Polisacharidai iš Cistanche gali žymiai sulėtinti plaučių funkcijos senėjimą

Kontaktai: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 El. paštas:audrey.hu@wecistanche.com

Sun Yun Wang Dejun Liu Xiaomei Shi Le Zhang Hongquan

(Medicinos institutas, Jangdžou universitetas, Jangdžou 225001)

SenėjimasTai procesas, kurio metu organizmo audiniai ir organai gyvenimo eigoje patiria funkcinę ir morfologinę degeneraciją ir netgi senėjimą. Plaučiai yra tiesiogiai susiję su išorine aplinka ir priima viso kūno kraujotaką. Labiausiai pažeidžiami įvairūs kenksmingi aplinkos ir organizmo veiksniai. Tai vienas iš pirmųjų kūno organų, kuriame sensta. Laisvųjų radikalų vaidmenį senėjimo procese patvirtino daugelio mokslininkų tyrimai. Šiame eksperimente naudojamas ozonas, kad būtų sukurtas eksperimentinis senėjimo modelis, kurį reikia stebėtiCistanche polisacharidų poveikis hipoksijos tolerancijai, antioksidacinei funkcijai ir senstančių pelių plaučių ultrastruktūrai. Įtaka. Tikimasi, kad tai padės moksliniams tyrimamspolisacharidai iš Cistanchelėtinant degeneracinius plaučių pokyčius ir pagyvenusių žmonių kvėpavimo sistemos sveikatos priežiūrą.

Šio tyrimo tikslas – stebėti eksperimentinio senėjimo pelių plaučių audinio ląstelių ultrastruktūros degeneracinius pokyčius ir jų įtaką.polisacharidai iš Cistancheant jo. Naudojant ozoną (Ozone, Ob) nepertraukiamas įkvėpimas 4 savaites, siekiant sukelti plaučių senėjimo modelio metodą, naudojant polisacharidą iš Cistanche 50 ir 100 gramų, kad būtų galima 6 savaites leisti pavyzdinėms pelėms, siekiant nustatyti senstančių pelių hipoksijos toleranciją, plaučius ir serumo superoksidą. ) aktyvumas ir malondialdehido (MDA) kiekis. Plaučių audinio organelių ir ultrastruktūros pokyčiai buvo stebimi elektroniniu mikroskopu. Rezultatai Ozono sukeltos eksperimentinės senstančios pelės reikšmingai sumažino hipoksijos toleranciją; sumažėjo plaučių ir serumo SOD, o padidėjo MDA. Palyginti su modelių grupe, polisacharidas iš Cistanche gali žymiai pailginti senstančių pelių hipoksijos tolerancijos laiką (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">Polisacharidai iš Cistanche gali žymiaiatidėti eksperimentą Plaučių fiziologinė degeneracija ir ląstelių morfologijalytiškai senstančių pelių.

1 medžiaga

1.1 Gyvūnai

3 mėn. amžiaus švarios ICR padermės pelės, 18–22 g, ¥^ kiekviena pusė, pateiktos Jangdžou universiteto Eksperimentinių gyvūnų centro, sertifikato numeris: Su Dongzhi 98002^

1.2 Vaistai ir reagentai

Polisacharidai iš Cistančės: pateikė Nankino laukinių augalų tyrimų institutas, paruošti distiliuotu vandeniu iki 2,5 g·LT, 5.0 gL-1; SOD, MDA testų rinkinius teikia Nanjing Juli Biomedicininės inžinerijos tyrimų institutas.

1.3 Priemonė

UV755B ultravioletinių spindulių spektrofotometras, Šanchajaus analizės prietaisų gamyklos produktas; ozono generatorius, Wuxi medicinos prietaisų gamyklos produktas; H-300 perdavimo elektronų mikroskopas, Hitachi (Japonija) gaminys.

2 Metodas

2 1 Eksperimentinio plaučių senėjimo modelio su kvapo posūkio pažeidimu parengimas ICR pelės buvo paimtos iš dienos ir eksperimentinio plano, o modelio ir gydymo grupės pelės buvo sugrupuotos atsitiktinai.

Eksperimentinis senėjimo modelis buvo kuriamas 4 savaites nepertraukiamai. Tuo pačiu metu kontrolinei grupei (paimkite normalias peles, įsigytas toje pačioje partijoje) ir modelio grupei buvo duota 20 ml-kg ^d'1 su įprastu fiziologiniu tirpalu, polisacharidas iš Cistanche gydymo grupės I ir II polisacharidas iš Cistanche 50, 100 mg-kg -1-d-' buvo suleidžiama į skrandį, o vartojimo laikotarpis buvo 6 savaitės. Po paskutinio vartojimo buvo atlikti įvairūs indekso testai.

2.2 Hipoksijos tolerancijos tyrimo metodas (2)

Kiekviena pelių grupė buvo dedama į 250 ml šlifavimo buteliuką, kuriame buvo 20 g natrio kalkių. Vazelinas buvo sandariai uždarytas, o laikas nuo pelių įdėjimo į butelį iki uždusimo ir mirties buvo užfiksuotas esant normaliai temperatūrai ir slėgiui.

2.3 Plaučiai ir kraujas

SOD^MDA kiekio nustatymas kiekvienoje pelių grupėje praėjus 1 valandai po paskutinio vartojimo, pašalinkite akių obuolius ir paimkite kraują, kad atskirtumėte serumą; tada pelės buvo numarintos, plaučių audiniai išimami ir į stiklinį homogenizatorių įpilama fiziologinio tirpalo, kad būtų paruoštas 100 g -f1 plaučių audinio homogenatas, Huangsuyin oksidazės metodu nustatytas plaučių ir serumo SOD aktyvumas, nustatytas MDA kiekis. tiobarbitūro rūgšties kondensacijos metodu.

2.4 Mėginio paruošimo elektroniniu mikroskopu metodas (3)

Eksperimentas suskirstytas į kontrolinę grupę, pavyzdinę grupę ir didelės dozės grupę. Modeliavimo ir administravimo metodai yra tokie patys kaip aukščiau. Po paskutinio įvedimo atsitiktine tvarka iš kiekvienos grupės atrenkamos 3 pelės, kurios numarinamos kaklu ir atitinkamai paimamos dešinės pusės. Plaučių viršūnės audinys, 0,4 mmol, L-1 glutaraldehidas ir 0,04 mmol, dviguba fiksacija su L'1 OfeO4, acetono gradiento dehidratacija, Epon 812 įterpimas, švinas-uranas elektronų dažymas, Hitachi H-300 perdavimo elektronų mikroskopas su 10,000 iki 20,000 padidinimu Stebėkite pagrindinių organelių pokyčius ir struktūrinius pokyčius po kartotiniais.

2.5. Statistinio apdorojimo rezultatai išreiškiami dirvožemio s dešimtimis, o dviejų imties vidurkių palyginimui naudojamas t testas.

3 rezultatai

3.1 Cistanche polisacharido poveikis senstančių pelių hipoksijos tolerancijai

Praėjus vienai valandai po paskutinio pelių skyrimo kiekvienoje grupėje, buvo išbandytas hipoksijos tolerancijos laikas. Rezultatai parodė, kad laikas, per kurį senstančios pelės galėjo toleruoti hipoksiją, buvo žymiai trumpesnis nei įprastų pelių. Laikas yra žymiai ilgesnis, palyginti su modelio grupe, tačiau nėra reikšmingo skirtumo, palyginti su kontroline grupe, o tai rodo, kad polisacharidas iš Cistanche gali žymiai pagerinti senstančių pelių hipoksijos toleranciją, žr. 1 lentelę.

3.2 Cistanche polisacharido poveikis senstančių pelių antioksidacinei funkcijai

Kiekvienos grupės pelių kraujas (serumas) ir plaučių audinys (plaučių homogenatas) buvo paimti po paskutinio vartojimo ir buvo nustatyti SOD ir MDA. Rezultatai Senstančių pelių serumo ir plaučių SOD aktyvumas sumažėjo, o MDA kiekis padidėjo. Palyginti su kontroline grupe, skirtumas buvo reikšmingas. Cistanche polisacharidai gali padidinti serumo ir plaučių SOD aktyvumą senstančiose pelėse ir sumažinti MDA kiekį. Palyginti su kontroline grupe, reikšmingo skirtumo nėra, o skirtumas su senėjimo modelio grupe yra reikšmingas, žr. 2 ir 3 lenteles.

3.3 Polisacharido iš Cistanche poveikis alveolių epitelio ląstelių viduląsteliniam tamsumui⑷

Elektroninio mikroskopo gamybos būdas yra toks pat kaip ir anksčiau. Morfometrinė analizė: elektroniniu mikroskopu kiekvienas mėginys buvo stebimas 10 matymo laukų, kad būtų išmatuotos organelės. Rezultatai parodė, kad modelio grupės mitochondrijos ir lameliniai kūnai sumažėjo, bazinė membrana sustorėjo, o polisomos padidėjo. Palyginti su kontroline grupe, buvo reikšmingų skirtumų. Cistanche didelių dozių grupės polisacharidai jį pagerino. Palyginti su modelio grupe, skirtumas buvo reikšmingas ir iš esmės buvo artimas kontrolinei grupei. Žr. 4 skirtuką.

3.4 Eksperimentiškai senstančių pelių plaučių epitelio ląstelių ultrastruktūros pokyčiai ir Cistanche polisacharidų įtaka

Senstančios modelio pelės gali būti matomos elektroniniu mikroskopu: I tipo alveolių epitelio ląstelės yra vieno sluoksnio plokščio tipo, kurio storis apie {{0}},2 pm. Branduolys yra mažas ir tankus. Perinuklearinėje citoplazmoje yra keletas mitochondrijų, Golgi kompleksas ir išsibarstę endoplazminis tinklas. Palyginti negausiai, su mažiau mikrofilamentų ir mikrotubulių. Senstančių pelių plaučių histologiniai pokyčiai buvo stebimi elektroniniu mikroskopu. Pagrindiniai pokyčiai buvo II tipo alveolių epitelio ląstelės. Ląstelių laisvajame paviršiuje sumažėjo arba išnyko mikrovileliai, susilpnėjo sluoksniniai kūnai, neryški sluoksninė struktūra, keliose ląstelėse buvo smulkių lamelinių ląstelių. Kūnas išnyksta ir yra tuščiavidurė arba vienalytė amorfinė juostelė, turinti mažą elektronų tankį. Ląstelės kūne sumažėja mitochondrijos ir šiurkštus endoplazminis tinklas. Alveolių epitelio ląstelių bazinė membrana yra akivaizdžiai sustorėjusi, o alveolių intersticijoje matomas diafragmos ląstelių ir fibroblastų proliferacija (1,2 pav.). Nors Cistanche polisacharidų grupėje buvo pastebėta vidinė branduolio membrana ir mitochondrijų patinimas, laipsnis buvo žymiai mažesnis, palyginti su modelio grupe (3.4 pav.). Vaistų grupės stebėjimas elektroniniu mikroskopu parodė, kad tipo epitelio ląstelės buvo plokščios, lygaus paviršiaus, be branduolio, o kai kurios buvo apie 0,1 storio. Tarpubrandulyje buvo keletas organelių, buvo matomos radžio dalelės. II tipo ląstelės turi trumpus gaurelius paviršiuje, daug mitochondrijų, šiurkštų endoplazminį tinklelį ir Golgi kompleksą citoplazmoje (5,6 pav.)

Ozono žalos senėjimo modelis yra pagrįstas laisvųjų radikalų senėjimo teorija. Deguonies laisvųjų radikalų pažeidimas vaidina svarbų vaidmenį plaučių senėjimo procese. Plaučiai yra vienintelis organas, kuris bendrauja su išorine aplinka. Tam tikrą laiką gyvūnai nuolat įkvepiami ozonu. Plaučiai pirmieji patenka į ozoną ir yra labiausiai pažeidžiami. Ozonas, patekęs į organizmą, greitai sukuria labai aktyvius superoksido anijonų laisvuosius radikalus. Laisvųjų radikalų perteklius viršija organizmo gebėjimą sunaikinti, sunaikina ir sunaudoja organizme esančius laisvuosius radikalus šalinančius fermentus (pvz., SOD), o tada organai ir net kūnas sensta. Šio eksperimento metu ozono sukeltas senstančių pelių antihipoksinis gebėjimas žymiai sumažėjo, sumažėjo antioksidantinės medžiagos SOD aktyvumas serume ir plaučių audinyje, o lipidų peroksidacijos metabolito MDA reikšmingai padidėjo. Naudojant Rongrong Duojing 50 100 mg-kg1 nepertraukiamą eksperimentinių senstančių pelių infuziją, senstančios pelės akivaizdžiai toleruoja hipoksiją, padidėja superoksido dismutazės aktyvumas laisviesiems radikalams šalinti. Sumažėja lipidų peroksidacijos metabolitų kiekis, o tai rodo, kad Cistanche polisacharidai gali sustiprinti senstančių pelių antioksidacinę funkciją.

Epitelio ląstelių funkcijai matuoti dažnai naudojami alveolinių n-tipo epitelio ląstelių citoplazmoje esantys lameliniai kūnai. Bado lamelinių kūnų išskyros vadinamos alveolinėmis paviršinio aktyvumo medžiagomis, kurios egzistuoja alveolių oro ir skysčio sąsajoje ir gali sumažinti alveolių paviršiaus įtempimą. Dėl senėjimo pokyčių lameliniuose kūnuose gali sumažėti alveolių paviršinio aktyvumo medžiagų kiekis. Alveolių paviršiaus įtempimas yra gana didelis, o alveolių susitraukimo jėga padidėja, todėl alveolės susitraukia. Elektroninės mikroskopijos stebėjimai atskleidė, kad senstančių pelių n tipo alveolių epitelio ląstelės labai pasikeitė. Matyti, kad susilpnėję lameliniai kraujo kūneliai, neryški struktūra, pabrinkusios ir sumažėjusios mitochondrijos, taip pat sumažėjęs grubus endoplazminis tinklas, gerokai sustorėjusi pamatinė membrana. Nors panašius struktūrinius pokyčius galima pastebėti pritaikius polisacharidą iš Cistanche, laipsnis žymiai sumažėja, o tai rodo, kad Cistanche polisacharidas gali žymiai pagerinti arba atitolinti morfologinius degeneracinius plaučių epitelio ląstelių lamelinių kūnų pokyčius ir mitochondrijų degeneraciją senstančiose pelėse. Dauguma ląstelių struktūros iš esmės yra nepažeistos, todėl plaučių ultrastruktūros pokyčiai vėluoja. Šio tyrimo rezultatai rodo, kad polisacharidai iš Cistanche gali sumažinti struktūrinius ir funkcinius pokyčius, kuriuos sukelia ozono sukeltas plaučių oksidacinis pažeidimas, sulėtinti plaučių senėjimą ir pateikti eksperimentinių įrodymų taikomiesiems tyrimams.