškumą. Jie gali būti naudojami apibūdinti Rehmannia glutinosa komponentų pokyčius ir perdirbimo laipsnį prieš ir po apdorojimo bei teikti techninę pagalbą Rehmannia glutinosa kokybės kontrolei. Tačiau šio tyrimo trūkumai yra mažos mėginių partijos ir nepilnas gamybos plotų aprėptis, todėl reikia atlikti tolesnę analizę ir patikrą.

Nuorodos

[1] Kinijos farmakopėjos komitetas. Kinijos Liaudies Respublikos farmakopėja: 1 tomas [S]. Pekinas: Kinijos medicinos mokslo ir technologijų spauda, ​​2020 m.: 129-130.

[2] Xu Jun, Fu Zhetong. Perdirbtos Rehmannia glutinosa pavadinimų istorinės raidos ir jos veiksmingumo tyrimas [J]. Kinijos patentinė medicina, 2017, 39 (9): 1913-1916.

[3] Zhu Jue, Zhu Xiangmei, Shi Yuhe ir kt. Rehmannia glutinosa tyrimų pažanga ir jos kokybės žymenų prognozinė analizė [J]. Kinijos patentų medicina, 2022, 45 (2): 1273-1281.

[4] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi ir kt. Rehmannia glutinosa [J] cheminės sudėties ir farmakologinio poveikio tyrimų pažanga. Kinijos žolelių medicina, 2022, 52 (6): 1772-1784.

[5] Li Hongwei, Meng Xiangle. Rehmannia glutinosa［J］ cheminių komponentų ir farmakologinio poveikio tyrimų pažanga.

Narkotikų vertinimo tyrimas, 2015, 38(2): 218-228.

[6] Zhang Boyong, Jiang Zhenzuo, Wang Yuefei ir kt. Šviežios Rehmannia glutinosa, žalios Rehmannia glutinosa ir virtos Rehmannia glutinosa cheminių komponentų analizė naudojant UPLC/ESI-Q-TOF MS［J］. Kinijos patentų medicina, 2016, 38(5): 1104-1108.

[7] Zhang Lixian, Wei Yue, Li Feifei ir kt. Pirštų atspaudų modelio atpažinimas ir kelių komponentų turinio nustatymas įvairiuose apdorotuose Rehmannia glutinosa produktuose［J］. Hubei Agricultural Sciences, 2023, 62(9): 135-141.

[8] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi ir kt. Rehmannia glutinosa［J］ cheminių komponentų ir farmakologinio poveikio tyrimų pažanga. Kinijos žolelių medicina, 2021, 52(6): 1772-1784.

[9] Tao Yi, Jiang Yanhui, Tang Kejian ir kt. Lyginamasis Rehmannia glutinosa cheminių komponentų tyrimas prieš ir po apdorojimo UHPLC-Q-TOF/MS［J］. Nauji kinų vaistai ir klinikinė farmakologija, 2016, 27(1): 102-106.

［10］ Xu Zhuo, Dai Xinxin, Su Shulan ir kt. Dinaminis nukleozidų ir aminorūgščių komponentų kaupimasis Rehmannia glutinosa, remiantis UPLC-TQ-MS［J］. Kinijos žolelių medicina, 2021, 52(23): 7323-7330.

［11］ Li Yujiao. Rehmannia glutinosa［D］ "devynių garų ir devynių ekspozicijos" apdorojimo technologijos ir mechanizmo tyrimas. Dzinanas: Šandongo universitetas, 2023 m.

［12］ Wang Yue, Zhou Qiao, Zhang Xuelan ir kt. HPLC Rehmannia glutinosa ir jos skirtingų perdirbtų produktų aštuonių komponentų kiekio nustatymas vienu metu naudojant UPLC pirštų atspaudų analizę ir kelių indeksų komponentų kiekio nustatymą [J]. Kinų medicinos medžiagos, 2021, 44 (7): 64-68.

[13] Guo Xiaokai, Xue Shujuan, Chen Suiqing. Rehmannia glutinosa kokybės įvertinimas remiantis UPLC pirštų atspaudų ir kelių indeksų komponentų kiekio nustatymu [J]. Kinų medicinos medžiagos, 2021, 44 (4): 917-923.