Kurkumino antioksidacinis poveikis 2 dalis

Prašau susisiektioscar.xiao@wecistanche.comDaugiau informacijos

Gydytose žiurkių grupėse su kurkuminu, rutinu ir kurkumino bei rutino deriniu reikšmingai nesiskyrė vidutinis MDA, GSH, GSSG, GSH/GSSG ir CAT kintamųjų poveikis. Šiuos rezultatus patvirtino mažos F vertės ir mažesni svyravimai dėl gydymo pokyčių (3 lentelė).

Buvo ryšys tarp minkštųjų audinių ir kraujo, atsižvelgiant į MDA ir CAT žymenis (4 pav.).

MDA lygis žymiai sumažėjo, palyginti su placebo grupe (DPP), pavartojus rutino ir kurkumino. Kurkumino ir rutino (DPCR) derinys turėjo didesnį teigiamą poveikį MDA lygiui, palyginti su tik rutinu (DPR), ir panašų poveikį, palyginti su vien kurkuminu (DPC). Kurkumino ir rutino (DPCR) derinys padidino CAT lygį, palyginti su vien kurkuminu (DPC) arba rutinu (DPR). Kurkumino vartojimas turėjo didesnį teigiamą poveikį nei rutino vartojimas.

Buvo reikšmingas skirtumas tarp visų penkių žiurkių grupių MDA ir CAT lygių, kai analizė buvo atlikta audinių lygiu (4 lentelė).

Dantenų audinio lygmenyje buvo reikšmingų skirtumų tarp MDA verčių, lyginant 1 grupę ir visas kitas, panašias į CAT (5 lentelė).

3. Diskusija

Šio tyrimo išvados parodė, kad kraujo ir dantenų audinių MDA lygiai ir CAT aktyvumas buvo susiję visose grupėse.

Gyvūnų modelių naudojimas periodonto tyrimuose yra būtinas žingsnis prieš pradedant klinikinius tyrimus su naujomis biomedžiagomis ir gydymo būdais. Žiurkė yra labiausiai ištirtas graužikas dėl periodonto ligųpatogenezė, nes jis yra mažas, lengvai prižiūrimas ir nebrangus, o danties dantenų struktūra yra gana panaši į tą, kuri stebima žmonėms, su negilia dantenų vagele ir jungiamojo epitelio prisitvirtinimu prie cemento. Patvirtintas kritinių žiurkių periodonto defektų chirurginis modelis, leidžiantis išbandyti naujas biomedžiagas kartu su augimo faktoriais arba mezenchiminėmis kamieninėmis ląstelėmis [29, 30]. Plačiausiai naudojamos Wistar arba Sprague-Dawley padermės, todėl mūsų tyrimuose buvo panaudota 50 patinų Wistar albinosų.

Norėdami sužinoti daugiau, spustelėkite čia

Periodonto liga yra daugiafaktorinė liga, kurią sukelia įvairios mikrobinės floros, esančios dantenų apnašoje, įvairovė. Šiuolaikinis periodonto ligų valdymas yra skirtas mažinti ant dantų prisitvirtinusių mikrobų krūvį ir atstatyti dantenų sveikatą atliekant chirurgines ir nechirurgines periodonto procedūras [31]. Įrodyta, kad kurkuminas, pagrindinis ciberžolės komponentas, turi priešuždegiminį, antimikrobinį ir antioksidacinį poveikį [32-34]. In vitro tyrimai [35, 36], tyrimai su gyvūnais [27, 37] ir klinikiniai tyrimai [38, 39] parodė, kad yra teigiamas ryšys tarp kurkumino ir periodontito vystymosi.

Epidemiologiniai tyrimai patvirtino, kad diabetas yra reikšmingas periodontito rizikos veiksnys, o periodontito rizika yra didesnė, jei.glikemijoskontrolė bloga; žmonėms, sergantiems blogai kontroliuojamu diabetu (kurie taip pat yra didžiausia kitų makrovaskulinių ir mikrovaskulinių komplikacijų rizika), padidėja periodontito ir alveolių kaulų retėjimo rizika [40,41].

Rutinas, citrusinių vaisių flavonoidų glikozidas, randamas vaisiuose (apelsinuose, greipfrutuose, citrinose, obuoliuose ir uogose), yra vienas iš pagrindinių daugelio multivitaminų preparatų ir vaistažolių ingredientų [42]. Dėl savo antioksidacinių ir priešuždegiminių savybių bei citoprotekcinių veiksmų, susijusių su senėjimą stabdančiomis ir priešvėžinėmis savybėmis, jis turi tam tikrą dokumentuotą farmakologinį poveikį[43,44]. Rutino teigiamas poveikis glikemijos būklei irmikrovaskuliniso su diabetu susijusios makrovaskulinės komplikacijos atsiranda dėl jo hipolipideminių savybių. Gliukozės koncentracijos sumažėjimą galima paaiškinti rutino poveikiu ląstelių membranoms ir gliukozės patekimo į ląsteles palengvinimu, taip sumažinant gliukozės išsiskyrimą į kraują [45].

Cistanche gali pagerinti imunitetą

Šiame tyrime tyrėme oksidacinio streso ir kurkumino bei rutino, atskirai ir mišinio, įtaką eksperimentiškai sukelto periodontito etiopatologijai diabetu sergančioms žiurkėms.

Siekiant eksperimentinės periodontito būklės pasiekti greičiau nei įprastai pasireiškia periodontitas, aplink dvišalius antrojo apatinio žandikaulio žiurkės krūminius dantis buvo uždėta 0,1 mm skersmens nerūdijančio plieno ligatūra[46]. Ligatūra aplink žiurkės krūminius dantis skatina uždegiminį iššūkį, kai yraneutrofilų, T- irB-limfocitai, išopėjimas ir epitelio pritvirtinimo viršūninė migracija[47].

Didėja susidomėjimas antioksidantų ir periodonto ligų koreliacija. Todėl šiame tyrime kurkuminas ir rutinas naudojamas kaip vienas antioksidantas ir jų abiejų mišinys. Kurkumino periodontijos naudojimas buvo įvertintas klinikinių tyrimų [38, 39], tyrimų su gyvūnais [37] ir in vitro tyrimų metu [35].

Mes įvertinome tokius parametrus kaip MDA, GSH, GSSC, GSH / GSSC ir CAT nuo pradinio lygio iki 70 dienos, kad nustatytume oksidacinį stresą. Mes nustatėme, kad šiems kintamiesiems yra reikšmingas skirtumas tarp negydytos grupės ir trijų gydymo grupių, tačiau vidutinis poveikis tarp DPC (gydyta kurkuminu) ir DPR (gydyta rutinu), DPC (gydyta) reikšmingai nesiskyrė. su kurkuminu) ir DPCR (apdorotas kurkuminu ir rutinu) ir DPR (apdorotas rutinu) ir DPCR (apdorotas kurkuminu ir rutinu).

MDA padidėjimas serume parodė, kad oksidacinis stresas, patiriamas pakankamai, gali sukelti laisvųjų radikalų sukeltą lipidų komponento peroksidaciją ląstelės membranoje; taigi, MDA yra geras rodiklis vertinant oksidacinį stresą sergant degeneracinėmis ligomis, tokiomis kaip cukrinis diabetas[48]. Vidutinis GSH, GHH/GSSC ir CAT buvo žymiai mažesnis 2, 3, 4 ir 5 grupėse, palyginti su kontroline grupe. Tomofuji ir kt.[49] pranešė, kad sumažėjo GSH lygis, o dantenų audinyje padidėjo alveolinių kaulų praradimas ir polimorfinė branduolinių leukocitų infiltracija, o de AraujoJunior ir kt. [50] pranešė, kad periodontito audinyje MDA lygis padidėjo ir GSH lygis sumažėjo.

Tyrimai su gyvūnais ir riboti klinikiniai tyrimai parodė teigiamus ir daug žadančius rezultatus, tačiau vis dar yra apribojimų ir atsargumo priemonių, į kurias reikia atsižvelgti prieš pradedant platų klinikinį kurkumino naudojimą periodontitu sergantiems pacientams. Kurkuminas blogai tirpsta vandenyje ir turi būti ištirpintas etanolyje arba dimetilsulfokside, jo sisteminis biologinis prieinamumas yra mažas, išgėrus dozę, prastai absorbuojamas ir greitai metabolizuojamas virškinimo trakte [51,52].

Reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant pagerinti kurkumino ir rutino formules ir tiekimo sistemas. Yra daug žadančių kurkumino rezultatų, siekiant padidinti absorbcijos procesą, sulėtinti metabolizmą [25] ir padidinti jo biologinį prieinamumą naudojant nanodaleles [53], liposomas [54], miceles [55] ir fosfolipidų kompleksus[56]. ].

4. Medžiagos ir metodai

4.1.Naudotos cheminės medžiagos / vaistai

Streptozotocinas (STZ), gliukozė, kurkuminas (C), rutinas (R), 2-tiobarbitūro rūgštis, o-ftaladehidas, vandenilio peroksidas ir kalcio fosfato buferis buvo įsigyti iš Sigma Aldrich Chemicals GmbH (Miunchenas, Vokietija).STZ ir gliukozė buvo ištirpinti distiliuotame vandenyje. C ir R buvo ištirpinti mineralinėje alyvoje esant 10 umol/L.

4.2.Eksperimentiniai gyvūnai

Penkiasdešimt Wistar albinosų patinų (8 savaičių amžiaus ir sveriančių vidutiniškai ±SD 220±20 g), įsigytų iš Iuliu Hatieganu medicinos ir farmacijos universiteto Gyvūnų skyriaus, Cluj-Napoca, Rumunija, buvo perkelti į BIOCOM tyrimų centrą Fiziologijos katedra, Cluj Napoca, Rumunija. Gyvūnai buvo laikomi 21 ± 2 laipsnių temperatūroje, 70 procentų ± 4 procentų drėgnumo sąlygomis ir trumpesniu nei 12-h tamsos/12-h šviesos periodu kontroliuojamoje aplinkoje, 5 narve. Jie buvo šeriami standartine granulių laboratorijos dieta ir gavo vandens ad libitum. Eksperimentas prasidėjo po 1-savaitės aklimatizacijos laikotarpio, o protokolą patvirtino Medicinos ir farmacijos universiteto „lulu Hatieganu“ gyvūnų gerovės etikos komitetas, Nr. 172/13, 2019 m. birželio mėn. Gyvūnų priežiūros ir naudojimo moksliniais tikslais gairės, Nacionalinis laboratorinių gyvūnų tyrimų patariamasis komitetas, 2004 m. 4.3. Cukrinio diabeto sukėlimas

Pirmą dieną po im (intramuskulinės) anestezijos sušvirkštus ketamino ksilazino kokteilio (100 mg/kg kūno svorio (KM), ketamino ir 10-mg/kg-1 KM ksilazino), diabetas buvo sukeltas. žiurkės grupėse 2-5. Jie buvo švirkščiami į veną į uodegos veną STZ 30mgkg-1 k.m., po 6 val. suleidžiama 30 proc.,2mL gliukozės vienam gyvūnui. Hiperglikemiją suaugusioms žiurkėms sukelia streptozotocinas (STZ); Veikimo mechanizmas yra selektyvus kasos ląstelių naikinimas oksidaciniu stresu. Dėl to sumažėja cirkuliuojančio insulino kiekis, padidėja gliukozės kiekis kraujyje ir atsiranda reikšmingų simptomų [57].

1 grupės gyvūnai gavo tik tokį patį tūrį kaip tik kontrolinė nešiklis. Po 72 valandų, naudojant gliukometrą, glikemija buvo išmatuota kraujyje, paimtame iš uodegos venos. Žiurkės su a<300 mg/dl="" glycemia="" level="" were="" readministered="" stz="" and="" glucose="" as="" stated="">

4.4.Periodontito sukėlimas

Siekiant pagreitinti periodontitą, apnašas kaupiančios priemonės, pvz., ortodontinės raiščiai, buvo dedamos viršūnėje tarpproksimalinėje srityje ir įstumtos į dantenų griovelį aplink antruosius krūminius dantis, kad būtų lengviau formuotis apnašos, taip pat sutrikdytų dantenų epitelį, sustiprintų osteoklastogenezę ir kaulų susidarymą. praradimas[58,59] Uždėjus ligatūrą aplink raištelį susikaupė bakterijos, o tai sukėlė greitą periodontitą. Tyrimas atliktas perkeliant odontologinį zondą visuose danties paviršiuose ir zonduojant 6 vietose – 3 žandinėje ir 3 burnos pusėje. (mezialinis, centrinis ir distalinis danties). Kišenės gylis piką pasiekė po 15 dienų, raištis prarado kontaktą su periodonto kišenės apačia, kuri ėjo apikaline kryptimi, todėl sumažėjo jos efektyvumas. Vadinasi, eksperimento metu ligatūra turi būti stumiama viršūniškai. Giliausios kišenės vidutinis kišenės gylis buvo 3,1 mm. Patvirtinus periodontitą, raiščiai buvo pašalinti nepažeidžiant apnašų ar akmenų.

Šis metodas buvo laikomas tinkamu ūminės ligos modeliu[60]. Tik ligatūra yra labiausiai paplitęs periodontito sukėlimo metodas (72,2 proc.)[60]. 4.5. Grupės paskirstymas ir eksperimentinis projektavimas

Wistar albinosų žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į 5 grupes: (1) (KONTROLĖ) - kontrolinė grupė, (2) (DPP) - eksperimentiniu būdu sukeltas cukrinis diabetas ir periodontitas, (3) (DPC) - eksperimentiniu būdu sukeltas cukrinis diabetas ir periodontitas, gydomi kurkuminu. (C), (4) (DPR) – eksperimentiniu būdu sukeltas cukrinis diabetas ir periodontitas, gydomi rutinu (R) ir (5) (DPCR) – eksperimentiniu būdu sukeltas cukrinis diabetas ir periodontitas, gydomi Cand R.

Įdiegus diabetą ir periodontitą, 3-5 grupių žiurkės buvo gydomos C, R arba kombinuotai: 3 grupei buvo skirta C,75 mg/kg KM/žiurkei, 4 grupei – R75 mg/ kg KM/žiurkei ir 5 grupėje lygiomis dalimis Cand R derinys, atitinkamai 75 mg/kg KM. 2 grupė gavo tik tą patį transporto priemonės tūrį. Gydymas buvo atliekamas per burną zondu kiekvieną dieną 10 savaičių. Dozavimas buvo pasirinktas remiantis duomenimis, naudojamais kituose panašiuose tyrimuose, kurių metu kurkuminas (15-90 mg/kg)[61-64] ir rutinas (25-100 mg/kg)[65] ] buvo tiriamas oksidacinio streso parametrų mažinimas. 4.6. Kraujo ir audinių mėginių paėmimas ir analizė

Eksperimento pabaigoje po intraperitoninės ketamino ksilazino kokteilio injekcijos (100 mg/kg KM ketamino ir 10 mg/kg KM ksilazino), iš visų gyvūnų retroorbitinio veninio sinuso buvo paimta 5 ml kraujo ir buvo išmatuoti oksidaciniai žymenys. Audinių mėginiai buvo paimti iš surištų dantų ir homologinių kontrolinių dantų dantenų gleivinės. Mėginiai buvo naudojami biocheminiams oksidaciniams žymenims matuoti.

Audinių fragmentai buvo homogenizuoti politrono homogenizatoriumi (Brinkman Kinematica, Liucerna, Šveicarija) 3 minutes ant ledo fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS) (pH 7,4) ir pridedami santykiu 1:4 (m/v). Suspensija buvo centrifuguojama 300 × g ir 4 laipsnių 5 minutes, kad būtų paruošta citozolinė frakcija. Baltymų kiekis homogenatuose buvo matuojamas Bradfordo metodu [66]. 4.7.Oksidacinio streso biomarkerių nustatymas

MDA buvo nustatytas fluorometriniu metodu su 2-tiobarbitūro rūgštimi (TBA), aprašytu Conti ir kt.[67].

Sumažintas glutationas (GSH) ir oksiduotas glutationas (GSSG) buvo matuojami fluorometriškai, naudojant o-ftaladehidą [68]. Rezultatai buvo išreikšti moliais/ml.

Norint įvertinti MDA dantenų mėginiuose, baltymų kiekis homogenatuose buvo nustatytas Bradfordo metodu [69], naudojant galvijų serumo albuminą kaip standartą. Dantenų audinio homogenatai buvo kaitinami verdančio vandens vonioje 1 valandą 75-mMK2HPO4,pH3, turinčioje 10-mM TBA. Po aušinimo tirpalas ekstrahuotas 3 ml n-butanolio 0.6 ml TBA. MDA buvo spektrofluorometriškai nustatyta organinėje fazėje, naudojant sinchroninę techniką su 534 nm sužadinimu ir 548 nm emisija. MDA buvo pranešta kaip nmol/mg baltymo.

Katalazės (CAT) aktyvumas homogenatuose ir ląstelių lizatuose buvo matuojamas reakcijos mišinyje, kuriame yra {{0}} mM vandenilio peroksido 50- mM kalcio fosfato buferyje, pH 7,4. Fermento kiekis, dėl kurio absorbcija sumažėjo 0,43, esant 25 laipsniams per minutę, esant 240 nm, šioje sistemoje buvo apibrėžtas kaip vienas katalazės aktyvumo vienetas. Aktyvumas išreikštas vienetu/mg baltymo.[70]4.8.Statistinė analizė

Duomenys buvo statistiškai analizuojami naudojant ANOVA su Scheffe testu, siekiant palyginti kontrolinės ir eksperimentinės grupės reikšmingumo lygius. Visos statistinės analizės buvo atliktos naudojant SPSS24 programinę įrangą, Armonk, NY, JAV. P reikšmės Mažiau arba lygios 0.05 buvo laikomos reikšmingomis.

5. Išvados

Galima daryti išvadą, kad vienkartinis arba kombinuotas kurkumino ir rutino vartojimas gali sumažinti oksidacinį stresą tiek dantenų audiniuose, tiek kraujyje ir sustiprinti antioksidacinę būklę hiperglikeminio periodontito žiurkėms. Modeliuodami oksidacinį stresą, šie du antioksidantai gali slopinti uždegimą. Norint įvertinti antioksidacinį poveikį vietiniam uždegimui, palyginti su sisteminiu uždegimu, reikia atlikti tolesnius tyrimus.

Šis straipsnis yra ištrauktas iš Molecules 2021, 26, 1332