Kaip aktyvieji Cistanche Tubulosa ingredientai vaidina svarbų vaidmenį sergant Alzheimerio liga?

JIANHUA YANG1*, BOWEI JU1,2*, YAO YAN1, HUANHUAN XU1, SHANSHAN WU1, DANDAN ZHU1, DANDAN CAO1 ir JUNPING HU2

Abstraktus.Šiuo tyrimu buvo siekiama ištirti neuroprotekcinį poveikįfeniletanoidiniai glikozidai(PhG) dėl H2O2- ir amiloido peptido (A )1-42- sukelto PC12 ląstelių pažeidimo kaip in vitro modelisAlzheimerio liga (REKLAMA). Optimalios indukcijos sąlygos buvo nustatytos tikrinant įvairius inkubacijos laikus ir koncentracijas. PC12 ląstelės buvo apdorotos 0,5 µM A 1-42 ir H2O2, dalyvaujant PhG 24 valandas, o tada ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT tyrimu; Taip pat buvo matuojamas laktatdehidrogenazės (LDH) išsiskyrimas ir malondialdehido (MDA) kiekis. Optimalios sąlygos steigtiREKLAMAmodelis buvo PC12 ląstelių apdorojimas 0,5 µM A 1-42 48 valandas arba 25 µM H2O2, ištirpintu DMEM su PBS. 5, 25 ir 50 µg/ml koncentracijos PhG padidino A 1-42 arba H2O2 pažeistų PC12 ląstelių gyvybingumą ir sumažino LDH ir MDA išsiskyrimą. Apibendrinant galima pasakyti, kad A 1-42- ir H2O2-sukeltas PC12 ląstelių pažeidimo modelis buvo sėkmingai sukurtas. Nustatyta, kad PhG turi didelį neuroprotekcinį poveikį nuo A 1-42- arba H2O2- sukelto ląstelių pažeidimo.

Kontaktas:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche tubulosa turi daug efektų, spustelėkite čia, kad sužinotumėte daugiau

Įvadas

Alzheimerio liga (REKLAMA), neurodegeneracinis sutrikimas, kurio klinikinės savybės yra progresuojantis atminties praradimas ir pažinimo funkcijų sutrikimas (1), yra dažniausia demencijos priežastis visame pasaulyje (2). Finansinės išlaidos yra didžiulės dėl AD paplitimo (3). Todėl būtina skubiai sukurti tinkamas priemones, skirtas valdyti ir užkirsti keliąREKLAMA.

Patogenezė išREKLAMAyra glaudžiai susijęs su neurofibrilinių raizginių ir senatvinių plokštelių (SP) kaupimu paveiktuose smegenų regionuose (4, 5). Buvo pranešta, kad amiloidinis peptidas (A), pagrindinis SP komponentas, turi priežastinį vaidmenį progresuojantREKLAMAkaip turi toksinį poveikį neuronų ląstelėms (6). A fragmentai, įskaitant A 1-40, A 25-35 ir A 1-42, buvo sukurti skaidant amiloido pirmtako baltymą (7). Nustatyta, kad A 1-42 neurotoksiškumas yra žymiai didesnis nei A 25-35 ir A 1-40, o A 1-42 gali sukeltiREKLAMAmodelis (1, 8-10). Oksidacinis stresas gali būti susijęs su patogenezeREKLAMAir yra pagrindinis A sukelto neurotoksiškumo mechanizmas (11-13). Keletas tyrimų parodė, kad A 1-42 sukėlė reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) kaupimąsi ląstelėse, o tai sukėlė lipidų ir baltymų oksidaciją, DNR pažeidimus ir ląstelių ciklo kontrolinio taško signalizacijos aktyvavimą (1, 14, 15). Per didelis H2O2 kiekis gali sukelti oksidacinę žalą ir sukelti PC12 ląstelių apoptozę (16). Todėl nukreipimas į oksidacinį stresą gali būti perspektyvus požiūris kuriant terapines strategijas, skirtas slopinti A sukeltą neurotoksiškumą sergant AD.

Herba (H.)Cistanche, Kinijos augalinis vaistas, dažniausiai naudojamas žemyninėje Kinijoje inkstams maitinti ir esencijai bei kraujui papildyti, buvo naudojamas atminties praradimui ir senatviniam vidurių užkietėjimui gydyti (17). Feniletanoido glikozidas (PhG), vienas iš pagrindinių H.Cistanche, pagerina neuronų apoptozės, kurią sukelia A 25-35, sutrikimą dėl savo antioksidacinio poveikio (18, 19). Ankstesnis tyrimas nustatė penkis pagrindinius komponentus iš visų PhG, būtentakteozido2'-acetilaktozidas,echinakozidas, cistanozidai ir izoakteozidas (20). Tarp šių komponentųakteozidoirechinakozidasbuvo pranešta, kad jie turi neuroprotekcinį poveikį A 25-35- arba H2O2- sukeltam neurotoksiškumui (21-23). Pavyzdžiui, Wu ir kt. (24) pasiūlė, kad akteozidas irechinakozidas

Raktiniai žodžiai:feniletanoidasglikozidai, PC12 ląstelės, H2O2, amiloidinis peptidas1-42, neuroprotekcija, cistanche

medžiagos ir metodai

PhG paruošimas. Bendras PhG buvo išgautas iš H.Cistanchekaip aprašyta anksčiau (25). Oru išdžiovintas H.Cistanchebuvo sumaltas į miltelius ir ekstrahuotas perkoliuojant 80 procentų EtOH. Perkolatas išgarinamas sumažintame slėgyje, po to pakartotinai suspenduojamas atitinkamame H2O2 kiekyje (1{{20}}0 µmol/l). Mišinys buvo išskirtas ant SP-825 makroporingos dervos kolonėlės (Mitsubishi Chemical, Tokijas, Japonija) ir eliuuojamas 0, 30, 50, 70 ir 90 procentų EtOH vandenyje. Norint gauti PhG turtingą frakciją, 30-50 % EtOH eliuentai buvo sukoncentruoti ir išdžiovinti sumažintame slėgyje. Siekiant nustatyti bendrą PhG, buvo atlikta ultravioletinė (UV) spektrofotometrija. Echinakozido ir akteozido kiekis buvo nustatytas naudojant aukšto slėgio skysčių chromatografiją pagal ankstesnį protokolą (26). Buvo naudojama Hypersil ODS{15}} kolonėlė (4,6 x 250 mm, 5 µm; Dalian Elite Analytical Instruments, Co., Ltd., Dalianas, Kinija) ir palaikoma kambario temperatūroje. Judančios fazės buvo metilcianidai ir vanduo, turintis 0,4 % fosforo rūgšties (v/v; Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmštatas, Vokietija). Srauto greitis buvo 0,75 ml/min., o bangos ilgis nustatytas į 333 nm.

Ląstelių kultūra ir gydymas vaistais. PC12 žiurkių feochromocitomos ląstelių liniją pateikė Dr He Chunhui iš Sindziango medicinos universiteto (Urumčis, Kinija) medicinos mokyklos. Ląstelės buvo kultivuojamos daug gliukozės turinčioje Dulbecco modifikuotoje Eagle terpėje (DMEM; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, JAV), turinčioje 1 0 procentų galvijų vaisiaus serumo (Sangon Biotech Co. Ltd., Šanchajus, Kinija). , 100 V/ml penicilino ir 100 V/ml streptomicino inkubatoriuje 37 ˚C temperatūroje, kuriame yra 5 % CO2 ir 95 % oro. Pasiekus 80 procentų susiliejimą, ląstelės buvo apdorotos 0,25 procento tripsino ir pasažuotos.

Siekiant pašalinti paties vaisto trukdžius PC12 ląstelių augimui, buvo atliktas toksiškumo eksperimentas. Trumpai tariant, PC12 ląstelės (3x104 ląstelės/ml) buvo pasėtos į 96-šulinėlių plokšteles po 100 µl/šulinėlį ir inkubuojamos 37 ˚C temperatūroje per naktį. Išmetus supernatantą, tuščiojoje grupėje buvo pridėta 200 µl pilno DMEM, o intervencinių grupių ląstelės buvo apdorotos PhG įvairiomis dozėmis (5, 25, 50, 75, 100, 125, 150, 175 ir 200 µg/g). ml). Po ląstelių inkubacijos 37 ˚C temperatūroje 48 valandas, į kiekvieną šulinėlį įpilama 20 µl MTT tirpalo (Sigma-Aldrich; Merck KGaA). Po 4 valandų inkubacijos supernatantas buvo išmestas ir į kiekvieną duobutę buvo pridėta 150 µl dimetilsulfoksido, po to maišoma 10 min. Optinio tankio (OD) reikšmės esant 490 nm buvo aptiktos naudojant ELISA plokštelių skaitytuvą.

1–42 sukeltas PC12 ląstelių pažeidimas. 1-42 peptidas, įsigytas iš Bioss Biotech (Pekinas, Kinija), buvo ištirpintas vandenyje (100 µg/ml). Vėliau mišinys buvo inkubuojamas 37 °C temperatūroje 4 dienas ir prieš naudojimą laikomas 4 °C temperatūroje.

PC12 ląstelės buvo pasėtos į 96-šulinėlių plokšteles (3xl04 ląstelės po 100 µl į duobutę). Po 24 valandų kultivavimo, kad sukibtų, buvo pridėta 50 µl A 1-42 įvairiose galutinėse koncentracijose (0, 0,25, 0,5, 1, 1,5 arba 2 µM), ištirpinto DMEM be serumo, po to inkubacija 24, 48, 72 arba 96 val. Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT tyrimu. Optimali A 1-42 koncentracija buvo 0,5, nustatyta kaip µM.

PC12 ląstelės (3 x 1 0,5 µM A 1-42 24 val. Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT tyrimu.

H2O2 sukeltas PC12 ląstelių pažeidimas. PC12 ląstelės buvo pasėtos į 96-šulinėlių plokšteles (3xl04 ląstelės 100 µl šulinėlyje). Po 24 valandų kultivavimo, kad sukibtų, buvo pridėta 100 µl H2O2 įvairiose galutinėse koncentracijose (0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 ir 500 µM), ištirpinto DMEM su arba be PBS (0,01 mol/l). po to inkubuojama 24 valandas. Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT tyrimu. Siekiant sukurti AD in vitro modelį, nustatyta optimali H2O2 koncentracija ir tirpiklis.

PC12 ląstelės (3xl04 ląstelės viename šulinyje) buvo apdorotos įvairiomis PhG dozėmis (0, 0,5, 5, 25 ir 50 µM). Po 24 valandų kultivavimo, kad priliptų, PC12 ląstelės 24 valandas buvo apdorotos 100 µl H2O2, ištirpinto DMEM su PBS, dalyvaujant PhG. Ląstelių gyvybingumas buvo įvertintas MTT tyrimu.

Laktato dehidrogenazės (LDH) išsiskyrimo tyrimas. Ląstelių pažeidimas buvo įvertintas matuojant LDH aktyvumą PC12 ląstelių supernatante, naudojant LDH rinkinį pagal gamintojo protokolą (kat. Nr. 20150604; Nanjing Jiancheng bioinžinerijos institutas, Nankinas, Kinija). Trumpai tariant, du kartus distiliuotas H2O, 0,2 µmol/ml piruvinės rūgšties, matricos buferis ir kofermento I buferis buvo pridedami iš eilės praėjus 48 valandoms po gydymo vaistais. Po 15 minučių inkubacijos 37 °C temperatūroje buvo pridėta 2,4-dinitro-fenilhidrazino. Vėliau į kiekvieną šulinėlį įpilama 250 µl 0,4 M NaOH tirpalo. Supernatantas buvo surinktas po 30 minučių inkubacijos kambario temperatūroje. Tada sugertis prie 450 nm buvo išmatuota mikroplokštelių skaitytuvu.

Malondialdehido (MDA) matavimas. MDA buvo matuojamas PC12 ląstelių supernatante, naudojant komercinį rinkinį (kat. Nr. 20150604; Nanjing Jiancheng Bioinžinerijos institutas) pagal gamintojo protokolą. 95˚C temperatūroje 40 min. Mišinys buvo centrifuguojamas 1006 xg ir 25 °C temperatūroje 10 min. po aušinimo. Tada supernatantas buvo naudojamas MDA kiekiui nustatyti. Vėliau absorbcija buvo išmatuota mikroplokštelių skaitytuvu esant 532 nm.

Echinakozido ir akteozido apsauginio poveikio nuo AD įvertinimas in vitro. PC12 ląstelės buvo pasėtos 3xl04 ląstelių/šulinėlių tankiu į 96-šulinėlių plokšteles (100 µl/šulinėle). Ląstelės buvo inkubuojamos su vaistais, įskaitant echinakozidą (kat. Nr. 111670-200503; Nacionaliniai maisto ir vaistų kontrolės institutai, Pekinas, Kinija) ir acetonidą (kat. Nr. 111530-200505; Nacionaliniai maisto ir vaistų kontrolės institutai ) esant įvairioms koncentracijoms (0,5, 25 ir 50 µg/ml). Vėliau ląstelės buvo apdorotos A 1-42 arba H2O2 24 valandas, o ląstelių gyvybingumas buvo matuojamas MTT tyrimu.

Statistinė analizė. Reikšmės išreiškiamos kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis. Palyginimui tarp grupių buvo naudojamas studento t testas. Statistinė analizė buvo atlikta naudojant SPSS 18.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, JAV). P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Rezultatai

PhG iš H. Cistanches kiekybinis nustatymas. UV spektraiPhGsekstrahuojami, taip pat standartiniai tirpalaiechinakozidasirakteozidobuvo užfiksuoti, o rezultatai parodė, kad UV spektrai buvo nuoseklūs (1 pav.). UV spektrofotometrija

parodė, kad PhG kiekis buvo 87,6 proc. HPLC rezultatai parodė, kad echinakozido ir akteozido kiekis buvo atitinkamai 37,7 ir 17,8 proc. (2 pav.).

Idealios PhG koncentracijos nustatymas. Palyginti su tuščiąja grupe, PhG, esant 75, 100, 125, 150, 175 ir 200 µg/ml, turėjo reikšmingą slopinamąjį poveikį PC12 ląstelėms (P<0.05), while="" phg="" at="" 5,="" 25="" and="" 50="" µg/ml="" showed="" low="" toxicity="" on="" pc12="" cells,="" and="" the="" cell="" viability="" was="">80 procentų (3 pav.). Taigi, PhGs, kurių koncentracija buvo 5, 25 ir 50 µg/ml, buvo naudojami PC12 ląstelėms gydyti vėlesniuose eksperimentuose, nes jie neturėjo įtakos ląstelių gyvybingumui.

1–42 sukeltas PC12 ląstelių pažeidimas. Palyginti su kontroline grupe, ląstelių gyvybingumas 0,5 µM A 1-42 sužalojimų grupėje buvo 63 procentai (P<0.05). the="" cell="" viability="" was="" decreased="" by="" aβ1-42="" in="" a="" concentration-dependent="" manner,="" and="" the="" viability="" was=""><50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups="" (fig.="" 4).="" thus,="" treatment="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" in="" vitro="" ad="">

Taip pat buvo nustatytas PC12 ląstelių, apdorotų 0,5 µM A 1-42, aktyvumas esant saugioms PhG dozėms (5, 25 ir 50 µg/ml) 24 valandas. Palyginti su modelių grupe (P<0.01), phgs="" showed="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" rescued="" by="" phgs="" in="" a="" dose-dependent="" manner="" (fig.="">

H2O2 sukeltas PC12 ląstelių pažeidimas. PC12 ląstelių, apdorotų 25 µM H2O2, ištirpinto DMEM su PBS, gyvybingumas buvo 56,43 proc. PC12 ląstelių, apdorotų 200 µM H2O2, ištirpinto DMEM be PBS, gyvybingumas buvo 71,64 proc. (I lentelė). Taigi PC12 ląstelės, apdorotos 25 µM H2O2, ištirpinto DMEM su PBS, buvo pasirinktos kaip optimali sąlyga AD modeliui sukurti.

Palyginti su kontroline grupe, ląstelių gyvybingumas modelio grupėje buvo 48,8 proc<0.05). compared="" with="" the="" model="" group,="" phgs="" had="" a="" significant="" neuroprotective="" effect="" on="" pc12="" cells.="" the="" cell="" viability="" was="" dose-dependently="" increased="">

PhGs ir PC12 ląstelių, apdorotų PhG koncentracijomis 5, 25 ir 50 µg/ml, gyvybingumas buvo atitinkamai 54, 57 ir 64 procentai (II lentelė).

PhG slopina sužalojimų sukeltą LDH išsiskyrimą iš PC12 ląstelių. Palyginti su kontroline grupe, sužeistų PC12 ląstelių supernatanto LDH kiekis buvo padidėjęs, o PhGs slopino priklausomai nuo koncentracijos. Šis rezultatas parodė, kad PhG turi reikšmingą neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms (6 pav.).

I lentelė. Ląstelių gyvybingumas (procentais) po apdorojimo H2O2.

II lentelė. Ląstelių gyvybingumas po vaistų įsikišimo.

slopina PhGs priklausomai nuo koncentracijos. Šis rezultatas parodė, kad PhG turi reikšmingą neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms (7 pav.).

PhG ir jo komponentai echinakozidas ir akteozidas gelbsti sužeistų PC12 ląstelių gyvybingumą. Palyginti su modelio grupe, gydymas akteozidu reikšmingai padidino A 1-42-pažeistų PC12 ląstelių gyvybingumą priklausomai nuo dozės. PhG ir echinakozidas taip pat reikšmingai padidino A 1-42-pažeistų PC12 ląstelių gyvybingumą visomis tirtomis koncentracijomis (8A pav.).

**P<0.05, vs.="" model="" group.="" aβ,="" â-amyloid="" peptide;="" phgs,="" phenylethanoid="" glycosides;="" ech,="" echinacoside;="" as,="">

Palyginti su modelių grupe, akteozidas žymiai padidino PC12 ląstelių, apdorotų H2O2, gyvybingumą. PhG taip pat padidino PC12 ląstelių, apdorotų H2O2, gyvybingumą, o poveikis nebuvo reikšmingas, kai koncentracija buvo 5 ir 25 µg/ml (8B pav.). Be to, echinakozidas padidino ląstelių gyvybingumą 25 µg/ml.

Apibendrinant galima pasakyti, kad akteozidas, PhG ir echinakozidas padarė reikšmingą neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms, kurios buvo pažeistos A 1-42 arba H2O2.

Diskusija

Oksidacinis stresas yra pagrindinis mechanizmas, sukeliantis A sukeltą neurotoksiškumą sergant AD (11-13). Todėl nukreipimas į oksidacinį stresą gali būti AD gydymo metodas. Šiame tyrime buvo sėkmingai sukurtas AD modelis in vitro, apimantis A 1-42- ir H2O2- sukeltą PC12 ląstelių pažeidimą. MTT, LDH ir MDA tyrimų rezultatai parodė, kad PhG padidino ląstelių gyvybingumą ir sumažino sužalotų PC12 ląstelių LDH ir MDA išsiskyrimą. Galima daryti išvadą, kad PhG turi didelį neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms.

Siekiant sumažinti pačių PhG poveikį PC12 ląstelių augimui ir užkirsti kelią nenormaliam proliferacijai, saugi PhG dozė buvo nustatyta atrankos tyrime. Rezultatai parodė, kad 75, 100, 125, 150, 175 ir 200 µg/ml PhG turėjo reikšmingą slopinamąjį poveikį PC12 ląstelėms (P<0.05,><0.01), while="" cell="" viability="" remained="">80 proc., kai koncentracija yra 5, 25 ir 50 µg/ml. Taigi 5, 25 ir 50 µg/ml koncentracijos PhG buvo saugūs PC12 ląstelėms.

A {{0}} sužalojimui įtakos turėjo tam tikri veiksniai, įskaitant tirpiklį, inkubacijos laiką ir produkto kokybę. Šiame tyrime A 1-42 peptidas buvo ištirpintas vandenyje (100 µg/ml) ir prieš naudojimą inkubuojamas 37 ˚C temperatūroje 4 dienas CO2 inkubatoriuje. PC12 ląstelės buvo apdorotos A 1-42, kurių koncentracija buvo 0,5, 1, 1,5 ir 2 µM. Rezultatai parodė, kad ląstelių gyvybingumas sumažėjo padidėjus A 1-42, o gyvybingumas sumažėjo<50% in="" the="" 1,="" 1.5,="" and="" 2="" µm="" aβ1-42="" injury="" groups.="" thus,="" treatment="" of="" pc12="" cells="" with="" 0.5="" µm="" aβ1-42="" for="" 48="" h="" was="" determined="" to="" be="" the="" optimal="" condition="" for="" establishing="" the="" ad="" model.="" aβ25-35="" has="" been="" commonly="" used="" to="" establish="" ad="" models="" due="" to="" its="" low="" cost="" and="" simple="" operation="" (27-29).="" the="" neurotoxicity="" of="" aβ1-42="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" aβ25-35,="" and="" aβ1-42="" is,="" therefore,="" the="" optimal="" aβ="" fragment="" for="" establishing="" an="" ad="" model="">

H2O2 yra oksidatorius, o per didelis H2O2 gali sukelti oksidacinę žalą ir sukelti ląstelių apoptozę (30). Šiame tyrime PC12 ląstelės buvo apdorotos 25-500 µM H2O2, ištirpinto DMEM su PBS arba be jo. Rezultatai parodė, kad H2O2, ištirpintas DMEM be PBS, sukėlė nenormalų PC12 ląstelių dauginimąsi. Taigi, PC12 ląstelių apdorojimas 25 µM H2O2, ištirpinto DMEM su PBS, buvo optimali sąlyga AD modeliui sukurti. Dėl prasto H2O2 stabilumo ir tirpiklio poveikio 1-42-sukeltas sužalojimas buvo didesnis nei H2O2-sukeltas sužalojimas.

Kai ląstelė yra pažeista, LDH nutekėjimas į auginimo terpę žymiai padidėja. Yra žinoma, kad ROS sukelia MDA gamybą. Todėl MDA ir LDH kiekis atspindi oksidacinės žalos dydį. Šiame tyrime žalos sukeltas LDH ir MDA aktyvumas sumažėjo didėjant PhG dozėms. Šie rezultatai parodė, kad PhG turi didelį neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms. MTT tyrimas parodė, kad PhGs turėjo nuo dozės priklausomą neuroprotekcinį poveikį PC12 ląstelėms.

Apibendrinant, buvo sėkmingai sukurtas AD modelis in vitro, apimantis A 1-42- ir H2O2- sukeltą PC12 ląstelių pažeidimą. Gydymas PhG padidino ląstelių gyvybingumą ir sumažino LDH ir MDA išsiskyrimą iš PC12 ląstelių, apdorotų A 1-42 arba H2O2. PhG turėjo didelį neuroprotekcinį poveikį A 1-42- arba H2O2- sukeltam ląstelių pažeidimui.

Nuorodos

1. Qu M, Zhou Z, Xu S, Chen C, Yu Z ir Wang D: per didelė Mortalino ekspresija susilpnina beta amiloido sukeltą neurotoksiškumą SH-SY5Y ląstelėse. Brain Res 1368: 336-345, 2011 m.

2. Uzun S, Kozumplik O ir Folnegović-Small V: Alzheimerio demencija: dabartinių duomenų apžvalga. Collegium antropologicum 35: 1333-1337, 2011 m.

3. Brookmeyer R, Johnson E, Ziegler-Graham K ir Arrighi HM: Pasaulinės Alzheimerio ligos naštos prognozavimas. Alzheimerio liga ir demencija 3: 186-191, 2007 m.

4. Castellani RJ, Rolston RK ir Smith MA: Alzheimerio liga. Liga per mėnesį 56: 484-546, 2010 m.

5. Mattson MP: Kelias link Alzheimerio ligos ir nuo jos. Nature 430: 631-639, 2004 m.

6. Gouras GK, Tsai J, Naslund J ir kt.: Intraneuroninis A 42 kaupimasis žmogaus smegenyse. Amerikos patologijos žurnalas 156: 15-20, 2000 m.

7. Shen C, Chen Y, Liu H ir kt.: Vandenilio peroksidas skatina A gamybą per JNK priklausomą -sekretazės aktyvavimą. Biologinės chemijos žurnalas 283: 17721-17730, 2008 m.

8. Shih PH ir Wu CH, Yeh CT ir Yen GC: apsauginis antocianinų poveikis nuo amiloido peptido sukelto pažeidimo neuro-2A ląstelėse. Žemės ūkio ir maisto chemijos žurnalas 59: 1683-1689, 2011 m.

9. Figueiredo CP, Bicca MA, Latini A, Prediger R, Medeiros R ir Calixto JB: folio rūgštis ir tokoferolis sumažina amiloido - - sukeltą neurotoksiškumą moduliuodami mitochondrijų kompleksų aktyvumą. Alzheimerio ligos žurnalas: JAD 24: 61-75, 2010 m.

10. Dumont M, Lin MT ir Beal MF: Mitochondrijų ir antioksidantų tikslinės terapinės strategijos Alzheimerio ligai gydyti. Alzheimerio ligos žurnalas: JAD 20: S633, 2010.

11. Sonnen JA, Breitner JC, Lovell MA, Markesbery WR, Quinn JF ir Montine TJ: Laisvųjų radikalų sukelta žala smegenims sergant Alzheimerio liga ir jos transgeniniais pelių modeliais. Laisvoji radikalioji biologija ir medicina 45: 219-230, 2008 m.

12. Lin MT ir Beal MF: mitochondrijų disfunkcija ir oksidacinis stresas sergant neurodegeneracinėmis ligomis. Nature 443: 787-795, 2006 m.

13. Trushina E ir McMurray C: Oksidacinis stresas ir mitochondrijų disfunkcija sergant neurodegeneracinėmis ligomis. Neuroscience 145: 1233-1248, 2007.

14. Huang SH, Lin CM ir Chiang BH: Angelica Sinensis ekstrakto apsauginis poveikis amiloido peptido sukeltam neurotoksiškumui. Fitomedicina 15: 710-721, 2008 m.

15. Burhans WC ir Heintz NH: ląstelių ciklas yra redokso ciklas: susieja fazei būdingus taikinius su ląstelės likimu. Laisvoji radikalioji biologija ir medicina 47: 1282-1293, 2009 m.

16. Xue HY, Gao GZ, Lin QY, Jin LJ ir Xu YP: apsauginis aukubino poveikis H O sukeltai apoptozei PC12 ląstelėse. Fitoterapija

18. Liu, Fx Wang, Xw Luo L ir Xin H, Na B ir Wang Xf: Cistanche glikozidų poveikis mokymuisi ir atminčiai sergant beta amiloido peptidų sukelta Alzheimerio liga pelėms ir galimas jos mechanizmas. Kinijos farmakologinis biuletenis 22: 595, 2006.

19. Bao B, Tang X, Tian H, Tong Y, Wu W ir Hong Y: Antioksidacinis ekstraktų iš dykumoje gyvenančių Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wright Shanghai J Tradit Chin Med 44: 68-71, 2010 m. .

20. Jiang Y, Li S, Wang Y, Chen X ir Tu P: Herba Cistanches diferencijavimas pagal pirštų atspaudus naudojant didelio efektyvumo skysčių chromatografijos-diodų matricos aptikimo-masių spektrometriją. Chromatografijos žurnalas A 1216: 2156-2162, 2009 m.