RNA M6 A skaitytuvas YTHDF2 kontroliuoja NK ląstelių priešnavikinį ir antivirusinį imunitetą, 6 dalis

Metastazavusios melanomos modelis ir MCMV iššūkis

B16F10 ląstelės (105) buvo suleistos į veną pelėms. Praėjus 14 dienų po injekcijos, pelės buvo nužudytos pomirtinei analizei. Metastazuojantys mazgeliai plaučiuose buvo analizuojami makroskopiškai ir suskaičiuoti. B16F10 ląstelių liniją pateikė Hua Yu (Vilties miestas, Los Andželas, Kalifornija). Ythdf2ΔNK ir Ythdf2WT pelės buvo užkrėstos ip injekcija Smith padermės MCMV (2,5 × 104 PFU), kuri buvo įsigyta iš American Type Culture Collection (VR{11}}). Periferinio kraujo mėginiai buvo paimti atliekant submandibulinę punkciją 0, 4 ir 7 dienomis po užsikrėtimo.

Plaučių metastazių mazgai – tai mazgai, susidarę piktybinių navikų ląstelių iš kitų vietų, kurios per kraują ar limfinę sistemą migruoja į plaučius. Daugeliui pacientų tai yra įprastas plaučių vėžio pasireiškimas.

Tačiau, nors plaučių metastazių mazgai kelia grėsmę pacientų fizinei sveikatai, tiesioginio ryšio tarp to ir atminties nėra. Todėl turėtume aktyviai kovoti su plaučių vėžio ir plaučių metastazių mazgelių iššūkiais ir neleisti neigiamoms emocijoms bei nerimui paveikti mūsų fizinę ir psichinę sveikatą.

Tuo pačiu metu mes galime išlaikyti ir pagerinti atmintį naudodami keletą teigiamų metodų. Pavyzdžiui, lavinkite atmintį, pavyzdžiui, matematinius skaičiavimus, skaitymą, muzikos klausymąsi, žaidimus ir pan. Be to, laikytis gerų gyvenimo įpročių, tokių kaip reguliari mankšta, pakankamai miegoti, sveikai maitintis ir pan. pagerinti mūsų atmintį.

Svarbiausia išlaikyti teigiamą požiūrį. Kad ir su kokiais sunkumais susidurtumėte, turite tikėti savo jėgomis ir nervų sistemos lankstumu, o per teigiamus koregavimus ir atsakymus galiausiai sėkmingai įveiksite sunkumus.

Trumpai tariant, nors metastazuojantys mazgeliai plaučiuose kelia grėsmę fizinei sveikatai, jie nėra tiesiogiai susiję su atmintimi. Turėtume su tuo susitaikyti teigiamai ir palaikyti bei pagerinti atmintį koreguodami savo gyvenimo būdą ir išlaikydami gerą požiūrį. Matyti, kad turime pagerinti atmintį, o Cistanche deserticola gali žymiai pagerinti atmintį, nes Cistanche deserticola taip pat gali reguliuoti neuromediatorių pusiausvyrą, pavyzdžiui, padidinti acetilcholino ir augimo faktorių kiekį. Šios medžiagos labai svarbios atminčiai ir mokymuisi. Be to, Cistanche deserticola taip pat gali pagerinti kraujotaką ir skatinti deguonies tiekimą, o tai gali užtikrinti, kad smegenys gautų pakankamai maistinių medžiagų ir energijos, taip pagerinant smegenų gyvybingumą ir ištvermę. Matyti, kad turime pagerinti atmintį, o Cistanche deserticola gali žymiai pagerinti atmintį, nes Cistanche deserticola taip pat gali reguliuoti neuromediatorių pusiausvyrą, pavyzdžiui, padidinti acetilcholino ir augimo faktorių kiekį. Šios medžiagos labai svarbios atminčiai ir mokymuisi. Be to, Cistanche deserticola taip pat gali pagerinti kraujotaką ir skatinti deguonies tiekimą, o tai gali užtikrinti, kad smegenys gautų pakankamai maistinių medžiagų ir energijos, taip pagerinant smegenų gyvybingumą ir ištvermę.

Norėdami pagerinti atmintį, spustelėkite žinokite papildus

Norėdami išmatuoti virusų kiekį periferiniame kraujyje, blužnyje ir kepenyse, DNR buvo išskirta naudojant QIAGEN DNeasy kraujo ir audinių rinkinį, skirtą qPCR analizei. Buvo naudojami šie pradmenys: MCMV-IE1, 59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (pirmyn) ir MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (atvirkščiai).

Pelės gydymas in vivo IL-15

In vivo pelėms gydyti IL-15, Ythdf2ΔNK ir Ythdf2WTpelėms 5 d. buvo švirkščiama 2 µg ip rekombinantinio žmogaus IL-15 (kat. Nr. 745101; Nacionalinis vėžio institutas). Tada apdorotos ir kontrolinės pelės buvo eutanazuotos srauto citometrinei analizei.

Srauto citometrija

Vienos ląstelės suspensijos buvo paruoštos iš Ythdf2ΔNK ir Ythdf2WT pelių BM, kraujo, blužnies, kepenų ir plaučių, kaip aprašyta anksčiau (Wang ir kt., 2018b). Srauto citometrijos analizė ir ląstelių rūšiavimas buvo atlikti atitinkamai LSRFortessa X-20 ir FACSAriaFusion srauto citometru (BD Biosciences).

Duomenys buvo analizuojami naudojant NovoExpress programinę įrangą (Agilent Technologies).

Buvo naudojami šie fluorescenciniais dažais pažymėti antikūnai iš BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen arba Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5). ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7), CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzimas B (QA16A02), perforinas (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226 (TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), aneksino V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) ir Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), fosfo-S6 baltymą ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) ir phospho-Stat5 (Tyr694, #9539).

Norint įvertinti NK ląstelių proliferaciją, ląstelės buvo paženklintos 5 µM CTV (Invitrogen) pagal gamintojo protokolą prieš perkeliant jas į recipiento peles. Intracelulinis Ki67, Tbet ir Eomes dažymas buvo atliktas fiksuojant ir permeabilizuojant naudojant Foxp3 / Transkripcijos faktoriaus dažymo rinkinį (eBioscience).

Fosforilintų baltymų aptikimui išgrynintos blužnies NK ląstelės buvo iš anksto apdorotos rekombinantiniu žmogaus IL-15 (50 ng/ml) 1 val., o po to fiksuotos Phosflow Fix Buffer I, po to permeabilizuotos Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) ir dažytos. antikūnų.

Adoptyvinis ląstelių perkėlimas

Norint įvertinti Ythdf2 trūkumo poveikį NK ląstelių brendimui, 5 × 106 BM ląstelių mišinys santykiu 1:1 iš CD45.1 arba Ythdf2ΔNK CD45.2 pelių buvo perkeltas į Rag2-/-Il2rg-/-peles. Recipientų atkūrimas buvo įvertintas srauto citometrija 8 savaites po transplantacijos.

Atliekant limfopenijos sukeltos homeostatinės proliferacijos eksperimentus, vienodas išgrynintų blužnies NK ląstelių skaičius iš CD45.1 arba Ythdf2ΔNK CD45.2 pelių buvo perkeltas į Rag2−/−Il2rg−/− peles, po to buvo įvertintas santykinis perkeltų WT ir Ythdf2ΔNK NKleen NK ląstelių procentas. Rag2−/−Il2rg−/− recipientų srauto citometrija nurodytais laiko momentais.

Metastazavusiam melanomamodeliui Rag2−/−Il2rg−/− pelėms į veną buvo sušvirkštos 106 IL-2-išsiplėtusios NK ląstelės iš Ythdf2ΔNK arba Ythdf2WTmice. Po 1 dienos pelėms į veną buvo sušvirkštos B16F10 ląstelės (105). Praėjus 14 dienų po injekcijos, pelės buvo nužudytos pomirtinei analizei. Kai kuriuose eksperimentuose ląstelės buvo paženklintos CTV (5 µM, Invitrogen), kad būtų galima atsekti ląstelių proliferaciją prieš perkėlimą.

In vivo prekybos žmonėmis tyrimas

Norint nustatyti NK ląstelių judėjimą iš BM į periferinį kraują, į C57BL/6 peles buvo sušvirkštas 1 µg iv APC pažymėtas anti-CD45 antikūnas. Praėjus dviem minutėms po antikūnų injekcijos, pelės buvo nedelsiant eutanazuotos, o BM ląstelės buvo surinktos srauto citometrijai, kai ląstelės buvo nudažytos CD3 ir NK1.1 antikūnais. Parenchiminės NK ląstelės buvo nustatytos be CD45 dažymo, o sinusoidinės NK ląstelės buvo identifikuotos pagal CD45 ženklinimą. Todėl NK ląstelių santykis sinusoiduose (CD45+) ir parenchiminiuose regionuose (CD45−) rodo NK ląstelių judėjimą iš KM toperiferinio kraujo esant pastoviai būsenai.

Realaus laiko RT-qPCR ir imunoblotingas

RNR buvo išskirta naudojant RNeasy Mini Kit (QIAGEN) ir po to atvirkštinė transkribuota į cDNR naudojant PrimeScript RT Reagent Kit with gDNA Eraser (Takara Bio) pagal gamintojo instrukcijas. mRNR ekspresijos lygiai buvo analizuojami naudojant SYBRGreen PCR Master Mix ir QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR sistemą (abi iš Thermo Fisher Scientific). Pradmenų sekos išvardytos S1 lentelėje.

Imunoblotavimas buvo atliktas pagal standartines procedūras, kaip aprašyta anksčiau (Denget al., 2015; Yu ir kt., 2006). Buvo naudojami šie antikūnai: METTL3 (kat. Nr. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (kat. Nr. 26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (kat. Nr. 17479-1-AP ; Proteintech), YTHDF2 (kat. Nr. RN123PW; MBL), YTHDF3 (kat. Nr..{11}}AP; Proteintech), ALKBH5 (kat. Nr. ab195377; Abcam), FTO (kat. Nr. ab124892); Abcam), MDM2 (kat. Nr. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (kat. Nr. PA5-29949; Invitrogen) ir -aktinas (kat. Nr. {{20) }}Ig; Proteintech).

siRNR numušimo tyrimas

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90%, matuojant srauto citometrija. Geneknockdown efektyvumas buvo nustatytas qPCR ir imunoblotingu. Praėjus 3 dienoms po transfekcijos, ląstelių apoptozė ir proliferacija buvo analizuojami srauto citometrija, kaip aprašyta aukščiau.

Liuciferazės reporterio tyrimas

Ythdf2 promotoriaus sritis nuo –2,000 bp iki +100 bp TSS buvo amplifikuota iš pelių NK ląstelių ir klonuota į apGL{4}}Basic Liuciferazės reporterio vektorių (Promega), kad būtų generuojamas apGL{ {5}}Ythdf2 reporterio plazmidė. HEK293T ląstelės, įsigytos iš ATCC, buvo kotransfekuotos pGL4-Ythdf2 reporterinėmis plazmidėmis, STAT5a arba STAT5b ekspresijos plazmidėmis arba anempty vektoriumi kartu su pRL-TK Renilla reporterio plazmide (Promega), kad būtų normalizuotas transfekcijos efektyvumas. Ląstelės buvo surinktos lizei praėjus 24 valandoms po transfekcijos, o luciferazės aktyvumas buvo kiekybiškai įvertintas fluorimetriškai naudojant „Dual-LuciferaseSystem“ (Promega). Pradmenų sekos, skirtos klonuoti Ythdf2 promotorių ir STAT5a ir STAT5b pernelyg didelės ekspresijos plazmides, pateiktos S1 lentelėje.

ChIP tyrimai

ChIP tyrimai buvo atlikti naudojant Pierce Magnetic ChIP rinkinį (kat. Nr. 26157; Thermo Fisher Scientific) pagal gamintojo instrukcijas. Trumpai tariant, toks pat kiekis ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694, kat. Nr. 9351; Cell Signaling Technologies) arba atitinkamo kontrolinio normalaus triušio IgG buvo atskirai panaudotas kryžminio ryšio DNR ir baltymų kompleksams, gautiems iš 5 × 106 išgrynintos pirminės pelės NK ląstelės, kurios buvo iš anksto apdorotos IL-15 (50 ng/ml) 1 val. Po to, kai kryžminis ryšys buvo panaikintas, DNR, imunoprecipituota nurodytu antikūnu, buvo ištirta qPCR. Visų pradmenų sekos išvardytos S1 lentelėje.

Ex vivo citotoksiškumo tyrimas

Ex vivo NK ląstelių citotoksiškumas buvo įvertintas standartiniais 51Crrlease tyrimais. Pelės limfomos ląstelių linijos RMA-S (MHC klasė Ideficient) ir RMA (MHC I klasės pakankamai) ląstelės, Andre´Veillette (McGill universitetas, Monrealis, Kanada) dovana, buvo naudojamos astarget ląstelės. Pelės buvo gydomos ip injekcija poliinozino:policitidilo rūgštimi [poli (I: C); 200 µg/pelėms] 18 val. Poli (I: C) aktyvuotos NK ląstelės buvo išskirtos iš blužnies naudojant EasySepMouse NK ląstelių izoliavimo rinkinį (STEMCELL Technologies). Išgrynintos NK ląstelės buvo kultivuojamos su tikslinėmis ląstelėmis santykiu 5:1, 2,5:1 ir 1,25:1, dalyvaujant IL-2 (50 V/ml).

m6A-seq

Išgrynintos blužnies NK ląstelės buvo išplėstos IL-2 (1,000 U/ml, kat. Nr. Bulk Ro 23-6019; Nacionalinis vėžio institutas) in vitro 7 dienas. Bendra RNR buvo išskirta TRIzol reagentu (Thermo FisherScientific) iš 50 milijonų IL-2 išplėstų NK ląstelių. Poliadenilinta RNR buvo dar labiau praturtinta iš bendros RNR, naudojant Dynabeads mRNR valymo rinkinį (Invitrogen). mRNR mėginiai buvo suskaidyti į 100- nt ilgio fragmentus naudojant RNR suskaidymo reagentus (Invitrogen).

Fragmentuota mRNR (5 µgmRNR) buvo naudojama m6A imunoprecipitacijai naudojant m6Aantikūną (202003; Synaptic), vadovaujantis standartiniu Magna MeRIP m6A rinkinio (Merck Millipore) protokolu. RNR buvo praturtinta naudojant RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research) bibliotekai generuoti naudojant KAPA RNA HyperPrep rinkinį (Roche). Sekvenavimas buvo atliktas „City of Hope“ genomikos įstaigoje „Illumina HiSeq 2500“ įrenginiu su vieno skaitymo 50-bp režimu. Sekos skaitymai buvo susieti su pelės genomu naudojant HISAT2 v101 programinę įrangą (Kim ir kt., 2015).

Imunoprecipitacijos ir įvesties bibliotekų žemėlapiai buvo pateikti naudojant R paketą exomePeak (Meng ir kt., 2014). m6Apeaks buvo vizualizuotas naudojant Integrative Genomics Viewer programinę įrangą (http://www.igv.org). M6A surišimo motyvą išanalizavo MEME (https://meme-suite.org) ir HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Pašauktos smailės buvo anotuotos sankirtoje su genų architektūra, naudojant Rpackage ChIPseeker (Yu ir kt., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 arbalog2 (keitimas kartus)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 mln. IL-2-išsiplėtusių NK ląstelių buvo surinkta ir du kartus plaunama šaltu PBS, o ląstelių nuosėdos buvo lizuotos 2 tūrio lizės buferiu (10 mM Hepes, pH 7,6, 150). mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5 % NP-40, 0,5 mM ditiotreitolio, 1:100 proteazės inhibitorių kokteilio [Thermo Fisher Scientific] ir 400 U/ml SUPERazės-In RNazės inhibitoriaus [Thermo Fisher Scientific]).

Lizatas buvo inkubuojamas ant ledo 5 minutes ir centrifuguojamas 15 minučių, kad išsivalytų lizatas. Viena dešimtoji ląstelių lizato tūrio buvo išsaugota kaip įvestis. Ląstelių lizatas buvo inkubuojamas su 5 µg anti-YTHDF2 (kat. Nr. RN123PW; MBL), kuris buvo sujungtas su A proteino magnetinėmis granulėmis (kat. Nr. 10001D; Invitrogen) 4 laipsnių temperatūroje 2 valandas švelniai sukant. Po to karoliukai penkis kartus plaunami 1 ml ledinio plovimo buferio (50 mM HEPES, pH 7,6, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05 % NP-40, 0,5 mM ditiotreitolio ir 200 V/ml RNazės). inhibitorius).

Imunoprecipituoti mėginiai buvo virškinami proteinaze K plovimo buferyje, papildytame 1% SDS ir 2 mg/ml proteinazės K (ThermoFisher Scientific) ir inkubuojami kratant 1200 aps./min. 55 laipsnių temperatūroje 1 valandą. Bendra RNR buvo išgauta tiek iš įvestos, tiek iš imuniniu būdu nusodintos RNR, pridedant 5 tūrių TRIzol reagento, po to Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

CDNR biblioteka buvo sukurta naudojant KAPA RNA HyperPrep rinkinį (Roche) ir sekvenuota Illumina HiSeq 2500 platformoje. Didžiausi iškvietimo rezultatai naudojant imunoprecipitaciją ir įvesties bibliotekas buvo sukurti naudojant R paketą RIPSeeker (Li ir kt., 2013). HOMER buvo naudojamas ieškant duomenų pasiskirstymo smailių regionuose motyvams. Vadinamos smailės buvo anotuotos sankirtos su genu ir transkripto architektūra naudojant ChIPpeakAnno (Zhu ir kt., 2010).

mRNR stabilumo tyrimas

Išgrynintos blužnies NK ląstelės iš Ythdf2ΔNK ir Ythdf2WT pelių buvo kultivuojamos su IL-15 (50 ng/ml). Praėjus 3 dienoms po auginimo, ląstelės buvo apdorotos aktinomicinu D (5 µg/ml, kat. Nr. A9415; Sigma) nurodytą laiką. Neapdorotos ląstelės buvo panaudotos 0 val. Ląstelės buvo surinktos nurodytu laiku, o bendra RNR buvo išskirta iš ląstelių qPCR. MRNR pusinės eliminacijos laikas buvo apskaičiuotas naudojant metodą, kurį anksčiau aprašė Weng ir kt. (2018). Pradmenų sekos išvardytos S1 lentelėje.

Internetinės duomenų bazės analizė

Mes panaudojome internetinį išteklį BioGPS (//biogps.org), kad analizuotume specifinę Ythdf2 ekspresiją. RNR-seqdata rinkiniai buvo iš GEO, kurių registracijos Nr. GSE106138, GSE113214 ir GSE25672. Normalizuoti duomenys iš RNR-seq analizės buvo eksportuoti, o genų ekspresijos z balas buvo vizualizuotas naudojant Heatmap.2 funkciją gplots bibliotekoje

Statistika

Nesuporuoti Studento t testai (dviejų dalių) buvo atlikti naudojant programinę įrangą GraphPad Prism. Vienpusė arba dvipusė ANOVA buvo atlikta, kai buvo lyginamos trys ar daugiau nepriklausomų grupių. P reikšmės buvo pakoreguotos daugkartiniam palyginimui, naudojant Holm-Sˇ´ıdak procedūrą. P < 0.05 buvo laikomas reikšmingu. *, P < {{10}}.05; **, P < 0,01; ir ***, P < 0,001.

Papildoma medžiaga internete

S1 pav. parodytas YTHDF2 baltymų kiekis imuninėse ląstelėse, įskaitant NK ląsteles, reaguojančias į IL-15 stimuliaciją, MCMV infekciją ir naviko progresavimą; pelių su NKląstelėms specifiniu Ythdf2 ištrynimu generavimas. Fig. S2 rodo viruso titrus blužnyje ir kepenyse iš pelių, užsikrėtusių MCMV, ir Ly49H+ ir/arba Ly49D+ NKląstelių procentą ir absoliutų skaičių pelėse, užkrėstose MCMV. S3 paveikslas rodo Ythdf2WT ir Ythdf2ΔNK pelių NK ląstelių aktyvinančių ir slopinančių receptorių proliferaciją, išgyvenimą, brendimą ir ekspresiją. S4 pav. parodytas YTHDF2 ekspresijos reguliavimas IL-15-STAT5 signalizavimu ir IL-15 receptorių komponentų ekspresija, PI3K–AKT kelias ir MEK–ERK kelias Ythdf2WT ir Ythdf2ΔNK ląstelėse. pelėms. Fig. S5 rodo transkripto pločio RNR-seq, m6A-seq ir RIP-seq tyrimus NK ląstelėse. S1 lentelėje išvardyti tyrime naudojami pradmenys.

Duomenų prieinamumas

RNA-seq, m6A-seq ir RIP-seq duomenys buvo deponuoti Nacionaliniame biotechnologijos informacijos centre GEO pagal prisijungimo Nr. GSE174027. Likusius duomenis, patvirtinančius šio tyrimo išvadas, galima gauti iš atitinkamų autorių paprašius.

Padėkos

Šį darbą rėmė Nacionaliniai sveikatos institutai (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 ir CA210087), Leukemijos ir limfomos draugija (1364-19), Kalifornijos regeneracinės medicinos institutas ({{DISC2COVID). 9}}), ir Breast Cancer Alliance 2021 išskirtinio projekto apdovanojimą. Šis darbas taip pat buvo iš dalies paremtas USDA apdovanojimu (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Autorių indėlis: S. Ma, J. Yu ir MA Caligiuri sumanė ir sukūrė projektą. S. Ma, J. Yan, J. Zhang ir J. Yu atliko eksperimentus ir (arba) duomenų analizę. Z. Chen, L.-S. Wang, JC Sun ir J. Chen prisidėjo reagentais ir materialine parama. S. Ma, J. Yu, J. Chen ir MA Caligiuri parašė, recenzavo ir (arba) pataisė straipsnį. Visi autoriai aptarė rezultatus ir pakomentavo rankraštį.

Atskleidimas: J. Chen pranešė „kita“ iš „Genovel BiotechCorp. už pateikto darbo ribų ir yra „Genovel Biotech Corp.“ mokslinis įkūrėjas ir rasės onkologijos mokslinis patarėjas. Apie kitus atskleidimus nepranešta.

Nuorodos

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill ir LL Lanier. 2002. Tiesioginis citomegaloviruso atpažinimas aktyvinant ir slopinant NKląstelių receptorius. Mokslas. 296:1323–1326.

2. Ayala, YM, T. Misteli ir FE Baralle. 2008. TDP-43 reguliuoja retinoblastomos baltymo fosforilinimą slopindamas nuo ciklino priklausomą kinazės 6 ekspresiją. Proc. Natl. Akad. Sci. JAV. 105:3785–3789.

3. Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han ir kt. 2017. Su promotoriumi susietas METTL3 palaiko mieloidinę leukemiją nuo m6A priklausomu transliacijos kontrole. Gamta. 552:126–131.

4. Becknell, B. ir MA Caligiuri. 2005. Interleukinas-2, interleukinas-15 ir jų vaidmuo žmogaus natūraliose žudikų ląstelėse. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim ir RA de Bruin. 2013. Ląstelių ciklo transkripcijos kontrolė G1 ir S fazių metu. Nat. kun. Mol. Cell Biol. 14:518–528.

6.Bezman, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath ir LL Lanier. Imunologinio genomo projekto konsorciumas. 2012. Natūralių žudikų ląstelių tapatumo ir aktyvavimo molekulinis apibrėžimas. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7. Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Paxton, D. Anderson, J. Eisenmann, K. Grabstein ir MA Caligiuri. 1994. Interleukinas (IL) 15 yra naujas citokinas, kuris per IL-2 receptoriaus komponentus aktyvuoja natūralias žmogaus žudikes. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8. Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann ir MA Caligiuri. 1997. Galimas interleukino-15 vaidmuo reguliuojant žmogaus natūralių žudikų ląstelių išgyvenimą.J. Clin. Investuoti. 99:937–943.

9. Chan, CJ, MJ Smyth ir L. Martinet. 2014. Natūralių žudikų ląstelių aktyvacijos molekuliniai mechanizmai reaguojant į ląstelių stresą. Ląstelių mirties skirtumas. 21:5–14.

10. Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H. Wang, L. Yi ir kt. 2016. EGFR-CAR NK ląstelių ir onkolitinio herpes simplex viruso 1 kombinuota krūties vėžio smegenų metastazių terapija. Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com