Viso Cistanche glikozidų poveikis kraujagyslinės demencijos žiurkių mokymuisi ir atminčiai bei jos mechanizmui

Gao Cong 1, Wang Chuanshe 2,3, Wu Guanzhong 1, Hu Mei 1, Tu Pengfei 2,4

[1 , Pekino universitetas, Pekinas 100083)

Visuomenės senėjimas paskatino ieškoti saugių ir veiksmingų vaistų profilaktikai ir gydymuiAlzheimerio liganarkotikų tyrimų karštoji vieta. Pastaraisiais metais buvo padaryta didelė pažanga gydant Alzheimerio ligą taikant inkstų ir kaulų čiulpų, taip pat širdies ir blužnies tonizuojantį metodą.Cistanche deserticola iš pradžių buvo paskelbtas Shennong's Classic of Materia Medica ir turi tonizuojantį inkstų yang poveikį, naudingą kraujo esencijai, drėkina žarnyną ir mažina vidurių užkietėjimą. Dabar jis plačiai naudojamas senatvinei demencijai, impotencijai, įprastiniam vidurių užkietėjimui ir kitoms ligoms gydyti. [1,2]. Tyrimai parodė, kad jis turi anti-demencijos, antioksidacinį, antihipoksinį, anti-radiacinį poveikį ir stiprina imuninę funkciją, o pagrindiniai jo komponentai yra fenilo etanolio glikozidai. [3-6].

Cistanche deserticola ma – anti-Alzheimerio liga

Bendras glikozidų kiekisCistanche deserticola maekstrahuojami ir rafinuojami iš džiovintų mėsingų Cistanche deserticola (Schrenk) R. Wight stiebų, kurių sudėtyje yra 90,7 proc. feniletanoidinių glikozidų, įskaitant 44,3 proc. pagrindinio komponento.echinakozidas. Šiame eksperimente buvo tiriamas visų cistanche glikozidų poveikis mokymuisi ir atminties sutrikimui žiurkių, sergančių kraujagysline demencija, ir trombozei bei trombocitų agregacijai normalioms žiurkėms, siekiant įrodyti, kad šis vaistas vystosi kaip naujas vaistas, skatinantis intelektą ir užkertantis keliągydant Alzheimerio ligą.

Ką daro cistanche – Aanti-Alzheimerio liga

1. Medžiaga

1.1 Gyvūnai:

SD žiurkes, patinus, sveriančias 470–570 g, pateikė Shanghai Xipuma-Bikai Experimental Animal Co., Ltd., sertifikato numeris HDQZ Nr. 152.

1.2 Vaistai ir reagentai:

Bendras glikozidų kiekisCistanche deserticola, Cistanche ekstrakto milteliai, yra 90,7 proc. visų fenilo etanolio glikozidų, 44,3 proc.Echinakozidas, ir tamsiai rudi milteliai, kuriuos tiekia Pekino universiteto Šiuolaikinio tradicinės kinų medicinos tyrimų centro chemijos biuras, serijos numeris 980601. Piracetamo tabletės, pagamintos Yixing Pharmaceutical Factory, partijos numeris 980521. Aspirinas dengtas enteriniu būdu. tabletės, pagamintos Nanjing No. 2 Pharmaceutical Factory, partijos numeris 000402. Kiekvienas vaistas ruošiamas distiliuotu vandeniu. Natrio heparinas, Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd. of China Pharmaceutical (Group) produktas, partijos numeris F000128. Pentobarbitalio natrio druska, kurią importuoja China Pharmaceutical (Group) Shanghai Chemical Reagent Co., Ltd., yra supakuota su partijos numeriu 971104. Adenozino dinatrio diacetatas (ADP), Dongfeng Biochemical Technology Co., Ltd., Šanchajaus instituto produktas. Biochemija, Kinijos mokslų akademija, kurios partijos numeris 9305122, prieš naudojimą buvo paruoštas į 1 mg/mL pradinį tirpalą ir laikomas šaldytuve. Kai buvo naudojamas, jis buvo 3 kartus skiedžiamas fosfatiniu buferiu.

Cistanche 200 mg - Aanti-Alzheimerio liga

1.3 Priemonė:

MG-3 Y tipo elektrinis labirintas, pagamintas Zhangjiagang mokymo ir eksperimentinės įrangos gamyklos. SPA-4 daugiafunkcis trombocitų agregatorius, pagamintas Šanchajaus Keda testavimo prietaisų gamyklos.

2. Metodas

2.1 Kraujagyslinės demencijos modelis, sukeltas židinio smegenų išemijos-reperfuzijos žiurkėms

Paruošimas ir aptikimas

2.1.1 Grupavimas ir administravimas:

Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į 6 grupes pagal jų kūno svorį, įskaitant fiktyvių operacijų grupę, modelio grupę, teigiamą kontrolinę grupę (piracetamas 300mg/kg) ir dideles, vidutines ir mažas dozes (200 100, 50 mg/kg) visų cistanche glikozidų. Kiekvienai grupei buvo skiriama 0,5 ml / 100 g ig kartą per dieną. Apgaulingos operacijos grupei ir modelio grupei 30 dienų buvo duodami vienodi distiliuoto vandens kiekiai.

2.1.2 Modelio paruošimas[7]:

16-tą vartojimo dieną žiurkės buvo anestezuotos chloro hidratu 360mg/kg IP. Nupjaukite kaklo odą per vidurį, atskirkite dešinįjį kaklo raumenį, išlaisvinkite bendrąją miego arteriją ir išorinę miego arteriją, perriškite ir nupjaukite išorinės miego arterijos šakas. Atskirkite vidinę miego arteriją, kol bus atskleista pterigopalatino proceso arterija. Arterijos spaustuku užfiksuokite bendrąją miego arteriją iš šios pusės, perpjaukite išorinę miego arteriją, įkiškite nuo žiurkės išorinės miego arterijos į vidinę miego arteriją 0,28 mm skersmens buku anglies meškerės valą ir įkiškite į intrakranijinę kol. atsiranda nedidelis pasipriešinimas, tada blokuojamas visas vidurinės smegenų arterijos aprūpinimas krauju. Po 40 minučių išemijos buvo ištrauktas meškerės valas, perrišta išorinė miego arterija, atidaryta bendroji miego arterija, dezinfekuota ir susiuvama, o infekcijos profilaktikai panaudotas im penicilinas. Apgaulingos operacijos grupėje buvo izoliuota ir perrišta tik išorinė miego arterija, o bendroji miego arterija nebuvo nukirpta.

2.1.3 Mokymosi ir atminties testas [8]:

7 dieną po operacijos Y tipo elektrinis labirintas buvo naudojamas mokymuisi ir atminties lavinimui bei testavimui. Eksperimentas buvo atliktas ramioje ir tamsioje aplinkoje. Žiurkės buvo dedamos į vieną ranką (fiksuota pradinė zona), 2 minutes prisitaikiusios prie šviesos, o po to jiems buvo suteiktas elektros šokas. Šviesos signalas yra nustatytas prie kairės rankos, kuri yra saugi sritis, o dešinė ranka yra pavojinga sritis, kurioje yra srovė ir nėra šviesos. Elektros smūgio intensyvumas priklauso nuo žiurkių gebėjimo bėgti po elektros šoko, o įtampa yra 50-60V. Teisinga žiurkėms pabėgti į saugią zoną po šoko, o neteisinga – į pavojingą zoną. Po kiekvienos treniruotės jie pasilieka saugioje zonoje 30 metų, kad sustiprintų savo atmintį. Vėl treniruodamiesi pailsėkite 10 s po starto zonos šviesa, pakartokite 10 kartų, užfiksuokite teisingą ir neteisingą laiką ir apskaičiuokite teisingą atsako dažnį. Kiekvienas mokymas buvo atliktas praėjus 1 valandai po vartojimo ir buvo nuolat matuojamas 4 dienas. Tada dar 4 dienas pakaitomis paimkite kairę ir dešinę ranką kaip saugos zoną, užrašykite teisingą ir neteisingą laiką ir apskaičiuokite teisingą reakcijos greitį.

Teisingas reakcijos greitis teisingų reakcijų skaičius / treniruočių laikas

2.2 Žiurkių arterioveninė šuntavimo trombozė ir aptikimas[8]:

Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į 5 grupes pagal jų kūno svorį, ty pavyzdinę grupę, teigiamą kontrolinę grupę (aspirinas 100 mg/kg), dideles, vidutines ir mažas bendras cistanche glikozidų dozes. 200, 100, 50 mg/kg) grupėse. Kiekvienai grupei buvo duota 0,5 ml / (100 g), o modelio grupei buvo duotas toks pat distiliuoto vandens tūris 7 dienas. Po paskutinio vartojimo, ip 45 mg/kg pentobarbitalio natrio druskos anestezija, gulimos padėties fiksavimas, dešinės bendrosios miego arterijos ir kairiosios išorinės jungo venos atskyrimas. Pasverkite 7 cm ilgio Nr. 4 chirurginį šilko siūlą ir įkiškite į 3-segmento polietileno vamzdelio vidurį taip, kad šilko siūlų, besiliečiančių su krauju, ilgis būtų 6 cm, ir į visą polietileno vamzdelį užpildykite 50 U. /mL heparino fiziologinis tirpalas. Įvedę veninį galą į kairiąją išorinę jungo veną, tiksliai suleiskite 50 V/kg heparino fiziologinio tirpalo iš arterinio galo antikoaguliacijai, o po to arterijos galą įkiškite į dešinę bendrą miego arteriją. Arteroveninis šuntavimas buvo atidarytas praėjus 1 valandai po vartojimo, o kraujotaka buvo nutraukta praėjus 15 minučių po atidarymo. Šilko siūlas buvo greitai ištrauktas ir uždėtas ant svėrimo popieriaus. Drėgna masė buvo pasverta elektroninėmis analitinėmis svarstyklėmis ir apskaičiuotas trombų slopinimo greitis.

Trombozės slopinimo laipsnis=(trombo masė modelių grupėje – trombo masė gydymo grupėje) / trombų masė modelių grupėje × 100 proc.

2.3. Žiurkių trombocitų agregacijos nustatymas in vitro [8]:

Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į 5 grupes pagal jų kūno svorį, kuri buvo normali kontrolinė grupė, teigiama kontrolinė grupė (aspirinas 100 mg/kg) ir bendras cistanche vartojamų glikozidų kiekis (dozė buvo tokia pati, kaip nurodyta aukščiau). Administravimo būdas yra toks pat kaip 2.2 punkte. Nevalgius 12 valandų prieš paskutinį kartą, praėjus 1 valandai po paskutinio vartojimo, iš pilvo aortos buvo paimtas kraujas, antikoaguliuotas 3,8 procento natrio citratu (1:9), švelniai sumaišytas, centrifuguojamas 1000 aps./min. greičiu 3 minutes ir buvo išsiurbtas viršutinis trombocitais turtingos plazmos (PRP) sluoksnis. Likęs kraujas buvo centrifuguojamas 3000 aps./min. greičiu 10 minučių, o supernatantas buvo aneminė mažos plokštelės plazma (PPP). Įpilkite 200 μ į turbidimetrinį mėgintuvėlį μ LPRP, sureguliuokite nulinį tašką naudodami PPP, pakaitinkite 5 minutes, tada pridėkite 50 μ LADP tirpalo sukeltos trombocitų agregacijos, išmatuoto trombocitų agregacijos intensyvumo ir apskaičiuoto trombocitų agregacijos slopinimo greičio.

Agregacijos slopinimo rodiklis=(maksimalus normalios grupės agregacijos greitis – didžiausias suvedimo grupės agregacijos greitis) / didžiausias normalios grupės agregacijos greitis × 100 proc.

2.4 Statistinis apdorojimas:

Rezultatai išreikšti x ± s, o duomenys statistiškai apdoroti naudojant tarpgrupinio palyginimo t-testą.

3. Rezultatai

3.1 Poveikis kraujagyslinės demencijos modelio žiurkių mokymuisi ir atminties funkcijai, kurią sukėlė židininė smegenų išemija-reperfuzija:

Cistanche priedas šalia manęs – Aanti-Alzheimerio liga

Spustelėkite čia, kad pamatytumėte „Cistanche“ produktus, gerinančius atmintį ir užkertančius kelią Alzheimerio ligai

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Rezultatai pateikti 1 lentelėje. Kiekvienos grupės vidutinis teisingo atsako dažnis didėjo kiekvieną dieną per pirmąsias 4 testo dienas, o vidutinis kiekvienos grupės teisingo atsako dažnis ketvirtą dieną siekė daugiau nei 90 procentų. Vidutinis teisingas kiekvienos dozės grupės ir teigiamų cistancho glikozidų grupės atsako dažnis per pirmąsias tris dienas buvo žymiai didesnis nei pavyzdinės grupės (P<0.05, 0.01), indicating that the administration of total glycosides of cistanche at 50, 100, and 200 mg/kg could significantly improve the correct response rate of maze training in rats with vascular dementia caused by focal cerebral ischemia-reperfusion, that is, total glycosides of cistanche had a significant protective effect on the learning and memory dysfunction caused by the model. There was no significant difference in the average correct response rate of each group on the 4th day, and the average correct response rate of each group decreased significantly after using the left and right arm alternately as the safety zone on the 5th day, but there was no significant difference between the groups. Then the average correct response rate of each group gradually increased, but there was no significant difference between the groups. Rezultatai parodė, kad bendras glikozidų kiekis"dykumos ženšenis" cistanche deserticolagalėjo tiktam tikru mastu atkurti smegenų traumą patyrusių žiurkių mokymosi ir atminties funkcijas, o mokymosi stiliaus pasikeitimas neturėjo įtakos įgytam mokymosi ir atminties gebėjimui.

1 lentelė Cistanchis glikozidų poveikis kraujagyslinės demencijos žiurkių mokymosi ir atminties funkcijai, kurią sukelia židininė smegenų chemija-reperfuzija

*P<0.05 ** P<0.01 priešmodelių grupė

3.2 Poveikis žiurkių arterioveninei šuntavimo trombozei:

Rezultatai pateikti 2 lentelėje. Palyginti su modelio grupe, suminiai Cistanche deserticola 200 ir 100 mg/kg glikozidai gali reikšmingai slopinti žiurkių arterioveninės šuntavimo trombozės susidarymą, tačiau jų poveikis buvo žymiai silpnesnis nei 100 mg/kg aspirino. kilogramas. Bendras Cistanche deserticola 50 mg/kg glikozidų kiekis neturėjo įtakos žiurkių arterioveninės šuntavimo trombozės susidarymui. Tai rodo, kad bendrieji Cistanche deserticola glikozidai gali slopinti arterioveninės šuntavimo trombozės susidarymą sveikiems gyvūnams.

2 lentelė Cistanchis glikozidų poveikis žiurkių arterioveninei šunto trombozei(n=10)

*P<0.05 ** P<0.01priešmodelių grupė

3.3 Poveikis ADP sukeltai žiurkės trombocitų agregacijai in vitro:

Rezultatai pateikti 3 lentelėje. Palyginti su normalia grupe, bendras Cistanche deserticola 200, 100 ir 50 mg/kg glikozidų kiekis gali reikšmingai slopinti ADP sukeltą trombocitų agregaciją in vitro ir 200 mg/kg dozės slopinimo greitį. grupėje buvo aukščiausia, pasiekusi 59,48 proc.

3 lentelė Cistanchis glikozidų poveikis trombocitų agregacijaiin vitrosukeltas ADP

*P<0.05 ** P<0.01 priešnormali grupė

4. Diskusija

Alzheimerio ligą paprastai galima suskirstyti į keturis tipus: Alzheimerio ligą (AD), kraujagyslinę demenciją (VD), mišrią demenciją (pirmieji du egzistuoja kartu) ir senatvinę demenciją, kurią sukelia sisteminės ligos.. Epidemiologiniai tyrimai rodo, kad Vakarų šalyse sergamumas AD yra didesnis nei VD, tačiau Kinijoje jis skiriasi. Bendros 11 miestų apklausos duomenimis, VD paplitimas yra didesnis nei AD [9]. VD yra bendras demencijos sindromo, kurį sukelia smegenų audinio pažeidimas, kurį sukelia smegenų kraujagyslių veiksniai, pavadinimas. Tradicinė kinų medicina mano, kad šią ligą dažniausiai lemia esencijos trūkumas ir esencijos perteklius. Ilgėjant amžiui, organizmo inkstų esencija palaipsniui senka, kaulų čiulpų jūra palaipsniui išsenka, vidaus organų funkcija palaipsniui silpnėja, o vidaus organų nepakankamumas sukels vandens ir kraujo pasiskirstymo sutrikimą. kūnas, qi ir kraujo judėjimas, o tada patologinių produktų, tokių kaip skreplių ir kraujo sąstingis, kaupimasis organizme, skreplių ir kraujo sąstingio sutrikimas sukels smegenų užstato pažeidimą, qi infiltracijos trūkumą. ir kraujas, nepalankus angų ir priedų kilimas ir kritimas, dieviškosios galios sutrikimas. Todėl šios ligos ypatybė yra ta, kad ją sukelia trūkumas ir sumaišoma su trūkumu ir pertekliumi. Inkstų trūkumas yra pagrindinė Alzheimerio ligos atsiradimo ir vystymosi priežastis. Skreplių sąstingis ir kraujo sąstingis bei kolateralių sunaikinimas yra pagrindiniai šios ligos patogenezės patologiniai ryšiai.

Cistanche deserticola yra tradicinis tonikas ir afrodiziakas, kurio funkcijos tonizuoja inkstus, užpildo esenciją ir drėkina žarnyną. Materia Medica klasika vadina tai esminiu vaistu, kuris tonizuoja kraujo esenciją ir maitina inkstus. Jis gerai veikia nuovargio, užmaršumo, klausos praradimo ir inkstų nepakankamumo sukeltos enurezės simptomus. Zhu Zhiming ir kiti išanalizavo 46 junginių, skirtų Alzheimerio ligai gydyti, sudėtį ir nustatė, kad Cistanche deserticola yra vienas iš dažniausiai vartojamų vaistų. [1].

Cistanche deserticola - kovos su Alcheimerio liga

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Šiame eksperimente 16-ą ig vartojimo dieną žiurkėms buvo paruoštas VD modelis, sukeltas židininės smegenų išemijos-reperfuzijos, o 7-ąją nuolatinio vartojimo dieną jos buvo apmokytos ir išbandytos dėl mokymosi ir atminties. Pirmąsias tris testo dienas vidutinis teisingo atsako dažnis pavyzdinėje grupėje buvo žymiai mažesnis nei fiktyviai operuotos grupės, o tai rodo, kad smegenų išemijos-reperfuzijos pažeidimas sukėlė pavyzdinių žiurkių mokymosi ir atminties sutrikimus; Vidutinis teisingas žiurkių atsako dažnis kiekvienoje cistanche glikozidų dozių grupėje buvo žymiai didesnis nei pavyzdinėje grupėje, kuris buvo lygus žiurkių lygiui fiktyvių operacijų grupėje, o tai rodo, kad cistanche deserticola turėjo prevencinį ir gydomąjį poveikį mokymuisi. ir atminties sutrikimas VD žiurkėms, o cistanche glikozidai buvo veiksmingas anti-demencijos komponentas. VD etiologija ir patogenezė yra gana sudėtinga ir šiuo metu nėra labai aiški. Naujausi tyrimai parodė, kad VD rizikos veiksniai yra susiję su insultu ir nesusiję su insultu, kurie apibendrinami kaip hipertenzija, širdies liga, hiperlipidemija, diabetas, kraujo tūrio santykis, išsilavinimo lygis, amžius, lytis ir kt. patogenezė yra susijusi su daugybiniais infarktais, pavieniais svarbių dalių infarktais, smegenų baltosios medžiagos išemija ir kt. [10,11]. Šio eksperimento metu šlapio arterioveninio aplinkkelio trombo masė žiurkėms, kurioms 7 dienas buvo skirti Cistanche deserticola glikozidai, buvo žymiai mažesnė nei pavyzdinėje grupėje, ty bendras Cistanche deserticola glikozidų kiekis gali reikšmingai slopinti viso gyvūno trombozę. kūnas;Rezultatai taip pat parodė, kad bendras glikozidų kiekisCistanche deserticolagali žymiai slopinti ADP sukeltą trombocitų agregaciją in vitro. Sujungus du eksperimento rezultatus,galima nustatyti, kad VD prevencijos ir gydymo bendrais cistanche glikozidais mechanizmas gali būti susijęs su trombocitų agregacijos slopinimu.

Nuorodos:

[1] Zhu ZM, Zh ou YS, Ouyang J H. 46 tradicinių kinų ir medicininių junginių, skirtų gydyti smegenis, analizė [J]. Hunan J Tradit Chin Med, 2001, 17(1): 60-61.

[2] Yu F. Cistanch e mokslinių tyrimų pasiekimai klinikiniuose pritaikymuose [J]. Inner Mon gholia Med J, 2003, 35 (6): 535-536.

[3] Liang MH, Sun PY, Cao Y. Cist anche glikozidų poveikis lipidų peroksidacijai esant emoraginiam šonkauliui / reperfuzijai žiuri triušiuose [J]. J Ch in Microcir c , 2000, 4(4): 230-231.

[4] Sh ang XY, Wang XW, Wang XF ir kt. Apsauginis cistos anche glikozidų poveikis 60 bendrai spinduliuote apšvitintų pelių imuninėms funkcijoms [J]. Ch in Trad it Herb Dru gs, 2001, 32(2): 139-142.

[5] Wu LY, Wang XW, Zao R M. Apsauginis cistancho glikozidų poveikis pelių smegenų hipoksijai [J]. J Xinjiang Med Uni v , 2003, 26 (6): 561-562.

[6] Mut eli efu G, Liu MJ, Lu J F. Cistanozido junginių poveikis oksidaciniam stresui ir imunitetui [J]. J Ch in Pharm Sci, 2001, 10(3): 157-160.

[7] Longa EZ, Weinstein PR, Carls on S ir kt. Grįžtamasis vidurinės smegenų arterijos užsikimšimas be kaukolės trūkumo žiurkėms [J]. S troke, 1989, 20(1): 84-91.

[8] Xu SY, Bi an RL, Chen X. Farmakologinių tyrimų metodologija [M ]. 3 leidimas Pekinas: „Peopl e's M edical Publishing House e“, 2002 m.

[9] Wu F Q. Cerebrovaskulinė demencija [J]. Adv Card iovasc Dis , 1993, 14(2): 90-92.

[10] Skoon I. Kraujagyslinės dem encijos rizikos veiksnys [J]. Neu roep idem iolo gy, 1998, 17(1): 2-6.

[11] Loeb C. M entalinis pablogėjimas, susijęs su lacunar infarktais [J]. Hea rt Dis Stroke, 1994, 23: 75-81.