Iš trichozantų masės išskirtų sudedamųjų dalių balinimo aktyvumas

Kontaktas:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Rongchao Zhang, 1, 2 Xiuqin Hu, 1 Bo Zhang, 1 Zhen Wang, 1 Chunxiang Hao, 1 Jie Xin, 1 ir Qingmei Guo 2

Santrauka: Balinimaskosmetikos rinka turi šviesią ateitį, o gryni natūralūs tradicinės kinų medicinos balinamieji produktai visada buvo tyrimų taškas. Šiame tyrime pirmą kartą buvo išskirta ir išgryninta balinanti kinų medicinos veiklioji medžiaga Trichozanthes minkštimas ir josbalinimasmechanizmas buvo patikslintas. Norint juos išskirti ir išvalyti, buvo naudojami chromatografiniai metodai, tokie kaip silikagelis, ODS ir HPLC. B16 ląstelės buvo naudojamos antioksidaciniam aktyvumui matuoti,tirozinazėaktyvumas ir melanino šalinimo veikla. Iš viso buvo išskirta 20 junginių, įskaitant p-hidroksibenzaldehidą (1), salicilo rūgštį (2), vanilo rūgštį (3), izovanilo rūgštį (4), protokatechuatą (5), trans-cinamono rūgštį (6), {{9 }}kumaro rūgštis (7), trans-ferulo rūgštis (8), drekslerolis-B (9), cikloheksanolio 3-palmitatas (10), 5-acetoksimetil-2-furaldehidas (11), 5-hidroksimetilfurfurolas (12), diosmetinas (13), apigeninas (14), chrizoberilas (15), liuteolinas (16), 4′-hidroksikutellarinas (17), kvercetinas (18), 3′,{{31} }dihidroksi-7-(-D-gliukopiranoziloksi)-4′-metoksiflavonas (19) ir ciprofloksacino-7-O- -D-gliukozidas (20). Tarp jų 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ir 20 junginiai turi gerą antioksidacinį atkuriamąjį poveikį; 3, 4, 5, 6 ir 7 junginiai turi didelį juodos spalvos slopinimą; 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ir 20 junginiai turi akivaizdų tirozino oksidazę slopinantį aktyvumą. 1e rezultatai padėjo pagrindą tolesnei Trichozanthes plaušienos išteklių plėtrai ir panaudojimui, taip pat sudaro pagrindą natūraliųbalinimaskosmetika.

Cistanche žolėyranatūralus balinamasis ingredientas.

1. Įvadas

Trichozantes kirilowii Maksimas. yra daugiametis vijoklinis augalas iš Cucurbitaceae šeimos. Jo vaisiai, sėklos, žievelė ir šaknis dažniausiai naudojami kaip tradiciniai kinų vaistai. Ilgą laiką trichozantų minkštimas dažnai išmetamas gaminant ir apdorojant spermą Trichosanthis ir Pericarpium Trichosanthis, todėl susidaro daug atliekų. Šiuo metu ataskaitose apie trichozantų minkštimą daugiausia dėmesio skiriama cukraus, aminorūgščių, vitaminų ir kitų maistinių medžiagų kiekio palyginimui [1–4]. Nėra pranešimo apie trichozantų minkštimo cheminę sudėtį. 1todėl būtina sistemingai tirti plaušienos chemines sudedamąsias dalis.

Tuo pačiu metu, sparčiai vystantis ekonomikai, kosmetika yra ne tik daug vartojama gyvenimo būdo produktai, bet ir tampa populiariausiais „būtiniausiais“ daiktais moterims. Daugelyje klasikinės kinų medicinos knygų ar materiamedicinos buvo užfiksuota, kad trichozantų minkštimas atlieka tokią funkcijąbalinimasir raukšles šalinantis poveikis [5–7]. 1e ankstesni mūsų tyrimo grupės rezultatai rodo, kad trichozantų minkštimo vandens ekstraktas buvo didesnistirozinazėslopinamasis aktyvumas, o tirozinazės slopinimo dažnis buvo apie 70 proc. 1 bendrasbalinimasvitaminas C (VC) ir arbutinas buvo naudojami kaip kontrolinės medžiagos [8]. Preliminariai buvo įrodyta, kad trichozantų minkštimo ekstraktas, slopindamas tirozinazės aktyvumą, turėjo tam tikrą balinamąjį poveikį. Todėl labai svarbu ištirti trichozantų minkštimo chemines sudedamąsias dalis ir balinimo mechanizmą.

ThebalinimasGalima apibendrinti mechanizmą, kuris slopina melanino sintezę ir pagreitina melanino perdavimą. 1e melanino susidarymo inmelanocituose procesas yra toks:tirozinazėoksiduoja tiroziną iki polimorfo BA (DOPA); po to jis oksiduojamas iki dopachinono.Po keleto metabolinių reakcijų susidaro melaninas.Tirozinazė yra vienintelis greitį ribojantis fermentas reakcijos procese, o jo veikla lemia sintezuojamo melanino kiekį. Sustiprėjus tirozinazės aktyvumui, padidėja melanino sintezė; kai slopinamas tirozinazės aktyvumas, sumažėja melanino sintezė [9]. 1e aktyvusis tirozinazės centras turi dvigubą vario aktyviąją vietą, o kiekvienas vario jonas jungiasi su 3 histidino liekanomis, turinčiomis atitinkamai 1 arba 2 valentais. Todėl redukcija su antioksidaciniu poveikiu gali sąveikauti su vario atomu aktyvioje tirozinazės vietoje arba sumažinti tarpinį junginį melanino sintezės procese, kad būtų slopinamas melanino susidarymas [10, 11]. Be to, subrendusių melanocitų pernešimo į keratinocitus slopinimas taip pat gali turėti įtakos balinimui.

Poveikiui nustatyti naudojama ląstelių kultūros technologijabalinimasant aktyvių ingredientųtirozinazėaktyvumas ir melanino gamyba melanocituose in vitro. 1e pelių melanomos ląstelių linija (B16 ląstelės) yra gauta iš pelių odos melanomos ląstelių, o jos pagrindinė struktūra, ypač susijusi su melanino sinteze, iš esmės yra tokia pati kaip žmogaus normalių melanomos ląstelių. Kadangi labai sunku kultivuoti žmogaus pirmines odos melanomos ląsteles, pelės modelis gali būti naudojamas kaip bandomoji ląstelė nustatantbalinimasveikliosios medžiagos. Todėl B16 ląstelės buvo naudojamos antioksidaciniam aktyvumui, tirozinazės aktyvumui ir melanino šalinimo aktyvumui matuoti, o balinantys aktyvūs komponentai ir susijęs mechanizmas buvo nustatyti preliminariai. 1ersults padėjo pagrindą tolesnei Trichozanthes minkštimo išteklių plėtrai ir panaudojimui, taip pat suteikė pagrindą natūralios balinančios kosmetikos kūrimui.

2. Eksperimentai

2.1. Medžiagos.

Trichosanthes trichosanthis buvo surinktas iš Hebao vaistažolių sodinimo bazės Pinyin, Jinan. 1e mėginius nustatė Šandongo tradicinės kinų medicinos universiteto profesorius QingmeiGuo. Pašalinus žievelę ir sėklas, gauta vaisiaus minkštimo dalis. Po džiovinimo šalčiu minkštimas buvo susmulkintas, sumaišytas ir galiausiai dedamas į eksikatorių tolesniam naudojimui.

šviežia cistanchesuechinakozidasefektai

2.2. Ląstelių gyvybingumas.

B-16 ląstelės (pelės melanomos ląstelės) buvo įsigytos iš KeyGEN ir laikomos DMEM terpėje, papildytoje 10 procentų galvijų vaisiaus serumo (FBS), 37 laipsnių temperatūroje drėgnoje atmosferoje su 5 procentais CO2. 1en, B-16ląstelės buvo pasėtos į 96-šulinėlių plokšteles (10 × 104 ląstelių / duobutėje) inkubuojant 24 valandas.

2.3. Įvairių ekstraktų ruošimas.

Trichosanthes kirilowii minkštimo žaliava buvo 4,5 kg. 1e minkštimas buvo mirkomas 10 karto didesniame 95 procentų etanolio kiekyje 3 kartus. 1e ekstraktai buvo sujungti ir sukoncentruoti iki maždaug 3,0 l. Anilo acetato ekstraktas buvo gautas disperguojant etanolio ekstraktą 15 l vandens, ekstrahuojant jį etilo acetatu, kol ekstraktas tapo bespalvis. 1e ekstraktai buvo sujungti ir koncentruoti sumažintame slėgyje.

Etilo acetato ekstraktas buvo sumaišytas su silikageliu (100–200 tinklelis) santykiu 1:2 (ekstraktas: silikagelis, v/ v). 1 tirpiklis buvo išgarintas, o gelis buvo rezervuotas. 1e stiklo chromatografijos kolonėlė (8{{30}} mm × 1200 mm) buvo supakuota su 200–300 akių silikageliu ir D101 makroporinga derva, tada kolonėlė buvo eliuuojama etilo acetatu, petrolio eteriu (10 proc., 25 proc., 50 proc., 75 proc. ir 100 proc.) ir metanoliu, etilo acetatu (5 proc., 10 proc., 25 proc., 50 proc. , 75 procentai ir 100 procentų ), kad surinktų kiekvieną srautą. Galiausiai kiekviena frakcija buvo surinkta ir sukonfigūruota į šias koncentracijas: 0,003125 mg/ml, 0,00625 mg/mL, 0,0125 mg/mL, 0,025 mg/mL, 0,05 mg/mL, 0,1 mg/mL, 0,25 mg/ml, 0. ml, 1,0 mg/mL ir 2,0 mg/mL, o po to naudojamas kultivuojamoms ląstelėms apdoroti. Gydymo pabaigoje į kiekvieną duobutę buvo įpilta 20 μL MTT tirpalo (5 mg/ml). 1e ląstelės buvo inkubuojamos 20 minučių 37 laipsnių temperatūroje. 1 supernatantas buvo išmestas ir į kiekvieną šulinėlį įpilta 100 μL DMSO. 1e absorbcija buvo išmatuota esant 490 nm. 1eeksperimentas buvo pakartotas 3 kartus. 1e išgyvenamumas buvo apskaičiuotas taip:

išgyvenamumo procentas=(eksperimentinė grupė tuščia grupė)/(kontrolinė grupė – tuščia grupė) × 100 procentų .

Kiekvienos frakcijos optimali koncentracija (C1) buvo apskaičiuota pagal funkcinį ryšį tarp išgyvenamumo rodiklio ir kiekvienos frakcijos koncentracijos. C1 buvo skiedžiamas 2, 4, 6 ir 8 kartus, kad gautų atitinkamai C2, C3, C4 ir C5 koncentracijas. 1e skirtingi minkštimo ekstraktai parodyti 1 lentelėje.

1 lentelė: Trichozanthes minkštimo poliariniai ekstraktai ir optimali koncentracija.

2.4. Balinimo eksperimentas

2.4.1. Antioksidantų testas.

Ląstelių gyvybingumui nustatyti buvo naudojamas MTT tyrimas (MTT rinkinys, Kaiji Biology). 1en, B-16 ląstelės buvo sėjamos į 96-šulinėlių plokšteles (10 × 104 ląstelės / duobutėje) 24 valandas ir 24 valandas apdorotos skirtingais ekstraktais arba junginiu. Po apdorojimo auginimo terpė buvo išmesta ir du kartus plaunama PBS. 1en, buvo pridėta 0,05 procento H2O2 ir ląstelės buvo kultivuojamos 4 valandas. Po to B-16 ląstelės buvo inkubuojamos 20 µL MTT tirpale (5 mg/mL) 37 laipsnių temperatūroje 4 valandas. 1en, kultūros supernatantas buvo pašalintas, o likutis ištirpintas 100 µL DMSO. 1e absorbcija buvo aptikta ties 490 nm naudojant mikroplokštelių skaitytuvą (Tecan Trading AG). 1eeksperimentai buvo atlikti lygiagrečiai 3 kartus.

2.4.2. Melanino gamybos slopinimas.

Melanino gamyba buvo nustatyta NaOH pirolizės būdu aptikus melanino kiekio ląsteles [12]. Ląstelės buvo sėjamos į 96-šulinėlių auginimo plokšteles 24 val., kai ląstelių tankis buvo 10 × 104 ląstelės/šulinėlyje.1en, ląstelės buvo apdorotos skirtingais ekstraktais arba junginiais 24 valandas. Po to ląstelių kultūros supernatantas (300 µL) buvo pašalintas, o likutis ištirpintas NaOH (1 ml, 1,0 mol/L) 24 valandas kambario temperatūroje. 1 absorbcija buvo išmatuota esant 475 nm, naudojant mikroplokštelės skaitytuvą (Tecan Trading AG). 1e eksperimentai buvo atlikti lygiagrečiai su 3 pakartojimais. 1e IC50 buvo nustatytas GraphPad Prism 5 programine įranga (GraphPad Software, Inc., San Diego, California), o arbutinas buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė (IC50 =15.6 µL).

2.4.3. Tirozinazės aktyvumo nustatymas.

Ląstelių kultūrų supernatantas buvo pašalintas, likutis ištirpintas Tritonx -100 (90 µL) irtirozinazė(10 µL, 1,0 mg/mL, Sigma, T3824 25ku). Sumaišius, mišinys inkubuojamas 37 laipsnių temperatūroje 30 min. 1e absorbcija buvo išmatuota esant 475 nm, naudojant mikroplokštelių skaitytuvą (Tecan Trading AG). 1eeksperimentai buvo atlikti lygiagrečiai 3 kartus. 1e IC50 buvo nustatytas GraphPad Prism 5 programine įranga (GraphPadSoftware, Inc., San Diegas, Kalifornija), o arbutinas buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė (IC50 =15.6 µL).

2.5. Ekstrahavimas ir izoliacija. Etilo acetato ekstraktas buvo ištirpintas metanolyje, o kolonėlė buvo užpildyta 200–300 akių silikageliu, kuris buvo subalansuotas petrolio eteriu. 1en, gradientinis eliuavimas, susidedantis iš petroleterio ir etilo acetato santykiu 2:1, 1:1 ir 1:2; etilo acetatas; etilo acetatas ir metanolis santykiu 2:1, 1:1 ir 1:2; ir metanolis buvo naudojamas kartu su TLC, kad gautų junginius A (11,5 g), B (10,4 g), C (12,1 g), D (5,2 g) ir E (6,1 g).

A buvo atskirtas poliamido kolonėlės chromatografija, naudojant dichlormetaną ir metanolį santykiu 2:1, 1:1 ir 1:2 kaip eliuavimo tirpiklį. 1e eliuatas buvo stebimas TLC. Dėmės su tuo pačiu sulaikymo koeficientu (rf ) buvo sujungtos ir buvo gauti A1 ir A2. 1en, A1 buvo paruoštas TLC, naudojant dichlormetaną ir metanolį santykiu 1:1 kaip ryškinimo agentą, ir kelis kartus išgrynintas gelio kolonėlėje. Galiausiai buvo gautas junginys 1 (17 mg) ir junginys 2 (27 mg). A2 buvo išgrynintas silikagelio kolonėlės chromatografija, eliuentu naudojant dichlormetaną ir metanolį santykiu 1:1 ir 1:2. Gautas junginys 3 (11 mg), junginys 4 (12 mg) ir junginys 5 (23 mg). B buvo atskirtas atvirkštinės fazės C18 vidutinio slėgio chromatografija (RP-C18), naudojant metanolį, vandenį gradiento eliuavimo būdu: 0 proc. ,10 proc , 15 proc , 20 proc , 25 proc , 30 proc , 35 proc., 40 proc., 50 proc., 75 proc., 90 proc. ir 100 proc. 1e srauto greitis buvo 10 mL·min-1. Buvo sujungtos 1e srauto frakcijos, turinčios tą patį rf, ir gauti B1 ir B2. B1 buvo pakartotinai išgrynintas gelio kolonėlėje, naudojant metanolį kaip eliuavimo tirpiklį. Po pakartotinio eliuavimo buvo gauti junginiai (24 mg), 7 (21 mg) ir 8 (18 mg). B2 buvo išgrynintas gelio kolonėle ir metanoliu, ir gautas junginys 9 (11 mg). C buvo atskirtas RP-C18 ir eliuuojamas metanoliu ir vandeniu 10 ml·min–1 srauto greičiu. Sujungtos 1e srauto frakcijos, turinčios tą patį rf, ir gautas C1, C2 ir C3. C1 buvo paruoštas gelio kolonėlėje ir eliuuojamas metanoliu, ir gautas junginys 10 (13 mg). C2 buvo atskirtas silikagelio kolonėle ir eliuuojamas etilo acetatu ir metanoliu, gradientiniu eliuavimu santykiu 2:1, 1:1 ir 1:2. C2 buvo išgrynintas preparatine skystosios fazės ekstrakcija ir 11 (15 mg) ir 12 junginiais. C3 buvo atskirtas poliamido kolonėlėje, išplautas metanoliu ir vandeniu ir išgrynintas HPLC. Buvo gauti 13 (34 mg), 14 (42 mg) ir 15 (38 mg) junginiai. D buvo atskirtas RP-C18 ir eliuuotas metanoliu ir vandeniu.1e srautas buvo 10 mL·min-1. 16 (36 mg), 17 (19 mg) ir 18 (37 mg) junginiai buvo gauti HPLC metodu. 19 (29 mg) ir 20 (34 mg) junginiai buvo gauti gradiento eliuavimo būdu, naudojant etilo acetatą ir metanolį santykiu 1:1 ir 1:2, po to 100 procentų metanolį ant silikagelio kolonėlės.

herba epimedium sagittatum ant odos

3. Rezultatai ir aptarimas

3.1. Aktyvių ekstraktų nustatymas (E1–E11).

Apskaičiuota kiekvieno ekstrakto 1e optimali koncentracija (būtent C1) ir parodyta 1 lentelėje. 1e antioksidacinis eksperimentas parodė, kad visi ekstraktai turi antioksidacinį atkuriamąjį poveikį, tačiau lyginant su VC, kiekvienos grupės antioksidacinis poveikis yra silpnas. E1, E3, E4, E7 ir E11 antioksidacinis aktyvumas sumažėjo didėjant koncentracijai, kaip parodyta 1 paveiksle. 1e melanininhibavimo testas parodė, kad visi poliniai komponentai Trichosanthes kirilowii minkštime slopina melanino sintezę. Visų pirma, melanino slopinimo greitis E2, E3 ir E4 buvo žymiai didesnis nei teigiamo kontrolinio arbutino, kaip parodyta 2 paveiksle. 1e rezultataitirozinazėaktyvumas rodo, kad visi Trichosanthes kirilowi ​​celiuliozės poliniai komponentai slopino tirozinazės aktyvumą, o slopinimo tendencija buvo panaši į melanino slopinimo tendenciją. 1e tirozinazės aktyvumo slopinimas E2, E3, E4 ir E8 buvo žymiai didesnis nei teigiamos kontrolės. Apskritai, ekstraktai iš naftos eterio turi silpną slopinamąjį poveikį tirozinazei.1e ekstraktai iš etilo acetato stipriai slopina tirozinazę, ypač polinius etilo acetato komponentus. 1e ekstraktai iš n-butanolio taip pat turi didelį slopinamąjį poveikį tirozinazei, kaip parodyta 3 paveiksle.

3.2. Monomerų komponentų išskyrimas ir identifikavimas.

20 junginių buvo atskirti silikagelio ir ODS chromatogramos kolonėlėmis bei preparatine HPLC. Remiantis BMR ir MS duomenų analize, buvo išaiškintos jų struktūros.1e 20 junginių parodyta 2 lentelėje, o specifiniai monomerų analitiniai duomenys pateikti 1 priede.

3.3. Veiksmingų junginių patvirtinimo analizė

3.3.1. Antioksidacinių junginių patvirtinimo analizė.

E1, E2, E3, E4 ir E5 turi antioksidacinį poveikį. 1e pagrindiniai junginiai, išskirti iš aukščiau išvardytų komponentų, buvo drechslerolis-B (9 junginys), cikloheksanolio 3-palmitatas (10 junginys), 5-acetoksimetil-2-furaldehidas (11 junginys), 5-hidroksimetilfurfurolas ( 12 junginys), diosmetinas (13 junginys), apigeninas (14 junginys), chrizoberilas (15 junginys), liuteolinas (16 junginys), 4′-hidroksiskutellarinas (17 junginys), kvercetinas (18 junginys), 3′, {{ 25}} pagrindiniai junginiai buvo glikozidai, o tai rodo, kad glikozidai turi gerą antioksidacinį aktyvumą. Fenolio rūgštys, pvz., 5-acetoksimetil-2-furaldehidas (11 junginys), 5-hidroksimetilfurfurolis (12 junginys), diosmetinas (13 junginys), apigeninas (14 junginys), chrizoberilas (15 junginys) ,liuteolinas (16 junginys), 4′-hidroksiskutellarinas (17 junginys), kvercetinas (18 junginys) ir 3′,5-dihidroksi-7-(-Dgliukopiranoziloksi)-4′-metoksiflavonas, taip pat turi gerą antioksidacinį aktyvumą dėl fenolio hidroksilo grupės ir nesočiųjų dvigubų jungčių [26, 27]. 1e rezultatai parodyti 4 paveiksle.

4 pav. Ląstelių išgyvenamumas (procentais) atliekant antioksidantų eksperimentą su skirtingais junginiais iš trichozantų ekstraktų

3.3.2. Melaniną slopinančių junginių patvirtinimo analizė.

E11, E12, E13, E16, E17 ir E18 gerai slopina melanino sintezę. 1e pagrindiniai junginiai, išskirti iš minėtų komponentų, pateikti 2 lentelėje. Pagal 2.4.2 skyriuje pateiktą metodą buvo nustatytas kiekvieno junginio poveikis melanino sintezei. Kiekvienas junginys buvo įvertintas tokiomis koncentracijomis: 1000 µg/mL, 800 µg/mL, 400 µg/mL, 200 µg/mL ir 100 µg/mL. Kiekvienas matavimas buvo atliktas trimis egzemplioriais ir buvo apskaičiuotas melanino sintezės slopinimo greitis.

Protokatechuatas (5 junginys), 5-acetoksimetil-2-furaldehidas (11 junginys), 5-hidroksimetilfurfurolas (12 junginys), diosmetinas (13 junginys), p-hidroksibenzaldehidas (1 junginys), salicilo rūgštis (2 junginys), vanilo rūgštis (3 junginys), izovanilo rūgštis (4 junginys), trans-cinamono rūgštis (6 junginys), 4-kumaro rūgštis (7 junginys), apigeninas (14 junginys), chrizoberilas (15 junginys) ), liuteolinas (16 junginys), 4′-hidroksiskutellarinas (17 junginys), kvercetinas (18 junginys), 3′,5-dihidroksi-7-(-D-gliukopiranoziloksi)-4′ -metoksiflavonas (19 junginys), ofloksacinas-7-O- -D-gliukozidas (20 junginys) gali slopinti melanino gamybą [28]. Visų pirma, vanilo rūgštis (3 junginys), izovanilo rūgštis (4 junginys), protokatechuatas (5 junginys), trans-cinamono rūgštis (6 junginys) ir 4- kumaro rūgštis (7 junginys) turi didelį melanino slopinimą. 1e rezultatai parodyti 5 paveiksle.

3.3.3. Tirozinazės aktyvumą slopinančių junginių patikrinimas ir analizė.

E2, E3, E4, E7, E8 ir E9 turi gerą slopinamąjį poveikįtirozinazėveikla. 1e pagrindiniai junginiai, išskirti iš aukščiau išvardytų komponentų, parodyti 2 lentelėje. Pagal 2.4.3 skirsnyje pateiktą metodą kaip kontrolė buvo naudojamas arbutinas, o junginio koncentracija buvo 1000 µg/mL, 800 µg/mL, 400 µg/mL. , 200 µg/mL ir 100 µg/mL. Kiekvienas matavimas buvo atliktas 5 kartus ir apskaičiuotas tirozinazės slopinimo greitis. 1e rezultatai parodyti 6 paveiksle.

1e rezultatai rodo, kad diosmetinas (13 junginys), apigeninas (14 junginys), chrizoberilas (15 junginys), liuteolinas (16 junginys), 4′-hidroksikutellarinas (17 junginys), kvercetinas (18 junginys), 3′, {{10} }dihidroksi-7-(-D-gliukopiranoziloksi)-4′-metoksiflavonas (19 junginys), ciprofloksacinas-7-O- -D-gliukozidas (20 junginys), p-hidroksibenzaldehidas (1 junginys), salicilo rūgštis (2 junginys), vanilino rūgštis (3 junginys), izovanilo rūgštis (4 junginys), protokatechuatas (5 junginys), trans-cinamono rūgštis (6 junginys), 4-kumaro rūgštis (7 junginys) ), ir trans-ferulo rūgštis (8 junginys) yra akivaizditirozinazėslopinanti veikla.

Cistanche augalas slopina tirozinazės aktyvumą.

Spustelėkite paveikslėlį ir gaukite daugiau informacijos.

Hidroksilo pakaitų junginiai benzeno žiede, tokie kaip p-hidroksibenzaldehidas (1 junginys), salicilo rūgštis (2 junginys), vanilino rūgštis (3 junginys), izovanilo rūgštis (4 junginys), protokatechuatas (5 junginys), trans-cinamono rūgštis ( 6 junginys), 4-kumaro rūgštis (7 junginys), trans-ferulo rūgštis (8 junginys) ir flavonoidai, stipriai slopino tirozinazę, o para-pakeistų junginių slopinimo greitis buvo žymiai didesnis nei oforto-pakeistų junginių. . Pavyzdžiui, p-hidroksibenzaldehido slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei salicilo rūgšties, o vanilo rūgšties slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei izovanilo rūgšties. Be to, p-hidroksibenzaldehido slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei salicilo rūgšties, vanilinės rūgšties, izovanilo rūgšties ir protokatechuato. Priežastis gali būti ta, kad nukleofilinės grupės aplink aktyvųjį centrątirozinazė, pvz., –SH, –NH2 ir –OH, užima erdvę aplink aktyvųjį centrą ir taip neleidžia tirozinui atakuoti aktyvųjį centrą. Galiausiai buvo slopinama melanino sintezė [28]. 1e junginių, turinčių o-dihidroksi, slopinamasis aktyvumas buvo stipresnis nei para hidroksi junginių, o protokatechuato slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei vanilio rūgšties. 1e aukščiau esantys reiškiniai taip pat egzistuoja flavonoiduose. 1 flavonoidų, turinčių 7 ir 4′ hidroksilo grupes, slopinimo greitis buvo žymiai didesnis nei tuo atveju, jei 7 ir 4′ hidroksilo grupės būtų pakeistos. Pavyzdžiui, chrizoberilo slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei diosmetino, o diosmetino slopinamasis aktyvumas buvo didesnis nei 3′,5-dihidroksi-7-(-D-gliukopiranoziloksi)-4 ′- metoksiflavonas ir ciprofloksacino-7-O- -D-gliukozidas. 1 flavonoidų, kurių sudėtyje yra 3-hidroksi, slopinimo laipsnis buvo žymiai didesnis nei junginių be 3-hidroksi arba jei 3-hidroksi buvo pakeistas. Pavyzdžiui, kvercetino slopinamasis aktyvumas buvo žymiai didesnis nei 4′-hidroksiskutellarino, bet 4′-hidroksiskutellarino slopinamasis aktyvumas buvo didesnis nei kvercetino -3-o gliukozido. Be to, koelino slopinamasis aktyvumas yra didesnis nei apigenino, bet mažesnis nei liuteolino. Manoma, kad B žiedo pakaitai, ypač hidroksilo grupė, gali sustiprintitirozinazėslopinamasis aktyvumas, o B žiedo ortodihidroksi grupė turėjo didesnį slopinamąjį aktyvumą [29].