1 dalis|Kinų žolelių formulė, tonikas The Kindney, pagerina raumenų atrofiją, reguliuodamas mitochondrijų kokybės kontrolės procesą 5/6 žiurkėms, kurioms buvo pašalintas nefrektomijos.

Kontaktai: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 El. paštas:audrey.hu@wecistanche.com

Dongtao Wang1,3, Jianping Chen2, Xinhui Liu1, Ping Zheng1, Gaofeng Song1, Tiegang Yi1,2 ir Shunmin Li1

Raumenų atrofija yra viena iš rimtų lėtinės inkstų ligos (LIL) komplikacijų. Mitochondrijų kokybės kontrolės (MQC) proceso sutrikimas, įskaitant sumažėjusią mitochondrijų biogenezę, pablogina mitochondrijų dinamiką ir sukelia mitofagijos aktyvavimą, vaidina svarbų vaidmenį tarpininkaujant raumenų nykimui. Šiuo tyrimu buvo siekiama stebėti Jian-Pi-Yi-Shen (JPYS) nuoviro poveikį CKD žiurkių raumenų atrofijai ir ištirti galimą jo MQC procesų reguliavimo mechanizmą. 5/6 nefrektomizuotų žiurkių buvo atsitiktinai suskirstytos į 2 grupes: CKD grupę ir JPYS grupę. Be to, fiktyviai operuotos žiurkės buvo fiktyvi grupė. Visos žiurkės buvo gydomos 6 savaites. Rezultatai parodė, kad naudojant JPYS nuovirą buvo išvengta kūno svorio mažėjimo, raumenų praradimo, raumenų skaidulų dydžio sumažėjimo, raumenų baltymų degradacijos ir padidėjusios raumenų baltymų sintezės. Be to, JPYS nuoviras padidino mitochondrijų kiekį ir biogenezės baltymus bei sumažino autofagijos ir mitofagijos baltymus. Be to, JPYS nuoviras padidino mitochondrijų sulietų baltymų kiekį, tuo pačiu sumažindamas mitochondrijų dalijimosi baltymų kiekį. Apibendrinant galima pasakyti, kad JPYS nuoviras padidino mitochondrijų kiekį ir biogenezę, atkūrė pusiausvyrą tarp dalijimosi ir sintezės ir slopino autofagijos-lizosomų kelią (mitofagiją). Visi mūsų duomenys parodė, kad JPYS nuoviras yra naudingas raumenų atrofijai sergant CKD, kuri gali būti susijusi su MQC proceso moduliavimu.

Cistanche tubulosa apsaugo nuo inkstų ligos, spustelėkite čia, kad gautumėte mėginį

Lėtinė inkstų liga(CKD) būdingas laipsniškas inkstų funkcijos praradimas per kelis mėnesius ar metus. Didžiuliai tyrimai parodė, kad jo veikimo mechanizmas yra susijęs su per dideliu ekstraląstelinės matricos kaupimu ir podocitų praradimu bei uždegimu, taip pat su lipidų apykaitos ir amino apykaitos sutrikimais1–6. Kai kuriose ataskaitose nurodyta, kad CKD yra susijusi su raumenų atrofija, kuri tiesiogiai koreliuoja su mirtingumu ir sergamumu7. Galimi raumenų atrofijos stimulai sergant CKD yra acidozė, angiotenzino II gamyba, uždegimas, ubikvitino-proteasomos ir autofagijos-lizosomų sistemų (UPS ir ALS) reguliavimas bei mitochondrijų kokybės kontrolės (MQC) procesų reguliavimo sutrikimas8, 9. Deja, , prevencinės ir terapinės intervencijos, blokuojančios raumenų atrofiją, vis dar yra pradinėse vystymosi stadijose. Vis daugiau pacientų priėmė papildomą ar alternatyvų gydymą, pvz., tradicinę kinų mediciną (TCM)10–14. Ištyrėme, ar atradicinė kinų medicina, Jian-Pi-Yi-Shen (JPYS) nuoviras, moduliuodamas MQC procesą, užkirstų kelią raumenų atrofijai.

UPS yra pripažintas kaip pagrindinis raumenų proteolizės veiksnys, atsakingas už 50 ar daugiau procentų viso baltymų skaidymo skeleto raumenyse. UPS yra pagrindinis tarpląstelinis baltymų skaidymo būdas, kurį 1 Nefrologijos skyrius, Šendženo tradicinės kinų medicinos ligoninė, Guangdžou kinų medicinos universitetas, Šendženas, 518033, Kinija. 2Shenzhen pagrindinė ligoninės kinų medicinos paruošimo laboratorija, Šendženo tradicinės kinų medicinos ligoninė, Guangdžou kinų medicinos universitetas, Šendženas, 518033, Kinija. 3 Nefrologijos skyrius, Ruikang filialo ligoninė, Guangxi kinų medicinos universitetas, Nanning, 530011, Kinija. Dongtanas Wangas ir Jianpingas Chenas vienodai prisidėjo prie šio darbo. Susirašinėjimas ir prašymai dėl medžiagų turėtų būti adresuojami DW, nes gali suskaidyti miofibrilių baltymus į jų komponentus (aktiną, mioziną, troponiną ir tropomioziną)15. Šiuos baltymus nukreipia ir skaido dvi raumenims specifinės E3 ubikvitino (Ub) ligazės, raumenų atrofija F-Box (MAFbx/ Atrogin-1) ir raumenims specifinis RING piršto baltymas (MuRF1)16, 17. Lygiagrečiai Manoma, kad ALS per lizosomų mechanizmą nukreipia ir suskaido ilgai gyvenančius baltymus, masinę citoplazmą ir organelius18. Su UPS ir ALS susijusių genų aktyvavimą paprastai blokuoja Akt, neigiamai reguliuodamas Forkhead box O (FoxO) transkripcijos faktorius, įskaitant FoxO1, FoxO3a ir FoxO4. FoxO narių translokacijos ir transkripcijos aktyvumo pakanka, kad padidėtų atrogin-1 ir MuRF1 ekspresija bei sukeltų raumenų atrofiją.

MQC procesus griežtai reguliuoja keli procesai, pvz., biogenezė, sintezė, dalijimasis ir mitofagija. Pranešama, kadlėtinės ligosaktyvuoti mitochondrijų atsaką, kuris pagerina skeleto raumenų mitochondrijų ląstelių „kokybę“ skirtinguose molekuliniuose lygiuose: (i) biogenezę veikiant pagrindinių reguliatorių peroksisomų proliferatoriaus aktyvuotam receptoriui gama koaktyvatoriui 1-alfa (PGC{{2). }} ), branduolinio kvėpavimo faktoriaus 1/2 (NRF-1/2), adenozino 5′-monofosfato (AMP) aktyvuotos proteinkinazės (AMPK ) ir ATP sintezės; (ii) mitochondrijų remodeliuojančių GTPazės baltymų, tokių kaip mitofuzinas-2 (Mfn-2) ir optinė atrofija 1 (OPA-1), suliejimo ir su dinaminu susijusio baltymo 1 (DRP{{) dinamika. 16}}) ir skilimas 1 (Skilimas-1), skirtas dalijimuisi; (iii) mitofagijos pažeistų mitochondrijų apykaita per PTEN sukeltą spėjamą kinazę 1 (PINK1), Parkin ir Bnip3/Nix (BNIP3L); ir (iv) kokybės kontrolė skaidant netinkamai sulankstytus baltymus arba vėl pažeistų mitochondrijų dalį proteolitine sistema su chaperonais ir proteazėmis20. Buvo pranešta, kad sumažėjo mitochondrijų biogenezė, susijusi su raumenų atrofija, kurią skatino PGC-1 ir AMPK 21, 22. Tačiau MQC procesas, įskaitant mitochondrijų susiliejimą, dalijimąsi, biogenezę ir mitofagiją sergant CKD raumenų atrofija vis dar neaišku.

Buvo pranešta, kad TCM yra veiksmingas gydant raumenų atrofiją 23–26. Tačiau literatūroje buvo mažai informacijos apie tai, ar kinų vaistažolių preparatai, turintys raumenų atrofiją mažinantį poveikį, gali turėti įtakos MQC procesui sergant CKD. JPYS nuoviras daugelį metų buvo plačiai naudojamas gydant nepakankamą mitybą su blužnies ir inkstų qi trūkumo sindromu sergant CKD. Tačiau vis dar reikia atlikti išsamų jo išsamų kovos su netinkamą mitybą ir raumenų atrofijos mechanizmo tyrimą. Čia siekėme ištirti, kaip MQC proceso reguliavimas sukelia raumenų išsekimą ir ar JPYS nuoviras slopina raumenų atrofiją efektyviai moduliuodamas MQC procesą.

cistanche tubulosa ekstraktas: gydo lėtines inkstų ligas

Rezultatai

Inkstų funkcijos pokyčiai.

Tyrimo pabaigoje CKD grupėje buvo žymiai didesnis kreatinino (Scr) ir kraujo šlapalo azoto (BUN) kiekis, palyginti su fiktyviąja grupe. Įdomu tai, kad JPYS nuoviras sumažina Scr ir BUN kiekį. Tačiau serumo albumino (ALB) lygis visose grupėse reikšmingai nesiskyrė (1 lentelė).

JPYS nuoviras gerina raumenų atrofiją.

LIL sergančių pacientų kūno svoris gydymo pradžioje buvo žymiai mažesnis nei fiktyvių pacientų; tačiau kūno svorio skirtumų tarp CKD ir JPYS grupių nebuvo. Įdomu tai, kad 5 ir 6 savaičių gydymo JPYS grupėje kūno svoris akivaizdžiai pagerėjo, palyginti su CKD grupe (1a pav.). Kūno svorio padidėjimas, pridėjus JPYS, apėmė gastrocnemius (Gastroc) ir blauzdikaulio priekinių (TA) raumenų svorio padidėjimą CKD grupėje (1b, c pav.). JPYS grupės raumenų masės pagerėjimą patvirtino CKD grupės TA raumenų vidutinio miofiberų skerspjūvio ploto padidėjimas (1d, e pav.).

JPYS nuoviras padidina baltymų sintezę ir slopina baltymų skaidymąsi.

Baltymų sintezės greitis CKD grupėje buvo mažesnis nei fiktyvių, o JPYS nuoviras padidino baltymų sintezės greitį (2a pav.). Kita vertus, CKD grupėje baltymų skilimo greitis buvo didesnis nei fiktyviųjų grupėje, kurią visiškai slopino JPYS nuoviras (2b pav.).

JPYS nuoviras slopina ubikvitino-proteasomų sistemą ir FoxO3a aktyvaciją.

Baltymų žymenys raumenų ubikvitino-proteasomų sistemoje ir FoxO3a pateikti 3a pav. CKD grupėje padidėjo Atrogin-1 ir MuRF-1 ekspresija, o šie pokyčiai buvo panaikinti JPYS nuoviru (3b, c pav.). Be to, norėdami patvirtinti CKD žiurkėms pastebėtų raumenų proteolizės pokyčių svarbą, išmatavome 20 S proteasomos aktyvumą. Tiek chimotripsino, tiek tripsino tipo aktyvumas buvo didesnis CKD grupėje nei fiktyvių, o susilpnintas JPYS nuoviru (3g, h pav.). Be to, fosforilinto (p)-FoxO3a ir p-FoxO3a/FoxO3a santykis buvo sumažėjęs CKD grupėje, o JPYS nuoviras padidina, palyginti su CKD grupe (3d, f pav.). Kaip parodyta 3e pav., CKD grupėje FoxO3a bazinis baltymų kiekis buvo padidintas, o to taip pat užkirto JPYS nuoviras.

JPYS nuoviras pagerina raumenų mitochondrijų kiekį ir nukrypstančias raumenų morfologines savybes.

Mitochondrijų kiekis buvo įvertintas naudojant skrandžio raumenų dažymą SDH (4a pav.). SDH aktyvumas, kuris rodo mitochondrijų kiekį, buvo žymiai sumažintas CKD grupėje, o JPYS nuoviras priešinosi šiam atsakui (4b pav.). Kita vertus, SDH dažymas atskleidė, kad I tipo (lėtas oksidacinis) ir I (greitas oksidacinis glikolitinis) raumenų skaidulų, kurios yra daug mitochondrijų turinčios skaidulos, žymiai sumažėjo, o IIb tipo (greitos glikolitinės) skaidulos padidėjo CKD grupėje. . Gana įdomu, kad JPYS nuoviras parodė raumenų skaidulų tipo pokytį CKD grupėje, kuriam būdingas IIb tipo skaidulų sumažėjimas ir reikšmingas I ir IIa tipo raumenų skaidulų padidėjimas (4c pav.). Atsižvelgiant į sumažėjusį SDH aktyvumą, TEM morfologinis tyrimas taip pat atskleidė didelius sarkomerinio lygio pakitimus, nukrypimus nuo normos, atitinkančios mažesnį ir mažesnį mitochondrijų skaičių (juodos rodyklės; 4e, f pav.) ir žymiai plonesnes Z linijas (baltos rodyklės; 1 pav. 4d) CKD grupėje. Panašiai I juosta, daugiausia sudaryta iš plonų aktino gijų, CKD grupėje pasirodė plonesnė arba jos visai nebuvo (skliausteliai; 4d pav.). Svarbu tai, kad šių pokyčių išvengė gydymas JPYS nuoviru.

užkirsti kelią inkstų ligoms: cistanche tubulosaekstraktas

JPYS nuoviras didina mitochondrijų biogenezę.

Baltymų žymenys raumenų mitochondrijų biogenezėje pateikti 5a pav. Te Cox IV baltymas gali būti veiksmingai naudojamas kaip mitochondrijų apkrovos kontrolė ir atspindi mitochondrijų kiekį, kuris atitiko SDH aktyvumo rezultatus (5b pav.). Be to, CKD grupėje taip pat sumažėjo mitochondrijų biogenezės baltymų NRF-1 ir PGC-1, o šie pokyčiai buvo pakeisti naudojant JPYS nuovirą (5c–e pav.). Tačiau baltymų kiekis ATP5B ir p-AMPK / AMPK racione nepakito visose grupėse (5d–f pav.).

JPYS nuoviras slopina autofagijos ir mitofagijos kelią.

Su autofagija ir mitofagija susiję baltymai buvo aptikti Western blot metodu (6a pav.). Beclin-1 baltymų ir LC3II/LC3I raciono lygis buvo padidintas CKD grupėje ir tai buvo sulėtina JPYS nuoviru (6b, c pav.). Nustatyta, kad autofagijos adapterio p62 indėlis nėra būtinas mitofagijai, kuri padidėjo CKD grupėje ir susilpnėjo JPYS nuoviru (6d pav.). Įdomu tai, kad PINK1 ir Parkin baltymų kiekis LIL grupėje buvo ženkliai padidintas, o šiems pokyčiams užkirto JPYS nuoviras (6f,g pav.). Tačiau tarp visų grupių BNIP3L ekspresijos skirtumų nebuvo (6e pav.).

JPYS nuoviras sumažina mitochondrijų dalijimąsi ir padidina mitochondrijų susiliejimą.

Mitochondrijų susiliejimas ir su dalijimusi susiję baltymai buvo aptikti Western blot metodu (7a pav.). Pagrindinių dalijimosi baltymų Fis-1 ir Drop-1 lygis buvo žymiai didesnis CKD grupėje, o šiems pokyčiams trukdė gydymas JPYS (7b, c pav.). Tačiau pagrindinių sulietų baltymų OPA-1 ir Mfn-2 lygis buvo sumažėjęs CKD grupėje, o šio sumažėjimo išvengė gydymas JPYS (7d, e pav.).

užkirsti kelią inkstų nepakankamumui cistanche tubulosa ekstraktas