Ekstrahavimo technologijos optimizavimo ir polisacharidų antioksidacinės veiklos iš Yunnan Coffea Arabica gėlių tyrimas
Nov 09, 2022
Anotacija: optimizuoti gavybos technologiją ir ištirtiantioksidantasveiklapolisacharidaiIš kavos žiedo (AKP), ultragarso temperatūra, ultragarso laikas, skysčio ir kietos medžiagos santykis, ultragarso galia, mėginio panardinimo laikas ir etanolio tūrio procentas buvo tiriami naudojant polisacharidų ekstrahavimo išeigą kaip indikatorių. Tada daugiausia įtakos turėjo ultragarso temperatūra, ultragarso laikas ir ultragarso galia, o ekstrahavimo technologija optimizuota atsako paviršiaus metodu.AntioksidantasACP aktyvumas buvo tiriamas naudojant DPPH· ir ABTS plius · valymo efektus ir FRAP tyrimus. Rezultatai parodė, kad ultragarso ekstrahavimo optimalios technologinės sąlygos buvo: Ultragarso temperatūra 69,5 laipsnio, ultragarso laikas 93 min., ultragarso galia 175 W, skysčio ir kietos medžiagos santykis 10:1 mL/g, mėginio panardinimo laikas 3{{ 17}} min, o etanolio tūrio procentas 80 proc. Polisacharidų išeiga buvo 2,292 proc. Rezultatai parodė, kad IC50 vertė, pagrįsta ACP DPPH· sugeriančiu poveikiu, buvo 3,844 mg·mL−1, o ABTS plius · valymo aktyvumas buvo 0,921 mmol Trolox/g ACP. ACP FRAP reikšmės pagal FRAP tyrimą buvo 0,0565 mmol Fe2 plius /g ACP, o tai parodė, kad ACP silpnumasantioksidantasveikla. Šis tyrimas suteiktų teorinį pagrindą visapusiškam šalutinių kavos produktų panaudojimui ir vystymui.
Raktiniai žodžiai:kavos gėlės;polisacharidas;ekstrahavimas;antioksidacinis aktyvumas

Kavayra Rubiaceae (Coffea) genties augalas, daugiausia paplitęs tokiose šalyse kaip Pietų Amerika, Centrinė Amerika, Afrika ir Azija, auginamas daugiau nei 80 pasaulio šalių [1]. Pasak „Chinese Materia Medica“, kava pasižymi gaivinančiu, diuretikų ir skrandį skatinančiu poveikiu, ji daugiausia naudojama nuo protinio nuovargio ir apetito praradimo. Jis dažnai naudojamas kaip gaivinantis, diuretikas ir skrandį mažinantis vaistas. Šiuolaikiniai tyrimai parodė, kad kavoje yra įvairių veikliųjų medžiagų, tokių kaip alkaloidai, fenolio rūgštys, flavonoidai ir terpenai, kurie turi įvairių farmakologinių savybių, tokių kaip kepenų apsauga, neuroprotekcija,antioksidantas, ir vaistai nuo diabeto [2-3]. mano šalieskavosauginant vyrauja smulkiagrūdė kava, o daugiau nei 99 procentai jos platinama Junane. Yunnan smulkiagrūdėje kavoje gausu medžiagų, be kofeino, chlorogeno rūgšties, trigonelino ir kitų komponentų, joje taip pat yra askarozidų.
I~II[4], panikulozidas VI[4], kofarilozidas I[4], villanovanas I[4], kaferolidai A~H[5], kafruenolis AB[6], kafruonai AD[6] ir kafruolidas AB[7]. ir kai kurie nauji terpenoidai. Tarp jų buvo patvirtinta, kad kafarolidai C, D ir F turi tam tikrą trombocitų agregaciją aktyvinantį aktyvumą in vitro [5]; caffruenol AB ir caffruolide AB slopina lipopolisacharidų sukeltą NO gamybą 264,7 makrofaguose [7]. Nuodugniai tyrinėjant kavą, kavos pridėtinė vertė ir toliau didėja. Pastaraisiais metais kavos šalutiniuose produktuose gausu fenolio rūgščių, flavonoidų, terpenų, alkaloidų ir kitų biologinių
Veikliosios medžiagos, kurios gali būti naudojamos kaip natūralūs ir tvarūs aktyvių ingredientų šaltiniai, pvzantioksidantai, kepenų apsauga ir nervų apsauga, tyrėjams vis labiau rūpinosi kavos šalutinių produktų tyrimais [8–10]. Campa ir kt. pranešė, kad kavos lapuose yra fenolio junginių [11]; Chen apžvelgė kavos lapuose esančias turtingas alkaloidų, flavonoidų, fenolio rūgščių, terpenų ir kt. chemines sudedamąsias dalis ir jų farmakologinę veiklą, pavyzdžiui, antioksidacinį, priešuždegiminį ir antibakterinį poveikį. [12], ir ištyrė kavos lapų apdorojimo metodų ir lapų amžiaus poveikį jų cheminei sudėčiai ir aktyvumui [13].
Be to, Fu Xiaoping ir kt. [14–15] nustatė, kad neapdorotas Yunnan mažos kavos žievelės ekstraktas turi tam tikrą apsauginį ir atkuriamąjį poveikį pažeistoms žmogaus bambos venų endotelio ląstelėms, taip pat turi potencialą.antioksidantaspoveikį, ir nustatė, kad pagrindinė gėlė Cianidinai yra cianidino-3-gliukozidas ir cianidino-3-rutinozidas.

Kavos žiedai dažnai išmetami kaip pagrindinis kavos auginimo pramonės šalutinis produktas. Tačiau atlikti tyrimai parodė, kad kavos žieduose gausu cheminių komponentų. Stašenko ir kt. [16] naudojo GC-MS, kad ištirtų lakiuosius ir pusiau lakiuosius komponentus mažose kavos žieduose, o rezultatai nustatė iš viso 150 junginių, kuriuose yra n-pentadekano. Aukščiausias, po kurio seka geraniolis. Be to, Nguyen ir kt. [17] ištyrė kavos gėlių veikliąsias medžiagas ir nustatė, kad kavos žieduose yra daug fenolinių junginių, todėl kavos žiedai gali būti naudojami kaip žaliava natūraliai gauti.antioksidantasveikliosios medžiagos. Be to, kavos žieduose taip pat yra kofeino ir trigonelino. Kofeinas yra susijęs su sumažėjusia neurodegeneracinių ligų rizika [18–19]
Trigonelinas gali užkirsti kelią diabetui ir inkstų pažeidimams, taip pat turi įtakos neurodegeneracinių ligų gydymui [20-21]. Pinheiro ir kt. [22] išanalizavo keturių aktyvių komponentų trigonelino, chlorogeno rūgšties, galo rūgšties ir kofeino kiekį kavos žieduose skirtingais džiovinimo ir ekstrahavimo metodais naudojant HPLC, tarp kurių didžiausias buvo kofeino ir trigonelino kiekis; Antioksidacinis aktyvumas buvo įvertintas ABTS ir DPPH eksperimentais, kurie patvirtino, kad kavos gėlė turi antioksidacinį aktyvumą ir gali būti naudojama kaip potenciali žaliava gaminant arbatos gėrimus. Šiuo metu yra nedaug tyrimų ataskaitų apie kavos gėles, tačiau iš esamų ataskaitų matyti, kad kavos gėlės turi plačias taikymo perspektyvas kaip potencialus bioaktyvių junginių šaltinis.
Polisacharidaiyra stambiamolekuliniai junginiai, sudaryti iš daugiau nei 10 monosacharidų, sujungtų glikozidinėmis jungtimis, ir yra plačiai randami gyvūnuose, augaluose ir mikroorganizmuose. Polisacharidai yra struktūriškai sudėtingi, turintys skirtingą konformaciją ir santykinę molekulinę masę, taip pat antrines grandininių ir tarpgrandinių vandenilinių jungčių struktūras. Šiuolaikiniai tyrimai parodė, kad polisacharidai turi farmakologinį aktyvumą, pavyzdžiui, antioksidacinį [23-24], senėjimą stabdantį [25], imuninį reguliavimą [26], priešuždegiminį [27] ir priešnavikinį poveikį [28]. Biologinis polisacharidų aktyvumas yra susijęs su jų grynumu, chemine struktūra, tirpumu ir kt. Pastaraisiais metais biologinis polisacharidų aktyvumas tapo natūralių vaistų tyrimų tašku, taip pat yra kanalas ieškant naujų vaistų ir kuriant funkcinį maistą. . Todėl polisacharidai atlieka svarbų vaidmenį medicinos ir maisto srityje. mano šalies Yunnan yra pagrindinė kavos sodinimo sritis, o kavos gėlės turi potencialią vystymosi vertę, tačiau yra mažai tyrimų apie Yunnan kavos gėlių vystymąsi, o galima kavos gėlių vertė nebuvo išnaudota. Todėl šiame darbe Yunnan smulkių grūdų kavos gėlės yra tyrimo objektas, siekiant atlikti aktyvių polisacharidų tyrimus, siekiant giliai ištirti visapusišką Yunnan smulkiagrūdžio kavos panaudojimo vertę.
Šiame dokumente,polisacharidasderlius buvo naudojamas kaip vertinimo indeksas, siekiant optimizuoti polisacharidų ekstrahavimo procesą ir kavos gėlių, surinktų iš Baoshan miesto, Yunnan provincijos, antioksidacinį pajėgumą, siekiant pateikti pagrindinius duomenis tolesniam biologiškai aktyvių polisacharidų vystymui. Ir pateikite nuorodą, kaip tirti Yunnan smulkių grūdų kavą ir pagerinti jos pridėtinę vertę.
1 Medžiagos ir metodai
1.1 Medžiagos ir instrumentai
Kavagėlė Baoshan City, Yunnan provincija; Bevandenis alkoholis Tianjin Chemical Reagent Co., Ltd.; Antrono grynumas 98.0 proc., Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; koncentruota sieros rūgštis, druskos rūgštis Chongqing Chuandong Chemical Co., Ltd.; 1,1-difenil-2- trinitrofenilhidrazinas (DPPH), 2,2'-diaza-bis-3-etilbenzotiazolinas{{10}}sulfonrūgštis (ABTS), 2, 4,6-Tripiridiltriazinas (TPTZ), rutino grynumas 98.0 proc., Shanghai Ruiyong Biotechnology Co., Ltd.; vandenyje tirpaus vitamino E grynumas 98,0 proc., Hefei Bomei Biotechnology Co., Ltd.; geležies chlorido heksahidratas analitiškai grynas, vakarietiškas
„Long Science Co., Ltd.“; Analitinės klasės kalio persulfatas, Tianjin Damao cheminių reagentų gamykla; PBS buferis, natrio acetato buferis Xiamen Haibiao Technology Co., Ltd.

Spustelėkite čia norėdami sužinoti daugiau apie Rich inpolisacharidas
Cistanche tirpios kavos produktas
FA2104N elektroninis balansas, 722-spektrofotometras Shanghai Qinghua Technology Co., Ltd.; KQ-250DB ultragarsinis instrumentas, SHZ-D (Ⅲ) cirkuliacinis vandens vakuuminis siurblys Gongyi Yuhua Instrument Co., Ltd.; Xuman 1000Y daugiafunkcinis malūnėlis Yongkang City Boou Hardware Products Co., Ltd.; 800 Electric Centrifuge Jintan Fuhua Instrument Co., Ltd.; VFD-3000 Vakuuminis šaldymo džiovintuvas Beijing Bo Yikang Experimental Instrument Co., Ltd.
1.2 Eksperimentinis metodas
1.2.1 Kavos gėlių ištraukimaspolisacharidaiŽr. Zheng Tingting ir kt. metodą. [29] su pakeitimais. Kavos gėlės, surinktos iš Baošano miesto, Junanio provincijoje, buvo džiovinamos pavėsyje kambario temperatūroje, susmulkinamos pulverizatoriumi ir pertrinamos per 80-tinklelio sietelį. Pasverkite 2.0 g kavos gėlių miltelių, įpilkite 20,0 ml gryno vandens, pamirkykite 30 min.,
Ultragarsinis 100 W 30 min 40 laipsnių temperatūroje, atšaldomas iki kambario temperatūros, o filtratas išlaikomas po vakuuminio filtravimo. Į filtratą įpilama etanolio iki 80 procentų koncentracijos nusodinimui ir leista nusistovėti 12 valandų. Po centrifugavimo 10 minučių 4000 aps
Paruoškite 5 mg·mL−1 kavos žiedų polisacharido tirpalo ir atidėkite.
1.2.2 Polisacharidų standartinės kreivės paruošimas ir polisacharidų kiekio kavos žieduose nustatymas Gliukozės standartinė kreivė buvo nubrėžta remiantis antrono-sieros rūgšties metodu [30]. Paruoškite 0.0, 25.{{10}}, 50.0, 100.{{23} }, 150,0 ir 200,0 ug/mL gliukozės standartiniai tirpalai atitinkamai. Tiksliai pipete įpilkite 1,00 mL aukščiau nurodyto skirtingos koncentracijos gliukozės standartinio tirpalo, įpilkite 1,00 mL gryno vandens ir įdėkite į 25 mL užkimštą mėgintuvėlį. Įpilkite 5,0 ml 2,1 mg·mL-1 antrono-sieros rūgšties tirpalo, gerai suplakite, atvėsinkite ledo vandens vonelėje, kaitinkite verdančio vandens vonioje 7 minutes ir greitai atvėsinkite iki kambario temperatūros ledo vandens vonioje. Naudojant dejonizuotą vandenį kaip tuščią kontrolę,
Absorbcija A buvo matuojama kolorimetriškai esant 625 nm. Bevandenės gliukozės kiekį imant abscisėmis (0.0, 25.0, 50.0, 1{{1{{12} ( R2=0.9970) (kur: Y yra absorbcijos vertė, X yra gliukozės kiekis, ug).
Tiksliai pipete įpilkite tam tikrą 5 mg/mL kavos žiedų polisacharido tirpalo, paruošto aukščiau, tūrį į 25 ml mėgintuvėlį su kamščiu ir įpilkite gryno vandens, kad praskiestumėte iki 2.00 ml. Įpilkite 50 mL 2,1 mg·mL−1 antrono-sieros rūgšties tirpalo, gerai suplakite, atvėsinkite ledo vandens vonelėje, pakaitinkite verdančio vandens vonioje 7 minutes ir greitai atvėsinkite iki kambario temperatūros ledinio vandens vonia. Absorbcija A buvo matuojama kolorimetriškai esant 625 nm, naudojant dejonizuotą vandenį kaip tuščią kontrolę. Kavos gėlių polisacharido išeiga buvo apskaičiuota pagal gliukozės standartinės kreivės lygtį ir kiekvienas mėginys buvo pakartotas 3 kartus. Rezultatai buvo išreikšti kaip vidutinė vertė, o skaičiavimo formulė buvo tokia:
Kavos žiedų polisacharido derlius (proc.) =X×m1×10–35×V×ms×100
Formulėje: X yra polisacharidų kiekis kavos žiedų polisacharido tirpalo V tūryje, ug; V – išmatuotas polisacharido tirpalo tūris, ml; 5 yra paruošto kavos žiedų polisacharido tirpalo koncentracija, 5 mg·mL−1; m1 – liofilizuotos kavos žiedas Bendra polisacharido masė, g; ms yra kavos gėlių mėginio masė, g.
1.2.3 Vieno veiksnio eksperimentas
Kavos gėlių polisacharido ekstrahavimo ultragarsu procese svarbūs veiksniai, turintys įtakos polisacharido derliui, daugiausia yra ultragarso temperatūra, ultragarso laikas, skysčio ir medžiagos santykis, ultragarso galia, mirkymo laikas ir alkoholio kritulių koncentracija. Buvo pasirinkti penki ultragarso temperatūros lygiai: 40, 50, 60, 70 ir 80 laipsnių; buvo pasirinkti penki ultragarsinio laiko lygiai: 30, 60, 90, 120 ir 150 min.; : 1, 30: 1 ml/g penki lygiai; ultragarso galia parenka penkis lygius 100, 125, 150, 175, 200 W; panardinimo laikas pasirenka penkis lygius 30, 60, 90, 120, 150 min; etanolio koncentracija parenkami penki lygiai 75 procentai , 80 procentai , 85 procentai , 90 procentai , 95 procentai penki lygiai, vieno faktoriaus eksperimentas. Filtruojant pagal vieną iš parametrų
, kiti veiksniai yra: ultragarso temperatūra 40 laipsnių, ultragarso laikas 30 min.
Skysčio ir medžiagos santykis 10:1 ml/g, ultragarso galia 100 W, mirkymo laikas 30 min.
ir alkoholio nuosėdų koncentracija 80 proc .
1.2.4 Atsako paviršiaus optimizavimo eksperimentas Pagal Box-Benhnken eksperimentinio projektavimo principą, kai atsako kintamuoju yra kavos žiedų polisacharido derlius, iš vieno faktoriaus buvo atrinkti trys veiksniai, turintys didžiausią įtaką kavos žiedų polisacharido derliui. bandymo rezultatai, kaip parodyta 1 lentelėje. Ultragarso temperatūros optimizavimas naudojant kavos žiedų polisacharido derlių kaip indekso laipsnį, ultragarso laiką ir ultragarso galią.
1.2.5 Antioksidacinių savybių testas
1.2.5.1 DPPH laisvųjų radikalų šalinimo eksperimentai DPPH laisvųjų radikalų šalinimo eksperimentai buvo atlikti, kaip aprašyta nuorodoje. [31]. Paimkite 3,9 mL 0.075 mmol/L DPPH reakcijos tirpalo ir sumaišykite su 100 μL skirtingų koncentracijų polisacharidų tirpalų. Reakcija buvo vykdoma kambario temperatūroje 30 minučių tamsoje, o absorbcijos vertės buvo išmatuotos esant 515 nm. Naudojant rutiną kaip teigiamą kontrolę, DPPH laisvųjų radikalų pašalinimo greitis buvo apskaičiuotas taip: I procentas =[(A0–As)/A0] × 100 (kur : As yra mėginio tirpalo absorbcija; A0 yra tirpalo be mėginio absorbcija), o antioksidacinis aktyvumas išreiškiamas 50 procentų slopinimo greičiu (IC50).
1.2.5.2 ABTS ir laisvųjų radikalų šalinimo eksperimentas
ABTS plius radikalų šalinimo eksperimentai buvo atlikti naudojant metodą, aprašytą nuorodoje. [32]. Paimkite 2 ml polisacharido tirpalo ir atitinkamai įpilkite į 2 ml ABTS ir laisvųjų radikalų tirpalo, po tolygiai sumaišę, reaguokite kambario temperatūroje 6 minutes ir išmatuokite UV sugertį ties 734 nm, o rutinas yra teigiama kontrolė. ABTS ir laisvųjų radikalų pašalinimo gebėjimo skaičiavimo formulė yra tokia: I( procentai )=[(A0–As)/A0]×10{ {12}} (kur As yra mėginio tirpalo absorbcija; A0 yra tirpalo be mėginio absorbcija) Standartinė kreivė nustatoma matuojant skirtingų koncentracijų Trolox etaloninių tirpalų brėžinį (I procentas =0.0247C) −0,0046, R2=0.9937), ABTS anti-
Oksidacinis aktyvumas išreiškiamas mmol Trolox/g.
1.2.5.3 FRAP metodas
Metodas, aprašytas nuorodoje. [33] buvo naudojamas FRAP antioksidaciniam pajėgumui nustatyti. Paimkite 5.0 ml TPTZ, 50 ml 20 mmol/L FeCl3 ir 50 ml natrio acetato buferinio tirpalo (300
mmol/L, pH 3,6) FRAP darbiniam tirpalui paruošti; 100 μL mėginio sumaišytas su 300 μL vandens ir 3,0 mL FRAP darbinio tirpalo, 30 min. patalpintas į 37 laipsnių vandens vonią; absorbcija buvo išmatuota ties 595 nm. Standartinė kreivė buvo sudaryta naudojant FeSO4 kaip standartinę medžiagą (A=0.572C0.008, R2=0.9974), o rutinas buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė pagal standartinę kreivę.
Apskaičiuokite redukcijos galią mmol FeSO4/g polisacharido.
1.3 Duomenų apdorojimas
Visi eksperimentai buvo pakartoti tris kartus ir buvo paimta vidutinė vertė. Reagavimo paviršiaus eksperimentams kurti ir analizuoti buvo naudojama DesignExpert 8.{1}}.6 programinė įranga.
2 Rezultatai ir analizė
2.1 Vieno veiksnio eksperimentiniai rezultatai
Vieno faktoriaus eksperimento rezultatai parodyti pav. Ultragarso temperatūros poveikis kavos žiedų polisacharido derliui: ultragarso temperatūra buvo 40-80 laipsnis , o polisacharido išeiga 1,0048 proc. -1.7982 procentų . 40-70 laipsnių diapazone kavos žiedų polisacharido derlius palaipsniui didėjo, kylant ultragarso temperatūrai, pasiekė maksimumą ties 70 laipsnių, o po 70 laipsnių pradėjo mažėti. Taip gali būti dėl sumažėjusio polisacharidų derliaus dėl kavos žiedų polisacharidų struktūros sunaikinimo esant aukštai temperatūrai, kas panašiai aprašyta literatūroje [29,34–35]. Apdorojimo ultragarsu temperatūra buvo pasirinkta 70 laipsnių.
Ultragarsinio laiko įtaka kavos žiedų polisacharido derliui: ultragarso laikas buvo 30-150 min., polisacharido išeiga 1,0369 proc. -1,5853 proc., polisacharido išeiga padidėjo didėjant ultragarso laikui, ir pasiekė maksimumą 90 min., , derlius pradėjo mažėti ilgėjant ultragarso trukmei. Taip yra todėl, kad trumpalaikis ultragarsinis ekstrahavimas nepadeda visiškai ištirpinti polisacharidų, o ilgalaikis ekstrahavimas ultragarsu suardys polisacharidus ir sumažins derlių, apie ką taip pat pranešama literatūroje [29, 34–35]. Todėl ultragarso apdorojimo laikas buvo pasirinktas 90 min.
Skysčių ir kietų medžiagų santykio įtaka kavos žiedų polisacharido derliui: kieto ir skysčio santykio įtaka polisacharido išeigai yra nedidelė. Polisacharido išeiga padidėjo didėjant skysčio ir kietos medžiagos santykiui ir pasiekė didžiausią 25:1 ml/g. Po 25:1 ml/g išeiga sumažėjo, padidėjus skysčio ir kietos medžiagos santykiui. Mažiau tirpiklio sukels nepakankamą polisacharido ištirpimą, todėl polisacharido išeiga bus mažesnė; daugiau tirpiklio ištirpdys polisacharidus ir apsunkins nuosėdų išsiskyrimą, o tuo pačiu metu išeiga sumažės dėl ultragarso spinduliuotės absorbcijos tirpiklio. 29,34−35] taip pat turi panašių pranešimų. Atsižvelgiant į tai, kad skysčio ir medžiagos santykis turi mažai įtakos išeigai, taupant reagentų kiekį, buvo pasirinktas skysčio ir medžiagos santykis 10:1 ml/g.

Ultragarso galios įtaka kavos žiedų polisacharido derliui: ultragarso galia pasirinkta 100-200 W, o polisacharido išeiga 1,1185 proc. -1,8583 proc. Po W derlius sumažėjo didėjant ultragarso galiai. Ultragarso galios padidėjimas gali veiksmingai sunaikinti ląsteles ir audinius, kad ištirptų polisacharidus tirpiklyje, todėl didėjanti ultragarso galia yra naudinga polisacharidų nusodinimui; tačiau didesnių ultragarso bangų suskaidymas ir šiluminis efektas taip pat padidins priemaišų tirpimą kavos žieduose. , terminis efektas sunaikins polisacharidų komponentus ir sumažės polisacharidų išeiga, kas taip pat aprašyta literatūroje [36-37]. Todėl ultragarso galia buvo pasirinkta 175 W.
Mirkymo laiko įtaka kavos žiedų polisacharido derliui: mirkymo laiko įtaka polisacharido derliui buvo nedidelė, mirkymo trukmė – 30-150 min., o polisacharido išeiga – 1,1827 proc. -1. 4609 proc. 30-90 min. intervale polisacharidų išeiga didėjo ilgėjant mirkymo laikui, o maksimumą pasiekė po 90 min. Po 90 min., ilgėjant mirkymo laikui, derlius šiek tiek sumažėjo ir buvo lygus. Mirkymo laiko pailginimas gali palengvinti polisacharidų nusodinimą ultragarso metu ir sumažinti energijos sąnaudas. Tačiau per ilgas mirkymas negali duoti didesnio derliaus, o per ilgas mirkymas taip pat sukels kitų komponentų išsiskyrimą ir turės įtakos polisacharidų išeigai. Tai panašu į aprašytą [38]. Atsižvelgiant į tai, kad mirkymo laiko įtaka nedidelė, taupant laiką pasirinktas mirkymo laikas 30 min.
Alkoholio kritulių koncentracijos įtaka kavos žiedų polisacharidų išeigai: alkoholio kritulių koncentracija turi mažai įtakos polisacharidų išeigai, alkoholio kritulių koncentracija yra 75 procentai ~95 procentai, polisacharidų išeiga yra 0,9703 procentai ~1,2806 procentai. Polisacharido išeiga didėjo didėjant etanolio koncentracijai ir pasiekė maksimumą ties 85 proc. Po 85 procentų išeiga sumažėjo, didėjant etanolio koncentracijai. Vandens ekstrahavimas ir alkoholio nusodinimas – tai alkoholyje netirpių polisacharidų panaudojimas nuosėdoms išleisti. Padidėjus pridedamo etanolio kiekiui, polisacharidas netirpsta etanolyje ir nusėda, o išeiga didėja. Kai alkoholio nusodinimo koncentracija viršija 85 procentus, polisacharidų išeiga negali būti pagerinta, tačiau reagentai yra švaistomi. Tai panašu į aprašytą [38]. Siekiant supaprastinti operaciją, šiame darbe naudojamas būdas tiesiogiai įpilti etanolio, kad būtų sureguliuota alkoholio koncentracija nusodinant. Tuo pačiu metu, kadangi 80 procentų ir 85 procentų polisacharido išeiga nedaug skiriasi, tai gali sutaupyti reagentų ir sumažinti atliekų kiekį. Todėl alkoholio kritulių koncentracija buvo pasirinkta 80 proc.
2.2 Atsako paviršiaus bandymo rezultatai
2.2.1 Atsako paviršiaus bandymo rezultatai Ultragarso temperatūra, ultragarso laikas ir ultragarso galia turi didelę įtaką. Todėl, remiantis pirmiau minėtais vieno faktoriaus eksperimentais, atsako paviršiaus metodas yra optimizuotas trims ultragarso temperatūros, ultragarso laiko ir ultragarso galios sąlygoms. Rezultatai pateikti 2 lentelėje.
Atsižvelgiant į polisacharido išeigą (Y) kaip atsako indeksą, buvo sukurtas regresijos modelis su trimis ultragarso temperatūros, ultragarso laiko ir ultragarso galios faktoriais ir gauta kvadratinės regresijos lygtis:
Y{0}.29−0.067A plius 0.{{10}}54B−0. 019C plius 0.34AB plius 0.083AC plius 0.011BC–0.40A2
−0.19B2−0.27C2
2.2.2 Dispersijos reikšmingumo testas
Bandymo rezultatai pateikti 3 lentelėje.
Remiantis dispersinės analizės rezultatais 3 lentelėje, bendras modelis buvo reikšmingas (P<0.0001), and the model reached a very significant level, indicating that the difference between different factors was significant; according to the absolute value of the linear coefficient of the regression equation, it can be seen that each factor has a significant effect on the total polysaccharide yield. The order of influence is: A>B>C, that is, ultrasonic temperature> ultrasonic time> ultrasonic power. Lack of fit item P=0.5764>0.05, tinkamų elementų testo trūkumas nėra reikšmingas, o tai rodo, kad nežinomi veiksniai turi mažai įtakos testo rezultatams, o likutinį elementą daugiausia lemia atsitiktinės klaidos, o tai rodo, kad modelio pasirinkimas yra tinkamas ir teisingas . AB įtaka buvo didelė (P<0.05), and the influence of A2, B2, and C2 was extremely significant (P<0.01). In the whole model, the adjustment coefficient R2Adj=0.9277 in the model, indicating that 92.77% of the response value changes can be carried out through the model. Explanation, the coefficient of determination R2 = 0.9684, indicating that the model is highly reliable, and the model fits well with the experiment, and this model can be used for analysis and prediction [39−42].
2.2.3 Reagavimo paviršiai ir kontūrai
Įvairių veiksnių sąveikos su kavos žiedų polisacharido derlingumu atsako paviršiaus diagrama parodyta 2 paveiksle. Ultragarso temperatūros ir ultragarso laiko sąveika parodė, kad šių dviejų sąveika buvo reikšminga; ultragarso temperatūrai nepasikeitus, kavos žiedų polisacharidų išeiga iš pradžių didėjo, o vėliau mažėjo ilgėjant ultragarso laikui; ultragarso laikui išlikus nepakitusiam, kava Gėlių polisacharido derlius iš pradžių didėjo, o po to mažėjo didėjant ultragarso temperatūrai. Iš ultragarso temperatūros ir ultragarso galios sąveikos matyti, kad kai ultragarso temperatūra yra pastovi, kavos žiedų polisacharido išeiga pirmiausia didėja, o paskui mažėja didėjant ultragarso galiai; kai ultragarso galia nesikeičia, kavos žiedų polisacharido išeiga didėja kartu su ultragarso banga. Temperatūros padidėjimas pirmiausia didėja, o vėliau mažėja. Iš ultragarso laiko ir ultragarso galios sąveikos matyti, kad kai ultragarso laikas yra pastovus, kavos gėlių polisacharido išeiga pirmiausia padidėja, o vėliau mažėja didėjant ultragarso galiai; kai ultragarso galia yra pastovi, kavos žiedų polisacharido išeiga didėja didėjant ultragarso galiai. Laiko padidėjimas pirmiausia didėja, o vėliau mažėja.
Todėl, naudojant polisacharido išeigą kaip vertinimo standartą, atsako paviršiaus metodo optimizavimo rezultatai trims ultragarso laiko, ultragarso temperatūros ir ultragarso galios sąlygoms yra: ultragarso temperatūra 69,56 laipsnio, ultragarso trukmė 92,99 min ir ultragarso galia 174,01 W. prognozuojama, kad esant tokiai sąlygai 2,290 proc. Pagal faktinę situaciją ultragarso temperatūra 69,5 laipsnio, ultragarso laikas 93.{11}} min., ultragarso galia 175 W, panardinimo laikas 30 min., skysčio ir medžiagos santykis 10: 1 mL/g ir 80 procentų etanolio koncentracija buvo parinkta 4 lygiagrečiams bandymams.
Vidutinis derlingumas buvo 2,292 proc. ±0,061 proc. Jis iš esmės yra artimas teorinei vertei, gautai atliekant testą, o tai rodo, kad prognozuojama vertė gerai sutampa su realia verte, todėl optimizuoti proceso parametrai, gauti pagal atsako paviršių šiame tyrime, yra tikslūs ir patikimi [43].
2.3 Antioksidacinio pajėgumo eksperimentiniai rezultatai
DPPH testas yra efektyvus ir jautrus augalų antioksidacinio pajėgumo įvertinimo modelis. Ištirto mėginio laisvųjų radikalų šalinimo gebėjimas yra susijęs su galimu jo protonų donorystės pajėgumu; Augalų mėginių antioksidaciniam pajėgumui įvertinti plačiai naudojamas ABTS testas, kuriuo galima tirti mėginius Lipofilinių ir hidrofilinių komponentų antioksidacinis aktyvumas FRAP metodu; natūralių produktų redukcinis gebėjimas buvo įvertintas sumažinant Fe3 plius -TPTZ iki Fe2 plius -TPTZ [44-45]. Kavos žiedų polisacharidų antioksidacinių eksperimentų rezultatai pateikti 4 lentelėje. Kavos žiedų polisacharidai turi tam tikrą antioksidacinį aktyvumą prieš DPPH laisvuosius radikalus ir ABTS plius laisvuosius radikalus, tačiau jų antioksidacinis aktyvumas yra mažesnis nei rutino.

3 Išvada
Šiame eksperimente kaip žaliava buvo naudojama Yunnan smulkiagrūdė kavos gėlėpolisacharidasYunnan smulkių grūdųkavosgėlė buvo išskirta ultragarsu. Nustatyta, kad ultragarso laikas, ultragarso temperatūra ir ultragarso galia turi svarbų poveikį kavos gėlių polisacharidų ekstrahavimui. Tada ultragarso laikas, ultragarso temperatūra ir ultragarso galia buvo optimizuoti pagal atsako paviršių, o optimalios kavos gėlių polisacharido proceso sąlygos buvo nustatytos taip: ultragarso temperatūra 69,5 laipsnio, ultragarso laikas 93 min., ultragarso galia 175 W, skysčio ir medžiagos santykis. 10:1 ml/g, mirkymo laikas buvo 30 min., o etanolio koncentracija – 80 proc. Esant tokioms sąlygoms, polisacharido išeiga buvo 2,292 proc. ± 0,061 proc. Šis metodas gali veiksmingai pagerinti kavos gėlių derliųpolisacharidas, kartu sutrumpinant ekstrahavimo laiką ir sumažinant naudojamo etanolio kiekį. Antioksidantų eksperimentų rezultatai parodė, kad kavos žiedų polisacharidai pasižymi silpnu antioksidaciniu pajėgumu. Šis tyrimas bus nuoroda į tolesnį kavos gėlių atskyrimą ir gryninimąpolisacharidasir jos veiklos bei funkcijų tyrimai, taip pat suteiks teorinį pagrindą ir paramą tolesnei kavos plėtrai ir panaudojimui.
Palaikymas:
wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950





