Glochidion Littorale lapų ekstraktas pasižymi neuroprotekciniu poveikiu sergant Caenorhabditis Elegans per DAF{0}} aktyvinimą

Daugiau informacijos kreipkitės eltina.xiang@wecistanche.com 
Santrauka:Nemažai Tailando ir Rytų Azijos liaudies medicinoje naudojamų augalų sulaukia susidomėjimo dėl didelio jų ekstraktų biologinio aktyvumo. Šio tyrimo tikslas buvo ištirti 20 Tailande rastų augalų valgomųjų lapų ekstraktus ir ištirti galimą bioaktyviausio mėginio neuroprotekcinį poveikį. Visuose 20 lapų ekstraktų buvo nustatytas bendras fenolio ir flavonoidų kiekis bei 2,2-difenil-1-pikrilhidrazilradikalų šalinimo aktyvumas. Remiantis šiais tyrimais, Glochidionlittorale lapų ekstraktas (GLE), kurio visų tirtų parametrų vertė buvo didelė, buvo naudojamas tolesniuose eksperimentuose, siekiant įvertinti jo poveikį neurodegeneracijai.Caenorhabditis elegantiškas. Gydymas GLE sumažino H2O2- sukeltą oksidacinį stresą, sumažindamas reaktyviųjų deguonies rūšių kaupimąsi ir apsaugodamas kirmėles nuo 1-metil-4-fenilpiridinio sukeltos neurodegeneracijos. Pastebėtas neuroprotekcinis poveikis gali būti susijęs su transkripcijos faktoriaus DAF-16 aktyvavimu. Apibūdinant šį ekstraktą LC-MS, buvo nustatyti keli fenolio junginiai, įskaitant miricetiną, kumestriną, chlorogeno rūgštį ir hesperidiną, kurie gali atlikti pagrindinį vaidmenįneuroprotekcija. Šis tyrimas praneša apie naują neuroprotekcinį GLE aktyvumą, kuris gali būti naudojamas kuriant neurodegeneracinių ligų, tokių kaip Parkinsono sindromas, gydymą.

Raktiniai žodžiai: Caenorhabditis elegantiškas; lapų ekstraktas;neuroprotekcija; antioksidacinis aktyvumas; DAF-16

1. Įvadas 

Neurodegeneraciniai sutrikimai, įskaitant Alzheimerio ir Parkinsono ligą (PD), kelia didelių sveikatos ir finansinių problemų pasaulinėms sveikatos priežiūros organizacijoms [1]. Nors žmonių gyvenimo trukmė pramoninėse šalyse per pastaruosius kelis dešimtmečius pailgėjo, išaugo ir su amžiumi susijusių ligų paplitimas. Tikimasi, kad per ateinančius kelis dešimtmečius greitai išaugs vėlyvųjų sutrikimų, tokių kaip neurologiniai sutrikimai, dažnis. Todėl labai svarbu skatinti tyrimus ir klinikinius tyrimus su junginiais, kurie gali išgydyti neurodegeneracines ligas, užkirsti jai kelią ar bent atidėti jų atsiradimą [2]. Vienas iš būdingų PD bruožų yra laipsniškas dopaminerginių (DA) neuronų nykimas juodojoje nigroje [3]. PD patogenezėje padidėjusi reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) gamyba vaidina pagrindinį vaidmenį nykstant DA ląstelėms [4]. Todėl oksidacinio streso mažinimas laikomas perspektyviu terapiniu metodu gydant PD [5]. 1-metil-4-fenilpiridinas (MPP plus), slopinantis mitochondrijų komplekso I aktyvumą, gali sukelti į PD panašius simptomus žmonėms ir gyvūnų modeliams [6].

PanaudojimasCaenorhabditis elegantiškaskaip in vivo modelis suteikia tam tikrų pranašumų tiriant PD [7]. Nematodas yra paprastas, nebrangus ir trumpas gyvavimo ciklas. Ji remia tyrimus, apimančius didelės apimties analizę. Be to, C. elegans neuronų tinklas buvo visiškai suplanuotas. Jame yra 8 DA neuronai ir su PD susiję homologiniai genai [8]. Neurodegeneracija, kuri imituoja parkinsonizmo simptomus, gali būti sukelta C. elegans gydant neurotoksinais, tokiais kaip MPP plus [9].
Natūralūs antioksidaciniai junginiai yra patrauklūs šaltiniai kuriant vaistus neurodegeneracinėms ligoms gydyti dėl jų neuroprotekcinio poveikio gyvūnų modeliuose ir mažo toksiškumo [3]. Yra žinoma, kad polifenoliai yra vieni gausiausių antioksidantų žmogaus mityboje [10]. Taip pat nustatyta, kad oksidaciniai procesai yra susiję su daugeliu patologijų, įskaitant neurodegeneraciją, vėžį, diabetą, širdies ir kraujagyslių bei priešuždegimines ligas. Taigi, polifenolių, pasižyminčių antioksidacinėmis savybėmis iš natūralių šaltinių, radimas gali padėti užkirsti kelią ar gydyti šias patologijas. Šiame tyrime daugiausia dėmesio buvo skiriama Tailande rastų augalų valgomųjų lapų ekstraktams. Dauguma veislių, plačiai auginamų šiaurės ir pietų Tailande, buvo naudojamos kaip liaudies medicina nuo bendrų sužalojimų ir ligų; tačiau yra nedaug pranešimų apie jų neuroprotekcinį poveikį.
Šiame tyrime pirmiausia patikrinome 20 Tailande auginamų augalų valgomųjų lapų ekstraktus ir įvertinome jų fenolio ir flflavonoidų kiekį bei jų 2,2-difenil-1- pikrilhidrazilo (DPPH) radikalų sunaikinimo aktyvumą. Glochidion littorale lapų ekstrakto (GLE), kurio vertė buvo didelė pagal visus tirtus parametrus, poveikis buvo įvertintas C. elegans su neurodegeneracija. Be to, buvo ištirti galimi GLE neuroprotekcinio poveikio būdai, taip pat pagrindinių GLE komponentų identifikavimas.
Kadangi žinoma, kad transkripcijos faktorius DAF{0}} vaidina pagrindinį vaidmenį reguliuojant oksidacinį stresą [11], buvo iškelta hipotezė, kad GLE gali nukreipti į DAF-16. C. elegans padermė CF1038, kuri yra DAF-16 funkcijos praradimo mutantinė padermė, buvo naudojama kirminų, gydytų GLE ir be jo, išgyvenamumui nustatyti. Esant H2O2-sukeltam oksidaciniam stresui, gydymas GLE nepadidina transgeninių kirminų išgyvenamumo (1C pav.).

2. Rezultatai

2.1. Tailando augalų lapų atranka

Neapdoroti Tailande auginamų augalų valgomųjų lapų ekstraktai buvo paruošti ultragarsu. 20 augalų lapų ekstraktai buvo patikrinti dėl jų fenolio ir flavonoidų kiekio bei antioksidacinio aktyvumo DPPH radikalų pašalinimo tyrimu. Nustatyta, kad kai kurie iš tirtų mėginių, tokių kaip Glochidion sphaerogynum ir Mentha piperita, pasižymi dideliu radikalų sunaikinimo aktyvumu ir mažu fenolio ir flflavonoidų kiekiu, o kai kurie mėginiai, tokie kaip Clinacanthus nutans ir Ocimum × citriodorum, rodė priešingą tendenciją (11 lentelė). ). G. littorale lapų ekstraktas pasižymėjo dideliu DPPH radikalus sugeriančiu aktyvumu, taip pat dideliu fenolio ir flflavonoidų kiekiu. Todėl su G. littorale susijęs biologinis aktyvumas buvo toliau tiriamas.

2.2. GLE padidintas atsparumas oksidaciniam stresui naudojant DAF{2}}, C. Elegans

Ištirtas GLE poveikis N2 kirminų išgyvenimui oksidacinio streso metu. Gydymas H2O2 (5 mM) sukėlė 75 proc. mirtį kontrolinėje grupėje, o bendras gydymas 50 µg/mL ir didesnėmis GLE koncentracijomis buvo susijęs su dideliu išgyvenamumu (1A pav.). Iš ištirtų GLE koncentracijų 100 µg/mL ir 200 µg/mL buvo susiję su didžiausiais išgyvenamumo rodikliais (atitinkamai 82,0 proc. ir 88,2 proc.). Todėl šios dvi koncentracijos buvo naudojamos vėlesniuose eksperimentuose. Norint įvertinti antioksidacinį GLE poveikį in vivo, laukinio tipo nematoduose buvo matuojamas intracelulinis ROS lygis, naudojant 2',7'-dichlorodihidroflfluoresceino diacetatą (H2DCF-DA), gerai žinomą fluorescencinį zondą, skirtą tarpląstelinei ROS gamybai nustatyti. Buvo pastebėtas reikšmingas fluorescencijos intensyvumo sumažėjimas GLE gydytose grupėse, palyginti su negydytomis grupėmis (1B pav.), patvirtinantis GLE antioksidacines savybes.

2.3. Gydymas GLE sumažino MPP plius sukelto DA neurotoksiškumo per DAF-16 mirtingumą C. Elegans C. elegans turi 8 DA neuronus [8]. Selektyvi šių DA neuronų degeneracija buvo įvertinta po MPP plus poveikio. Laukinio tipo N2 kirminų gydymas 0,75 mM MPP plius žymiai sumažino išgyvenamumą (2 pav.). Tačiau gydymas kartu su GLE žymiai padidino kirminų išgyvenamumą. Buvo ištirtas GLE gydymo poveikis daf{12}} mutantinėms kirmėlėms. Kaip parodyta 3 paveiksle ir 2 lentelėje, gydymas GLE nepadidino šių kirminų išgyvenamumo po MPP plus poveikio, palyginti su kontroline grupe. Šie rezultatai rodo, kad DAF{15}} gali būti reikalingas tarpininkaujant GLE neuroprotekciniam poveikiui C. elegans. Po to, siekiant nustatyti, ar DAF-2 buvo susijęs su pastebėtu neuroprotekciniu poveikiu, buvo panaudota DAF-2 nefunkcionuojanti mutantinė padermė CB1370. Kaip parodyta 4 paveiksle ir 3 lentelėje, daf-2 mutantinių kirminų, gydytų GLE, vidutinis ir maksimalus išgyvenamumas žymiai padidėjo.

2.4. GLE poveikis DAF{2}} lokalizacijai

Įrodyta, kad DAF{0}} aktyvaciją reguliuoja jo branduolio kaupimasis [12]. Vėliau ištyrėme, ar GLE gali sukelti DAF-16 branduolinį kaupimąsi transgeninėje padermėje TJ356, kuri išreiškia DAF-16::GFP sulietą baltymą. Rezultatai parodė, kad po 48 valandų inkubacijos su 100 µg/mL GLE DAF-16 žalios fluorescencijos intensyvumas branduolyje žymiai padidėjo, palyginti su neapdorotomis grupėmis (5 pav.).

2.5. Fitocheminis apibūdinimas GLE

LC-MS buvo atlikta fitocheminių medžiagų profiliavimui GLE, o jo rezultatai pateikti paveiksle6. Chromatografinės smailės buvo nustatytos lyginant MS duomenis su duomenų bazėmis, pagrįstomis molekulinių jonų smailių m/z reikšmių paieška. teigiamas režimas [M plius H]pliusas. Todėl miricetinas, kumestrinas, chlorogeno rūgštis ir hesperidinas buvo aptikti kaip pagrindiniai junginiai (lentelė4).

3. Diskusija

Augalų ekstraktai yra turtingas natūralių biologiškai aktyvių junginių šaltinis. Daugelyje tyrimų buvo įvertinti augalų ekstraktai, naudojami Pietryčių Azijos šalyse, įskaitant Tailandą, kur šie ekstraktai yra liaudies medicinos komponentai [13,14]. Šiame tyrime buvo atrinkti 20 valgomųjų augalų lapų ekstraktai iš Tailando, o G. littorale buvo atrinktas tolesniam tyrimui, nes jame buvo nustatytas didelis fenolio kiekis, flflavonoidų kiekis ir radikalus sulaikantis aktyvumas. Keliais tyrimais tirtos įvairios Glochidion genties rūšys [15–19]; tačiau yra nedaug tyrimų apie G. littorale funkcines savybes ir sudedamąsias dalis. Mūsų duomenys parodė, kad GLE apsaugojo C. elegans nuo H2O2-sukeliamo oksidacinio streso sumažindama tarpląstelinį ROS kaupimąsi. Taip galėjo nutikti dėl didelio fenolinių junginių, tokių kaip flavonoidai, kiekio, kurie, kaip žinoma, turi stiprų antioksidacinį aktyvumą [20]. Šie rezultatai yra panašūs į tuos, kuriuos gavo Duangjan ir kt. (2019), kurie parodė, kad G. zeylanicum lapų ekstraktai gali apsaugoti C. elegans nuo oksidacinio streso [21]. Insulino/insulino tipo signalizacijos (IIS) kelias reguliuoja C. elegans augimą, reagavimą į stresą ir ilgaamžiškumą [22,23]. Mes nustatėme, kad daf-16 null mutantas C. elegans, apdorotas GLE, buvo jautrus oksidaciniam stresui. Šis rezultatas rodo, kad antioksidacinis GLE poveikis mažinant nematodų oksidacinį stresą gali būti susijęs ne tik su radikalų šalinimo veikla, bet ir su DAF-16 transkripcijos faktoriaus reguliavimu.

Buvo ištirtas apsauginis GLE poveikis nuo MPP plius sukelto toksiškumo C. elegans. Nematodų DA neuronai paima MPP plius daugiausia per didelio afiniteto DA transporterius, o tai panašiai stebima žinduoliams. MPP plius kaupimasis neuronuose inaktyvuoja kvėpavimo grandinės mitochondrijų kompleksą I ir sukelia ląstelių mirtį [24–27]. Nustatyta, kad gydymas GLE žymiai sumažino laukinių kirminų mirtingumą, susijusį su MPP ir gydymu. IIS kelią moduliuoja į insuliną panašūs peptidai per DAF-2 receptorių C. elegans [28]. Įprastomis sąlygomis IIS kelias slopina DAF-16 fosforilinimą ir neleidžia jo branduoliniam perkėlimui. Daf-2 nulinių mutantų atveju GLE gydyta grupė išgyveno ilgiau nei kontrolinė grupė. Priešingai, kontrolinės grupės ir GLE gydytos grupės, kurioje yra daf-16 null mutantinių kirminų, išgyvenamumo skirtumo nepastebėta. Yra žinoma, kad sumažėjęs DAF-2 signalų perdavimas palengvina DAF-16 patekimą į branduolį, kur jis gali sureguliuoti tikslinių genų ekspresiją ir kontroliuoti atsparumą stresui bei ilgaamžiškumą [29]. Tai gali paaiškinti, kodėl daf-2 mutantinių kirminų, gydytų GLE, išgyvenamumas buvo palyginti didesnis. Be to, naudojant transgeninį TJ356 DAF-16::GFPC, buvo pastebėtas padidėjęs DAF-16 branduolių kaupimasis kirmėlėse, gydytose GLE. elegantiškas. Bendrai šie rezultatai parodė, kad GLE galėjo turėti neuroprotekcinį poveikį suaktyvinus DAF{20}}.

4.3. Bendras fenolio kiekis Bendram fenolio kiekiui nustatyti buvo naudojamas Folin-Ciocalteu metodas. Trumpai tariant, 11,4 µl ekstrakto (1 mg/ml) buvo sumaišyta su 227,3 µL 2 procentų (m/v) Na2CO3 tirpalo, o po to mišiniui leista stovėti kambario temperatūroje 2 minutes. Pridėjus 11,4 µl 10 procentų (t/v) Folin-Ciocalteu reagento. Inkubavimas tamsoje buvo atliktas 30 min. Vėliau absorbcija buvo išmatuota esant 750 nm, naudojant mikroplokštelių skaitytuvą (Nivo 3F Multimode Plate Reader, PerkinElmer, Waltham, MA, JAV). Galio rūgštis buvo naudojama kaip kalibravimo kreivės standartas. Bendras fenolio kiekis buvo išreikštas galo rūgšties ekvivalentais (mg galo rūgšties ekvivalentas/g augalo ekstrakto).

4.4. Bendras flavonoidų kiekis Bendram flavonoidų kiekiui matuoti buvo naudojamas aliuminio chlorido kolorimetrinis metodas. Trumpai tariant, 25 µL ekstrakto (2 mg/mL) buvo sumaišyti su 7,5 µL 5 procentų (m/v) NaNO2 tirpalo ir 152,5 µL distiliuoto vandens. Po 6 minučių buvo pridėta 15 µl 10 procentų (m/v) AlCl3 tirpalo ir leidžiama pastovėti 5 minutes. Tada į mišinį įpilama 50 µl 1 M NaOH tirpalo. Vėliau mišinys buvo inkubuojamas tamsoje 15 minučių, o absorbcija buvo matuojama esant 510 nm, naudojant mikroplokštelių skaitytuvą. Bendras flavonoidų kiekis buvo apskaičiuotas generuojant kalibravimo kreivę naudojant kvercetiną kaip standartą, o rezultatai išreikšti kvercetino ekvivalentu (mg kvercetino ekvivalentas/g augalo ekstrakto).4.5. Laisvųjų radikalų šalinimo aktyvumas Gebėjimas sunaikinti laisvuosius radikalus buvo įvertintas naudojant DPPH tyrimus [32]. Trumpai tariant, 100 µL ekstrakto (1 mg/ml) buvo sumaišyta su 100 µL DPPH tirpalo. Po 30 minučių absorbcija buvo išmatuota esant 517 nm, naudojant mikroplokštelių skaitytuvą. Rezultatai buvo išreikšti DPPH radikalų slopinimo procentais.

4.10. DAF-16Transgeninio C. elegans TJ356, ekspresuojančio DAF-16-GFP sulietą baltymą, branduolinė lokalizacija buvo naudojama DAF-16 tarpląsteliniam pasiskirstymui ištirti. L1 stadijos nematodai buvo gydomi GLE 48 valandas 2{{30}} ◦C temperatūroje. Tada kirminai buvo perkelti į 2 procentų agarozės pagalvėlę ant stiklelio ir anestezuoti į agarozės pagalvėlę įlašinant vieną lašą (apie 2{34}} µL) 25 µM natrio azido. GFP ekspresija buvo tiriama naudojant fluorescencinę mikroskopiją (EVOSflfl; Advanced Microscopy Group, Bothell, WA, JAV). Vidutinis DAF-16 fluorescencijos intensyvumas branduoliuose buvo analizuojamas naudojant Image J programinę įrangą (Nacionalinis sveikatos institutas, Bethesda, MD, JAV). 4.11. Fitocheminis profiliavimas naudojant LC-MSLapų ekstraktas buvo analizuojamas naudojant LCMS{16}} (Shimadzu). Masės spektrai buvo gauti per m/z 50–1000 diapazoną naudojant Q3 nuskaitymo režimą. Tirpalas buvo įšvirkščiamas į Inertsil ODS-3 (250 × 2,1 mm, 5 µm, GL Sciences, Tokijas, Japonija) kolonėlės temperatūroje 40 ◦C, naudojant (A) 0,1 procento skruzdžių rūgšties gradientą ir (B). ) acetonitrilas/vanduo (80/20), kuriame yra 0,1 proc. skruzdžių rūgšties. Naudotas toks gradientas, kurio srautas 0,2 ml/min.: 0–100 procentų B (0–45 min.), 100 procentų B (45–50 min.) ir 0 procentų B (50–60 min.). Junginiai buvo tariamai identifikuoti suderinus eksperimentines m / z vertes su teorinių apskaičiuotų m / z reikšmių biblioteka duomenų bazėse, įskaitant žmogaus metabolizmo duomenų bazę ir METLIN duomenų bazę. 4.12. Statistinė analizė Kiekvienos grupės duomenys buvo išreikšti kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis. Reikšmingas skirtumas tarp dviejų grupių buvo įvertintas naudojant t-testą, o skirtumas tarp trijų ir daugiau grupių buvo įvertintas naudojant vienpusį ANOVA, po kurio buvo atliktas Tukey post-hoc palyginimo testas. Statistinis reikšmingumas buvo nustatytas ties p < 0,001="" ir="" p="">< 0,0001.="" gyvenimo="" trukmės="" tyrimams="" c.="" elegans="" išgyvenamumas="" buvo="" nubraižytas="" naudojant="" kaplan-meier="" išgyvenimo="" kreives="" ir="" analizuojamas="" log-rank="" testais="" naudojant="" graphpad="" prism="" programinę="" įrangą="" (9.01="" versija;="" graphpad="" software,="" san="" diego,="" ca,="">

Abdel Fawaz Bagoudou 1, Yifeng Zheng 2, Masahiro Nakabayashi 2, Saroat Rawdkuen 3, Hyun-Young Park 4, Dhiraj A. Vattem 4,5, Kenji Sato 6, Soichiro Nakamura 1 ir Shigeru Katayama 1,2,*

1 Medicinos, mokslo ir technologijų aukštoji mokykla, Shinshu universitetas, 8304 Minamiminowa, Kamiina, Nagano 399-4598, Japonija;

2 Shinshu universiteto Biomedicinos mokslų institutas, 8304 Minamiminowa, Kamiina, Nagano 399-4598, Japonija;

3 School of Agro-Industry, Mae Fah Luang University, 333 Moo 1, Thasud, Muang, Chiang Rai 57100, Tailandas;saroat@mfu.ac.th

4 Edisono biotechnologijos institutas, Konneker Research Laboratories, Ohajo universitetas, Atėnai, OH 45701, JAV;

5 Sveikatos mokslų ir profesijų koledžas, Ohajo universitetas, Atėnai, OH 45701, JAV

6 Graduate School of Agriculture, Kioto universitetas, Kioto 606-8502, Japonija;

Autoriaus indėlis:

Autoriaus indėlis: konceptualizavimas, SR, DAV ir SK; tyrimas, AFB, YZ, MN, SR, H.-YP, DAV ir KS; rašymas – pirminio projekto rengimas, AFB; rašymas – peržiūra ir redagavimas, SK; priežiūra, SN Visi autoriai perskaitė ir sutiko su paskelbta rankraščio versija.
Finansavimas: Šis tyrimas negavo išorės finansavimo.
Institucinės peržiūros tarybos pareiškimas: Netaikoma.
Informuoto sutikimo pareiškimas: Netaikoma.
Duomenų prieinamumo pareiškimas: duomenis gali gauti atitinkamas autorius, pateikęs pagrįstą prašymą.
Interesų konfliktai: autoriai pareiškia, kad nėra interesų konflikto.
Mėginių prieinamumas: junginių pavyzdžių iš autorių nėra

Nuorodos

1 Pohl, F.; Lin, PKT Antioksidacinių savybių turinčių augalinių natūralių produktų ir augalų ekstraktų galimas panaudojimas neurodegeneracinių ligų profilaktikai/gydymui: in vitro, in vivo ir klinikiniai tyrimai. Molecules 2018, 23, 3283. [CrossRef] [PubMed]

2. Kimas, GH; Kim, JE; Rhie, SJ; Yoon, S. Oksidacinio streso vaidmuo neurodegeneracinėse ligose. Exp. Neurobiol. 2015, 24, 325–340. [CrossRef] [PubMed]

3. Lu, X.-l.; Yao, X.-l.; Liu, Z.; Zhang, H.; Li, W.; Li, Z.; Wang, G.-L.; Pang, J.; Linas, Y.; Xu, Z. Apsauginis ksiloketalio B poveikis nuo MPP plius sukelto neurotoksiškumo Caenorhabditis elegans ir PC12 ląstelėse. Brain Res. 2010, 1332, 110–119. [CrossRef]

4. Žoliapjovė, PA; Bennett, JP, Jr. Kibridinis atsitiktinės Parkinsono ligos modelis. Exp. Neurol. 2009, 218, 320–325. [CrossRef]

5. Cheon, S.-M.; Jang, I.; Lee, MH; Kimas, DK; Jeonas, H.; Cha, DS Sorbus alnifolia apsaugo nuo dopaminerginės neurodegeneracijos Caenorhabditis elegans. Pharm. Biol. 2016, 55, 481–486. [CrossRef]

6. Schmidt, N.; Ferger, B. Parkinsono ligos MPTP modelio neurocheminiai radiniai. J. Neuroninis perdavimas. 2001, 108, 1263–1282. [CrossRef] [PubMed]

7. Haringtonas, A.; Yacoubian, TA; Slone, SR; Caldwell, K.; Caldwell, G. VPS{1}}tarpininkaujamos neuroprotekcijos, sergant Caenorhabditis elegans, funkcinė analizė ir Parkinsono ligos žinduolių modeliai. J. Neurosci. 2012, 32, 2142–2153. [CrossRef] [PubMed]

8. Fu, R.-H.; Harn, H.-J.; Liu, S.-P.; Chen, C.-S.; Chang, W.-L.; Chen, Y.-M.; Huang, J.-E.; Li, R.-J.; Tsai, S.-Y.; Hung, H.-S.; ir kt. n-butilideneftalidas apsaugo nuo dopaminerginės neuronų degeneracijos ir -sinukleino kaupimosi Caenorhabditis elegans Parkinsono ligos modeliuose. PLOS ONE 2014, 9, e85305. [CrossRef]

9. Jadiya, P.; Chanas, A.; Sammi, SR; Kauras, S.; Mir, SS; Nazir, A. Bacopa monnieri antiparkinsoninis poveikis: transgeninių ir farmakologinių Caenorhabditis elegans Parkinsono ligos modelių įžvalgos. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 2011, 413, 605–610. [CrossRef] 10. Andrade, JMDM; Fasolo, D. Polifenolio antioksidantai iš natūralių šaltinių ir indėlis į sveikatos stiprinimą. Polifenoliuose žmonių sveikatai ir ligoms; Elsevier BV: Amsterdamas, Nyderlandai, 2014 m.; 253–265 p.

11. Hsu, A.-L.; Murphy, CT; Kenyon, C. Senėjimo ir su amžiumi susijusių ligų reguliavimas pagal DAF-16 ir šilumos šoko faktorių. Mokslas 2003, 300, 1142–1145. [CrossRef]

12. Hendersonas, ST; Johnson, TE daf-16 integruoja vystymosi ir aplinkos indėlius, kad tarpininkautų nematodo Caenorhabditis elegans senėjimui. Curr. Biol. 2001, 11, 1975–1980. [CrossRef]

13. Hutadilok-Towatana, N.; Chaiyamutti, P.; Panthong, K.; Mahabusarakam, W.; Rukachaisirikul, V. Kai kurių Tailando liaudies medicinoje naudojamų augalų antioksidacinė ir laisvųjų radikalų šalinimo veikla. Pharm. Biol. 2006, 44, 221–228. [CrossRef]

14. Stewart, P.; Boonsiri, P.; Putongas, S.; Rojpibulstit, P. Antioksidacinis aktyvumas ir ultrastruktūriniai skrandžio vėžio ląstelių linijų pokyčiai, sukelti šiaurės rytų Tailando valgomųjų liaudies augalų ekstraktų. BMC papildymas. Altern. Med. 2013, 13, 60. [CrossRef]

15. Hui, W.; Lee, W.; Ng, K.; Chan, C. Triterpenoidų ir steroidų atsiradimas trijose Glochidion rūšyse. Fitochemija 1970, 9, 1099–1102. [CrossRef]

16. Takeda, Y.; Mima, C.; Masuda, T.; Hirata, E.; Takushi, A.; Otsuka, H. Glohidiobosidas, (7S,8R)-dihidrodehidrodikoniferilo alkoholio gliukozidas iš glochidia obovatum lapų. Fitochemija 1998, 49, 2137–2139. [CrossRef]

17. Zhang, X.; Chen, J.; Gao, K. Cheminės sudedamosios dalys iš Glochidion wrightii Benth. Biochem. Syst. Ecol. 2012, 45, 7–11. [CrossRef]

18. Tianas, J.-M.; Fu, X.-Y.; Zhang, Q.; Jis, H.-P.; Gao, J.-M.; Hao, X.-J. Cheminės sudedamosios dalys iš Glochidion assamicum. Biochem. Syst. Ecol. 2013, 48, 288–292. [CrossRef]

19. Kongkachuichai, R.; Charoensiri, R.; Yakoh, K.; Kringkasemsee, A.; Insung, P. Vietinių daržovių iš Pietų Tailando maistinė vertė ir antioksidantų kiekis. Food Chem. 2015, 173, 838–846. [CrossRef]

20. Pietta, P.-G. Flavonoidai kaip antioksidantai. J. Nat. Prod. 2000, 63, 1035–1042. [CrossRef] [PubMed]

21. Duangjan, C.; Rangsinth, P.; Gu, X.; Zhang, S.; Wink, M.; Tencomnao, T. Glochidion zeylanicum lapų ekstraktai pasižymi gyvenimo trukmę prailginančiomis ir atsparumo oksidaciniam stresui savybėmis Caenorhabditis elegans per DAF-16/FoxO ir SKN-1/Nrf-2 signalizacijos kelius. Fitomedicina, 2019, 64, 153061. [CrossRef]

22. Jensenas, VL; Gallo, M.; Riddle, DL DAF{1}} taikiniai, susiję su Caenorhabditis elegans suaugusiųjų ilgaamžiškumu ir dauer formavimu. Exp. Gerontol. 2006, 41, 922–927. [CrossRef] [PubMed]

23. Daitoku, H.; Fukamizu, A. FOXO Transkripcijos veiksniai ilgaamžiškumo reguliavimo tinkluose. J. Biochem. 2007, 141, 769–774. [CrossRef]

24. Lakso, M.; Vartiainen, S.; Moilanenas, A.-M.; Sirviö, J.; Tomas, JH; Nass, R.; Blakely, RD; Wong, G. Dopaminerginis neuronų praradimas ir motoriniai trūkumai sergant Caenorhabditis elegans, per daug išreiškiantys žmogaus -sinukleiną. J. Neurochem. 2004, 86, 165–172. [CrossRef] [PubMed]

25. Nass, R.; salė, DH; Milleris, DM; Blakely, RD Neurotoksinų sukelta dopamino neuronų degeneracija Caenorhabditis elegans. Proc. Natl. Akad. Sci. JAV, 2002, 99, 3264–3269. [CrossRef]

26. Wang, Y.-M.; Pu, P.; Le, W.-D. ATP išeikvojimas yra pagrindinė MPP plius sukeltos dopamino neuronų mirties ir kirminų mirtingumo priežastis -sinukleino transgeniniame C. elegans. Neurosci. Bull. 2007, 23, 329–335. [CrossRef]

27. Braungartas, E.; Gerlachas, M.; Riedereris, P.; Baumeisteris, R.; Hoener, M. Caenorhabditis elegans MPP plus Parkinsono ligos modelis didelio našumo vaistų patikrai. Neurodegeneras. Dis. 2004, 1, 175–183. [CrossRef]

28. Panovskis, SH; Dillin, A. Jaunystės signalai: endokrininis senėjimo reguliavimas sergant Caenorhabditis elegans. Endokrinolio tendencijos. Metab. 2009, 20, 259–264. [CrossRef]