N-sukcinil-S-farnezil-L-cisteinas (SFC): naujas izoprenilcisteino analogas, turintis priešuždegiminį poveikį in vitro ir klinikinėmis odos apsaugos savybėmis

Prašau susisiektioscar.xiao@wecistanche.comDaugiau informacijos

Santrauka:Per pastaruosius 15 metų mažos molekulės izoprenilcisteino (IPC) analogai buvo nustatyti kaip galima nauja vietinio poveikio priešuždegiminių vaistų klasė. Klinikiniai tyrimai parodė, kad IPC yra saugūs ir veiksmingi skatinant sveiką odą, kai naudojami lokaliai. Šiuo darbu siekiama parodyti N-sukcinil-S-farnezil-L-cisteiną (SFC) kaip naują IPC molekulę, kuri suteikia platų spektrą naudos odai. Žmogaus promielocitinė ląstelių linija HL-60, žmogaus odos mikrovaskulinės endotelio ląstelės (HDMEC), žmogaus odos fibroblastai (HDF) ir normalūs žmogaus epidermio keratinocitai (NHEK) kultūroje buvo veikiami įvairiais induktoriais, kad suaktyvintų reaktyviąsias deguonies rūšis, citokinus, arba kolagenazės gamyba. Buvo atliktas 49-atsitiktinės atrankos dvigubai aklas, transporto priemone kontroliuojamas, suskaidyto veido tyrimas su 1 proc. SFC geliu arba 5 proc. niacinamidu, o nešiklis buvo naudojamas 12 savaičių, siekiant įvertinti raukšles ir senėjimą. galutiniai taškai. Mes parodėme, kad SFC slopino GPCR ir TLR sukeltą priešuždegiminį citokinų išsiskyrimą NHEK ir HDMEC iš kelių uždegimą sukeliančių medžiagų, tokių kaip UVB, cheminės medžiagos, katelicidinas ir bakterijos. SFC sėkmingai sumažino GPCR sukeltą oksidaciją diferencijuotuose neutrofiluose. Be to, fotosenėjimo tyrimai parodė, kad SFC sumažino UVA sukeltos kolagenazės (pro-MMP{22}}) gamybą HDF. Klinikinis 1 procento SFC gelio įvertinimas parodė, kad raukšlių mažinimas, drėkinimas, tekstūra ir bendra odos išvaizda pagerėjo. N-sukcinil-S-farnezil-L-cisteinas (SFC) yra nauja priešuždegiminė maža molekulė ir yra pirmasis farnezilcisteino IPC, kuris, kaip įrodyta, kliniškai pagerina išvaizdą ir senėjimo požymius, taip pat gali pagerinti uždegiminius odos sutrikimus. .

Norėdami sužinoti daugiau, spustelėkite čia

Raktiniai žodžiai:izoprenilcisteinas; kovoti su senėjimu; Kosmetika; G-baltymu susietas receptorius; į rinkliavą panašus receptorius

1. Įvadas

Mažos molekulės izoprenilcisteino (IPC) analogai buvo nustatyti kaip galima nauja vietinio poveikio priešuždegiminių vaistų klasė. IPC analogai turi 15-arba 20-anglies šoninę grandinę, prijungtą prie aminorūgšties cisteino, imituojančią apdorotų CAAX baltymų C-galą, kuris yra būtinas norint nukreipti heterotrimerinius ir mažus G baltymus, kurie tarpininkauja. receptorių signalizacija eukariotinėse ląstelėse. IPC analogai slopina signalizacijos aktyvavimą membranos skyriuje, konkuruodami su izoprenoidų grupėmis dėl prenilo surišimo vietų [1, 2] ir sutrikdydami signalo perdavimą, užkertant kelią heterotrimeriniam G baltymo susidarymui ir (arba) tikriausiai blokuodami pasroviui vykstančią G baltymo efektoriaus sąveiką. 3-5].

Nuo tada, kai pirmą kartą buvo atrastas N-acetil-S-farnezil-L-cisteinas (AFC), kaip pirmasis IPC analogas, veiksmingai sumažinantis trombocitų, makrofagų ir neutrofilų uždegiminius atsakus[6-8], buvo sukurti keli skirtingi IPC analogai. buvo atrasta ir pranešta, kad ji suteikia įvairių skirtingų veiklų odoje, įskaitant G-baltymų susietų receptorių (GPCR) sukelto priešuždegiminio citokinų išsiskyrimo, edemos ir neutrofilų infiltracijos slopinimą, kai naudojamas lokaliai [9]. Pavyzdžiui, N-acetilglutaminoil-S-farnezil-L-cisteinas (SIG-1191) pasižymi priešuždegiminėmis ir drėkinančiomis savybėmis žmogaus keratinocituose ir žmogaus 3D odoje [10]. Naujausi tyrimai rodo, kad IPC analogai taip pat visiškai sukelia ne G baltymų sukeltą uždegimą žmogaus epidermio keratinocituose, žmogaus odos fibroblastuose, žmogaus odos endotelio ląstelėse ir periferinio kraujo mononuklearinėse ląstelėse, panaikindami į rinkliavą panašius receptorius 2, 4 ir 6 ( TLR2, TLR4, TLR6) ir T-ląstelių receptorių (TCR) signalizacija[11,12]. Be to, buvo įrodyta, kad fitilcisteino IPC analogai yra kliniškai veiksmingi kovojant su spuogais [13] ir odos senėjimu [14], išryškinant šios klasės junginių veiksmingumą blokuojant odos uždegimą ir gerinant įvairias odos būklę, kai jie naudojami lokaliai.

Cistanche gali kovoti su senėjimu

Čia buvo pranešta, kad naujasis IPCanalogN-Succinyl-S-farnezil-L-cisteinas (SFC) (S1 pav.) pasižymi daugybe priešuždegiminių ir odą apsaugančių savybių, padedančių sulėtinti uždegimą ir senėjimą dėl anksčiau nežinomo veikimo mechanizmo. Tyrimai, kuriuose naudojamos odos endotelio ląstelės, rodo, kad SFC slopina katelicidino (L-37) GPCR sukeltą uždegimą. Be to, epidermio keratinocitų tyrimai in vitro rodo, kad SFC sėkmingai slopina priešuždegiminį citokinų išsiskyrimą iš kelių aplinkos veiksnių, tokių kaip UVB, cheminės medžiagos ir bakterijos.cistanche tubulosa dosage redditFotosenėjimo tyrimai rodo, kad SFC gali sėkmingai sumažinti UVA sukeltos kolagenazės (pro-MMP-1) gamybą odos fibroblastuose. Atsižvelgdami į šį daugiafunkcinį odos aktyvumo profilį, SFC kliniškai išbandėme suskilusio veido, dvigubai aklo, transporto priemone kontroliuojamo tyrimo metu ir įrodėme, kad 1 procento SFC gelis yra gerai toleruojamas ir gerokai pranoksta transporto priemonę, rodydamas reikšmingą visų klinikinių vertinamųjų rodiklių pagerėjimą. , įskaitant raukšlių mažinimą, drėkinimą ir bendrą odos išvaizdą.

2. Medžiagos ir metodai

2.1.Cheminės medžiagos ir reagentai

All reagents were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis,MO, USA).Organic solvents were purchased from Fisher Scientific (Hampton, NH, USA). SFC was synthesized according to methods as described in US patent US10314802B2. All chemicals were ana-lyzed by LC/MS (Agilent 1100), H,and l3CNMR (500 MHz and 125 MHz, Bruker) for structural identity,and confirmed to be >95 proc. grynumo analitiniu HPLC (Agilent 1200). 2.2.Ląstelių gydymas

HL-60 ląstelės (CCL-240TM) buvo gautos iš Amerikos tipo kultūrų kolekcijos (ATCC; Manassas, VA, JAV), auginamos suspensijos kultūroje ir paskatintos diferencijuotis į subrendusias mieloidines formas (dHL{). {2}}) kultivuojant, kai yra 1,3 % (t/t) dimetilsulfoksido (DMSO)[15]. Plyšimo tyrimas buvo atliktas taip, kaip aprašyta anksčiau [16]. Trumpai dHL-60 (2 × 10 laipsnių ląstelių/ml) buvo inkubuojami su formil-Met-Leu-Phe-OH((MLP), kad paskatintų superoksido išsiskyrimą iš neutrofilų. Superoksido anijono aptikimas buvo matuojamas redukuojant fericitochromo c iki ferocitochromo c, nuskaitant absorbciją esant 550 nm. Tyrimo reakcijos mišinys buvo paruoštas Hankso subalansuotame druskos tirpale (HBSS) su 160 uM citochromo c, 100 U/mL superoksido dismutazės (SOD) ir 16 uM TPA ({ {18}}O-tetradekanoilforbolo 13-acetatas). Absorbcija buvo matuojama plokštelių skaitytuvu, esant 550 nm bangos ilgiui, kaip galutinis taškas (po 20 min. ekspozicijos).

Pirminės žmogaus ląstelės, gautos iš naujagimių donorų, buvo perkamos iš Ther-moFisher (NHEKs, HDF; Carlsbad, CA, JAV) ir ScienCell (HDMECs; Carlsbad, CA, CA, USA). Ląstelės (1 × 10 laipsnio ląstelės /mL) buvo auginami normaliomis sąlygomis (5 proc. CO2; 37 laipsniai), o vėliau tris kartus iš anksto inkubuojami 2 valandas su junginiais (0,1 proc. tūrio/tūrio etanolio nešiklis) šviežioje terpėje, kurioje išeikvotas augimo faktorius. NHEK sukėlė 5 ng/mL TPA, 25 m//cm2 plačiajuosčio 305 ± 12 nm UVB (Daavlin; Bryan, OH, JAV) arba 10 ug/ml peptidoglikano. HDMEC ir HDF buvo sukelti atitinkamai 10 ug/ml LL-37 (Tocris Bioscience; Bristolis, JK) ir 12,5 J/cm2 plačiajuosčio 350±12 nm UVA (Daavlin; Bryan, OH, JAV). Ląstelių gyvybingumas buvo tiriamas naudojant tetrazolio junginį [3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenilas)-2-( 4-sulfofenil)-2H-tetrazolis, vidinė druska; MTS] tyrimas (Promega; Madison, WI, JAV). Terpės supernatantai buvo paimti po 24 valandų indukcijos citokinams (TNF-, IL-6, IL-8) ir kolagenazės (pro-MMP-1) matavimams.

2.3. Su fermentais susiję imunosorbentų tyrimai (ELISA)

Žmogaus citokinų ir kolagenazės lygiai buvo išmatuoti iš audinių kultūros terpės supernatantų naudojant sumuštinį ELISA, naudojant atitinkamus standartus ir vadovaujantis gamintojo protokolais. IL-6 ir IL-8 rinkiniai buvo įsigyti iš BD Biosciences (San Chosė, CA, JAV). Pro-MMP-1 ir TNF rinkiniai buvo įsigyti iš R&D Systems Inc. (Mineapolis, MN, JAV).

2.4.Klinikinis tyrimas

Klinikinis tyrimas su sveikais savanoriais buvo atliktas SGS Stephens (tyrimas Nr. C20-J156; Tokijas, JP) ir buvo gautas raštiškas sutikimas, atitinkantis Tarptautinės derinimo tarybos (ICH) E6(r2) 4.8.10 skirsnį. iš kiekvieno dalyko. Tai buvo vieno centro, padalinto veido, dvigubai aklo transporto priemonės kontroliuojamas tyrimas, kuriame iš viso 12-savaitės tyrimą atliko 49 japonės. Tiriamieji buvo priskirti vienai iš dviejų gydymo ląstelių pagal iš anksto nustatytą atsitiktinės atrankos būdą. Kiekvienoje ląstelėje tiriamieji buvo toliau atsitiktinai suskirstyti į vieną veido pusę vartoti SFC arba niacinamidą, o kitoje veido pusėje – transporto priemonės kontrolę (1 ląstelė: 31 tiriamasis gavo 1 proc. SFC gelio ir nešiklio, ir 2:18 ląstelės gavus 5 procentų niacinamido gelį ir nešiklį) (Visą sudedamųjų dalių sąrašą žr. S1 lentelėje).kiek cistanche paimtiŠis tyrimas buvo atliktas remiantis Japonijos kosmetikos mokslo draugijos „Produktų nuo raukšlių vertinimo gairėmis“. Tiriamieji 2 kartus per dieną naudojo tiriamąją medžiagą ant priskirtos varnų pėdų srities pusės ir visos veido pusės. Atlikę pradinius vertinimus, tiriamieji pirmą kartą klinikoje panaudojo bandomąsias medžiagas. Klinikiniai vertinimai buvo atlikti pirmojo apsilankymo metu (pradinis ir 15 minučių po paraiškos pateikimo), antrojo vizito (8 savaitė) ir trečiojo vizito (12 savaitė).cistanche แอ ม เว ย์Varnų pėdų raukšlių sąlygos buvo parinktos nuo lengvo iki vidutinio (balas {{0}} pagal Japonijos kosmetikos chemikų draugijos (JSCC) skalę, kur0=nėra ir7=labai gilus buvo pastebėtos raukšlės). Klinikinis veiksmingumo parametrų įvertinimas buvo vertinamas atskirai dešinėje ir kairėje bendro veido pusėse, naudojant modifikuotą Griffith 10- balų skalę, prireikus priskiriant pusės balo balus (0 – nėra (geriausia įmanoma būklė),1 3= lengvas, nuo 4 iki 6=vidutinis, nuo 7 iki 9=sunkus (blogiausia įmanoma būklė)). Veiksmingumo parametrai buvo suskirstyti pagal 1 lentelėje išvardytus skalės inkarus.

2.5.Statistinė analizė

Statistinis reikšmingumas buvo nustatytas ANOVA, po to Dunnett daugkartinio palyginimo testas, naudojant p-reikšmes, mažesnes nei 0,05 kaip reikšmingą skirtumą. Visiems antibakteriniams matavimams ir citokinų lygiams mėginiai buvo tiriami trimis egzemplioriais. Citokinų dozės ir atsako kreivės buvo sukurtos derinant duomenis su Hill, trijų parametrų lygtimi, naudojant Sigma Plot programinę įrangą (Systat Software Inc., Chicago, IL, JAV), pagal kurią buvo nustatytas IC50 ir didžiausias slopinimas.

3. Rezultatai

3.1. SFCSlopina GPCR sukeltą oksidacinį stresą ir uždegimą

Formilo peptido receptorius-1(FPRL1) yra GPCR, esantis neutrofilų ir endotelio ląstelių paviršiuje, kuris atlieka svarbų vaidmenį reaguojant į daugybę uždegiminių dirgiklių[17]. Pavyzdžiui, N-formilmetionil-leucil-fenilalaninas (fMLP) yra chemotaktinis peptidas, kuris jungiasi prie FPRL1 verbuojančių neutrofilus, o jiems patekus sukelia greitą reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) išsiskyrimą ir įvairias antimikrobines funkcijas [18]. . Tačiau, jei neutrofilų daugėja ir toliau, atsiranda reikšmingas uždegiminės kaskados reguliavimo sutrikimas, dėl kurio neutrofilų infiltracija yra susijusi su rožinės ir kelių kitų odos ligų patogeneze[19]. Katelicidinas (LL-37) yra dar vienas FPRL1 ligandas, pasižymintis pleiotropiniu aktyvumu, įskaitant antimikrobines savybes, prisitraukimą ir uždegimą, kuris buvo susijęs su atopiniu dermatitu, psoriaze ir rožine [20].kas yra cistancheTaigi mes siekėme ištirti, ar SFC galėtų sėkmingai moduliuoti FPRL{0}}sukeliamą oksidacinį sprogimą ir uždegimą. Naudojant diferencijuotus neutrofilus (DHL-60)[21], fMLP buvo pridėtas siekiant inicijuoti ROS, o rezultatai rodo, kad SFC veiksmingai blokuoja superoksido susidarymą priklausomai nuo dozės (IC50=25 μM) (1A pav.). su netoksišku poveikiu (S2 pav.). Be to, žmogaus odos mikrovaskulinės endotelio ląstelės (HDMEC), apdorotos 10 ug/mL LL-37, sukelia perteklinę uždegimą skatinančio citokino IL{11}} gamybą. Gydymas SFC 100 procentų slopino IL-6 išsiskyrimą, priklausomai nuo dozės (1B pav.), o poveikis buvo netoksiškas (S2 pav.) ir panašus stiprumas (IC50=2 uM) kaip vaistas nuo egzemos FK{{ 19}} (IC50=1 uM), ir žymiai geriau nei gydant rožinę metronidazolu (IC50=14 uM) ir azelaino rūgštimi (IC50 =100 uM). Vietiškai vartojamas gliukokortikoidas klobetazolis pasižymėjo stipriausiu priešuždegiminiu aktyvumu, kaip ir tikėtasi (IC50=0,08 μM; duomenys nerodomi).

3.2. SFC apsaugo nuo UVA ir UVB sukelto fotosenėjimo

Ultravioletinė (UV) šviesa yra įprastas aplinkos stresorius, kuris kasdien atakuoja mūsų odą. Ilgesnės bangos UVA (320-400 nm) prasiskverbia giliai į dermą, o trumpesnės bangos, didesnės energijos, UVB (290-320 nm) pirmiausia veikia mūsų epidermį.

Konkrečiai, UVA skatina matricos metaloproteinazių (MMP) sekreciją, kurios vaidina svarbų vaidmenį odos fotosenėjimui [22]. MMP-1, taip pat žinomas kaip intersticinė kolagenazė, skaido kolageną (I, II ir III tipo), taip prisidedant prie smulkių linijų ir raukšlių atsiradimo. Siekdami nustatyti SFC potencialą nuo raukšlių, patikrinome jo gebėjimą sumažinti UVA sukeltą pro-MMP{5}} išsiskyrimą iš žmogaus odos fibroblastų (HDF). SFC, priklausomai nuo dozės, slopina pro-MMP{8}} gamybą, parodydamas išskirtinį ICso=10 pM stiprumą (2 lentelė) ir netoksišką poveikį (S2 pav.), o kosmetinės senėjimą stabdančios medžiagos, tokios kaip askorbo rūgštis. ir a-tokoferolis nesumažino pro-MMP{16}} išsiskyrimo esant didžiausiai tirtai koncentracijai (2 lentelė). Panašiai kaip ir UVA, ilgalaikis UVB poveikis sukelia uždegimo kaskadą ir uždegimą skatinančių citokinų, kurie atlieka pagrindinį vaidmenį saulės sukeltam odos senėjimui, gamybą[23]. Konkrečiai, normalūs žmogaus epidermio keratinocitai, veikiami UVB spindulių, skatina interleukino -6 (IL-6) ir naviko nekrozės faktoriaus-a (TNF-a) išsiskyrimą, kurie taip pat siejami su sausa oda [24]. . Mūsų rezultatai rodo, kad SFC blokuoja ir IL-6, ir TNF-x išsiskyrimą, priklausomai nuo dozės, atitinkamai su ICso=10 pM ir 100 pM, su netoksišku poveikiu (S2 pav.).bioflavonoidaiBe to, šis stiprus stiprumas buvo 4-5 laipsniais didesnis nei stebimas askorbo rūgšties ir -tokoferolio, kurie taip pat pasižymėjo priešuždegiminėmis savybėmis, stiprumas (2 lentelė).

3.3.SFC apsaugo nuo cheminių medžiagų ir bakterijų sukelto uždegimo

Be saulės spindulių UV spindulių, daugelis kitų išorinių aplinkos streso veiksnių sukelia odos uždegimą ir gali pagreitinti natūralų odos senėjimo procesą, jei neapsaugosite. Du tokie kaltininkai yra cheminės medžiagos ir bakterijos. 12-O-tetradekanoil--forbol-13-acetatas (TPA) yra įprastas cheminis dirgiklis, naudojamas vietiniam priešuždegiminiam aktyvumui in vivo tirti [9]. Be to, ankstesni tyrimai rodo, kad normalūs žmogaus epidermio keratinocitai (NHEK), gydomi TPA, padidina kelių priešuždegiminių mediatorių gamybą [25, 26]. Mūsų ląstelių pagrindu atliktas NHEK tyrimas rodo nuoseklų reikšmingą TNF-a indukciją TPA ir kad SFC slopina jo išsiskyrimą priklausomai nuo dozės su IC50=0,75 uM (maksimalus slopinimas 70 proc.) (2A pav.) su netoksišku poveikiu (S2 pav.). Tuo tarpu priešuždegiminis gliukokortikoidas klobetasolis, tirtas esant 3 uM, rodo maksimalų tik 58 procentų slopinimą, o tai rodo, kad šiame specifiniame tyrime SFC yra stipresnis.

TLR vaidina lemiamą vaidmenį reguliuojant odos įgimtą imuninį atsaką į patogenus, o konkrečiai įrodyta, kad TLR2 signalizacija atlieka pagrindinį vaidmenį kelių dermatologinių ligų patogenezėje [27]. Peptidoglikanas (PGN) yra bakterijų ląstelės sienelės produktas ir į rinkliavą panašus receptoriaus-2(TLR2) ligandas. Mūsų rezultatai rodo, kad SFC, priklausomai nuo dozės, sumažina PGN sukeltą interleukino-8 (IL-8) ​​išsiskyrimą NHEK, kurių ICso=0.8 uM, panašiai kaip klobetazolis su IC{{11 }} μM (2B pav.).

3.4. SFC sumažina raukšles ir pagerina kai kuriuos kitus žmonių odos parametrus. Veido odos fotosenėjimas yra vienas iš kelių veiksnių, prisidedančių prie regėjimo senėjimo požymių. Jam būdingos smulkios linijos, raukšlės ir pigmentacijos pokyčiai. Čia pateikti duomenys rodo, kad SFC in vitro priešuždegiminė, senėjimą stabdanti ir oksidacinio sprogimo apsauganti veikla gali veiksmingai sulėtinti priešlaikinį odos senėjimą ir uždegimą, kai jie naudojami vietiškai žmonėms. Taigi, siekėme kliniškai įvertinti SFC, kad įvertintume jo aktyvumą vietiniu būdu. SFC buvo sudarytas 1 procento gelyje ir buvo įvertintas dvigubai aklu, nešikliu kontroliuojamu tyrimu, kuriame jis buvo naudojamas du kartus per dieną 12 savaičių. Prieš šį tyrimą SFC gelis buvo išbandytas atliekant 100 žmonių pakartotinio įžeidimo pleistro testą ir buvo nustatyta, kad jis yra saugus odai (duomenys nerodomi).

Iš viso 49 moterys baigė tyrimą, visi tiriamieji vienoje veido pusėje naudojo transporto priemonę, o kitai pusei 31 tiriamoji naudojo 1 procento SFC gelį; likę 18 tiriamųjų naudojo 5 procentus niacinamido kaip lyginamąjį preparatą, nes anksčiau buvo įrodyta, kad jis pagerina veido odos išvaizdą [28]. Klinikinio varnų pėdų srities raukšlių įvertinimo rezultatai rodo, kad 8 ir 12 savaitės statistiškai reikšmingai pagerėjo, palyginti su pradine padėtimi ir tirpikliu, naudojant 1 procentą SFC gelio, o 5 procentai niacinamido reikšmingai pagerėjo tik 12 savaitę (3 pav.). 8,1 proc. SFC gelio savaitę pagerėjo ~32 proc., o 5 proc. niacinamido ir nešiklio pagerėjo atitinkamai tik ~11 proc. ir ~6 proc. (3 pav.). Be raukšlių mažinimo, 1 procento SFC gelis žymiai pranoksta transporto priemonę keliais kitais vertinamaisiais taškais, įskaitant tekstūrą (lytėjimo) ir drėkinimą (vizualinį) 8 ir 12 savaites, spindesį / šviesumą / ryškumą ir tekstūrą (vizualiai) 12 savaitę ir apskritai. odos būklės (sveikos) atsiradimas ant veido po naudojimo (3 lentelė). Be to, kai kuriuose galutiniuose taškuose 1 procentas SFC gelis ne tik pranoksta transporto priemonę, bet ir niacinamidą. Pavyzdžiui, 12-osios savaitės spindėjimo/šviesumo/ryškumo parametro analizė rodo, kad tiriamieji, vartojantys 1 % SFC gelį, statistiškai reikšmingai pagerėjo ~52 %, palyginti su tik ~22 % tiems, kurie vartojo 5 % niacinamido (3 lentelė). 1 procento SFC gelis taip pat gerokai pranoksta 5 procentus niacinamido 8 savaitę dėl hidratacijos (~42 proc., palyginti su ~3 proc.) (3 lentelė). Galiausiai dėl odos stangrumo (lytėjimo) galutinio taško, nepaisant to, kad SFC gelis nėra žymiai geresnis, 1 proc. statistiškai reikšmingas 19 proc. pagerėjimas, lyginant su pradiniu lygiu (p reikšmė {{40}}.031), o tik transporto priemone apdorota oda pagerėjo ~10 proc. (p vertė 0,063), o 5 procentai niacinamidu gydytų grupių pagerėjo 0 procentų. Apskritai šie rezultatai rodo, kad SFC, kai naudojamas lokaliai, kliniškai pagerina senėjimo požymius ir skatina odos sveikatą.

4. Diskusija

Pirmoji IPC molekulė, N-acetil-S-farnezil-L-cisteinas (AFC), buvo atrasta daugiau nei prieš 30 metų [6, 29] ir vėliau buvo įrodyta, kad ji veiksmingai sumažina edemą ir neutrofilų infiltraciją, kai buvo naudojama in vivo. gyvūnų uždegimo ir kontaktinio padidėjusio jautrumo modeliai [9]. Buvo pranešta, kad keli kiti farlnezilcisteino dariniai sėkmingai slopina uždegimą ir oksidacinio streso išsiskyrimą [21]. Be to, buvo įrodyta, kad kita toli nezilinta IPC molekulė, SIG{13}}, pasižymi priešuždegiminiu NHEK aktyvumu ir potencialiai drėkinamuoju poveikiu, kai ji lokaliai tepama ant 3D žmogaus odos [10] Apskritai šie rezultatai pabrėžia šios klasės junginiai, skirti pagerinti odos būklę ir (arba) gydyti odos ligas. Nepaisant daug žadančio in vitro ir in vivo aktyvumo profilio, jokio farnezilinto IPC junginio aktyvumas nebuvo kliniškai ištirtas. Taigi pirmą kartą siekėme nustatyti farnezilinto IPC N-sukcinil-S-farnezil-L-cisteino (SFC) aktyvumą klinikinio tyrimo metu ir pradėti aiškintis jo veikimo mechanizmą, kad paaiškintume šiuos privalumus.

Buvo pranešta, kad IPC molekulės moduliuoja GPCR, į rinkliavą panašius receptorius (TLR) ir peroksisomų proliferatorių aktyvuojamų receptorių gama (PAR-y) signalizaciją [30]; tačiau šio priešuždegiminio poveikio mechanizmas nėra gerai suprantamas. Anksčiau buvo įrodyta, kad AFC, naudojant odos mikrovaskulines endotelio ląsteles, slopina purinerginį GPCR uždegiminį signalą (ATP-P2Y receptorių sukeltą citokinų išsiskyrimą) [31]. Be to, buvo įrodyta, kad SIG-1191 kontroliuoja odos hidratacijos žymeklio akvaporino 3 (AQP3) ekspresiją per mitogeno aktyvuotą baltymų kinazę / tarpląstelinį signalą reguliuojamą kinazę (MEK) [10]. Be to, IPC junginiai SIG-1273 ir SIG-1459 reguliuoja TLR ir T-ląstelių receptorių (TCR) signalus, kurie atlieka svarbų vaidmenį spuogų ir atopinio dermatito patogenezėje [11,12]. Čia parodome, kad SFC moduliuoja GPCR-FPRL1 signalizaciją, sėkmingai blokuodamas katelicidino (LL-37) sukeltą FPRL1 priešuždegiminį išsiskyrimą HDMEC. Konkrečiai nukreipdamas HDMEC išskiriamus uždegiminius mediatorius, SFC gali būti stiprus lėtinio uždegimo inhibitorius, nes IL-6 vaidina svarbų vaidmenį keliuose odos mechanizmuose ir sutrikimuose, įskaitant žaizdų gijimą [32]. Be to, LL-37 [33,34], kuri yra svarbi šių odos ligų, taip pat atopinio dermatito, efektorinė molekulė, teigia, kad epitelio ląstelių kilmės uždegiminiai mediatoriai turi įtakos rožinei ir psoriazei[20]. ]. Kaip pranešama čia, priešuždegiminiai vaistai nuo rožinės metronidazolo (IC=o=14 uM) ir azelaino rūgštis (IC50 =100 uM), taip pat atopinio dermatito gydymas FK{{37} } (IC50 =1 uM), sumažina LL-37-FPRL1-sukeliamą citokinų išsiskyrimą su skirtingu stiprumu. SFC pasižymi panašiu stiprumu kaip FK-506, pranoksta abu rožinės vaistų junginius ir slopina FPRL-1-sukeliamą ROS išsiskyrimą (1A pav.) iš neutrofilų. Iš viso šie duomenys rodo, kad IPC molekulės gali sąveikauti keliais skirtingais signalizacijos keliais ir ląstelių tipais, kurie yra svarbūs odos uždegimui. Šiuo tikslu per pastaruosius ~ 20 metų TLR2 tapo svarbiu uždegiminių odos sutrikimų, tokių kaip spuogai, rožinė, atopinis dermatitas ir kt., receptorius [27, 35-37]. Išreiškiamas mūsų odoje, TLR2 yra mūsų pirmosios šeimininko imuninės gynybos linijos dalis, reaguojant į invazinius patogenus. TLR2 signalizacija veikia prieš GPCR, TCR ir PPAR, kaip anksčiau buvo parodyta kaip moduliuojama IPC analogais. Čia pateikti rezultatai rodo, kad SFC stipriai slopina PGN-TLR2- sukeltą IL-8 išsiskyrimą iš NHEK (2B pav.) ir sėkmingai sumažina TPA sukeltą TNF-a išsiskyrimą keratinocituose (2A pav.). TPA yra žinomas baltymų kinazės C (PKC) aktyvatorius, kuris taip pat atlieka svarbų vaidmenį perduodant GPCR signalus. Taigi, SFC taip pat gali slopinti uždegiminį signalizacijos atsaką pasroviui nuo PKC sukelto citokinų išsiskyrimo NHEK.

Lėtinis uždegimas yra pagrindinis veiksnys, skatinantis odos ligas ir senėjimą. Kaip pranešama čia, SFC ne tik slopina GPCR ir TLR sukeltą uždegiminį signalą, bet ir blokuoja UVB ir UVA sukeltą uždegimą, taip pat MMP-1 gamybą fibroblastuose, kurie skaido kolageną ir greitina odos senėjimą [22]. MP-1 gamybą reguliuoja didėjantis MAP kinazės/AP-1 aktyvumas [38]. Atsižvelgdami į SFC gebėjimą užtikrinti priešuždegiminį aktyvumą keratinocituose ir endotelio ląstelėse bei lėtą oksidacinį stresą ir fotosenėjimą neutrofiluose ir odos fibroblastuose, iškėlėme hipotezę, kad platus SFC aktyvumo spektras būtų naudingas žmogaus odai, kai naudojamas lokaliai. Čia pateikti klinikiniai duomenys rodo, kad 1 procentas SFC gelis žymiai sumažina raukšles, pagerina drėkinimą, odos tekstūrą, pašviesina odą ir bendrą sveiką odos išvaizdą geriau nei transporto priemonė. Šie rezultatai yra ypač įdomūs, nes dauguma kosmetikos klinikinių tyrimų atliekami be transporto priemonės kontrolės. Be to, SFC odos sveikatą gerinančios savybės tam tikrais atvejais žymiai pagerėjo daugiau nei 5 procentais niacinamido, kosmetinio senėjimo ir priešuždegiminio etaloninio ingrediento (3 lentelė). Nors dar reikia atlikti papildomus tyrimus, siekiant dar labiau išsiaiškinti SFC veikimo mechanizmą, susijusį su odos uždegimu ir senėjimu, čia siūlome darbinę hipotezę, kaip SFC suteikia savo odos sveikatą skatinančią veiklą, reguliuojančią kelis tikslus, įskaitant TLR ir GPCR signalizaciją. 4 pav.). Apskritai šie rezultatai rodo, kad SFC kliniškai pagerina senėjimo požymius ir gali būti veiksmingas gerinant odos sveikatą ir kovojant su kai kuriais uždegiminiais odos sutrikimais.

Šis straipsnis yra ištrauktas iš Cosmetics 2021, 8, 110. https://doi.org/10.3390/cosmetics8040110 https://www.mdpi.com/journal/cosmetics