Eksperimentinis kaulų mezenchiminių kamieninių ląstelių (BMSC) kryptingos diferenciacijos osteoblastams tyrimas, vadovaujamas serumo, kuriame yra cistanche deserticola

ZENG Jian chun,FAN Yue guang*,LIU Jian ren,ZENG Yi rong,YI Chun zhi, YAN Liang. *

Pirmoji susijusi Guangdžou tradicinės kinų medicinos universiteto ligoninė, Guangdžou 510405, Guangdongas, Kinija

Liestis:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanchegali užkirsti keliąosteoporozėirSkatintikaulasląstelė augimas

ABSTRAKTUS

Tikslas: Ištirti kryptingą BMSC diferenciaciją vadovaujantis DesertlivingCistanche(Herba Cistanches), kuris pagyvina inkstus. Metodai: Pirminiai BMSC buvo gauti ištisinės kaulų čiulpų kultūros ir subkultūruoti iki ketvirtosios kartos tripsino skaidymo būdu, o po to inokuliuojami į dvi šešių duobučių plokšteles 5×106 ląstelės mililitre, visos plokštelės buvo suskirstytos į tris grupes kaip tuščia grupė, deksametazono (DXM) grupė ir Herba Cistanches grupė, trys šuliniai kiekvienoje grupėje, terpė buvo pakeista 2 dieną. Tuščia grupė buvo pakeista su L-DMEM, kuriame yra 10% FBS. DXM grupė buvo pakeista terpe, kurioje yra 10 mmol / l β natrio glicerofosfato, 0,1 μmol / L DXM ir 50 mg / l vitamino C. HerbaCistanchaigrupė buvo pakeista terpe, kurioje buvo 10% kraujo serumo, kuriame buvo Herba Cistanches ir L-DMEM. Viena iš šešių šulinių plokštelių dešimtą dieną buvo nudažyta šarmine fosfataze (AKP), kitą dvidešimtą dieną nudažė Alizarin Bordeaux. Rezultatai: Dešimtą dieną DXM grupė ir Herba Cistanches grupė buvo ALKP nudažyta teigiamai; nuo 12-os dienos šulinių paviršiuje buvo galima pamatyti baltą kalcio mazgą; kurį alizarinas nudažė; kurį alizarinas nudažė teigiamas iki dvidešimtos dienos.

Išvada: Terpė, kurioje yra HerbaCistanchaigali paskatinti BMSC diferencijuotis į osteoblastą, o tai žada palankią osteoporozės ir kaulų lūžių susiskaldymo gydymo perspektyvą.

RAKTAŽODŽIAICistanchedeserticola； Kaulų čiulpai; Mezenchiminės kamieninės ląstelės; Osteoblastai; Ląstelių diferenciacija

Mezenchiminės kamieninės ląstelės (MSC) yra tam tikros rūšies pliuripotentinės suaugusiųjų kamieninės ląstelės, daugiausia randamos kaulų čiulpuose, bet taip pat ir pašaliniuose audiniuose, gautuose iš mezenchiminės kilmės embriono laikotarpiu, pavyzdžiui, odos fibroblastai, riebalinės kamieninės ląstelės, skeleto raumenų palydovinės ląstelės, kraujagyslės Endotelio ląstelės ir pan. Kaulų čiulpų PG (BM SCs) yra kaulų čiulpų stromos komponentai. Po to, kai jie yra izoliuoti ir kultivuoti in vitro, esant tam tikroms indukcinėms sąlygoms, jie turi galimybę diferencijuotis į osteoblastus, chondrocitus, nervų ląsteles, adipocitus, kardiomiocitus ir kt. Pagrindiniai kaulinio audinio inžinerijos sėklinių ląstelių šaltiniai yra osteoblastai ir BMSC. Nors osteoblastai turi gerą osteogeninį aktyvumą, jie turi ribotus šaltinius, juos sunku atskirti ir gauti dideliais kiekiais, ir jie turi nepakankamą didelio masto plėtimosi potencialą in vitro, o tai sunku patenkinti klinikinių pritaikymų kaulų audinių inžinerijoje poreikius. BMSC turi ne tik gerą osteoblastų diferenciacijos potencialą, bet ir didelį augimo potencialą. Kaulų aktyvumas, stiprus proliferacijos potencialas ir patogus šaltinis gali patenkinti autologinių audinių inžineriją ir tapti tyrimų centru.

Kinų medicina mano, kad inkstai kontroliuoja kaulus ir gamina kaulus. Šiuolaikiniai farmakologiniai tyrimai parodė, kad inkstus tonizuojantys vaistai turi skirtingą jaudulio laipsnį hipofizės-antinksčių-gonadalų sistemai ir yra glaudžiai susiję su kaulų metabolizmu. Estrogenas stiprina osteogenezę.

Kinų medicina mano, kad inkstai kontroliuoja kaulus ir gamina kaulus. Šiuolaikiniai farmakologiniai tyrimai parodė, kad inkstus tonizuojantys vaistai turi skirtingą jaudulio laipsnį hipofizės-antinksčių-gonadalų sistemai ir yra glaudžiai susiję su kaulų metabolizmu. Estrogenas gali sustiprinti kaulų susidarymą, o androgenai gali skatinti baltymų sintezę, skatinti kaulų matricos padidėjimą ir kalcio bei fosforo nusėdimą. Poveikis.Cistanchai(HerbaCistanchai) sudėtyje yra fenetilo alkoholio, kurių bendras glikozidų kiekis, skalsių glikozidai ir betainas turi androgenų panašų poveikį. Šiuo eksperimentu siekiama ištirti inkstus tonizuojančios tradicinės kinų medicinos poveikįCistanche-kurio sudėtyje yra serumo, skirto BMSC diferenciacijai į osteoblastus.

Diskusija

Cistanchevaistinis serumas sukelia BMSCs. Cistanche turi vidurinio maitinimo, kepenų pagyvinimo, inkstų maitinimo, yang stiprinimo, žarnyno drėkinimo ir vidurių užkietėjimo poveikį. Šiuolaikiniai farmakologiniai tyrimai parodė, kad inkstus tonizuojantys vaistai turi skirtingą jaudulio laipsnį hipofizės-antinksčių-gonadalų sistemai ir yra glaudžiai susiję su kaulų metabolizmu. Estrogenas gali sustiprinti kaulų susidarymą, o androgenai gali skatinti baltymų sintezę, skatinti kaulų matricos padidėjimą ir kalcio bei fosforo nusėdimą. Vaidmuo [1]. Bendras feniletanoidinių glikozidų, ergosterozido ir betaino kiekis Cistanche turi androgenų panašų poveikį. Šis eksperimentas parodė, kad gydomasis serumasCistanchegali paskatinti BMSC diferencijuotis į osteoblastus. Nors viena kinų medicina arba sudėtinė kinų medicina buvo naudojama siekiant paskatinti BMSC diferencijuotis į osteoblastus, apie specifinį molekulinį mechanizmą dar nebuvo pranešta. Proteomikos tyrimai gali analizuoti susijusių proteomikos skirtumus šiame procese ir nustatyti funkcinę proteomiką, siekiant naujo inkstų valdymo kaulus teorijos aiškinimo.

Ląstelių tankis vaidina svarbų vaidmenį BMSC diferenciacijos procese į osteoblastus. Kaulų mazgelių susidarymas ne tik reikalauja osteoindukcinių medžiagų, bet ir priklauso nuo inokuliuotų ląstelių tankio. Ląstelių tankis turi pasiekti tam tikrą tankį ir ląstelės gali susijungti. Osteoblastų diferenciacija. Šiame eksperimente, kai 4-osios kartos ląstelės dauginasi iki daugiau kaip 90% susiliejimo, induktorius pridedamas kultūrai. Kai ląstelių tankis yra per mažas, ląstelės lėtai dauginasi ir nėra tendencijos kauptis ir augti. Toje pačioje kultūroje, kurioje ląstelių tankis yra netolygus, ląstelių tankus plotas turi neaiškias ląstelių ribas ir neryškią struktūrą, o ląstelės susijungia į gumulus. AKP dažymas ir alizarino raudonas dažymas yra teigiami, tačiau toje vietoje, kurioje ląstelių tankis yra mažesnis, nėra ląstelių tankio. Ląstelės susijungė į gumulus, o AKP dažymas ir Alizarino raudonas dažymas buvo neigiamas. Todėl mikroautomobilių naudojimas kaulų audinių inžinerijoje kartu su efektyvesniais in vitro kultūros metodais, tokiais kaip trimatė kultūra (RCCS), siekiant gauti daugiau ląstelių, turi didelę įtaką ląstelių transplantacijos sėkmei.

Klinikinė reikšmėCistanchemedicininis serumas, skirtas paskatinti BMSCs Kaulinių audinių inžinerija turi plačias klinikinio taikymo perspektyvas ir tapo šiuolaikinės ortopedijos mokslinių tyrimų tašku. BMSC šiuo metu yra idealiausios sėklų ląstelės kaulų audinių inžinerijai. Pagrindinis jų poveikio tyrimų uždavinys yra tai, kaip kuo greičiau atskirti juos į osteoblastus, o tada paversti juos subrendusiomis kaulų ląstelėmis.

Šiuo metu dažniausiai naudojami induktoriai, skirti nukreiptiems BMSC diferenciacijai, susideda iš deksametazono, vitamino C ir natrio β glicerofosfato. In vitro kultūroje deksametazonas slopina ląstelių proliferaciją [2], kaip matyti iš šio eksperimento, kliniškai deksametazonas turi nepageidaujamų reakcijų, tokių kaip infekcija, osteonekrozė ir osteoporozė, o tai apribos BMSC transplantaciją. Po naudojimo kaip induktorius organizme. Cistanche turi inkstų pagyvinimo ir kaulų bei raumenų stiprinimo poveikį. Šis eksperimentas parodė, kad Cistanche turi poveikį skatindamas BMSC proliferaciją ir skatindamas BMSC diferenciaciją į osteogeninį. Ilgalaikio klinikinio taikymo metu cistanche nepageidaujamos reakcijos nepastebėta, o jo naudojimas kaip induktorius in vivo turi plačias klinikines taikymo perspektyvas.

Trumpai tariant, dauguma dabartinių BMSC, kaip kaulinio audinio inžinerijos sėklinių ląstelių, tyrimų vis dar yra eksperimentinėje stadijoje. Dabartinių tyrimų dėmesio centre yra tai, kaip per palyginti trumpą laiką gauti pakankamai BMSC ir naudoti paprastus metodus, skatinančius juos diferencijuotis į osteogeninius. Nors Cistanche cistanche mechanizmas, kurio funkcija yra pagyvinti inkstus ir stiprinti kaulus bei raumenis, skatinant BMSC osteogeninę diferenciaciją, dar reikia toliau tirti, jo naudojimas kaip BMSC diferenciacijos induktorius, skirtas gydyti uždelstą lūžių sąjungą, neunijoniją ir osteonekrozę su PG transplantacija, turi šviesią ateitį.

Cistanchegali užkirsti keliąosteoporozėir skatintikaulų ląstelėaugimas