Mitybinio kalcio ir fosfatų įkrovos poveikis kalciproteino dalelių kinetikai suaugusiesiems, kurių inkstų funkcija normali ir sutrikusi

Abstraktus

Plazma artėja prie metastabilumo, atsižvelgiant į kalcio ir fosfatų kiekį, tik nedideli jonų aktyvumo sutrikimai, kurių reikia norint palaikyti kristalų augimą po branduolio atsiradimo. Fiziologiškai kalcis ir fosfatas su pertraukomis pasisavinami iš dietos kiekvieną dieną, tačiau šių jonų koncentracija plazmoje po valgio skiriasi minimaliai. Tai reiškia, kad egzistuoja per kraują pernešama mineralinio buferio sistema, skirta kalcio fosfatams atskirti ir sumažinti nusėdimo minkštuosiuose audiniuose riziką. Kalciproteino dalelės (CPP), endogeniniai mineralų ir baltymų koloidai, turintys plazmos baltymo fetuino-A, gali atlikti šią funkciją, tačiau trūksta galutinių įrodymų, siejančių mitybos mineralų kiekį su jų susidarymu. Čia parodome, kad CPP susidaro kaip normalus fiziologinis atsakas į sveikų suaugusiųjų maitinimą ir kad tai vyksta nepaisant minimalių įprastinių serumo mineralinių žymenų pokyčių. Be to, asmenims, sergantiems lėtine inkstų liga (CKD), kurių mineralų tvarkymas yra sutrikęs, parodėme, kad CPP pirmtakų lygis nevalgius ir po valgio yra žymiai padidėjęs ir stipriai atvirkščiai koreliuoja su inkstų funkcija. Šiame tyrime pabrėžiamas svarbus, bet dažnai nepaisomas koloidinės biochemijos indėlis į mineralų homeostazę ir pateikiama nauja įžvalga apie mineralų metabolizmo sutrikimą sergant CKD.

Spauskite čia norėdami įsigyti Cistanche produktų

Įvadas

Kalcis ir fosfatas vandeniniame tirpale sudaro labai netirpias druskas ir, nors visų gyvų organizmų metabolizmas priklauso nuo šių pagrindinių maistinių medžiagų, jų sambūvis biologiniuose skysčiuose sukelia būdingą mineralizacijos riziką ir poreikį griežtai reguliuoti1. Dauguma tarpląstelinių skysčių, tokių kaip plazma, yra laikomi metastabiliais arba artėja prie metastabilumo, atsižvelgiant į jų kalcio ir fosfato joninį aktyvumą2, todėl jie lengvai palaiko kristalų augimą, jei yra branduoliai. Šią kalcio ir fosfato nuosėdų tendenciją panaudojo stuburiniai gyvūnai dėl jų unikalių biomechaninių savybių skeleto ir dantų audinių evoliucijos metu. Tačiau tuo pat metu tai įpareigojo greito mobilizavimo ir veiksmingo mineralinių pirmtakų transportavimo mechanizmus, kad būtų patenkinti šių kietųjų audinių augimo ir taisymo reikalavimai, taip pat strategijos, apribojančios mineralizaciją šiose vietose ir užkertančios kelią nepageidaujamam kalcifikacijai minkštuosiuose audiniuose3. . Iš tiesų, net nedidelis kalcio ir fosfatų koncentracijos padidėjimas plazmoje yra susijęs su padidėjusia patologinio arterijų ir audinių kalcifikacijos rizika4. Kadangi kalcio ir fosfato perteklius beveik išimtinai pašalinamas per inkstus, ši rizika kartu su su ja susijusiomis širdies ir kraujagyslių sistemos pasekmėmis yra daug didesnė pacientams, sergantiems lėtine inkstų liga (LIL), kai mineralų apykaitos sutrikimai išryškėja santykinai nedideliu glomerulų filtracijos sumažėjimu. norma (GFR)5,6. Atsižvelgiant į tai, kad žinduolių maiste yra daug kalcio ir fosfatų, galima įtarti, kad negimdinės mineralizacijos rizika yra didžiausia po valgio dėl numatomo mineralinių jonų, absorbuojamų iš žarnyno, antplūdžio. Tačiau, priešingai nei tikimasi, kalcio ir fosfatų koncentracija plazmoje po valgio kinta minimaliai ir nors padidėjęs šlapimo išsiskyrimas padeda palaikyti homeostazę7, šis atsakas nėra akimirksniu ir vėluoja keliomis valandomis po milimolinio kalcio ir fosfato kiekio suvartojimo8. Kaip šio fiziologinio iššūkio sprendimas, jau seniai buvo įtariama, kad kraujas perneša mineralų buferio ir transportavimo sistemą9, o pastaruoju metu dėmesys buvo nukreiptas į koloidinius mineralų ir baltymų kompleksus, kurie galėtų atlikti šią funkciją ir saugiai valdyti pertrūkį mineralų srautą per tarpląstelinį. skysčio į panaudojimo arba šalinimo vietas10.

Plazmoje stipriausias ir gausiausias baltymų mineralizacijos reguliatorius yra iš kepenų gaunamas glikoproteinas fetuinas-A11, kuris sąveikauja su besiformuojančiais koloidiniais mineralų ir baltymų kompleksais, sudarydamas kalciproteino daleles (CPP)12,13. Panašiai kaip apolipoproteinai tirpina lipidų krovinį transportavimui, fetuinA stabilizuoja blogai tirpius kalcio fosfatus, užkertant kelią kristalų augimui ir nusodinimui, tuo pačiu palengvindamas jų įsisavinimą audiniuose, kad būtų galima panaudoti arba išvalyti 14–16. Nesugebėjimas pagaminti ar pakankamai stabilizuoti CPP, kaip matyti iš fetuin-A išmuštų pelių, sukelia vieną iš sunkiausių žinomų negimdinio kalcifikacijos fenotipų17, kai mineralų turintys kompleksai nusėda tiesiai į mikrovaskuliarijos spindį ir sukelia okliuziją, išemiją, nekrozė ir fbrozė18. CPP generuojamas per eilę tvarkingų etapų, iš pradžių spontaniškai susidariusias kalcio ir fosfato jonų sankaupas jungiant prie fetuino-A, suformuojant kalciproteino monomerus (CPM)19, kurie vėliau naudojami kaip statybiniai blokai didesnėms polimerinėms struktūroms; pirma, susilieja, kad susidarytų sferinis pirminis CPP (CPP-I), turintis amorfinio kalcio fosfato, prieš paverčiant didesnį ir tankesnį elipsoidinį antrinį CPP (CPP-II), turintį kristalinį hidroksiapatitą12.

Be tariamo fiziologinio CPP susidarymo vaidmens sekvestruojant ir išsklaidant mineralų perteklių, padidėjęs lygis taip pat stebimas esant sutrikusio mineralų metabolizmo būsenoms, įskaitant CKD20. Esant tokiai aplinkai, didesnis CPM ir CPP kiekis serume buvo susijęs su padidėjusia širdies ir kraujagyslių įvykių rizika21–25 ir mirtingumu22. Ikiklinikiniai tyrimai rodo, kad CPP gali tiesiogiai sukelti kraujagyslių lygiųjų raumenų ląstelių kalcifikaciją 26, 27, ląstelių uždegiminių ir citotoksinių takų aktyvavimą 28, 29, taip pat kraujagyslių luminalinius ir endotelio pažeidimus30. Apibendrinant, buvo pasiūlyta, kad ilgalaikis chroniškai padidėjusio CPP kiekio serume poveikis gali padėti paaiškinti ryšį tarp mineralų pertekliaus ir prastų pacientų baigčių sergant CKD14, 31. Įdomu tai, kad naujausi duomenys taip pat rodo, kad cirkuliuojantis CPM yra filtruojamas glomeruluose29, o tai reiškia, kad inkstų funkcijos sutrikimas gali paveikti CPP metabolizmą keliais mechanizmais.

Naujausi metodologiniai pasiekimai leidžia tiesiogiai kiekybiškai įvertinti CPM32, CPP-I ir CPP-II33, o šie tyrimai dabar taikomi keliuose stebėjimo ir intervencijos klinikiniuose tyrimuose 24, 25, 34–39. Kitas naujas papildomas metodas šiai sistemai įvertinti yra T50 testas, funkcinis serumo gebėjimo atsispirti CPP-II susidarymui ex vivo, kai yra paveiktas persotintu kalcio ir fosfato kiekiu40, įvertinimas. Mažesnis T50 nuosekliai siejamas su padidėjusia kraujagyslių patologijos ir mirtingumo rizika asmenims, kurių inkstų funkcija normali41, taip pat įvairiose ŠKL grupėse, įskaitant nedializuojamus22, 42,43 ir nuo dializės priklausomus CKD44. Be CPP-II formavimosi kinetikos, T50 tyrime susidariusių CPP-II molekulių dydis (hidrodinaminis spindulys) taip pat gali būti išmatuotas40,45 ir gali suteikti papildomos prognostinės informacijos apie kraujagyslių riziką46,47.

Dietinės CPP kilmės sąvoką tvirtai patvirtina pastebėjimas, kad maitinimas dideliu fosfatu yra susijęs su padidėjusiu CPM48 ir CPP33 kiekiu aplinkoje, atliekant tyrimus su gyvūnais, ir CPM34 ir CPP37 koncentracijos serume sumažėjimu hemodializuojamiems pacientams, gydomiems žarnyno fosfatų rišikliais. Tačiau trūksta galutinio stebėjimo apie maistinių mineralų suvartojimo poveikį ūminei CPP kinetikai žmonėms. Be to, CKD poveikis CPP metabolizmui po valgio dar turi būti dokumentuotas. Siekdami pašalinti šias pagrindines įrodymų spragas, atlikome kontroliuojamą standartizuoto maisto vartojimo poveikio CPM, CPP-I, CPP-II, T50 ir CPP-II dydžiui serume nevalgiusiems suaugusiems žmonėms, kurių inkstų funkcija normali arba sutrikusi.

Cistanche ekstraktas

Metodika

1. Tiriamoji populiacija.

Mes ištyrėme 14 asmenų, sergančių CKD, ir 16 pagal amžių ir lytį atitinkančių sveikų kontrolinių asmenų. Kiekvienas dalyvis turėjo būti ne jaunesnis nei 18 metų, kad galėtų dalyvauti. Dalyviai buvo neįtraukti, jei jie: (i) sirgo mineralinėmis ar kaulų ligomis, nesusijusiomis su CKD; ii) buvo gydomi žarnyno fosfato rišikliu arba kalcitrioliu; arba (iii) turėjo virškinimo trakto sutrikimų, anksčiau netoleravo laktozės arba nenorėjo valgyti tiriamojo maisto. CKD grupei įdarbinome septynis asmenis, kurių apskaičiuotas glomerulų filtracijos greitis (eGFR) yra nuo 30 iki 60 ml/min/1,73 m2, ir septynis su eGFR.<30 mL/min/1.73 m2, excluding participants who required dialysis or with a previous kidney transplant. Healthy controls had no history of chronic medical conditions and had normal kidney function (eGFR>60 ml/min/1,73 m2). Tyrimą atliko Helsinkio deklaracija.

Visi asmenys pateikė raštišką informuotą sutikimą, o tyrimą patvirtino vietos etikos komitetas (Melburno sveikatos žmogaus tyrimų etikos komitetas MH2018.363).

2. Procedūra.

Kiekvienas dalyvis buvo tiriamas po naktinio badavimo ir mėginių ėmimas prasidėjo nuo 7.3 0 iki 9.30 val. Tyrimo laikotarpio pradžioje buvo įvesta intraveninė kaniulė. Prieš paimant kiekvieną kraujo mėginį, pradinis 5 ml iš kaniulės buvo išmestas. Du pradiniai kraujo mėginiai nevalgius buvo paimti 30 minučių pertrauka, kad būtų atsižvelgta į pradinius pokyčius. Šių dviejų laiko taškų vidutinės vertės buvo naudojamos kaip „laikas 0“. Iš karto po antrojo badavimo mėginio paėmimo dalyviai valgė standartizuotą maistą (Sanitarium Up&Go skysti pusryčiai; 250 ml, vanilės skonio), kuriame buvo 815 kJ energijos, 300 mg kalcio ir 188 mg fosfato (1 lentelė). Dalyviams buvo nurodyta suvartoti visą gėrimą per 5 minutes. Serijiniai kraujo mėginiai buvo paimti penkiais laiko momentais po valgio (30, 60, 120, 180 ir 240 minučių) nuo valgio pradžios. Tyrimo metu dalyviams buvo leista gerti vandenį, bet nebuvo leista vartoti jokio kito maisto ar gėrimų.

3. Rezultato priemonės.

Kraujas buvo paimtas pakartotinai matuojant naujus mineralų metabolizmo žymenis (CPM, CPP-I, CPP-II, T50 ir CPP-II dydis) kiekvienu laiko momentu. Fetuinas-A buvo matuojamas kiekvienu laiko momentu, atsižvelgiant į jo, kaip pagrindinio mineralus surišančio baltymo, esančio CPM ir CPP, vaidmenį. Taip pat kiekvienu laiko tašku matavome serumo fosfato, bendro kalcio, magnio, albumino ir bikarbonato kiekį, o tris kartus – nepažeisto prieskydinės liaukos hormono (PTH) ir nepažeisto fibroblastų augimo faktoriaus -23 (iFGF23) koncentraciją serume ({{12). }}, 120 ir 240 min.). Citrato koncentracija serume buvo matuojama 0, 30 ir 60 min. Karbamido, kreatinino ir 1,25 dihidroksi vitamino D kiekis serume buvo matuojamas vieną kartą nevalgius (0 min.). Naujų mineralų metabolizmo žymenų, PTH, iFGF23, 1,25 dihidroksi vitamino D ir serumo citrato kraujo mėginiams buvo leista krešėti 30 minučių prieš centrifugavimą, o po to serumo alikvotinės dalys buvo laikomos –80 laipsnių temperatūroje iki partijos analizės. Visi kiti biocheminiai matavimai buvo atlikti mėginio paėmimo metu naudojant standartinius laboratorinius metodus.

4. CPM ir CPP gelio filtravimo ir pjūvio citometriniai tyrimai.

Mes panaudojome du papildomus tyrimus, norėdami kiekybiškai įvertinti skirtingas cirkuliuojančio CPP telkinio frakcijas49. Abiejuose tyrimuose naudojamas fluorescenciniu būdu pažymėtas bisfosfonato darinys OsteoSense 680EX (Perkin Elmer), kuris specifiškai jungiasi su kietosios fazės kalcio fosfatu ir pirmiausia su kristalinėmis fazėmis (pvz., hidroksiapatitu). Mažiems (<50 nm diameter), low-density mineral-laden fetuin-A colloids. Briefly, frozen serum samples were thawed for 24 h at 25 °C to induce aggregation of CPM and phase transition to crystalline calcium phosphate. Samples were then centrifuged for 30,000g for 2 h at 4 °C to remove larger CPP-I and CPP-II, leaving less dense crystal-laden fetuin-A monomer and multimers for staining with OsteoSense (0.5 µM) in HEPES-buffered DMEM (pH 8.0). Unbound dye was subsequently removed by gel filtration (Micro Bio-Spin® Columns with Bio-Gel® P-30, Bio-Rad) and the resultant fluorescence was measured using an infrared scanner (Odyssey CLx, LI-COR; EX 685 nm, EM 700 nm). Miura and colleagues32 referred to the mineral detected as low-density (L)-CPP, however, here we refer to them as CPM to reflect the origin of this mineral fraction in vivo. In our hands, the mean interassay analytical coefficient of variation (CVA) for the CPM assay was 4.9%.

Srauto citometrinei analizei užšaldyto serumo alikvotinės dalys buvo apdorotos naudojant standartizuotas procedūras, aprašytas anksčiau50. CPP-I ir CPP-II buvo išmatuoti, kaip aprašyta anksčiau, naudojant BD FACSVerse srauto citometro sąranką dalelėms atskirti<200 nm from the background and operate with fluorescence triggering on OsteoSense-positive events33,37. In this assay, CPP is distinguished from membrane-delimited mineral-containing extracellular vesicles using phosphatidyl serine–binding cadherin-FITC (Haematologic Technologies Inc., Essex Junction, VT). CPP-I and CPP-II were distinguished by differences in side scatter (SSC) intensity (related to particle size) and OsteoSense fluorescence intensity. Interassay CVA for CPP-I and CPP-II were<15% and<10%, respectively.

5. Kiti mineraliniai žymekliai.

Serumas T50 buvo matuojamas Calciscon AG, Biel, Šveicarija, kaip aprašyta anksčiau naudojant Nephelostar nefelometrą (BMG Labtech, Ortenberg, Vokietija)40. Vidutinė T50 tyrimų CVA buvo 3,4 proc. CPP-II hidrodinaminis spindulys buvo išmatuotas dinamine šviesos sklaida naudojant DynaPro Plate Reader II (Wyatt Technology, Santa Barbara, CA, JAV), kaip aprašė Chen ir kt.47 CPP-II dydžio CVA tarp tyrimo buvo 4 proc. Komerciniai imunologiniai tyrimai buvo naudojami iFGF23 (Kainos Laboratories, Tokijas, Japonija), 1,25 dihidroksi vitamino D imunodiagnostikos sistemoms, Boldonas, JK) ir fetuin-A (R&D Systems, Mineapolis, JAV) matuoti pagal gamintojo instrukcijas. Vidutinė tarptyrinė CVA buvo atitinkamai 3,8 proc., 5,5 proc. ir 3,2 proc. Citratas serume buvo matuojamas naudojant kolorimetrinį tyrimą (Sigma-Aldrich, Darmštatas, Vokietija), o vidutinis tarpanalinis CVA buvo 3,5 proc.

6. Statistinė analizė.

Using GLIMPSE, a validated linear mixed model power and sample size calculator51, we estimated that 10 participants would provide>90 procentų galia aptikti CPP padvigubėjimą laikotarpiu po valgio, kai I tipo klaidų lygis yra 0,05. Tyrimas nebuvo pagrįstas skirtumui tarp grupių nustatyti.

Demografiniai ir nevalgius biocheminiai duomenys buvo lyginami tarp grupių, naudojant nesuporuotą t-testą arba Kruskal-Wallis testą normaliam ir iškreiptam nuolatiniam kintamiesiems ir chi kvadrato testą kategoriškiems kintamiesiems.

Mes siekėme apibūdinti kiekvieno kartojamo parametro atsaką po valgio ir tarp jų. Norėdami tai padaryti, kiekvienam parametrui pritaikėme linijinius mišraus poveikio modelius (LMM), naudodami ribotos didžiausios tikimybės metodą ir nestruktūruotą kovariacijos matricą52. Kiekvienam LMM modeliavome grupę, kategorinį laiką ir grupės laiko sąveiką kaip fiksuotus efektus, o kiekvienam dalyviui buvo įtrauktas atsitiktinis pertraukimas, kad būtų atsižvelgta į pasikartojančių priemonių koreliaciją. Kontrolinė grupė ir laikas „0“ buvo atitinkamai naudojami kaip atskaitos grupės ir laiko reikšmės. Sąveikos terminų grupės pagal laiką koeficientų įverčiai buvo naudojami siekiant patikrinti atsako po valgio skirtumus tarp ŠKL ir kontrolinių grupių. Pritaikę kiekvieną LMM, mes taip pat atlikome post hoc porų palyginimus, kad patikrintume vidutinių verčių skirtumus tarp grupių kiekvienu laiko momentu ir patikrintume, ar kiekvienoje grupėje nukrypstama nuo pradinės nevalgius. Šiems poriniams palyginimams naudojome Bonferroni korekcijos metodą, kad pritaikytume kelis palyginimus. CPM, CPP-I, CPP-II, CPP-II dydis, PTH ir iFGF23 buvo natūraliai logaritmiškai transformuoti prieš montuodami LMM, kad būtų užtikrintas normalus likučių pasiskirstymas. Kad būtų lengviau interpretuoti, šių modelių sąveikos terminų koeficientų įverčiai buvo eksponuojami, kad būtų gauti procentinio pokyčio įverčiai. MUT LMM atveju grupės pagal laiką sąveikos terminai rodo reikšmingą atsako po valgio skirtumą tarp grupių. Norėdami toliau tirti inkstų funkcijos poveikį MUT lygiui po valgio, mes taip pat apskaičiavome plotą po kreive (AUC) pagal MUT, naudodami kubinio splaino metodą (laikas nuo 0 iki 240 min.) ir ištyrėme ryšį tarp eGFR. , AUC ir maksimali CPM koncentracija (naudojant Spearman rango koreliaciją), taip pat tarp CKD ir didžiausios MUT koncentracijos laiko (naudojant chi kvadrato testą).

Keliuose mėginiuose CPP-I (2 mėginiai kontrolinėje grupėje ir 6 CKD grupėje) arba CPP-II (5 kontrolinėje grupėje ir 10 CKD grupėje) lygiai buvo nenustatomi. Atliekant pagrindines analizes, šioms cenzūruotoms vertėms buvo naudojama apatinė tyrimo kiekybinio nustatymo riba (133 dalelės/ml). Norėdami įvertinti galimą šališkumą taikant šį metodą, atlikome jautrumo analizę, kurioje CPP-I ir CPP-II LMM buvo pakartotinai pritaikyti po to, kai buvo priskirtos kairiosios cenzūros vertės, naudojant kelių lygių Tobit regresiją, kur laikas ir grupė buvo įvesti kaip nepriklausomi kintamieji 53.

Dvipusės p reikšmės<0.05 were considered significant. All data were analyzed using Stata MP version 17.0 (StataCorp, College Station, USA) and figures were produced using GraphPad Prism version 9.2.0 (GraphPad Sofware, San Diego, USA).

Herba Cistanche

Diskusija

Mūsų žiniomis, tai yra pirmasis tyrimas, kuriame pranešama apie reikšmingą mitybos poveikį po valgio CPM, CPP-I ir CPP-II koncentracijai žmonių serume. Šis poveikis buvo būdingas asmenims, kurių inkstų funkcija normali ir sutrikusi; tačiau serumo CPM po valgio ekskursija buvo daug ryškesnė ŠKL dalyviams. Mes taip pat nustatėme ankstyvą ir trumpalaikį po valgio poveikį T50, kuris pasireiškė nepriklausomai nuo inkstų funkcijos ir kartu padidėjo fetuino-A kiekis serume.

Mūsų išvados atitinka nuostatą, kad su maistu gaunamo mineralinio kiekio absorbcija žarnyne gali tiesiogiai sukelti cirkuliuojančių CPM, CPP-I ir CPP-II susidarymą. Tai buvo pasiūlyta anksčiau 10, 15, 16, bet daugiausia pagrįsta duomenimis apie gyvūnus33, 48. Priešingai, įrodymai apie žmones buvo netiesioginiai, gauti iš žarnyno fosfatų rišiklių tyrimų su hemodializės priklausomomis CKD pacientais34, 37, 55. Nedidelis Yamada ir kt. tyrimas. pasiūlė paros CPP svyravimus serume su smailėmis po valgio, tačiau šiame tyrime buvo naudojamas senesnis tyrimo metodas, kuris negalėjo atskirai įvertinti CPM ir CPP porūšių, o visi dalyviai buvo hospitalizuoti dėl nestabilaus diabeto gydymo56. Priešingai, visi šio tyrimo dalyviai buvo kliniškai stabilūs ir, kiek žinome, pirmą kartą įrodėme, kad ekskursijos po valgio pastebimos ne tik asmenims, sergantiems lėtine inkstų liga, bet ir sveikiems suaugusiems, o tai patvirtina jų vaidmenį. CPM ir CPP susidarymo normalioje fiziologinėje reakcijoje į maisto suvartojimą.

CPM ir CPP padidėjimas serume buvo pastebėtas net ir po santykinai nedidelio ir fiziologiškai reikšmingo maistinių mineralų kiekio (1 lentelė). Priešingai, įprastesni mineralų apykaitos žymenys po valgio skyrėsi minimaliai. Ankstesni tyrimai taip pat parodė ribotą fosfato nuokrypį po valgio7, 57, išskyrus atvejus, kai tiriamieji patiria didelių farmakologinių apkrovų58, 59. Sveikatos atveju bendras fosfatų kiekis organizme yra reguliuojamas taip, kad grynoji absorbcija žarnyne atitiktų išsiskyrimą su šlapimu8. Tačiau šis atsakas nėra akimirksniu ir gali būti stebimas kelių valandų vėlavimas, kol padidėja fosfato išsiskyrimas su šlapimu, net jei fosfato kiekis yra suleidžiamas į veną8. Vietoj to, gyvūnų modeliai parodė, kad kiti, ne inkstų, mechanizmai padeda palaikyti jonų koncentraciją serume ūmiau, pasiskirstant kauluose ir kituose audiniuose59–61. Tikėtina, kad CPM ir CPP susidarymas gali būti svarbus papildomas laikinas fosfato (ir kalcio) sandėlis, galintis ūmiai apsaugoti vietines mineralines apkrovas, pvz., iš virškinimo trakto sistemos14. Fizikinės ir cheminės CPM ir CPP savybės reiškia, kad potencialiai dideli kiekiai kitaip netirpių mineralų gali egzistuoti apyvartoje be kritulių pavojaus, o tai neva palengvina mineralų saugų transportavimą dideliais kiekiais į naudojimo ar šalinimo vietas.

Mes stebėjome laikiną fetuino-A padidėjimą serume CKD grupėje. Priešingai, fetuinas-A kontrolinėse grupėse pasirodė stabilus, tačiau, kai palyginimai poromis buvo kartojami be pataisų atliekant kelis palyginimus, kontrolinės grupės 30 ir 60 min. žymiai padidėjo (papildoma S8 lentelė), o tai rodo, kad galėjome nepakankamai aptikti. pagrindinis poveikis. Be to, kad jis yra neigiamas ūminės fazės reagentas, kurio lygis yra stipriai slopinamas reaguojant į ūminį ir lėtinį uždegimą62, mažai žinoma apie kitus mechanizmus, kurie tiesiogiai reguliuoja fetuino A sintezę ir sekreciją kepenyse, o ankstesnių duomenų apie paros, arba ūmūs bet kurios rūšies po valgio pokyčiai. Atsižvelgiant į pastebėtą fetuino-A koncentracijos serume padidėjimą po maitinimo, ypač CKD grupėje, ir būtiną fetuino-A vaidmenį formuojant CPM ir CPP, įdomu apsvarstyti, ar šėrimas gali būti „jaučiamas“ naudojant dar nežinomą mechanizmą, dėl to fetuinoA išsiskyrimas kepenyse sutampa su mineralų antplūdžiu iš žarnyno. Iš tiesų, Uedono ir kt. neseniai pasiūlė, kad pats CPP gali būti fetuino A ekspresijos sukėlėjas kultivuotuose hepatocituose63. Taigi, mechanizmai, kontroliuojantys fetuino A išsiskyrimą ir jų atsaką į mineralų apkrovą, reikalauja tolesnio tyrimo.

T50 yra funkcinis serumo gebėjimo atsispirti ex vivo CPP-II susidarymui įvertinimas, atspindintis įvairių stiprinančių (įskaitant kalcį ir fosfatą) ir slopinančių (įskaitant fetuiną-A, albuminą, magnį, citratą ir bikarbonatą) kalcifikacijos faktorių derinį40. Pastebėjome ankstyvą, bet laikiną T50 padidėjimą. Tai buvo pastebėta abiejose grupėse, tačiau CKD grupėje pikas sutapo su fetuino-A padidėjimu serume. Be to, tarp visų dalyvių T50 pokytis nuo pradinio lygio buvo labai glaudžiai susijęs su fetuino-A pokyčiu serume (papildomas S2 pav.), o tai rodo, kad fetuinas-A gali būti pagrindinis veiksnys, lemiantis pastebėtus T50 pokyčius. Iš tiesų, mes neradome atitinkamų ankstyvų pokyčių po valgio kituose žinomuose T50 moduliatoriuose (serumo fosfatas, kalcis, bikarbonatas, magnis ar albuminas), nors tai neatmeta subtilesnių vieno ar šių veiksnių derinio pokyčių. . Pavyzdžiui, CKD grupėje po 120 min. buvo teigiama serumo bikarbonato sąveika pagal laiką, kuri sutapo su T50 padidėjimu. Kalbant apie fetuiną-A, taip pat buvo koreliacija tarp bikarbonato ir T50 pokyčio, palyginti su pradine verte (papildomas S4 pav.), nors tai buvo gana silpna, palyginti su koreliacija su pirmuoju (r=0.385 vs. r=0.839). Nepaisant to, „šarminis potvynis“ po valgio yra pripažintas reiškinys ir tikėtina, kad keli veiksniai prisidėjo prie stebimų po valgio T5064 pokyčių. Tiriamajame maiste taip pat buvo stebėtinai daug citrato (~ 16 mM), žinomo stipraus CPP susidarymo inhibitoriaus, tačiau, nors ir buvo šiek tiek padidėjęs citrato kiekis serume sergančiųjų CKD grupėje, šis pokytis nesutapo su pastebėtais pokyčiais. T50, taip pat nebuvo jokios bendros koreliacijos tarp T50 pokyčio ir serumo citrato abiejose grupėse. Kiti anksčiau aprašyti T50 moduliatoriai, tokie kaip pirofosfatas ir cinkas, šiame tyrime nebuvo išmatuoti. Nors šie ar kiti dar nežinomi veiksniai taip pat galėjo turėti įtakos pastebėtam T50 padidėjimui po valgio, pastebime, kad norint reikšmingai paveikti T5065, paprastai reikia gana didelių šių mažų neorganinių molekulių koncentracijos pokyčių. Priešingai nei po valgio poveikis T50, CPP-II hidrodinaminis spindulys abiejose grupėse išliko nepakitęs.

Cistanche kapsulės

Nors abiejose grupėse buvo stebimi MUT pokyčiai po valgio, MUT lygiai CKD grupėje buvo nuolat aukštesni kiekvienu laiko tašku, o grupės pagal laiką sąveikos terminai parodė, kad atsako po valgio dydis buvo žymiai didesnis. CKD dalyvių nei kontrolinės grupės. Atitinkamai, atliekant tiriamąją analizę, buvo stipri koreliacija tarp eGFR ir CPM AUC ir didžiausios koncentracijos. Didžiausias CPM lygis taip pat buvo linkęs atsirasti vėliau CKD grupėje. Teoriškai šie skirtumai gali rodyti padidėjusį CPM gamybą po mitybos ir (arba) sumažėjusio gebėjimo išvalyti CPM sergantiesiems CKD. Pastarąjį patvirtina naujausi Koeppert ir kt. duomenys, kurie naudojo gyvą dviejų fotonų mikroskopiją, kad parodytų, kad cirkuliuojantis CPM daugiausia pašalinamas glomerulų filtracijos būdu pelėms29. Todėl pagrįsta prognozė gali būti, kad gebėjimas išvalyti MUT pablogėja, kai GFR mažėja. Tačiau kiti mineralų homeostazės aspektai, įskaitant kaulų apykaitą66, ir uždelstas ūminio fosfatų kiekio išsiskyrimas per inkstus7, 59 taip pat dažnai pastebimi sergant CKD ir galėjo turėti įtakos po valgio padidėjusiam lygiui. Naujausi įrodymai suabejojo ​​ilgalaike nuomone, kad CKD veikia grynąją fosfato absorbciją žarnyne57, 67, 68. Tačiau atkreipėme dėmesį, kad šeši iš 14 asmenų, sergančių lėtine inkstų liga, vartojo cholekalciferolį. Atsižvelgdami į galimą vitamino D stimuliuojamąjį poveikį mineralų absorbcijai žarnyne, atlikome ad hoc tiriamąją analizę, kad patikrintume, ar maistinio vitamino D vartojimas paveikė ūmų CPM, CPP-I ir CPP-II atsaką į maitinimą (papildomos lentelės). S9–S11). Išskyrus vieną teigiamą CPP-I sąveiką po 30 min. vartojant cholekalciferolį, visi kiti sąveikos terminai ir post hoc CPM, CPP-I ir CPP-II palyginimai poromis nebuvo reikšmingi, o tai rodo, kad cholekalciferolis Mažai tikėtina, kad vartojimas turėjo reikšmingos įtakos CPM/CPP kinetikai po valgio. Nors mažas imties dydis ir galimybė suklaidinti gali neleisti daryti galutines išvadas, poveikio nebuvimas taip pat gali atspindėti dominuojančią fosfato absorbciją tarpląsteliniu keliu, kai mineralo yra gausu, o tai nėra aktyviai reguliuojama vitamino D ašies69.

Priešingai nei CPM, mes nepastebėjome stipraus poveikio inkstų funkcijai nei CPP-I, nei CPP-II. Skirtingai nuo CPM, cirkuliuojantis CPP iš kraujotakos pirmiausia pašalinamas ne inkstų mechanizmais. Gyvūnų ir in vitro modeliai rodo, kad CPP-I greitai pašalina daugiausia kepenų sinusoidines endotelio ląsteles28, o CPP-II - iš nuolatinių kepenų ir blužnies makrofagų70. Tikėtina, kad nors mūsų CKD grupės dalyviai parodė pakitusį CPM metabolizmą, šių atskirų CPP klirenso būdų pakako normaliam CPP profiliui po valgio palaikyti. Tikėjomės, kad CKD grupė turės pastebimai didesnį CPP lygį, palyginti su ankstesniais tyrimais pagrįstomis kontrolinėmis grupėmis, nors į šiuos tyrimus buvo įtraukti pacientai, sergantys labiau pažengusia CKD, kurie buvo priklausomi nuo dializės33 arba naudojo senesnį ir netiesioginį CPP matavimo metodą20, 23. Asmenys, sergantys labiau pažengusia CKD nei čia tirti, gali turėti didesnių CPP nevalgius ir po valgio skirtumų. Mūsų CKD ir kontrolinės grupės CPP atskyrimo stoka taip pat gali būti dėl riboto dalyvių skaičiaus, kuris taip pat apribojo mūsų galimybę oficialiai patikrinti CKD stadijos poveikį (papildomas S6 pav.). Iš tiesų, mūsų tyrimas buvo pagrįstas reakcijų po valgio tyrimu, o ne skirtumais tarp grupių. Pažymėtina, kad kontrolinėje grupėje CPP-I nevalgius grįžo į nevalgius anksčiau nei CKD dalyviai, o CPP-II grupė pagal laiką sąveikavo teigiamai 120 min. Abi išvados gali rodyti, kad didesnėje grupėje galėjome pastebėti ryškesnį poveikį tarp grupių. Didesnis analitinis srauto citometrija pagrįstų CPP matavimų netikslumas taip pat galėjo prisidėti prie nulinių išvadų.

Mūsų tyrimas ne tik suteikia naujų įžvalgų apie CPM ir CPP metabolizmo fiziologiją, bet ir turi tiesioginės reikšmės optimizuojant šių naujų mineralų metabolizmo žymenų naudojimą būsimuose tyrimuose. Nors kiekvienas iš šių naujų tyrimų buvo perspektyvus ankstyvame klinikiniame darbe, labai nedaug tyrimų buvo pranešta43 arba buvo kontroliuojama nevalgius / absorbcijos būklė46,56. Šiame tyrime keli asmenys turėjo nenustatytus CPP-I arba CPP-II lygius nevalgius ir ankstyvuoju laikotarpiu po valgio, o šis didelis badavimo poveikis serumo CPP savaime anksčiau nebuvo praneštas ir yra reikšmingas finansavimas. Priešingai, CPM lygis nevalgius buvo išmatuojamas ir žymiai didesnis CKD grupėje nei kontrolinėje grupėje, o tai rodo, kad nuolatinis CPM padidėjimas nebūtinai gali pasireikšti padidėjusiu CPP lygiu tiems, kurie serga nuo dializės nepriklausančiu CKD.

Ankstesni epidemiologiniai tyrimai parodė ryšį tarp padidėjusio CPM ir CPP lygių su įvairiais pakaitiniais kraujagyslių ligų žymenimis21, 23, 24, taip pat su širdies ir kraujagyslių reiškiniais25 ir mirtingumu dėl visų priežasčių22. Be to, laboratoriniai tyrimai parodė patikimus mechanizmus, kuriais CPP gali tarpininkauti šiems patologiniams kraujagyslių rezultatams 26–28. Tačiau, nors tyrimai in vitro parodė, kad daugelis šių toksinių poveikių sukeliami priklausomai nuo dozės, jei CPP atlieka normalų fiziologinį vaidmenį sveikatai, neaišku, kada šios dalelės gali tapti žalingos. Čia atskleistos žinios apie mitybos poveikį CPP kinetikai gali būti labai svarbios norint geriau suprasti šį procesą. CPM ir CPP patologinio poveikio pasireiškimo slenkstinė koncentracija gali būti pasiekta (bent jau iš pradžių) tik po valgio in vivo. Jei taip, dinaminis atsako po valgio tyrimas gali suteikti papildomų galimybių įvertinti ankstesnius sutrikusio mineralų metabolizmo pasireiškimus, taip pat susijusių kraujagyslių ligų riziką. Kita svarbi galimybė yra ta, kad CPP-I ir CPP-II sudėtis, taigi ir būdingas toksiškumas, skiriasi priklausomai nuo sveikatos ir CKD45.

Cistanche papildas

Apribojimai

Pripažįstame, kad šis tyrimas turi keletą apribojimų, įskaitant ribotą pacientų skaičių, kaip jau buvo aptarta. Pažymėtina, kad mes taip pat vartojome standartizuotą maistą, kuris buvo valgomas po naktinio pasninko, todėl negalime komentuoti kintančios valgio sudėties poveikio ar vėlesnių valgymų, vartojamų visą likusią dienos dalį. Mes pasirinkome patiekalą pagal jo komercinį prieinamumą, leidžiantį standartizuoti dalyvius ir todėl, kad jis atspindėjo fiziologiškai svarbias mitybos apkrovas (1 lentelė). Tačiau gali būti, kad jei dalyviai patyrė didesnį mineralų kiekį, galėjo būti akivaizdus tolesnis atskyrimas tarp normalios ir sutrikusios inkstų funkcijos. Panašiai, atsižvelgiant į tai, kad asmenis stebėjome tik keturias valandas po valgio, galima įsivaizduoti, kad vėlesnių valgymų kumuliacinis poveikis taip pat galėjo dar labiau išskirti grupes.

Mes neradome išmatų ar šlapimo, todėl negalime komentuoti viso tyrimo metu absorbuotų ar pašalintų mineralų. Manome, kad kiekvienos priemonės pokyčiai, pastebėti po maitinimo, yra tiesiogiai susiję su mitybos vartojimu. Šią prielaidą netiesiogiai patvirtina išsamūs vaizdo tyrimai, rodantys kalcio ir fosfato jonų srautą po valgio57, taip pat tiesioginiai tyrimų su gyvūnais įrodymai, rodantys, kad ūminis pelių burnos zondavimas buferiniu fosfato tirpalu sukelia CPM/CPP šuolius serume48. Nepaisant to, mes nepastebėjome dalyvių ilgomis badavimo sąlygomis, todėl negalime įtikinamai atsižvelgti į su mityba nesusijusius paros svyravimus bet kuriame iš tirtų parametrų. Tačiau mes turėjome du nevalgius mėginius, kurių vidurkis buvo naudojamas kaip „laikas 0“, o šių nevalgiusių mėginių kintamumas buvo nereikšmingas, palyginti su pokyčių dydžiu, pastebėtu laikotarpiu po valgio.

Naudojome Bonferroni metodą, kad atsižvelgtume į kelis kiekvieno parametro post hoc porinius palyginimus tarp grupių ir jų viduje. Tai neabejotinai yra konservatyvus požiūris ir, mūsų žiniomis, joks kitas panašus mineralų metabolizmo po valgio šėrimo tyrimas nepriimtas. Pasirinkome šį metodą, atsižvelgdami į daugybę laiko taškų ir atliktų palyginimų ir motyvavome, kad geriau sutelkti dėmesį į patikimiausius ir reikšmingiausius signalus. Tačiau dėl to galėjome praleisti mažesnius, bet potencialiai reikšmingus efektus. Mes nepataisėme kelių skirtingų mineralų parametrų bandymų, atsižvelgiant į tarpusavyje susijusių fiziologiškai susijusių pokyčių tikimybę.

Cistanche tubulosa

Išvada

Mūsų tyrimas pirmą kartą atskleidė, kad maistinių medžiagų suvartojimas sukelia CPM ir CPP susidarymą kraujyje, kaip įprastą fiziologinį atsaką į maitinimą. Šie atradimai patvirtina hipotezę, kad CPM / CPP susidarymas padeda sukurti mineralų apkrovą po valgio, veikiant kaip laikina cirkuliuojanti masinių kalcio fosfatų saugykla, galiausiai skirta panaudoti / saugoti (pvz., mineralinis pirmtakas kaulų mineralizacijai) arba pašalinimas. Mes taip pat stebėjome didesnį CPM kiekį serume nevalgius ir didesnį atsaką po valgio tiems, kurių inkstų funkcija sutrikusi, o tai rodo, kad sergant CKD CPM metabolizmas yra akivaizdžiai pakitęs. CPM/CPP po valgio analizė gali suteikti naujų įžvalgų apie mechanizmus, siejančius per didelį kalcio ir fosfatų suvartojimą su padidėjusia širdies ir kraujagyslių ligų rizika pacientams, kurių mineralų išsiskyrimas yra sutrikęs. Kalbant plačiau, šie nauji atradimai pabrėžia svarbų, bet dažnai nepaisytą koloidinės biochemijos indėlį į mineralų homeostazę.

Nuorodos

1. Magalhães, MCF, Marques, PAAP ir Correia, RN Biomineralizacija – medicininiai tirpumo aspektai (red. Königsberger, E. & Königsberger, L.). 71–123. (Wiley, 2006).

2. Holt, C., Lenton, S., Nylander, T., Sorensen, ES & Teixeira, SC Mineralization of soft and hard audinio and the stability of biofluids. J. Struktūra. Biol. 185, 383–396 (2014).

3. Reznikov, N., Steele, JAM, Fratzl, P. & Stevens, MM Medžiagų mokslo vizija apie ekstraląstelinės matricos mineralizaciją. Nat. Kunigas Mater. 1, 16041 (2016).

4. Smith, ER Kraujagyslių kalcifikacija uremijoje: Naujojo amžiaus sampratos apie senatvės problemą. Metodai Mol. Biol. 1397, 175–208 (2016).

5. Chen, J. ir kt. Vainikinių arterijų kalcifikacija ir širdies ir kraujagyslių ligų bei mirties rizika pacientams, sergantiems lėtine inkstų liga. JAMA Cardiol. 2, 635–643 (2017).

6. Kestenbaum, BR ir kt. Vainikinių arterijų kalcifikacijos dažnis ir progresavimas sergant lėtine inkstų liga: daugiatautis aterosklerozės tyrimas. Kidney Int. 76, 991–998 (2009).

7. Isakova, T. ir kt. Mineralų metabolizmas po valgio ir antrinis hiperparatiroidizmas ankstyvoje CKD. J. Am. Soc. Nefrolis. 19, 615–623 (2008).

8. Scanni, R., vonRotz, M., Jehle, S., Hunter, HN & Krapf, R. Te human response to acute enteral and parenteral phosphate loads. J. Am. Soc. Nefrolis. 25, 2730–2739 (2014).

9. Pasch, A., Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Fosfatas, kalcifikacija kraujyje ir mineralų stresas: fiziologinė kraujo mineralų buferio sistema ir jos ryšys su širdies ir kraujagyslių rizika. Tarpt. J. Nefrolis. 2018 m., 9182078 (2018 m.).

10. Jahnen-Dechent, W. ir kt. Purvas kraujyje: baltymų ir mineralų kompleksų ir tarpląstelinių pūslelių vaidmuo biomineralizacijoje ir kalcifikacijoje. J. Struktūra. Biol. 212, 107577 (2020).

11. Schinke, T. ir kt. Serumo baltymas alfa2-HS glikoproteinas/fetuinas slopina apatito susidarymą in vitro ir mineralizuoja kalvarijos ląsteles. Galimas vaidmuo mineralizacijoje ir kalcio homeostazėje. J. Biol. Chem. 271, 20789–20796 (1996).

12. Heiss, A. ir kt. Kalcifikacijos slopinimo alfa 2-HS glikoproteinu/fetuinu-A struktūrinis pagrindas. Koloidinių kalciproteino dalelių susidarymas. J. Biol. Chem. 278, 13333–13341 (2003).

13. Cai, MM, Smith, ER ir Holt, SG. Fetuino-A vaidmuo prekybai mineralais ir nusėdimu. Bonekey Rep. 4, 672 (2015).

14. Smith, ER, Hewitson, TD ir Jahnen-Dechent, W. Kalciproteino dalelės: blogai elgiasi mineralas? Curr. Nuomonė. Nefrolis. Hipertenzija. 29, 378–386 (2020).

15. Jahnen-Dechent, W., Schäfer, C., Ketteler, M. & McKee, MD Mineraliniai šaperonai: fetuino-A ir osteopontino vaidmuo slopinant ir regresuojant patologinę kalcifikaciją. J. Mol. Med. (Berl.) 86, 379–389 (2008).

16. Jahnen-Dechent, W. & Smith, ER Gamtos vaistas nuo fosfatų bėdų: Kalciproteino dalelės reguliuoja sisteminę mineralų apykaitą. Kidney Int. 97, 648–651 (2020).

17. Schafer, C. ir kt. Serumo baltymas alfa 2-Heremans-Schmid glikoproteinas/fetuinas-A yra sistemiškai veikiantis negimdinio kalcifikacijos inhibitorius. J. Clin. Investuoti. 112, 357–366 (2003).

18. Herrmann, M. ir kt. Lumeno kalcifikacija ir mikrovaskulopatija pelėms, kurioms trūksta fetuino A, sukelia daugelio organų sergamumą. PLoS ONE 15, e0228503 (2020).

19. Heiss, A., Pipich, V., Jahnen-Dechent, W. & Schwahn, D. Fetuin-A yra mineralinis nešiklis: mažo kampo neutronų sklaida suteikia naujų įžvalgų apie Fetuin-A kontroliuojamą kalcifikacijos slopinimą. Biofizė. J. 99, 3986–3995 (2010).

20. Smith, ER ir kt. Serumo fetuino-A koncentracija ir fetuino A turinčios kalciproteino dalelės pacientams, sergantiems lėtine uždegimine liga ir inkstų nepakankamumu. Nephrology (Carlton) 18, 215–221 (2013).

21. Smith, ER ir kt. Fosforilintos fetuino A turinčios kalciproteino dalelės yra susijusios su aortos standumu ir procikline aplinka pacientams, sergantiems CKD prieš dializę. Nefrolis. Surinkite. Transplantacija. 27, 1957–1966 (2012).

22. Smithas, ER ir kt. Serumo kalcifikacijos polinkis prognozuoja mirtingumą nuo visų priežasčių sergant CKD iki dializės. J. Am. Soc. Nefrolis. 25, 339–348 (2014).

23. Hamano, T. ir kt. Fetuino ir mineralų kompleksas atspindi nekaulinį kalcifikacijos stresą sergant CKD. J. Am. Soc. Nefrolis. 21, 1998–2007 (2010).

24. Nakazato, J. ir kt. Kalciproteino dalelių, išmatuotų nauju metodu, susiejimas su vainikinių arterijų plokštelėmis pacientams, sergantiems vainikinių arterijų liga: skerspjūvio tyrimas. J. Cardiol. 74, 428–435 (2019).

25. Gatate, Y. ir kt. Vidutinės trukmės nuspėjamoji kalciproteino dalelių vertė palaikomosios hemodializės pacientams, remiantis gelio filtravimo tyrimu. Aterosklerozė 303, 46–52 (2020).

26. Cai, MMX, Smith, ER, Tan, SJ, Hewitson, TD ir Holt, SG. Antrinių kalciproteino dalelių vaidmuo lėtinės inkstų ligos mineralizacijos paradokse. Calcif. Audinys. Tarpt. 101, 570–580 (2017).

27. Aghagolzadeh, P. ir kt. Kraujagyslių lygiųjų raumenų ląstelių kalcifikaciją sukelia antrinės kalciproteino dalelės ir sustiprina naviko nekrozės faktorius alfa. Aterosklerozė 251, 404–414 (2016).

28. Koppert, S. ir kt. Kalciproteino dalelių klirensas iš ląstelių ir biologinis aktyvumas priklauso nuo jų brendimo būsenos ir kristališkumo. Priekyje. Immunol. 9, 1991 (2018).

29. Koeppert, S. ir kt. Tiesioginis kalciproteino dalelių klirenso ir receptorių įsisavinimo vaizdas: kalciproteino monomerų vaidmuo. Priekyje. Ląstelė. Dev. Biol. 9, 633925 (2021).

30. Šiškova, D. ir kt. Kalcio fosfato bionai sukelia intimos hiperplaziją nepažeistose normolipideminių žiurkių aortose dėl endotelio pažeidimo. Tarpt. J. Mol. Sci. 20, 5728 (2019).

31. Kuro-o, M. Į fosfatus orientuota lėtinės inkstų ligos patofiziologijos ir terapijos paradigma. Kidney Int. Suppl. 2011 (3), 420–426 (2013).

32. Miura, Y. ir kt. Plazmos kalciproteino dalelių, turinčių skirtingas fizines savybes, identifikavimas ir kiekybinis įvertinimas pacientams, sergantiems lėtine inkstų liga. Sci. Rep. 8, 1256 (2018).

33. Smith, ER ir kt. Naujas fluorescenciniu zondu pagrįstas srauto citometrinis mineralų turinčių nanodalelių serume tyrimas. Sci. Rep. 7, 5686 (2017).

34. Nakamura, K. ir kt. Lantano karbonato poveikis kalciproteino dalelėms hemodializuojamiems pacientams. Clin. Exp. Nefrolis. 24, 323–329 (2020).

35. Tiong, MK ir kt. Vidutinio dydžio dializatoriaus poveikis su baltymais susietiems ureminiams toksinams ir mineralinių medžiagų apykaitos žymenims pacientams, kuriems atliekama hemodializė. Hemodialinis. Tarpt. https://doi.org/10.1111/hdi.12924 (2021).

36. Tiong, MK, Smith, ER, Toussaint, ND, Al-Khayyat, HF ir Holt, SG Kalciproteino dalelių mažinimas suaugusiesiems, vartojantiems infliksimabą nuo lėtinės uždegiminės ligos. JBMR Plus 5, e10497 (2021).

37. Smith, ER, Pan, FFM, Hewitson, TD, Toussaint, ND ir Holt, SG Sevelamero poveikis kalciproteino dalelėms hemodializuojamų pacientų organizme: sevelameris ir kalcis sumažina fetuino A turinčių kalciproteino dalelių skaičių atliekant dializę (SCaRF). kontroliuojamas tyrimas. Kidney Int. Rep. 5, 1432–1447 (2020).

38. Ruderman, I., Smith, ER, Toussaint, ND, Hewitson, TD ir Holt, SG Kaulų ir mineralų metabolizmo išilginiai pokyčiai nutraukus cinakalceto vartojimą dializuojamiems pacientams, sergantiems antrine hiperparatiroidizmu. BMC Nephrol. 19, 113 (2018).

39. Bressendorf, I. ir kt. Magnio dializės padidėjimo poveikis kalciproteino dalelėms, uždegimui ir kaulų žymenims: atsitiktinių imčių kontroliuojamo klinikinio tyrimo post hoc analizė. Nefrolis. Surinkite. Transplantacija. 36, 713–721 (2021).

40. Pasch, A. ir kt. Nanodalelėmis pagrįstas testas matuoja bendrą polinkį kalcifikuotis serume. J. Am. Soc. Nefrolis. 23, 1744–1752 (2012).

41. Eelderink, C. ir kt. Serumo kalcifikacijos polinkis ir širdies ir kraujagyslių bei mirtingumo dėl visų priežasčių rizika bendroje populiacijoje: PREVENT tyrimas. Ateroskleris. Tromb. Vasc. Biol. 40, 1942–1951 (2020).

42. Bundy, JD ir kt. Serumo kalcifikacijos polinkis ir vainikinių arterijų kalcifikacija pacientams, sergantiems CKD: Te CRIC (chroninio inkstų nepakankamumo kohortos) tyrimas. Esu. J. Inkstas. Dis. 73, 806–814 (2019).

43. Bundy, JD ir kt. Serumo kalcifikacijos polinkis ir klinikiniai CKD reiškiniai. Clin. J. Am. Soc. Nefrolis. 14, 1562–1571 (2019).

44. Pasch, A. ir kt. Kraujo kalcifikacijos polinkis, širdies ir kraujagyslių reiškiniai ir pacientų, kuriems atliekama hemodializė, išgyvenamumas EVOLVE tyrime. Clin. J. Am. Soc. Nefrolis. 12, 315–322 (2017).

45. Smith, ER, Hewitson, TD, Hanssen, E. & Holt, SG Biocheminė kalciproteino dalelių transformacija uremijoje. Bone 110, 355–367 (2018).

46. ​​Chen, W. ir kt. Serumo kalciproteino dalelių dydžio ir transformacijos laiko sąsajos su arterijų kalcifikacija, arterijų standumu ir mirtingumu hemodializuojamiems pacientams. Esu. J. Inkstas Dis. 77, 346–354 (2021).

47. Chen, W. ir kt. Pacientai, sergantys pažengusia lėtine inkstų liga ir kraujagyslių kalcifikacija, turi didelį hidrodinaminį antrinių kalciproteino dalelių spindulį. Nefrolis. Surinkite. Transplantacija. 34, 992–1000 (2019).

48. Akiyama, KI ir kt. Kalciproteino dalelės reguliuoja fibroblastų augimo faktoriaus{1}} ekspresiją osteoblastuose. Kidney Int. 97, 702–712 (2020).

49. Smith, ER Kalciproteino dalelės: mineralinis biomarkeris, kurį reikia geriau išmatuoti. Aterosklerozė 303, 43–45 (2020).

50. Smith, ER Fetuino A turinčių kalciproteino dalelių išskyrimas ir kiekybinis nustatymas iš biologinių skysčių. Metodai Mol. Biol. 1397, 221–240 (2016).

51. Guo, Y., Logan, HL, Glueck, DH & Muller, KE Mėginio dydžio parinkimas tyrimams su kartotiniais matavimais. BMC Med. Res. Metodas. 13, 100 (2013).

52. Liu, C., Cripe, TP & Kim, MO Statistinės problemos išilginės duomenų analizės, skirtos gydymo efektyvumo tyrimams biomedicinos moksluose. Mol. Ter. 18, 1724–1730 (2010).

53. Tobin, J. Ryšių įvertinimas ribotiems priklausomiems kintamiesiems. Econometrica 26, 24–36 (1958).

54. Ter Meulen, KJ ir kt. Citrinos rūgšties dializatas pagerina hemodializuojamų pacientų polinkį kalcifikuotis: daugiacentris perspektyvus atsitiktinių imčių kryžminis tyrimas. PLoS ONE 14, e0225824 (2019).

55. Tiem, U. ir kt. Fosfatų rišiklio terapijos su sakrofero oksihidroksidu poveikis lėtinės hemodializės pacientų kalcifikacijos polinkiui: atsitiktinių imčių, kontroliuojamas, kryžminis tyrimas. Clin. Kidney J. 14, 631–638 (2021).

56. Yamada, H. ir kt. Kasdienis kalciproteino dalelių kiekio serume kintamumas ir jų ryšys su mineralų apykaitos parametrais: skerspjūvio bandomasis tyrimas. Nephrology (Carlton), 23, 226–230 (2018).

57. Stremke, ER ir kt. Fosforo absorbcija žarnyne vidutinio sunkumo CKD ir sveikiems suaugusiems žmonėms buvo nustatyta naudojant radioizotopinį žymeklį. J. Am. Soc. Nefrolis. 32, 2057–2069 (2021).

58. Volk, C. ir kt. Ūmus neorganinio fosforo priedo poveikis mineralų metabolizmui ir kardiometaboliniams rizikos veiksniams sveikiems asmenims. J. Clin. Endokrinolis. Metab. 107, e852–e864 (2022).

59. Turner, ME ir kt. Sutrikusi fosfatų tolerancija buvo atskleista po ūmaus burnos poveikio. J. Kaulininkas. Res. 33, 113–122 (2018).

60. Tomas, L. ir kt. Ūminiam prisitaikymui prie geriamojo ar intraveninio fosfato reikia prieskydinės liaukos hormono. J. Am. Soc. Nefrolis. 28, 903–914 (2017).

61. Zelt, JG ir kt. Ūmus audinių mineralų nusėdimas, reaguojant į fosfato impulsą eksperimentinėje CKD. J. Kaulininkas. Res. 34, 270–281 (2019).

62. Lebreton, JP ir kt. Žmogaus alfa 2 HS glikoproteino koncentracija serume uždegiminio proceso metu: įrodymai, kad alfa 2 HS glikoproteinas yra neigiamas ūminės fazės reagentas. J. Clin. Investuoti. 64, 1118–1129 (1979).

63. Uedono, H. ir kt. Fetuino A turinčių kalciproteino dalelių poveikis potransliaciniams fetuino A modifikacijoms HepG2 ląstelėse. Sci. Rep. 11, 7486 (2021).

64. Niv, Y. & Fraser, GM Te šarminio potvynio reiškinys. J. Clin. Gastroenterolis. 35, 5–8 (2002).

65. Smith, ER, Hewitson, TD & Holt, SG Diagnostiniai kraujagyslių kalcifikacijos tyrimai. Adv. Lėtinė inkstų liga. 26, 445–463 (2019).

66. Sprague, SM ir kt. Diagnostinis kaulų apykaitos žymenų ir kaulų histologijos tikslumas pacientams, sergantiems CKD, gydomiems dializėmis. Esu. J. Inkstas Dis. 67, 559–566 (2016).

67. Vorland, CJ ir kt. Inkstų ligos progresavimas nesumažina žarnyno fosforo absorbcijos lėtinės inkstų ligos ir mineralinio kaulų sutrikimo žiurkės modelyje. J. Kaulininkas. Res. 35, 333–342 (2020).

68. Marks, J. ir kt. Žarnyno fosfato absorbcija lėtinio inkstų nepakankamumo modelyje. Kidney Int. 72, 166–173 (2007).

69. Hill Gallant, KM & Vorland, CJ Fosforo absorbcija žarnyne: naujausi transliacinių ir klinikinių tyrimų rezultatai. Curr. Nuomonė. Nefrolis. Hipertenzija. 30, 404–410 (2021).

70. Herrmann, M. ir kt. Fetuino A turinčių kalciproteino dalelių klirensas yra tarpininkaujamas scavenger receptorių A. Circ. Res. 111, 575–584 (2012).

71. Sanitarium Health Food Company. UP&GO™ vanilinio ledo skonio. https://www.sanitarium.com.au/products/up-and-go/up-and-go/ vanilla-ice-favor (2021).

72. Australijos vyriausybės nacionalinė sveikatos ir medicinos tyrimų taryba. Australijos ir Naujosios Zelandijos maistinių medžiagų pamatinės vertės. https://www.nrv.gov.au/nutriens (2021).

Markas K.Tiongas1,2, Michaelas MX Cai1, Nigelas D.Toussaintas1,2, Svenas-JeanTanas1,2, Andreasas Paschas 3,4,5 ir Edwardas R. Smithas1,2

1 Nefrologijos skyrius, Karališkoji Melburno ligoninė, Grattan Street, Parkville, VIC 3052, Australija.

2 Medicinos departamentas (RMH), Melburno universitetas, Parkvilis, Australija.

3 Calciscon AG, Bielis, Šveicarija.

4 Lindenhofspital Bern, Bern, Šveicarija.

5 Johaneso Keplerio universiteto fiziologijos ir patofiziologijos katedra, Lincas, Austrija.