Terapinės hipotermijos poveikis inkstų pažeidimui žiurkės asfiksinio širdies sustojimo modelio atveju: Α Dėmesys išgyvenamumui, patofiziologijai ir antioksidaciniams fermentams
Mar 25, 2022
TAIP EUN KIM1*, HA-YOUNG SHIN2*, EUI-YONG LEE2, YEO-JIN YOO2, RYUN-HEE KIM2, ET AL
Abstraktus.
Nors daugelio organų disfunkcija yra susijusi su išgyvenamumu po širdies sustojimo (ca), dauguma iki šiol atliktų tyrimų buvo sutelkti į širdis ir smegenis, o keliuose tyrimuose buvo nagrinėjamas inkstų nepakankamumas. Todėl šio tyrimo tikslas buvo ištirti terapinės hipotermijos poveikį išgyvenamumui, patofiziologijai ir antioksidaciniams fermentams žiurkių inkstuose po asfiksijos CA. Žiurkės buvo paaukotos vieną dieną po CA. Išgyvenamumas, kuris buvo įvertintas naudojant Kaplan-Meier analizę, buvo 42,9 procento vieną dieną po maždaug. Tačiau hipotermija, kuri buvo sukelta po ca, žymiai padidino išgyvenamumą (71,4 proc.). žiurkėms, sergančioms normotermija, karbamido azoto kiekis serume buvo reikšmingai padidėjęs vieną dieną po maždaug. be to, kreatinino kiekis serume buvo reikšmingai padidėjęs vieną dieną po CA. Tačiau CA žiurkėms, patyrusioms hipotermiją, karbamido azoto ir kreatinino kiekis žymiai sumažėjo po maždaug. Histocheminis dažymas atskleidė reikšmingą laikiną inkstų pažeidimo padidėjimą po to, kai normotermijos grupei buvo atlikta maždaug. Tačiau hipotermijos grupėje inkstų pažeidimas žymiai sumažėjo. imunohistocheminė inkstų analizė atskleidė reikšmingą antioksidantų fermentų (vario-cinko superoksido dismutazės, mangano superoksido dismutazės, glutationo peroksidazės ir katalazės) sumažėjimą normotermijos grupėje. Tačiau hipotermijos grupėje šie fermentai buvo žymiai padidėję po maždaug. Apskritai rezultatai atskleidė, kad inkstų funkcijos sutrikimas po asfiksijos gali būti stipriai susijęs su ankstyvu išgyvenamumu, o terapinė hipotermija sumažino inkstų pažeidimą dėl veiksmingų antioksidacinių mechanizmų.
Raktiniai žodžiai: asfiksinis širdies sustojimas, po širdies sustojimo sindromas, hipotermijos gydymas, inkstai, histopatologija, antioksidaciniai fermentai
Kontaktas:joanna.jia@wecistanche.com
cistanche prarastos imperijos žolelėsneleidžiainkstų liga, spustelėkite čia, kad gautumėte pavyzdį
Įvadas
Širdies sustojimas (ca), taip pat žinomas kaip širdies ir plaučių sustojimas arba kraujotakos sustojimas, susijęs su staigiu normalios kraujotakos nutraukimu dėl to, kad širdis nesugeba tinkamai pumpuoti kraujo (1). gali sukelti viso kūno išemiją, dėl kurios pažeidžiami keli organai, įskaitant smegenis, širdį, inkstus ir kepenis. Dauguma tyrimų, kuriuose dalyvavo maždaug per pastarąjį pusšimtį metų, buvo skirti sėkmingo spontaniškos cirkuliacijos (roSc) grįžimo greičio gerinimui, o tai padarė didelę pažangą (2–4). Nors neatidėliotinas gaivinimas gali pagerinti roSc, išgyvenamumas esant prastai prognozei kelia susirūpinimą (5–7). Po širdies sustojimo sindromas (PcaS) reiškia patofiziologines roSc pasekmes po sėkmingo kardiopulmoninio gaivinimo (cPr) po maždaug (8). PcaS yra pagrindinė sumažėjusio išgyvenamumo po roSc priežastis (9). Ankstyvojo laikotarpio PcaS pacientų išgyvenamumas yra tik 30 procentų (5). Nėra jokių abejonių, kad širdis ir smegenys yra svarbūs PcaS organai. Tuo tarpu tyrimais retai buvo tiriamas inkstų nepakankamumas po maždaug (1, 10, 11). Laikinas inkstų funkcijos sutrikimas yra dažnas pacientams, išgyvenusiems apie (12). Inkstų funkcijos sutrikimo dažnis ir poveikis po ca nėra gerai aprašytas (13). be to, mūsų ankstesnis tyrimas parodė, kad mažas ankstyvas išgyvenamumas po roSc eksperimentiniuose tyrimuose (14) gali būti stipriai susijęs su inkstų nepakankamumu, pvz., ūminiu inkstų pažeidimu. viena dažniausių ūminio inkstų pažeidimo priežasčių yra apie (15). Ūminis inkstų pažeidimas yra įprastas PcaS, pasireiškiantis ~ 30 procentų ligoninėje esančių pacientų, sergančių maždaug (16).
reaktyviosios deguonies rūšys (roS) sudarytos iš daugybės deguonies tarpinių produktų, įskaitant laisvojo radikalo superoksido anijoną (o2•-), neradikalinį vandenilio peroksidą (H2o2), labai reaktyvųjį hidroksilo laisvąjį radikalą (OH•), peroksinitritą (onoo). , ir vienkartinis deguonis (1o2) (17). Nustatyta, kad roS vaidina svarbų vaidmenį sergant keliomis eksperimentinėmis inkstų ligomis, tokiomis kaip ūminis išeminis inkstų nepakankamumas, inkstų transplantato atmetimas, ūminis glomerulonefritas ir toksinės inkstų ligos (18). Yra reikšmingų įrodymų, patvirtinančių roS sintezę iškart po ūminio išeminio insulto (19) ir ūminio miokardo infarkto (20). Yra žinoma, kad roS yra svarbus išeminėms ligoms, tokioms kaip insultas ir miokardo infarktas. Pavyzdžiui, Hackenhaar ir kt. (21) pranešė, kad pacientų, sergančių PcaS, kraujyje susidaro roS; tačiau tyrimais retai buvo tiriamas roS susidarymas inkstuose po maždaug ankstyvojo periodo po PcaS (22, 23).
Dėl šios priežasties buvo iškelta hipotezė, kad roS yra svarbus inkstų pažeidimui po ca ir prisideda prie mažo išgyvenamumo ankstyvosiose PcaS stadijose. Norint ištirti šią hipotezę, žiurkėms buvo sukeltas asfiksijos ca ir buvo stebimas išgyvenamumas ankstyvosiose PcaS stadijose. Be to, buvo atlikta neatidėliotina ir uždelsta hipotermija, siekiant padidinti mažą išgyvenamumą, susijusį su PcaS po roSc. Be to, inkstų funkcijos sutrikimas buvo ištirtas histopatologiškai ir įvertinti roS sukelti pokyčiai, tokie kaip vario-cinko superoksido dismutazė (Sod-1), mangano superoksido dismutazė (Sod-2), katalazė (caT) ir glutationo peroksidazė (GPX). atliekant imunohistocheminę analizę po roSc.
cistanche pharma special
medžiagos ir metodai
Eksperimentiniai gyvūnai ir grupės.Iš viso 62 Sprague-Dawley (Sd) žiurkių patinai (svoris, 270–300 g; amžius, 10 savaičių) buvo gauti iš Jeonbuk nacionalinio universiteto (iksanas, Korėjos Respublika) eksperimentinių gyvūnų centro. Jie buvo laikomi 23 ± 2 ° C temperatūroje ir 60 ± 10 procentų drėgme, 12 valandų šviesos / tamsos ciklo metu. Jiems buvo suteikta nemokama prieiga prie maisto ir vandens. Visi eksperimentiniai protokolai buvo patvirtinti Jeonbuk nacionalinio universiteto institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto, remiantis etinėmis procedūromis ir moksline priežiūra (patvirtinimo Nr. JBnu 2020-084).
Eksperimentiniai gyvūnai buvo suskirstyti į tris kategorijas [fiktyviosios operacijos grupė, ca pagal normotermiją ir gydymas ca bei hipotermija (HT)] taip: i) I grupė, fiktyvi grupė (n=5) buvo palaikoma normotermijos sąlygomis. be ca; ii) ii grupė – normotermijos grupė be hipotermijos (33˚C) gydymo po CA (n=17); ir iii) iii grupė (n=40), grupė, kuri patyrė ca esant normotermijai ir buvo gydoma HT po maždaug 2 val. (n=17), 4 val. (n=13) ir 6 val. (n=10) po roSc, kai visos žiurkės buvo pašildytos iki normotermijos.
CA indukcija ir CPR.Ca ir cPr buvo atlikti taip, kaip aprašyta anksčiau (24, 25) su nedideliais pakeitimais (1 pav.). Trumpai tariant, žiurkės buvo anestezuotos 2–3 procentų izofluranu ir mechaniškai vėdinamos, kad būtų palaikomas kvėpavimas, naudojant graužikų ventiliatorių (Harvardo aparatą). Norint stebėti periferinį deguonies prisotinimą (Spo2), prie kairės pėdos buvo pritvirtintas pulso oksimetrijos deguonies prisotinimo zondas (Nonin Medical, Inc.). Operacijos metu ir po jos kūno temperatūra buvo palaikoma 37±0.5˚C. Norint stebėti elektrokardiogramos (ecG) pokyčius, ant galūnių buvo dedami elektrokardiografiniai zondai (cytiva), kad būtų gauti trijų švino duomenų, kurie buvo nuolat stebimi. Kairioji šlaunies arterija ir dešinė šlaunikaulio vena buvo kanuliuotos atskirai, kad būtų galima stebėti vidutinį arterinį spaudimą (MaP) (MLT 1050/d; ADInstruments, Ltd.) ir intraveninę injekciją.
Po 5 minučių stabilizavimo laikotarpio į veną buvo suleidžiamas vekuronio bromidas (2 mg/kg; Gensia Sicor Pharmaceuticals, inc.), anestezija buvo sustabdyta ir mechaninė ventiliacija nutraukta. MAP buvo mažesnis nei 25 mm Hg ir vėlesnis impulsinis elektrinis aktyvumas buvo naudojamas CA apibrėžti (25, 26). CA buvo patvirtinta praėjus 3–4 min. po vekuronio bromido injekcijos. 5 min. po maždaug cPr buvo pradėtas į veną suleidus boliuso epinefrino injekciją (0,005 mg/kg; Sigma-Aldrich;
Merck KGaa) ir natrio bikarbonatu (1 mekv/kg; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), po to mechaninė ventiliacija su 100 procentų deguonimi ir rankinis krūtinės suspaudimas 300/min greičiu, kol MaP pasieks 60 mm Hg ir buvo stebimas elektrokardiografinis aktyvumas. . Kai gyvūnas buvo hemodinamiškai stabilus ir spontaniškai kvėpavo (paprastai 1 val. po roSc), kateteriai buvo pašalinti ir gyvūnas ekstubuotas.
Temperatūros valdymas tarp grupių.Normotermijos grupės kūno temperatūra CA operacijos metu ir po jos buvo palaikoma 37±0,5˚C ir palaikoma tol, kol žiurkės buvo nužudytos pagal tvarkaraštį. hipotermijos grupėje ca buvo nustatyta normalioje temperatūroje; tada kūno temperatūra buvo palaikoma ledo paketais ir ventiliatoriais 33±0,5˚C temperatūroje iš karto po CPR 2, 4 ir 6 valandas, ir jie buvo greitai pašildyti kaitinimo pagalvėlėmis iki norimos temperatūros ( buvo pasiekta 37±0,5˚C). Tada žiurkės buvo grąžintos į narvus, kol vieną dieną po CPR / roSc buvo paaukotos. Kūno temperatūra buvo stebima naudojant tiesiosios žarnos temperatūros jutiklį (27).
Biocheminė serumo analizė.Visiems gyvūnams anestezuoti buvo naudojama intraperitoninė 30 mg/kg pentobarbitalio natrio druskos injekcija (JW Pharm co., Ltd.). Kraujas buvo paimtas iš kiekvienos grupės gyvūno pilvo venų. Serumas buvo surinktas centrifuguojant kraują (2774 xg, 15 min., 4 °C) ir iki analizės buvo laikomas -80 °C temperatūroje. Kraujo karbamido azoto (Bun) ir kreatinino kiekiai serume buvo nustatyti pagal Tarptautinės klinikinės chemijos federacijos (28) aprašytus metodus, naudojant automatinį cheminį analizatorių Hitachi 2070 (Hitachi, Ltd.). visi tyrimai buvo atlikti trimis egzemplioriais naudojant šviežią serumą.
Audinių apdorojimas.Žiurkės buvo giliai anestezuotos į pilvaplėvės ertmę suleidus 200 mg/kg pentobarbitalio natrio druskos (JW Pharm co., ltd.) ir perfuzuotos perfuzijos būdu 0,1 M. fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS; pH 7,4), po to 4 procentai paraformaldehido 0,1 M fosfatiniame buferyje (PB; pH 7,4). Inkstai buvo izoliuoti nuo kiekvieno gyvūno ir fiksuoti 4 procentų paraformaldehidu 0, 1 M PB (pH 7, 4) kambario temperatūroje per 1 savaitę, tada supjaustyti sagitaliais griežinėliais, įterpti į parafiną ir supjaustyti (6 µm).
Hematoksilinas ir eozinas (H&E), periodinė rūgštis-Schiff (PAS) ir Massono dažymas trichromu.H&e dažymas buvo atliktas siekiant ištirti patologinius inkstų pokyčius pagal anksčiau aprašytą procedūrą (29). PaS dažymas buvo atliktas siekiant ištirti glomerulų pokyčius pagal anksčiau aprašytas procedūras (30–32). Massono dažymo trichromu metodas buvo naudojamas kanalėlių pažeidimui apibūdinti, atsižvelgiant į kanalėlių išsiplėtimą, kanalėlių atrofiją, kanalėlių gipso susidarymą, vakuolizaciją, degeneraciją, intersticinę fibrozę ir kanalėlių epitelio ląstelių šlifavimą arba kanalėlių pamatinės membranos sustorėjimą (pagal anksčiau aprašytas procedūras33). ,34).
iš viso 2 patyrę patologai histopatologinius pokyčius įvertino dvigubai aklu būdu. 10 nudažytų pjūvių / žiurkės vaizdai buvo užfiksuoti 400 kartų padidinus, naudojant Leica dM 2500 šviesos mikroskopą (Leica Microsystems GmbH). Iš viso kiekviename skyriuje buvo analizuojama 10 laukų. Inkstų pakitimų histopatologinė analizė atlikta pagal anksčiau aprašytas procedūras (35,36). Trumpai tariant, pažeidimai buvo suskirstyti į kategorijas, kuriose nėra reikšmingų mikroskopinių pakitimų (nSMl), minimalūs, lengvi, vidutinio sunkumo arba ryškūs pažeidimai, suskirstyti pagal šią skalę su aklu testu: normalus, 0 balų;<25% damage,="" 1="" point;="" 26‑50%="" damage,="" 2="" points;="" 51‑75%="" damage,="" 3="" points;="" and="" 76‑100%="" damage,="" 4="">
Glomeruliniai pažeidimai buvo apibūdinti pagal ląstelių elementų praradimą, kapiliarų spindžio žlugimą, amorfinę hialininę medžiagą, sulipusią prie Bowmano kapsulės arba be jos (30-32) ir įvertintos pagal šias skaitines skales: jokios žalos, { {7}} taškų; labai švelnus, 1 balas; lengvas, 2 balai; vidutinis, 3 balai; ir sunkus, 4 balai. Vamzdelio pažeidimas buvo įvertintas pagal tokią balų sistemą: kanalėlių pažeidimo nėra, 0 taškų; 1-9 procentai kanalėlių pažeisti, 1 balas; 10-25 procentai kanalėlių pažeisti, 2 balai; 26-50 procentų kanalėlių sužeista, 3 balai; 51-75 procentai kanalėlių pažeisti, 4 balai; ir ne mažiau kaip 76 procentai kanalėlių sužeisti, 5 balai (33,34).
Malondialdehidas (MDA).Mda koncentracija inkstų žievėje buvo įvertinta pagal anksčiau aprašytą protokolą (23, 37, 38). Trumpai tariant, inkstų audinių homogenizavimas ir centrifugavimas buvo atliktas esant 8 832 xg 10 minučių 4 ° C temperatūroje, o supernatantas buvo surinktas ir laikomas -80 ° C temperatūroje MDA analizei. MDA kiekis nustatytas pagal TBarS tyrimo rinkinio (kat. Nr. 10009055; Cayman Chemical Company) instrukcijas.
Imunohistochemija (IHC) antioksidaciniams fermentams. iHc buvo atliktas su Sod-1, Sod-2, caT ir GPX, siekiant ištirti antioksidacinio imunoreaktyvumo pokyčius inkstuose. iHc buvo atliktas pagal mūsų anksčiau aprašytą metodą (22). Trumpai tariant, sekcijos (6 µm) buvo inkubuojamos su pirminiu ožkų anti-Sod1 (1:500; kat. Nr. SaB2500976; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), ožkos anti-Sod2 (1:1). ,000; kat. Nr. SaB2501676; Sigma-Aldrich; Merck KGaa), triušio anti-caT (1:1, 000; kat. Nr. ab16731; Abcam) ir triušio anti-GPX ( 1:2 , inc.) ir biotinilinti-konjuguoti anti-ožkos (1:250; kat. Nr. Ba-5000-1,5; Vector Laboratories, Inc.) antriniai antikūnai 2 valandas 24 °C temperatūroje ir sukurti naudojant Vectastain aBc (Vector laboratories). , įskaitant). Tada jie buvo vizualizuoti naudojant 3,3'-diaminobenzidino tirpalą (0,1 M Tris-HCl buferyje).
Leica dM 2500 mikroskopas buvo naudojamas pjūviams vaizduoti padidinus 400 kartų. Iš viso buvo atrinkta 10 sekcijų / žiurkių ir užfiksuota 10 sričių. Vaizdo slenksčio analizės programinės įrangos versija 1.52a (nacionalinis sveikatos institutas) buvo naudojama santykinio optinio tankio (stulpelio) procentams (procentams) matuoti.
Statistinė analizė.Visi eksperimentai buvo pakartoti trimis egzemplioriais. Duomenims analizuoti buvo naudojama Graph Pad Prism versija 5.0 (GraphPad Software, inc.), kurie buvo išreikšti kaip vidurkis ± standartinė vidutinių (SeM) reikšmių paklaida. Išgyvenamumas buvo analizuojamas naudojant Kaplan-Meier statistiką ir log-rank testą. MaP ir periferinis deguonis buvo lyginami naudojant vienpusius ir dvipusius kartotinius dispersijos analizės matavimus, siekiant įvertinti laiko poveikį. Siekiant nustatyti skirtumų reikšmingumą, buvo atlikta post hoc analizė naudojant Tukey testą visiems poriniams kartotiniams palyginimams. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Rezultatai
Fiziologiniai pokyčiai, išgyvenamumas ir serumo biocheminiai kintamieji. Tarp grupių nebuvo statistiškai reikšmingo skirtumo pagal pradines charakteristikas, įskaitant kūno svorį, MaP ir Spo2 (i lentelė ir 2 pav.). Ca indukcija įvyko praėjus 3–4 min. po intraveninės vekuronio bromido (2 mg/kg) injekcijos. CA buvo patvirtinta naudojant izoelektrinį ecG, Spo2 ir MaP, ir jie pasikeitė, kaip tikėtasi pagal eksperimentinį protokolą (2a-c pav.). kaip parodyta 2d pav., kūno temperatūra buvo skirtinga visose grupėse po roSc, kaip parodyta 3 pav., kiekvienos grupės išgyvenamumas buvo įvertintas praėjus vienai dienai po maždaug. II grupės rodiklis buvo 42,9 proc.
iii grupėje dažnis po 2 h-HT buvo 42,9 proc., dažnis po 4 h-HT buvo 57,1 proc., o dažnis po 6 h-HT buvo 71,4 proc. šiame eksperimente nebuvo jokio skirtumo tarp ii grupės žiurkių ir 3 grupės žiurkių su 2 h-HT.
kaip parodyta 4B pav., Bun lygis serume I grupėje buvo 13,8 mg/dl vieną dieną po maždaug. ii grupėje bandelės lygis buvo žymiai padidintas iki 35,3 mg/dl. iii grupėje bandelės lygis buvo 3{{10}},7 mg/dl po 2 h-HT, 250 mg/dl po 4 h-HT ir 22,7 mg/dl. dl po 6 h-HT. be to, kaip parodyta 4c pav., I grupės kreatinino kiekis serume buvo {{20}},23 mg/dl. ii grupėje kreatinino kiekis reikšmingai padidėjo iki 0,43 mg/dl. iii grupėje kreatinino kiekis buvo mažesnis nei ii grupėje: 0,39 mg/dl po 2 h-HT, 0,37 mg/dl po 4 h-HT ir 0,36 mg/dl po 6 h-HT.
Histopatologiniai radiniai. I grupėje (fiktyvi) nepažeistos histologinės struktūros buvo atskleistos naudojant H&e, PaS ir Massono dažymą trichromu (5A pav.). Intersticinė fibrozė buvo aptikta ne visose grupėse, tuo tarpu ii grupėje ca sukelta inkstų histopatologija buvo ištirta vieną dieną po roSc, naudojant H&e, PaS ir Massono trichromo dažymą. Sunkus CA sukeltas inkstų pažeidimas žymiai padidėjo proksimaliniuose kanalėliuose ir glomeruluose; ypač buvo rimtai pažeistos inkstų kanalėlių epitelio ląstelių šepetėlio kraštinės (5a ir B pav.). be to, šioje grupėje glomerulų kapiliarai buvo išsiplėtę uždegiminėmis ląstelėmis, o intersticinė edema ir ūminė inkstų kanalėlių nekrozė buvo rimta, palyginti su pastebėtais I grupėje (5a pav.).
iii grupėje inkstų pažeidimas susilpnėjo vieną dieną po roSc (5a ir B pav.). visų pirma, Ca sukeltas sužalojimas proksimaliniuose kanalėliuose buvo žymiai sumažintas po 6 h-HT, palyginti su tuo, kuris buvo pastebėtas ii grupėje. be to, vietinis proksimalinių kanalėlių išsiplėtimas buvo mažesnis, palyginti su ii grupėje (5A pav.). Glomeruluose 6 h-HT žymiai susilpnino glomerulų pažeidimą, palyginti su ii grupės pažeidimu (5a ir B pav.).
MDA lygis. kaip parodyta 4a pav., Mda lygis inkstų žievėje buvo reikšmingai padidėjęs vieną dieną po ca II grupėje, palyginti su i grupe. Tačiau III grupėje MDA lygis žymiai sumažėjo po 4 valandų ir 6 valandų HT. jis taip pat sumažėjo per 2 h-HT, tačiau statistiškai reikšmingo skirtumo, palyginti su ii grupe, nebuvo.
Antioksidacinių fermentų imunoreaktyvumo išvados.
I grupėje buvo įvertinti normalūs Sod-1, Sod-2, GPX ir caT imunoreaktyvumai, atskleidžiantys, kad jie daugiausia buvo kanalėliuose (6a pav.). ii grupėje Sod-1, Sod-2, GPX ir CAT imunoreaktyvumas buvo žymiai sumažintas praėjus vienai dienai po roSc, palyginti su nustatytais i grupėje (6a ir B pav.).
iii grupėje Sod-1, Sod-2, GPX ir caT imunoreaktyvumas po 2 h-HT reikšmingai nesiskyrė nuo stebėtų ii grupėje (6a ir B pav.). 4 h-HT atveju keturi imunoreaktyvumas buvo žymiai didesnis nei nustatytas ii grupėje (6a ir B pav.), o tai rodo, kad GPX imunoreaktyvumas buvo žymiai didesnis, palyginti su kitais imunoreaktyviais. 6 h-HT atveju visas imunoreaktyvumas buvo didesnis nei nustatytas žiurkių, gavusių 4 h-HT, ir atskleidžia, kad kiekvieno Sod-1, Sod-2, GPX ir caT imunoreaktyvumo lazdelė buvo 78,4, 67,4, 86.5 ir 79,5 proc. atitinkamai, palyginti su i grupe (6a ir B pav.).
herba epimedium sagittatum
Diskusija
Tyrimų su gyvūnais metu širdis ir smegenys yra labiausiai paveikti organai po išemijos/reperfuzijos (i/r) sužalojimo po maždaug (39,40). nepaisant to, kai kurie tyrimai parodė, kad ūminis inkstų pažeidimas turi įtakos neurologiniam atsigavimui (41,42). Todėl svarbu ištirti ūminį inkstų pažeidimą po ca ir cPr . Šiame tyrime suaugę Sd žiurkių patinai buvo naudojami asfiksijai gydyti, švirkščiant vekuronio bromido. CA buvo patvirtinta praėjus 3–4 min. po asfiksijos sukėlimo, o cPr atlikta praėjus 5 min. MaP, ecG ir Spo2 buvo pakeisti, kaip tikėtasi, maždaug per roSc ir po jo. mūsų dabartiniame tyrime išgyvenamumas iii grupėje buvo 42,9 proc. vieną dieną po roSc žiurkėms, paveiktoms 2 h-HT, 57,1 proc. žiurkių, gydytų 4 h-HT, ir 71,4 proc. che ir kt. (26) pranešė, kad išgyvenamumas buvo 40 proc., praėjus dviem dienoms po roSc žiurkės modelyje, kai buvo asfiksijos maždaug. be to, Wang ir kt. (43) pranešė, kad žiurkių hipotermijos ir levosimendano (kalcio sensibilizatoriaus ir kalio kanalų atidarytojo) derinys po roSc žymiai padidino išgyvenamumą. Remiantis šiais duomenimis, HT žiurkėms, turinčioms ca, gali padidinti išgyvenamumą praėjus kelioms dienoms po roSc. Tačiau žmonėms HT po ca beveik nepadidina išgyvenamumo po roSc (44).
12–28 proc. pacientų, sergančių ca po sėkmingo gaivinimo, buvo pranešta apie inkstų funkcijos sutrikimą (13). be to, ūminis inkstų pažeidimas išsivystė 43 procentams pacientų, kurie buvo atgaivinti maždaug po maždaug, ir daugiau nei 75 procentai šių epizodų įvyko per tris dienas po maždaug (45). gyvūnų modeliuose ūminis inkstų pažeidimas, sukeltas i/R (ty ROSC po CA), buvo reikšmingai susilpnintas HT (43, 46, 47). Pavyzdžiui, Tissier ir kt. (47) pranešė apie reikšmingą inkstų pažeidimų susilpnėjimą HT naudojant triušio modelį ca, remiantis histopatologija ir elektronine mikroskopija, palyginti su kontroline grupe. mūsų dabartiniame tyrime ii grupės inkstų histopatologiniai glomerulų ir kanalėlių pažeidimų balai akivaizdžiai padidėjo vieną dieną po roSc. šioje grupėje Bun ir kreatinino kiekis serume buvo žymiai padidėjęs po ROSC, palyginti su fiktyviąja grupe (i grupė). Šie rezultatai buvo panašūs į ankstesnių tyrimų, kuriuose dalyvavo šunų, triušių ir paršelių ca modeliai (47–49), rezultatus. Taigi, inkstų pažeidimas labai padidėjo ankstyvoje fazėje po eksperimentinių gyvūnų. mūsų dabartiniame tyrime inkstų glomerulų ir kanalėlių pažeidimai ir histopatologiniai balai iii grupėje buvo žymiai sumažinti po 4 valandų ir 6 valandų HT vieną dieną po roSc, palyginti su ii grupe. Ribeiro ir kt. (46) ir Souza ir kt. (50) pranešė, kad HT buvo veiksmingas inkstų i/r pažeidimo gyvūnų modeliuose. Islamas ir kt. (23) ir Jawad ir kt. (22) nustatė, kad HT sumažino inkstų pažeidimo sunkumą ir padidino išgyvenamumą asfiksijos ca modelyje. Išvados rodo, kad HT turi reikšmingą inkstų apsauginį poveikį, kuris buvo susijęs su padidėjusiu išgyvenamumu.
Endogeniniai antioksidaciniai fermentai daugiausia apima velėnus, CAT ir GPX. Šie fermentai suteikia pirmąją gynybos liniją nuo o2•- ir OH•. SOD-1 ir SOD-2 apsaugo nuo oksidacinio streso, katalizuodami o2•- dismutaciją į o2 ir H2o2 (51). oksidacinis stresas yra esminis organų pažeidimo ir hemodinaminės disfunkcijos veiksnys PcaS metu ir roS susidarymas i / r pažeidimo metu. Antioksidacinių fermentų aktyvumas keičiasi dėl i/r pažeidimo po maždaug (21). mūsų tyrimas atskleidė, kad Sod-1, Sod-2, GPX ir caT lygiai sumažėjo po roSc ii grupėje, palyginti su i grupe. Šių antioksidacinių fermentų kiekis sumažėja po i/r, o tai sukelia ląstelių pažeidimą ir mirtį dėl endogeninių antioksidantų vartojimo dėl roS išsiskyrimo (52).
Xia ir kt. (53) pranešė apie padidėjusį antioksidacinį aktyvumą pelių, paveiktų HT, inkstų audiniuose dėl inkstų i/r pažeidimo. Hackenhaar ir kt. (21) pastebėjo reikšmingą Sod-1, Sod-2, GPX ir caT aktyvumo padidėjimą po 6, 12, 36 ir 72 valandų HT žmonėms po roSc. Ankstesniuose tyrimuose, kuriuose buvo naudojamas asfiksijos ca modelis, Islamas ir kt. (23) pranešė, kad HT po ca sumažina oksidacinį stresą inkstuose, o Jawad ir kt. (22) pranešė, kad HT po ca apsaugo inkstus nuo sužalojimų, kuriuos sukelia ca, rodantis, kad nrf2/Ho‑1 inkstuose padidėjo. mūsų dabartiniame tyrime Sod-1, Sod-2, GPX ir caT imunoreaktyvumas žymiai padidėjo po 4 h-HT ir 6 h-HT iii grupėje, palyginti su ii grupe, o tai rodo, kad HT aktyvavo antioksidantų fermentus ir sumažino. oksidacinis stresas.
Remiantis šio tyrimo išgyvenamumu, histopatologija, biocheminiais ir imunohistocheminiais rezultatais, buvo nustatyta, kad inkstų funkcijos sutrikimas yra dažnas ir susijęs su mirtingumu ankstyvosiose PcaS stadijose po roSc, mūsų žiurkių asfiksijos ca. Tačiau po ROSC praėjus 4 valandoms arba 6 valandoms HT žymiai sumažėjo inkstų pažeidimas, o tai rodo, kad HT sukelia antioksidantų fermentų, tokių kaip Sod-1, Sod-2, GPX ir caT, aktyvavimą, todėl sumažėja oksidacinis stresas inkstuose. dėl to buvo iškelta hipotezė, kad HT sumažina inkstų pažeidimą antioksidaciniu mechanizmu ir padidina ankstyvą išgyvenamumą. Tačiau norint išsiaiškinti inkstų pažeidimo ir HT mechanizmą po roSc, reikalinga Western blot analizė. Tai yra galimas šio tyrimo apribojimas ir pabrėžia tolesnių tyrimų poreikį.
miricetinas
1 skubios medicinos katedra, Jeonbuk nacionalinio universiteto klinikinės medicinos tyrimų institutas, Jeonju, Jeollabuk-do 54907;
2 Veterinarinės medicinos ir biologinės saugos tyrimų instituto kolegija, Jeonbuk nacionalinis universitetas, San, Jeollabuk-do 54596;
3 Biomedicinos mokslų katedra ir Biomokslų ir biotechnologijų tyrimų institutas, Halimo universitetas, Chuncheon, Gangwon-do 24252;
Kangvono nacionalinės universiteto ligoninės 4 chirurgijos skyrius,
Medicinos mokykla, Kangvono nacionalinis universitetas, Chuncheon, Gangwon-do 24289; 5 Neurobiologijos katedra, Medicinos mokykla, Kangvono nacionalinis universitetas, Chuncheon, Gangwon-do 24341, Korėjos Respublika
Padėkos
netaikoma.
Finansavimas
Šį tyrimą rėmė Pagrindinių mokslų tyrimų programa per Korėjos nacionalinį tyrimų fondą, finansuojamą Švietimo ministerijos (subsidijų Nr. nrF-2019r1c1c1002564, nrF-2019r1F1a1062696 ir nrF-2021r1F1a1059992).
Duomenų ir medžiagų prieinamumas
Dabartinio tyrimo metu naudotus ir (arba) analizuotus duomenų rinkinius pagrįstu prašymu gali gauti atitinkamas autorius.
Autorių indėlis
SeK, HYS, MHW ir HJT buvo atsakingi už eksperimentinį planavimą, duomenų rinkimą, duomenų analizę ir rankraščių rašymą. eYl, YJY, rHK, JHc ir TKl atliko eksperimentus ir duomenų analizę. dca, BYP, JcY, SKH ir iSK atliko duomenų analizę ir pateikė kritinių pastabų apie visą tyrimo procesą. visi autoriai perskaitė ir patvirtino galutinį rankraštį. HYS ir HJT patvirtina visų neapdorotų duomenų autentiškumą.
Etikos patvirtinimas ir sutikimas dalyvauti
Visi eksperimentiniai protokolai buvo patvirtinti remiantis etinėmis procedūromis ir moksline priežiūra Jeonbuk nacionalinio universiteto Institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto (patvirtinimo Nr. JBnu 2020-084; Jeonju, Pietų Korėja).
Paciento sutikimas publikuoti
netaikoma.
Konkuruojantys interesai
Autoriai pareiškia, kad neturi konkuruojančių interesų.
Nuorodos
1. Girotra S, chan PS ir Bradley SM: priežiūra po gaivinimo po širdies sustojimo ne ligoninėje ir ligoninėje. Širdis 101: 1943–1949, 2015 m.
2. ROH Yi, Jung WJ, Hwang So, Kim S, Kim HS, Kim JH, Kim TY, Kang HS, Lee JS ir Cha KC: trumpesnis defibriliacijos intervalas skatina sėkmingus defibriliacijos ir gaivinimo rezultatus. gaivinimas 143: 100-105, 2019 m.
3. Xanthos T, iacovidou n, Pantazopoulos i, Vlachos I, Bassiakou e, Stroumpoulis K, Kouskouni e, Karabinis a ir Papadimitriou l: Išemijos modifikuotas albuminas prognozuoja kardiopulmoninio gaivinimo rezultatus: eksperimentinis tyrimas. gaivinimas 81: 591-595, 2010 m.
4. Yeh ST, Cawley RJ, aune Se ir Angelos MG: deguonies poreikis atliekant kardiopulmoninį gaivinimą (cPr), kad grįžtų spontaniška kraujotaka. gaivinimas 80: 951-955, 2009 m.
5. lópez-Herce J, del castillo J, Matamoros M, canadas S, rodriguez-calvo a, cecchetti c, rodríguez-núnez a ir carrillo Á; iberoamerikos vaikų širdies sustojimas RiBePci studijų tinklas: spontaniškų kraujotakos veiksnių, susijusių su mirtingumu sergant vaikų ligoninėje sustojus širdžiai, sugrįžimas: perspektyvus daugiacentris daugianacionalinis stebėjimo tyrimas. crit care 18: 607, 2014.
6. Mongardon n, Dumas F, tapti S, Grimaldi d, Hissem T, Pène F ir cariou a: Pokardinio sustojimo sindromas: nuo neatidėliotino gaivinimo iki ilgalaikio rezultato. ann intensyvi terapija 1: 45, 2011.
7. Neymar RW, Nolan JP, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin RG, Jauch EC ir kt.: Po širdies sustojimo sindromas: epidemiologija, patofiziologija, gydymas ir prognozė. tarptautinio gaivinimo ryšių komiteto (American Heart Association, Australijos ir Naujosios Zelandijos gaivinimo taryba, Europos gaivinimo taryba, Kanados Širdies ir insulto fondas, Interamerican Heart Foundation, Azijos gaivinimo taryba ir Pietų Afrikos Reanimacijos taryba) konsensuso pareiškimas ); Amerikos širdies asociacijos skubios širdies ir kraujagyslių priežiūros komitetas; širdies ir kraujagyslių chirurgijos ir anestezijos taryba; kardiopulmoninės, pooperacinės ir kritinės priežiūros taryba; klinikinės kardiologijos taryba; ir Insulto taryba. tiražas 118: 2452-2483, 2008 m.
8. Nolan JP, Neumann RW, Adrie c, Hibiki M, Berg RA, Böttiger BW, Callaway c, Clark rS, Geocadin rG ir kt.: Po širdies sustojimo sindromas: epidemiologija, patofiziologija, gydymas ir prognozė. Tarptautinio gaivinimo ryšių komiteto mokslinis pareiškimas; Amerikos širdies asociacijos skubios širdies ir kraujagyslių priežiūros komitetas; širdies ir kraujagyslių chirurgijos ir anestezijos taryba; kardiopulmoninės, pooperacinės ir kritinės priežiūros taryba; klinikinės kardiologijos taryba; taryba dėl insulto. reanimacija 79: 350-79, 2008. DOI: 10.1016/j.reanimacija.2008.09.017
9. Jentzer Jc, pakeisti Md ir dezfulian c: Miokardo disfunkcija ir šokas po širdies sustojimo. BioMed res int 2015: 314796, 2015.
10. Madl c ir Holzer M: smegenų funkcija po gaivinimo po širdies sustojimo. curropin crit care 10: 213-217, 2004.
11. Roberts BW, Kilgannon JH, Chansky Me, Mittal n, Wooden J, Parrillo Je ir Trzeciak S: Daugelio organų disfunkcija po spontaninės kraujotakos sugrįžimo po širdies sustojimo sindromo. crit care Med 41: 1492-1501, 2013 m.
12. Zeiner a, Sunder-Plassmann G, Sterz F, Holzer M, nevykėliai H, laggier an ir Müllner M: Lengvos terapinės hipotermijos poveikis inkstų funkcijai po širdies ir plaučių gaivinimo vyrams. gaivinimas 60: 253-261, 2004.
13. Yanta J, Guyette FX, Doshi a, Callaway CW ir Rittenberg Jc; Paslauga po širdies sustojimo: inkstų funkcijos sutrikimas yra dažnas po gaivinimo po širdies sustojimo ne ligoninėje. gaivinimas 84: 1371-1374, 2013 m.
14. Lee JH, Lee TK, Kim iH, lee Jc, Won MH, Park JH, Ahn JH, Shin Mc, ohk TG, Moon JB ir kt.: histopatologijos ir naviko nekrozės faktoriaus lygio pokyčiai žiurkių širdyse po asfiksinis širdies sustojimas. Clin Exp Emerg Med 4: 160–167, 2017 m.
15. Lucchino S, Kellum Ja, Bellomo r, Doig GS, Morimatsu H, Morgera S, Schetz M, Tan i, Bouman c, Macedo e ir kt.; Inkstų palaikomosios terapijos pradžia ir pabaiga (BeST Kidney) tyrėjai: ūminis inkstų nepakankamumas sunkiai sergantiems pacientams: daugianacionalinis, daugiacentris tyrimas. JAMA 294: 813-818, 2005.
16. Mattana J ir Singhal Pc: Ūminio inkstų nepakankamumo paplitimas ir veiksniai po širdies ir plaučių gaivinimo. arch stažuotojas Med 153: 235-239, 1993.
17. Sachse a ir Wolf G: angiotenzino II sukeltos reaktyviosios deguonies rūšys ir inkstai. J am Soc Nephrol 18: 2439–2446, 2007 m.
18. Baud l ir ardaillou r: reaktyviosios deguonies rūšys: gamyba ir vaidmuo inkstuose. am J Physiol 251: F765-F776, 1986 m.
19. rodrigo r, Fernández-Gajardo r, Gutiérrez r, Matamala JM, carrasco r, Miranda-Merchak a ir Feuerhake W: oksidacinis stresas ir išeminio insulto patofiziologija: naujos gydymo galimybės. CNS Neurol Disord Drug Targets 12: 698-714, 2013.
20. Shahzad S, Hasan a, Faizy AF, Mateen S, Fatima n ir Moin S: padidėjęs DNR pažeidimas, oksidacinis stresas ir sutrikusi atsako gynybos sistema pacientams, sergantiems miokardo infarktu. Clin Appl Thromb Hemost 24: 780–789, 2018 m.