Cistanche desercicola polisacharidai susilpnina pelių diabetinę nefropatiją, darydama įtaką žarnyno florai ir slopindami Toll panašaus receptorių 4/branduolinio faktoriaus-KB signalizacijos kelią ⅱ

2.5 CDP poveikis storosios žarnos patologijai C57BL/6J pelėms

„Cistanche Deserticola“ ekstrakto milteliai iš aukštos kokybės žaliavų

Spustelėkite, jei norite gauti daugiau informacijos

Kaip parodyta 2 paveiksle, H&E dažymas atskleidė, kad normalių pelių storosios žarnos audinių struktūra buvo normali, kriptos buvo tvarkingai ir sandariai išdėstytos, skaičius buvo didelis, o epitelio ląstelės neturėjo akivaizdaus degeneracijos ir išsiskyrimo. Priešingai, DN pelėms buvo akivaizdus storosios žarnos epitelio ląstelių išsiskyrimas, uždegiminių ląstelių įsiskverbimas, kripto ląstelių pažeidimas, žarnyno liaukos struktūros išnykimas ir padidėjęs pralaidumas. Po 4 savaičių CDP intervencijos minėtos patologinės sąlygos atsigavo į skirtingą laipsnį.

AB-PAS dažymo rezultatai parodė, kad, palyginti su kontroline grupe, nemažai, kurių pelių modelio grupės storosios žarnos gaubtinės žarnos yra suplanuotų taurės ląstelių, buvo žymiai sumažėjęs, o rūgščių gleivių baltymų sekrecija žymiai padidėjo; Didžiausias buvo suinteresuotų taurės ląstelių skaičius kontrolinės grupės dvitaškyje; Palyginti su modelio grupe, buvo sumažintas storosios žarnos rūgščių gleivių baltymų sekrecija CDPS-H grupėje.

2 pav. CDPS poveikis storosios žarnos histopatologiniams pokyčiams DN pelėse, kaip tiria H&E ir AB-PAS dažymas

2.6 CDP poveikis C57BL/6J pelių žarnyno florai

Buvo išsamiai išanalizuotas CDP poveikis biocheminiams rodikliams ir patologiniams DN pelių rezultatams, o pelių storosios žarnos kiekis CDPS-H grupėje, kurių bendras veiksmingumas buvo geriausias, buvo parinktas žarnyno floros tyrimams.

2.6.1 Amplikono sekos variantas (ASV) pasiskirstymo diagrama, kaip parodyta 3 paveiksle, palyginti su kontroline grupe, sumažėjo santykinis žarnyno floros rūšių gausa, o santykinis gausumas pagerėjo po gydymo CDP.

Cistanche

2.6.2 Alfa įvairovės analizė, kaip parodyta 6 lentelėje, palyginti su kontroline grupe, sumažėjo modelio grupės pelių žarnyno floros chao1 indeksas. Po CDP intervencijos padidėjo ChaO1 indeksas, tačiau statistinio reikšmingumo nebuvo, tai rodo, kad CDP gali pakeisti žarnyno floros struktūrą padidindamas bendrą rūšių skaičių. Apžvalgos indeksas yra beveik 1, tai rodo, kad sekos nustatymo rezultatai iš esmės gali atspindėti tikrąją imties situaciją. Šenono, Simpsono, aprėpties ir Pielou {_ e indekso tarp grupių nebuvo jokio statistiškai reikšmingo skirtumo tarp grupių, tai rodo, kad kiekvienos grupės aplinkosaugos bendruomenių rūšių turtingumas ir įvairovė buvo gera, o kolonijų aprėptis buvo vienoda ir tolygiai paskirstoma.

3 pav. Venno ASV pasiskirstymo schema

6 lentelė, kontrolinės, modelio ir CDP grupėse (n=6) žarnyno mikrobiotos alfa-disketinės indeksai (n {= 6)

2.6.3 Beta įvairovės analizė

Kaip parodyta 4 paveiksle, atliekant beta įvairovės analizę, pagrindinė komponentų analizė (PCA) gali atskirti tris mėginių grupes trimatėje erdvėje, tai rodo, kad šių trijų mėginių grupių žarnyno floroje yra reikšmingų skirtumų. Modelių grupė ir kontrolinė grupė yra atskirti išilgai PC2 ašies, o CDPS-H grupė yra tarp modelio ir kontrolinės grupės, arti kontrolinės grupės.

4 pav. Pelių žarnyno floros beta įvairovė kontrolinėje, modelio ir CDP grupėse (n=6)

2.6.4 CDP poveikis C57BL/6J pelių žarnyno florai

2.6.4.1 Phylum lygis

Kaip parodyta 5 paveiksle, palyginti su kontroline grupe, santykinis firmikalų gausumas modelio grupėje žymiai padidėjo, santykinis Bacteroidota ir verrucomicrobijos gausumas žymiai sumažėjo, o santykinis bakterioidų gausos santykis (B/F) sumažėjo ir sumažėjo. Palyginti su modelio grupe, CDP žymiai padidino santykinį bakteroidetų ir verrucomicrobijos gausą, sumažino santykinį firmticutes gausą ir padidino B/F vertę, kuri buvo arčiau kontrolinės grupės b/F vertės.

5 pav. Santykinio žarnyno floros gausos juostos diagrama fylum lygiu (n=6)

2.6.4.2 Genties lygis

Rūšių gausos sudėties histograma, esanti 30 geriausių genčių lygių (6 paveikslas), rodo, kad modelių grupėje ir CDPS-H grupėje yra skirtumų pelių žarnyno floroje. Tarp modelių ir kontrolinės grupės yra 16 skirtingų bakterijų genčių; Tarp CDPS-H grupės ir modelio grupės yra 8 skirtingi bakterijų gentys; 5 bakterijų gentys sutampančioje srityje gali būti bakterijų gentys, kurias CDP gali pagerinti diabetinę nefropatiją (7 paveikslas). Kaip matyti iš 7 lentelės, pelių žarnyno floros genties lygyje, palyginti su kontroline grupe, santykinis allobakulumo gausa modelio grupėje buvo žymiai sumažėjęs, o santykinis rožburijos, romboutsia, Ruminococcus _ sukimo momentas _} grupės ir RF39 (P pF39 (P “(p“<0.05) was increased. ; Compared with the Model group, the relative abundance of Roseburia, Romboutsia, Ruminococcus_torques_group and RF39 (P＜0.05) decreased in the CDPs-H group; the relative abundance of Allobaculum increased (P＜0.05).

6 pav. Genties lygio santykinio žarnyno floros santykinio gausos juostos diagrama (n=6)

7 pav. Venno žarnyno floros diagrama genties lygyje (n {= 6)

7 lentelės CDP poveikis santykiniam diferencialinės žarnos mikrobų genčių gausumui tarp kontrolinės, modelio ir CDP grupių (n=6)

2.6.4.3 CDP poveikis storosios žarnos zo raiškai -1 ir okludinui

Kaip parodyta 8 paveiksle ir 8 lentelėje, palyginti su kontroline grupe, buvo žymiai sumažėjęs ZO -1 ir okludino baltymų santykinis raiškos lygis pelių storosios žarnos audinyje (p <{0. 01); Palyginti su modelio grupe, CDP intervencija kiekvienoje dozėje galėjo būti reikšmingai padidėjęs ZO -1 ir okludino baltymų santykinis ekspresijos lygis (P “<0.01).

8 pav. ZO -1 ir okludino ekspresija iš kiekvienos grupės pelių storosios žarnos audinyje (n=3)

8 lentelė. Santykiniai ZO -1 ir okludino santykiniai lygiai iš kiekvienos grupės pelių storosios žarnos audinyje (n=3)

Cistanche žaliavos

2.7 CDP poveikis inkstų TLR4/NF-κB signalizacijos kelio baltymo ekspresijai

Kaip parodyta 9 paveiksle ir 9 lentelėje, palyginti su kontroline grupe, santykinė TLR4 baltymo ekspresija pelių inkstų audinyje modelio grupėje ir P-NF-κBP65/NF-κB P65 ir Pi κBα/I κBα santykiai žymiai padidėjo. Aukštas (p<0.01); compared with the Model group, the relative expression of TLR4 protein and p-NF-κBp65/NF-κB p65 and p-I κBα/I κBα in the kidney tissue of mice in the CDPs-M and CDPs-H groups The ratios were significantly reduced (P＜0.01, P＜0.05).

9 pav. Baltymų ekspresijos Western blot analizė, susijusi su TLR4/ NF-κB signalizacijos keliu iš kiekvienos grupės pelių inkstų audinyje (n=3).

9 lentelė. Santykiniai TLR4/NF-κB signalizacijos kelio baltymų santykiniai lygiai iš kiekvienos grupės inkstų audinyje (n {= 3) inkstų audinyje (n=3)