Skirtingi trumpo aplinkos praturtinimo po žiurkių socialinės izoliacijos padariniai 2 dalis

Atviro lauko bandymas

Bendram judėjimo aktyvumo lygiui matuoti buvo naudojamas atviras laukas (72 × 72 × 45 cm). Kiekvienas gyvūnas prieš bandymą buvo nuvežtas į 5 bandymų kambarį ir dar 5 minutėms patalpintas į OFT kamerą.

Pastaraisiais metais vis daugiau mokslinių tyrimų rodo, kad tarp motorinės veiklos ir atminties yra neatsiejamas ryšys. Įvairios sportinės veiklos turi didelę įtaką įvairaus amžiaus žmonių atminčiai gerinti, o tai turi didelę reikšmę mūsų kasdieniam mokymuisi, darbui ir gyvenimui.

Mankštos veikla gali paskatinti organizmo kraujotaką ir kvėpavimo sistemą bei skatinti medžiagų apykaitą. Tokiu būdu smegenų kraujagyslės gaus geresnį aprūpinimą krauju, bus aprūpinta daugiau deguonies ir maistinių medžiagų normaliai smegenų ląstelių veiklai užtikrinti. Ši gera fizinė būklė gali padėti mums geriau susikaupti ir pagerinti mokymosi bei atminties gebėjimus. Dėl to žmonės, kurie reguliariai užsiima fizine veikla, paprastai gali geriau išlaikyti savo atmintį ir protinį gyvybingumą.

Be to, skirtingos mankštos rūšys gali paveikti įvairių tipų atmintį. Pavyzdžiui, aerobiniai pratimai, tokie kaip ilgų nuotolių bėgimas, gali paskatinti hipokampo augimą ir taip pagerinti žmonių erdvinės atminties gebėjimus. Greita koordinavimo veikla, pavyzdžiui, stalo tenisas, gali paskatinti šokio atmintį ir trumpalaikę atmintį. Vyresnio amžiaus žmonėms mąstymo sporto šakos, tokios kaip šachmatai, gali labai pagerinti atmintį intelekto ir erdvinio pažinimo požiūriu.

Be to, mankšta gali dar labiau pagerinti atmintį, nes sumažina stresą ir pagerina miego kokybę. Stresas ir nemiga ne tik paveikia smegenų aprūpinimą krauju ir medžiagų apykaitą, bet ir priverčia žmones prislėgti bei išsekti, todėl jie negali susikaupti ir susikaupti. Tinkama mankšta gali atitraukti dėmesį, sumažinti įtampą kūnui ir smegenims, padėti pagerinti miego kokybę, lengviau sutelkti dėmesį į mokymąsi ir darbą bei pagerinti atmintį.

Apibendrinant galima pasakyti, kad mankštos veikla gali skatinti kraujotaką ir medžiagų apykaitą, pagerinti fizinę būklę ir psichinę sveikatą, taigi ir atmintį. Todėl kasdieniame gyvenime turėtume dalyvauti įvairiose sporto veiklose, kad palaikytume kūno ir smegenų sveikatą bei skatintume atmintį. Matyti, kad reikia pagerinti atmintį. Cistanche deserticola gali žymiai pagerinti atmintį, nes Cistanche deserticola taip pat gali reguliuoti neurotransmiterių pusiausvyrą, pvz., padidinti acetilcholino ir augimo faktorių kiekį. Šios medžiagos labai svarbios atminčiai ir mokymuisi. Be to, mėsa taip pat gali pagerinti kraujotaką ir skatinti deguonies tiekimą, o tai gali užtikrinti, kad smegenys gautų pakankamai maistinių medžiagų ir energijos, taip pagerinant smegenų gyvybingumą ir ištvermę.

Norėdami pagerinti atmintį, spustelėkite žinokite papildus

Seansai buvo įrašyti vaizdo įraše, naudojant gyvūnų sekimo programinę įrangą EthoVision (Noldus, Wageningen, NL), siekiant įvertinti bendrą mobilumo trukmę ir specifinius elgesio modelius, įskaitant auginimą ir strigmotaksę.

Paaukštintas plius labirintas

EPM (Handley ir Mithani, 1984; Pellow ir kt., 1985; Pellow ir File, 1986), nustatytas 51 cm virš žemės lygio, buvo naudojamas nerimą primenančiam elgesiui įvertinti. Jį sudaro medinis pagrindas su keturiomis siauromis svirtimis (50 × 10 cm).

Dvi priešingos rankos yra padengtos skaidriais akrilo stiklo šonais ir yra žinomos kaip atviros, o kitos dvi uždarytos medinėmis pusėmis, todėl koridoriai yra daug tamsesni.

Kiekvienas gyvūnas buvo patalpintas į centrinį skyrių ir paliktas labirinte 5 minutes. Bendras laikas, praleistas temos centre, atvirose ir uždarose rankose, buvo užfiksuotas ir apskaičiuotas naudojant EthoVision. Laikas, praleistas atvirose rankose, rodo anksiolitinį poveikį, o uždaros rankos yra susijusios su nerimą primenančiu elgesiu (Walf & Frye, 2007).

Vandens Y labirintas

Mes panaudojome modifikuotą vandens T labirinto versiją, kurią sukūrė Del Arco ir kt. (2007) ir patvirtino Locchi ir kt. (2007). Akrilinio stiklo Y labirintas, sudarytas iš trijų 120 laipsnių atstumu vienas nuo kito esančių rankų (kiekviena 45 × 15, 5 × 45 cm), buvo užpildytas 30 cm vandens 24 ± 0, 5 laipsnių kampu, kad būtų galima įvertinti erdvinės darbinės atminties veikimą spontaniškai keičiant.

Kiekviena žiurkė buvo tiriama 5 dienas, atliekant šešis bandymus iš eilės per dieną, atskiriant 30 s intervalu. Gyvūnai buvo atvesti į bandymų kambarį likus 5 minutėms iki pirmojo bandymo susipažinti su aplinka. Kiekviename tyrime gyvūnai buvo dedami į tolimąją pradinės rankos pusę, o jų galva buvo nukreipta į labirinto centrą, link kurio jie plaukė ir pasirinko vieną iš dviejų tikslinių rankų (ranka A arba ranka B).

Nedidelė skaidri platforma buvo pastatyta 1 cm žemiau vandens lygio vienoje iš tikslinių rankų (ranka A arba ranka B), atsveriant pirmojo bandymo pradžioje ir pakaitomis tarp dviejų tikslinių rankų kiekvienam bandymui.

Gyvūnai, kurie negalėjo rasti platformos per 60 sekundžių, buvo švelniai vedami link jos uodegos. Po paskutinio bandymo jie buvo patalpinti į mažą narvą, kad išdžiūtų 40 minučių, prieš grąžindami į savo namų narvus. Kiekviena sesija buvo įrašyta vaizdo įraše naudojant EthoVision. Kiekviename bandyme buvo užkoduotas paslėptos platformos buvimo vietos nustatymo laikas ir neteisingų rankos įrašų (klaidų) skaičius.

Perfuzijos fiksavimas, audinių apdorojimas ir imunohistochemija

Gyvūnų perfuzinė fiksacija buvo atlikta 41 dieną, 24 valandas po paskutinio elgesio testo (5 WYM diena). Gyvūnai buvo išimti iš (SI arba EE) narvų, giliai anestezuoti ketamino-ksilazino tirpalu (100-15 mg/kg, IP) ir perfuzuoti 4% depolimerizuotu paraformaldehidu (pH 7,4).

Po fiksavimo per naktį tame pačiame tirpale vainikinės sekcijos (40-50 μm) buvo nupjautos vibratomu (VT1000 S, Leica Biosystems, Nussloch, Vokietija) ir nuplautos fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS; pH 7,4).

C-Fos baltymo ekspresija buvo atskleista imunohistochemija, siekiant įvertinti laikymo sąlygų poveikį spontaniškai aktyvių neuronų skaičiui įvairiuose smegenų regionuose.

Į audinį prasiskverbta pridedant {{0}},05 % Triton X-100 (pH 7,4) į PBS (PBS-Tx). Sekcijos buvo apdorojamos vandenilio peroksidu (0, 6%) 30 minučių kambario temperatūroje (RT), prieš perkeliant į blokuojantį tirpalą.

Jie buvo blokuojami 20% normalaus ožkos serumo (NGS; Vector Laboratories) PBS-Tx 30 minučių kambario temperatūroje ir inkubuojami su anti-c-Fos antikūnu (pelės monokloninis, Santa Cruz 8047, 1:500 koncentracija) PBS-Tx. su 1%NGS 3 naktis 4 laipsnių temperatūroje. Tada sekcijos buvo nuplaunamos PBS (3 × 10 min.), perkeliamos į antrinį antikūnų tirpalą (biotinilintas anti-pelės IgG, 1:250 PBS-Tx su 1% NGS) ir inkubuojamos 2 valandas kambario temperatūroje.

Po kitos skalavimo serijos jie buvo inkubuojami su avidinu biotinilinta peroksidaze (ABC rinkinys, Vector Laboratories) PBS 20 minučių kambario temperatūroje. Peroksidazės produktas atsirado su nikeliu sustiprintu3,30-diaminobenzidino tetrahidrochlorido hidratu (DAB, Sigma-Aldrich D5637).

Mikroskopija ir ląstelių skaičiavimas

Iš viso apdorojome 48 sekcijas iš 12 gyvūnų (6 nuolatinis SI ir 6 SI iki EE; 4 skyriai vienam gyvūnui), kurių perfuzijos kokybė buvo gera. C-Fos imunopozityvių (c-Fos+) branduolių skaičius buvo kiekybiškai įvertintas retrosplenialinėje žievėje (RSC), agranulinėje peririninėje žievėje (35 sritis; PRC), šoniniame migdolinio kūno branduolyje (LA) ir migdolinio kūno bazolateriniame branduolyje (BL). .

Dominantys regionai buvo nustatyti atliekant citologinį palyginimą su žiurkės smegenų atlasu (Paxinos & Watson, 2006). Vaizdai buvo gauti naudojant epifluorescencinį mikroskopą (Olympus BX53), turintį monochrominę CCD kamerą (Olympus XM10). Analizės buvo apribotos audiniu, pasirinktu prieš imunohistochemiją, o papildomos sekcijos buvo apdorotos po duomenų gavimo.

Pažymėtos ląstelės buvo skaičiuojamos pusiau automatiniu būdu. Pirma, c-Fos+ ląstelių skaičius pirmiau minėtuose regionuose buvo aptiktas ir kiekybiškai įvertintas naudojant acell-counting plugin (ITCN) ImageJ (Schneider ir kt., 2012).

ITCN sukūrė išvesties vaizdus, ​​​​rodančius aptiktas ląsteles kiekviename regione. Du nepriklausomi vertintojai, aklai nuo eksperimentinių sąlygų, įvertino šiuos vaizdus, ​​kad nustatytų ir suskaičiuotų klaidingai neigiamus atvejus (ty silpnai pažymėtas ląsteles, kurių programinė įranga nepastebėjo). Šių dviejų klaidingai neigiamų ląstelių skaičiaus aritmetinis vidurkis buvo pridėtas prie bendro kiekvienos sekcijos ITCN aptiktų ląstelių skaičiaus.

Rezultatai

Svorio pokytis

Gyvūnų kūno svoris buvo užregistruotas keturiais laiko taškais, tiek prieš (1, 15 ir 31 dienos), tiek po EEmanipuliacijos (41 diena). Mes nustatėme laiko poveikį kūno svoriui (F (3, 42)=7.69, p < 0.001) ir svėrimo laiko grupės sąveiką (F (3, 42) )=3.30, p=0.029, 2 × 4 dvipusė mišri ANOVA), rodanti reikšmingą EE gyvūnų svorio sumažėjimą po sodrinimo: svoris 1 dieną (M= 324 .6, SD=15.7), 15 diena (M=334.6, SD=13.3) ir 31 diena (M=325.5, SD {{ 33}}.6) buvo didesni nei 41 dieną (M=311.9, SD=14; visi ps < 0,05).

Ištisinėje SI grupėje tokio pokyčio nebuvo (1 diena, M=321, SD =12,5; 15 diena, M=325, SD=15,5; 31 diena , M=322.3, SD= 15.5; 41 diena, M=320.1, SD=12.9).

Elgesio neviltis

Mes įvertinome trumpo EE manipuliavimo poveikį elgesio nevilčiai po SI sukelto streso, registruodami ir palygindami bendrus FST-2 nejudrumo balus (Slattery & Cryan, 2012; Yankelevitch-Yahav ir kt., 2015).

SI nejudrumo lygis EE grupei (M=49.04, SD=21.77) buvo žymiai didesnis nei stebimas nuolatinės SI grupėje (M=29.47, SD { {6}}.04; t (14)=2.18, p=0.047,d=1.09, nepriklausomų imčių t testas; 2 pav.), rodantis elgseną neviltis gyvūnams, veikiamiems trumpo EE, ir santykinis antidepresinis nuolatinio SI poveikis.

Reikėtų pažymėti, kad baziniai, ty FST-1, nejudrumo balai ištisinio SI (M=41.32, SD=17.02) ir SI iki EE gyvūnų (M {{5}) }}.18, SD=11.42) buvo labai panašūs. Vadinasi, FST bandymo fazėje pastebėtas skirtumas atsirado ne dėl pradinio lokomotorinio aktyvumo skirtumo. Be to, po FST-2, kaip buvo įvertinta OFT (toliau), buvo pastebėtas bendro lokomotorinio aktyvumo lygio pokytis.

Lokomotorinis aktyvumas ir tiriamasis elgesys

Mes panaudojome OFT, kad įvertintume galimus lokomotorinio aktyvumo skirtumus tarp nuolatinių SI ir SI iki EE gyvūnų. Nebuvo jokio skirtumo tarp kontrolinių (M =160.05, SD=53.95) ir eksperimentinių gyvūnų (M=206.93, SD=76.36; t () 14)=1.42, p=0.178, nepriklausomų mėginių t testas; 3 pav., rodantis, kad trumpalaikio EE metabolinis (ty svorio pokyčio) poveikis nepakeitė bendro judėjimo aktyvumo ir netrukdė. su FST.

Auginimo elgesys, tiriamojo elgesio rodiklis, taip pat neparodė reikšmingo skirtumo tarp grupių, nors SI toEE gyvūnai dažnai rodė daugiau auginimo (M=38.75, SD =31.91), palyginti su nuolatiniais SI gyvūnai (M=18.75, SD=11.83; t (14)=1.66, p=0.119, nepriklausomas mėginio testas). Rezultatas nepasikeitė, kai stebėjimai buvo apriboti iki centro (SI į EE M=2.25, SD=1.75 vs.

ištisinis SI M {{0}}.38, SD=2.77) arba periferija (SI toEE M=34.25, SD=34.44 prieš nepertraukiamą SI M=16.38,SD=9.93) OFT (visi ps > 0,05). Neatsižvelgiant į grupes, didžioji auginimo elgsena buvo rodoma pakraščiuose, dažnai prie sienų (M=25.31, SD =25.34), o ne centre (ty laisvai stovintis auginimas). ;M=2.31, SD=2.17; t (15)=3.54, p=0.003, d=1.28,suporuotas mėginių t testas).

Nerimas

Skirtingas auginimas ir bendra trukmė, praleista centre, palyginti su OFT periferija, rodo bendro nerimo lygio pokyčius. Po šio stebėjimo panaudojome standartinį nerimo matą – EPM – ir palyginome į nerimą panašų nuolatinio SI ir SI elgesį su EE gyvūnais.

Mes nustatėme, kad SI–EE grupė žymiai daugiau laiko praleido atvirose rankose (M=169.25, SD=106.59), palyginti su kontroliniais gyvūnais (M=60.87, SD {). {6}}.51;t (14)=−2.33, p=0.036, d=1.16, nepriklausomas mėginių ėmimo testas; 4 pav.), nurodantis anksiolitinį poveikį trumpo sodrinimo po SI sukelto streso poveikis.

Erdvinė darbinė atmintis

Erdvinės darbinės atminties našumas buvo vertinamas per penkias dienas iš eilės WYM. Mes nustatėme reikšmingą poveikį bandymo dienai, matuojant vidutiniu latentiniu laiku, aptinkant paslėptą pabėgimo platformą (F (1.47, 20.64)=12.95,p=0.001, 2 × 5 dvipusis mišri ANOVA), atskleidžianti, kad buvo pasiektas mokymasis.

Bonferroni pataisyti posthoc testai parodė, kad platformos buvimo vietos nustatymo delsa pirmą dieną buvo žymiai didesnė (M {{0}.26, SD=10.13), palyginti su trečiąja (M=6). 79, SD= 2.25), ketvirtas (M=4.73, SD =1.44) ir penktas (M=6.29, SD {{14} }.03) WYM dienos (allps < 0,05; 5 pav.).

Nei bandymo dienos ir sąlygos sąveika (F (1,47, 20,64)=2.54, p=0.115), nei pagrindinis eksperimentinės sąlygos poveikis (F (1, 14)=3 .87, p=0.069, 2 × 5 dvipusė mišri ANOVA).

Išanalizavome bendrą neteisingų grupės įrašų (ty klaidų) skaičių per bandymus kaip papildomą darbinės atminties efektyvumo matą ir nustatėme reikšmingą bandymo dienos poveikį (F (4, 56)=4.71, p {{4). }}.{18}}02, 2 × 5 dvipusė mišri ANOVA). Bonferroni pakoreguoti post-hoc testai atskleidė, kad bendras klaidų skaičius žymiai sumažėjo ketvirtą dieną (M=8.69, SD=1.82), palyginti su pirmąja WYM diena (M=12 .69, SD=4.27; p < 0,05), tai rodo, kad buvo išmokta.

Nebuvo jokio pagrindinio eksperimentinės sąlygos (F (1, 14)=2.46, p=0.139, 2 × 5 dviejų krypčių mišri ANOVA) ar bandomosios dienos ir sąlygų sąveikos (F) poveikio. (4, 56)=1.34, p=0.269). Klaidų lygio analizė rodo, kad abi grupės išmoko ketvirtą dieną. Tačiau per pirmąsias 2 WYM dienas SI į EE gyvūnai rodė geresnius rezultatus (5 pav.).

Šis platformos nustatymo delsos skirtumas tapo reikšmingas antrąją WYM dieną (SI į EE M=7.13, SD= 2.63 vs. nuolatinis SI M=11.09, SD=4.47; t (14) =2.17, p=0.048, d=1.08, nepriklausomų pavyzdžių t-testas), rodantis greitesnį mokymąsi ankstyvoje atminties užduoties fazėje.

For more information:1950477648nn@gmail.com