Įvairių C. Deserticola ekstrahavimo dalių nuo vidurių užkietėjimo žiurkės modelio valymo funkcijos

SANTRAUKATIKSLAS Ištirti įvairių ekstrahuotų C. deserticola dalių laisvinamąjį poveikį. METODAI Imodium vidurių užkietėjimo žiurkės modelis buvo sukurtas siekiant stebėti tuštinimąsi ir nustatyti virškinimo trakto hormonus bei neurotransmiterius ir kt. REZULTATAI Skirtingos išskirtos C. deserticola dalys turėjo skatinti žiurkių išskyrimą su vidurių užkietėjimu. Palyginti su modelių grupe, oligosacharidinės dalies SS, AchE, SP ir MTL turėjo tendenciją didėti, o oligosacharidinės dalies 5-HT, VIP ir NT reikšmingai padidėjo (P<0. 05 or P<0. 01), AQP3 significantly reduced (P<0. 01), which suggested that the oligosaccharide part had obvious therapeutic effects. The remaining parts showed no significant difference. Oligosaccharide was an ef-the festive working part of C. deserticola. CONCLUSION The oligosaccharide of C. deserticola has good purging effects, and can effectively treat constipation, which provides the scientific basis for pharmaceutical development.

PAGRINDINIAI ŽODŽIAI:C. deserticola; valymas; virškinimo trakto hormonai; neurotransmiteriai; oligosacharidai

Cistanche deserticola yra sausas, žvynuotas, mėsingas Orobaceae augalo Cistanche deserticola arba vamzdinės gėlės Cistanche deserticola stiebas. Jis žinomas kaip „dykumos ženšenis“ ir atlieka tokias funkcijas kaip žarnyno drėkinimas, tuštinimosi skatinimas, inkstų tonizavimas ir yang stiprinimas. Cistanche deserticola pasižymi raminamuoju ir vidurius laisvinamuoju poveikiu ir tinka vidurių užkietėjimui gydyti silpno kūno žmonėms. Šiuo metu yra daug pranešimų apie Cistanche deserticola tuštinimosi poveikį, tačiau yra nedidelis skirtingų ekstrahavimo dalių tuštinimosi poveikio skirtumų palyginimas. Mūsų tyrimų grupė anksčiau ištyrė Cistanche deserticola tuštinimosi poveikį vidurių užkietėjimui žiurkėms ir normalioms žiurkėms. Siekdama nustatyti jo veiksmingas dalis, mūsų tyrimų grupė toliau tyrė skirtingų Cistanche deserticola ekstraktų tuštinimosi poveikio skirtumus užkietėjusioms žiurkėms, suteikdama mokslinį pagrindą naujų vaistų kūrimui.

Dykumos ženšenis

Spustelėkite čia norėdami pamatyti Cistanche produktus

【Klauskite daugiau】 El. paštas:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1 Medžiaga

1.1 Bandomasis vaistas

Cistanche deserticola buvo nupirkta iš Inner Mongolia Wangyedi Co., Ltd., o profesorius Zhai Yanjun iš Liaoningo tradicinės kinų medicinos universiteto identifikavo kaip sausą, žvynuotą, mėsingą kinų medicinos šeimos augalo Cistanche deserticola YCMa stiebą.; Loperamido hidrochlorido kapsulės (prekinis pavadinimas: Yimengting, partijos numeris: 150413966, Xi'an Janssen Pharmaceutical Co., Ltd.); Tongbianling kapsulės (partijos numeris 12090202, Jinan Limeng Pharmaceutical Co., Ltd.); Aktyvuota anglis (partijos numeris 20040602, Liyang Zhuxi Activated Carbon Co., Ltd.); Substance P (SP) rinkinys (partijos numeris: BPE30328), somatostatino (SS) rinkinys (partijos numeris: BPE30378), motilino (MTL) rinkinys (partijos numeris: BPE30376), acetilcholinesterazės (AchE) rinkinys (partijos numeris: BPE30063), Vasoactive žarnyno peptido (VIP) tyrimo rinkinys (partijos numeris BPE31682), 5-hidroksitriptamino (5-HT) tyrimo rinkinys (partijos numeris BPE30326), akvaporino 3 (AQP3) tyrimo rinkinys (partijos numeris BPE30361), neurotenzinas ( NT) bandymo rinkinys (partijos numeris BPE30823), viską pateikė Shanghai Langton Biotechnology Co., Ltd; Likę reagentai yra analitiškai gryni.

Supermeno žolelių cistanche

1.2 Priemonė 

Enzyme Labeling Instrument (Thermo Fisher Scientific, JAV); TGL{0}}C stalinė centrifuga (Shanghai Anting Scientific Instrument Factory); Elektroninės svarstyklės (Shanghai Yousheng Weighing Instrument Co., Ltd.); Vortex maišytuvas (Šanchajaus Qingpu Huxi instrumentų gamykla); Pastovios temperatūros ir drėgmės dėžutė (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.).

1.3 Gyvūnas

SD žiurkės, kurių kūno svoris 180-220g, SPF klasės, pateikė Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd., licencijos numeris SCXK (Liao) 2015-0001.

2 Metodai

2.1 Įvairių ekstrahuotų Cistanche deserticola dalių paruošimas

Cistanche deserticola griežinėlis

Paimkite atitinkamą kiekį Cistanche deserticola nuoviro gabalėlių, įpilkite 8 kartus didesnį vandens kiekį, pakaitinkite ir virkite su grįžtamu šaldytuvu, kad ištrauktumėte 3 kartus, kiekvieną kartą po 1 valandą. Sumaišykite filtratą, sumažinkite slėgį ir koncentruokite iki santykinio tankio 1,15 (matuojant 50 laipsnių temperatūroje), įpilkite 95 procentų etanolio iki 60 procentų alkoholio, nusodinkite žemoje temperatūroje 12 valandų, filtruokite ir nusodinkite į bendrą polisacharidų ekstrahavimo vietą. ; Paimkite skystį, gautą iš vakuuminės koncentracijos, išvalykite makroporine derva, nuplaukite vandeniu, surinkite vandens plovimo tirpalą ir išgarinkite iki sausumo, kad gautumėte bendrą oligosacharidų frakciją; Tada eliuuojama 40 % etanoliu, surenkamas 40 % etanolio eliuentas, koncentruojamas sumažintame slėgyje ir išdžiovinamas, kad gautųsi visi glikozidai. Kiekvieną ištrauktą dalį ištirpinkite vandenyje ir atidėkite.

Cistanche deserticola eksperimentas

2.2 Grupavimas

Po vienos savaitės adaptyvaus šėrimo SD žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į 6 grupes su 8 žiurkėmis kiekvienoje grupėje, įskaitant normalią kontrolinę grupę, modelio grupę, teigiamų vaistų kontrolinę grupę, bendrą polisacharidų grupę, bendrą oligosacharidų grupę ir bendrą saponino grupę. Buvo paimtos normalios žiurkės. Išskyrus normalią kontrolinę grupę, kiekvienai žiurkių grupei tris dienas iš eilės buvo duodama 30mg · kg-1 loperamido hidrochlorido kapsulės (prekinis pavadinimas: Yimengting), kad būtų atkartotas vidurių užkietėjimo modelis. Po sėkmingo modeliavimo, išskyrus normalią kontrolinę ir modelio grupę, visų kitų grupių žiurkėms 9 dienas buvo nepertraukiamai maitinama 1 ml/100 g doze, o 2,74 g · kg-1 koncentracija atitinka tiriamąjį mėginį. . Įprastos kontrolinės grupės ir modelio grupės buvo maitinamos tokiu pat kiekiu fiziologinio tirpalo.

Cistanche deserticola griežinėlis

2.3 Stebėjimo rodikliai

2.3.1 Žiurkių tuštinimosi būklė

Po paskutinės injekcijos žiurkės nevalgė 12 valandų ir negalėjo atsigerti. Kiekvienai grupei buvo duota 20 procentų aktyvuotos anglies per zondą 25 ml · kg -1 greičiu. Žiurkės buvo patalpintos į metabolinį narvą ir buvo stebimas per 6 valandas pasišalinusių juodų išmatų dalelių skaičius ir svoris.

2.3.2. Įvairių rodiklių ekspresijos lygiai žiurkių serume, plazmoje ir storosios žarnos audiniuose

Baigusios stebėjimą, visos žiurkės toliau badavo 6 valandas ir negalėjo negirdėti. Iš visos pilvo aortos buvo paimta apie 5 ml kraujo ir patalpinta į du EP mėgintuvėlius, iš kurių į vieną iš anksto įpilta 50 μl heparino. Plazmai surinkti, o kitą – serumui. Pastovėję 30 minučių, centrifuguokite 2500r · min-1 5 minutes, serumą ir plazmą surinkite atskirai, paimkite supernatantą tyrimui ir laikykite -70 laipsnio temperatūroje žemoje temperatūroje. Gaubtinės žarnos audinys 2 cm po aklinos vožtuvo pašalinimo buvo išpjaustytas. Turinys plaunamas fiziologiniu fiziologiniu tirpalu, išdžiovinamas filtravimo popieriumi ir pridedamas atitinkamas kiekis PBS (pH 7,4). Centrifuguokite 4 laipsniais 3500r · min{13}} 15 min., o supernatantas paimtas tyrimui. Supernatantas buvo laikomas -70 laipsnių temperatūroje žemoje temperatūroje. Paimkite serumo, plazmos ir storosios žarnos audinių supernatantą pagal rinkinio instrukcijas ir naudokite SS, AchE, SP, MTL, 5-HT, VIP, NT ir AQP3.

2.4 Duomenų apdorojimas

Dispersijos analizei buvo naudojama SPSS 17.{1}} statistinė programinė įranga, o visi duomenys buvo išreikšti 珚 x ± s. t testas buvo atliktas siekiant nustatyti skirtumus tarp grupių, o P<0.05 was considered significant and statistically significant.

3 rezultatai

3.1. Poveikis žiurkių, sergančių vidurių užkietėjimu, defekacijai

Palyginti su normalia kontroline grupe, modelio grupės žiurkių išmatų dalelės ir svoris mažėjo. Palyginti su modelio grupe, Cistanche deserticola grupės parodė tendenciją didinti žiurkių išmatų dalelių skaičių ir išmatų svorį. Bendra Cistanche deserticola oligosacharidų grupė parodė didesnę tendenciją nei kitos gydymo grupės, tačiau statistinio reikšmingumo nebuvo, o tai rodo, kad visa oligosacharidų grupė turėjo reikšmingą gydomąjį poveikį ir buvo veiksminga veikimo vieta. Rezultatai pateikti 1 lentelėje.

1 skirtukas Tiriamųjų mėginių poveikis užkietėjusių žiurkių išmatų atliekų skaičiui ir svoriui (士s,n=8)

3.2. Poveikis SS, NT ir AchE lygiams serume žiurkėms, kurių vidurių užkietėjimas

Iš 2 lentelės rezultatų matyti, kad, palyginti su normalia kontroline grupe, modelio grupės žiurkėms SS ir NT buvo žymiai sumažintas (P<0.01), and AchE showed a downward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the NT of rats in each treatment group was significantly increased (P<0.05), while SS and AchE showed an increasing trend. Among them, the total oligosaccharide group showed a significant increase, indicating that the total oligosaccharide had a significant therapeutic effect and was an effective site of action for Cistanche deserticola.

3.3 Poveikis plazmos SP ir MTL lygiams vidurių užkietėjimo modelio žiurkėms

Iš 3 lentelės rezultatų matyti, kad lyginant su normalia kontroline grupe, modelio grupės žiurkių SP ir MTL buvo žymiai sumažėję (P<0.05 or P<0.01), indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the SP and MTL of rats in each treatment group showed an increasing trend. Among them, the SP of rats in the total oligosaccharide group was significantly increased compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and the MTL showed an increasing trend, but there was no statistical difference, indicating that the total oligosaccharide group had a significant therapeutic effect and was an effective part of Cistanche deserticola.

2 skirtukas Tiriamųjų mėginių poveikis SS, NT ir AchE žiurkių, kurių vidurių užkietėjimas, serume (士s,n=8)

Pastaba: Palyginti su įprasta kontroline grupe, aP<0.05, bP<0.01; Compared with the model group, cP<0.05, dP<0.01; Compared with the total oligosaccharide group, eP<0.05, fP<0.01 (the same in the following table)

3.4 Poveikis AQP3, 5-HT, VIP turiniui vidurių užkietėjimo modelio žiurkių gaubtinės žarnos audiniuose

Palyginti su normalia kontroline grupe, modelio grupės žiurkių 5-HT ir VIP buvo žymiai mažesni (P<0.05 or P<0.01), and AQP3 showed an upward trend, indicating that the constipation model was successfully established. Compared with the model group, the 5-HT, and VIP of the total oligosaccharide group rats were significantly increased (P<0.05 or P<0.01), while AQP3 was significantly reduced (P<0.01). The AQP3 and 5-HT of the total oligosaccharide group rats showed significant differences compared to the other treatment groups (P<0.05 or P<0.01), and VIP showed an upward trend, but there was no statistical difference, It indicates that the total oligosaccharide group has significant therapeutic effects and is the effective site of action for Cistanche deserticola (Table 4).

3 skirtukas Tiriamųjų mėginių poveikis SP ir MTL vidurių užkietėjusių žiurkių plazmoje (士s,n=8)

4. Diskusija

Vidurių užkietėjimas yra dažna klinikinė liga, glaudžiai susijusi su virškinimo trakto motorika. MTL ir SP yra sužadinamieji peptidai, turintys virškinimo trakto motoriką reguliuojančias funkcijas, kurie gali skatinti virškinimo trakto motoriką. NT yra nerviniame audinyje, distalinėje klubinėje žarnoje ir tuščiojoje žarnoje ir atlieka gaubtinės žarnos judrumo didinimo funkciją. SS egzistuoja žarnyno nervų rezginyje ir kasos bei skrandžio D ląstelėse, kurios gali slopinti virškinamojo trakto peristaltiką, pailginti storosios ir plonosios žarnos tranzito laiką [6], slopinti VIP ir kitų virškinimo trakto hormonų sekreciją. 5-HT yra svarbus enterinės nervų sistemos neuromediatorius, galintis skatinti sekreciją ir žarnyno peristaltiką. AQP3 yra virškinamojo trakto epitelio ląstelėse ir atlieka svarbų vaidmenį įsisavinant vandenį. Šis eksperimentas turi gydomąjį poveikį vidurių užkietėjimui reguliuodamas šiuos virškinimo trakto hormonus ir žarnyno neurotransmiterius.

Ekstrahavimo vieta skatina vidurių užkietėjimo žiurkių išsiskyrimą. Palyginti su modelių grupe, visos oligosacharidų grupės SS, AchE, SP ir MTL didėjo, o 5-HT, VIP ir NT žymiai padidėjo (P<0.05 or P<0.01), and a significant decrease in AQP3 (P<0.01), indicating that the total oligosaccharide group has a significant therapeutic effect, There was no significant difference between the other groups, and total oligosaccharides were the effective active sites of Cistanche deserticola. The total oligosaccharides of Cistanche deserticola have good moisturizing and defecating effects, which can effectively treat constipation. It is hoped that this result will provide a scientific basis for the development of new drugs.

4 skirtukas AQP3, 5-HT ir VIP poveikis žiurkių gaubtinės žarnos audiniams (士s,n=8)

nuoroda:

[1] Kinijos farmakopėja. 1 dalis [S]. 2010: 126

[2] Zhong Ping. Dykumos ženšenis ir Cistanche [J]. Miškas ir žmogus, 2004, 24 (11): 25

[3] Tu Pengfei, Jiang Yong, Guo Yuhai ir kt. Cistanche deserticola ir jos pramonės plėtros tyrimai [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (12): 882-886

[4] Wu Feng, Zhao Xi, Xue Hua ir kt. Aloe vera Lingzhi kapsulių poveikis žarnynui drėkinti ir vidurių užkietėjimui malšinti [J]. Transporto medicinos žurnalas, 2008, 22 (4): 338

[5] Foxx OA, Camilleri M, Ste PD ir kt. Somatostatino ir alavo analogo poveikis sveikų žmonių skrandžio motorinėms ir jutimo funkcijoms [J]. Gut, 2003, 52: 1555-1561.

[6] Park JH, Rhee PL, Kim G ir kt. Enteroendokrininių ląstelių skaičius koreliuoja su padidėjusiu visceraliniu jautrumu pacientams, kuriems vyrauja dirgliosios žarnos sindromas [J]. Neurogastro-enterol Motil, 2006, 18(7): 539-546.

[7]Brancati SB, Zadori ZS, Nemeth J ir kt. Medžiaga P skatina skrandžio gleivinės apsaugą supraspinaliniu lygmeniu, padidindama endomorfino -2 kiekį žiurkėms[J]. Brain Res Bull, 2013, 91(2):38-45.

[8] Fukuda A, Goto T, Kuroishi KN ir kt. Hemokininas{1}}konkurenciškai slopina medžiagos P sukeltą os-teoklastų susidarymo ir funkcijos stimuliavimą[J]. Neuropeptidai, 2013, 47 (4):251-259.

[9] Layer PK, Laczinski J, Salfelder A ir kt. Vystomos cholinesterazės: AChEasa ugniasienė slopina ląstelių dauginimąsi ir palaiko diferenciaciją [J]. Chem Biol Interact, 2013, 203(1):227-269.