Dabartiniai klinikiniai in vivo genų terapijos su AAV taikymai 2 dalis

Solid Biosciences naudojant SGT{0}} (ClinicalTrials.gov: NCT03368742) pradėjo 1/2 fazės atvirą klinikinį tyrimą, naudodama AAV9 ir specifinį CK8raumeniui promotorių (SGT-001), skirtą skeleto ir širdies raumenims, IGNITE. DMD tyrimas.

Ryšys tarp miokardo ir atminties yra tyrimų sritis, kuriai pastaraisiais metais buvo skiriama daug dėmesio. Miokardas reiškia širdies raumens audinį. Kaip pagrindinė širdies dalis, ji atlieka ne tik kraujo siurbimo funkciją, bet ir daro didelę įtaką žmonių sveikatai. Atmintis yra vienas iš žmogaus sąmonės ir elgesio pamatų, o jos svarba yra savaime suprantama. Taigi koks yra ryšys tarp miokardo ir atminties?

Visų pirma, yra glaudus ryšys tarp miokardo ir atminties. Tyrimai parodė, kad pacientai, sergantys širdies ligomis, patirs pažinimo sutrikimų, tokių kaip atminties praradimas. Taip yra todėl, kad širdies ligos gali pakenkti žmogaus organizmui ir sukelti tokias problemas kaip bloga kraujotaka arba smegenų hipoksija, kuri pažeidžia žmonių atmintį. Todėl, norint išlaikyti normalią atmintį ir pažinimo funkciją, labai svarbu išlaikyti sveiką miokardą.

Miokardo pratimai teigiamai veikia atmintį. Pratimai gali pagerinti žmogaus miokardo sveikatą, padidinti miokardo elastingumą ir lankstumą, sustiprinti širdies gebėjimą pumpuoti kraują, pagerinti miokardo stabilumą ir toleranciją, padėti miokardui geriau transportuoti kraują į smegenis ir taip palaikyti smegenų sveikata. Be to, mankšta gali sustiprinti kraujagyslių endotelio ląstelių funkciją, padidinti kraujo tekėjimą į smegenis ir padėti skatinti smegenų neuronų augimą ir atstatymą, taip pagerinant žmonių atmintį.

Apibendrinant galima pasakyti, kad tarp miokardo ir atminties iš tiesų yra tam tikras ryšys. Todėl visada turėtume atkreipti dėmesį į savo miokardo sveikatą ir aktyviai dalyvauti sveikoje veikloje, pavyzdžiui, mankštintis, kad pagerintume miokardo stabilumą ir toleranciją bei iš esmės palaikytume atmintį ir pažinimo funkcijas. Tik taip galime geriau mėgautis gyvenimo grožiu ir sutikti geresnį rytojų. Matyti, kad reikia pagerinti atmintį. Cistanche gali žymiai pagerinti atmintį, nes Cistanche turi antioksidacinį, priešuždegiminį ir senėjimą stabdantį poveikį, kuris gali padėti sumažinti oksidacines ir uždegimines reakcijas smegenyse ir taip apsaugoti nervų sistemos sveikatą. Be to, Cistanche taip pat gali skatinti nervų ląstelių augimą ir taisymą, taip pagerindamas neuroninių tinklų ryšį ir funkciją. Šis poveikis gali padėti pagerinti atmintį, mokymosi gebėjimus ir mąstymo greitį, taip pat gali užkirsti kelią pažinimo sutrikimams ir neurodegeneracinėms ligoms.

Spustelėkite žinokite būdus, kaip pagerinti smegenų veiklą

Šioje kasetėje yra neuroninis azoto oksido sintazės (nNOS) surišimo domenas, užkoduotas SR 16/17, siekiant pagerinti raumenų perfuziją.29,30 Šios peržiūros metu iki šiol buvo įtraukti ir gydyti šeši asmenys: mažos dozės ( 5.{10}} 1013 mg/kg, n=3) ​​ir didelė dozė (2,0 1014 mg/kg,n=3).

Buvo pasikartojančių problemų, susijusių su komplemento aktyvavimu, todėl FDA patvirtino 2 klinikinius sprendimus. Pirmasis 2018 m. buvo susijęs su trombocitopenija. Antrasis buvo 2019 m. spalio mėn., nes buvo labiau paplitęs komplemento aktyvinimas, turintis įtakos raudoniesiems kraujo kūnams (RBC) ir sukeliantis inkstų pažeidimą bei širdies ir plaučių nepakankamumą.

Klinikiniai Solid tyrimo rezultatai buvo gauti iš pirmosios kohortos, gydytos mažomis dozėmis. Vienam pacientui mikrodistrofinas buvo aptiktas per WB žemiau 5 % kiekybinio įvertinimo lygio ir per IF maždaug 10 % skaidulų.

Taip pat pranešta apie nNOS ir beta sarkoglikano kolokalizaciją. Kituose dviejuose tiriamuosiuose mikrodistrofino kiekis buvo aptiktas labai minimaliais IF ir nė vieno WB.

2020 m. kovo mėn. paskelbta, kad praėjus 3 mėnesiams po gydymo, trečiajam pacientui, vartojusiam 2 1014 mg/kg dozę, 50–70 % raumenų skaidulų buvo išreikštas mikrodistrofinas, o WB aptiktas 8 % normos. Klinikinis Solid tyrimo sulaikymas buvo panaikintas nuo 2020 m. spalio 1 d.

XLMTM

XLMTM sukelia mutacijos myotubularin 1 (MTM1) gene, esančiame Xq28.31. Miotubularinas, visur ekspresuojama fosfoinozitido fosfatazė, veikia kaip membraninis fermentas ir vaidina svarbų vaidmenį skeleto raumenų vystymesi ir homeostazei.32

MTM1 mutacijos, dėl kurių prarandama funkcija, veikia sužadinimo ir susiejimo susitraukimo mechanizmus, sutrikdydamos T kanalėlių tinklo funkciją ir organizaciją.33 Sunki XLMTM, dažniausia forma, pasireiškia gimus su hipotonija, išorine oftalmoplegija, griaučių raumenų silpnumu. , ir kvėpavimo nepakankamumas.34

Antenatalinės pradžios požymiai yra sumažėję vaisiaus judesiai ir polihidramnionas. Raumenų biopsija rodo vienodą mažų raumenų skaidulų išvaizdą su dideliais centre esančiais branduoliais. RECENSUS gamtos istorijos tyrime buvo pranešta apie beveik visus pacientus, kuriems gimus prireikė kvėpavimo palaikymo, o 64 % mirtingumas 18 mėnesių amžiaus.

Approximately 74% of patients surviving >18 mėnesių reikia tracheostomijos ir mechaninės ventiliacijos.34Pelių Mtm1 sutrikimas panašus į žmogaus XLMTM, su panašia patologija ir ankstyvu mirtingumu.35 Į raumenis suleistos AAV suleistos Mtm1 išgelbėjo raumenų funkciją, o tai rodo, kad funkcinio miotubulino atkūrimas gali pagerinti ligos fenotipą36.

Vėliau Childerso laboratorijos 37–39 tyrimų serija parodė ilgalaikį terapinį veiksmingumą, naudojant sisteminį AAV8 vektorių, ekspresuojantį Mtm1, naudojant specifinį raumenų desmino (DES) promotorių.

Pelėms, kurioms Mtm1- trūkumas, rAAV8.-desmin.Mtm1, esant 3 1013 vg/kg, ištaisė raumenų patologiją ir pailgino išgyvenamumą per visą 6-mėnesio tyrimą. Maža dozė buvo neveiksminga pelėms.

Šunų modelis, turintis MTM1 mutaciją, pagerino lokoregioninio kraujagyslių pristatymo funkciją. Šie tyrimai paruošė kelią platesniam šunų modelio tyrimui su viso kūno miotubulinės miopatijos korekcija.39

Didėjančios dozės į veną suleidžiamo rAAV8.desmin.cMTM1 (0.3 1014, 2 1014 ir 5 1014 mg/kg) tyrime su šunų modeliu (n=3 perdozė) 10 savaičių amžiaus , palyginus su fiziologiniu tirpalu apdorotus, tokio amžiaus mutantus ir normalius vados draugus kaip kontrolinius, dvi didesnės dozės lėmė ligos eigą, o klinikiniai radiniai nesiskyrė nuo įprastų be papildomų saugumo problemų.

Kartu šie ikiklinikiniai tyrimai parodė genų terapijos su AAV8 pagrįstumą, saugumą ir veiksmingumą ilgalaikei XLMTM korekcijai.37,38 ASPIRO tyrimas yra 1/2 fazės atviras, atsitiktinių imčių, didėjančios dozės tyrimas, kurio metu vertinamas saugumas ir veiksmingumas. AT132 (resamirigenebilparvovekas).

Šiame dviejų dalių genų perdavimo tyrime 1 dalyje įvedama vienkartinė intraveninė dozė, įvertinant dviejų dozių saugumą ir veiksmingumą: 1 1014 mg/kg ir 3 1014 mg/kg (ClinicalTrials.gov:NCT03199469). 2 tyrimo dalyje aštuoni tiriamieji atsitiktiniu būdu suskirstomi į gydymo grupę, skiriančią 3 1014 mg/kg dozę, arba į atidėto gydymo kontrolinę grupę.

2019 m. rugpjūčio mėn. į tyrimą buvo įtraukta 12 pacientų, šeši (1 grupė) vartojo mažą dozę, o 2 grupė (n=4) buvo gydoma didele doze, palyginti su negydytais kontroliniais pacientais.

Preliminariais rezultatais, kuriais pasidalino „Audentes“, buvo teigiamas atsakas į saugumą ir veiksmingumą bei stebėjimą nuo 4 iki 72 savaičių. Visiems gydytiems butonu tiriamiesiems kliniškai reikšmingai pagerėjo kvėpavimo funkcija, sumažėjo kasdienės ventiliacijos poreikis, taip pat pagerėjo vidutinis įkvėpimo slėgis (MIP).

Taip pat buvo pastebėtas teigiamas motorinės funkcijos atsakas, išmatuotas CHOP-INTEND. 9 tiriamųjų raumenų biopsijos parodė tvirtą nuo dozės priklausomą audinių transdukciją ir miotubulino baltymų ekspresiją, pagerėjus bendrai raumenų histologijai.

Tai prieštarauja gamtos istorijos duomenims, kuriuose XLMTM tiriamieji turėjo 2.{1}}punkto metinį CHOP-INTEND balų sumažėjimą nuo pradinio lygio ir MIP sumažėjimą per 12 mėnesių.40 2018 m., patvirtinus šio tyrimo pažangą, FDA suteiktas AT132 regeneracinės medicinos pažangios terapijos (RMAT) pavadinimas, atitinkantis FDA greitąją ir proveržio terapiją.

Deja, kadangi tyrimas vyko palankiai, 2020 m. gegužės mėn. tyrimo rėmėjas Audentes laiške pacientų grupėms pranešė, kad tyrimo dalyvis mirė po to, kai gavo AT132 didesnę 3 1014 mg/kg dozę. Vėliau, 2020 m. birželio mėn., Audentesas pasidalijo papildomomis detalėmis, kai mirė antrasis iš 3 didelės dozės kohortos.

Abi mirtys įvyko po panašios klinikinės eigos, kiekviena sirgo progresuojančia kepenų liga praėjus 46 savaitėms po genų terapijos gavimo. Tiesioginė mirties priežastis buvo generalizuotas sepsis po kepenų komplikacijų.

Nė vienas iš šešių pacientų, vartojusių mažesnę dozę, nepatyrė rimtų AE (SAE), nors keturi iš jų sirgo kepenų ir tulžies pūslės ligomis. Tarp trijų šių SAE sergančių pacientų pastebimos savybės yra vyresnis amžius, sunkesnis svoris, esamos kepenų ir tulžies pūslės ligos požymiai ir didesnės 3 1014 mg/kg dozės dozavimas.

XLMTM tyrimas šiuo metu yra klinikinis FDA ir ieško tolesnio paaiškinimo. Šiuo metu vyksta aktyvus duomenų rinkimas. Apibendrinant, šioje apžvalgoje mes pabrėžiame trijų neuroraumeninių sutrikimų klinikinius genų terapijos tyrimus, kad parodytume platesnio sisteminio pristatymo taikymo galimybes. Be jokios abejonės, buvo padaryta didelė pažanga sisteminio genų pristatymo srityje; tačiau dar reikia išspręsti keletą apribojimų.

Kiekvienos ligos veiksmingumas ir saugumas reikalauja tolesnės analizės ir ilgalaikio stebėjimo. Sunkias XLMTM tyrimo komplikacijas reikia toliau tirti.

Genų terapija CNS ligoms gydyti

CNS ligų genų terapija naudojant AAV vektorius buvo pradėta beveik prieš 2 dešimtmečius, naudojant stereotaksinį intracerebrinį AAV2 vektorių tiekimą. Ankstyvieji novatoriški klinikiniai tyrimai buvo skirti CD, AD ir PD.

Nors AD ir PD metodai buvo židininės dvišalės injekcijos, klinikiniame CD tyrime buvo bandoma stereotaksiškai įvesti AAV2 į 12 skirtingų vietų, siekiant maksimaliai padidinti vektorių pasiskirstymą smegenyse.

Vėliau sekė AADC trūkumo sutrikimas, vėl naudojant AAV2, ir buvo pagrindinis ligą keičiančio veiksmingumo įrodymas CNS genų terapijos tyrime. Šie ankstyvieji CNS genų terapijos tyrimai parodė AAV pagrįsto genų perdavimo galimybę saugiai gydyti CNS.

AD

AD yra neurodegeneracinis sutrikimas, kuris yra pagrindinė su amžiumi susijusios demencijos priežastis. Gilus AD ir susijusios neuropatologijos supratimas leido sukurti daugybę virusų sukeltų genų perdavimo metodų, skirtų AD gydyti, kaip apžvelgė Raikwar ir kt.41

Vienas iš klinikinių tyrimų pradėtas taikyti metodas yra nervų augimo faktoriaus (NGF), kuris, kaip manoma, skatina cholinerginių neuronų išlikimą, pristatymas. su lengva ar vidutinio sunkumo su AD susijusia demencija parodė daug žadančių rezultatų.

Chirurginis gimdymas buvo saugus ir gerai toleruojamas, o praėjus 2 metams po injekcijos kliniškai reikšmingo ligos progresavimo trūko.44 Tačiau vėlesniame atsitiktinių imčių kontroliuojamo 2 fazės tyrimo (n=49) metu veiksmingumo vertinamieji rodikliai nebuvo pasiekti.45 Nepaisant to, Dėl šios ankstyvos nesėkmės genų terapijos sistemoje yra daug papildomų programų, skirtų AD.

PD

PD yra neurodegeneracinis judėjimo sutrikimas, kuriam būdinga bradikinezija, eisenos sutrikimas ir vėliau pažinimo nuosmukis, kurį sukelia bazinių ganglijų dopaminerginių neuronų praradimas.

Buvo ištirtos virusinės genų terapijos metodai, kuriais siekiama moduliuoti GABAergicneuroninį signalizavimą (AAV2-GAD [AAV2-glutamo rūgšties dekarboksilazę]) ir didinti dopamino gamybą (AAV2-hAADC, aminorūgščių dekarboksilazę). ankstyvosios fazės klinikiniuose tyrimuose.

Pradiniame atvirame, dozės didinimo 1 fazės tyrime buvo tiriamas AAV-GAD, sušvirkšto vienašališkai į subtalaminį branduolį, 12 PD pacientų. Nebuvo jokių su gydymu susijusių nepageidaujamų reiškinių, o visų tiriamųjų motorinis funkcionavimas pagerėjo, o talamo metabolizmas gydomame pusrutulyje sumažėjo.

2 fazės atsitiktinių imčių kontroliuojamo tyrimo metu pacientams, sergantiems pažengusia PD, buvo atlikta fiktyvi procedūra (n=23) arba dvišalė AAV2-GAD infuzija į subtalaminius branduolius (n=22).

Procedūra vėl buvo gerai toleruojama, o gydomos grupės pacientų motorinė funkcija pagerėjo.47 Šie rezultatai išliko iki 12 mėnesių po injekcijos.48

Teigiama, kad GAD patekimas į šią smegenų sritį veda prie naujų funkcinių kelių tarp subtalaminių neuronų ir motorinių žievės sričių, vadinamų „su GAD susijusiais keliais“, kurie koreliuoja su klinikiniais gydymo grupės patobulinimais.

Alternatyviu būdu AADC, fermentas, dalyvaujantis dopamino sintezėje, yra tiekiamas PD pacientų putamenams, siekiant padidinti dopamino gamybą. 1 fazės dvišalės intrastrialinės AAV-hAADC infuzijos tyrime penkiems pacientams, sergantiems vidutiniškai pažengusia PD, AADC ekspresija putamenoje padidėjo 30%, o pacientų klinikinis pagerėjimas buvo nedidelis.

Vėlesnis dozės didinimo tyrimas parodė panašius rezultatus: pozitronų emisijos tomografijos (PET) tyrimo metu AADC ekspresija padidėjo 30 % mažų dozių grupėje ir 75 % didesnės dozės grupėje.51

Šiame tyrime trims pacientams pasireiškė pooperacinis intrakranijinis kraujavimas (vienas simptominis, du besimptomis).51 Ilgalaikio stebėjimo metu poveikis išliko iki 96 savaičių.52 Pastaruoju metu, 1 fazės genų pristatymo optimizavimo tyrime, gadoteridolis buvo skiriamas kartu su AAV. 2-AADC naudojant MRT valdomą infuziją į putameną, kad būtų lengviau vizualizuoti vektoriaus plitimą ir aprėptį.

Šiame trijų lygių dozės didinimo tyrime (n=5 vienam dozavimo lygiui) nustatytas nuo 13 % iki 79 % priklausomas AADC aktyvumo padidėjimas, susijęs su motorinių rezultatų pagerėjimu, įskaitant padidėjusį atsaką į levodopą be diskinezijos. .53 Abu metodai parodė palankius saugos profilius ir daug žadantį klinikinį atsaką, tačiau reikia atlikti didesnius, gerai kontroliuojamus tyrimus.

CD

CD yra leukodistrofija, kurią sukelia patogeniniai aspartoacilazės geno (ASPA) variantai. ASPA ekspresuoja oligodendrocitai ir yra atsakingas už N-acetilaspartato (NAA) skaidymą deacetilinant.

NAA padidėjimas CNS turi kintamą pasroviui poveikį, kuris gali paaiškinti pagrindinę CD patofiziologiją, įskaitant nenormalią mielinizaciją, parenchiminę edemą ir baltosios medžiagos vakuolizaciją (peržiūrėjo Leone ir kt.54).

Klinikinis CD vaizdas skiriasi priklausomai nuo ASPA likutinio aktyvumo lygio ir atitinkamos NAA koncentracijos. Tai neurodegeneracinis sutrikimas, pasireiškiantis hidrocefalija dėl progresuojančios kempinės neurodegeneracijos, progresuojančios neurologinės negalios, sunkiai įveikiamos epilepsijos, maitinimo netoleravimo ir ankstyvos mirties paauglystėje ar ankstyvoje pilnametystėje.

AAV2 metodas išsivystė iš ankstesnių genų perdavimo tyrimų, naudojant lipiduose užfiksuotą polikatijono kondensuotą tiekimo sistemą (LPD) kartu su AAV pagrindu veikiančiomis plazmidėmis, turinčiomis rASPA.55.

Nors šis metodas buvo gerai toleruojamas ir lėmė tiek biocheminius, tiek klinikinius patobulinimus, patobulintos virusų tarpininkaujamų genų perdavimo technologijos, naudojant AAV2, buvo tiriamos 1 fazės intrakranijinių infuzijų per šešias kaukolės šerdies angas pacientams, sergantiems CD (n=13).56. Procedūra buvo gerai toleruojama su minimaliu sisteminiu uždegimu ir įrodyta, žadanti ilgalaikį saugumą ir klinikinį veiksmingumą.

Pasaulinė NAA koncentracija CNS, išmatuota magnetinio rezonanso (MR) spektroskopija, po AAV{0}}ASPA pristatymo sumažėjo, ypač baziniuose ganglijose.

Panašiai T1 atsipalaidavimo laikas sumažėjo baltosios medžiagos traktuose, ypač corpus callosum blužnyje, o kai kuriems pacientams buvo sustabdyta arba išnykusi smegenų atrofija.

Galiausiai, šių biocheminių ir vaizdinių biomarkerių pagerėjimas buvo lydimas stabilizavimo ir bendro motorinio veikimo pagerėjimo, nors socialinis ir pažintinis atsigavimas buvo ne toks nuoseklus.

Biocheminių ir struktūrinių biomarkerių pasikeitimas rodo, kad procesas yra grįžtamas; tačiau įtariama, kad ankstesnė intervencija lems stipresnį klinikinį atsaką.54 Šiuo metu tiriamos naujos technologijos, kuriose naudojamos AAV-ASPA, nukreiptos į oligodendrocitus.57

AADC trūkumas

Po daug žadančių AAV{0}}AADC tyrimų dėl PD rezultatų tyrėjai siekė pritaikyti šią technologiją retam neurogenetiniam vaikystės sutrikimui. AADC trūkumo sutrikimas yra retas paveldimas neurotransmiterių sintezės sutrikimas, kurį sukelia bialeliniai variantai dopa dekarboksilazės (DDC) geno 7.58 chromosomoje.

Nors klinikinis spektras gali skirtis, 80% pacientų yra klasifikuojami kaip sunkūs ir kūdikystėje su hipotonija, augimo sulėtėjimu ir ryškiais motorikos sutrikimais.

Jie niekada nesugeba tinkamai valdyti galvos ar sėdėti savarankiškai ir kenčia nuo dažnų distonijos ir okuloginių krizių epizodų. Dažnai pranešama apie autonominę disfunkciją ir stiprų emocinį dirglumą.58

Asmenys paprastai miršta sulaukę 5 metų amžiaus.59 2012 m. Taivane buvo atliktas pirminis AAV2/hAADC klinikinis genų perkėlimo labdarais tyrimas. Hwu ir kt.59 atrinko keturis tiriamuosius, kuriems patvirtinta AADC diagnozė, iš dvidešimties žinomų gyvų pacientų Taivane.

Pradinio įvertinimo duomenimis, visi pacientai buvo prikaustyti prie lovos, nesuvaldė galvos ir negalėjo kalbėti. Kas 2–3 dienas buvo pranešta apie akių krizes, o globėjai pranešė apie ryškų dirglumą, gausų prakaitavimą ir nestabilią kūno temperatūrą. Pacientai gavo AAV2 / hAADC tiesiogine dvišale intraluminaline injekcija ir buvo stebimi iki 24 mėnesių.

Dviem iš keturių tiriamųjų buvo pranešta apie trumpalaikes diskinezijas, kurių pakaktų trukdyti maitinimui, o vienam tiriamajam pasireiškė reikšmingi apnėjos reiškiniai, kurie išnyko per 10 mėnesių nuo dozės skyrimo.

Visi keturi tiriamieji pagerėjo tiek motorinės, tiek pažintinės raidos rezultatai, o globėjai pranešė, kad sumažėjo okulogirinių krizių dažnis ir intensyvumas, sumažėjo dirglumas ir padidėjo temperatūros stabilumas.

Be to, biologinių žymenų duomenys buvo įtikinami, rodantys, kad PET tyrimo metu dopamino pasisavinimas padidėjo 45–{1}} %, palyginti su pradiniais matavimais, ir visi parodė padidėjusį dopamino ir serotonino metabolitų kiekį smegenų skystyje (CSF).

Pirmojo etapo 1/2 metu, atviro klinikinio tyrimo Nacionalinėje Taivano universiteto ligoninėje (Taipėjus, Taivanas) metu, dar dešimčiai vaikų, kurių amžius 24 mėnesiai ir vyresni, kuriems buvo patvirtinta AADC trūkumo diagnozė, buvo dozuojama intraluminalinė AAV{4}}hAADC. .

Vienas tiriamasis mirė nuo nesusijusios priežasties, tačiau likusių išgyvenusių asmenų motorinė veikla pastebimai pagerėjo (62 taškais padidėjimas Peabody vystymosi motorikos skalėje).

Buvo pranešta apie karščiavimą ir trumpalaikę burnos ir veido diskineziją, kuri išnyko vartojant risperidoną.60 Panašūs rezultatai gauti ir antrojo atviro fazės 1/2 tyrimo, kuriame dalyvavo genetiškai įvairesnė populiacija (n=6), metu.61

Per 2 mėnesius visų savanoriški judesiai pagerėjo, dviem buvo atjunkyta nuo mechaninės ventiliacijos, keturi atgavo gebėjimą valgyti per burną ir visiems pagerėjo distonijos epizodai, dirglumas ir autonominė disfunkcija.61

For more information:1950477648nn@gmail.com