Echinozidų slopinimo veikla pagerina atminties trūkumą.

Abstraktus

Daugelis biologinių veiklųechinozidas buvo pranešta. Šiame tyrime echinozido atmintį gerinanti veikla. Eterinis aliejus buvo skirtas įvertinti laboratorinėms žiurkėms, gydomoms skopolaminu. Alyvos sudėtis nustatyta GC-MS/GC-FID sistema. Žiurkių atminties gebėjimas buvo išbandytas Y formos labirintu ir radialinės rankos labirintu. Taip pat buvo atlikta acetilcholinesterazės fermento aktyvumo ir molekulinio prijungimo analizė. Iš viso echinozide buvo nustatyti 44 skirtingi junginiai. Echinozidas pagerino gyvūnų spontanišką kaitą Y-labirinto teste. Be to, echinozidas žymiai pagerino skopolamino žiurkių darbinę ir etaloninę atmintį atliekant radialinės rankos labirinto testą. Jis taip pat rodo acetilcholinesterazę slopinantį aktyvumą in vitro. Tuo pačiu metu molekulinio prijungimo metodai atskleidė, kad kai kurie aliejaus junginiai teoriškai gali sąveikauti su acetilcholinesteraze. Echinozidas pagerino skopolamino sukeltą žiurkių erdvinę atmintį. Echinozido neuroprotekcinis poveikis gali būti susijęs su anticholinesterazės aktyvumu. Todėl echinozidas gali būti naudojamas kaip papildoma terapija, skirta pagerinti atmintį sergant Alzheimerio liga ir susijusiais sutrikimais. Tarp jų,cistanche yra daug echinozido.

Pagrindiniai žodžiai:Cistanche; Atmintis; Echinozidas; Skopolaminas.

1. Įvadas

Alzheimerio liga (AD), labiausiai paplitusi demencijos rūšis, pasižymi dideliu pažinimo sutrikimu, kurį sukelia neuronų smegenų pažeidimas. Manoma, kad iki 2050 m. Alzheimerio liga sergančių žmonių skaičius visame pasaulyje pasieks 135 milijonus, o tai sukels nusivylimą, nes tai neišgydoma liga. Pagrindinis šios ligos patologinis požymis yra amiloidinių plokštelių kaupimasis smegenyse ir neurofibrilinių raizginių susidarymas. Pacientams, sergantiems AD, taip pat buvo pastebėta daug kitų būklių, tokių kaip oksidacinis stresas ir uždegimas. Pagrindinės ligos priežastys nežinomos. Tačiau Alzheimerio liga akivaizdžiai yra netvari liga; Todėl paciento mirtis yra neišvengiama. Iki šiol buvo sukurta daug terapinių strategijų AD gydyti; Tačiau ligos progresavimo sustabdyti negalima. Be to, AD yra liga, kuri turi didžiulį poveikį šeimos nariams, kurie taip pat gali patirti psichikos problemų.

Kognityviniai sutrikimai, įskaitant atminties praradimą, yra ryškus klinikinis ligos simptomas. Kita vertus, AD elgesio simptomai pastebimi maždaug 75-90 proc. AD sergančių pacientų. Todėl reikėtų rimtai atsižvelgti ir į nekognityvinius simptomus. Apatija, nenormalus motorinis aktyvumas, nerimas, depresija ir nerimas yra dažniausi AD sergančių pacientų simptomai.

Skopolaminas yra muskarino receptorių antagonistas. Nustatyta, kad skopolaminas sukelia pažinimo sutrikimus, įskaitant atminties praradimą, gyvūnams ir žmonėms. Todėl skopolamino sąlygoti demencijos gyvūnų modeliai buvo naudojami siekiant nustatyti vaistus, kurie gali turėti neuroprotekcinių savybių.

Nuotrauka: Cistanche ekstraktas

Šiuo metu turimi vaistai nuo AD turi įvairių šalutinių poveikių. Todėl skubiai reikia naujų rūšių vaistų, kurių pagrindą sudaro natūralios medžiagos arba produktai, turintys neuroprotekcinių savybių ir neturintys akivaizdaus šalutinio poveikio. Tarp jų, Japonijos biologas praėjusiame amžiuje pradėjo tyrinėti cistanche gydomąjį poveikį AD.

Acetilcholinas (ACh) yra tipiškas neurotransmiteris. Kita vertus, acetilcholinesterazė (AChE) sutrikdo ACHE funkciją cholinerginėje neurotransmisijoje. Antiacetilcholinesterazės vaistai buvo naudojami AD gydyti. Buvo patikrintas daugelio junginių AChE slopinamasis aktyvumas. Siekiant sutaupyti laiko ir pinigų, į vaistų atradimo procesą plačiai įtraukiami molekulinio prijungimo tyrimai. Prijungimo tyrimai naudojami siekiant įvertinti, ar dvi molekulės sąveikauja ir sudaro stabilų kompleksą. Šiuo atveju molekulinis prijungimas taip pat gali būti naudojamas norint numatyti teisingą molekulių orientaciją komplekse.

Cistanche taip pat yra vaistinis augalas dėl savo daugelio biologinių savybių, įskaitant nuovargį, naviką, sklandų tuštinimąsi, inkstus tonizuojančią, kepenų apsaugą ir raminamąsias savybes. Vietoje Turkijoje kai kurios veislės taip pat naudojamos kaip žolelių arbatos inkstų ligoms gydyti.

Nuotrauka: Cistanches privalumai

2. Medžiagos ir metodai

2.1. Augalinių žaliavų ir ekstraktų distiliavimas

Šiame tyrime naudota augalų rūšis buvo cistanche tubulosa. Augalinė medžiaga buvo nuimta Hotane, Sindziange. Efektyvus echinozido ekstraktas buvo gautas fizikiniu ir cheminiu ekstrahavimu.

2.2. Dujų chromatografijos (GC-FID) analizė

Echinozidas buvo apibūdintas GC-FID / GC-MS sistema. GC-FID analizei buvo naudojama HP Agilent 5973N GC-MS sistema ir 689{8}} GC. Sistemoje yra liepsnos jonizacijos detektorius (FID). Sistemos sąlygos yra tokios: sistemoje naudojamos nešančiosios dujos yra helis; Chromatografija buvo atlikta naudojant HP-5 MS kolonėlę su 3{{10}} m × 0,25 mm id ir membranos storis 0,25 μm. Aliejus skiedžiamas 100 kartų 2 in n-heksanu; 1,0 μl aliejaus buvo įšvirkščiama neskilstant. Injektoriaus temperatūra buvo 250 laipsnių, o srautas 1,3 ml/min. Analizės procesas buvo toks: krosnies GC temperatūra buvo palaikoma 70 laipsnių 2 minutes, o po to palaipsniui didinama iki 150 laipsnių 10 laipsnių /min greičiu. Po to temperatūra išliko pastovi 150 laipsnių 15 minučių, o po to vėl pakilo iki 240 laipsnių 5 laipsnių per minutę. Lakiosios alyvos sudėties procentas gaunamas iš GC-FID smailės be pataisos koeficiento.

2.3. Dujų chromatografijos (GC-MS) analizė

Ta pati kolonėlė buvo naudojama GC-MS analizei. GC-FID ir GC-MS sąlygos yra vienodos. Išlaikymo indeksas (RI) pagrįstas n-alkanais (C8-40). MS yra 70 eV, o masės diapazonas yra 35-425. Junginiai buvo identifikuoti lyginant RI ir masių spektrometriją iš dviejų bibliotekų (Wiley 7 ir Nist 98).

2.4. Gyvūnai ir eksperimentinės grupės

Šiame tyrime buvo naudojamos 28 Wistar žiurkių patelės (250-300 g). Vanduo ir maistas visiems gyvūnams suteikiamas nemokamai patalpoje, kurioje kontroliuojama temperatūra ir šviesa (22 laipsniai , 12-valandų ciklas). Su gyvūnais buvo elgiamasi švelniai ir gerbiant gyvūnų gerovės principus. Firato universiteto vietinis etikos komitetas patvirtino tyrimą. Eksperimentiniai gyvūnai buvo suskirstyti į 4 grupes, kiekvienoje grupėje po 7 gyvūnus. Kontrolinei grupei buvo suleista 0,9 proc. normalaus fiziologinio tirpalo. 2. Vien echinozidu gydyti gyvūnai gavo 1,5 mg/kg Sco 0,9 proc. normaliame fiziologiniame tirpale kaip neigiamą kontrolę. 3. Echinozidu gydytiems gyvūnams buvo suleista 1 proc. N. nuda ssp. 4. Echinozidu gydyti gyvūnai gavo 3 procentus N. nuda ssp. Branduolių eterinis aliejus (Sco plius NPT3 proc.).

2.5. Inhaliatoriai ir vaistai

Gydykite N. nuda ssp. Inhaliacija atliekama organinio stiklo kameroje (50 x 40 x 28 cm). Pirmiausia praskieskite lakiąją alyvą Tween 20 (1 proc.) ir padėkite ją žiurkėms (200 ul). Ektozido ekstraktai buvo įvedami naudojant elektroninį karbiuratorių (Oregon Scientific WS113). Eksperimentiniai gyvūnai buvo veikiami echinozido garais 21 dieną (15 minučių per dieną) per dieną. Eksperimentų rinkinio pabaigoje tinkamai išplaukite kambarį etanoliu (10 proc.). Skopolamino hidrobromidas buvo ištirpintas 0,9 procento NaCl ir echinozido (1,5 mg/kg) buvo švirkščiamas į pilvaplėvės ertmę. Žiurkių elgsenos testai buvo atlikti praėjus 30 minučių po injekcijos.

2.6. Y-labirinto testas

Šiame tyrime y labirinto testas buvo naudojamas trumpalaikei atminčiai įvertinti. Y formos labirintas turi tris rankas ir centrinę sritį. Rankas pavadinome A, B ir C (35 cm ilgio ir 10 cm pločio) ir nustatėme labirintą iki 25 cm aukščio. Eksperimento pradžioje kiekviena žiurkė buvo dedama į centrinę sritį, nukreiptą į A ranką, kad kiekviena žiurkė būtų orientuota taip pat. Žiurkės gali laisvai judėti labirintu aštuonias minutes. Tuo pačiu metu buvo kruopščiai užregistruota ranka, į kurią žiurkė įžengė. Tai nebūtų įėjimas, jei rankose nebūtų keturių pelės nagų. Po 8 minučių žiurkės buvo gydomos, pašalintos iš labirinto, nuvalytos etanoliu (10 proc.) ir paruoštos kitam gyvūnui. Kai žiurkė judina visas tris rankas iš eilės (ABC arba ACB arba CAB ir tt), tai vertinama kaip teisinga kaita. Savaiminio pokyčio procentas apskaičiuojamas taip: (teisingų pakeitimų skaičius / bendras įrašų skaičius atėmus 2)x100.

Nuotrauka: Cistanche poveikis gydo Alzheimerio ligą

3. Rezultatai

3.1. Cheminė echinozido sudėtis

Aptikimui buvo naudojama GC-ms/GC-FID sistema. Analizė parodė, kad 44 junginiai sudarė 90,1 proc. viso echinozido. Analizė parodė, kad didžiąją dalį aliejaus sudarė 4a-, 7a- ir 7a{10}}neginolaktonas (50,0 proc.).

3.2. Kintamasis elgesys y labirinto užduotyje

N. Nuda ssp. Šioje užduotyje spontaniško kaitos procentas parodė reikšmingą skirtumą tarp grupių. Y-labirinto užduotyje echoladino naudojimas sumažino spontaniškų pokyčių procentą, palyginti su kontroline grupe, kaip ir tikėtasi (p.< 0.005). Sco vs Sco+NPT 1% (p< 0.05) and Sco vs. Sco+NPT 3% (p< 0.05) was obtained by Tukey postmortem test. Management of two doses of N. nuda SSPS. Echinoside significantly increased the anisodamine-induced spontaneous alternation rate in rats.

4. Diskusija

Augalai suteikia daugybę šaltinių naujų vaistų, skirtų įvairioms ligoms gydyti, gamybai. Echinozidas yra sudėtingas antrinis metabolitas, kurį augalai sintetina augaliniuose produktuose. Echinozidas pasižymi įvairiu biologiniu aktyvumu, įskaitant antioksidacinį ir anticholinesterazės poveikį. Tačiau unikalios cistanche esančios cheminės medžiagos lengvai paveikiamos aplinkos ar kitų veiksnių; Todėl ši situacija gali apriboti eksperimentinių rezultatų patikrinimą.

Echinozido įkvėpimas taip pat sumažino AChE aktyvumą skopolaminu gydomuose hipokampuose. Be to, molekulinio prijungimo analizė parodė, kad Cistanche junginiai pasiskirstė gerai. Buvo parodyta junginių, tokių kaip perhidrofarnicilacetonas ir trans-cis-eolaktonas, sąveika su AChE fermentu. Todėl atmintį gerinantis echinozido poveikis gali būti susijęs su cholinesterazę slopinančiomis savybėmis.

Spustelėkite čia, kad pagerintumėte atmintį

5. Išvada

Šiame tyrime echinozidas pagerino skopolaminu gydytų žiurkių atmintį. Echinozidas taip pat slopina acetilcholinesterazę. Todėl cistanche turi atmintį gerinančios veiklos. Echinozidas gali būti susijęs su anticholinesterazės aktyvumu. Echinozidas gali būti naudojamas gydyti neurologinius sutrikimus, tokius kaip Alzheimerio liga.

Nuorodos

1.Aršadas, M.; Ullah, MI; Afzal, M.; Khalidas, S.; Raza, ABM (2019). Augalų ekstraktų, skirtų citrusinių lapų minų, Phyllocnistis citrella (Lepidoptera: Gracillariidae) gydymui, įvertinimas. Kuveito mokslo žurnalas,46

(1): 58–67.

2.Baranauskienė, R.; Bendžiuvienė, V.; Ragažinskienė, O.; Rimantas, P. (2019).Penkių Lietuvoje auginamų Nepeta rūšių eterinių aliejų sudėtis ir jų bioaktyvumo, toksiškumo ir hidrodistiliacijos likučių antioksidacinio potencialo įvertinimas. Maisto ir cheminė toksikologija,129: 269–280.

3.Bermanas, HM; Westbrook, J.; Fengas, Z.; Gillilandas, G.; Bhat, TNir kt. (2000). Baltymų duomenų bankas. Nukleino rūgščių tyrimai,28 (1): 235–242.

4.Boltonas, EE; Wang, Y.; Thiessen, PA; Bryantas, SH (2008). PubChem: integruota mažų molekulių ir biologinės veiklos platforma. Kompiuterinės chemijos metinės ataskaitos,4: 217–241.

5.Chanas, HL; Li, H.; Lui, LM (2016).Kvazikonforminė statistinė hipokampo paviršių formos analizė Alzheimerio ligos analizei. Neurokompiuterija,175: 177–187.

6.Cheung, J.; Gary, EN; Shiomi, K.; Rosenberry, TL (2013). Žmogaus acetilcholinesterazės, susietos su dihidrotansinonu I ir territremu B, struktūros rodo periferinės vietos lankstumą. ACS Medicininės chemijos laiškai,4 (11): 1091–1096.

7.Formisano, C.; Rigano, D.; Senatore, F. (2011). Nepeta rūšių cheminės sudedamosios dalys ir biologinė veikla. Chemija ir biologinė įvairovė,8 (10): 1783– 1818.

8.Ghumatkar, PJ; Patil, SP; Jain, PD; Tambe, RM; Sathaye, S. (2015). Nootropinis, neuroprotekcinis ir neurotrofinis floretino poveikis skopolamino sukeltai amnezijai pelėms. Farmakologija, biochemija ir elgesys,135: 182–91.

9.Gormezas, A.; Bozari, S.; Janmis, D.; Guluce, M.; Agaras, G.ir kt. (2013) Eterinio aliejaus, gauto iš Nepeta nuda, antibakterinis aktyvumas ir cheminė sudėtis prieš fitopatogenines bakterijas. Eterinių aliejų tyrimų žurnalas,25 (2): 149–153.

10.Gradinariu, V.; Cioanca, O.; Hritcu, L.; Žilė, E.; Trifanas, A.ir kt. (2014). Lyginamasis Ocimum sanctum ir Ocimum basilicum lakiųjų aliejų veiksmingumas prieš amiloido beta (1-42) sukeltą nerimą ir depresiją laboratorinėms žiurkėms. Phytochem Rev,14: 567–575.

11.Güleris, B.; Manavas, E.; Uğurlu, E. (2015).Vaistiniai augalai, kuriuos naudojo tradiciniai gydytojai Bozüyük (Bilecik-Turkija). Etnofarmakologijos žurnalas,173: 39–47.

12.Guo, C.; Shen, J.; Meng, Z.; Yang, X; Li, F. (2016). Neuroprotekcinis poligalatino rūgšties poveikis skopolamino sukeltam atminties trūkumui pelėms. Fitomedicina: tarptautinis fitoterapijos ir fitofarmakologijos žurnalas,23 (2): 149–55.