Kurkumino darinio J147 slopinamasis poveikis melanogenezei ir melanosomų transportavimui palengvinant ERK sukeltą MITF skaidymą 1 dalis

Buvo pripažintas terapinis kurkumino ir chemiškai modifikuoto kurkumino (CMC) naudojimas melanogenezės ir tirozinazės aktyvumui slopinti. J147 yra modifikuota kurkumino versija, pasižyminti puikiu biologiniu prieinamumu ir stabilumu. Tačiau nėra pranešimų apie J147 poveikį pigmentacijai in vitro ir in vivo. Savo tyrimuose ištyrėme J147 gydymo hipopigmentinį poveikį melanocitams ir ištyrėme pagrindinį mechanizmą. Šie tyrimai parodė, kad J147 slopino tiek bazinę, tiek -MSH sukeltą melanogenezę, taip pat sumažino melanocitų dendrito išplėtimą ir melanosomų transportavimą. J147 atliko šiuos vaidmenis daugiausia aktyvuodamas ekstraląstelinio signalo reguliuojamo baltymo kinazės (ERK) kelią. Kai jis buvo suaktyvintas, jis lėmė MITF degradaciją ir dar labiau sumažino tirozinazės, TRP-1, TRP-2, miozino Va, Rab27a ir Cdc42 ekspresiją, galiausiai slopindamas melanino sintezę ir melanosomų transportavimą. Be to, J147 hipopigmentinis poveikis buvo įrodytas in vivo naudojant zebrafish modelį ir UVB sukeltą hiperpigmentacijos modelį rudoms jūrų kiaulytėms. Mūsų išvados taip pat parodė, kad J147 neparodė citotoksiškumo in vitro ir in vivo. Visi šie duomenys patvirtino, kad J147 gali pasirodyti gana naudingas kaip saugesnė natūrali odos balinimo priemonė.

Cistanchetaip pat turi funkcijąskatina kolageno gamybą, kuris gali padidinti odos elastingumą ir blizgesį bei padėti atstatyti pažeistas odos ląsteles. CistancheFeniletanolio glikozidaituri reikšmingą reguliavimą mažinantį poveikįtirozinazėįrodyta, kad poveikis tirozinazei yra konkurencinis ir grįžtamasis slopinimas, o tai gali būti mokslinis pagrindas kuriant ir panaudojantbalinimo ingredientaiCistanche. Todėl cistanche atlieka pagrindinį vaidmenį balinant odą. Tai galislopina melanino gamybąsumažinti spalvos pasikeitimą ir blankumą; ir skatina kolageno gamybąpagerinti odos elastingumąir spindesys. Dėl plačiai paplitusio šio cistanche poveikio pripažinimo daugelisodos balinimasgaminiuose pradėtos naudoti augalinės kilmės sudedamosios dalys, tokios kaip Cistanche, kad patenkintų vartotojų poreikius, taip padidindami komercinę Cistanche vertę odą balinančiose priemonėse. Apibendrinant galima pasakyti, kad cistanche vaidmuo balinant odą yra labai svarbus. Jo antioksidacinis ir kolageną gaminantis poveikis gali sumažinti spalvos pasikeitimą ir blyškumą, pagerinti odos elastingumą ir blizgesį, taigi pasiekti balinimo efektą. Be to, platus Cistanche panaudojimas odos balinimo gaminiuose rodo, kad negalima nuvertinti jo vaidmens komercinėje vertėje.

Raktiniai žodžiai: J147, hipopigmentinis poveikis, melanosomų pernešimas, ERK kelias, MITF degradacija

Norėdami balinti, spustelėkite Cistanche Tubulosa

Daugiau informacijos: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

ĮVADAS

Odos pigmentacija priklauso tiek nuo melanino sintezės, tiek nuo pasiskirstymo epidermio sluoksnyje. Melaninas daugiausia gaminamas aplink melanocitų branduolį ir saugomas melanosomose (Tian ir kt., 2021). Po brandinimo melanosomos migravo išilgai mikrotubulių ir aktino gijų į ląstelių dendrito galiukus ir galiausiai į gretimus keratinocitus, kad užbaigtų pasiskirstymo procesą (Beaumont ir kt., 2011; Ohbayashi ir Fukuda, 2012). Esant normaliai fiziologinei būklei, melaninas apsaugo žmogaus odą nuo ultravioletinių (UV) pažeidimų, toksinių cheminių medžiagų ir kitų aplinkos veiksnių (Slominski ir kt., 2004; Yousaf ir kt., 2020). Tačiau perteklinė gamyba ir kaupimasis sukelia hiperpigmentaciją ir yra susiję su odos sutrikimais, tokiais kaip použdegiminė melanoderma, melasma ir saulės lentiginiai, todėl atsiranda didžiulė psichosocialinė našta (Pillaiyar ir kt., 2017). Vadinasi, būtina sukurti veiksmingas ir saugias odos balinimo priemones.

Pastaraisiais metais melanino ląstelių biologija tapo platesne mokslinių tyrimų sritimi ir buvo išaiškinti keli svarbūs baltymai, prisidedantys prie melanogenezės ir melanosomų pernešimo, padedantys nustatyti melanino sintezės inhibitorius. Tirozinazė yra būtina tik melanogenezei, o tirozinazės katalizinio poveikio slopinimas yra labiausiai paplitęs melanino gamybos mažinimo metodas (D'Mello ir kt., 2016). Keletas žinomų tirozinazės inhibitorių, įskaitant arbutiną ir kojinę rūgštį, jau buvo sukurti kaip kosmetikos priedai (Ding ir kt., 2020). KIF5b ir Rab27A-Melanophilin-Myosin Va kompleksas prisideda prie melanosomų transportavimo į išorę (Ohbayashi ir Fukuda, 2012; Noguchi ir kt., 2014). Cdc42 reguliuoja dendrito pailgėjimą, kuris yra būtinas melanosomų perkėlimui (Luo, 2000). Šių minėtų baltymų slopinimas gali žymiai slopinti melanosomų transportavimą, kuris yra svarbus odos balinimo priemonių kūrimo mechanizmas. Su mikroftalmija susijęs transkripcijos faktorius (MITF) yra pagrindinis melanogenezės transkripcijos faktorius. Be to, MITF taip pat reguliuoja melanosomų transportavimą, skatindamas Rab27a ir Cdc42 ekspresiją (Noguchi ir kt., 2016). Pigmentacijoje dalyvauja keli signalizacijos keliai, reguliuodami MITF ekspresijos lygį. cAMP baltymų kinazės A (PKA) aktyvinimas stimuliuoja pigmentaciją per cAMP atsako elementą surišančio baltymo (CREB) priklausomą MITF ekspresijos reguliavimą (Rodríguez ir Setaluri, 2014). Ir atvirkščiai, tarpląstelinio signalo reguliuojamos baltymų kinazės (ERK) aktyvinimas slopina melanogenezę, pagreitindamas MITF skaidymą (Lv ir kt., 2020a). Buvo sukurta daug anti-melanogeninių agentų, kurie nukreipti į tirozinazės aktyvumą, melanosomų perkėlimą arba su melanogeniniais signalais susijusius signalizacijos kelius. Tačiau nedaugelis inhibitorių buvo tiriami in vivo ir parodė gerus rezultatus (Pillaiyar ir kt., 2017).

Kurkuminas yra diarilheptanoidinis junginys, išskirtas iš Curcuma longa (Zingiberaceae) šakniastiebių ir naudojamas kaip geltonas kvapioji medžiaga arba pigmentas maisto produktuose (Zheng J. ir kt., 2018). Tyrimai parodė įvairias jo fiziologines funkcijas, įskaitant priešuždegiminę, antioksidacinę, anti-amiloidinę ir priešnavikinę veiklą (Liu ir kt., 2016; Zheng Y. ir kt., 2018). Be šių, kurkuminas slopina tirozinazės aktyvumą ir slopina melanogenezę melanocituose (Lee ir kt., 2010; Tu ir kt., 2012). Tačiau prastas kurkumino biologinis prieinamumas riboja jo taikymą (Karthikeyan ir kt., 2020). Siekiant išspręsti šią problemą, J147 yra sukurtas kaip stiprus kurkumino darinio junginys, pasižymintis didesniu stabilumu ir biologiniu prieinamumu (Li ir kt., 2020). J147 turi neuroprotekcinį poveikį ir šiuo metu yra I fazės klinikinių tyrimų dėl Alzheimerio ligos. Tačiau vis dar nėra pranešimų apie J147 poveikį pigmentacijai in vitro ir in vivo.

MEDŽIAGOS IR METODAI

Reagentai

J147 (J302241), -MSH (M118985) ir grybų tirozinazė (T128536) buvo gauti iš Aladdin (Šanchajus, Kinija). Gavome antikūnus prieš Myosin Va (sc-365986), KIF5b (sc-133184), GP100 (sc-393094), Cdc42 (sc-8401), Rab27a (sc{{ 13}}), p-JNK (sc-6254), JNK (sc-7345), p-p38 MAPK (sc-166182) ir p38 MAPK (sc-398546) iš Santa Kruzo (Kalifornija, JAV). Antikūnai prieš MITF (97800), p-MEK (2338), MEK (4694), p-ERK (4370) ir ERK (4695) buvo gauti iš Cell Signaling Technology (MA, JAV). Antikūnai prieš tirozinazę (ab180753), TRP-1 (ab235447), TRP-2 (ab221144), citokeratiną (ab7753) ir S100 (ab133519) buvo gauti iš Abcam (Kembridžas, JK). p38 inhibitorius SB203580 (S1863), ERK inhibitorius PD98059 (S1805), BCA baltymų tyrimo rinkinys (P0012), ląstelių lizės buferis (P0013) ir -aktinas (AF5001) buvo gauti iš Beyotime (Šanchajus, Kinija). RT-qPCR rinkiniai (RR036A) buvo įsigyti iš Takara Biomedical Technology (Pekinas, Kinija).

Ląstelių kultūros

MTT tyrimas

Ląstelių gyvybingumas buvo tiriamas MTT tyrimu (Yun ir kt., 2020). Trumpai tariant, ląstelės buvo pasėtos į 96-šulinėlių plokšteles ir 48 valandas apdorotos J147 (1–8 μM). Tada ląstelės buvo plaunamos PBS ir pakeistos MTT tirpalu (20 μL). Po papildomų 4 valandų inkubacijos supernatanto tirpalas buvo pašalintas ir į kiekvieną šulinėlį įpilama DMSO (200 μL). Galiausiai buvo nustatyta optinė absorbcija esant 570 nm.

Melanino kiekio matavimas

Ląstelės, kurių tankis 2 × 105 ląstelės/ml, buvo pasėtos į 6-šulinėlių auginimo plokšteles. Po 24 valandų inkubacijos ląstelės buvo kultivuojamos skirtingomis J147 dozėmis (1, 2, 4 μM) ir stimuliuojant -MSH (60 nM) arba be jo. Po 48 valandų apdorojimo ląstelės buvo surinktos ir visas melaninas ląstelių nuosėdose ištirpintas 100 μl NaOH darbinio tirpalo (1 mol/L, 10 proc. DMSO) 80 °C temperatūroje 1 val., o absorbcija buvo išmatuota esant 405 nm (Lv ir kt., 2015; Lv ir kt., 2019).

Tirozinazės aktyvumo tyrimas

Ląstelių tirozinazės aktyvumas buvo tiriamas, kaip aprašyta anksčiau (Liao ir kt., 2017; Lv ir kt., 2020a). Trumpai tariant, ląstelės buvo lizuojamos ląstelių lizės buferiu po plovimo tris kartus, o po to tirozinazės aktyvumo tyrimo supernatantas buvo gautas centrifuguojant lizatus. 100 μL PBS (0,1 M, pH 6,5), kuriame yra 10 ug baltymų, sumaišytų su 100 μL 0,1 procento L-DOPA. Plokštelė buvo inkubuojama 37 laipsnių temperatūroje 1 valandą, tada buvo stebima optinė absorbcija esant 475 nm.

Tiesioginis J147 poveikis tirozinazės aktyvumui buvo išbandytas sistemoje be ląstelių, kaip aprašyta anksčiau (Lv ir kt., 2020a). Trumpai tariant, reakcija grybų tirozinazės aktyvumui nustatyti buvo atlikta 96-šulinėlių plokštelėje, o reakcijos mišinyje buvo grybų tirozinazės (10 vienetų), L-tirozino (0,03 proc., 50 μL) ir 100 μL PBS. (0,1 M, pH 6,5), pridedant skirtingomis koncentracijomis J147. Po 10 minučių inkubacijos 37 laipsnių temperatūroje absorbcija prie 475 nm buvo išmatuota naudojant mikroplokštelės spektrofotometrą.

Masson-Fontana amoniakinis sidabro dažymas

Norint aptikti melanino pigmentą, odos gabalėliai ir melanocitai buvo fiksuoti formalinu ir nudažyti pagal standartinį protokolą (Gu ir kt., 2018; Lv ir kt., 2020b). Trumpai tariant, stikleliai buvo 3 kartus plaunami dejonizuotu vandeniu ir 12 valandų inkubuojami amoniakiniame sidabro tirpale kambario temperatūroje. Gerai nuplovus dejonizuotame vandenyje, stikleliai buvo inkubuojami hipo tirpale 5 minutes. Tada stikleliai buvo dar kartą nuplauti ir dar 5 minutes nudažyti neutralia raudona dėmė. Galiausiai, po kruopštaus skalavimo, stikleliai buvo stebimi Nikon-Eclipse-Ti mikroskopu.

Imunofluorescencija melanosomų perkėlimui

B16F10 ir HaCaT ląstelių auginimo sistema buvo sukurta ant konfokalinio indo, kaip aprašyta anksčiau (Lee ir kt., 2015; Lv ir kt., 2020c). Po gydymo J147 ląstelės buvo imuniniu būdu nudažytos anti-GP100 ir anti-citokeratinu pagal standartinį protokolą. Nuotraukos buvo paimtos iš Nikon-Eclipse-Ti mikroskopo.

S{0}} imunohistochemija

S-100 imunohistochemija buvo atlikta, kaip aprašyta anksčiau (Lee ir kt., 2013; Lv ir kt., 2020b). Trumpas aprašymas buvo toks: stikleliai buvo užblokuoti 5 procentais BSA 25 °C temperatūroje 1 val., o po to per naktį inkubuojami su anti-S-100 pirminiu antikūnu 4 °C temperatūroje. Kitą dieną stikleliai buvo 3 kartus plaunami TBST tirpalu ir inkubuojami su antriniu antikūnu. Tada skaidrės buvo apdorotos aminoetilkarbazolu, kad būtų sukurtos sekcijos, ir buvo stebimos mikroskopu.

Atvirkštinė transkripcija – PGR

Bendra ląstelių RNR buvo ekstrahuota TRIzol reagentu ir kiekybiškai įvertinta spektrofotometriškai. Tada SuperScript II atvirkštinė transkriptazė buvo naudojama vienos grandinės sintezeicDNR pagal gamybos instrukcijas.Oligonukleotidų pradmenys buvo įsigyti iš GenScript(Nankinas, Kinija). SekosMITFgenų pradmenys yra 5′- AGAGCAGGGCAGAGAGTGAGTG -3′, 5′-AACTTGATTCCAGGCTGATGATGTC -3′. SekosGAPDHgenaspradmenys yra 5′– AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3′, 5′- TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA -3′. PGR produktai buvoatskirtas elektroforezės būdu ant 1 procento agarozės gelių ir aptiktasultravioletinėje šviesoje (Lee ir kt., 2013 m).

Western blotavimas

Baltymai (40 ug) buvo atskirti SDS-PAGE geliais ir perkeliami į nitroceliuliozės filtro (NC) membranas elektroforezės perdavimo sistema (Bio-Rad). NC membranos buvo užblokuotos 3 procentų BSA TBST tirpale kambario temperatūroje 1, 5 valandos. Tada membranos buvo inkubuojamos su pirminiais antikūnais 4 laipsnių temperatūroje per naktį. Kitą dieną blotai buvo 3 kartus plaunami TBST tirpalu, po to 1 valandą inkubuojami su peroksidaze konjuguotais antriniais antikūnais 25 laipsnių temperatūroje ir vizualizuojami naudojant sustiprintą chemiliuminescenciją (Lv ir kt., 2020d).

Melanino kiekio nustatymas zebrafish modelyje

Trumpai tariant, sinchronizuoti embrionai buvo surinkti ir išdėstyti pipete (nuo trijų iki keturių embrionų vienoje duobutėje su 200 μL embrionų terpės 96-šulinėlių plokštelėse). Tada J147 ir PTU buvo ištirpinti 0, 1 procento DMSO ir buvo pridėti į embriono terpę nuo 35 iki 60 valandų (25 valandų ekspozicija). Stereomikroskopu buvo stebima J147 įtaka zebrafish melanogenezei (Zheng J. et al., 2018).

Fenotipu pagrįstas įvertinimas ir UVB sukelta hiperpigmentacija jūrų kiaulytės modelis

Iš Laboratorinių gyvūnų mokslo instituto (Pekinas, Kinija) įsigytos 8 rudos jūrų kiaulytės (6 sav., maždaug 250–300 g). Šios jūrų kiaulytės buvo laikomos vienos pastovios temperatūros ir drėgmės patalpoje 12-h šviesos / tamsos ciklu. Kiekvieno gyvūno nugaros atskiros sritys (1 cm skersmens apskritimas) buvo veikiamos 500 mJ/cm2 UVB (Sigma SH-4, Šanchajus, Kinija) kartą per dieną 1 savaitę, kad būtų sukurtas hiperpigmentacijos modelis. Tada nešiklis (PEG400/EtOH=7:3) ir J147 (1 proc.) buvo duodami į hiperpigmentuotas sritis (20 μL tirpalo vienam apskritimui) du kartus per dieną 3 savaites. Pigmentacijos laipsnis buvo įvertintas apskaičiuojant ΔL reikšmę pagal L reikšmę, išmatuotą spektrofotometru (YS3010, 3nh, Shenzhen, Kinija), taip: ΔL=L (kiekvieną dieną matuojama)-L (0 dieną) (Lee ir kt., 2013; Lv ir kt., 2020b). Visas šio tyrimo procedūras su gyvūnais patvirtino Čangdžou universiteto gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas.

Statistinė analizė

REZULTATAI

J147 Sumažėjusi melanogenezė ir dendritų skaičius B16F10 ląstelėse

J147 struktūra parodyta 1A paveiksle. Pirma, buvo atliktas ląstelių gyvybingumo eksperimentas, siekiant ištirti, ar J147 buvo citotoksiškas B16F10 ląstelėms. Kaip parodyta 1B paveiksle, vartojant 1–8 μM dozavimo intervalą po 48 valandų, citotoksinio J147 poveikio nepastebėta. Tada mes ištyrėme J147 įtaką melanino sintezei. Kaip parodyta 1C paveiksle, J147 slopino bazinę melanino sintezę. -MSH žymiai skatina melanogenezę melanocituose. -MSH sukeltas melanogenezės padidėjimas po gydymo J147 buvo pakeistas. Nuosekliai Masson – Fontana amoniakinio sidabro dažymas parodė, kad J147 žymiai sumažino melanino kiekį B16F10 ląstelėse su arba be -MSH (1D pav.). Be to, lyginant su neapdorotomis ląstelėmis, dendritų skaičius ir ilgis bei melanino koncentracija dendrituose taip pat sumažėjo (1D pav.). Rezultatai rodo, kad J147 sumažino melanogenezę ir dendrito susidarymą be citotoksinio poveikio.

J147 slopino ląstelių tirozinazės aktyvumą ir tirozinazės ekspresiją, TRP-1, TRP-2

Melanogenezėje dalyvavo tirozinazės baltymų šeima (tirozinazė, TRP-1 ir TRP-2). Tarp jų tirozinazės yra pagrindiniai fermentai, reguliuojantys melanino biosintezės kelią (D'Mello ir kt., 2016). Norėdami nustatyti, ar J147 veikia tirozinazės aktyvumą, pirmiausia panaudojome L-DOPA oksidacijos metodą, kad nustatytume J147 poveikį ląstelių tirozinazės aktyvumui. Nustatyta, kad J147 (1–4 μM) daro didelį slopinamąjį poveikį ląstelių tirozinazės aktyvumui, priklausomai nuo dozės B16F10 ląstelėse (2A pav.). Tada buvo atliktas grybų tirozinazės aktyvumo tyrimas, siekiant nustatyti tiesioginį J147 poveikį tirozinazės aktyvumui. Kaip parodyta 2B paveiksle, jokio slopinamojo poveikio nepastebėta, o tai rodo, kad J147 neturėjo įtakos grybų tirozinazės fermentiniam aktyvumui (2B pav.). Kaip žinome, melanogenezę valdo tų tirozinazių aktyvumas ir kiekiai. Siekiant ištirti, ar J147 anti-melanogeninis poveikis yra susijęs su tirozinazės ekspresija, buvo atlikta Western blot analizė. Kaip parodyta 2C paveiksle, tirozinazės ekspresijos lygis buvo žymiai sumažintas po J147 gydymo su -MSH arba be jo, ir tokie patys rezultatai buvo pastebėti ir TRP-1 bei TRP-2 ekspresijoje. Šie stebėjimai parodė, kad J147 slopino ląstelių tirozinazės aktyvumą ir melanogenezę, sumažindamas tirozinazės, TRP-1 ir TRP-2 ekspresijos lygius.

J147 slopino melanosomų transportavimą reguliuodamas miozino Va, Rab27a ir Cdc42 ekspresiją

Žmogaus odos pigmentaciją lemia melanino sintezė, taip pat melanino pasiskirstymas. Žinduolių melanocituose melaninas daugiausia gaminamas ląstelės kūne irmigruoja išilgai aktino gijųir mikrovamzdelius į dendritus ir galiausiaiį gretimus keratinocitus, kad baigtųpaskirstymasprocesas (Ohbayashi ir Fukuda, 2012 m). Kaip parodyta1D pav, J147 žymiai sumažino dendrito susidarymą.Be to, melanino koncentracija dendrituose taip pat buvosumažėjo, nes melanino pigmentas buvo agreguotas perinukleariniameregionuose. Tada mes kartu auginome B16F10 ir HaCaT ląstelesištirti, ar J147 turi įtakosmelanosomų perkėlimas įkeratinocitai konfokaliniu mikroskopu. Paskirstymasmelaninas buvo pastebėtas HaCaT ląstelėse bendroje kultūrojemodelis (3A pav). Priešingai, o bendros kultūros modelis buvoapdorotas J147 48 valandas, melanosomų granuliuoti signalaiHaCaT ląstelės buvo reikšmingossumažintas (3A pav).

Norėdami dar labiau išsiaiškinti pagrindinį J147 melanosomų perdavimo slopinimo mechanizmą, ištyrėme keletą esminių veiksnių, susijusių su melanosomų transportavimu. KIF5b tarpininkauja į išorę melanosomų transportavimui išilgai mikrotubulių, o Rab27a Melanophilin-Myosin Va kompleksas prisideda prie melanosomų pernešimo išilgai aktino gijų melanocituose (Reiner ir kt., 2020). Be to, Cdc42 stimuliuoja dendritų susidarymą melanocituose, kurie taip pat atlieka esminį vaidmenį melanosomų transporte. Kaip parodyta 3B paveiksle, Cdc42, Myosin Va ir Rab27a, bet ne KIF5b, ekspresija žymiai sumažėjo po gydymo J147, kai buvo arba be -MSH. Mūsų išvados parodė, kad J147 slopino melanosomų transportavimą sumažindamas Myosin Va, Rab27a ir Cdc42 ekspresiją.

J147 pagreitintas MITF degradavimas

MITF yra vienas iš pagrindinių melanogenezės reguliatorių ir kontroliuoja tirozinazės, TRP-1, TRP-2, Cdc42 ir Rab27a genų transkripciją (Noguchi ir kt., 2016; Kim ir kt., 2019). ). Pirmiausia ištyrėme J147 įtaką MITF nuorašams. Kaip parodyta 4A paveiksle, -MSH žymiai padidino MITF transkripciją, tačiau po gydymo J147 pokyčių nepastebėta, o tai rodo, kad J147 nesumažina MITF ekspresijos. Toliau ištyrėme, ar J147 turi įtakos MITF vertimui. Kaip parodyta 4B paveiksle, po gydymo -MSH MITF baltymų kiekis padidėjo, pasiekė aukščiausią tašką po 4 valandų ir pradėjo mažėti po 8 valandų (4B pav.). Kitaip tariant, MITF baltymų kiekis nesumažėjo praėjus 4 valandoms po gydymo J147, tačiau po 8 valandų MITF baltymų lygis greitai sumažėjo iki neaptinkamo lygio, o tai rodo, kad J147 neturi įtakos MITF transliacijai, bet pastebimai pagreitina MITF baltymų skaidymą.

J147 slopinama melanogenezė per MEK / ERK signalizacijos kelią

Mitogeno aktyvuotų baltymų kinazių (MAPK) signalizacijos kelias, įskaitant ekstraląstelinio signalo reguliuojamą baltymų kinazę (ERK), p38 ir c-jun N-galinę kinazę (JNK), vaidina lemiamą vaidmenį pigmentacijoje (Lee ir kt., 2013). Yra žinoma, kad ERK fosforilinimas palengvina MITF skilimą ir galiausiai išsklaido melanogeninius dirgiklius, o tai yra pagrindinis neigiamo grįžtamojo ryšio mechanizmas (Kwon ir kt., 2017). Tačiau p38 ir JNK kelio funkcija išlieka prieštaringa. Taigi mes ištyrėme J147 poveikį MAPK signalizacijos keliams. Kaip parodyta 5A paveiksle, J147 suaktyvino MEK / ERK ir p38, tuo tarpu JNK signalizacijos kelio fosforilinimui įtakos nerasta.

Daugiau informacijos: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501