1 DALIS Valgomos tradicinės kinų medicinos Cistanche Deserticola kovos su osteoporoze veikla dėl žiurkių, kurių kiaušialąstės pašalintos, kaulų metabolizmo per RANKL/RANK/TRAF6- tarpininkaujantį signalizacijos kelius

Bo Zhang 1†, Ling-Ling Yang 1†, Shu-Qin Ding 1†, Jing-Jing Liu 1, Yan-Hong Dong 1,

Yan-Ting Li 1, Nan Li 1, Xiao-Jun Zhao 1, Chang-Ling Hu 2, Yiping Jiang 3* ir Xue-Qin Ma 1*

1 pagrindinė Hui etninės medicinos modernizavimo laboratorija, Farmacijos analizės departamentas, Švietimo ministerija, Farmacijos mokykla, Ningxia medicinos universitetas, Yinchuan, Kinija, 2 Funkcinio maisto ir žmogaus sveikatos laboratorija, Technologijos po derliaus nuėmimo kompetencijos centras, Šiaurės Karolina Mokslinių tyrimų miestelis, Šiaurės Karolinos A&T valstybinis universitetas, Greensboro, NC, Jungtinės Valstijos, 3 Farmakognozijos katedra, Antrasis karinės medicinos universitetas, Šanchajus, Kinija

cistanchegali gydytiosteoporozė

Atsižvelgiant į esamų terapinių priemonių, skirtų osteoporozei po menopauzės gydyti, apribojimus, vis dar reikia daugiau veiksmingų ir mažiau nepageidaujamų poveikių.Cistanche deserticolaYC Ma yra žinoma kaip populiari tonizuojanti žolė, tradiciškai naudojama gydant inkstų energijos trūkumą, įskaitant raumenų silpnumą mažumose Azijos apskričių srityse. Remiantis teorija, kad kaulas dominuoja inkstuose, terapiniam pomenopauzinės osteoporozės žiurkės modeliui įvertinti buvo naudojamas OVX modelis.C. deserticolaekstraktas (CDE) dėl kaulų retėjimo. Keturiasdešimt aštuonios maždaug 12 savaičių amžiaus Sprague-Dawley žiurkių patelės buvo atsitiktinai suskirstytos į šešias grupes, įskaitant fiktyviąją grupę, kuriai per burną buvo skiriama 0,5 proc. karboksimetilceliuliozės natrio druskos (CMC-Na) (fiktyvioji grupė), teigiama grupė. gydyti 1 mg/kg estradiolio valerato (EV), mažų, vidutinių ir didelių dozių grupėms per burną buvo skiriama atitinkamai 200, 400 ir 800 mg/kg per parą CDE. Po 3 mėnesių nepertraukiamos intervencijos CDE pasižymėjo reikšmingu antiosteoporoziniu aktyvumu, kurį patvirtina padidėjęs bendras kaulų mineralų tankis, pagerėjusi kaulų mikroarchitektūra; padidėjęs šarminės fosfatazės aktyvumas; sumažėjęs deoksipiridinolino, katepsino K, tartratui atsparios rūgštinės fosfatazės ir malondialdehido kiekis; kadangi CDE intervencija neturėjo įtakos OVX žiurkių kūno, gimdos ir makšties svoriui. Be to, buvo pastebėtas ir išaiškintas iš pažiūros prieštaringas kalcio ir fosforo kiekio reiškinys tarp OVX ir fiktyvių žiurkių. Mechaniškai CDE žymiai sumažino TRAF6, RANKL, RANK, NF-κB, IKK, NFAT2 lygius ir padidino fosfatidilinozitolio 3-kinazės (PI3K), AKT, osteoprotegerino ir c-Fos ekspresijas. tai reiškė, kad CDE gali slopinti RANKL / RANK sukeltą NF-κB ir PI3K / AKT takų aktyvavimą ir galiausiai užkirsti kelią pagrindinių osteoklastogeninių baltymų NFAT2 ir c-Fos aktyvumui. Visi duomenys rodo, kad CDE turėjo galimą anti-osteoporozinį aktyvumą ir šis poveikis bent iš dalies buvo susijęs su RANKL/RANK/TRAF6-tarpininkaujamų NF-κB ir PI3K/AKT signalų moduliavimu, taip pat c- Fos ir NFAT2 lygiai. Todėl CDE gali būti naudingas perspektyvus vaistas pomenopauzinės osteoporozės gydymui.

Raktiniai žodžiai:Cistanche deserticola, antiosteoporozinis, TRAF6, RANKL, RANK

Norėdami gauti daugiau informacijos, kreipkitės:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola turi daug efektų, spustelėkite čia, kad sužinotumėte daugiau

ĮVADAS

Kadangi osteoporozė nebuvo laikoma normalaus senėjimo dalimi, buvo pasiekta didelė pažanga osteoporozės srityje. Šiandien osteoporozė tapo dideliu pavojumi sveikatai, kenčiančia daugiau nei 200 milijonų gyventojų visame pasaulyje, o kasmet šiems asmenims išleidžiama 10 milijardų dolerių (Ma ir kt., 2015). Osteoporozei, įskaitant pomenopauzinę ir senatvinę osteoporozę, buvo būdingas mikroarchitektūros pablogėjimas ir mažas kaulų masės tankis (KMT) dėl disbalanso tarp osteoblastų sukeliamo kaulų formavimosi ir osteoklastų sukeltos kaulų rezorbcijos (Kanis ir kt., 2015). ). Atsižvelgiant į dabartinių terapinių galimybių apribojimus ir kai kuriuos nepageidaujamus sintetinių medžiagų neigiamus poveikius (Ye ir kt., 2015) gydant osteoporozę, būtina naudoti alternatyvas, kurios būtų veiksmingos ir turinčios minimalų šalutinį poveikį (Tan ir kt., 2017). Natūrali vaistinė žolė, ypač tradicinė kinų medicina (TCM), kaip puikus papildomas ir alternatyvus gydymo būdas įvairiems negalavimams, įskaitant osteoporozę po menopauzės, buvo palaipsniui atpažįstamas ir labai pagrįstas (Czerwinska ir Melzig, 2018; Ma ir kt., 2018). Prieš du tūkstančius metų,Cistanche deserticolaBuvo nustatyta, kad YC Ma yra naudingas žmonių sveikatai ir įrašytas į kinų klasikinės medicinos knygą pavadinimu Shen Nong Herbal (Anonimas, 1981). Dabar tai yra svarbus TCM, oficialiai įrašytas į Kinijos farmakopėją (Kinijos ir farmakopėja, 2015), taip pat kaip garsioji tonizuojanti žolė, kuri šimtmečius buvo naudojama Azijos apskrityse, įskaitant Kiniją ir Japoniją (Wong ir kt., 2006). .C. deserticolabuvo nustatyta, kad jis turi palankų saugumo profilį (Liao ir kt., 2018) ir plačias gydomąsias funkcijas: liaudyje jis buvo plačiai naudojamas gaminant maistą su įvairiomis žolelių virtuvės rūšimis inkstų nepakankamumui, raumenų silpnumui ir juosmens silpnumui gydyti. ; Šiais laikais vis didesnis dėmesys skiriamas įvairioms jo farmakologinėms funkcijoms, įskaitant priešuždegiminėms, nuovargio, priešnavikinėms, antioksidacinėms, imuniteto stiprinimui ir pan. (Gu ir kt., 2016; Fu ir kt., 2018). Kinijoje jis taip pat gerai žinomas kaip „dykumos ženšenis“ dėl puikaus klinikinio medicininio gydomojo poveikio. Tiek tradicinis, tiek modernus taikymasC. deserticolaišpopuliarino šią žolę tiek medicinoje, tiek sveiko maisto pramonėje, todėl buvo išplėtota į vaistinį ir maistinį skystį, patvirtintą Valstybinės maisto ir vaistų administracijos. DuotaC. deserticolakinų liaudies medicinoje dažniausiai buvo naudojamas inkstų nepakankamumui gydyti, o tai reiškė, kad ši valgomoji vaistinė žolė gali būti laikoma perspektyvia alternatyva osteoporozei gydyti, remiantis teorija, kad kaulas dominuoja inkstuose (Wang ir kt., 2016). Paskelbti duomenys įrodė antiosteoporozinį C. deserticola ekstraktų poveikį tiek in vivo, tiek in vitro (Liang ir kt., 2011; Li ir kt., 2012; Liang ir kt., 2013; Xu ir kt., 2017; Song ir kt., 2018), ir keli izoliuoti junginiai, įskaitant echinakozidą (Li ir kt., 2013), akteozidą (Lee ir kt., 2013) ir cistanosidą A (Xu ir kt., 2017), apie kuriuos taip pat buvo pranešta, kad jie apdoroja antioksidantus. -osteoporozinė veikla; ir kiti junginiai, tokie kaip 2'-acetillakteozidas, turi antioksidacinių, priešuždegiminių, neuroprotekcinių, hepatoprotekcinių, imunitetą stiprinančių (Li ir kt., 2016) ir senėjimą stabdančių savybių (Peng ir kt., 2016). Iki šiol buvo nustatyta dešimtys biologiškai aktyvių feniletanoidinių glikozidųCistanche žolė(Wang ir kt., 2012), echinakozidas ir akteozidas yra pagrindiniai junginiai, esantys daugumoje Cistanche rūšių, kurių kiekis buvo 1,83–41,49 ir ​​0,27–8,28 mg/kg. , atitinkamai; o kitų feniletanoidinių glikozidų, įskaitant 2'-acetilaktozidą, 6'-acetilakteozidą, cistanosidą A, cistanoidą C ir izoakteozidą, buvo 1,56–3,16 mg/g, 0.49–1,66 mg/kg, 1,41–1{{ 29}},11 mg/kg, 0,33–2,24 mg/kg ir 0,08–5.{32}} mg/kg atitinkamai (Dong ir kt., 2018). Remdamiesi aukščiau paskelbtais duomenimis, nustatėme, kad pagrindiniai antiosteoporoziniai molekuliniai mechanizmaiC. deserticolaypač prieš srovę signalizacija liko neaiški; ir pats junginys negali atspindėti žolės, turinčios sinergijos savybių, kurias suteikia įvairių tipų komponentai, poveikio; be to, konkretūs signalizacijos kelių tikslai skirtinguose komponentuose buvo visiškai skirtingi. Dabartinis darbas skirtas ištirti galimą apsauginį poveikįC. deserticolaprieš žiurkes, kurių kiaušidžių pašalinta (OVX) in vivo, daugiausia dėmesio skiriant naviko nekrozės faktoriaus receptorių susieto faktoriaus 6 (TRAF6), branduolinio faktoriaus kappa B ligando (RANKL) receptorių aktyvatoriaus, RANK ekspresijos ir RANKL/RANK/TRAF reguliavimui{{3} } sukeltos branduolinio faktoriaus kappa B (NF-κB) ir fosfoinozitido 3- kinazės (PI3K)/baltymkinazės (AKT) signalizacijos. Kaulų remodeliavimas, įskaitant rekonstrukciją ir atstatymą, yra sudėtingas procesas, kurį valdo pusiausvyra tarp osteoblastinio kaulo formavimosi ir osteoklastinės kaulų rezorbcijos, o padidėjusi kaulų rezorbcija, kurią daugiausia sukelia sustiprinta osteoklastogenezė, paprastai sukelia osteoporozę, netgi kaulų lūžius. Daugumą ląstelių signalų, hormonų ir augimo faktorių, kurie buvo būtini osteoklastų diferenciacijai ir funkcijai, kontroliavo RANK ir du jo ligandai – RANKL ir osteoprotegerinas (OPG) (Lacey ir kt., 1998). Be to, naujausi atradimai atskleidė, kad TRAF6 buvo pagrindinis RANKL / RANK suaktyvintų signalizacijos kaskadų reguliavimo veiksnys (Tan ir kt., 2017). Įdarbinus TRAF6, RANKL prisijungė prie savo receptoriaus RANK, o vėliau buvo suaktyvintos signalizacijos kaskados, įskaitant NF-κB ir PI3K/AKT, tada pagrindiniai osteoklastogeniniai c-Fos baltymai ir aktyvuotų T ląstelių branduolinis faktorius c2 (NFAT2) ( Takayanagi, 2007) buvo reguliuojami ir galiausiai buvo pradėta osteoklastų diferenciacija. Šiame tyrime tiriamas ir aptariamas pagrindinis anti-osteoporozinis CDE mechanizmas dėl RANKL / RANK / TRAF{19}tarpininkaujamos kaulų rezorbcijos.

MEDŽIAGOS IR METODAI

Gyvūnai, ląstelės, antikūnai ir reagentai

Suaugusių Sprague-Dawley žiurkių patelės (Ningxia medicinos universitetas, Yinchuan, Kinija); RAW264.7 ląstelės (Zhong Qiao Xin Zhou Biotechnology Co., Ltd., Šanchajus, Kinija); makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (M-CSF) ir RANKL (PerroTech, Inc. USA); estradiolio valeratas [estradiolio valeratas (EV), Delpharm Lille SAS, Paryžius, Prancūzija]; katepsino K (CK) ELISA rinkinys (BioVision, Amerikos); deoksipiridinolino (DPD) ir kaulų gla-baltymo (BGP) kryžminių ryšių ELISA rinkiniai (Xinyu Biological Engineering Co., Ltd, Šanchajus, Kinija); malondialdehido (MDA), glutationo (GSH) ir superoksido dismutazės (SOD) reagentų rinkiniai (Jianchen Biological Engineering, Nanjing, Kinija); penicilinas ir streptomicinas (Gibco, JAV); polivinilidenfluorido (PVDF) membrana (Millipore Life Sciences, JAV); pirminiai antikūnai, įskaitant GAPDH (18AF0401), -aktiną (17AV0411), IKB kinazę (IKK ) (AD01134589), TRAF6 (2), RANKL (GR3193842-5), RANK (AA02113656), NFkBIA (AHK6), 3PI22 (3 AC09021266), OPG (AG06292776), c-Fos (AG12059411), AKT (AF05173234), NFAT2 (AO11015648) ir antrinius antikūnus (su krienų peroksidaze konjuguota ožka siūlo anti-triušio ZIOB5GB, imunoglobulin G5GB, imuno)1 , Kinija); Dulbecco modifikuota erelio terpė (DMEM), bicinchonino rūgšties baltymų kvantavimo tyrimo rinkinys, galvijų vaisiaus serumas (FBS) ir Dulbecco fosfatu buferinis fiziologinis tirpalas (PBS) buvo įsigyti iš Hylcone (Logan, UT, JAV); echinakozidas [didelio efektyvumo skysčių chromatografija (HPLC) didesnė nei 98 proc. arba lygi, 11167-200503, Nacionaliniai maisto ir vaistų kontrolės institutai, Kinija]; akteozidas (HPLC didesnis arba lygus 98 proc., AB0497, ALFA, Kinija); izoakteozidas (HPLC, didesnis arba lygus 98 proc., AB17021202, ALFA, Kinija); 2'-acetilo akteozidas (HPLC, didesnis arba lygus 98 proc., PRF7081243, Chengdu Pu Rui Fa Technology, Co., Ltd. China); cistanozidas A, cistanozidas C ir 6'-acetil akteozidas (HPLC, didesnis nei arba lygus 95 proc., išskirtas ir išgrynintas mūsų laboratorijoje) (Xu ir kt., 2017).

Augalinės medžiagos ir paruošimas

Džiovinti stiebaiC. deserticolaYC Ma buvo nupirkti iš Yongning apygardos, Ningxia provincijoje rugsėjo 2 015, konkrečios augalų skynimo koordinatės buvo (106.026597, 38.262816). Žolelę identifikavo prof. Ling Dong (Ningxia medicinos universiteto Farmakognozijos katedra), o kvito pavyzdį (#20150901) buvo galima rasti farmacinės analizės herbariume. Iš viso 10,0 kg džiovintų ir sumaltų milteliųC. deserticolabuvo ekstrahuotas naudojant šilumos grįžtamąjį srautą, detali procedūra buvo tokia: tirpiklis buvo 75 procentai etanolio, santykisC. deserticolamedžiagos ir tirpiklio santykis buvo 1:8, virimo laikas truko 2 val., o medžiagos buvo su grįžtamu šaldytuvu tris kartus; tada visi filtratai buvo sumaišyti ir sukoncentruoti sumažinto slėgio sąlygomis, kad būtų gauta 6,5 ​​kgC. deserticolaetanolio ekstraktai (CDE). Eksperimente su gyvūnais CDE sustabdyti buvo naudojamas {{0}},5 proc. karboksimetilceliuliozės natrio druskos (CMC-Na), o per burną vartojama dozė nustatyta kaip 200, 400 ir 800 mg/kg per parą, 1 ml/100 g kiekvieno gyvūno kūno svorio; Western blot analizei buvo naudojamas dimetilsulfoksidas CDE ištirpinti, o po to praskiedžiamas DMEM, kad galutinė koncentracija būtų 0,01, 0.{11}} mg/ml; HPLC analizei CDE ištirpinti buvo naudojamas metanolis, po to filtruojamas ir praskiedžiamas pradine judriąja faze, kad būtų gauta tinkama koncentracija.

Aukštos kokybės skysčių chromatografijos analizėCistanche deserticola ekstraktas

Pagrindinės cheminės CDE sudedamosios dalys buvo nustatytos naudojant HPLC su atitinkamomis etaloninėmis medžiagomis. Chromatografijos sąlygos buvo nustatytos taip: Agilent 1220 RP-HPLC instrumentas su C18 kolonėle (4,6 id × 250 mm; 5 μm), gradiento eliuavimo mobilioji fazė, kurioje daugiausia buvo vandens ir acetonitrilo. gerai atskirtoms smailėms gauti: tirpiklis A (vanduo, kuriame yra 0,5 procento acto rūgšties) ir B (acetonitrilas): 0–4 min., 85–83 procentai A; 4–10 min., 83–80 procentų A; 10–30 min., 80–75 procentai A; 30–40 min., 75–70 proc. A. Mėginio įpurškimo tūris buvo 5 ul, temperatūra kontroliuojama 30 laipsnių, o UV aptikimas atliktas esant 333 nm (Dong ir kt., 2018). Atitinkamai smailei nustatyti buvo naudojamos etaloninės medžiagos, įskaitant echinakozidą, akteozidą, izoakteozidą, cistanosidą A, cistanosidą C, 2'-acetilakteozidą ir 6'-acetilakteozidą.

cistanchegalianti-apoptozė

Eksperimentai su gyvūnais

Atliekant eksperimentus su gyvūnais, visos procedūros buvo atliekamos griežtai laikantis protokolo, patvirtinto Ningxia medicinos universiteto (NXMU{0}}) institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto vadovo. Buvo gautos keturiasdešimt aštuonios suaugusios Sprague-Dawley žiurkių patelės, sveriančios apie 237 ± 25 g (Ningxia medicinos universitetas, Yinchuan, Kinija) ir 1 savaitę laikomos standartine granulių dieta ir vandeniu iš čiaupo aplinkos kontroliuojamomis sąlygomis. Tada kiekvienai žiurkei buvo atlikta anestezija (chloro hidratas, 100 mg/kg, ip), fiktyviai pašalintos kiaušidės arba pašalintos dvi kiaušidės ir atsitiktinai suskirstytos į penkias grupes: modelio grupei (OVX) buvo skiriama 0,5 procentų CMC-Na; teigiama grupė (EV) su 1 mg/kg per dieną estradiolio valerato; mažos (CDEL), vidutinės (CDEM) ir didelės (CDEH) dozių grupės su atitinkamai 200, 400 ir 800 mg/kg per dieną CDE. Eksperimentai truko 12 savaičių; kiekvienos žiurkės kūno svoris buvo matuojamas kas dvi savaites, atitinkamai koreguojant dozę. Po paskutinės intervencijos dienos 24 valandų šlapimas, serumas, šlaunikaulis, blauzdikaulis ir gimda buvo surinkti ir laikomi –80 laipsnių temperatūroje tolimesnei analizei.

Biocheminiai parametrai

Serumo SOD, GSH, MDA, katepsino K, BGP ir šlapimo DPD lygiai buvo nustatyti atitinkamais reagentų rinkiniais, o tartratui atsparios rūgštinės fosfatazės (TRAP) aktyvumas buvo įvertintas remiantis etalonu (Jiao ir kt., 2009). Šarminės fosfatazės (ALP) aktyvumas ir Ca ir P lygiai buvo įvertinti naudojant automatinį analizatorių (Ciba-Corning 550, JAV).

Kaulų mineralų tankio ir mikrokompiuterinės tomografijos analizė

Kiekvienos žiurkės dešiniojo šlaunikaulio kaulų mineraliniam tankiui (KMT, g/cm2) įvertinti buvo panaudotas dvigubos energijos rentgeno spindulių absorbcijos aparatas (Lunar, JAV), o nuskaitymo režimas buvo nustatytas kaip mažas gyvūnas. Tada tuo pačiu šlaunikauliu buvo įvertintas 3D trabekulinio kaulo mikroarchitektūros vaizdas, taikant mikro-KT skaitytuvo aparatą (GE, amerikietiškas), o dominanti sritis (ROI) buvo pasirinkta nustatant tas pačias koordinates augimo plokštelėje. kiekvieno mėginio šlaunikaulis, mikroarchitektūros parametrai, įskaitant kaulų mineralų kiekį (BMC), mineralų kiekį audiniuose (TMC), audinių mineralų tankį (TMD), trabekulinį atskyrimą (Tb. Sp), trabekulinį skaičių (Tb. N) ir trabekulinį storį ( Tb. Th) buvo gauti analizuojant IG.

Western blot nustatymas

Osteoklastai buvo sukelti naudojant RAW 264.7 ląsteles, pridėtas MCSF (25 ng/ml) ir RANKL (20 ng/ml) (Yang ir kt., 2019). Po 6 dienų trukusio stimuliavimo subrendusios osteoklastų ląstelės, kurioms nustatytas TRAP aktyvumas, buvo gydomos CDE arba be jo (atitinkamai 0,01, 0,1 ir 1 mg/ml) 48 valandas, po to ląstelės lizuojamos lizės buferiu ir supernatantai buvo centrifuguoti ir atskirti 10 procentų natrio dodecilsulfato-poliakrilamido gelio elektroforeze ir perkelti ant PVDF membranų. Membrana buvo užblokuota 5 procentų neriebiu pienu kambario temperatūroje 1 val., o po to inkubuojama su pirminiais antikūnais prieš TRAF6 (1:400), RANKL (1:400), RANK (1:400), IKK (1:400). ), NFκBIA (1:400), OPG (1:400), PI3K (1:400), AKT (1:400), c-Fos (1:400), NFAT2 (1:400), -aktinas ir GAPDH (1:1,000). Tos pačios membranos buvo nuplėštos ir vėl zonduotos su atitinkamais antikūnais, kuriuos pabaigoje aptiko „Image Lab Software“. Kiekvienas eksperimentas buvo pakartotas tris kartus, naudojant -aktiną arba GAPDH kaip vidinę kontrolę.

Statistinė analizė

Mūsų eksperimentų duomenys, apibūdinti kaip vidurkis ± SD, buvo analizuojami naudojant vienpusę dispersijos analizę, po kurios buvo atliktas Dennett testas (SPSS 22.0 programinė įranga, SPSS, JAV), p < {{3} },05 buvo laikomas statistiškai reikšmingu.

cistanchetaip pat žinomas kaipdykumaŽenšenis

REZULTATAI Pagrindinės cheminės sudedamosios dalysCistanches deserticola

Ekstraktas Naudojant atitinkamas etalonines medžiagas, septynis daugiausia feniletanoidinius glikozidų junginius, įskaitant echinakozidą,cistanozidasA, akteozido, izoakteozidas,cistanozidasC,2'-acetilasakteozidas,ir 6'-acetilasakteozidobuvo identifikuoti šiame ekstrakte, jų atitinkamos chromatografijos smailės ir struktūros parodytos 1 paveiksle.

PoveikisCistanches deserticolaEkstraktas ant kūno, gimdos ir makšties svorio

Pradinis vidutinis kūno svoris prieš operaciją reikšmingo skirtumo nebuvo. Tačiau praėjus 3 mėnesiams po kiaušidžių pašalinimo operacijos, OVX modelio grupės žiurkių kūno svoris žymiai padidėjo – 35,7 proc. žiurkės (p < 0,001).="" cde,="" vartojant="" 200–800="" mg/kg="" per="" parą,="" neparodė="" jokios="" įtakos="" šiems="" pastebimai="" padidėjusiam="" kūno="" svoriui="" ir="" sumažėjusiam="" gimdos="" ir="" makšties="" šlapiam="" svoriui,="" kaip="" parodyta="" 2="" paveiksle.="" tačiau="" visiškai="" kitaip="" nei="" cde,="" 1="" mg/kg="" per="" dieną="" ev="" pasižymėjo="" reikšmingu="" estrogeniniu="" poveikiu,="" iš="" kurio="" padidėjęs="" kūno="" svoris="" ir="" sumažėjęs="" gimdos="" bei="" makšties="" svoris="" ovx="" žiurkėms="" buvo="" žymiai="" pakeistas="" papildytu="">

PoveikisCistanches deserticolaIštrauka apie kaulų mineralų tankį ir kaulų mikroarchitektūrą

Pastebėta intuityviai mažėjimo tendencija OVX grupėje, kurios KMT buvo {{0}},158 ± 0.016 g/cm2, palyginti su fiktyviais KMT žiurkėmis. {{10}},180 ± 0,010 g/cm2 (p < 0,001),="" o="" tai="" reiškė,="" kad="" ovx="" modelio="" grupės="" žiurkių="" kmt="" sumažėjo="" maždaug="" 12,2="" proc.="" 12="" savaičių="" po="" kiaušidžių="" pašalinimo="" operacijos,="" palyginti="" su="" fiktyviomis="" žiurkėmis.="" kaip="" parodyta="" 3="" paveiksle,="" visų="" cde="" gydytų="" žiurkių="" kmt="" padidėjo="" atitinkamai="" 15,1="" procento="" (p="">< 0,001),="" 8,1="" procento="" (p="">< 0,05)="" ir="" 9,2="" procento="" (p="">< 0,05),="" palyginti="" su="" ovx="" modelio="" grupe.="" 3d="" vaizdas="" ir="" atitinkami="" kiekybiniai="" žiurkių="" trabekulinio="" kaulo="" mikroarchitektūros="" rezultatai="" parodyti="" 4="" paveiksle.="" remiantis="" kmt="" rezultatais,="" ovx="" modelio="" grupėje="" buvo="" gautas="" akivaizdus="" trabekulinio="" ploto="" sumažėjimas,="" lyginant="" su="" netikromis="" žiurkėmis.="" tačiau="" cde="" intervencija="" iš="" dalies="" pagerino="" trabekulinio="" kaulo="" pablogėjimą,="" išskyrus="" tmd="" ir="" tb.="" kiti="" trabekulinio="" kaulo="" parametrai="" apima="" bmc,="" tmc="" ir="" tb.="" n="" buvo="" žymiai="" padidėjęs="" ir="" tb.="" sp="" žymiai="" sumažėjo="" po="" gydymo="">

PoveikisCistanches deserticolaEkstraktas apie šlapimo ir serumo biocheminius parametrus

Praėjus dvylikai savaičių po kiaušidžių pašalinimo operacijos, OVX modelio grupėje buvo pastebėta mažėjanti, bet ne statistinė Ca išskyrimo su šlapimu tendencija, kaip parodyta 5 paveiksle, o OVX modelio grupės žiurkių šlapimo P lygis sumažėjo maždaug trimis. kartų mažiau nei fiktyvios žiurkės (p < 0.001).="" po="" 12="" savaičių="" gydymo="" cde="" (200–400="" mg/kg="" per="" parą),="" ca="" ir="" p="" serume="" sumažėjo="" reikšmingai="" (p="">< 0,05),="" o="" sumažėjęs="" p="" išskyrimo="" su="" šlapimu="" lygis="" taip="" pat="" buvo="" slopinamas="" visuose="" gydytų="" cde.="" grupės="" (p=""><>

PoveikisCistanches deserticolaKaulų formavimosi ir rezorbcijos žymenų ekstraktas

Kalbant apie ALP ir BGP kaulų formavimosi žymenis (6 pav.), ALP, o ne BGP aktyvumas buvo reikšmingai pagerėjęs visose trijose CDE dozėmis (200–800 mg/kg per dieną), gydytose grupėse, lyginant su fiktyviais žiurkėmis. Kalbant apie TRAP, DPD ir katepsino K kaulų rezorbcijos žymenis (7 pav.), visų trijų kaulų rezorbcijos aktyvumas.

OVX modelio grupės žiurkėms žymenys buvo reikšmingai padidėję apie 20,9–74,8 proc., palyginti su fiktyviomis žiurkėmis; ir tikimasi, kad CDE turėjo didelį potencialą slopinti visus šiuos rodiklius, iš kurių katepsino K aktyvumas sumažėjo 49,9–66,7 proc. (p < 0.001),="" dpd="" lygis="" buvo="" sumažėjo="" 22,9-39,3="" proc.="" (p="">< 0,01),="" o="" trap="" savybė="" buvo="" apsaugota="" atitinkamai="" 20,1-27,6="" proc.="" (p="">< 0,01),="" palyginti="" su="" ovx="" modelių="" grupės="">

Cistanches deserticola ekstrakto poveikis glutationo ir superoksido dismutazės bei malondialdehido kiekiui

Kaip parodyta 8 paveiksle, reikšmingų SOD ir GSH aktyvumo skirtumų tarp OVX ir fiktyvių grupių OVX ir netikrų grupių nebuvo, kaip parodyta 8 paveiksle, o OVX žiurkėms MDA kiekis buvo akivaizdžiai padidėjęs.

modelio grupėje 68,2 proc., palyginti su fiktyviomis žiurkėmis, ir šį padidėjusį MDA lygį reikšmingai slopino mažos, vidutinės ir didelės CDE gydytų grupių dozės, o slopinimo procentai buvo 66,1, 44.{5}} ir 62,8 proc. , atitinkamai, lyginant su OVX modelių grupės žiurkėmis.

PoveikisCistanches deserticolaTRAF6, RANKL, RANK, NFκBIA, IKK, PI3K, AKT, OPG, c-Fos ir NFAT2 baltymų ekspresijos lygių ekstraktas

Kaip parodyta 9 paveiksle, TRAF6, RANKL, RANK, IKK, NFκBIA ir NFAT2 išraiškos buvo žymiai sumažintos, o PI3K, AKT, OPG ir c-Fos lygiai buvo akivaizdžiai sureguliuoti po gydymo CDE, lyginant. į valdymą. Hipotezuojamas mechanizmas (10 pav.), kuriuo CDE gali sumažinti RANKL, RANK ir TRAF6 lygius ir aukštyn reguliuoti OPG raišką, todėl sumažėjo RANKL surišimo su RANK kiekiai; todėl pasroviui keliai, įskaitant NF-κB signalą, buvo slopinami ir PI3K / AKT buvo stimuliuojamas, o šios signalizacijos kaskados kartu paskatino c-Fos aktyvavimą ir NFAT2 buvo slopinamas, ir galiausiai buvo užkirstas kelias osteoklastinei kaulų rezorbcijai. DISKUSIJA