1 dalis: Genisteinas: potenciali natūrali švino molekulė kuriant ir kuriant naujus vaistus, skirtus atminties sutrikimams gydyti

Norėdami gauti daugiau informacijos, kreipkitėstina.xiang@wecistanche.com

Abstraktus: Genisteinasyra natūraliai esanti polifenolinė molekulėizoflavonaigrupė, kuri gerai žinoma dėl savo neuroprotekcijos. Šioje apžvalgoje apibendriname genisteino veiksmingumą silpninant jo poveikįatminties sutrikimas(MI) gyvūnams. „Scopus“, „PubMed“ ir „Web of Science“ duomenų bazės buvo naudojamos ieškant atitinkamų straipsnių ir aptariant genisteino poveikį smegenyse, įskaitant jo farmakokinetiką, biologinį prieinamumą, poveikį elgesiui ir kai kuriuos galimus atminties veikimo mechanizmus keliuose gyvūnų modeliuose. Ikiklinikinių tyrimų rezultatai rodo, kad genisteinas yra labai veiksmingas gerinant MI gyvūnų modelių pažinimo efektyvumą, ypač atminties srityje, įskaitant erdvinius, atpažinimo, išsaugojimo ir atskaitos prisiminimus, nes jis gali sumažintioksidacinis stresasir susilpnintineurouždegimas. Šioje apžvalgoje taip pat išryškėjo iššūkiai ir galimybės pagerinti genisteino tiekimą gydant MI. Be to, taip pat aptariamos galimos genisteino struktūrinės modifikacijos ir dariniai, siekiant pagerinti jo fizikines ir chemines bei panašumo į vaistus savybes. Peržiūros rezultatai parodė, kad genisteinas gali pagerinti pažinimo veiklą ir pagerinti MI įvairiuose ikiklinikiniuose tyrimuose, taip parodydamas jo, kaip natūralaus lyderio, potencialą kuriant ir kuriant naują neuroprotekcinį vaistą.

Raktažodžiai: genisteinas; izoflavonas; atminties sutrikimas; neuroprotekcija; fitomedicina

Spustelėkite čia norėdami sužinoti daugiau apie produktus

1. Įvadas

Atmintis yra informacijos gavimo, saugojimo ir gavimo būsena, apimanti visas per patirtį įgytas žinias, tokias kaip žinomos tiesos, prisiminti įvykiai ir per visą gyvenimą ugdomi gebėjimai. Du pagrindiniai atminties tipai yra deklaratyvūs ir nedeklaratyvūs prisiminimai, pirmieji yra kasdieniai prisiminimai, o antrieji daugiausia susideda iš prisiminimų, gaunamų refleksiškai[1. Atminties sutrikimai, dažnai žinomi kaip atminties sutrikimas (MI), yra pagrindiniai rodikliai diagnozuojant tam tikras su sindromais susijusias etiologijas. Kai kurie aptariami atvejai apimaAlzheimerio liga, Parkinsono liga, Huntingtono, Korsakoffo ir Creutzfeldt-Jakob ligos (1 pav.)[2-5]. MI daugiausia paveikia deklaratyviąją atmintį, kaip yra amnezijos ir silpnaprotystės atveju, tačiau tai ne visada būna pastarųjų atveju, nes demencija apibrėžiama kaip dviejų ar daugiau pažinimo sričių nuosmukis. Kitaip tariant, demencija neapsiriboja vien deklaratyviu atminties sutrikimu, nes ji paveikia ir kitas atminties dalis [1].

Demencija gali paveikti atmintį tiek pirminiu, tiek antriniu būdu. Pirminė atminties negalia gali apimti deklaratyvios atminties susilpnėjimą, o Alzheimerio liga yra geras įrodymas, nes deklaratyvioji atmintis yra viena iš pažinimo sričių, kuri kenčia nuo nuosmukio. Kita vertus, antrinis būdas, kuriuo atminties gebėjimas paveikiamas, yra tada, kai yra kognityvinių sutrikimų, kurie gali trukdyti atminties veikimui, pvz., dėmesio sutrikimo demencija, kuri gali trukdyti daugeliui atminties veikimo aspektų [1].

Šiuo metu nėra patvirtinto gydymo, kuris galėtų visiškai susilpninti Ml vystymąsi. Nepaisant to, atminties gerinimo terapija yra svarbi palaikant paciento pažinimo funkciją, siekiant kovoti su MI rizikos veiksniais. Estrogenas, kuris yra reprodukcinis hormonas, turi platų veikimo spektrą ir savo neuroprotekcinį vaidmenį. Nepaisant to, jo, kaip neuroprotekcinio agento, potencialą gali pagerinti proliferacija ir onkogeninis poveikis tam tikroms ląstelėms, todėl reikia sukurti selektyvius estrogenų receptorių moduliatorius (SERM), įskaitant natūraliai atsirandančius fitoestrogenus [6], tokius kaip genisteinas.

Genisteinasyra izoflavonas (2 pav.), daugiausia randamas Glycine max (sojų pupelių) ekstrakte tarp daugelio kitų šaltinių, tokių kaip ankštiniai augalai, žemės riešutai ir žali žirneliai. Genisteinas susidaro metabolizuojant biologiškai aktyvų glikozidą genistiną [7]. Kadangi daugelis tradicinių Azijos maisto produktų yra gaminami iš sojų pupelių, pvz., natto, tofu ir sufu [8], Azijos šalyse užregistruotas gana didelis genisteino (25-30 mg per dieną) suvartojimo kiekis, palyginti su Vakarų šalimis (2 mg). /dieną). Tiesą sakant, sojų pupelių fermentacija taip pat yra vienas geriausių genisteino išsiskyrimo būdų, išskyrus virškinimą [9].

Farmakologinės genisteino savybės atskleidė, kad jis gali būti pagrindinė molekulė gydant daugybę ligų, įskaitant pomenopauzinius simptomus, vėžį, kaulų, smegenų ir širdies problemas [l0. Kadangi manoma, kad genisteinas praeina kraujo ir smegenų barjerą, kad padarytų neuroprotekcinį poveikį, jis plačiai taikomas gydant neurodegeneracines ligas, tokias kaip Alzheimerio, Hantingtono ir Sanfilippo liga (3 pav.)[11-13 ]. Naujausi tyrimai buvo skirti jo poveikiui MI, kai genisteinas apsaugo nuo MI, nes (1) sumažina ß-amiloidinio baltymo (A) gamybą, (2) užkerta kelią neurouždegiminiams procesams, slopindamas branduolinio faktoriaus aktyvuotas B ląsteles (NF-kB). , (3) slopina acetilcholinesterazės (AChE) aktyvumą, (4) mažina tau baltymo hiperfosforilinimą, kad išvengtų neuronų skaidulų įsipainiojimo (NFT), (5) padidina apolipoproteino E (ApoE) aktyvumą, kad sumažintų A ir (6) pasižymi antioksidacinėmis savybėmis ir sumažina oksidacinį stresą, pašalindama reaktyviąsias deguonies rūšis (ROS) [14-19].

Šioje apžvalgoje pateikiama daugybės genisteino prieš MI tyrimų apžvalga, siekiant geriau suprasti galimas genisteino funkcijas gerinant MI. Taip pat apibendrinamas kiekvieno svarbaus darbo su Ml tyrimo planas, atsižvelgiant į gyvūnų modelius, atminties testavimo metodikas ir jo dozę. Be to, pateikiama duomenų, surinktų apie genisteino veiksmingumą gydant MI, apžvalga. Taip pat pabrėžiami galimi genisteino suteikiami apsauginiai mechanizmai, siekiant užpildyti žinių spragą, susijusią su jo naudojimu kaip papildoma medicina ar pagalbinė priemonė nuo MI. Šioje apžvalgoje taip pat aprašomos kai kurios kliūtys ir galimybės pagerinti genisteino vaistų tiekimą MI gydymui. Be to, buvo aptartos įvairios genisteino struktūrinės modifikacijos ir dariniai, siekiant padidinti jo saugumą, veiksmingumą, fizikines ir chemines bei panašumo į vaistus savybes.

2. Studijų plano aprašymas

2.1.Gyvūnai

Daugumoje tyrimų buvo naudojamos žiurkės ir pelės. Visi eksperimentiniai protokolai buvo patvirtinti atitinkamos institucijos gyvūnų gerovės komitetų ir buvo atlikti pagal laboratorinių gyvūnų naudojimo ir priežiūros gaires.

2.2. MI modeliai

Kiekvienas apėmė tyrimą, kuriame daugiausia dėmesio buvo skiriama skirtingų tipų MI modeliams. Pavyzdžiui, Rum-manet al. [19] sutelktas į hipoksijos sukeltą Ml, o Luet al. [20] nuodugniai išnagrinėjo lėtinio miego trūkumo (CSD) sukeltą atminties trūkumą. Dviejuose tyrimuose buvo naudojamas streptozotocino (STZ) sukeltas MI modelis, kur Pierzynowska ir kt. [13] ištyrė STZ sukeltą Alzheimerio ligos (AD) modelį, o Rajput ir kt. [21]Dėmesys STZ sukeltam diabetui MI modeliui. Kita vertus, kiti MI modeliai apėmė skopolamino sukeltą pažinimo sutrikimą, lipopolisacharidą (LPS), šviną, kaino rūgštį (KA), senėjimą ir amiloidą [22-27].

2.3. Genisteinas DOose

During the course of the treatment, all of the selected investigations used purchased genistein (purity>98 procentai). Daugumoje tyrimų buvo naudojamas genisteinatas0.5-150 mg/kg. Dvi dažniausiai pasirinktos MI in vivo modeliuose dozės buvo 10 ir 20 mg/kg. Kalbant apie vartojimo būdą, aštuoniuose tyrimuose buvo naudojamas peroralinis (po)genisteinas, o dviejuose tyrimuose jis buvo skiriamas į pilvaplėvės ertmę (ip). Prieš atliekant elgesio vertinimus, gydymas genisteinu buvo atliktas mažiausiai 4 dienas ir ne ilgiau kaip 90 dienų.

2.4. Genisteino toksiškumo profilis

In vivo tyrime Ek ir kt. [28] tyrė genisteino toksiškumo profilį ir farmakokinetiką pelėse. Tyrimų metu buvo naudojamos BALB/c pelių patelės, kurių metu kiekvienai pelei buvo sušvirkšta į pilvaplėvės ertmę 0,2 ml (10 proc.) dimetilsulfoksido/fosfato buferinio tirpalo (DMSO/PBS), kuriame yra arba 0 ,2,20,200,400 ir 800 ug genisteino kasdien 10 dienų. Vėliau pelės buvo stebimos 14 dienų, po to visos išgyvenusios pelės buvo paaukotos histologinei analizei. Išvados parodė, kad pelėms, gydomoms genisteinu, nebuvo jokių toksiškumo požymių, jos net ir po gydymo didžiausia genisteino doze (40 mg/kg) netapo silpnos, mieguistos ir nenumetė svorio. Be to, genisteinas buvo gerai toleruojamas atliekant in vivo subchroninius ir lėtinius saugumo tyrimus iki 500 mg/kg per parą dozės, vartojamos per burną iki 52 savaičių, pasak Nasri ir Pohjanvirta [29].

2.5. Atminties tikrinimo procedūra

Levinas ir Buccafusco [30] teigė, kad atliekant gyvūnų modelių tyrimus yra trys pagrindiniai pažinimo sutrikimai: (1) farmakologiniai modeliai, (2) toksikologiniai modeliai ir (3) genetiškai modifikuoti modeliai. Neuroniniai mokymosi, atminties ir dėmesio pagrindai buvo nustatyti naudojant labai reikšmingus pažinimo sutrikimo gyvūnų modelius. Farmakologiniai modeliai yra plačiausiai naudojami kognityvinių sutrikimų tyrimuose, nes jie sudaro pagrindą suprasti neuromediatorių-receptorių sistemos, dalyvaujančios pažinimo procesuose, tokiuose kaip mokymasis, atmintis ir dėmesys, vaidmenį [30].

"Cholinerginė sistema (muskarino ir nikotino) ir glutamato receptoriai, daugiausia N-metil-D-aspartato (NMDA) receptoriai, vaidina svarbų neuronų vaidmenį kognityvinėse funkcijose. Acetilcholinas yra sintetinamas iš maisto cholino ir acetilkofermento A per fermentą choliną. acetiltransferazė (CAT).Acetilcholino metabolizmas vyksta neuronų sinapsėje, jį skatina fermentas acetilcholinesterazė.Iki šiol buvo sukurti kai kurie cholinesterazės inhibitoriai, skirti pagerinti atmintį, pvz., donepezilas, rivastigminas ir galantaminas [31].

Siekiant sukelti atminties sutrikimą cholinerginės sistemos gyvūnų modeliuose, buvo naudojami antimuskarininiai vaistai, įskaitant skopolaminą, atropiną, pirenzepiną, triheksifenidilą, benztropiną, biperideną ir diciklominą [32]. Nikotino receptorių antagonistai, tokie kaip mekamilaminas (nekonkurencinis neselektyvus nikotino receptorių antagonistas), chlorizono diaminas ir d-tubokurarinas (nespecifiniai nikotino antagonistai), dihidro- -eritroidino hidrobromidas (Dh E; specifinis receptorius {{5). }} antagonistas) ir metilo akonitinas (MLA) (specifinis 7 receptoriaus antagonistas) buvo naudojami gyvūnų modelių pažinimo defektams stimuliuoti [33]. Panašiai NMDA receptoriai taip pat vaidina svarbų vaidmenį kognityvinėse funkcijose, nes jų aktyvavimas yra susijęs su ilgalaikiu potencija (LTP), siekiant sustiprinti signalo perdavimą tarp neuronų. Todėl, norėdami paskatinti pažinimo sutrikimus gyvūnų modeliuose per glutamato receptorių sistemą, daugelis mokslininkų pasirinko naudoti NMDA receptorių antagonistus, tokius kaip MK-801, ketaminas ir fenciklidinas (PCP)[34].

Neurologinė toksikologija buvo sėkmingai pritaikyta tiriant pažinimo sutrikimus gyvūnų modeliuose. Neurotoksiškumas gyvūnų modeliuose pasiekiamas naudojant neurotoksines medžiagas, tokias kaip švinas, gyvsidabris ir polichlorinti bifenilai (PCB), nes beždžionių ir graužikų modeliuose pažinimo defektai buvo gerai sumodeliuoti [30]. Daugelyje tyrimų buvo pranešta, kad švinas sukelia oksidacinį stresą. Jis sukelia oksidacinį stresą, padidindamas jautrumą reaktyviosioms deguonies rūšims (ROS) ir sumažindamas antioksidantų, tokių kaip katalazę (CAT) ir superoksido dismutazę (SOD), poveikį. ROS daugiausia generuoja proteinkinazė C (PKC) ir branduolinio faktoriaus aktyvuotos B ląstelės (NF-kB), kurias gali sukelti švino poveikis. Švinas taip pat gali sukelti neuronų ląstelių apoptozę, imituodamas kalcio jonus ir jungdamasis prie įtampos priklausomų kalcio jonų kanalų, taip paveikdamas neurotransmiterių pusiausvyrą hipokampe, o tai gali sukelti apoptozę ir autofagiją. Galiausiai, švinas taip pat gali sukelti neurouždegimines reakcijas, aktyvindamas NF-kB [24].

Streptozotocinas (STZ) plačiai naudojamas diabetui sukelti Alzheimerio ligos (AD) gyvūnų modeliuose. STZ intracerebroventrikulinė injekcija sukelia tau baltymo hiperfosforilinimą ir -amiloido kaupimąsi, kuris gali sukelti MI [13]. STZ taip pat naudojamas diabetinei būklei sukelti gyvūnų modeliuose, siekiant stimuliuoti MI, sukeliant hiperglikemiją ir hipoinsulinemiją. Nuolat didelis gliukozės kiekis kraujyje sukelia uždegimą ir oksidacinį stresą, taip pat suaktyvina daugybę pasroviui tekančių kinazių, kurios aktyvina priešuždegiminių citokinų, tokių kaip IL-6, IL-1 ir TNF-, išsiskyrimą, dar labiau žalojančius neuronus. (4 pav.). Nors STZ gali sukelti reikšmingą svorio mažėjimą gyvūnų modeliuose, suderintą su pagrindiniu hiperglikemijos simptomu, gydymas antihiperglikeminiais vaistais ir insulino jautrumą skatinančiais vaistais gali pagerinti pažinimo sutrikimus [35].

Genetiškai modifikuoti gyvūnų modeliai vis dažniau naudojami kognityvinių sutrikimų tyrimuose, nes jie gali imituoti tam tikrus defektus, įskaitant Alzheimerio ligą (AD), amiloido nusėdimą, amiloido pirmtako baltymą (APP) ir cholinerginių receptorių išmušimą, kurie bus naudojami kuriant naujus vaistus. 30]. Kita vertus, atmintis pasiekiama naudojant įvairias eksperimentines procedūras, įskaitant (1) Morriso vandens labirintą (MWM), (2) pasyvų vengimo testą (PAT), (3) naujo objekto atpažinimą (NOR), (4) objekto vietos atpažinimą. (OLR), (5) naujoviškų objektų diskriminacija (NOD), (6) padidintas ir labirintas (EPM), (7) uždelstas erdvinis kaitaliojimas (DSA), (8) diferencinis žemo atsako dažnio sustiprinimas (DRL), (9) )Radialinės rankos labirinto (RAM) užduotis ir (10)Y labirinto. Tarp šių tyrimų MWM, NOR ir OLR yra trys dažniausiai naudojami atminties testavimo metodai.

2.5.1. Morriso vandens labirintas (MWM)

„Morris“ vandens labirintas (MWM) yra apvalus, vandens turintis plieninis baseinas, kurio skersmuo ir aukščiai svyruoja nuo 100-160 cm skersmens iki 38-80 cm aukščio. Baseinas yra padalintas į keturis panašius kvadrantus (pažymėtus NE, SE, NW ir SW), o platforma bus panardinta po vandeniu vieno iš nurodytų kvadrantų viduryje [19, 22]. Visą testavimo sesiją platforma laikoma toje pačioje vietoje.

Gyvūnai keletą dienų mokomi nustatyti platformos vietą Treniruotės metu jie išleidžiami iš skirtingų kvadrantų, o atsisukę į kvadrantus plauks ir plauks link panardintos platformos 60, 90 arba 120 s. Jei gyvūnams nepavyks rasti platformos per skirtą laiką, jie bus pastatyti ant platformos dar 10 ar 30 sekundžių, kad jaustųsi pažįstami. Mokymosi fazė tęsis kelias dienas iki tikrojo bandymo, kai į baseiną bus įlašinamas nekenksmingas nepermatomas rašalas, kad būtų paslėpta platformos vieta [22]. Gyvūnams bus suteiktas tam tikras laikas nustatyti panardintos paslėptos platformos vietą. Ilgalaikei erdvinei atminčiai įvertinti bus fiksuojamas laikas, kurio reikia. Taip pat galima atlikti kitą vertinimą, siekiant įvertinti atminties išsaugojimą, kai bandomojo etapo metu platforma bus pašalinta ir, naudojant vaizdo kamerą, bus fiksuojamas gyvūnų kirtimų skaičius ankstesnėje tikslinės platformos vietoje [24].

2.5.2. Pasyvaus vengimo užduotis (PAT)

Pasyviojo vengimo užduotis (PAT) apima aparato naudojimą, kuris yra padalintas į apšviestus ir tamsius skyrius, sujungtus mažais vartais. Aklimatizacijos fazės metu gyvūnai įdedami į aparatą 15 min., kad susipažintų su nauja aplinka. Treniruotės metu gyvūnai bus patalpinti į tamsų skyrių, o ant kojų bus paleistas nedidelis elektros šokas (39 V 3 s arba 1 mA 1 s). Po 24 valandų mokymo bandymo bus atliktas tikrasis bandymas, kurio metu kiekvienas gyvūnas bus patalpintas į apšviestą skyrių. Latentinis laikotarpis, prieš jam patenkant į tamsųjį skyrių, bus registruojamas daugiausiai iki 300 s, kad būtų galima įvertinti, ar gyvūnas išlaiko elektros šoko atmintį, vengiant tamsaus skyriaus, kai jie gavo šoką [19, 27].

2.5.3. Naujų objektų atpažinimas (NOR)

Naujo objekto atpažinimo testas (NOR) atliekamas siekiant įvertinti gyvūno atpažinimo atmintį. Bandymas atliekamas stačiakampėje dėžėje (40 cm × 50 cm × 50 cm), kuri yra nudažyta juodai, virš kameros įrengta vaizdo kamera gyvūno elgesiui fiksuoti. Pripratimo fazėje gyvūnai tris dienas iš eilės patalpinami į kamerą be jokių daiktų bent 10 min. Bandomojo etapo metu gyvūnams bus leista 5 minutes vaikščioti dėžėje, kurioje yra du identiški objektai (paprastai plastikiniai rutuliai). Po 30 min bus atliktas bandomasis bandymas, kurio metu vienas iš objektų bus pakeistas kitu kitos spalvos objektu. Gyvūnų tiriamasis elgesys bus stebimas atsižvelgiant į objekto uostymą ar lietimą. Siekiant įvertinti atpažinimo atmintį, bus registruojama kontakto su kiekvienu objektu trukmė [19,20].

2.5.4. Objekto vietos atpažinimas (OLR)

Objekto vietos atpažinimo testas naudojamas atpažinimo atminčiai įvertinti, kuris panašus į NOR testą. Aparatas yra stačiakampė dėžutė (40 × 50 × 50 cm), kurios viduje yra tamsiai nudažyta kamera, o kameros viršuje sumontuota vaizdo kamera, skirta stebėti gyvūnų tiriamąjį elgesį. Naudojami du maži plastikiniai buteliai, vienodo dydžio ir formos, bet skirtingos spalvos. Metodas skirstomas į tris fazes: pripratimo, susipažinimo ir testavimo fazes [20].

Pripratimo fazė: gyvūnams leidžiama laisvai klaidžioti kameroje be jokių daiktų 10 minučių tris dienas iš eilės.

Susipažinimo fazė: ketvirtą dieną gyvūnai 5 minutėms patalpinami į kamerą, kurioje yra du identiški objektai.

Bandymo fazė: praėjus 30 minučių po susipažinimo etapo, gyvūnai vėl bus patalpinti į kamerą, tačiau vienas iš pirminių objektų bus pakeistas kitu, o likęs originalus objektas vis dar bus kameroje.

Kad būtų išvengta bet kokių galimų kvapų, kiekvienos bandymo sesijos pabaigoje daiktai ir kameros grindys valomi 70 procentų etanoliu. Gyvūnų tiriamasis elgesys bandymo fazės metu stebimas pagal objekto uostymą ar lietimą naudojant gyvūnų nosis [22].

2.5.5. Naujų objektų diskriminacija (NOD)

Naujas objektų atskyrimo testas leidžia gyvūnams pažinties fazės metu 5 minutes tyrinėti du objektus. Po 4 valandų vienas iš objektų bus pakeistas nauju. Vėliau bus registruojamas tiriamasis gyvūnų elgesys, pvz., kramtymas, laižymas, uostymas arba objekto lietimas nosimi [23].

2.5.6. Padidintas plius labirintas (EPM)

Padidintas pliuso labirintas apima pakelto pliuso formos aparato naudojimą, kurį sudaro keturi pailgi bėgiai (rankos), iš kurių dvi yra atviros, o kitos dvi – uždaros. Dvi atviros svirties yra viena skersai viena kitos, statmenos uždaroms rankoms su platforma viduryje [36]. Mokymo fazės metu gyvūnai trims dienoms dedami į atviros rankos galą, atsisukę nuo centrinės platformos. Perkėlimo delsos laikas (TLT) registruojamas kaip laikas, per kurį gyvūnai patenka į uždarą ranką nuo atviros rankos pradžios taško per 90s. Ketvirtą dieną, atliekant bandomąjį tyrimą, TLT registruojamas praėjus 24 valandoms po visuotinio smegenų išemijos-reperfuzijos (IR) smegenų pažeidimo, kuris yra atminties indeksas [21].

2.5.7. Uždelstas erdvinis kaitaliojimas (DSA) / diferencinis žemo atsako greičio (DRL) sustiprinimas

Atidėtas erdvinis kaitaliojimas (DSA) ir diferencinis mažo atsako dažnio (DRL) sustiprinimas apima panašaus aparato – „Skinner“ dėžės, kurioje yra dvi ištraukiamos svirtys tarp granulių dozatorių, ir tiesiai virš kiekvienos svirties esančios lemputės, naudojimą. Mokymo fazės metu gyvūnai yra mokomi paspausti svirtį pagal maisto granulių signalo lemputę kaip sustiprinimą, remiantis automatinio formavimo programa. Kad gyvūnai nepasislinktų į šoną svirties link, svirtis, susijusi su sutvirtinimu, yra įterpiama į kas penkis pristatomus sutvirtinimus. DSA užduotis buvo susijusi su svirties paspaudimo delsa 0, 3, 6, 9 arba 18 sek. Lėto atsako kriterijai yra suskirstyti į šešias pagrindines treniruotes, pirmąsias dvi sesijas sudaro fiksuoto santykio 1 grafikas 200 bandymų arba 90 minučių. Trečią ir ketvirtą seansus sudaro DRL-5s grafikas, o sustiprinimas priklauso nuo 5 s vėlavimo tarp atsakymų. Tas pats taikoma paskutinėms dviem pagrindinėms seansams su DRL-10 tvarkaraščiu, pagal kurį tarp atsakymų reikia 10 s. Gyvūnai tiriami pagal DRL{13}}grafiką mažiausiai 30 seansų [26].

2.5.8.RAM užduotis

Radialinės rankos labirinto (RAM) užduotis naudojama erdvinei atminčiai įvertinti ir apima pakelto aštuonių ginklų radialinio labirinto naudojimą, kai kiekviena ranka yra ištiesta nuo aštuonkampės centrinės platformos. Kiekvienos rankos gale yra maisto indas, kuriame eksperimentuotojas gali padėti maistą sustiprinti. Nepaisant to, bandomojo etapo metu tik kai kuriose rankose maisto indelyje bus maisto granulės.

Mokymo fazės metu gyvūnai bus pastatyti ant centrinės platformos ir jiems bus leista laisvai tyrinėti labirintą, kad įsigytų maisto granulių. Proceso metu gyvūnai išmoks nebeleisti į rankas, kurias aplankė per tą patį bandymą, kai nėra maisto. Bandymo metu gyvūnams bus skirta 10 minučių, kad jie galėtų ištirti labirintą ir suvartoti visas granules, įdėtas į kai kurias rankas. Kiekvieno gyvūno pasirodymui įvertinti naudojami teisingi ir neteisingi pasirinkimai. Jei gyvūnai vėl patektų į ginklus be maisto, kurį aplankė, tai bus laikoma klaida [27].

2.5.9.Y labirintas

Y-labirinto testą naudoja Bagheri ir kt.[27] ir Shahmohammadi ir kt.[23] įvertinti gyvūnų erdvinio atpažinimo atmintį. Naudojamas aparatas yra trijų rankų labirintas, kuriame kiekviena ranka yra 120 laipsnių kampu nuo kitos ir primena didžiosios „Y“ raidės formą. Kiekviena ranka yra sujungta tarpusavyje jungiančia dalimi. Protokolas buvo atliktas siekiant įvertinti erdvinį mokymąsi naudojant spontanišką kaitą, kai gyvūnai naivūs labirinto prigimties atžvilgiu. Gyvūnai dedami ant vienos rankos galo ir jiems bus leista laisvai judėti per 8 minutes. Kaitaliojimas stebimas kaip sėkmingas įėjimas į kiekvieną iš trijų persidengiančių trigubų rinkinių, kurių kiekvienas turi nesikartojančias šakas. Pokyčių procentas vėliau apskaičiuojamas kaip faktinių ir galimų pakeitimų santykis × 100.

3. Genisteino veiksmingumas

3.1.Hipooksija

Rumman ir kt. tyrime. [19] Genisteino poveikis hipoksijos sukeltam MI buvo tiriamas naudojant Šveicarijos albinosų patinus. Pelės nuolat gydomos 10, 20 arba 30 mg/kg per dieną genisteino po 28 dienas. Pelių amnezijos modelis buvo sukurtas remiantis hipoksija, veikiant peles žemam deguonies kiekiui (10 procentų) kasdien panašiai kaip ir gydant genisteinu. Morriso vandens labirintas (MWM), pasyvus vengimo testas (PAT) ir naujų objektų atpažinimas (NOR) buvo naudojami genisteino poveikiui gerinti amnezijos turinčių pelių atminties defektus.

Rezultatai, pagrįsti MWM, parodė, kad pelėms, gydomoms 20 ir 30 mg/kg genisteino dozėmis, buvo mažas latentinis laikotarpis ir padidėjo kryžminimo skaičius platformos kvadrante. Kalbant apie PAT, 20 ir 30 mg/kg genisteino grupėse latentinis laikotarpis padidėjo. Galiausiai NOR, abi pelių grupės, gavusios 20 ir 30 mg/kg genisteino, padidino naujo objekto tiriamąjį elgesį, palyginti su pažįstamo objekto elgesiu. Apskritai išvados rodo, kad gydymas genisteinu gali padėti sumažinti hipoksijos sukelto MI atminties defektus.

3.2.Lėtinis miego nusidėvėjimas (CSD)

Kitame tyrime Lu ir kt. [20] Genisteino poveikis lėtinio miego trūkumo (CSD) sukeltam MI buvo tiriamas su Vėžio tyrimų instituto (ICR) pelių patinais. Pelės buvo gydomos genisteinu (10, 20 arba 40 mg / kg per dieną) kasdien 23 dienas. CSD indukcija buvo atlikta naudojant automatinį miego pertraukimo aparatą (SIA), kurį sudarė nerūdijančio plieno rotatorius, kuris sukasi 1 minutę po 2 minučių pertraukos 24 valandas per dieną iš viso 14 dienų. Morriso vandens labirintas (MWM), objekto vietos atpažinimas (OLR) ir naujas objekto atpažinimas (NOR) buvo naudojami norint įvertinti CSD sukeltų pelių erdvinę ir atpažinimo atmintį.

MWM atveju, genisteinu gydytos grupės, ypač 40 mg/kg grupės, latentinis laikas ieškant panardintos platformos gerokai sumažėjo. Be to, atliekant zondo testą, kai platforma buvo pašalinta, tiksliniame kvadrante gerokai padidėjo genisteino 20 ir 40 mg/kg kirtimų skaičius. Genisteinu gydytos grupės (20 ir 40 mg/kg) diskriminacijos indeksas (DI, palyginti su CSD grupe pagal OLR) gerokai padidėjo. Atliekant NOR užduotį, DI buvo labai padidėjęs, ypač tarp genisteino 20 ir 40 mg/kg gydymo grupės Apskritai gydymas genisteinu (ypač 20 ir 40 mg/kg) yra veiksmingas mažinant CSD sukeltus atminties defektus.

3.3. Streptozotocinas (STZ)

Siekiant ištirti neuroprotekcinį genisteino poveikį streptozotocino (STZ) sukeltai pažinimo sutrikimui, Wistar žiurkių patinams buvo sušvirkšta streptozotocino (STZ) intracerebroventrikulinė (icv) injekcija, kuri sudarė bendrą 3 mg/kg dozę per dvi injekcijas su 438 val. ]. Žiurkės buvo gydomos genisteinu po 150 mg/kg per parą 90 dienų. Morriso vandens labirinto (MWM) bandymo metu genisteinu gydyta grupė parodė mažesnį delsą plaukti link platformos. Tačiau atliekant zondo testą, laikas, kurį genisteinu gydytos žiurkės praleido tiksliniame kvadrante, buvo žymiai ilgesnis nei kitose grupėse, o tai rodo, kad gydymas genisteinu parodė daug žadančių rezultatų gerinant STZ sukeltą MI.

3.4.Skopolaminas

Lu ir kt.[22] ištyrė genisteino poveikį skopolamino sukeltai MI su Vėžio tyrimų instituto pelių patinais. Pelėms buvo skiriamas intraperitoninis (ip) skopolaminas 0,75 mg/kg per dieną septynias dienas iš eilės. Genisteinas (10, 20 arba 40 mg/kg per dieną, po) pelėms buvo skiriamas kasdien 24 dienas. Elgsenos testai buvo prieštaraujantys vietos atpažinimui (OLR) ir Morriso vandens labirintui (MWM), siekiant įvertinti erdvinę atmintį. Atliekant OLR užduotį, genisteinu gydyta grupė (40 mg/kg) žymiai padidino diskriminacijos indeksą (DI). Tiek atliekant MWM bandomuosius, tiek zondo tyrimus, genisteinu gydytų grupių grupė parodė mažesnį pabėgimo delsą, kad būtų galima rasti panardintą platformą, ir didesnis kirtimų skaičius tiksliniame kvadrante, o tai rodo, kad gydymas genisteinu gali pagerinti pažinimo veiklą.

3.5. Lipopolisacharidai (LPS)

Shahmohammadi ir kt. [23] atliko tyrimą dėl gydymo genisteinu poveikio lipopolisacharidų (LPS) sukeltam neurouždegimui Wistar žiurkių patinams albinosams. Neurouždegimas buvo sukeltas įvedant 500 ug/kg per dieną LPS(ip). Vėlesnis genisteino gydymas buvo atliktas septynias dienas po 10, 50 arba 100 mg/kg per parą. Erdvinė ir atpažinimo atmintis buvo vertinama naudojant Y labirintą, naują objektų diskriminaciją (NOD) ir pasyvaus vengimo užduotį (PAT). Visuose trijuose bandymuose genisteinas (50 ir 100 mg/kg) žymiai pagerino susijusius parametrus, o tai dar labiau patvirtina. kad gydymas genisteinu gali palengvinti pažinimo sutrikimus.

3.6. Streptozotocino (STZ) sukeltas diabetas

In vivo tyrimą atliko Rajput ir kt. [21] ištirti genisteino neuroprotekcinį vaidmenį SIZ sukeltam diabetui šveicariškų pelių albinosų patinuose. Cukrinis diabetas pelėms buvo sukeltas įvedant 200 mg/kg STZ per iproute. Cukrinis diabetas pelėms sukėlė hiperglikemiją, kuri savo ruožtu gali sukelti išemijos-reperfuzijos (IR) sukeltą neuronų pažeidimą. Vėliau diabetu sergančios pelės buvo gydomos genisteinu (2, 5, 5 arba 10 mg / kg per dieną) 14 dienų. Erdviniai ir sulaikymo prisiminimai buvo įvertinti naudojant padidintą plius labirintą (EPM), dėl kurio sutrumpėjo perdavimo latentinis laikas genisteino (5 ir 10 mg/kg) gydymo grupių pelėms, sergančioms IR, sergančiomis IR. Apskritai, išvados tvirtai rodo, kad kognityvinius trūkumus galima sumažinti gydant genisteinu.

3.7.Švinas

Su ir kt. [24] įvertino apsauginį gydymo genisteinu poveikį švino, kaip toksiškos medžiagos, lygiui. Sprague-Dawley žiurkių patinams 56 dienas buvo duodama per burną (po) švino ir genisteino po 1 mg/kg per parą. Morriso vandens labirintas (MWM) buvo naudojamas žiurkių pažinimo veiksmingumui ir švino įtakai įvertinti. Gydymas genisteinu žymiai sumažino delsą iki platformos ir padidino kirtimų skaičių tiksliniame kvadrante tiek bandymų, tiek zondo testų metu, o tai rodo, kad gydymas genisteinu gali sumažinti MI poveikį.

3.8. Kaiino rūgšties (KA) sukeltas priepuolis

Khodamoradi ir kt. tyrime. [25], buvo ištirtas gydymo genisteinu poveikis Wistar žiurkių patelių kaino rūgšties (KA) sukeltiems priepuoliams. KA sukeltas priepuolis sukėlė MI ir neuronų pažeidimus. KA buvo skiriamas žiurkėms intracerebroventrikuliniu (icv) būdu (0,5 ug/μL). Vėliau KA buvo įvesta žiurkėms praėjus keturioms dienoms po gydymo genisteinu 0,5 ir 5 mg/kg per dieną per ip. Erdvinei atminčiai įvertinti buvo naudojamas Morriso vandens labirintas (MWM). Apskritai rezultatai rodo teigiamą genisteino poveikį KA sukeltų traukulių pelėms.

3.9.Senėjimas

Neese ir kt. [26] tyrė su senėjimu susijusį pažinimo sutrikimą ir ištyrė galimą apsauginį genisteino poveikį, mažinantį deficitą. Jie naudojo 14-mėnesio amžiaus Long-Evans žiurkių pateles, kad imituotų senėjimo poveikį pažinimo veiklai. Darbinei atminčiai įvertinti buvo naudojamas ir svirties paspaudimas, ir Skinnerio dėžutės uždelstas erdvinis kaitaliojimas (DSA) ir diferencinis mažo atsako dažnio (DRL) sustiprinimas. Nepaisant to, rezultatai parodė, kad genisteinas nėra veiksmingas mažinant pažinimo sutrikimus senų žiurkių MI modelyje.

3.10.-. amiloido

Bagheri ir kt. [27] ištyrė neuroprotekcinį gydymo genisteinu poveikį amiloido sukeltam MI. -amiloido 1-40 buvo sušvirkšta icv (4 μL) Wistar žiurkių patinams, po to per burną buvo įvesta genisteino (10 mg/kg per dieną). Y-labirinto, pasyvaus vengimo testo (PAT) ir radialinės rankos labirinto (RAM) testai buvo naudojami kognityviniam veiksmingumui įvertinti, kai genisteinu gydytų žiurkių parametrai žymiai padidėjo ir Y labirinte, ir PAT, o RAM nebuvo. reikšmingas teisingų rankų pasirinkimų padidėjimas arba neteisingų rankų pasirinkimų sumažėjimas. Apskritai išvados rodo, kad gydymas genisteinu gali užkirsti kelią amiloido sukeltam MI.

Norėdami gauti daugiau informacijos, spustelėkite nuorodą:https://www.xjcistanche.com/news/part2-genistein-a-potential-natural-lead-mol-55084044.html