Wenyang Tongbian granulių paruošimo technologija

Santrauka:

TikslasNustatyti ir optimizuoti Wenyang Tongbian granulių paruošimo technologiją.

MetodaiIšgautas vandens nuoviras. Kaip indeksai buvo naudojami ežiuolės glikozido kiekis monarchiniame vaiste ir derliaus junginys. L9 (34) ortogonalinis testas buvo naudojamas Wenyang Tongbian granulių ekstrahavimui optimizuoti. Geriausias formavimo procesas buvo optimizuotas atsižvelgiant į granuliavimo sunkumą, formuojamumą ir dalelių išeigą. Rezultatai Optimalus ekstrahavimas apėmė 10 vandens įdėjimą ir ekstrahavimą 3 kartus po 1 val. Geriausias formavimo procesas: pagalbinės medžiagos tipas dekstrinas, pagalbinių medžiagų santykis 1∶0,9, o geriausia drėkinanti medžiaga – 85 % etanolis. Išvada Ekstrahavimo ir formavimo procesas yra stabilus ir pagrįstas, paprastas ir įmanomas, gerai atkuriamas, o tai gali būti pramoninės Wenyang Tongbian granulių gamybos pagrindas.

Raktažodžiai: Wenyang Tongbian granulės; ortogonalinis testas; ištraukimas; lipdymas

NAUJA ŽOLŲ FORMACIJA INKSTUMSYANGO TRŪKUMAS

Pagalbinė Wecistanche tarnyba

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp / Tel:+86 15292862950

Jang trūkumo vidurių užkietėjimasdažnas vyresnio amžiaus žmonėms ir moterims. Gydymo metodas neturėtų būti paprastas valymas. Warming Yang metodu galima pasiekti gerų rezultatų [1]. Wenyang Tongbian granulės yra ligoninėje naudojamas preparatas, sukurtas remiantis Hubėjaus provincijos tradicinės kinų medicinos ligoninės profesoriaus Lin Aizhen klinikine patirtimi gydant pagyvenusių žmonių funkcinį vidurių užkietėjimą. Jį sudaro Cistanche deserticola, cinamono žievė, astragalus ir Atractylodes macrocephala. Formulėje Cistanche deserticola atlieka inkstų yang tonizuojančią funkciją ir naudingą esencijai bei kraujui, ir yra pagrindinis yang šildantis vaistas; cinamono žievė atlieka meridianų šildymo ir kraujagyslių atblokavimo, ugnies papildymo ir yang palaikymo funkcijas; astragalus atlieka yang didinimo ir qi papildymo funkcijas, sutraukia žaizdas ir skatina audinių regeneraciją; ir Atractylodes macrocephala atlieka blužnies stiprinimo ir qi papildymo funkcijas, džiovina drėgmę ir skatina diurezę.

Tyrimai parodė, kad feniletanolio glikozidai yra pagrindinės Cistanche deserticola veikliosios medžiagos [2]. Tarp jų echinakozidas ir verbaskozidas yra būdingi Cistanche deserticola kokybės kontrolės ingredientai, kaip nurodyta Kinijos farmakopėjoje. Liu Xianhong ir kt. [3], atlikus tyrimus su žmonėmis in vivo, padarė išvadą, kad Cistanche deserticola tinka klinikiniam vidurių užkietėjimo gydymui ir gali gydyti simptomus ir pagrindinę priežastį. Pagrindiniai cheminiai cinamono žievės komponentai yra lakieji aliejai, polisacharidai, flavonoidai ir kt. Šiuolaikiniai farmakologiniai tyrimai parodė, kad cinamono žievė turi farmakologinį poveikį, pavyzdžiui, plečia kraujagysles, mažina skrandžio opą ir antibakterinį poveikį [4]. Astragalus polisacharidai, flavonoidai ir astragalozidas IV yra pagrindiniai cheminiai komponentai, turintys imunomoduliacinį poveikį [5]. Atractylodes macrocephala stiprina blužnį ir reguliuoja žarnyno floros sutrikimus ir gali būti kliniškai naudojamas virškinimo trakto disfunkcijai gydyti [6]. Originalus receptas daugiausia naudojamas kinų medicinos nuoviruose, tačiau jis turi trūkumų, tokių kaip nepatogumas ruošiant nuovirą, didelė dozė ir nepatogumas nešiojant. Kad šis klinikinės patirties receptas būtų plačiai naudojamas klinikinėje praktikoje, jis buvo sukurtas į granules. Šiame eksperimente kaip indikatoriai buvo naudojamas pastos išeiga ir echinakozido, pagrindinės pagrindinio vaisto veikliosios medžiagos, kiekis, toliau naudojamas tradicinis vandens nuoviro procesas, o įpilamo vandens kiekiui optimizuoti naudojamas L9 (34) ortogonalinio tyrimo metodas. , nuoviro laikas ir nuoviro laikas ekstrahavimo procese, kad būtų pasiektas geriausias ekstrahavimo procesas. Tuo pačiu metu buvo ištirtas granulių formavimo procesas, siekiant nustatyti stabilų ir pagrįstą formavimo procesą, suteikiantį pagrindą bandomajai gamybai, kokybės kontrolei ir klinikiniam preparato pritaikymui [7-8].

1 Prietaisai ir reagentai

1.1 Prietaisai

Aljansas e2695didelio efektyvumo skysčių chromatografas, 2998 diodų matricos detektorius (Waters, JAV), ES225SMDR 1/100, 000 analitiniai svarstyklės (Precisa, Šveicarija), UPT-11-10T itin gryno vandens aparatas (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE dviejų dažnių CNC ultragarsinis valiklis (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2 Bandomieji vaistai

Vyno Cistanche griežinėliai(partijos numeris: 2322050113, pagaminta Vidinėje Mongolijoje), cinamono griežinėliai (partijos numeris: 2323020103, gaminami Guangxi), astragalų griežinėliai (partijos numeris: 2323020105, gaminami Gansu), Atractylodess macrocephalatchs10,8 ang ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., visus griežinėlius kaip autentiškus nustatė Chen Shuhe, Instituto vyriausiasis vaistininkasTradicinė kinų medicinaHubėjaus provincijos tradicinės kinų medicinos ligoninės ir yra kvalifikuoti pagal 2020 m.kinų FarmakopėjaI dalis). Echinakozido etaloninė medžiaga(partijos numeris: 111670-201907, grynumas: 91,8%, Kinijos maisto ir vaistų inspekcijos tyrimai).

Dekstrinas (partijos numeris: 230102), kukurūzų krakmolas (partijos numeris: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), sacharozė (partijos numeris: TF28221205), mikrokristalinė celiuliozė (partijos numeris: TF471211:0) TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metodai ir rezultatai

2.1 Echinakozido kiekio nustatymas

2.1.1 Chromatografinės sąlygos: Agilent 5 TC-C18 (250 nm × 4,6 mm, 5 μm) buvo naudojama kaip chromatografinė kolonėlė; metanolis buvo naudojamas kaip judri fazė A, 0,1 % skruzdžių rūgšties tirpalas – kaip judri B fazė, gradiento eliuavimas (0-17 min, 26,5 % A; 17-20 min, 26,5 % → 29,5 % A; 20-54 min.,

29,5 %A, 54-55 min., 29,5 % → 26,5 %A; 55-60min., 26,5 %A); srauto greitis 1.{11}} mL·min-1; kolonėlės temperatūra 30 laipsnių ; diodų matricos detektorius, aptikimo bangos ilgis 330 nm; įpurškimo tūris 10μL; teorinis plokštelės numeris, apskaičiuotas pagal echinakozido smailę, turi būti ne mažesnis kaip 3000[9].

2.1.2. Etaloninio tirpalo ruošimas

Paimkite atitinkamą echinakozido kiekį, tiksliai pasverkite 9,65 mg, sudėkite į 25 ml matavimo kolbą, įpilkite 50 proc.

metanolis, kad ištirptų ir praskiestų iki žymės kaip etaloninis pradinis tirpalas. Tiksliai pipete įpilkite 1 ml echinakozido pradinio tirpalo į 25 ml matavimo kolbą, įpilkite 50 % metanolio, kad praskiestumėte iki žymės, gerai suplakite ir paruoškite etaloninį tirpalą, kuriame yra 14,17 ug 1 ml [9].

2.1.3 Tiriamojo tirpalo paruošimas

Paimkite apie 0,5 g sausos pastos miltelių, susmulkinkite į miltelius, tiksliai pasverkite, sudėkite į rudą kūginį buteliuką su kamščiu, tiksliai įpilkite 50 ml 50% metanolio, sandariai užkimškite, gerai suplakite, pasverkite, apdorokite ultragarsu 40 min (galia 250 W, dažnis 45 kHz), leiskite atvėsti, dar kartą pasverkite, įpilkite 50% metanolio, kad prarastumėte svorį, gerai suplakite, palikite pastovėti, paimkite supernatantą, filtruokite ir paimkite filtratą.

2.1.4 Neigiamojo mėginio tirpalo paruošimas

Paimkite apie 0,5 g sausos pastos miltelių, kurių formulė be vyno Cistanche vaistinių medžiagų, ir paruoškite neigiamo mėginio tirpalą pagal „2.1.3“ aprašytą metodą.

2.1.5 Specifiškumo testas

Tiksliai pipete įpilkite tiriamąjį tirpalą, etaloninį tirpalą ir neigiamą mėginio tirpalą ir išmatuokite pagal chromatografines sąlygas pagal "2.1.1". Užrašykite chromatogramą. Rezultatai parodyti 1 paveiksle. Neigiamas mėginys netrukdo. Rezultatai rodo, kad metodas turi gerą specifiškumą.

1 pav. Specifinė Wenyang Tongbian granulių chromatograma

2.1.6 Tiesinio ryšio tyrimas

Paimkite atitinkamą echinakozido kiekį, tiksliai pasverkite iki 10,11 mg, supilkite į 25 ml matavimo kolbą, įpilkite 50 % metanolio, kad praskiestumėte etaloninio tirpalo koncentracijų seriją, ir įšvirkškite pagal chromatografines sąlygas, nurodytas 2.1 punkte. .1", kad būtų nustatyta echinakozido smailės ploto vertė. Nubraižykite standartinę kreivę, kurioje echinakozido atskaitos kiekis yra horizontalioji ašis (ug, X), o smailės ploto integralinė vertė yra vertikalioji ašis (Y), ir atlikite tiesinę regresiją.

Regresijos lygtis yra Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Rezultatai rodo, kad echinakozido injekcijos kiekio smailės ploto integralinė vertė yra gerai tiesiškai tarp 1,4850 ir 371,2392 ug.

2.1.7 Tikslumo testas

Tiksliai išsiurbkite 10 μL etaloninio tirpalo (masės koncentracija 37,12 ug·mL–1) pagal "2.1.6", įpurkškite 6 kartus, atitinkamai užregistruokite echinakozido smailės ploto vertę ir apskaičiuokite RSD reikšmę, kuri yra 1,1 %. kad instrumentas turi gerą tikslumą.

2.1.8 Pakartojamumo testas

Paimkite tą pačią sausą pastą, sumalkite į miltelius, tiksliai pasverkite 6 porcijas, kurių kiekviena yra apie 0,5 g, ir sudėkite į rudą kūginį butelį su kamščiu. Ištraukite pagal "2.1.3" pateiktą metodą, nustatykite turinį ir apskaičiuokite. Rezultatai rodo, kad vidutinis echinakozido kiekis mėginyje yra 1,46 mg·g–1, o RSD reikšmė yra 2,7%, o tai rodo, kad šio metodo pakartojamumas yra geras.

2.1.9 Stabilumo testas

Paimkite tą patį mėginio tirpalą, tiksliai ištraukite 10 μL ir atitinkamai suleiskite per 0, 2, 4, 8, 12, 18 ir 24 valandas. Didžiausio ploto RSD vertė yra 0,71%, o tai rodo, kad mėginio tirpalas turi gerą stabilumą per 24 valandas.

2.1.10 Mėginio atkūrimo testas

Tiksliai pasverkite 6 tos pačios partijos tiriamųjų mėginių porcijas po 0,24 g ir sudėkite į rudą kūginį butelį su kamščiu. Pagal sudedamųjų dalių masės santykį 1:1 tiriamajame mėginyje tiksliai įpilkite 0,9 mL echinakozido etaloninės medžiagos (masės koncentracija yra 371,24 ug·mL－ 1) į "2.1.6", paruošiamas tiriamasis tirpalas pagal 2.1.3 punkte nurodytą metodą, nustatomas echinakozido smailės chromatografinis plotas ir apskaičiuojamas kiekis. Rezultatai rodo, kad vidutinis echinakozido atkūrimo rodiklis yra 101,09%, o RSD reikšmė yra 1,6%.

2.2 Eksperimento planas ir vertinimo rodikliai

Kaip tiriami veiksniai buvo pasirinktas pridėto vandens kiekis (A), ekstrahavimo laikas (B) ir ekstrahavimo skaičius (D). Trys faktorių lygiai buvo nustatyti pagal ankstesnio vieno faktoriaus tyrimo rezultatus, žr. 1 lentelę. Eksperimente naudota stačiakampio testo lentelė L9 (34), žr. 2 lentelę. Atliekant bandymą buvo naudojamas pastos išeiga ir echinakozido kiekis kaip vertinimo rodiklius optimaliam vandens gavybos procesui ištirti.

1 skirtukas Stačiakampio testo veiksnys ir lygis

2.2.1 Ortogonalinis testas

Pagal recepto santykį pasverkite 18 kiekvieno vaistinio skonio porcijų, po 55 g, ir atlikite vandens nuoviro ekstrakciją pagal stačiakampio dizaino schemą, pateiktą 2 lentelėje. Kiekviena grupė turi 2 lygiagrečias porcijas. Nuoviras filtruojamas per 80-tinklelio tinklelį, filtratas sumaišomas, atšaldomas, išmatuojamas nuoviro tūris, 50 mL tiksliai pipete įpilama į garinimo indą, kuris pastoviai sveriamas, išgarinamas iki sausumo. ir džiovinama sumažintame slėgyje 6 0 laipsnių kampu, kad gautų stačiakampę eksperimentinio mėginio sausą pastą. Apskaičiuokite pastos išeigą (pastos išeiga=(sausos pastos masė × vaistinio skysčio tūris) / (50 × nuoviro gabalėlio masė) × 100%). Pagal chromatografines sąlygas pagal "2.1.1" ir "2.1.3" metodą, atitinkamai buvo nustatytas echinakozido ekstrahavimo kiekis 9 stačiakampių tiriamųjų ekstraktų grupėse. Echinakozido ekstrahavimo kiekis=sausos pastos svoris × echinakozido kiekis / vyno Cistanche nuoviro gabalo svoris. Bendras balas=echinakozido kiekis ÷ didžiausias kiekis × 0,5 × 100 % + pastos išeiga ÷ didžiausia pastos išeiga × 0,5 × 100 % [10]. Rezultatai pateikti 2 lentelėje.

Kaip parodyta 3 lentelėje, įvertinus pastos išeigą ir echinakozido kiekio išsamų balą kaip vertinimo rodiklius, diapazono R reikšmė lentelėje rodo, kad kiekvieno veiksnio pirminis ir antrinis poveikis yra D > B > A; dispersinės analizės rezultatai rodo, kad D faktorius (virimo laikas) yra statistiškai reikšmingas (P < 0.05), ir pasirinktas D3 lygis; A faktorius (vandens pridėjimas) ir B faktorius (virimo laikas) nėra statistiškai reikšmingi (P > 0,05). Atsižvelgiant į tai, kad šio preparato vaistinių medžiagų vandens absorbcijos greitis yra gana didelis (155 %), o kartu su tokiais veiksniais kaip faktiniai gamybos poreikiai, optimalios ekstrahavimo sąlygos parenkamos kaip A2B1D3, tai yra, įpilant 10 kartų vandens, išvirinant. 3 kartus, kiekvieną kartą po 1 val.