DNR vakcinacijos sukeltas apsauginis imunitetas nuo SARS CoV{0}} infekcijos žiurkėnams

2 pav. Antikūnų atsakas pelėms po imunizacijos SARS-CoV ir SARS-CoV-2 S DNR vakcinomis.

(A) BALB/c pelės (n=4 grupėje) buvo imunizuotos į raumenis du kartus su 3-savaitės intervalu 100 ug nurodytos plazmidės, po to atlikta elektroporacija. Serumo mėginiai buvo paimti nurodytais laiko momentais po pirmosios imunizacijos. (BD, F, G) Antikūnai prieš SARS-CoV-2 viso ilgio smaigalio baltymą, S2 sritį ir UBR buvo įvertinti ELISA metodu. (E, H) Vakcinos sukeltas neutralizuojantis antikūnas prieš SARS-CoV{10}} buvo įvertintas neutralizacijos tyrimu. Antikūnų titrai pateikiami kaip vidurkis ± SEM, o neutralizacijos titrai išreiškiami kaip geometrinis vidurkis su 95 % pasikliautinuoju intervalu. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Norėdami toliau ištirti, ar lyderės sekos pakeitimas gali padidinti baltymų sekreciją, naudojome lyderio seką iš audinių plazminogeno aktyvatoriaus, kad sujungtume skirtingus SARS-CoV-2 S baltymo variantus. Visuose variantuose yra SARS-CoV-2 S baltymo UBR sritis. Po dviejų DNR imunizacijos dozių, 4 ir 6 savaitę surinktuose serumuose buvo tiriami IgG antikūnų ir neutralizuojančių antikūnų titrai. Imunizacija ptSARS2-S sukėlė didesnius antikūnų titrus prieš viso ilgio S baltymą 4 savaitę nei imunizacija ptRBD, ptRBDTM ir ptSdTM (S1A pav). Anti-RBD antikūnų titrai imunizuojant ptRBD buvo didesni nei imunizacijos nuo ptSARS2-S (1496,2 ir 530,9, p=0,057) 4 savaitę (S1B pav). Tačiau imunizacija nuo ptRBD ir ptSARS{0}S sukėlė panašų neutralizuojančių antikūnų kiekį 4 savaitę (S1C pav). Tie patys rezultatai buvo gauti atliekant 6-osios savaitės serumo analizę; ptRBD imunizacija sukėlė didesnį anti-RBD antikūnų kiekį, lyginant su ptSARS2-S imunizacija (12589,3 ir 1000,0, p=0.028), bet toks pat neutralizuojančių antikūnų kiekis (9,3). palyginti su 9,6 (log2)) (2F pav., 2G ir 2H). Kadangi tPA lyderio sekos sulieti variantai nesukėlė didesnių neutralizuojančių antikūnų titrų nei imunizacija pSARS2-S, tolesniam tyrimui naudojome pSARS2-S.

Konkurencinis serumo antikūnų ir ACE2 surišimas su SARS-CoV-2 UBR

Norėdami ištirti serumo antikūnų gebėjimą trukdyti AKF{0}}RBD sąveikai, atlikome konkurencinį SARS-CoV-2 serologinį tyrimą. Šiame tyrime serumo antikūnai buvo dedami į ELISA plokšteles, padengtas SARS-CoV-2 RBD baltymu, po to pridėta žmogaus ACE2 baltymo. Konkretus neutralizuojantis antikūnas prieš SARS-CoV-2 UBR buvo naudojamas kaip nuoroda. Kaip parodyta3 pav, serumo antikūnai iš pSARS2-S imunizuotų pelių prisijungė prie UBR ir blokavo ACE2 surišimą, o tai buvo lygiavertė maždaug 353 ug/mL etaloniniam antikūnui, o pSARS-S serumas atitiko 56 ug/mL etaloninį antikūną. Todėl mūsų duomenys rodo, kad imunizacija pSARS{5}S gali sukelti konkurencinius antikūnus, kurie veiksmingai blokuoja SARS-CoV-2 UBR prisijungimą prie ACE2 receptoriaus. Šis rezultatas atitiko ELISA titrą prieš SARS-CoV2 UBR (2D pav), paremtas SARS-CoV ir SARS-CoV UBR sekų skirtumo tyrimu-2 [24].

3 pav. Imunizuotų pelių serumų konkurencinis aktyvumas prieš RBD/ACE2 sąveiką.

BALB/c pelės (n=4 grupėje) buvo imunizuotos į raumenis du kartus su 3-savaitės intervalu 100 ug vektoriaus, pSARS-S arba pSARS2-S, po to atlikta elektroporacija. Serumo mėginiai buvo paimti 8 savaitę po pirmosios imunizacijos. Serumo antikūnai, kurie konkuruoja su ACE2 dėl UBR prisijungimo, buvo įvertinti konkurenciniu SARS-CoV-2 serologiniu tyrimu. Konkurencinis pelių serumų aktyvumas išreiškiamas lygiaverčiu anti-RBD (SARS-CoV-2 smaigalio baltymo) antikūno lygiu (referencinis antikūnas). Antikūnų titrai pateikiami kaip vidurkis ± SEM. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

SARS-CoV-2 S DNR vakcinos sukeltas ilgalaikis humoralinis imunitetas ir siūloma kryžminė apsauga nuo SARS-CoV-2 su D614G mutacija

Pažymėtina, kad praėjus 20 savaičių po pirmosios imunizacijos buvo stebimas ilgalaikis IgG antikūnų titrų prieš viso ilgio S palaikymas.4A pav). SARS-CoV-2 neutralizuojančių antikūnų geometriniai titrai (log2) 8 savaitę po imunizacijos pSARS2-S pasiekė 10,8, šiek tiek sumažėjo iki 9,1 12 savaitę ir iki 8,8 20 savaitę (4B pav). Šie rezultatai rodo, kad imunizacija pSARS2-S suteikia ilgalaikį humoralinį atsaką prieš SARS-CoV-2. Be to, pSARS2-S DNR vakcina su D614 genotipu sukėlė neutralizuojantį antikūnų atsaką prieš virusą, kuriame yra D614G mutacija (4C pav), kuris yra panašus į neutralizacijos titrus prieš D614 genotipą. Todėl pSARS2-S gali suteikti kryžminę apsaugą nuo labiausiai paplitusio ir dominuojančio SARS-CoV-2 D614G varianto.

4 pav. SARS-CoV-2 S DNR vakcina sukėlė ilgalaikį humoralinį imunitetą ir kryžminę apsaugą nuo SARS-CoV-2 su D614G mutacija.

BALB/c pelės (n=4 grupėje) buvo imunizuotos į raumenis tris kartus su 3-savaitės intervalu 100 ug vektoriaus, pSARS-S arba pSARS2-S, po to atlikta elektroporacija. Serumo mėginiai buvo paimti nurodytais laiko momentais po pirmosios imunizacijos. (A) Antikūnai prieš SARS-CoV-2 viso ilgio smaigalio baltymą buvo įvertinti ELISA metodu. (B, C) Vakcinos sukeltas neutralizuojantis aktyvumas prieš SARS-CoV-2 su D614 arba G614 genotipais buvo įvertintas neutralizacijos tyrimu. Antikūnų titrai pateikiami kaip vidurkis ± SEM, o neutralizacijos titrai išreiškiami kaip geometrinis vidurkis su 95 % pasikliautinuoju intervalu. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Šališkų atsakymų{0}} ar2- sukėlimas

Efektorinės CD4+ T ląstelės gali būti suskirstytos į du pagrindinius funkcinius pogrupius – Th1 ir Th2, remiantis aktyvavimo metu išskiriamais citokinais. Th1 ląstelės gamina uždegiminius citokinus (IFN-) ir dalyvauja ląstelių sukeltame imuniniame atsake į tarpląstelines bakterijas ir virusus, o išskiriamos Th2 ląstelės daugiausia padeda B ląstelėms gaminti antikūnus, bet taip pat skatina eozinofilų sukeltą imunitetą (IL-5 ir IL{ {9}}), sukeliantis humoralinį arba alerginį atsaką [25, 26]. Be to, nuo Th2 ląstelių priklausomi mechanizmai gali prisidėti prie su vakcina susijusių sustiprėjusių kvėpavimo takų ligų (VAERD), kaip rodo SARS-CoV vakcinos kandidatų tyrimai.27, 28], kurie pabrėžia, kad subalansuotas T ląstelių atsakas yra labai svarbus saugiai COVID{0}} vakcinos kūrimui [29]. Siekiant išspręsti šią problemą, BALB/c ir C57BL/6 pelės buvo imunizuotos vektoriumi, pSARS-S ir pSARS2-S du kartus 3-savaitės intervalu. Pelės buvo numarintos praėjus 7 dienoms po antrosios imunizacijos, o splenocitai buvo stimuliuojami SARS-CoV-2 S baltymu (5 ug/ml) 3 dienas. BALB/c pelėms (5A–5D pav), Th1 tipo citokinų IFN- (19641,3 pg/mL ± 8823,5) ir IL-2 (599,5 pg/mL ± 37,7) sekrecija buvo didelė po stimuliacijos S baltymu pSARS2-S. imunizacijos grupėje, tačiau buvo aptiktas labai mažas Th2 tipo citokinų IL-5 (18,1 pg/mL ± 11,8) ir IL-13 (567,2 pg/mL ± 166,2) kiekis. Panašūs rezultatai buvo gauti su C57BL/6 pelėmis, imunizacijos grupė pSARS2-S sukėlė didesnį IFN- (33918,8 pg/mL ± 11646,1) ir IL-2 (800,3 pg/mL ± 109,5) kiekį. IL-5 (4,6 pg/mL ± 2,9) ir IL-13 (545,7 pg/mL ± 117,4) (5E–5H pav). Šie duomenys rodo, kad pSARS{0}}S gali sukelti šališką imuninį atsaką.

5 pav. T ląstelių atsakas pelėms po imunizacijos pSARS-S ir SARS2-S DNR vakcinomis.

BALB/c (AD) ir C57BL/6 (EH) pelės (n=4 grupėje) buvo imunizuotos į raumenis du kartus su 3-savaitės intervalu 100 ug vektoriaus, pSARS-S arba pSARS{{ 8}}S, po to elektroporacija. Splenocitai buvo surinkti 4 savaitę po pirmosios imunizacijos ir išskiriamo IFN- (A, E), IL-2 (B, F), IL-5 (C, G) ir IL lygiai. -13 (D, H) buvo įvertinti po pakartotinio stimuliavimo rekombinantiniu SARS-CoV-2 S baltymu. Antikūnų titrai pateikiami kaip vidurkis ± SEM. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Profilaktinis DNR vakcinų veiksmingumas nuo SARS-CoV{1}} iššūkis

Siekiant ištirti pSARS{0}}S vakcinacijos apsauginį veiksmingumą, Sirijos žiurkėnai buvo imunizuoti du kartus 100 ug DNR su 3-savaitės intervalu ir į nosį užkrėsti SARS-CoV-2 virusu 7 savaitę. (6A pav). Po imunizacijos 4 ir 6 savaitės serumai buvo paimti antikūnų prieš smaigalį (IgG) ir neutralizuojančių antikūnų titro analizei. Imunizacija pSARS2-S sukėlė aukštesnius antikūnų prieš Spike titrus nei ptRBD imunizacija 4 savaitę (1584,9 prieš 50,1) ir 6 savaitę (1995,3 ir 63,1) žiurkėnams (6B pav). Atsižvelgiant į anti-Spike antikūnų titrus, pSARS2-S imunizuotų žiurkėnų serumai padidino labai aukštus neutralizuojančių antikūnų titrus (6,5 4 savaitę ir 6,4 6 savaitę (log2)), tačiau vektoriaus arba ptRBD imunizuoti žiurkėnai to nepadarė (6C pav). Po iššūkio su SARS-CoV-2 žiurkėno kūno svoris buvo stebimas kiekvieną dieną. Ankstesni tyrimai atskleidė, kad viruso titras žiurkėno plaučiuose pasiekė aukštą lygį praėjus 3 dienoms po užkrėtimo.30]. Todėl pusė kiekvienos grupės žiurkėnų buvo nužudyti 3 dieną ir buvo ištirtas viruso kiekis plaučiuose. Pernešėjų vakcinuotų žiurkėnų kūno svoris mažėjo palaipsniui, o prarasto kūno svorio procentas buvo 11,1 % praėjus 6 dienoms po užkrėtimo. Priešingai, skiepijimas pSARS2-S apsaugojo žiurkėnus nuo kūno svorio mažėjimo (6D pav). Be to, infekcinio viruso titrai ir viruso RNR kopijų skaičius pSARS2-S grupėje parodė 2,29 ir 1,37 log10 sumažėjimą, palyginti su vektoriaus kontroline grupe (6E ir 6F pav). Šie rezultatai rodo, kad imunizacija pSARS2-S suteikia apsaugą nuo SARS-CoV-2 infekcijos Sirijos žiurkėnus.

6 pav. Profilaktinis SARS-CoV-2 S DNR vakcinos veiksmingumas SARS-CoV-2-infekuotiems žiurkėnams.

(A) DNR vakcinacijos ir SARS-CoV{1}} užkrėtimo laikas. Sirijos žiurkėnai buvo imunizuoti į raumenis du kartus su 3-savaitės intervalu 100 ug kontrolinės medžiagos pSARS-S arba pSARS2-S, po to atlikta elektroporacija. Serumo mėginiai buvo paimti retroorbitiniu kraujo mėginiu 4 ir 6 savaites po pirmosios imunizacijos. Praėjus 4 savaitėms po antrosios imunizacijos, Sirijos žiurkėnai buvo užkrėsti į nosį 105 TCID50 SARS-CoV-2. (B) Antikūnai prieš SARS-CoV-2 viso ilgio smaigalio baltymą buvo įvertinti ELISA metodu. (C) Vakcinos sukeltas neutralizuojantis aktyvumas prieš SARS-CoV-2 buvo įvertintas neutralizacijos tyrimu. (D) žiurkėnų kūno svorio pokytis (%) buvo registruojamas kiekvieną dieną po SARS-CoV{20}} užkrėtimo. Viruso titrai (E) ir virusinės RNR kopijos (F) SARS-CoV -2-infekuotų žiurkėnų plaučiuose praėjus 3 dienoms po užkrėtimo buvo nustatyti atitinkamai TCID50 tyrimu ir qRT-PGR. Antikūnų titrai pateikiami kaip vidurkis ± SEM, o neutralizacijos titrai išreiškiami kaip geometrinis vidurkis su 95 % pasikliautinuoju intervalu. *p<0.05, ***p<0.001 by the Mann-Whitney test.

Diskusija

Pradėta daugiau nei 80 COVID-19 vakcinos klinikinių tyrimų, o imunogeniškumo ir viruso poveikio tyrimai su gyvūnais yra svarbūs vakcinos kūrimo procesų žingsniai. DNR vakcinos nuo SARS-CoV-2 infekcijos buvo intensyviai kuriamos įvairiems pristatymo būdams. Elektroporacija yra perspektyvus metodas, galintis pagerinti DNR tiekimą ir imunogenų antigeniškumą in vivo . Buvo pranešta apie du DNR vakcinos tyrimus, Yu ir kt. [13] ir Smithas ir kt. [12]. Yu et al. found that rhesus macaques immunized with naked DNA encoding full-length S protein (without electroporation) exhibited >3,1 log10 virusų kiekio sumažėjimas bronchoalveolių plovimo metu po užkrėtimo, palyginti su kontroline grupe. Smithas ir kt. nustatė, kad pelių ir jūrų kiaulyčių imunizavimas INO-4800 (koduojančiu viso ilgio S baltymą) elektroporacija gali sukelti neutralizuojančių antikūnų prieš SARS-CoV-2 infekciją ir blokuoti S baltymo prisijungimą prie ACE2 receptoriaus, tačiau nepateikia duomenų apie užkrėtimą gyvūnais. Šioje ataskaitoje įvertinome skirtingus DNR vakcinos kandidatų variantus ir nustatėme, kad viso ilgio S baltymas (pSARS2-S) yra tinkamiausias tolesniam imunologiniam tyrimui. Nors SARS-CoV ir SARS-CoV-2 S baltymai turi 76 % homologiją [31, 32], imunizacija pSARS-S negali sukelti antikūnų prieš SARS-CoV-2 S baltymo UBR arba neutralizuojančių antikūnų titrų prieš SARS-CoV-2 infekciją (2 pav). Iš tiesų, anti-RBD antikūnai atlieka svarbų vaidmenį blokuojant virusinę infekciją. Tačiau imunizacija vien tik UBD (ptRBD) sukėlė aukštus neutralizuojančių antikūnų titrus pelėms, bet ne žiurkėnams (pav.2Hir6C). Mes spėliojome, kad šis rezultatas gali būti dėl to, kad signalinis peptidas (audinio plazminogeno aktyvatorius) nesugeba palengvinti RBD baltymo sekrecijos žiurkėnams. Išsamus mechanizmas reikalauja tolesnio tyrimo ateityje. Taip pat pažymėjome, kad ptRBDTM (koduojantis fragmentą iš UBR į S transmembraninį domeną) imunizacija sukėlė mažesnius neutralizuojančių antikūnų titrus nei ptRBD imunizacija (1 pav.2HirS1C). Rezultatai gali atspindėti nestabilią RBD-TM baltymo struktūrą. Norint toliau tirti Th1/Th2 imuninį atsaką, imunizuotų pelių splenocitai buvo stimuliuojami SARS-CoV-2 S baltymu. Mes nustatėme, kad imunizacija pSARS2-S sukėlė stiprų Th1-įšališką imuninį atsaką su didesniu IFN- -sekrecijos lygiu po stimuliacijos (5 pav), tačiau imunizacija pSARS-S sukėlė tik mažą IFN- -sekrecijos lygį. Šie duomenys parodė, kad T-ląstelių atsakų kryžminis reaktyvumas tarp SARS-CoV ir SARS-CoV -2 smaigalio baltymo nėra didelis (5 pav). Be to, IFN-ELISPOT tyrimas atskleidė, kad C57BL/6 ir BALB/c pelėms, imunizuotoms pSARS-S, buvo aptikta mažiau T ląstelių atsakų į S1 sritį.S2 pav), kurį taip pat patvirtina Smitho tyrimas [12]. Šie duomenys rodo, kad SARS vakcina gali nesuteikti visiško apsaugos nuo SARS-CoV-2 infekcijos. DNR vakcinų kūrimas yra svarbus norint greitai reaguoti į pandeminę koronaviruso infekciją. Taigi DNR vakcinos nuo SARS-CoV-2 sėkmė gali būti pritaikyta kitoms infekcinėms ligoms gydyti.

Skirtingos konstrukcijos, naudojamos SARS-SoV-2 DNR vakcinose, sukėlė skirtingus neutralizuojančių antikūnų titrų lygius. tPA lyderio seka buvo naudojama antigeno ekspresijai ir sekrecijai padidinti DNR vakcinose [21, 33–35]. Tačiau tPA lyderio seka šioje ataskaitoje reikšmingai nepadidino antikūnų titrų. Siekiant dar labiau padidinti vakcinos veiksmingumą, gali būti naudojamos skirtingos lyderių sekos, kurios pakeistų natūralią smailės baltymo lyderio seką. IgE lyderio seka buvo naudojama INO-4800 DNR vakcinoje ir MERS-CoV vakcinoje [5, 12]. Be to, modifikuota smaigalio baltymų seka taip pat gali padidinti vakcinos imunogeniškumą. Stabilizuotas smaigalio baltymas buvo sukurtas mutuojant furino vietą ir kitus regionus, kad būtų sukurta prefuzijos struktūra (S-2P), kuri gali padidinti smaigalio baltymo ekspresiją ~10- kartus [36]. Ideali DNR vakcina turėtų optimizuoti plazmidės DNR konstrukciją ir tiekimo sistemą, kad padidintų baltymų ekspresijos lygį.

cistanche tubulosa - stiprina imuninę sistemą

Gyvūnų modeliai yra labai svarbūs kuriant COVID{0}} vakciną. COVID{1}} vakcinų veiksmingumui įvertinti buvo naudojami keli gyvūnų modeliai, įskaitant nežmoginius primatus [13, 37], žmogaus ACE2 transgeninės pelės [38] ir Sirijos žiurkėnai [39]. Sirijos žiurkėno ACE2 yra labai panašus į žmogaus ACE2, o jo jungimosi afinitetas su SARS-CoV -2 S baltymu buvo didesnis nei pelės ACE2 [40]. Dėl šios priežasties žmogaus ACE2 transgeninės pelės buvo naudojamos kaip SARS-CoV-2 iššūkio modeliai, bet ne laukinio tipo pelės. SARS-CoV-2 perdavimo tyrimai parodė, kad virusas gali veiksmingai užkrėsti naivius žiurkėnus per tiesioginį kontaktą arba per aerozolius [41]. Intranazalinė SARS-CoV{1}} infekcija gali daugintis ir sukelti patogenezę Sirijos žiurkėnų plaučiuose [30]. This study and previous reports also showed that SARS-CoV-2 infection caused approximately a 10% reduction in the initial body weight of hamsters. Clinical manifestations of patients with COVID-19, including changes in smell and taste, and severe respiratory distress, might be accompanied by weight loss (>5 % sumažėjimas nuo pradinio), kuris buvo susijęs su ilgesne ligos trukme [42]. Šie radiniai rodo, kad Sirijos žiurkėnas taip pat yra tinkamas gyvūnų modelis COVID{0}} vakcinoms įvertinti. Atsižvelgdami į turimus gyvūnų modelius, kaip SARS-CoV-2 iššūkio modelį pasirinkome žiurkėnus, kad įvertintume vakcinos veiksmingumą. Mūsų duomenys parodė, kad imunizacija pSARS2-S, bet ne ptRBD, gali sukelti aukštus anti-Spike IgG antikūnų titrus ir neutralizuojančių antikūnų titrus (6B ir 6C pav). Atitinkamai, pSARS{0}}S imunizuoti žiurkėnai, bet ne ptRBD imunizuoti žiurkėnai, sukėlė imuninį atsaką prieš SARS-CoV-2 iššūkį. Pastebėjome, kad ptRBD imunizacija gali sukelti aukštą neutralizuojančių antikūnų titrų kiekį pelėms, bet ne žiurkėnams. Prieštaringi rezultatai gali būti dėl to, kad vien UBR nėra stabiliai išreikštas žiurkėnų organizme. Žiurkėno modelis taip pat buvo naudojamas adenoviruso 26 serotipo (Ad26) vektorinei COVID{8}} vakcinai įvertinti. Vienkartinė imunizacija Ad26 vektorine vakcina, ekspresuojančia stabilizuotą SARS-CoV-2 smaigalio baltymą, kuris sukėlė neutralizuojančius antikūnų atsakus ir apsaugojo nuo SARS-CoV-2 infekcijos, sukėlė svorio kritimą, dalinį mirtingumą ir viruso replikaciją. plaučiuose [39]. Šie rezultatai parodė, kad žiurkėnų modelis yra tinkamas COVID{0}} vakcinų veiksmingumui įvertinti.

Daugelis SARS-CoV{1}} vakcinų kūrimo pastangų yra pagrįstos MERS-CoV ir SARS-CoV tyrimų patirtimi. 2020 m. gruodžio mėn. pasauliniu mastu patvirtintos kelios COVID-19 vakcinos, įskaitant RNR ir adenoviruso vektorių pagrįstas COVID-19 vakcinas. Buvo aptarti skirtingų vakcinų platformų privalumai ir trūkumai [43]. Adenoviruso vektorinės vakcinos gali sukelti stipresnį imuninį atsaką nei DNR ir mRNR vakcinos, tačiau jų vakcinos veiksmingumas gali sumažėti dėl jau egzistuojančio imuniteto prieš reklamos vektorius [44]. Palyginti su DNR vakcina, mRNR vakcinai reikia itin žemos temperatūros saugojimui ir transportavimui.45]. Taigi, DNR vakcina gali būti potenciali vakcinos platforma, ypač naudojant avariniais atvejais.

Mūsų tyrimas rodo, kad DNR vakcina gali būti naudojama žmonėms. Tolesni tyrimai galėtų ištirti šios DNR vakcinos, suleidžiamos naudojant intraderminę (ID) injekciją, veiksmingumą, kuri yra patogesnė klinikiniam naudojimui, nes adata, skirta IM injekcijai, yra maždaug 18 mm gylio žmonėms ir paveikia daugiau audinių nei ID injekcija EP. Be to, vakcinos veiksmingumas turėtų būti išbandytas su pagyvenusiomis pelėmis kaip pagyvenusių žmonių modelis, nes ši populiacija yra ypač stipriai paveikta užsikrėtus SARS-CoV -2. Ankstesni tyrimai parodė, kad Th2 ląstelių atsakas buvo susijęs su paūmėjusia kvėpavimo takų liga (VAERD) po skiepijimo inaktyvuotomis virusinėmis vakcinomis nuo RSV.46], tymų virusas [47] ir SARS-CoV [27, 48]. Priešingai, pranešama apie ne tokius sunkius SARS-CoV atvejus, atsiradusius dėl Th1 ląstelių atsako indukcijos.49]. Todėl stiprus Th{0}}šališkas imuninis atsakas, sukeltas DNR vakcinos, rodo, kad šalutinis poveikis greičiausiai nebus pagrindinė problema [50]. Be to, susirūpinimą kelia baltymų pagrindu pagamintos vakcinos dėl aliuminio druskos arba aliejaus vandenyje emulsijos tipo adjuvantų, kurie sukelia Th2-šališką imuninį atsaką ir padidina galimą šalutinį poveikį [51, 52]. Apibendrinant galima pasakyti, kad COVID{0}} DNR vakcina artimiausiu metu gali atlikti svarbų vaidmenį kontroliuojant COVID{1}} pandemiją.

Nuorodos

1. Pak A, Adegboye OA, Adekunle AI, Rahman KM, McBryde ES, Eisen DP. Ekonominės COVID{0}} protrūkio pasekmės: būtinybė pasirengti epidemijoms. Priekinė visuomenės sveikata. 2020; 8:241. pmid: 325743072. Sistemų mokslo ir inžinerijos centras (CSSE) [internetas]. COVID{1}} informacijos suvestinė. Johnso Hopkinso universitete. [cituota 2021 m. vasario 11 d.]. Galima įsigyti iš:
2. 3. Buchholz UJ, Bukreyev A, Yang L, Lamirande EW, Murphy BR, Subbarao K ir kt. Sunkaus ūminio kvėpavimo sindromo koronaviruso struktūrinių baltymų indėlis į apsauginį imunitetą. Proc Natl Acad Sci US A. 2004;101(26):9804–9. pmid: 15210961
3. 4. Yang ZY, Kong WP, Huang Y, Roberts A, Murphy BR, Subbarao K ir kt. DNR vakcina sukelia SARS koronaviruso neutralizavimą ir apsauginį pelių imunitetą. Gamta. 2004;428(6982):561–4. pmid: 15024391
4. 5. Muthumani K, Falzarano D, Reuschel EL, Tingey C, Flingai S, Villarreal DO ir kt. Sintetinė konsensuso anti-spike baltymų DNR vakcina sukelia apsauginį imunitetą nuo Artimųjų Rytų kvėpavimo sindromo koronaviruso nežmoginiams primatams. Sci Transl Med. 2015;7(301):301ra132. pmid: 26290414
5. 6. Kuriamos Krammer F. SARS-CoV-2 vakcinos. Gamta. 2020;586(7830):516–27. pmid: 32967006
6. 7. Khalaj-Hedayati A. Apsauginis imunitetas nuo SARS subvieneto vakcinos kandidatų, pagrįstas smaigalio baltymu: koronaviruso vakcinos kūrimo pamokos. J Immunol Res. 2020; 2020: 7201752. pmid: 32695833
7. 8. Lu B, Tao L, Wang T, Zheng Z, Li B, Chen Z ir kt. Humoralinis ir ląstelinis imuninis atsakas, sukeltas 3a DNR vakcinų nuo sunkaus ūminio kvėpavimo sindromo (SARS) arba į SARS panašaus koronaviruso pelėms. Clin Vaccine Immunol. 2009;16(1):73–7. pmid: 18987164
8. 9. Bower JF, Yang X, Sodroski J, Ross TM. Neutralizuojančių antikūnų sukūrimas naudojant DNR vakcinas, ekspresuojančias tirpius stabilizuotus žmogaus imunodeficito viruso 1 tipo apvalkalo glikoproteinų trimerius, konjuguotus su C3d. J Virol. 2004;78(9):4710–9. pmid: 15078953
9. 10. Zakhartchouk AN, Viswanathan S, Moshynskyy I, Petric M, Babiuk LA. DNR vakcinos nuo SARS optimizavimas. DNA Cell Biol. 2007;26(10):721–6. pmid: 17665998
10. 11. Gary EN, Weiner DB. DNR vakcinos: dabar geriausias laikas. Curr Opin Immunol. 2020;65:21–7. pmid: 32259744
11. 12. Smith TRF, Patel A, Ramos S, Elwood D, Zhu X, Yan J ir kt. DNR vakcinos kandidatės nuo COVID imunogeniškumas-19. Nat Commun. 2020;11(1):2601. pmid: 32433465
12. 13. Yu J, Tostanoski LH, Peter L, Mercado NB, McMahan K, Mahrokhian SH ir kt. DNR vakcinos apsauga nuo SARS-CoV-2 rezus makakose. Mokslas. 2020;369(6505):806–11. pmid: 32434945
13. 14.Jorritsma SHT, Gowans EJ, Grubor-Bauk B, Wijesundara DK. Pristatymo metodai, skirti padidinti ląstelių įsisavinimą ir DNR vakcinų imunogeniškumą. Vakcina. 2016;34(46):5488–94. pmid: 27742218
14. 15. Kudchodkar SB, Choi H, Reuschel EL, Esquivel R, Jin-Ah Kwon J, Jeong M ir kt. Greitas atsakas į besiformuojančią infekcinę ligą – pamokos, įgytos kuriant sintetinę DNR vakciną, nukreiptą į Zikos virusą. Mikrobai užkrečia. 2018;20(11–12):676–84. pmid: 2955534516. Adam L, Tchitchek N, Todorova B, Rosenbaum P, Joly C, Poux C ir kt. Įgimtas molekulinis ir ląstelinis parašas odoje prieš ilgalaikį T ląstelių atsaką po elektroporuotos DNR vakcinacijos. J Immunol. 2020;204(12):3375–88. pmid: 32385135
15. 17. Lin F, Shen X, McCoy JR, Mendoza JM, Yan J, Kemmerrer SV ir kt. Naujas prototipas, skirtas elektroporacijai sustiprintai DNR vakcinai vienu metu tiekti į odą ir raumenis. Vakcina. 2011;29(39):6771–80. pmid: 21199706
16. 18. Williams M, Ewing D, Blevins M, Sun P, Sundaram AK, Raviprakash KS ir kt. Padidintas keturvalentės dengės karštligės DNR vakcinos imunogeniškumas ir apsauginis veiksmingumas naudojant elektroporaciją ir intraderminį įvedimą. Vakcina. 2019;37(32):4444–53. pmid: 31279565
17. 19. Ramakrishnan MA. 50 % galutinio taško titro nustatymas naudojant paprastą formulę. Pasaulis J Virol. 2016;5(2):85–6. pmid: 27175354
18. 20. Corman VM, Landt O, Kaiser M, Molenkamp R, Meijer A, Chu DK ir kt. 2019 m. naujojo koronaviruso (2019-nCoV) aptikimas naudojant realiojo laiko RT-PGR. Euro Surveill. 2020. pmid: 31992387
19. 21. Kou Y, Xu Y, Zhao Z, Liu J, Wu Y, You Q ir kt. Audinių plazminogeno aktyvatoriaus (tPA) signalo seka padidina MVA pagrindu pagamintos vakcinos nuo tuberkuliozės imunogeniškumą. Immunol Lett. 2017;190:51–7. pmid: 28728855
20. 22. Xia S, Zhu Y, Liu M, Lan Q, Xu W, Wu Y ir kt. 2019-nCoV ir sintezės inhibitorių, nukreiptų į HR1 domeną smaigalio baltyme, susiliejimo mechanizmas. Ląstelė Mol Imunol. 2020;17(7):765–7. pmid: 32047258