Iš Cistanche gautų nanopūslelių senėjimą stabdantis poveikis
Mar 28, 2023
3.5. Ekstraląstelinės matricos ir antioksidanto geno reguliavimas apdorojant Cistanche UV sukelto senėjimo modelyje
Norėdami patvirtintiCistanches anti-senėjimo savybėsaUV sukelto senėjimo modelio terminai molekulinėje biologijoje, su senėjimu susijusios ECM gamybos mRNR ekspresija irantioksidacinis genasbuvo ištirtas qPCR. qPCR rezultatai rodo, kad po UV švitinimo sumažėjo COL1 ir ELASTIN, o gydymas Cistanches žymiai padidino COL1; tačiau ELASTIN nepadidintas. Antioksidantų, SOD2 ir HMOX1, kiekis sumažėjo UV spinduliuote ir padidėjo gydant Cistanches (5a pav.). Be to, imunofluorescencinės analizės rezultatai rodo, kad sumažėjo 1 tipo kolageno ekspresija UV sukeltuose senstančiose HDF, kuri padidėjo gydant Cistanches (5b, c pav.). Šie rezultatai rodo, kad Cistanches padidina ECM gamybą ir senėjimą mažinantį antioksidacinį geną.
5 pav. Ekstraląstelinės matricos ir antioksidanto geno reguliavimas apdorojant suCistanchesUV sukeltame senėjimo modelyje. a ) COL1, ELASTIN, SOD2 ir HMOX1 mRNR ekspresija UV sukeltuose senstančių HDF po gydymoCistanches. b ) UV sukeltų senstančių HDF 1 tipo kolageno imunofluorescencinė analizė po gydymo Cistanches. (C) Nepakankami imunofluorescencinės analizės duomenys. Reikšmingus skirtumus tarp grupių nustatė vienpusė ANOVA (* p < 0.05, ** p < 0,01,* plius * p < 0,001).
Spustelėkite čia, kad gautumėte Cistanche ekstraktą nuo senėjimo
4. Diskusija
Šiame tyrime ištyrėme klausimą, ar iš TMSC gautos nanovezikulės gali turėti senėjimą stabdančių savybių. Išskyrėme ir patvirtinome TMSC charakteristikas irCistanches. TMSC buvo labai proliferuojančios į MSC panašios ląstelės irCistanchesturėjo savybių, panašių į egzosomų savybes.Cistanchespagreitino proliferaciją ir sumažino su senėjimu susijusį galaktozidazės aktyvumą bei vinkulino ekspresiją abiejų senstančių HDF židinio adhezijoje. ECM gamyba ir antioksidacinis genas, susijęs su ląstelių senėjimu, buvo sureguliuoti senstančių HDF gydant Cistanches. Atsižvelgdami į šiuos rezultatus, siūlome, kad Cistanches gali būti naudojami odos atjauninimui ir senėjimo prevencijai.
Per pastarąjį dešimtmetį buvo ginčijamas prastas derlius ir neveiksminga egzosomų gamybos atskyrimo procedūra [19]. Norėdami išspręsti šias problemas, mes siekėme pagaminti egzosomas imituojančias nanovezikules iš žmogaus tonzilių gautų mezenchiminių kamieninių ląstelių, naudodami gana paprastą ekstruzijos procedūrą [33]. Šiame tyrime, nors ir nepateikti lyginamieji charakteristikų su egzosomomis duomenys, Cistanches išreiškia specifinius egzosomų žymenis (CD9 ir CD63), o Cistanches dydis yra panašus į egzosomų, o tai reiškia, kad Cistanches charakteristikos yra panašios į egzosomų, o Cistanches gali būti naudojamos kaip alternatyva egzosomų terapijai.
Buvo pranešta, kad egzosomų mRNR ir miRNR profiliai skiriasi nuo jų kilusių ląstelių [13]. Čia daugybė tyrimų atskleidė specifinį egzosomų žymeklį, kad parodytų audinių regeneracijos mechanizmą, kurį sukelia egzosomos. Pavyzdžiui, Ying ir kt. parodė, kad eksosomų sukeltas miR-155 tiekimas reguliuoja jautrumą insulinui ir gliukozės homeostazę [34]. Xin ir kt. pranešė, kad iš mezenchiminių kamieninių ląstelių gautos egzosomos perkeliamos į neuronus ir astrocitus, o eksosomų sukeltas miR-133 vaidina pagrindinį vaidmenį neurologiniame atsigavimo po insulto procese [35]. Nors pateikti rezultatai rodo, kad Cistanches gali būti naudojamos kaip alternatyva egzosomoms odos atjauninimui, ląstelių senėjimo reguliavimo mechanizmas gydant Cistanches yra neaiškus. Todėl tolesniame tyrime planuojame atrasti pagrindinį Cistanches žymeklį reguliuojant ląstelių senėjimą.
Ląstelių senėjimas apibūdinamas kaip negrįžtamas ląstelių augimo sustojimas, atsirandantis keičiantis židininiam lipniam citoskeletui [2,3]. Šiame tyrime ląstelių senėjimą sukėlė tiek su perėjimu susiję senstantys HDF, tiek UV sukelti senstantys HDF, o Cistanches sumažino ląstelių senėjimą ir padidino ląstelių proliferaciją, antioksidantų genų ekspresiją ir tarpląstelinės matricos gamybą. Tačiau ELASTIN ekspresija padidėjo su perėjimu susijusiuose senstančių HDF, bet ne UV sukeltų senstančių HDF. Mūsų prognozė yra abiejų senėjimo modelių senėjimo indukcijos mechanizmo skirtumas. Buvo pranešta, kad senėjimą gali sukelti įvairūs veiksniai, o senėjimo indukcijos kelias kiekviename dirgiklyje gali būti skirtingas [36]. Visų pirma Pascal ir kt. pranešė apie skirtingus mRNR profilius tarp reprezentatyvių ląstelių senėjimo modelių, įskaitant replikacinį senėjimo modelį, tret butilo hidroperoksido sukeltą senėjimo modelį ir EtOH sukeltą senėjimo modelį [37]. Atsižvelgdami į šias ataskaitas, planuojame ištirti senėjimo vaidmenį reguliuojant ekstraląstelinės matricos ekspresiją kiekvienoje modeliavimo procedūroje, kuri gali suteikti tolesnių odos atjauninimo tyrimų.
Kitas egzosomų imitacinių nanoveziklių, skirtų odos atjauninimui, riba yra regeneracinio potencialo demonstravimas nuo ex vivo iki klinikinių tyrimų. Šiame tyrime mes nustatėme tarpląstelinių pūslelių proangiogeninį ir priešuždegiminį poveikį, kuris bus naudingas regeneracinėje medicinoje.
Šis tyrimas parodė, kad iš žmogaus tonzilių gautos mezenchiminės kamieninės ląstelės nanovezikulės turi panašių savybių kaip ir egzosomos beipadidinti senstančių HDF plitimą. Su senėjimu susijęs galaktozidazės aktyvumas ir vinkulino ekspresija senstančiose ląstelėse sumažėjogydymas Cistanches. Ekstraląstelinės matricos gamybos ir antioksidacinio geno genų ekspresija buvo sustiprinta gydant Cistanches. Šios išvados gali prisidėti prie odos atjauninimo priemonių ir pageidaujamų kosmetikos gaminių kūrimo, kai tik klinikinis tyrimas parodys daug žadantį veiksmingumą.
Informuoto sutikimo pareiškimas:Informuotas sutikimas buvo gautas iš visų tyrime dalyvavusių subjektų.
Duomenų prieinamumo pareiškimas:Išsami informacija pateikiama straipsnyje lentelių, figūrų ir rezultatų pavidalu.
Interesų konfliktai:Autoriai nepareiškia interesų konflikto
UV ultravioletinis B
Nuorodos
1. Herranz, N.; Gil, J. Ląstelių senėjimo mechanizmai ir funkcijos. J. Clin. Ištirti. 2018, 128, 1238–1246. [CrossRef] [PubMed]
2. Nišio, K.; Inoue, A. Su senėjimu susiję citoskeleto pokyčiai: nepaprasta vimentino gamyba, kuri įtvirtina citoplazminį p53 senstančiose žmogaus fifibroblastuose. Histochem. Cell Biol. 2005, 123, 263–273. [CrossRef] [PubMed]
3. Moujaber, O.; Fishbein, F.; Omranas, N.; Liang, Y.; Colmegna, I.; Presley, JF; Stochaj, U. Ląstelių senėjimas yra susijęs su mikrotubulinio citoskeleto reorganizavimu. Ląstelė. Mol. Gyvenimas Sci. 2019, 76, 1169–1183. [CrossRef] [PubMed]
4. Bu, H.; Wedel, S.; Cavinato, M.; Jansen-Dürr, P. Oksidacinio streso sukelto ląstelių senėjimo mikroRNR reguliavimas. Oksidacinis med. Ląstelė. Longevas. 2017 m., 2017 m. [CrossRef]
5. Chen, J.-H.; Ozanne, SE; Hales, CN Ląstelių senėjimo indukcijos metodai naudojant oksidacinį stresą. Biologiniame senėjime; Springeris: Berlynas/Heidelbergas, Vokietija, 2007 m.; 179–189 p.
6. Lee, S.; Jeong, S.-Y.; Limas, W.-C.; Kimas, S.; Parkas, Y.-Y.; Saulė, X.; Youle, RJ; Cho, H. Mitochondrijų dalijimosi ir sintezės mediatoriai, hFis1 ir OPA1, moduliuoja ląstelių senėjimą. J. Biol. Chem. 2007, 282, 22977–22983. [CrossRef] [PubMed]
7. Vasileiou, PV; Evangelou, K.; Vlasis, K.; Fildisis, G.; Panayiotidis, MI; Chronopulas, E.; Passias, P.-G.; Kouloukoussa, M.; Gorgoulis, VG; Havaki, S. Mitochondrijų homeostazė ir ląstelių senėjimas. Cells 2019, 8, 686. [CrossRef]
8. Yang, Y.; Li, S. Kiaulpienių ekstraktai apsaugo žmogaus odos fibroblastus nuo UVB pažeidimų ir ląstelių senėjimo. Oksidacinis med. Ląstelė. Longevas. 2015, 2015. [CrossRef] [PubMed]
9. Helenius, M.; Mäkeläinen, L.; Salminen, A. NF-κB signalizacijos reakcijos į UVB šviesą slopinimas ląstelių senėjimo metu. Exp. Cell Res. 1999, 248, 194–202. [CrossRef]
10. Hessvik, NP; Llorente, A. Dabartinės žinios apie egzosomų biogenezę ir išsiskyrimą. Cell Mol. Gyvenimas Sci. 2018, 75, 193–208. [CrossRef] [PubMed]
11. Lai, RC; Yeo, RWY; Tan, KH; Lim, SK Egzosomos vaistų tiekimui – nauja mezenchiminių kamieninių ląstelių taikymas. Biotechnol. Adv. 2013, 31, 543–551. [CrossRef]
12. Shao, H.; Chung, J.; Lee, K.; Balajus, L.; Min, C.; Carteris, BS; Hochberg, FH; Breakefifield, XO; Lee, H.; Weissleder, R. Egzosominės mRNR, tarpininkaujančios atsparumui vaistams sergant glioblastoma, analizė. Nat. Komun. 2015, 6, 1–9. [CrossRef] [PubMed]
13. Valadi, H.; Ekströmas, K.; Bossiosas, A.; Sjöstrand, M.; Lee, JJ; Lötvall, JO Eksosomų sukeltas mRNR ir mikroRNR perkėlimas yra naujas genetinių mainų tarp ląstelių mechanizmas. Nat. Cell Biol. 2007, 9, 654–659. [CrossRef]
14. Juanas, D.; Zhao, Y.; Bankai, WA; Bulokas, KM; Haney, M.; Batrakova, E.; Kabanovas, AV Makrofagų eksosomos kaip natūralūs nanonešėjai baltymams tiekti į uždegusias smegenis. Biomedžiagos 2017, 142, 1–12. [CrossRef] [PubMed] 15. Choi, EW; SEO, MK; Woo, EY; Kim, SH; Parkas, EJ; Kim, S. Iš žmogaus riebalų gautų kamieninių ląstelių egzosomos skatina odos fibroblastų dauginimąsi ir migraciją. Exp. Derm. 2018, 27, 1170–1172. [CrossRef]
16. Kimas, S.; Lee, SK; Kim, H.; Kim, TM egzosomos, išskiriamos iš indukuotų pluripotentinių kamieninių ląstelių, gautų iš mezenchiminių kamieninių ląstelių, pagreitina odos ląstelių dauginimąsi. Tarpt. J. Mol. Sci. 2018, 19, 3119. [CrossRef]
17. Zhang, B.; Wang, M.; Gongas, A.; Zhang, X.; Wu, X.; Zhu, Y.; Ši, H.; Wu, L.; Zhu, W.; Qian, H.; ir kt. Norint išgydyti odos žaizdas, reikalingas HucMSC-Exosome Mediated-Wnt4 signalas. Kamieninės ląstelės 2015, 33, 2158–2168. [CrossRef] [PubMed]
18. Kim, YJ; Yoo, SM; Parkas, HH; Limas, HJ; Kim, YL; Lee, S.; SEO, KW; Kang, KS Egzosomos, gautos iš žmogaus virkštelės kraujo mezenchiminių kamieninių ląstelių, skatina žmogaus odos atjauninimą. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 2017, 493, 1102–1108. [CrossRef]
19. Li, X.; Corbett, AL; Taatizadeh, E.; Tasnimas, N.; Mažoji, JP; Garnis, C.; Daugaard, M.; Ginklai, E.; Hoorfar, M.; Li, ITS iššūkiai ir galimybės tiriant egzosomus – biologijos, inžinerijos ir vėžio terapijos perspektyvos. APL Bioeng. 2019, 3, 011503. [CrossRef] [PubMed]
20. Kaneti, L.; Bronšteinas, T.; Malkah Dayan, N.; Kovregina, I.; Letko Khait, N.; Lupu-Haber, Y.; Flimanas, M.; Schoen, BW; Kaneti, G.; Machluf, M. Nanoghosts kaip nauja natūrali nevirusinių genų pristatymo platforma, saugiai nukreipta prieš kelis vėžius. Nano Lett. 2016, 16, 1574–1582. [CrossRef]
21. Ou, Y.-H.; Zou, S.; Goh, WJ; Wang, J.-W.; Wacker, M.; Czarny, B.; Pastorin, G. Iš ląstelių gautos nanovezikulės kaip egzosomų mimetikai vaistų tiekimo tikslams: naudojimas ir rekomendacijos. Bio-nešiklio vektoriuose; Springeris: Berlynas/Heidelbergas, Vokietija, 2021 m.; 147–170 p.
22. Oieni, J.; Loli, A.; D'Atri, D.; Kopsas, N.; Yayon, A.; van Osch, GJ; Machluf, M. Nano-vaiduokliai: naujos biomimetinės nano pūslelės, skirtos antisensiniams oligonukleotidams pristatyti. J. Kontrolė. 2021 m. leidimas, 333, 28–40. [CrossRef]
23. Yang, J.; Zhang, X.; Liu, C.; Wang, Z.; Dengas, L.; Feng, C.; Tao, W.; Xu, X.; Cui, W. Biologiškai modifikuotos nanodalelės kaip teranostinės bionanomedžiagos. Prog. Mater. Sci. 2021, 118, 100768. [CrossRef]
24. Kumar, P.; Bose, PP Makrofagų vaiduoklis įstrigęs amfotericinas B: nauja pristatymo strategija, skirta eksperimentinei visceralinei leišmaniozei. Narkotikų Deliv. Vertimas Res. 2019, 9, 249–259. [CrossRef]
25. Bose, RJ; Lee, S.-H.; Park, H. Biofunkcionalizuotos nanodalelės: nauja vaistų pristatymo platforma įvairioms ligoms gydyti. Narkotikų diskas. Šiandien 2016, 21, 1303–1312. [CrossRef] 26. Hwang, J.; Zheng, M.; Wiraja, C.; Cui, M.; Yang, L.; Xu, C. Makrofagų perprogramavimas naudojant makrofagų ląstelių membranos gautus nanovaiduolius. Nanoscale Adv. 2020, 2, 5254–5262. [CrossRef]
27. Bose, RJ; Kim, BJ; Arai, Y.; Han, I.-b.; Mėnulis, JJ; Paulmuruganas, R.; Parkas, H.; Lee, S.-H. Bioinžinerijos būdu sukurti kamieninių ląstelių membranos funkcionalizuoti nanonešikliai, skirti terapiniam sunkios užpakalinės galūnės išemijos taikymui. Biomedžiagos 2018, 185, 360–370. [CrossRef] [PubMed]
Paprašyk daugiau:
El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950