Diferencialinė HK{0}} ląstelių ir egzosomų lipidomika, kai stimuliuojama daug gliukozės

Abstraktus

Nenormalus ląstelių lipidų metabolizmas yra labai svarbus diabetinės inkstų ligos (DKD) atsiradimui ir progresavimui. Tačiau lipidų sudėtis ir diferencinė ekspresija, stimuliuojant inkstų kanalėlių ląsteles ir jų egzosomas, kurios yra gyvybiškai svarbi DKD vystymosi dalis, iš esmės nežinomos. Šiame tyrime, remiantis tiksline lipidų analize, naudojant izotopų ženklinimą ir tandeminę masės spektrometriją, HK-2 ląstelėse ir egzosomose iš viso buvo nustatyta atitinkamai 421 ir 218 lipidų rūšių. Dar svarbiau, kad rezultatai parodė, kad GM3 d18:1/22:0, GM3 d18:1/16:0, GM3 d18:0/16:0, GM3 d18:1/22:1 žymiai padidėjo, o LPE18:1, LPE, CL66:4 (16:1), BMP36:3, CL70:7 (16:1), CL74:8 (16) :1) buvo žymiai sumažėję didelės gliukozės stimuliuojamose HK{{4{{90}}}} ląstelėse. Be to, PG36:1, FFA22:5, PC38:3, SM d18:1/16:1, CE-16:1, CE-18:3, CE-20:5, ir CE-22:6 reikšmingai padidėjo, o GM3 d18:1/24:1, GM3 reikšmingai sumažėjo eksosomose, kurias išskiria daug gliukozės stimuliuojamos HK-2 ląstelės. Be to, TAG, PC ir CL žymiai sumažėjo egzosomose, palyginti su HK-2 ląstelėmis, ir LPA18:2, LPI22:5, PG32:2, FFA16:1, GM3 d18:1/18:1. , GM3 d18:1/20:1, GM3 d18:0/20:0, PC40:6p, TAG52:1(18:1), TAG52:0(18:0), CE{101 }}:5, CE-20:4, CE-22:6 buvo rasti tik egzosomose. Be to, PI4P ekspresija HK-2 ląstelėse sumažėjo esant didelei gliukozės koncentracijai. Šie duomenys gali būti naudingi siekiant pateikti naujus tikslus tiriant DKD mechanizmus.

Raktažodžiai

Tiksliniai lipidomikai; Inkstų kanalėliai; egzosomos; Diabetinė inkstų liga.

Spauskite čia norėdami nusipirkti Cistanche papildą, skirtą apsaugoti inkstus

Įvadas

Lipidų apykaitos sutrikimai prisideda prie diabetinės inkstų ligos (DKD) atsiradimo ir vystymosi [1, 2]. Ląstelių lipidų sudėties pokyčiai inkstuose esant dideliam gliukozės kiekiui gali sukelti aktyvios deguonies gamybos padidėjimą, mitochondrijų disfunkciją ir netgi sukelti apoptozę [3, 4, 5, 6]. Nors daugelis tyrėjų pripažino svarbų inkstų kanalėlių vaidmenį DKD vystymuisi ir progresavimui, keliuose tyrimuose buvo nagrinėjama bendra lipidų ekspresija inkstų kanalėliuose arba pokyčiai, esant dideliam gliukozės stimuliavimui [7, 8]. Todėl labai svarbu gauti išsamią informaciją apie lipidus inkstų kanalėliuose, taip dar labiau išaiškinant lipidų vaidmenį DKD patogenezėje.

Pastaraisiais metais vis daugiau dėmesio sulaukė egzosomų vaidmuo kuriant DKD. Egzosomos, kurios gali bendradarbiauti su autofagijos-lizosomų keliu, kad sumažintų tarpląstelinį stresą, atlieka svarbų vaidmenį palaikant ląstelių homeostazę [9, 10]. Tuo tarpu jie veikia kaip medžiagos perdavimo ir informacijos perdavimo tarp ląstelių nešėjai [11]. Naujausi tyrimai atskleidė, kad kanalėlių ląstelių ir kitų inkstų ląstelių tipų susikirtimas nefrone gali turėti svarbų vaidmenį ligos progresavimui [12, 13]. Nors egzosomų lipidų sudėtis gali paveikti jų savybes, ji buvo tiriama mažiau, palyginti su baltymų ir RNR dėmesiu [14]. Kadangi skirtingų ląstelių išskiriamos egzosomos skiriasi lipidų tipais, turiniu ir funkcijomis, išaiškinus lipidų sudėtį ir skirtingą inkstų kanalėlių išskiriamų egzosomų ekspresiją esant dideliam gliukozės kiekiui, būtų galima teoriškai paaiškinti egzosominio ryšio su inkstų kanalėliais mechanizmą. .

Čia pateikėme diferencinę inkstų kanalėlių ir jų egzosomų lipidominę analizę, kai stimuliuojama daug gliukozės, ir aptikome skirtingai išreikštas kardiolipino (CL), monosialodiheksozilo gangliozido (GM3) ir cholesterolio esterio (CE) lipidų rūšis. Iš pradžių mes taip pat ištyrėme fosfoinositidų (PIP) vaidmenį egzosomų gamyboje ir stebėjome, kaip glomerulinės mezangialinės ląstelės (GMC) pasisavina kanalėlių egzosomas.

Cistanche papildas

Metodai

1. Ląstelių kultūra

Žmogaus inkstų proksimalinio kanalėlių epitelio ląstelių linija HK-2 buvo nupirkta iš Šanchajaus biologinių mokslų instituto ląstelių išteklių centro. HK-2 ląstelės buvo kultivuojamos normalios gliukozės Dulbecco modifikuotoje Eagle terpėje/maistinių medžiagų mišinyje F-12 (DMEM/F-12), kuris buvo papildytas 10 procentų galvijų vaisiaus serumu (FBS; FSP500, „ExCell“). Įprasta gliukozė DMEM/F-12 buvo DMEM (11966025, Gibco) ir Ham's F-12 (11765054, Gibco) 1:1 mišinys, kuriame buvo 5,56 mmol/l gliukozės. Ląstelės buvo palaikomos 37 laipsnių temperatūroje 5 procentų CO2 inkubatoriuje. Pasiekus 80 procentų susiliejimą, ląstelės buvo paimtos naudojant standartinę tripsino virškinimo procedūrą ir paskirstytos 1:2 padalijimo santykiu. Pasažinės ląstelės buvo kultivuojamos naudojant FBS (CMS101.03, Cellmax) 5,5 mmol·L-1 gliukozės kaip tuščiosios kontrolinės grupės (NG) ir 30 mmol·L-1 gliukozės, kaip didelės gliukozės. grupėje (HG) 48 valandas.

2. Egzosomų išskyrimas

Diferencinė ultracentrifuga buvo naudojama eksosomoms ekstrahuoti iš HK{{0}} ląstelių kultūros supernatantų. Trumpai tariant, HK-2 ląstelių kultūros supernatantai buvo surinkti ir paeiliui centrifuguojami 2000×g, 4 laipsniais 10 min., o po to 10,000×g, 4 laipsnių kampu 30 minučių. min pašalinti ląsteles, ląstelių šiukšles ir dideles pūsleles. Supernatantų frakcijos buvo filtruojamos naudojant 0{10}} μm porų dydžio filtrus. Tada filtruoti mėginiai buvo ultracentrifuguojami 110 000 × g greičiu 75 minutes, du kartus 4 laipsnių kampu, kad egzosomos būtų granuliuotos. Gautos egzosomos buvo pakartotinai suspenduotos nedideliame kiekyje fosfatinio buferinio tirpalo (PBS) ir laikomos -80 laipsnių temperatūroje.

3. Nanodalelių sekimo analizė (NTA)

Egzosomos buvo atšildytos 25 laipsnių vandens vonioje ir padėtos ant ledo, po to jos buvo tiesiogiai praskiestos 1 × PBS, kad būtų galima aptikti naudojant derinamą varžinį impulsų jutiklį (TRPS). Egzosomų dydžio pasiskirstymo ir koncentracijos analizė buvo atlikta naudojant qNano Gold su Izon Control Suite 3.3.2 iš Izon Science.

4. Baltymų nustatymas ir Western bloting

apytiksliai 100 ul iš anksto sumaišyto krekingo tirpalo (RIPA krekingo tirpalo ir 1 procento PMSF inhibitoriaus) buvo pridėta į ląstelę ir egzosomų mėginius atskirai. Po 30 minučių krekingo jie buvo centrifuguojami 12, 000 × g, 4 laipsnių 20 minučių. Buvo paimtas supernatantas, o baltymų koncentracija buvo nustatyta naudojant bicinchonino rūgšties (BCA; Beyotime) baltymų tyrimo rinkinį pagal gamintojo instrukcijas. Galvijų serumo albuminas buvo naudojamas kaip standartinis baltymas.

Baltymų mėginiai buvo frakcionuoti natrio-dodecilsulfato poliakrilamido gelio elektroforeze (SDS-PAGE). Po to, kai jie buvo perkelti ant PVDF membranos (Millipore), jie buvo inkubuojami su įvairiais pirminiais antikūnais, anti-CD63 (EXOAB-CD63A-1, SBI; 1:1000), anti-ALIX (YT6283, Immunoway; 1:1000). ), anti-Calnexin (YT0613, Immunoway; 1:1000), anti-P62 (P0067, Sigma; 1:1000) ir anti-LC3 (L7543, Sigma; 1:1000), po to - ožkų anti-triušis arba pelės Ig antriniai antikūnai (180202-001, SBI; 1:5000). Konkrečios juostos buvo aptiktos naudojant sustiprintą chemiliuminescencinį (ECL; Beyotime) substratą. -aktinas (BM0627, Boster) buvo naudojamas kaip vidinė kontrolė. Santykinis juostos intensyvumas buvo matuojamas naudojant ImageJ programinę įrangą.

5. Perdavimo elektronų mikroskopija (TEM)

5 ul mėginio buvo lašinamas į varinį tinklą ir inkubuojamas kambario temperatūroje 5 minutes. Į vario tinklą buvo įlašinamas 2 procentų urano peroksido acetato lašas ir inkubuojamas kambario temperatūroje 1 min. Tada jis buvo džiovinamas maždaug 20 minučių kambario temperatūroje ir stebimas nanotransmisijos elektronų mikroskopu (Tecnai G2 Spirit BioTwin, FEI).

Cistanche ekstraktas

6. Tikslinė lipidomika

Lipidai buvo ekstrahuoti naudojant modifikuotą Bligh ir Dyer metodo versiją [15]. Visos lipidominės analizės buvo atliktos naudojant Exion itin efektyvią skysčių chromatografiją (UPLC), sujungtą su SCIEX QTRAP 6500 PLUS sistema. UPLC-MS/MS analizės buvo atliekamos elektropurškimo jonizacijos (ESI) režimu, esant šioms sąlygoms: užuolaidinės dujos=20, jonų purškimo įtampa=5,500 V , temperatūra=400 laipsnis , jonų šaltinio dujos 1=35 ir jonų šaltinio dujos 2=35. Poliniai lipidai buvo atskirti naudojant Phenomenex Luna 3 µm silicio dioksido kolonėlę (vidinis skersmuo 15{45}} × 2{51}} mm) su dviem judriosiomis fazėmis: judriąja faze A (chloroformas: metanolis: amonio hidroksidas, 89,5: 10: 0.5) ir judrioji fazė B (chloroformas: metanolis: amonio hidroksidas: vanduo, 55: 39: 0.5: 5,5). Gradiento atskyrimas buvo atliktas taip: gradientas buvo palaikomas 95 procentais A 5 minutes, o po to tiesiškai sumažintas iki 60 procentų per 7 minutes ir palaikomas 4 minutes, po to sumažėjo iki 30 procentų ir po to buvo laikomas 15 min. Galiausiai buvo pritaikytas pradinis gradientas ir palaikomas 5 min. Įvairiam lipidų identifikavimui ir kiekybinei analizei buvo sukurtas masių spektrometrinis kelių reakcijų stebėjimas (MRM) [16, 17]. Atskiros polinių lipidų rūšys buvo kiekybiškai įvertintos remiantis tos pačios lipidų klasės spygliuotais vidaus standartais, įskaitant PE-d31(16:0/18:1), DMPE; PG-d31(16:0/18:1), DMPG; PI-d31(16:0/18:1), di-C8- PI; PS-d31 (16:0/18:1), DMPS; PA-d31(16:{{1{{1{{110}}8}}4}}/18:1), PA(17:0/17:0); BMP-(14:0/14:0); LPE-17:1; LPI-17:1; LPS-17:1; LPA-17:0; GM3 d18:1/18:0-d3; d31-16:0, d8-20:4; PC-d31 (16:0/18:1), DMPC; SM d18:1/ d31-16:0, SM d18:1/12:0; LPC{109}}:0; Cer d18:{112}}d7/15:0; Sph-d18:1/17:0; CL 22:1(3)-14:1.

Glicerolio lipidai, įskaitant diacilglicerolius (DAG) ir triacilglicerolius (TAG), buvo kiekybiškai įvertinti naudojant modifikuotą atvirkštinės fazės HPLC / MS / MS versiją. Neutralūs lipidai buvo atskirti Phenomenex Kinetex-C18 2.6 µm kolonėlėje (id 4,6x100 mm), naudojant judriąją fazę, kurioje yra chloroformo: metanolio: {{19} }.1 M amonio acetatas (100:100:4), esant 160 µl/min srauto greičiui. d5-TAG (16:0)3; d5-TAG (14:0)3; d5-TAG (18:0)3 buvo naudojami atskiram spygliui TAG. d5-DAG (1,3-17:0); d5-DAG (1,3-18:1) buvo naudojami siekiant padidinti individualų DAG, remiantis Neutral miss MS/MS technologija.

Laisvieji cholesteroliai, steroliai ir jų esteriai buvo analizuojami HPLC-MS/MS, atliekant atmosferos slėgio cheminės jonizacijos (APCI) režimą, naudojant Cholesteryl-2,2,3,4,4,6-d6. oktadekonatas; Cholesterolis-26,26,26,27,27,27-d6 kaip vidiniai standartai.

Į mėginį buvo pridėta chloroformo: metanolio: (1:1), 2,4 M druskos rūgšties ir 0,25 M EDTA, po to sumalama žemoje temperatūroje. Mėginys buvo centrifuguotas po 3 valandų inkubacijos 4 laipsnių temperatūroje, po to ekstrahuota apatinė organinė fazė. Antrajam ekstrahavimui buvo pridėta chloroformo, po to organinė fazė plaunama naudojant 1 N druskos rūgštį: metanolį (1:1). Organinė fazė džiovinama vakuuminiame rotaciniame koncentratoriuje. Kaip buvo pranešta anksčiau, 40 procentų metilamino: vandens: n-butanolio: metanolio (36:8:9:47) buvo naudojamas deacilinimui ir analizuojamas naudojant Thermo ICS-5000 jonų chromatografiją. PI4P, PI3P, PI4P, PI(3, 4)P2, PI(3, 5)P2, PI(4, 5)P2 ir PI(3, 4,5) P3 buvo naudojami norint sukurti išorinę kiekybinio kalibravimo kreivę. analizė. Analizę palaikė Lipidall Technologies Company Limited.

7. Fluorescencinė mikroskopija

Norint vizualizuoti egzosomų įsisavinimą į GMC (Sicencell), pagal gamintojo instrukcijas toks pat egzosomų kiekis, kurį išskiria HK{0}} ląstelės su didele gliukozės stimuliacija arba be jos, buvo paženklintos PKH67 (mini67, Sigma). Pažymėtos egzosomos buvo kultivuojamos su GMC 24 valandas. Susilieję GMC buvo tris kartus plaunami PBS, po to ląstelės buvo fiksuotos 4 procentų paraformaldehidu ir 30 minučių laikomos nuo šviesos. Ląstelės tris kartus plaunamos PBS ir nudažytos DAPI (28718903, Solarbio) 4-6min. Nuplovus tris kartus, susilieję GMC buvo nufotografuoti naudojant Nikon C2 konfokalinį mikroskopą.

8. Statistinė analizė

GraphPad 7.0 buvo pritaikyta statistinei analizei ir žemėlapių sudarymui. Duomenys išreiškiami kaip vidurkis ± SEM. Dviejų grupių palyginimui buvo naudojamas Studento t testas. P reikšmė < 0,05 buvo laikoma statistiniu reikšmingumu.

Cistanche kapsulės

Diskusija

Mūsų tyrime pateikiamos skirtingai išreikštos HK{{0}} ląstelių lipidų rūšys ir eksosomos, veikiant stipriai gliukozės stimuliacijai, apie kurias anksčiau nebuvo pranešta. Įdomu tai, kad GM3 rūšys, pvz., GM3 d18:1/22:0, GM3 d18:1/16:0, GM3 d18:0/16:0 , GM3 d18:1/22:1 buvo reikšmingai padidėjęs didelės gliukozės stimuliuojamose HK-2 ląstelėse, o GM3 d18:1/24:1, GM3 jų egzosomose buvo žymiai sumažintas. Be to, GM3 d18:1 /18:1, GM3 d18:1/20:1 ir GM3 d18:0/20:0 buvo rasti tik egzosomose. GM3 yra plačiausiai organizme paplitęs gangliozidas, susidedantis iš gliukozės, galaktozės ir sialo rūgšties, kuriai būdingos sialo grupės, susijusios su keramido skeleto struktūra [18]. Jis dalyvauja reguliuojant įvairias ląstelių funkcijas, įskaitant signalų perdavimą, proliferaciją, diferenciaciją ir apoptozę. Remiantis naujausiais tyrimais, GM3 koncentracija serume yra didesnė pacientams, sergantiems 2 tipo cukriniu diabetu, hiperlipidemija ir nutukusiems pacientams, o GM3 gali skatinti insulino receptorių pašalinimą ir sumažinti insulino signalizaciją [19]. Mūsų rezultatai parodė padidėjusį visų skirtingai išreikštų GM3 rūšių kiekį HK-2 ląstelėse esant stipriai gliukozės stimuliacijai, ypač GM3 padidėjimą su šonine grandine (22:0), kuris buvo akivaizdžiausias. Zhang ir kt. [20] taip pat pastebėjo padidėjusią GM3 d18:1/22:0 ekspresiją diabetinės nefropatijos pelių inkstų žievėje, o tai atitiko mūsų rezultatus. Streptozotocino sukeltų 2 tipo cukrinio diabeto žiurkių tyrimas, kurį atliko Anela ir kt. [21] rado nepakitusio GM3 glomeruluose, bet žymiai padidino GM3 ekspresiją inkstų kanalėliuose, o tai atitinka mūsų išvadas apie GM3 pokyčius inkstų kanalėliuose. Kwak ir kt. [22] nustatė, kad streptozotocino sukeltų cukriniu diabetu sergančių žiurkių glomerulų kiekis sumažėjo GM3, o po to prarandamas selektyvus filtravimo barjeras glomeruluose. Svarbu pažymėti, kad GM3 vaidmuo glomeruluose ir inkstų kanalėliuose gali skirtis. GM3 taip pat yra svarbi lipidų plausto dalis [23]. GM3 ekspresijos lygių pokyčiai lipidų plaustuose keičia 2 tipo Na plius -gliukozės kotransporterio (SGLT2) ir inkstų Na plius /K plius /Cl-kotransporterio, kurie abu priklauso nuo lipidų plaustų, veiklą [24]. Kai kurie tyrėjai manė, kad didesnė GM3 koncentracija padidina SGLT2 ir Na plius /K plius /Cl-kotransporterio aktyvumą, todėl padidėja kanalėlių reabsorbcija ir eferentinis arteriolių hidrostatinis slėgis, o vėliau pažeidžiamos inkstų kanalėlių ląstelės, pažeidžiant tubuloglomerulų pusiausvyrą. Kumari ir kt. [25] nustatė, kad GM3 pacientų šlapimo egzosomose parodė reikšmingą skirtumą tarp DKD ir cukrinio diabeto. Apibendrinant, būsimuose tyrimuose turėtų būti atsižvelgta į padidėjusios GM3 ekspresijos vaidmenį esant dideliam gliukozės kiekiui inkstų kanalėliuose.

Svarbu tai, kad mūsų rezultatai taip pat parodė, kad kai kurių rūšių CL, įskaitant CL66:4(16:1), CL70:7(16:1) ir CL74:8(16:1), labai sumažėjo esant stipriai gliukozės stimuliuojamam HK{ {13}} langelių. Palyginti su HK-2 ląstelėmis, CL egzosomose žymiai sumažėjo. CL yra beveik visa mitochondrijų vidinėje membranoje ir yra svarbi mitochondrijų struktūros palaikymo dalis. Jis vaidina svarbų vaidmenį elektronų laidumui, adenozino trifosfato gamyboje, energijos metabolizme ir apoptozėje [26, 27]. Sergant cukriniu diabetu, mitochondrijų morfologinius pokyčius ir disfunkciją dažnai lydi patologinis CL pokytis [28,29]. Proksimalinėms inkstų kanalėlių epitelio ląstelėms reikia pakankamai ATP, kad palaikytų aktyvų įvairių medžiagų transportavimą ir reabsorbciją. Proksimalinėse inkstų kanalėlių epitelio ląstelėse, kurios sunaudoja daug energijos, yra daug mitochondrijų [30]. Mitochondrijų fragmentacija buvo pastebėta proksimalinėse kanalėlių epitelio ląstelėse ankstyvojo diabeto metu. Zhang ir kt. [31] nustatė, kad CL buvo būtinas palaikant kanalėlių mitochondrijų funkciją pelėms, sergančioms 1 tipo cukriniu diabetu. Mūsų rezultatai gali suteikti naują teorinį pagrindą tiriant DKD mitochondrijų pažeidimo mechanizmą.

Egzosomos vaidina svarbų vaidmenį palaikant ląstelių homeostazę, bendradarbiaudamos su autofagijos-lizosomų keliu. Ankstesni tyrimai parodė, kad PIP ekspresijos lygio pokyčiai gali turėti įtakos tiek egzosomų sekrecijai, tiek ląstelių autofagijai, reguliuodami MVB transformaciją [32, 33, 34]. Nina ir kt. [35] nustatė, kad PC-3 ląstelėse PIKfyve, kurio substratas yra PI3P, slopinimas padidino egzosomų sekreciją ir sukėlė sekrecinę autofagiją, taip parodydamas, kad šie keliai buvo glaudžiai susiję PIP. Remdamiesi tuo, kas išdėstyta pirmiau, mes stebėjome PIP, egzosominės gamybos ir autofagijos pokyčius didelės gliukozės stimuliuojamose HK-2 ląstelėse. Mūsų rezultatai parodė, kad didelis gliukozės kiekis stimuliavo ir eksosomų sekreciją, ir autofagijos aktyvavimą HK-2 ląstelėse, o PI4P ekspresija buvo reikšmingai sumažėjusi. Reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant ištirti PIP, dalyvaujančių didelės gliukozės stimuliacijos, eksosomų-autofagijos reguliavimo mechanizmą.

Kaip pasiuntinys, egzosomos vaidina svarbų vaidmenį tarpląsteliniame signalizavime ir funkciniuose DKD vystymosi pokyčiuose [36, 37, 38]. Fluorescenciniu būdu pažymėjome HK-2 ląstelių išskiriamas egzosomas ir parodėme, kad GMC juos pasisavina parakrininiu būdu. Palyginti su motininėmis ląstelėmis, egzosomos turi ypatingą sudėtį, todėl jos yra stabilesnės ir funkcionalesnės dėl turtingo cholesterolio, sfingolipidų, sočiųjų fosfolipidų ir lipidų plausto domenų [39]. Net nedideli lipidų sudėties pokyčiai gali turėti įtakos membranos savybėms, todėl labai paveikia jos funkciją. Šiame tyrime mes nustatėme, kad TAG, PC ir CL žymiai sumažėjo egzosomose, palyginti su HK-2 motininėmis ląstelėmis, o 13 rūšių lipidų, įskaitant LPA18:2, LPI22:5, PG32:2, FFA16: 1, GM3 d18:1/18:1, GM3 d18:1/20:1, GM3 d18:{{30}}/20:0, PC40: 6p, TAG52:1(18:1), TAG52:0(18:0), CE-20:5, CE-20:4, CE-22:6 buvo aptikti tik egzosomos. Čia pateiktas darbas suteikia pagrindą tolesnei kanalėlių ląstelių išskiriamų egzosomų parakrininių vaidmenų analizei.

Cistanche milteliai

Išvados

Apibendrinant, mūsų tyrimas parodė lipidomikos analizės svarbą nustatant naujus tikslus tiriant DKD patogenezę. Tolesni diferencijuotų lipidų funkcijos tyrimai, taip pat išsamūs lipidų tyrimai su kitomis nefrono ląstelėmis ir jų egzosomomis gali suteikti naują perspektyvą, kuri dar labiau paaiškintų DKD mechanizmą.

Nuorodos

1. Stephanie Eid, Kelli M. Sas, Steven F. Abcouwer, Eva L. Feldman, Thomas W. Gardner, Subramaniam Pennathur. ir kt. Naujos įžvalgos apie diabeto komplikacijų mechanizmus: lipidų ir lipidų metabolizmo vaidmuo. Diabetologija. 2019 m.; 62(9): 1539-49.

2. Krisztian Stadler, Ira J. Goldberg, Katalin Susztak. Besivystantis supratimas apie lipidų metabolizmo įtaką diabetinei inkstų ligai. Curr Diab Rep. 2015; 15(7): 40.

3. Michal Herman-Edelstein, Pnina Scherzer, Ana Tobar, Moshe Levi, Uzi Gafter. Pakitęs inkstų lipidų metabolizmas ir inkstų lipidų kaupimasis sergant žmogaus diabetine nefropatija. J Lipid Res. 2014 m.; 55(3): 561-72.

4. G Michelle Ducasa, Alla Mitrofanova, Alessia Fornoni. Lipidų ir mitochondrijų susikirtimas sergant diabetine inkstų liga. Curr Diabetes Rep. 2019; 19: 144.

5. Kerri J. Grove, Paul A. Voziyan, Jeffrey M. Spraggins, Suwan Wang, Paisit Paueksakon, Raymond C. Harris. ir kt. Diabetinė nefropatija sukelia glomerulų ir kanalėlių lipidų profilių pokyčius. J Lipid Res. 2014 m.; 55(7): 1375-85.

6. Kelli M. Sas, Jiahe Lin, Thekkelnaycke M. Rajendiran, Tanu Soni, Viji Nair, Lucy M. Hinder. ir kt. Bendros ir skirtingos lipidų ir lipidų sąveikos plazmoje ir paveiktuose audiniuose diabetinės pelės modelyje. J Lipid Res. 2018 m.; 59(2): 173-83.

7. Juozapas V. Bonventras. Ar galime nukreipti kanalėlių pažeidimus, kad išvengtume inkstų funkcijos sumažėjimo sergant diabetu? Seminas Nefrolis. 2012 m.; 32(5): 452-62.

8. Bi-Cheng Liu, Tao-Tao Tang, Lin-Li Lv, Hui-Yao Lan. Inkstų kanalėlių pažeidimas: lėtinės inkstų ligos varomoji jėga. Kidney International. 2018 m.; 93(3): 568-79.

9. Nina Pettersen Hessvik, Alicia Llorente. Dabartinės žinios apie egzosomų biogenezę ir išsiskyrimą. Cell Mol Life Sci. 2018 m.; 75(2): 193-208.

10. Leila Salimi, Ali Akbari, Nassrollah Jabbari, Behnam Mojarad, Ali Vahhabi, Sławomir Szafert. ir kt. Egzosomų ir autofagijos kelių sinergija ląstelių homeostazei ir naviko ląstelių metastazėms. Ląstelių Biosci. 2020 m.; 10:64.

11. Sureshas Mathivananas, Hong Ji, Richardas J. Simpsonas. Egzosomos: tarpląstelinės organelės, svarbios tarpląsteliniam ryšiui. J Proteomika. 2010 m.; 73(10): 1907-20.

12. Maja Kosanović, Alicia Llorente, Sofija Glamočlija, José M. Valdivielso, Milica Bozic. Ekstraląstelinės pūslelės ir inkstų fibrozė: odisėja link naujo terapinio požiūrio. Int J Mol Sci. 2021 m.; 22(8): 3887.

13. Lin-Li Lv, Ye Feng, Min Wu, Bin Wang, Zuo-Lin Li, Xin Zhong. ir kt. Egzosominė kanalėlių epitelio ląstelių miRNR-19b-3p skatina M1 makrofagų aktyvaciją inkstų pažeidimo atveju. Ląstelių mirties skirtumas. 2020 m.; 27(1): 210-26.

14. Raghu Kalluri, Valerie S. LeBleu. Egzosomų biologija, funkcijos ir biomedicininis pritaikymas. Mokslas. 2020 m.; 367(6478): eaau6977.

15. Jieli Lu, Sin Man Lam, Qin Wan, Lixin Shi, Yanan Huo, Lulu Chen. ir kt. Didelės aprėpties tikslinė lipidomika atskleidžia naujus serumo lipidų prognozes ir lipidų kelio disreguliaciją, buvusią prieš 2 tipo diabeto atsiradimą normoglikeminiams kinų suaugusiems. Diabeto priežiūra. 2019 m.; 42(11): 2117-26.

16. Sin Man Lam, Raoxu Wang, Huan Miao, Bowen Li, Guanghou Shui. Integruotas metodas, skirtas tiesiogiai tirti sfingolipidų homeostazę pelių širdies ir smegenų audiniuose per postnatalinį vystymąsi iki reprodukcinio senėjimo. Analinis Chim Acta. 2018 m.; 1037: 152-58.

17. Sin Man Lam, Zehua Wang, Jie Li, Xun Huang, Guanghou Shui. Polinesočiųjų riebalų rūgščių sekvestracija Caenorhabditis elegans dauer lervos membraniniuose fosfolipiduose susilpnina eikozanoidų biosintezę, kad išgyventų ilgiau. Redox Biol. 2017 m.; 12: 967-77.

18. Masako Nishikawa, Makoto Kurano, Takahiro Nitta, Hirotaka Kanoh, Jin-ichi Inokuchi, Yutaka Yatomi. GM3(d18:1-16:0) ir GM3(d18:1-24:1) lygiai serume gali būti susiję su limfoma: tiriamasis hematologinių ligų tyrimas. Sci Rep. 2019; 9: 6308.

19. Takashige Sato, Yutaka Nihei, Masakazu Nagafuku, Seiichi Tagami, Rina Chin, Mitsunobu Kawamura. ir kt. Cirkuliuojantis gangliozido GM3 lygis esant metaboliniam sindromui: bandomasis tyrimas. Obes Res Clin praktika. 2008 m.; 2(4): 231-38.

20. Biyu Hou, Ping He, Peng Ma, Xinyu Yang, Chunyang Xu, Sin Man Lam. ir kt. Išsamus inkstų lipidomų profiliavimas ankstyvosios diabetinės nefropatijos stadijoje. Priekinis endokrinolis (Lozana). 2020 m.; 11: 359.

21. Anela Novak, Nikolina Režić Mužinić, Vedrana Cikeš Čulić, Joško Božić, Tina Tičinović Kurir, Lejla Ferhatović. ir kt. Gangliozido GM3 pasiskirstymas per inkstus 1 ir 2 tipo diabeto žiurkių modeliuose. J Physiol Biochem. 2013 m.; 69: 727-35.

22. Dong Hoon Kwak, Young Il Rho, Oh Deog Kwon, Seon Ho Ahan, Ju Hung Song, Young Kug Choo. ir kt. Gangliozido GM3 sumažėjimas streptozotocino sukeltuose žiurkių diabetiniuose glomeruluose. Gyvenimas Sci. 2003 m.; 72(17): 1997-2006.

23. Yong Chen, Jie Qin, Zheng W. Chen. Fluorescencinė topografinė NSOM tiesiogiai vizualizuoja GM1 / GM3 plaustų smailių ir slėnių poliškumą ląstelių membranos svyravimų metu. J Lipid Res. 2008 m.; 49(10): 2268-75.

24. Pia Welker, Alexandra Böhlick, Kerimas Mutigas, Michele Salanova, Thomas Kahlas, Hartmutas Schlüteris. ir kt. Inkstų Na plius -K plius -Cl- -kotransporterio aktyvumas ir vazopresino sukelta prekyba priklauso nuo lipidų plaustų. Am J Physiol Renal Physiol. 2008 m.; 295(3): F789-F802.

25. Sangeeta Kumari, Ajeet Singh. Šlapimo egzosominė lipidomika atskleidžia diabetinės nefropatijos žymenis. Dabartinė medžiagų apykaita. 2018 m.; 6: 131-39.

26. Aleksandras V. Panovas, Sergejus I. Dikalovas. Kardiolipinas, hidroksilo radikalai ir lipidų peroksidacija esant mitochondrijų disfunkcijoms ir senėjimui. Oxid Med Cell Longev. 2020 m.; 2020 m.: 1323028.

27. Giuseppe Paradies, Valeria Paradies, Francesca M. Ruggiero, Giuseppe Petrosillo. Kardiolipino vaidmuo mitochondrijų funkcijoje ir sveikatos bei ligų dinamikoje: molekuliniai ir farmakologiniai aspektai. Ląstelės. 2019 m.; 8(7): 728.

28. Edgard M Mejia, Hieu Nguyen, Grant M Hatch. Žinduolių kardiolipino biosintezė. Chem Phys lipidai. 2014 m.; 179: 11-6.

29. G. Michelle Ducasa, Alla Mitrofanova, Shamroop K. Mallela, Xiaochen Liu, Judith Molina, Alexis Sloan. ir kt. ATP surišančios kasetės A1 trūkumas sukelia kardiolipino sukeltą mitochondrijų disfunkciją podocituose. J Clin Invest. 2019 m.; 129(8): 3387–400.

30. Alejandra Guillermina Miranda-Díaz, Ernesto Germán Cardona-Muñoz, Fermín Paul Pacheco-Moisés. Kardiolipino ir mitochondrijų pažeidimo vaidmuo persodinant inkstus. Oxid Med Cell Longev. 2019 m.; 2019 m.: 3836186.

31. Guanshi Zhang, Jialing Zhang, Rachel J. DeHoog, Subramaniam Pennathur, Christopher R. Anderton, Manjeri A. Venkatachalam. ir kt. DESI-MSI ir METASPACE rodo lipidų anomalijas ir pakitusius mitochondrijų membranų komponentus diabetinių inkstų proksimaliniuose kanalėliuose. Metabolizmas. 2020 m.; 16(1): 11.

32. Johanas-Owenas De Craene'as, Dimitri L. Bertazzi, Séverine Bär, Sylvie Friant. Fosfoinozitidai yra pagrindiniai membranų prekybos ir lipidų signalizacijos takų dalyviai. Int J Mol Sci. 2017 m.; 18(3): 634.

33. Kay O. Schink, Kia-Wee Tan, Haraldas Stenmarkas. Fosfoinozitidai kontroliuoja membranos dinamiką. Annu Rev Cell Dev Biol. 2016 m.; 32: 143-71.

34. Tore Skotland, Nina P. Hessvik, Kirsten Sandvig, Alicia Llorente. Egzosomų lipidų sudėtis ir eterio lipidų bei fosfoinozitidų vaidmuo egzosomų biologijoje. J Lipid Res. 2019 m.; 60(1): 9-18.

35. Nina Pettersen Hessvik, Anders Øverbye, Andreas Brech, Maria Lyngaas Torgersen, Ida Seim Jakobsen, Kirsten Sandvig. ir kt. PIKfyve slopinimas padidina egzosomų išsiskyrimą ir sukelia sekrecinę autofagiją. Cell Mol Life Sci. 2016 m.; 73: 4717-37.

36. Margherita AC Pomatto, Chiara Gai, Benedetta Bussolati, Giovanni Camussi. Ekstraląstelinės pūslelės inkstų patofiziologijoje. Priekyje Mol Biosci. 2017 m.; 4:37.

37. Xiaoming Wu, Yanbin Gao, Liping Xu, Wanyu Dang, Huimin Yan, Dawei Zou. ir kt. Eksosomos iš didelio gliukozės kiekio apdorotų glomerulų endotelio ląstelių sukelia epitelio-mezenchiminį perėjimą ir podocitų disfunkciją. Sci Rep. 2017; 7: 9371.

38. Xiao-ming Wu, Yan-bin Gao, Fang-qiang Cui, Na Zhang. Eksosomos iš glomerulų endotelio ląstelių, apdorotų dideliu gliukozės kiekiu, aktyvina mezangines ląsteles, skatindamos inkstų fibrozę. Biol Open. 2016 m.; 5(4): 484-91.

39. Tore Skotland, Kirsten Sandvig, Alicia Llorente. Lipidai egzosomose: dabartinės žinios ir kelias į priekį. Prog Lipid Res. 2017 m.; 66: 30-41.

Weidong Wang, Tingting Li, Zhijie Li, Hongmiao Wang, Xiaodan Liu

Nefrologijos skyrius, pirmoji susijusi Kinijos medicinos universiteto ligoninė, 155 North Nanjing Street, Shenyang, Liaoning, PR China, 110001