Herba Cistanche ekstraktas pagerina mitochondrijų ATP susidarymą žiurkių širdyse ir H9c2 ląstelėse
Mar 04, 2022
Susisiekite: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com
Hoi Yan Leung ir Kam Ming Ko
Cituoti šį straipsnį: Hoi Yan Leung ir Kam Ming Ko (2008) Herba Cistanche ekstraktas pagerina mitochondrijų ATP susidarymą žiurkių širdyse ir H9c2 ląstelėse, Pharmaceutical Biology, 46:6, 418-424, DOI: 10.1080/13882020088
Abstraktus
Norint ištirti Herbal Cistanche [džiovintas visas Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae) augalas] farmakologinį pagrindą kinų medicinoje, Herba Cistanche metanolio ekstrakto poveikis mitochondrijų ATP generavimo pajėgumams. ištirta naudojant ex vivo žiurkės širdies modelį ir in situ H9c2 ląstelių tyrimą. Gydymas Herba Cistanche ekstraktu padidino miokardo mitochondrijų ATP generavimo pajėgumą priklausomai nuo dozės žiurkėms, įvertinus matavimus in vitro. ATP generavimo pajėgumo stimuliavimas buvo susijęs su lygiagrečiu mitochondrijų elektronų transportavimo padidėjimu, kurį palaiko piruvatas, bet ne sukcinatas. Gydymas Herba Cistanche taip pat padidino miokardo mitochondrijų I ir III komplekso aktyvumą, o I komplekso aktyvumo stimuliavimo mastas buvo didesnis. Gydymas Herba Cistanche padidino nuo dozės ir laiko priklausomą mitochondrijų ATP generavimo pajėgumą H9c2 ląstelėse. Rezultatai rodo, kad gydymas Herba Cistanche gali padidinti mitochondrijų ATP susidarymą žiurkių širdyse ex vivo ir H9c2 ląstelėse in situ, galbūt sustiprindamas oksidacinį fosforilinimą.
Raktiniai žodžiai:ATP, Cistanche deserticola, H9c2 ląstelės, širdis, mitochondrijos.
Įvadas
"Yang invigoration", kuris įkūnija bendrą kūno funkcijų stiprinimą kinų medicinoje, apima energijos naudojimą įvairiems biocheminiams procesams valdyti. Šiuo atžvilgiu ATP, kuri yra universali energijos valiuta, skatinanti ląstelių funkciją, daugiausia susidaro per oksidacinį fosforilinimą mitochondrijose. Mes teigiame, kad "Yang gaivinančios" žolės turi savybę padidinti mitochondrijų ATP generavimo pajėgumus (Ko ir kt., 2004). Tai patvirtina naujausias mūsų atradimas, kad „Yang gaivinančios“, bet ne „Yin maitinančios“ Kinijos tonizuojančios žolės gali padidinti miokardo ATP generavimo pajėgumą pelių širdyse ex vivo (Ko ir kt., 2006). Herba Cistanche, išdžiovintas visas parazitinis Cistanche deserticola YC Ma (Orobanchaceae) augalas (išskyrus žiedą), tradicinėje kinų medicinoje klasifikuojamas kaip „jangą gaivinantis“ tonizuojantis augalas (Chen, 1998) ir yra populiariausias. sudedamoji dalis daugelyje Kinijos patentuotų preparatų, naudojamų Yang-gaivinti“. Kinijoje ir Japonijoje „Herba Cistanche“ plačiai naudojamas daugelio Yang trūkumo simptomų gydymui. Farmakologiniai tyrimai parodė, kad Herba Cistanche gali sunaikinti laisvuosius radikalus (Xiong ir kt., 1996), sukelti raminamąjį (Lu, 1998), senėjimą (Lee ir kt., 1990), antinociceptinį ir priešuždegiminį poveikį (Lin ir kt., 2002). ) ir sustiprinti imuninę funkciją (Wu ir kt., 2005). Pagrindinė Herba Cistanche veiklioji medžiaga yra feniletanoidiniai glikozidai (Ouyang ir kt., 2003), kurie, kaip nustatyta, turi antibakterinių, antistresinių ir antioksidacinių savybių (Xiong ir kt., 1998), taip pat antiapoptozinį poveikį auginamiems augalams. neuronai (Tian ir Pu, 2005). Šiame tyrime, siekiant ištirti Yang stimuliuojančio Herba Cistanche veikimo farmakologinį pagrindą, buvo ištirtas gydymo Herba Cistanche poveikis ATP generavimo pajėgumui mitochondrijose, išskirtose iš žiurkių širdžių ex vivo ir kultivuotų H9c2 kardiomiocitų in situ. Norint ištirti biocheminį mechanizmą, kuriuo grindžiamas ATP generavimą didinantis veiksmas, žiurkių širdyse taip pat buvo ištirtas gydymo Herba Cistanche poveikis mitochondrijų elektronų transportavimui ir sudėtingai I – IV veiklai.
Cistanche deserticola ekstraktas
Medžiagos ir metodai
Cheminės medžiagos, ląstelių kultūra ir augalinės medžiagos ATP, ADP ir 3-[4,5-dimetiltiozol-2-il]-2,5-difeniltetrazolio bromidas ( MTT) buvo įsigyti iš Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, JAV). Liuciferazės tirpalas (ATPlite) buvo gautas iš PerkinElmer (Bostonas, MA, JAV). Dulbecco modifikuota Eagle terpė (DMEM) ir vaisiaus galvijų serumas (FBS) buvo įsigyti iš GIBCO BRL Life Technologies (Grand Island, NY, JAV). H9c2 ląstelių linija buvo įsigyta iš ATTC (Rockville, MD, JAV). Herba Cistanche tiekė vietinis žolelių pardavėjas (Lee Hoong Kee). Vaistažolės autentiškumą patvirtino tiekėjas, o kupono pavyzdys (HKUSTY00301) buvo deponuotas Honkongo mokslo ir technologijų universiteto (HKUST) Biochemijos katedroje.
Žolelių ekstrahavimas
Herba Cistanche (100 g) buvo supjaustytas mažais gabalėliais ir ekstrahuojamas kaitinant su grįžtamu šaldytuvu 300 ml metanolio.
65°C temperatūroje 2 val. Procedūra buvo pakartota du kartus. Sujungtas ekstraktas buvo džiovinamas išgarinant tirpiklį sumažintame slėgyje ir buvo gautas Herba Cistanche metanolio ekstraktas, kurio išeiga buvo 39 procentai (m/m). Cheminė analizė parodė, kad metanolio Herba Cistanche ekstrakte yra 1,62 % (m/m), 0.08 % , 0,15 koncentracijos saponinų, flavonoidų, lignanų ir polisacharidų. ir atitinkamai 75,6 proc.
Gyvūnų priežiūra
Suaugę Sprague-Dawley žiurkių patinai (8–10 savaičių; 250–300 g) buvo laikomi 12-h tamsos/šviesos ciklu oro/drėgmės kontroliuojamoje patalpoje maždaug 22 °C temperatūroje ir leista valgyti ir vandenį ad libitum. Gyvūnų priežiūros įstaigose
HKUST. Eksperimentinius protokolus patvirtino HKUST tyrimų praktikos komitetas.
Gydymas vaistais
Gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į grupes, kurių kiekvienoje buvo nuo penkių iki šešių gyvūnų. Gydymo grupėse žiurkėms į skrandį buvo duodama Herba Cistanche metanolio ekstrakto (ištirpinto/suspenduoto vandenyje) didinant paros dozes ({{0}},031–0,5 g/kg) 3 dienas. Kontroliniai gyvūnai gavo tik vandens. Praėjus dvidešimt keturioms valandoms po paskutinės dozės, širdis buvo paimta iš fenobarbitaliu anestezuotų gyvūnų ir atlikta biocheminė analizė.
Mitochondrijų frakcijų paruošimas ir ATP generavimo pajėgumo (ATP-GC) matavimas ex vivo
Širdies kairiojo skilvelio audinių mėginiai buvo išpjauti ir nuplauti lediniu izotoniniu buferiu (0.32 M sacharozė, 1 mM EDTA, 50 mM Tris/HCl, pH 7,4). Širdies mitochondrijų frakcijos buvo paruoštos diferenciniu centrifugavimu izotoniniame buferyje 4 °C temperatūroje. 10 procentų (m/v) širdies homogenatas buvo paruoštas homogenizuojant susmulkintą skilvelio audinį tefloninio stiklo homogenizatoriumi esant 4000 aps./min., 20–30 pilnų smūgių. Homogenatas buvo centrifuguojamas 600 g 10 minučių, kad būtų pašalinti branduoliai ir ląstelių nuolaužos. Tada supernatantas buvo centrifuguojamas esant 8000 g 30 minučių, kad nusodintų mitochondrijas (Evan, 1992). Granulės buvo resuspenduotos 1 ml izotoninio buferio ir atstatytos mitochondrijų frakcijos. Negydytų gyvūnų mitochondrijų ATP-GC buvo išmatuotas Leung ir kt. metodu. (2005).
Mitochondrijų elektronų transportavimo matavimas
Elektronų pernašos matavimas izoliuotose mitochondrijose, pagrįstas MTT mažinimu, buvo atliktas taip, kaip aprašyta Cohen ir kt. (1997). Mitochondrijos buvo paruoštos esant 1 mg/ml baltymų koncentracijai su inkubaciniu buferiu (250 mM sacharozės, 50 mM HEPES, 10 mM KH2PO4, 2 mM MgCl2, 1 mM EGTA, pH 7,4). . Mitochondrijų alikvotinė dalis (40 µL) buvo sumaišyta su 100 µL 15 mM piruvato arba 0,5 mM sukcinato ir 0,42 mg/ml MTT. Reakcijos mišinys buvo inkubuojamas 37 °C temperatūroje 10 min., švelniai purtant. Po inkubacijos reakcijos mišinys buvo nutrauktas pridedant 100 µL lizės buferio (10 %, m/t, natrio dodecilsulfatas ir 45 % dimetilformamidas, sureguliuotas iki pH 4,7 ledine acto rūgštimi). Po 5 minučių pastovėjimo reakcijos mišinio absorbcijos rodmenys buvo paimti naudojant mikrotitro plokštelės skaitytuvą (Bio-Rad, Hercules, CA, JAV) ir pranešta kaip skirtumas tarp 570 nm ir 630 nm. Duomenys buvo išreikšti procentais nuo kontrolinės (ty Herba Cistanche negydytos) grupės vidutinės vertės.
Ląstelių kultūros
H9c2 ląstelės, nuolatinė ląstelių linija, gauta iš širdies mioblastų (Hescheler ir kt., 1991), buvo kultivuojamos kaip vienasluoksnės DMEM, papildytos 10 procentų (t/v) FBS. Terpėje buvo gliukozės (4,5 g/l) ir glutamino (4,5 mM), papildyto NaHCO3 (17 mM), penicilinu (100 TV/ml) ir streptomicinu (100 µg/ml). Visos ląstelės buvo auginamos 5 procentų (v/v) CO2 atmosferoje, 37 °C temperatūroje. Terpė buvo pakeista šviežia terpe kas 2 ar 3 dienas. Ląstelių atsargos buvo auginamos 75 cm2 auginimo kolboje ir suskaidomos prieš susiliejimą subkultūros santykiu 1:10. ATP-GC tyrimui H9c2 ląstelės buvo pasėtos 25 104 ląstelių/šulinėlių tankiu į 24-šulinėlių plokštelę. Po ląstelių pritvirtinimo terpėje buvo užpiltas Herba Cistanche ekstraktas (ištirpintas fosfatiniu buferiniu tirpalu; PBS), o ląstelės buvo inkubuojamos ilgesnį laiką (2–16 valandų). Kontrolinėms (neapdorotoms) ląstelėms buvo duodama tik PBS.
ATP-GC matavimas in situ
Po nurodytų inkubacijos su Herba Cistanche ekstraktu didėjančios koncentracijos laikotarpiu (5{{10}}–300 µg/mL), buvo atliktas ATP-GC tyrimas. Terpė buvo išsiurbta ir ląstelės buvo apdorotos digitoninu (50 µg/ml) inkubaciniame buferyje (120 mM KCl, 5 mM KH2PO4, 2 mM EGTA, 10 mM HEPES, 0,1 mM MgCl2, 0,5 proc. BSA, pH 7,4). min 37°C temperatūroje. Įsiurbus digitoniną, į ląsteles buvo pridėta glutamato (5 mM), malato (5 mM) ir ADP (60 µM), kad susidarytų mitochondrijų ATP, kuri buvo stebima didėjančiais laiko intervalais nuo 0 iki 15 min. Reakcija buvo nutraukta pridedant 60 µL perchloro rūgšties (30 proc., m/t), o reakcijos mišiniai centrifuguojami 600 g 10 min 4 °C temperatūroje. Alikvotinė dalis (120 µL) supernatanto buvo sumaišyta su 90 µL 1,4 M KHCO3 neutralizavimui. Mišiniai vėl centrifuguojami 600 g 4 °C temperatūroje, o supernatantuose buvo matuojamas ATP kiekis, kaip aprašyta anksčiau. Neapdorotų ląstelių ATP-GC buvo įvertintas apskaičiuojant plotą po grafiko kreive (AUC1), nubraižant susidariusį ATP (nmol/mg baltymo) pagal laiką (0–15 min.) ir išreikštą savavališkais vienetais. Herba Cistanche apdorotoms ląstelėms didėjančios inkubacijos trukmės (3, 5, 7, 10 ir 15 min.) AUC1 vertės buvo normalizuotos iki atitinkamos vidutinės kontrolinės vertės iš neapdorotų mėginių ir išreikštos kaip kontrolės procentas. Tada buvo apskaičiuotas plotas po kreive (AUC2) diagramoje, kurioje vaizduojamos procentinės kontrolinės vertės pagal inkubacijos laiką (3–15 min.), ir išreikštas savavališkais vienetais. Herba Cistanche gydytų grupių duomenys buvo išreikšti kontrolinės grupės procentais iš lygties:
[AUC2 (HerbaCistanche – apdorota) / AUC2 (neapdorota)] × 100 proc.
I–IV komplekso ir citrato sintazės aktyvumo matavimai
Mitochondrijų elektronų transportavimo grandinės (ETC) komplekso I–III aktyvumas buvo matuojamas spektrofotometriniais metodais, naudojant kompleksui specifinius substratus (NADH – kompleksui I, sukcinatą – kompleksui II ir decilubichinolį – kompleksui III), kaip aprašyta (Grad ir Lemire, 2004; Hsu ir kt. al., 2005; Mark ir kt., 2001). Kompleksinis IV aktyvumas buvo matuojamas naudojant Sigma citochromo c oksidazės tyrimo rinkinį. Mitochondrijų citrato sintazės aktyvumas buvo matuojamas Srere (1969) metodu.
Baltymų tyrimas
Baltymų koncentracijos mitochondrijų frakcijose ir ląstelių lizatuose buvo nustatytos naudojant BioRad baltymų tyrimo rinkinį, standartiškai naudojant galvijų serumo albuminą ({{0}},038–0,600 mg/ml).
Statistinė analizė
Visi duomenys buvo išreikšti kaip vidutinė standartinė vidurkio paklaida (SEM). Jie buvo analizuojami taikant vienpusę dispersinę analizę (ANOVA). Buvo atliktas daugkartinis post hoc palyginimas su LSD. P reikšmės<0.05 were="" regarded="" as="" statistically="">
Rezultatai
Gydymo Herba Cistanche poveikis žiurkių miokardo mitochondrijų ATP-GC
Kaip parodyta 1 paveiksle, gydymas Herba Cistanche ekstraktu dozėmis iki 0,5 g/kg padidino žiurkių miokardo mitochondrijų ATP-GC priklausomai nuo dozės, o stimuliacijos laipsnis buvo 89 proc. vartojant 0,5 g/kg dozę.
Herba Cistanche gydymo poveikis mitochondrijų elektronų transportavimui žiurkių širdyse
Elektronų pernešimo mastas izoliuotose mitochondrijose buvo matuojamas stebint MTT sumažėjimą. Tyrimui naudojamas substratas buvo piruvatas arba sukcinatas. Kaip parodyta 2a paveiksle, gydymas Herba Cistanche, priklausomai nuo dozės, padidino mitochondrijų elektronų transportavimą, palaikomą piruvato, žiurkių širdyse, o optimali stimuliacija buvo stebima vartojant 0,5 g/kg dozes. Tačiau reikšmingų sukcinato palaikomo mitochondrijų elektronų pernašos masto pokyčių Herba Cistanche gydytose žiurkių širdyse neaptikta (2b pav.).
Gydymo Herba Cistanche poveikis mitochondrijų kvėpavimo kompleksų veiklai žiurkių širdyse
Kaip parodyta 3 paveiksle, gydymas Herba Cistanche optimalia 0,5 g/kg doze žymiai padidino I komplekso (34 proc.) ir III komplekso (22 proc.) aktyvumą žiurkių širdyse. Gydymas Herba Cistanche neturėjo įtakos citrato sintazės, pagrindinio trikarboksirūgšties ciklo fermento, aktyvumui (3 pav.). Western blot analizė parodė, kad gydymas Herba Cistanche neturėjo įtakos I ir III komplekso baltymų lygiui (duomenys nerodomi).
Herba Cistanche sukeltų mitochondrijų ATP-GC pokyčių H9c2 ląstelėse laikas
ATP-GC pokyčiai buvo ištirti Herba Cistanche apdorotose ląstelėse (50 ir 150 µg/mL) po 2–16 valandų inkubacijos. Kaip parodyta 4 paveiksle, gydymas Herba Cistanche padidino ATP-GC priklausomai nuo laiko ir dvifazis būdu H9c2 ląstelėse, o didžiausia stimuliacija (atitinkamai 44 procentai ir 89 procentai) buvo stebima po 8 valandų inkubacijos abiem vaisto koncentracijoms. Tada ATP-GC grįžo į neapdorotas kontrolines vertes, kai inkubacijos laikas buvo pratęstas iki 16 valandų. Stimuliacija prasidėjo anksčiau, kai ląstelės buvo apdorotos didesne koncentracija (150 µg/mL) Herba Cistanche ekstraktu.
Herba priklausomybė nuo koncentracijos
Cistanche sukeltas ATP-GC padidėjimas H9c2 ląstelėse
H9c2 ląstelės buvo apdorotos didėjančiomis koncentracijomis (50–300 µg/mL) Herba Cistanche ekstraktu 4 valandas. 5 paveiksle parodyta, kad gydymas Herba Cistanche padidino ATP-GC priklausomai nuo koncentracijos, o didžiausia stimuliacija (82 proc.) buvo stebima esant 300 µg/mL koncentracijai.
Cistanche ekstraktas padidina ATP gamybą
Diskusija
Ląstelių veiklos reguliavimas, siekiant sustiprinti kūno funkcijas, tokias kaip raumenų susitraukimas ir imuninis atsakas, skatinant Yang gaivinimą, reikalauja padidinti ATP suvartojimą, o tai savo ruožtu palaiko mitochondrijų oksidacinis fosforilinimas. Dabartiniame tyrime nustatyta, kad gydymas Herba Cistanche, priklausomai nuo dozės, padidina mitochondrijų ATP generavimo pajėgumą ex vivo žiurkių širdyse. Šis stebėjimas atitinka mūsų ankstesnę išvadą, kad tarp Yang gaivinančių kiniškų tonizuojančių žolelių gydymas Herba Cistanche sąlyginai labiau stimuliavo mitochondrijų ATP susidarymą pelių širdyse (Ko ir kt., 2006). Mitochondrijų ATP susidarymo padidėjimas buvo lygiagretus mitochondrijų elektronų transportavimo padidėjimui, kurį skatina piruvatas, bet ne sukcinatas, kaip įvertinta MTT sumažėjimu. Rezultatai, gauti atlikus mitochondrijų komplekso I–IV kinetinį matavimą, parodė, kad tiek I, tiek III kompleksų aktyvumas padidėjo Herba Cistanche gydytose širdyse, o I komplekso aktyvumo stimuliavimo mastas buvo didesnis nei komplekso III. Kadangi citrato sintazės, pagrindinio trikarboksirūgšties ciklo fermento, aktyvumas nebuvo paveiktas, mitochondrijų ATP generavimo pajėgumo padidėjimas gydant Herba Cistanche daugiausia gali būti siejamas su I ir (arba) III komplekso veiklų stimuliavimu. Didžiąją dalį širdies ATP poreikių tenkina mitochondrijos, kurios beveik visiškai priklauso nuo kompleksinio I (NADH) susieto riebalų rūgščių ir gliukozės oksidacijos (Stanley ir kt., 1997; Taegtmeyer, 1998). I kompleksas, kurio aktyvumas mažesnis nei kitų kvėpavimo kompleksų, laikomas svarbiu veiksniu reguliuojant oksidacinį fosforilinimą. Taigi I komplekso aktyvumo stimuliavimas arba slopinimas gali turėti didelės įtakos širdies energetikai. Nors Western blot analizė neatskleidė jokių šių dviejų kompleksų baltymų lygio pokyčių (duomenys nerodomi), padidėjęs fermentų aktyvumas gali atsirasti dėl baltymų tiolio būklės ir (arba) lipidų aplinkos pokyčių (Davey ir kt., 1998; Paradies). ir kt., 2004).
Cistanche žolelių ekstraktasgali sukelti ATP generavimą didinantį poveikį auginamose H9c2 ląstelėse in situ. Palyginti ankstyvas stimuliacinio poveikio, kurį sukelia gydymas Herba Cistanche, pradžia, ypač vartojant dideles dozes, atitinka ex vivo tyrimų pastebėjimus, kurie parodė, kad I ir III komplekso baltymų sintezė greičiausiai nėra susijusi su ATP susidarymo didinimu. veiksmas. Herba Cistanche sukelto ATP susidarymo in situ būklės padidėjimo demonstravimas patvirtina mintį, kad mitochondrijų ATP generavimo pajėgumo padidėjimas, įvertintas ex vivo matavimu, gali tik atspindėti lygiagretų poveikį, kurį sukelia gydymas vaistais in vivo sąlygomis. ATP susidarymo matavimas izoliuotose mitochondrijose ir kultivuojamose ląstelėse, naudojant malatą ir glutamatą kaip substratus, yra netiesioginis 3 būsenos mitochondrijų kvėpavimo matas (Chen ir kt., 2003). Naudojant tą patį bioliuminescencinį ATP tyrimą, mitochondrijų ATP susidarymo greitis įvairiuose negydytų žiurkių audiniuose, kaip buvo pranešta anksčiau mūsų laboratorijoje (Leung ir kt., 2005), gerai sutapo su neseniai paskelbtais duomenimis (Drew & Leeuwenburgh, 2003). ). ATP generavimo pajėgumas buvo įvertintas dviem etapais integruojant nuo laiko priklausomus ATP lygio pokyčius tiek ex vivo, tiek in situ tyrimuose. Todėl pastebėtas vaistų sukeltas stimuliuojantis poveikis buvo padidintas palyginimo sumetimais. ATP generavimo pajėgumo padidinimas gydant Herba Cistanche žiurkės širdies mitochondrijose ex vivo buvo lygiagretus ATP susidarymo stimuliavimui H9c2 ląstelėse in situ. Atsižvelgiant į tai, kad Yang stimuliuojančiose Kinijos tonizuojančiose žolelėse, įskaitant Herba Cistanche, yra ATP generavimą didinantis aktyvumas pelių širdyse ex vivo (Ko ir kt., 2006), rezultatai rodo, kad ATP generavimo pajėgumo H9c2 ląstelėse matavimas situ gali būti naudojamas kaip Yang gaivinančių kiniškų tonizuojančių žolelių ar žolelių formulės farmakologinis testas.
Apibendrinant galima pasakyti, kad gydymas Herba Cistanche ekstraktu gali padidinti mitochondrijų ATP generavimo pajėgumą žiurkių širdyse ex vivo ir H9c2 ląstelėse in situ. Išvados patvirtina mūsų prielaidą, kad Yang-gaivinimo farmakologinis pagrindas yra kūno funkcijų stiprinimas stimuliuojant mitochondrijų ATP gamybą.
Herba Cistanche ekstraktas padidina mitochondrijų ATP generavimo pajėgumą
Nuorodos
Chen P (1998): Tonizuojančios žolės. Išplėstinė TCM serija. Pekinas, Kinija, Science Press, p. 233–320.
Chen Q, Vazquez EJ, Moghaddas S, Hoppel CL, Lesnefsky EJ (2003): Mitochondrijų reaktyviųjų deguonies rūšių gamyba: pagrindinis III komplekso vaidmuo. J Biol Chem 278: 36027-36031.
Cohen G, Farooqui R, Kesler N (1997): Parkinsono liga: naujas ryšys tarp monoaminooksidazės ir mitochondrijų elektronų srauto. Proc Natl Acad Sci USA 94: 4890–4894.
Davey GP, Peuchen S, Clark JB (1998): Energijos slenksčiai smegenų mitochondrijose. Galimas dalyvavimas neurodegeneracijoje. J Biol Chem 273: 12753-12757.
Drew B, Leeuwenburgh C (2003): ATP gamybos matavimo metodas izoliuotose mitochondrijose: ATP gamyba Fischer{1}} žiurkių smegenų ir kepenų mitochondrijose su amžiaus ir kalorijų apribojimu. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol 285: R1259–R1267.
Evan WH (1992): Membranų ir ląstelių organelių išskyrimas ir apibūdinimas. In: Rickwood D, red. Paruošiamasis centrifugavimas: praktinis metodas. New York, Oxford University Press, p. 223–270.
Grad LI, Lemire BD (2004): mitochondrijų komplekso I mutacijos Caenorhabditis elegans sukelia citochromo c oksidazės trūkumą, oksidacinį stresą ir į vitaminus reaguojančią pieno rūgšties acidozę. Human Mol Genetics 13: 303–314.
Hescheler J, Meyer R, Plant S, Krautwurst D, Rosenthal W, Schultz G (1991): Morfologinis, biocheminis ir elektrofiziologinis kloninių ląstelių (H9c2) linijos iš žiurkės širdies apibūdinimas.Circ Res 69: 1476–1486.
Hsu M, Srinivas B, Kumar J, Subramanian R, Andersen J (2005): Glutationo išeikvojimas, dėl kurio atsiranda selektyvus mitochondrijų komplekso I slopinimas dopaminerginėse ląstelėse, vyksta per NO tarpininkaujantį kelią, kuriame nėra peroksinitrito: poveikis Parkinsono ligai. J Neurochem 92: 1091–1103.
Ko KM, Leon TYY, Mak DHF, Chiu PY, Du Y, Poon MKT (2006): Būdingas "Yang-gaivinančių" Kinijos tonizuojančių žolelių farmakologinis poveikis: miokardo ATP generavimo pajėgumo didinimas. Fitomedicina 13: 636–642.
Ko KM, Mak DH, Chiu PY, Poon MKT (2004): "Yang-gaivinimo" farmakologinis pagrindas kinų medicinoje. Trends Pharmacol Sci 25: 3–6.
Lee CJ, Chuan S, Lee SL (1990): Cistanche deserticola Ma senėjimą stabdančio poveikio tyrimas. Šanchajus J Trad Chin Med 11: 22–23.
Lei L, Song ZH, Tu PF, Li YZ, Wu LJ, Chen FK (2001): Metabolinis feniletanoidinių glikozidų reguliavimas iš Herba cistanches šunų virškinimo trakte. Yao Xue Xue Bao 36: 432–435
Leung HY, Chiu PY, Poon MKT, Ko KM (2005): Yang gaivinanti Kinijos žolelių formulė padidina mitochondrijų funkcinį gebėjimą ir antioksidacinį pajėgumą įvairiuose žiurkių patinų ir patelių audiniuose. Rejuven Res 8: 238–247.
Lin LW, Hsieh MT, Tsai FH, Wang WH, Wu CR (2002): Antinociceptinis ir priešuždegiminis aktyvumas, kurį sukelia Cistanche deserticola graužikams. J Ethnopharmacol 83: 177–182.
Lu MC (1998): Cistanche deserticola raminamojo poveikio tyrimai. J Ethnopharmacol 59: 161-165.
Mark A, Birch M, Douglass MT (2001): Mitochondrijų kvėpavimo komplekso aktyvumo tyrimas mitochondrijose, išskirtose iš žmogaus ląstelių ir audinių. Meth Cell Biol. 65: 97-117.
Ouyang J, Wang X, Zhao B, Yuan X, Wang Y (2003): Retųjų žemių elementų poveikis Cistanche deserticola ląstelių augimui ir feniletanoidinių glikozidų gamybai. J Biotech 102: 129–134.
Paradies G, Petrosillo G, Pistolese M, Di Venosa N, Federici A, Ruggiero FM (2004): Mitochondrijų komplekso I aktyvumo sumažėjimas išeminėje / reperfuzuotoje žiurkės širdyje: reaktyviųjų deguonies rūšių ir kardiolipino įtraukimas. Circ Res 94: 53–59.
Srere PA (1969): Citrato sintazė. Citrinų rūgšties ciklas. Meth Enzymol 13: 3–11.
Stanley WC, Lopaschuk GD, Hall JL, McCormack JG (1997): Miokardo angliavandenių metabolizmo reguliavimas normaliomis ir išeminėmis sąlygomis. Farmakologinių intervencijų potencialas. Cardiovasc Res 33: 243-257.
Taegtmeyer H (1998): Energijos substrato metabolizmas kaip išeminio ir reperfuzinio širdies raumens farmakoterapijos tikslas. Širdies metab. 1: 5–9.
Tian XF, Pu XP (2005): Feniletanoidiniai glikozidai iš Cistanches salsa slopina apoptozę, kurią neuronuose sukelia 1-metil-4- fenilpiridinio jonas. J Ethnopharmacol 97: 59–63.
Wu XM, Gao XM, Tsim KW, Tu PF (2005): arabinogalaktanas, išskirtas iš Cistanche deserticola stiebų, skatina kultivuotų limfocitų dauginimąsi. Int J Biol Macromol 37: 278-282.
Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T, Kadota S (1998): Cistanche deserticola feniletanoidų hepatoprotekcinis aktyvumas. Planta Med 64: 120–125.
Xiong Q, Kadota S, Tani T, Namba T (1996): Antioksidacinis Cistanche deserticola feniletanoidų poveikis. Biol Pharm Bull 19: 1580–1585.
