Antihiperglikeminis ir hipopolipideminis Cistanche Tubulosa poveikis

Kontaktai: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 El. paštas:audrey.hu@wecistanche.com

Cistanche tubulosaino 2 tipo diabetinių db/db pelių antihiperglikeminis ir hipolipideminis poveikis

Wen-Ting Xiong ir kt

Abstraktus

Etnofarmakologinė reikšmė:Džiovintas sultingas stiebasCistanchekanalėlių (Schenk) R. Wightas yra viena iš tradicinės kinų medicinos receptų diabetui gydyti komponentų. Tačiau iki šiol nebuvo jokių šiuolaikinių mokslinių pranešimų, patvirtinančių šį tradicinį teiginį apie Cistanche rūšis. Taigi, mes ištyrėme poveikįCistanchekanalėliųapie gliukozės homeostazę ir serumo lipidus BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) pelių patinuose, 2 tipo diabeto modelis.

Medžiagos ir metodai:Verbascoside ir echinakozido turinysCistanchekanalėliųmilteliai buvo įvertinti naudojant HPLC. Bendras fenolio kiekis, polisacharidų kiekis ir antioksidacinis aktyvumasCistanchekanalėliųtaip pat buvo įvertinti milteliai. Tada skirtingos dozėsCistanche kanalėlių(atitinka 120,9, 72,6 arba 24,2 mg verbaskozido/kg) buvo skiriami per burną vieną kartą per parą 45 dienas db/db pelių patinams. Kaip įprasta kontrolė buvo naudojamos pagal amžių atitinkančios db / þ pelės. Eksperimento metu buvo matuojamas kūno svoris, gliukozės kiekis kraujyje nevalgius, gliukozės kiekis kraujyje po valgio ir insulino tolerancijos testai. Aukojimo metu buvo paimtas kraujas insulino lygiui išmatuoti, homeostatiniam atsparumo insulinui modeliui (HOMA-IR) ir bendrojo cholesterolio, trigliceridų, DTL-c, MTL-c ir VLDL-c lygiams įvertinti; Glikogeno kiekiui matuoti buvo paimti kepenų ir raumenys.

Rezultatai: Cistanchekanalėliųžymiai sumažino padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje nevalgius ir gliukozės kiekį kraujyje po valgio, pagerino atsparumą insulinui ir dislipidemiją bei slopino kūno svorio mažėjimą indb/db pelėms. TačiauCistanchekanalėliųneturėjo reikšmingos įtakos insulino koncentracijai serume arba kepenų ir raumenų glikogeno kiekiui.

Išvada:Šis tyrimas pateikia mokslinių įrodymų apie tradicinį naudojimąCistanchekanalėliųdiabetui gydyti, o tai rodoCistanchekanalėliųgali tapti funkciniu maisto ingredientu arba vaistu, siekiant išvengti hiperglikemijos ir gydyti hiperlipidemiją.

Raktiniai žodžiai:Cistanchekanalėlių2 tipo diabetas,Antihiperglikeminis poveikis, Hipolipideminis poveikis

1. Įvadas

Cukrinis diabetas (DM) yra progresuojantis ir sudėtingas metabolinis sutrikimas, kuriam daugiausia būdingas neįprastai didelis gliukozės kiekis kraujyje (hiperglikemija) (Tiwari ir Rao, 2002; Stumvollet al., 2005; Nathan ir kt., 2009). Maždaug 90 procentų iš 347 milijonų diabetu sergančių pacientų visame pasaulyje turi 2 tipo (nuo insulino nepriklausomą) DM (Danaei ir kt., 2011). Trys pagrindiniai medžiagų apykaitos defektai nuolat prisideda prie hiperglikemijos 2 tipo DM sergantiems pacientams: nepakankama insulino sekrecija, didelis gliukozės kiekis kepenyse ir atsparumas insulinui (Bavenholm ir kt., 2001). 2 tipo DM gali sutrumpinti gyvenimo trukmę ir yra didelė medicininė ir ekonominė našta (Gakidou ir kt., 2011)

2 tipo DM patogenezė priklauso nuo daugelio veiksnių ir buvo susijusi su genetiniais ir gyvenimo būdo veiksniais (Stumvoll ir kt., 2005). Gyvenimo būdo intervencijos derinamos su oraliniupriešhiperglikeminisvaistai yra tipiškas 2 tipo DM gydymo metodas. Geriamieji vaistaianti-hiperglikeminisTai gali padėti sumažinti tris pagrindinius medžiagų apykaitos sutrikimus, sukeliančius hiperglikemiją, arba sumažinant glikemijos lygio padidėjimą po valgio, trukdant angliavandenių virškinimui ir absorbcijai žarnyne.

Nors daugelis veiksmingų vaistų klasių tapo pripažintais medicininės terapijos pasirinkimais daugeliui 2 tipo DM pacientų, keli iš šių sintetinių vaistų turi rimtų šalutinių poveikių. Pavyzdžiui, roziglitazonas ir pioglitazonas padidina miokardo infarkto, stazinio širdies nepakankamumo ir periferinės edemos dažnį. susiję su padidėjusia kancerogenezės ir net mirties rizika po ilgalaikio vartojimo (Nissen ir Wolski, 2007; Zhang ir kt., 2007; Home ir kt., 2009). Todėl labai svarbu atrasti alternatyvius agentus, kurie turėtų antihiperglikeminį poveikį, bet turėtų mažiau šalutinių poveikių. Palyginti su sintetinėmis cheminėmis medžiagomis, natūraliai gautaisantihiperglikeminisagentai, tokie kaip vaistažolės ir tradiciniai vaistai, turi ilgą naudojimo istoriją ir gali būti iš esmės saugūs galimi naujų šaltiniųantihiperglikeminisnarkotikų (Yeh ir kt., 2003).

Remiantis Kinijos farmakopėja (Kinijos farmakopėjos komisija, 2010), Cistanche, parazitinių augalų gentis, priklausanti Orobanchaceae šeimai, dažniausiai naudojama kaip tradicinis vaistas nuo gydymo sutrikimų ir nevaisingumo. Kaip įrašyta kinų medicinos knygose, tokiose kaip „BenCao TuJing“ ir „Nature of Drug“, Cistanche gentis taip pat buvo verdama su aviena, bulvėmis arba ryžiais, kad būtų gaminamas tonizuojantis maistas, skirtas gydyti pervargimo sukeltus sutrikimus šimtus metų, o tai rodo, kad Cistanche gentis yra pavojinga vartoti per burną.

Tradicinėje kinų medicinoje DM vadinamas „Xiao Ke“ simptomu ir šimtmečius buvo gydomas kiniškomis žolelėmis. Džiovintas sultingas Cistanche rūšies stiebas tradiciškai naudojamas kaip devynių vaistų nuo diabeto receptų („Xiao Ke Fang“) dalis tradicinės kinų medicinos knygoje „Sengji Zonglu“. Tačiau iki šiol nebuvo jokių šiuolaikinių mokslinių ataskaitų, patvirtinančių šį tradicinį teiginį apie Cistanches rūšis.

Cistanchekanalėlių(Schenk) R. Wight, Cistanche rūšis, parazituojanti Tamarix augalo, kuris daugiausia auginamas Taklamakano dykumoje, šaknyse, neseniai buvo naudojamas greitai paruošiamai arbatai, skirtai naudoti kaip funkcinį maistą, gaminti (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011). .

CistanchekanalėliųJame yra daug feniletanoidinių glikozidų (PhG), iridoidų, lignanų, alditolių, oligosacharidų, polisacharidų ir lakiųjų junginių, tokių kaip palmitiko rūgštis ir linolo rūgštis (Song ir kt., 2000; Jiang ir Tu, 2009). Manoma, kad pagrindiniai aktyvūs Cistanche rūšių komponentai yra PhG (Xie ir kt., 2006; Jiang ir Tu, 2009).Cistanchekanalėliųir jo komponentai, tokie kaip PhG, polisacharidai ir polifenoliai, pasižymi geru antioksidaciniu poveikiu (Denget al., 2004; Pellati ir kt., 2004; Frum ir kt., 2007; Sui ir kt., 2011); Wang ir kt., 2011), antihipertenzijos (Ahmad ir kt., 1995) ir hipocholesterino (Shimoda ir kt., 2009) poveikį. Daugybė ataskaitų parodė, kad PhG, polisacharidai ir polifenoliai veikiaantihiperglikeminisdaro teigiamą poveikį 2 tipo DM dėl laisvųjų radikalų pašalinimo ir gliukozės sukelto oksidacinio streso moduliavimo (Pinto ir kt., 2010; Saltiel, 2001; Gulati ir kt., 2012). Šie komponentai ir biologinis aktyvumasCistanchekanalėliųrodo, kad jis gali būti naudojamas 2 tipo DM gydyti. Dėl to, kad nėra ataskaitų, apibūdinančių poveikįCistanchekanalėliųgydant DM, manėme, kad verta ištirti su diabetu susijusį poveikį.Cistanchekanalėlių. Taigi, mes ištyrėme poveikįCistanchekanalėliųapie hiperglikemiją ir dislipidemiją BKSdb/db pelėms (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jackson Laboratory stocknumber 00642), 2 tipo DM modelis, pasižymintis daugeliu žmogaus DM savybių, įskaitant progresuojančią hiperglikemiją, atsparumą insulinui ir nutukimą (Hummel). ir kt., 1966; Nishina ir kt., 1994; Uchida ir kt., 2005; Srinivasan ir Ramarao, 2007).

2. Medžiagos ir metodai

2.1. Chemikalai

Verbaskozidas (grynumas 493 proc.) ir echinakozidas (grynumas 493 proc.) buvo įsigyti iš Nacionalinių maisto ir vaistų kontrolės institutų (Pekinas, Kinija). HPLC klasės metanolis buvo pirktas iš Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, JAV). Akarbozė buvo pirkta iš „Bayer“ (West Haven, CT, JAV). Išgrynintas vanduo buvo gaminamas naudojant aMillipore Milli-Q Integral 3 System ir Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, JAV).

2.2. Cistanche tubulosa miltelių paruošimas

Džiovinti sultingi stiebaiCistanchekanalėlių(Pavyzdys kodas 109092, auginamas Hetian, Sindziangas, Kinija) buvo nupirktas iš Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. (Hetian, Sindziangas, Kinija). Džiovintos šaknys buvo susmulkintos į miltelius, sijotos per tinklinį sietą, sumaišytos. kruopščiai, sandariai uždarytus mažose pakuotėse, kad milteliai būtų izoliuoti nuo šviesos ir drėgmės, ir laikomi 4 1C temperatūroje.

2.3. Cistanche tubulosa identifikavimas

Džiovintą sultingą mėginio 109092 stiebą pagal jų morfologines savybes atpažino prof. DeXiang Gu ir prof. Xin Liu, kurie yra Cistanche rūšių ekspertai. Mėginiai buvo toliau identifikuoti atliekant DNR seką. Visa genomo DNR buvo išskirta iš 109 092 mėginio naudojant AxyPrep™ MultisourceGenomic DNA Kit (Axygen, CA, JAV). ITS sritis, kurioje yra 5.8S rDNR fragmentas, buvo amplifikuota naudojant pradmenų sekas ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3′ ir 5′ TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3′ (BGI Genomics, Šendženas, Kinija), naudojant metodą, aprašytą Schneeweiss ir kt. (Schneeweiss ir kt., 2004). Amplifikuotą DNR sekvenavo BGI (BGI Genomics, Shenzhen, Kinija), o rezultatas buvo lyginamas suCistanchekanalėlių5,8 s rDNR seka „GenBank“.

2.4. HPLC analizė

Du PhG, echinakozidas ir verbaskozidas, buvo naudojami kaip kokybės standartaiCistanchekanalėlių, remiantis Kinijos farmakopėja (Kinijos farmakopėjos komisija, 2010). HPLC yra dažniausiai naudojamas PhG kokybiniam ir kiekybiniam įvertinimui. Taigi, verbaskozido ir echinakozido turinysCistanchekanalėliųbuvo nustatyti pagal mūsų anksčiau paskelbtą HPLC metodą (Zhao ir kt., 2011). Trumpai tariant, 0,1 gCistanchekanalėliųmiltelių buvo įberta į 1{{10}} ml išgryninto vandens ir intensyviai maišoma orbitinėje purtyklėje (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, Niujorkas, JAV) 10 min kambario temperatūroje. Kieta medžiaga pakartotinai ekstrahuota du kartus tomis pačiomis sąlygomis. Ekstraktai buvo sujungti, sureguliuoti iki 50 ml ir centrifuguoti 12, 000 g 5 min. Supernatantas buvo filtruojamas per 0, 45 μm porų politetrafluoretileno (PTFE) švirkšto filtrą (Pall, Ann Arbor, MI, JAV). Tada 20 ul supernatanto buvo įšvirkščiama į HPLC sistemą (Binary HPLC Pump 1525, RefractiveIndex Detector 2414, Photodiode Array Detector 2996; Waters, Milford, MA, JAV), kurioje buvo kolonėlė Symmetry C18 (4,6 mm, 5 μm, 250 mm). Waters) ir apsaugos kolona (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Waters); sistema buvo valdoma naudojant EmpowerPros programinę įrangą (Waters, Milford, MA, JAV) su 1 ml/min srauto greičiu 30 1C temperatūroje. Judanti fazė buvo pagaminta sumaišant tirpiklį A (0,5 proc. (V/V) acto rūgšties vandeninį tirpalą) ir tirpiklį B (metanolį), kad susidarytų tiesinis 25–40 procentų B gradientas per 0–10 min. Echinakozido ir verbaskozido sulaikymo trukmė buvo 10,4 min. ir 13,6 min., kai didžiausia UV absorbcija buvo 330 nm.

2.5. Cistanche tubulosa bendro fenolio kiekio, polisacharidų kiekio ir antioksidacinio aktyvumo analizė

2.5.1. Mėginio paruošimas

Cistanchekanalėliųekstraktas buvo paruoštas išgrynintu vandeniu, naudojant anksčiau paskelbtą metodą (Zhao ir kt., 2011) su nedideliais pakeitimais, siekiant nustatyti bendrą fenolio kiekį, polisacharidų kiekį ir antioksidacinį aktyvumą (1 pav.). Trumpai tariant, 1 gCistanchekanalėliųmilteliai buvo įberti į 15 ml išgryninto vandens kambario temperatūroje, intensyviai maišomi sūkuriu, naudojant orbitinį kratytuvą 5 min., o supernatantas buvo išgautas centrifuguojant 3000 g 15 min. Nuosėdos buvo iš naujo ekstrahuotos du kartus tomis pačiomis sąlygomis. Kombinuotas supernatantas buvo sureguliuotas iki 50 ml išgrynintu vandeniu ir prieš analizę praleidžiamas per 0, 45 μm porų PTFE švirkšto filtrą (Pall).

2.5.2. Bendrojo fenolio kiekio analizė

Bendras fenolio kiekis buvo nustatytas naudojant Folin-Ciocalteureagent ir galo rūgštį kaip etaloninį junginį, kaip aprašė Singleton ir Rossi (Dubois ir kt., 1956; Singleton ir Rossi, 1965) su nedideliais pakeitimais. Trumpai, 0.1 mlCistanchekanalėliųekstraktas buvo sumaišytas su {{0}},9 ml išgryninto vandens ir 5 ml Folin-Ciocalteu reagento (anksčiau atskiesto 10-kartą distiliuotu vandeniu), leista pastovėti 25 1C temperatūroje. 3,5 min., tada į mišinį įpilama 4 ml natrio bikarbonato (7,5 % m/t) tirpalo ir inkubuojama {{10}}C temperatūroje 60 min. Absorbcija buvo matuojama esant 765 nm, naudojant spektrofotometrą (Perkin Elmer λ 25 UV-visible, Waltham, MA, JAV). Bendras fenolio kiekis buvo nustatytas naudojant standartinę kreivę, sudarytą naudojant galio rūgštį (0–0,6 mg/ml) kaip standartą. Rezultatai buvo apskaičiuoti miligramais galo rūgšties ekvivalentais (GAE)/1 gCistanchekanalėliųneapdoroti milteliai. Visi testai buvo kartojami keturis kartus.

2.5.3. Polisacharidų kiekio analizė

Polisacharidų kiekisCistanchekanalėliųbuvo matuojamas fenolio ir sieros rūgšties metodu (Dubois ir kt., 1951; Duboiset al., 1956). Trumpai tariant, 1 ml tinkamai praskiesto Cistanchetubulosa ekstrakto ir 0,5 ml fenolio tirpalo buvo įdėta į užsukamus dangtelius mėgintuvėlius, kurie buvo uždengti ir maišomi sūkuriu. Tada 2,5 ml koncentruotos sieros rūgšties buvo įpilta tiesiai į skysčio paviršių per 5 sekundes. Tada vamzdeliai buvo uždaromi, maišomi sūkuryje 5 s, inkubuojami 2 minutes 100 1C temperatūroje ir prieš analizę leista atvėsti iki kambario temperatūros. Absorbcija buvo išmatuota esant 490 nm, naudojant spektrofotometrą (Perkin Elmer λ25 UV-matomas), lyginant su 70 procentų metanolio tuščiuoju mėginiu. Polisacharidų kiekis buvo nustatytas naudojant standartinę kreivę, sudarytą naudojant gliukozę (0–100 mg/ml) kaip standartą. Rezultatai buvo apskaičiuoti procentais polisacharido/Cistanchekanalėliųneapdoroti milteliai. Visi testai buvo pakartoti tris kartus.

2.5.4. Bendrojo antioksidacinio aktyvumo analizė

Antioksidacinis aktyvumasCistanchekanalėliųekstraktas, akarbozė ir roziglitazonas buvo nustatyti 2,2'-amino-di(2-etilbenzotiazolino sulfonrūgšties-6) amonio druskos (ABTS) ir geležies jonų (Fe3þ) redukuojančios antioksidacinės galios tyrimu ( FRAP), naudojant komercinius rinkinius (Beyotime, Haimen, Kinija). Su atitinkamais oksidatoriais ABTS gali būti oksiduojamas į žalią ABTS þ; antioksidantai gali slopinti šį procesą. Bendras antioksidantų antioksidacinis aktyvumas gali būti atspindėtas ABTS þ absorbcija prie 734 nm. Absorbcija buvo matuojama ties 734 nm (ABTS), naudojant mikroplateerį (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, JAV) su Trolox (ABTS) kaip antioksidantų standartas. ABTS tyrimo rezultatai buvo apskaičiuoti kaip mM Trolox Equivalent Antioxidant Capacity (TEAC)/1 g miltelių.

Esant rūgštinėms sąlygoms, antioksidantai gali atkurti ferictripiridiltriaziną (Fe3þ-TPTZ) į mėlyną Fe2þ-TPTZ. Bendrą antioksidantų antioksidacinį aktyvumą gali atspindėti Fe2þ-TPTZ absorbcija esant 593 nm. Absorbcija buvo matuojama esant 593 nm (FRAP), naudojant mikroplokštelių skaitytuvą (Epoch), o antioksidanto standartu buvo FeSO4 (FRAP). FRAP tyrimo rezultatai buvo apskaičiuoti kaip mM FeSO4 ekvivalentinė antioksidacinė talpa (FEAC)/1 g miltelių. Visi bandymai buvo kartojami keturis kartus.

2.6. Cistanche tubulosa poveikis hiperglikemijai db / db pelėms

2.6.1. Gyvūnai ir gydymo grupės

BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) pelių patinus ir jų amžių atitinkančius nediabetinius heterozigotus vados draugus (db/þ) 5–6 savaičių amžiaus suteikė Nacionalinis mutantinių pelių modelio išteklių centras. Nankingo universiteto gyvūnų tyrimų centras (Nandzingas, Kinija). Gyvūnų priežiūra ir eksperimentinės procedūros buvo patvirtintos Sun Yat-sen universiteto Gyvybės mokslų mokyklos laboratorinių gyvūnų etikos komiteto (patvirtinimo kodas 0046500) ir buvo atliekamos pagal Kinijos eksperimentų su gyvūnais taisykles. Gyvūnai buvo laikomi 2272 1C specifinio patogeno neturinčioje (SPF) klasės patalpoje, kurioje drėgnumas 6075 proc. 12 valandų šviesos ir tamsos cikle, ir šeriami išvalytu AIN-93G maistu (Trophic Animal Feed High- tech Co., Ltd., Nantong, Kinija) ir tiekė išvalytą vandenį ad libitum.

Praėjus septynioms dienoms po atvykimo, pelėms, nesergančioms diabetu db/þ, buvo duodamas išgrynintas vanduo (nešiklis) kaip įprastai diabeto grupių (n¼7) kontrolinei grupei, o diabetu sergančios db/db pelės buvo pasvertos ir atsitiktinai suskirstytos į 6 grupes (n¼8). padariniusCistanchekanalėlių2 tipo diabetu sergančių db/db pelių (1 lentelė). Thedb/þ pelėms buvo duodama nešiklio, o db/db pelėms buvo duodama nešiklio, roziglitazono (0,52 mg/kg per dieną), akarbozės (19,5 mg/kg per dieną) arba trys dozėsCistanchekanalėlių(atitinka 120,9, 72,6 arba 24,2 mg verbaskozido/kg per dieną ir atitinkamai vadinama CT120.9, CT72.6 arba CT24.2) 45 dienų trukmei. Dozės išCistanchekanalėliųbuvo nustatyti pagal Kinijos Liaudies Respublikos farmakopėjos (PPRC) rekomenduojamą neapdorotų miltelių dozę;Cistanchekanalėlių120,9, 72,6 ir 24,2 mg verbaskozido/kg per parą dozės, atitinkančios PPRC rekomenduojamą žalių miltelių dozės 5-, 3- ir 1- kartų praskiedimus. Visi tiriamieji mėginiai, skirti vartoti per burną, buvo ištirpinti tinkamos koncentracijos išvalytame vandenyje, kad tokio paties kūno svorio pelėms būtų duodami panašūs tiriamųjų mėginių kiekiai. Bendri suleisti tūriai buvo 01 ml, o tiriamieji mėginiai buvo duodami per burną kiekvienai pelių grupei kiekvieną dieną nuo 16:30 iki 17:30 45 dienas. Visą eksperimentinį laikotarpį buvo stebimas kūno svoris ir gliukozės kiekis kraujyje. Eksperimento pabaigoje (50 dieną) pelės nevalgė 14 valandų, o kraujo mėginiai buvo paimti iš oftalmologinės venos, inkubuojami kambario temperatūroje 30 min., centrifuguojami ir serumo mėginiai buvo laikomi 70 1C temperatūroje. tolesnis tyrimas. Vėliau pelės buvo eutanazuotos. Kepenys ir griaučių raumenys buvo paimti, nuplauti šaltu fiziologiniu tirpalu, kad būtų pašalintas kraujas, greitai užšaldyti skystame azote ir laikomi 70 1C temperatūroje tolesniam tyrimui.

2.6.2. Gliukozės kiekio kraujyje nevalgius tyrimas, interperitonealinio insulino tolerancijos testas (ITT) ir serumo insulino lygis nevalgius (FINS)

Gliukozės kiekis kraujyje nevalgius buvo matuojamas likus 14 valandų nevalgius iki eksperimento su gyvūnais pradžios (0 d.), 1 dieną {{10}} ir kas 5 dienas 20–45 eksperimento dienomis. naudojant gliukozės kiekio kraujyje stebėjimo sistemą (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Manheimas, Vokietija). FBG reikšmių padidėjimas procentais (FBG procentinės vertės: FBG padidėjimo procentas ) dieną x (20–45 diena) buvo apskaičiuotas naudojant (BGday x BGday 0) / BG0 100 dieną, kad būtų parodytas kiekvienos FBG vertės padidėjimas. grupėje, palyginti su jų pradinėmis FBG reikšmėmis. Gliukozės kiekis kraujyje po valgio buvo nustatytas praėjus 120 minučių po geriamosios gliukozės (2 g/kg KM) vartojimo 40 dieną.

ITT buvo atliktas 45 eksperimento dieną, po naktinio badavimo (14 val.). Gliukozės kiekis uodegos venų kraujyje buvo matuojamas prieš insulino injekciją (0 min.) ir 30 min., 60 min. po insulino injekcijos tarp pilvaplėvės (0,1 TV/kg KM). Gliukozės atsakas ITT buvo išreikštas kaip integruotos sritys po insulino kreivėmis (AUCinsulinas), apskaičiuotos naudojant trapecijos schemą (Vishwakarma ir kt., 2003). Eksperimento pabaigoje insulino koncentracija serume nevalgius buvo analizuojama naudojant žiurkės/pelės insulino ELISA rinkinį iš Millipore (Bedfordas, MA, JAV); serumo mėginiai buvo paruošti pagal rinkinio instrukcijas. Homeostatinio modelio atsparumo insulinui įvertinimas (HOMA-IR) indeksas buvo apskaičiuotas pagal šią formulę: HOMA-IR¼ insulino nevalgius (ng/ml) gliukozės kiekis kraujyje nevalgius (mmol/L)/22,5 (Matthews ir kt., 1985).

2.6.3. Lipidų kiekio serume tyrimas

Bendrojo cholesterolio (TC), didelio tankio lipoproteinų cholesterolio (DTL-c) ir trigliceridų (TG) koncentracijos serume buvo nustatytos naudojant komercinius fermentinius rinkinius (Biosino Biotechnology & Science Inc., Pekinas, Kinija). Mažo tankio lipoproteinų cholesterolio (MTL-c) kiekis buvo apskaičiuotas kaip TC-TG/5 – DTL-c, o labai mažo tankio lipoproteinų cholesterolio (VLDL-c) lygis buvo apskaičiuotas kaip TG/5, pagal Friedewaldo lygtį (Friedewald). et al., 1972). Aterogeninis indeksas buvo apskaičiuotas kaip (TC HDL-c)/HDL-c.

2.6.4. Kepenų ir skeleto raumenų glikogeno lygio tyrimas

Sušaldytos kepenys ir griaučių raumenys buvo apdoroti glikogenanalizei iš karto po to, kai buvo išimti iš 70 1C šaldiklio. Glikogeno kiekis kepenyse ir griaučių raumenyse buvo matuojamas naudojant komercinį glikogeno rinkinį (Jiancheng, Nanjing, Kinija), pagrįstą Kepplerio ir Deckerio metodu (Keppler ir Decker, 1974). Mėginių sugertis esant 505 nm buvo išmatuota atšaldžius mėgintuvėlius iki kambario temperatūros. Glikogeno kiekis kiekviename audinio mėginyje buvo išreikštas mg gliukozės viename g audinio.

2.7. Statistinė analizė

Visi rezultatai išreiškiami kaip vidurkis7SEM ir buvo analizuojami naudojant socialinių mokslų programinės įrangos (SPSS 16.0, Chicago, IL, JAV) arba GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, JAV) statistinių paketų ANOVA. HOMA-IR indeksai taip pat buvo įvertinti naudojant dviejų imčių nepriklausomą t testą po logaritminės transformacijos. AUC reikšmės buvo apskaičiuotos naudojant GraphPad Prism 5. P reikšmės, mažesnės nei 0,05, rodo statistiškai reikšmingus skirtumus.

3. Rezultatai

3.1. Cistanche mėginio identifikavimas

Sekos derinimo rezultatai rodo, kad sustiprinta seka yra tokia patiCistanche kanalėlių5.8S rDNR dalinės ir visos sekos genai (614 nukleotidų; Gen-Bank prisijungimo numeris AB217871). Remiantis morfologinėmis savybėmis ir 5,8S rDNR geno seka, 109 092 mėginys identifikuojamas kaipCistanchekanalėlių.

3.2. Kiekybinis Cistanche tubulosa verbaskozido ir echinakozido kiekio nustatymas

Verbascoside ir echinakozido turinys inCistanchekanalėliųbuvo kiekybiškai įvertinti naudojant atitinkamus standartus. Verbaskozido ir echinakozido turinysCistanchekanalėliųbuvo atitinkamai 2,66 ir 11,59 proc. HPLC chromatogramaCistanchekanalėliųekstraktas parodytas 2 pav.

3.3. Bendras Cistanche tubulosa fenolio kiekis, polisacharidų kiekis ir antioksidacinis aktyvumas

Bendras fenolio kiekisCistanchekanalėliųbuvo 66,2970,44 mg GA/g. Polisacharidų kiekisCistanche kanalėliai buvo10.1570.26 proc. ABTS ir FRAP tyrimai parodė, kad antioksidacinis aktyvumas buvo 1,3970,06 mM TEAC/g ir 1,6170,04 mM FEAC/g.Cistanchekanalėlių, {{0}}.1570.01 mM TEAC/g ir 0,1270,01 mM FEAC/g akarbozei ir 0,1670,01 mMTEAC/g ir 0,1370,01 mM FEAC/g atitinkamai roziglitazonui.

3.4. Antihiperglikeminis Cistanche tubulosa poveikis db / db pelėms

Mūsų rezultatai tai parodėCistanche kanalėliųgali slopinti padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje nevalgius ir padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje po valgio, padidinti jautrumą insulinui ir susilpninti diabetu sergančių db/db pelių kūno svorio (KM) sumažėjimą. Apskritai,Cistanchekanalėliųeksperimento metu buvo veiksmingesnis mažinant hiperglikemiją nei akarbozę, be to, Cistanche tubulosa buvo pranašesnė už akarbozę, pagerindama atsparumą insulinui (p reikšmės nurodytos toliau).

3.4.1. Cistanche tubulosa poveikis kūno ir kepenų svoriui

Kontrolinės diabeto grupės BW nuolat didėjo per pirmąsias 25 dienas. Tačiau progresuojant diabetui, diabeto kontrolės pelių BW šiek tiek sumažėjo iki 30 dienos (1 papildoma lentelė). VidujeCistanchekanalėliųgrupės, visos trys dozėsCistanchekanalėliųsumažino svorio netekimo greitį, palyginti su diabetinėmis kontrolinėmis pelėmis (be reikšmės, 1 papildoma lentelė). Teigiamai kontrolinėje grupėje roziglitazonas reikšmingai padidino kūno svorį nuo 2 dienos 0, palyginti su diabeto kontroline grupe (po0,05). Priešingai, akarbozė sulėtino svorio metimo greitį, palyginti su diabeto kontroline grupe. Normalioje kontrolinėje grupėje kūno svoris eksperimento metu nuolat didėjo ir buvo žymiai mažesnis nei diabeto kontrolinės grupės (po0,001).

Eksperimento pabaigoje kepenų svoris ir kepenų ir kūno svorio santykis buvo reikšmingai padidėjęs rosiglitazono grupėje (po{0}}.001), palyginti su diabeto kontroline grupe.

3.4.2. Cistanche tubulosa poveikis gliukozės kiekiui kraujyje

Cistanchekanalėliųrodomasantihiperglikeminisveikia indb/db peles po 20 dienų per burną ir ilgą laiką gali kontroliuoti FBG lygį ir FBG padidėjimo procentinę reikšmę db/db pelėms, priklausomai nuo dozės, kaip rodo žymiai sumažėjęs badavimas ir po valgio. gliukozės kiekis kraujyje (3 pav., 2 lentelė). Diabeto kontrolinėje grupėje FBG lygis nuolat didėjo eksperimento metu ir buvo apie 6 kartus didesnis nei normalios kontrolinės grupės 45 dieną (28,3071,027 mmol/L vs. 4,6670,350 mmol/L; po0,001). Visos trys dozėsCistanchekanalėliųreikšmingai slopino FBG tendenciją didėti db/db pelėms viso eksperimento metu, o CT120.9 parodė stipriausią hipoglikeminį poveikį (20, 35 ir 45 diena: po{{1{{ 16}}}}.001; 4 diena0: po0.05 prieš diabeto kontrolę). Teigiamose kontrolinėse grupėse roziglitazonas (0.52 mg/kg) ir akarbozė (19,5 mg/kg) taip pat reikšmingai slopino FBG padidėjimą db/db pelėms viso eksperimento metu (2 diena{41}). } iki 45: po0.001, 10 diena: po0,05, roziglitazonevas. diabeto kontrolė; 35 diena: po0,001, 40 diena: po0,01, 20 ir 45 diena: po0. 05, akarbozė ir diabeto kontrolė). Tačiau akarbozė (19,5 mg/kg) buvo mažiau veiksminga nei roziglitazonas (20 diena: po0,05; 30 diena: po0,01; 35–45 diena: po0,001) ir CT120,9 (45 diena: po0,001) . Normalioje kontrolinėje grupėje FBG lygis išliko pastovus viso eksperimento metu ir buvo žymiai mažesnis nei diabeto kontrolinės grupės (po0,001).

Po 20 dienų vartojimo,Cistanche kanalėliųreikšmingai slopino db/db pelių gliukozės kiekio kraujyje padidėjimą (3 pav.). Eksperimento metu padidėjo FBG padidėjimas procentais diabeto kontrolinės grupės ir akarbozės (19,5 mg/kg KM) grupėse. FBG padidėjimo procentinės vertės iš trijųCistanchekanalėliųCT120.9 grupės FBG padidėjimo procentinės reikšmės išliko pastovios nuo 30 iki 45 dienos, o CT72.6 ir CT24.2 padidėjo nežymiai (p40.05) iki 45 dienos. eksperimentas, trys dozėsCistanchekanalėlių(CT120.9, CT72.6 ir CT24.2) žymiai sumažino FBG padidėjimo procentų verčių padidėjimą 181,5 proc., 151,72 proc. ir 123,58 proc., palyginti su diabeto kontroline grupe (PO{{). 24}}.001), atitinkamai. Nuo 20 dienos iki 40 dienos FBG padidėjimo procentinės reikšmės trijose Cistanche tubulosa grupėse buvo mažesnės arba panašios į akarbozės grupę (p40,05). 45 dieną FBG padidėjimas procentais CT120,9 grupėje buvo žymiai mažesnis nei akarbozės grupėje (po0,01).

Cistanchekanalėliųpasireiškė nuo dozės priklausomas hipoglikeminis poveikis (2 lentelė). Eksperimento pabaigoje CT120.9 grupės FBG lygis buvo žymiai mažesnis nei diabeto kontrolės, akarbozės ir dviejų kitų.Cistanchekanalėliųgrupės (CT120.9 vs.acarbose, CT72.6 ir CT24.2, po0.01; CT120.9 vs. diabetic control,po0.001; 2 lentelė). Iki eksperimento pabaigos FBG lygiai iš trijųCistanchekanalėliųgrupių (CT120.9, CT72.6 ir CT24.2), palyginti su pradiniu FBG lygiu, padidėjo atitinkamai 53,41 proc., 83,19 proc. ir 111,33 proc., o diabeto kontrolinės grupės ir akarbozės grupės FBG lygis padidėjo 23491. proc. ir 150,76 proc. Iš trijų išbandytų Cistanche tubulosa dozių viso eksperimento metu tik CT120.9 sumažino FBG lygį. CT72.6 ir CT24.2 buvo mažiau veiksmingi mažinant FBG lygį nei CT120.9 (2 lentelė, 1 papildomas pav.). CT120.9 grupės FBG lygis padidėjo tik nuo 30 dienos, o kitų dviejų FBG lygisCistanchekanalėliųgrupės ir akarbozės grupė didėjo sparčiau. Nuo 10 iki 40 dienos FBG lygiai yra trysCistanchekanalėliųgrupės buvo mažesnės arba panašios į teakarbozės grupę (19,5 mg/kg KM); šie skirtumai nebuvo statistiškai reikšmingi (p40,05).

4 dieną 0 CT120.9 reikšmingai sumažino po valgio padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje (po0,05, 2 lentelė) praėjus 2 valandoms po vienos geriamosios gliukozės dozės (2 g/kg). CT120.9 poveikis gliukozės kiekiui kraujyje po valgio db/db pelėms buvo panašus su 19,5 mg/kg akarbozės (p40,05). CT72.9 ir CT24.2 poveikis buvo mažiau veiksmingas nei roziglitazono (po0,001).

3.4.3. Cistanche tubulosa poveikis serumo insulino lygiui nevalgius ir interperitoninei insulino tolerancijai

FINS rezultatai parodė, kad po 45 dienų peroralinio vartojimo CT120.9 nereikšmingai padidino db/db pelių serumo insulino lygį (p40,05) 40,73 proc. procentų (po0,05 vs. diabeto kontrolė; 3 lentelė).

HOMA-IR indeksas buvo apskaičiuotas siekiant kiekybiškai įvertinti atsparumo insulinui ir nepakankamos ląstelių funkcijos indėlį į hiperglikemiją nevalgius. Palyginti su diabeto kontroline grupe, CT120.9 nežymiai pagerino HOMA-IR sisteminio insulino jautrumo indeksą 15,30 proc. (p40,05), o roziglitazonas reikšmingai pagerino HOMA-IR indeksą 35,30 proc. (PO0,001 vs. diabeto kontrolė; 3 lentelė). ITT buvo naudojamas poveikiui įvertintiCistanchekanalėliųapie jautrumą insulinui po egzogeninės insulino injekcijos. Rezultatai parodė, kad CT120.9 pagerino insulino atsaką diabetu sergantiems db/db pelėms. CT120.9 poveikis buvo panašus į roziglitazoną ir buvo pranašesnis už akarbozę.CT12{{10}}.9 ir roziglitazonas reikšmingai sumažino gliukozės koncentraciją kraujyje 0 min. (prieš insuliną). injekcija, po0.001 prieš diabeto kontrolę) ir 30 min. (po0.01 CT120.9, po0,001 roziglitazono) po insulino injekcijos (4 pav.). CT120.9 ir roziglitazonas sumažino insulino AUC 27,92 proc. ir 43,89 proc., palyginti su diabeto kontrole. Nebuvo reikšmingo skirtumo tarp gliukozės kiekio kraujyje CT120.9 ir roziglitazono grupėse bet kuriuo metu ITT metu. CT120.9 grupės gliukozės kiekis kraujyje buvo žymiai mažesnis nei akarbozės 0 min (prieš insulino injekciją, po0,01: CT120.9 lyginant su akarboze), 30 min (po0,01:CT120.9, palyginti su akarboze) ir 60 min. min (po0,05: CT120,9 vs. akarbozė) po insulino injekcijos (4 pav.). CT120.9 sumažino AUCinsuliną 28,79 proc., palyginti su akarboze. Akarbozė, CT72.6 ir CT24.2 neturėjo reikšmingo poveikio AUCinsulino ar gliukozės kiekiui kraujyje jokiu ITT laiko momentu. Tiek normalios kontrolinės grupės FIN, tiek ITT rezultatai buvo žymiai mažesni nei diabeto kontrolinės grupės (po0,05: FIN; po0,001: ITT).

3.4.4. Cistanche tubulosa poveikis kepenų ir skeleto raumenų glikogeno lygiui

Glikogeno lygis įvairiuose audiniuose yra tiesioginis jautrumo insulinui atspindys, nes insulinas skatina tarpląstelinį glikogeno nusėdimą. Rosiglitazonas reikšmingai sumažino glikogeno kiekį kepenyse 59,61 proc. (po0.001), o raumenų glikogeno lygį padidino 33,93 proc. (po0,05, palyginti su diabeto kontrole). CT24.2 sumažino glikogeno kiekį kepenyse 30,41 proc. (po0,05, palyginti su diabeto kontrole). Mažesnės Cistanche tubulosa dozės neturėjo reikšmingos įtakos nei kepenų, nei skeleto raumenų glikogeno lygiui.

3.5. Hipolipideminis Cistanche tubulosa poveikis db / db pelėms

Norėdami įvertinti poveikįCistanchekanalėliųapie dislipidemiją, mes nustatėme bendro cholesterolio, TG, DTL-c, MTL-c ir VLDL-c kiekį db/db pelėse. Mūsų rezultatai tai rodoCistanchekanalėliųgali pagerinti dislipidemiją padidindamas DTL-c kiekį, sumažindamas TG, MTL-c ir VLDL-c kiekį, be to, sumažindamas cholesterolio kiekį db/db pelėse. CT120.9 (po0.05) ir CT24.2 (po0.001) reikšmingai sumažino TC lygį pelėms, sergančioms diabetu db/db (3 lentelė). ), palyginti su diabeto kontrole. Iš visų eksperimentinių grupių tik CT24.2 reikšmingai sumažino TG (po0,05) ir VLDL-c (po0,05) lygius, palyginti su diabeto kontrole. Visos trys dozėsCistanchekanalėliųžymiai sumažino MTL lygį (po0.01 CT120,9, po0,05 CT72,6, po0,001 CT24,2, palyginti su diabeto kontrole) . Visos trys dozėsCistanchekanalėlių(CT120.9, CT72.6 ir CT24.2) nežymiai padidino DTL lygį – 9,78 proc., 7,32 proc. ir 7,78 proc. (p40,05, palyginti su diabeto kontrole).

Iš šių lipidų parametrų žemas DTL-c/TC lygis yra reikšmingiausias nepriklausomas vainikinių arterijų ligos rizikos veiksnys.CT120.9 (po0.05) ir CT24.2 (po0.001) palyginti su diabeto kontrole) reikšmingai padidino DTL-c/TC lygį. Aterogeninis indeksas, kuris yra vainikinių arterijų ligos rizikos veiksnys, sumažėjo nuo visų trijų dozių.Cistanchekanalėlių(po{{0}}.001 CT120.9 ir CT24.2, po0.01 CT72.6 lyginant su diabeto kontrole).

Teigiamai kontrolinėje grupėje roziglitazonas reikšmingai padidino TC (po{0}}001) ir MTL-c (po0,01) koncentraciją, palyginti su diabeto kontrole. Rosiglitazonas taip pat reikšmingai padidino DTL c lygį 57,32 proc. (po0,001), bet neturėjo teigiamo poveikio DTL-c/TC lygiui ar aterogeniniam indeksui. Akarbozė neturėjo jokio reikšmingo poveikio db / db pelių lipidų indeksams serume.

4. Diskusija

Šis tyrimas buvo sukurtas siekiant ištirti galimą antihiperglikeminį ir hipolipideminį aktyvumąCistanchekanalėlių.

In vitro tyrimo rezultatai parodė, kadCistanchekanalėliųsudėtyje yra daug fenolio ir polisacharidų ir pasižymi geru antioksidaciniu aktyvumu. Bendras fenolio kiekisCistanche kanalėliųyra mažesnis nei bendras fenolio kiekis arbatoje (Ankolekar ir kt., 2011) ir kavoje (Chu ir kt., 2011) ir didesnis nei daugelyje kitų.hiperglikeminisžolės, tokios kaip bruknės (Pinto ir kt., 2010), jūros dumbliai (Nwosu ir kt., 2011), avinžirniai (Sreerama ir kt., 2012) ir kai kurie tradiciniai vaistiniai augalai, naudojami 2 tipo DM gydyti (Gulatiet al., 2012). Cistanche tubulosa polisacharidų kiekis yra mažesnis nei Panax ženšenio (Wanget al., 2011) ir arbatos (Chu ir kt., 2011) polisacharidų kiekis ir didesnis nei daugelyje kitų.antihiperglikeminisžolės, tokios kaip Aloe vera L. (Hu ir kt., 2003), jujuba (Sun ir kt., 2011), Polyporus umbellatus (Tian ir kt., 2007), Rheum palmatum (Ni ir kt., 2007) ir kai kurie tradiciniai vaistiniai augalai, naudojami 2 tipo DM gydymui (Gulatiet al., 2012). Augalai, kuriuose yra daug antioksidantų, tokių kaip polifenoliai ir feniletanoidiniai glikozidai (PhG), dažnai identifikuojami kaip turintys antidiabetinį aktyvumą, kurį bent iš dalies lemia jų gebėjimas sumažinti oksidacinį stresą (Pinto ir kt., 2010; Saltiel, 2001; Gulati ir kt., 2012). Mūsų antioksidacinio tyrimo rezultatai atitinka ankstesnes ataskaitas (Arthur ir kt., 2011;priešBaoet al., 2010; Funes ir kt., 2009), kurie nurodė, kadCistanchekanalėliųturi reikšmingų antioksidacinių savybių. Cistanche tubulosa TEAC vertė ir FRAP vertė buvo didesnė nei žaliųjų kopūstų, morkų, agurkų, žaliųjų salotų, salierų (Pellegrini ir kt., 2003) ir kai kurių kitų augalų, turinčių gerą antioksidacinį poveikį, kurie buvo naudojami diabetui gydyti (Rahimi ir kt. , 2005), ir buvo daug didesnis nei akarbozės ir roziglitazono. Ankstesni klinikiniai tyrimai parodė, kad lipoinė rūgštis (Konrad ir kt., 1999) arba kiti antioksidantai (Paolisso ir kt., 1992) gali pagerinti insulinui atsparių ir (arba) diabetu sergančių pacientų jautrumą insulinui. Taigi, Cistanchetubulosa yra antioksidantų šaltinis, kuris gali turėti apsauginį poveikį nuo diabeto ir ilgalaikių diabeto komplikacijų.

Cistanche rūšys buvo naudojamos kaip tonizuojantis maistas ar vaistas šimtus metų, o tai rodo, kad jas saugu vartoti per burną. Ankstesnė ataskaita apie 14 dienų ūmaus toksiškumo bandymą parodėCistanchekanalėliųekstraktas priklauso faktinei netoksiškai: didžiausiai toleruojamai dozei (MTD).CistanchekanalėliųNustatyta, kad pelėms ekstraktas yra 410 g/kg. Per 14 stebėjimo dienų mirtingumas nebuvo užfiksuotas, o kiekvienos grupės tirtoms pelėms 24 valandų ir 14 dienų stebėjimo metu nebuvo pastebėta jokių ryškių toksiškumo požymių (Zhang ir kt., 2012). Didžiausia mūsų eksperimento dozė, 5, 084 g CTAE / kg KM per dieną, kuri atitinka 9, 10 g neapdorotų miltelių / kg pelėms, yra daug mažesnė nei MTD. Taigi, mūsų eksperimente dozė yra saugi.

2 tipo DM yra viena iš labiausiai paplitusių ir rimčiausių medžiagų apykaitos ligų pasaulyje, kuriai daugiausia būdinga hiperglikemija. Šiame tyrime pasirinkome BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) peles kaip 2 tipo DM modelį, kad ištirtumeCistanchekanalėliųgliukozės ir lipidų metabolizmui in vivo. db/dbmice yra gerai priimtas su gyvenimo būdu susijusių medžiagų apykaitos ligų genetinis graužikų modelis, kuris ypač naudingas vertinant vaistus nuo diabeto ir nutukimo. Ši pelių padermė atlieka leptino receptorių geno mutaciją, pasireiškia hiperglikemija, hiperlipidemija, atsparumas insulinui ir nutukimas iki 6–7 savaičių amžiaus (Hummel ir kt., 1966; Nishina ir kt., 1994; Uchida ir kt., 2005); Srinivasanas ir Ramarao, 2007).

Progresuojant diabetui, nežymus diabeto kontrolinės grupės kūno svorio sumažėjimas (1 papildoma lentelė) gali būti dėl sumažėjusio insulino kiekio plazmoje, kuris pasireiškia 10–12 savaičių amžiaus diabetinėmis db/db pelėms (Hummel ir kt., 1966). padidėjęs medžiagų apykaitos efektyvumas diabetu sergančių db/db pelių (Trayhurn, 1979). Sumažėjo svorio metimo greitis vartojant visas tris dozesCistanche kanalėliaigali būti dėl to, kadCistanchekanalėliųtaip pat padidino insulino kiekį kraujyje (3 lentelė), o tai naudinga sergant DM. Dėl rosiglitazono labai padidėjo kūno svoris, o tai yra žinomas šalutinis rosiglitazono poveikis. Žymiai padidėjęs kepenų svoris ir kepenų ir kūno svorio santykis rosiglitazono grupėje (po{1}}.001) rodo, kad rosiglitazonas gali sukelti lipidų kaupimąsi ir funkcinius pokyčius kepenyse.

In vivo tyrimo rezultatai parodė, kadCistanche kanalėliai galėtųslopina padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje nevalgius ir padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje po valgio ir padidina db/db pelių jautrumą insulinui. Apskritai,Cistanchekanalėliųbuvo veiksmingesnis mažinant hiperglikemiją ir dislipidemiją bei pagerinant atsparumą insulinui nei akarbozė eksperimento metu.

Po 20 dienų vartojimo per burną,Cistanchekanalėliųžymiai slopino didėjančias FBG lygio tendencijas ir FBG padidėjimo procentinę vertę db / db pelėms. Eksperimento pabaigoje,Cistanchekanalėliųparodė savoantihiperglikeminispoveikis priklauso nuo dozės. Šie rezultatai rodo, kadCistanchekanalėliųVartojant atitinkamą dozę, jis gali veikti kaip galimas gliukozės kiekį kraujyje mažinantis agentas. Didžioji dalis gliukozės pašalinama skeleto raumenyse po valgio, o FBG kiekį pirmiausia lemia kepenų gliukozės kiekis. FBG rezultatai tai parodėCistanchekanalėliųžymiai pagerino db/db pelių gliukozės kiekį kepenyse; blogas gliukozės kiekis kepenyse yra vienas iš trijų pagrindinių 2 tipo DM metabolinių defektų, kurie prisideda prie hiperglikemijos (Bavenholm ir kt.,2001). 3 dieną 0 diabeto kontrolinės grupės FBG padidėjimo procentinės reikšmės buvo mažesnės nei tikėtasi, o tai gali paaiškinti faktą, kad tik CT72,6 (po0,01), akarbozė (po0,05) ir androsiglitazonas ( po0,001) žymiai sumažino FBG padidėjimą, palyginti su diabeto kontroline grupe.

Bendrai 2 lentelės rezultatai rodo, kadCistanchekanalėliųveiksmingai kontroliuoja padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje po valgio po gliukozės pakrovimo, o tai rodo, kad Cistanche tubulosa yra kandidatas į hiperglikemiją po valgio palengvinti. Aukštas gliukozės kiekis kraujyje po valgio yra nepriklausomas širdies ir kraujagyslių komplikacijų, susijusių su 2 tipo DM, rizikos veiksnys (Ceriello, 2005; Blaak ir kt., 2012). CT120.9 reikšmingai slopino gliukozės kiekio kraujyje padidėjimą po valgio, o tai rodo, kad CT120.9 pagerino diabetu sergančių db/db pelių gliukozės toleranciją, o poveikis buvo panašus į 19,5 mg/kg akarbozės. Tačiau antihiperglikeminis CT120 poveikis. 9 buvo mažiau intensyvus nei roziglitazono.

Nepakankama insulino sekrecija ir atsparumas insulinui yra du iš trijų pagrindinių 2 tipo DM metabolinių defektų, kurie prisideda prie hiperglikemijos (Bavenholm ir kt., 2001). Mūsų analizės rezultatas FINS parodė, kad didelė dozėCistanchekanalėliųtam tikru mastu atkūrė nepakankamą insulino sekreciją db/db pelėms. Todėl Cistanchetubulosa veiksmingai slopino padidėjusį gliukozės kiekį kraujyje nevalgius ir po valgio (2 lentelė), skatindama insulino sekreciją. Hiperglikemija ir hiperlipidemija, be pirminės diabeto patogenezės, sukelia papildomą oksidacinį stresą beta ląstelėms ir mitochondrijoms. Yra in vitro ir in vivo įrodymų, kad nuolatinis didelio gliukozės ir lipidų kiekio kraujyje poveikis yra žalingos tobeta ląstelės, sukeliančios nepakankamą insulino sekreciją, pablogėjusią insulino geno ekspresiją ir apoptozės sukeliamą ląstelių mirtį (Pitocco ir kt., 2010). Kadangi antioksidantai gali apsaugoti beta ląstelių linijas ir izoliuotas salas nuo neigiamo didelės gliukozės koncentracijos poveikio (Kaneto ir kt., 1996, Tajiri ir kt., 1997), Cistanche tubulosa gali pagerinti insulino sekreciją dėl savo antioksidacinio poveikio.

Diabeto kontrolinės grupės labai sutrikusi insulino tolerancija patvirtino db/db pelių atsparumą insulinui. ITT rezultatai parodė, kad didelė dozėCistanchekanalėliųpagerėjo db/db pelių atsparumas insulinui, kuris buvo panašus į roziglitazoną ir pranašesnis už akarbozę, o tai rodo, kadCistanchekanalėliųpasižymi stipriomis insulino jautrumo savybėmis.

Gliukozės homeostazę daugiausia reguliuoja kepenys ir skeleto raumenys. Didžioji dalis gliukozės pašalinama kepenyse ir skeleto raumenyse, o glikogenas yra pagrindinė kaupiamos gliukozės forma ląstelėse (Saltiel, 2001). Glikogeno lygis įvairiuose audiniuose tiesiogiai atspindi jautrumą insulinui, nes insulinas skatina tarpląstelinį glikogeno nusėdimą. Insulino stimuliuojamo glikogeno kiekis gyvūnams, turintiems atsparumą insulinui, žymiai sumažėja, proporcingai insulino trūkumo laipsniui (Chandramohan ir kt., 2008).Cistanchekanalėliųneturėjo teigiamo poveikio glikogeno kaupimui kepenyse ar griaučių raumenyse.

2 tipo DM metaboliniam profiliui būdingas sutrikęs gliukozės metabolizmas ir atsparumas insulinui, dažnai kartu su dislipidemija (Cha ir kt., 2005). Dislipidemija yra vienas iš pagrindinių širdies ir kraujagyslių ligų rizikos veiksnių sergant DM. Būdingi diabetinės dislipidemijos požymiai yra didelė trigliceridų (TG) koncentracija plazmoje, maža didelio tankio lipoproteinų cholesterolio (DTL-c) koncentracija, padidėjusi mažo tankio lipoproteinų cholesterolio (MTL-c) koncentracija ir padidėjusi labai mažo tankio lipoproteinų koncentracija. cholesterolio (VLDL-c) koncentracija (Mooradian, 2009). Po gydymo suCistanchekanalėlių45 dienas bendrojo cholesterolio, TG, LDL-c ir VLDL-c kiekis db/db pelėse sumažėjo, o DTL-c kiekis padidėjo, o tai rodo, kadCistanchekanalėliųturėjo teigiamą poveikį dislipidemijai ir gali stipriai sumažinti aterosklerozės, koronarinės širdies ligos ir diabeto komplikacijų riziką (3 lentelė). Cistanche tubulosa žymiai sumažino TC lygį, o tai atitinka ankstesnę ataskaitą (Shimoda ir kt., 2009). Mechanizmas, kuriuo Cistanche tubulosa pagerina dislipidemiją, gali būti susijęs su kepenų mRNR ekspresijos tarpininkavimu, susijusiu su cholesterolio transportavimu ir metabolizmu (Shimoda ir kt. ., 2009). Nors sergant cukriniu diabetu hipercholesterolemijos paplitimas nepadidėja, cholesterolio kiekio sumažinimas gali sumažinti santykinę širdies ir kraujagyslių ligų riziką pacientams, sergantiems DM (Mooradian, 2009). Cistanche tubulosa žymiai padidino DTL-c/TC lygį ir sumažino aterogeniškumą indeksą, kurie yra vainikinių arterijų ligos rizikos veiksniai, o tai rodo, kad Cistanche tubulosa yra naudinga tiek diabeto, tiek širdies ir kraujagyslių ligų gydymui. Teigiamas kontrolinis vaistas roziglitazonas reikšmingai padidino TC lygį, o tai susiję su padidėjusia diabeto ir širdies ir kraujagyslių ligų progresavimo rizika.

5. Išvada

Pabaigoje pateikiame pirmąjį antihiperglikeminio irhipolipidemijaefektaiapieCistanchekanalėlių2 tipo cukriniu diabetu sergančių db/db pelių.Cistanchekanalėliųnormalizuota hiperglikemija atkūrė jautrumą insulinui ir sumažino dislipidemiją.Cistanchekanalėliųpagerino visus tris pagrindinius metabolinius defektus, kurie prisideda prie hiperglikemijos sergant 2 tipo DM. Taigi,Cistanchekanalėliųparodė didelį potencialą užkirsti kelią 2 tipo DM progresavimui ir sumažinti aterosklerozės, koronarinės širdies ligos ir diabeto komplikacijų riziką. Kaip tradicinė kinų medicina ir tonizuojantis maistas, Cistanchetubulosa gali būti toliau vystoma į vaistus, farmacinius maisto produktus ar maisto papildus. ateities. Tačiau reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant nustatyti biologiškai aktyvų komponentą ir išsiaiškinti mechanizmus, atsakingus už antihiperglikeminį ir.hipolipidemijaefektaiapieCistanchekanalėlių.

Padėkos

Šis darbas buvo paremtas Nacionalinės pagrindinių technologijų mokslinių tyrimų ir plėtros programos 11-ajame Kinijos penkerių metų plane (2007BAI32B06) ir Valstybės tarybos vadovaujančios grupės skurdo mažinimo ir plėtros biuro (2008-3A) lėšomis.

A priedas. Papildoma medžiaga

Su šiuo straipsniu susijusius papildomus duomenis galite rasti internetinėje versijoje adresu http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

Iš: „Cistanche tubulosa antihiperglikeminis ir hipolipideminis poveikis“, autoriusWen-Ting Xiong ir kt

---W.-T. Xiong ir kt. / Journal of Ethnopharmacology 150 (2013) 935–945