Labai jautrus ir ekologiškai tvarus atvirkštinės fazės HPTLC metodas hidrochinonui nustatyti komerciniuose balinamuose kremuose

Susisiekite:ali.ma@wecistanche.com

Mohammedas H. Alqarni 1, Prawez Alam 1, Faiyaz Shakeel 2, Ahmed I. Foudah 1 ir Sultan Alshehri 2,*

Santrauka: Hidrochinonas(HDQ) yra natūrali depigmentuojanti medžiaga, dažniausiai naudojama odos tonizavimo preparatuose. Ankstesnėje literatūroje nebuvo atsižvelgta į HDQ kiekybinio įvertinimo analitinių metodų saugą ir ekologiškumą. Todėl keturiuose skirtinguose komerciniuose HDQ įvertinimui buvo sukurtas labai jautrus ir ekologiškai ekologiškesnis atvirkštinės fazės didelio efektyvumo plonasluoksnės chromatografijos (RP-HPTLC) tyrimas.balinimaskremai (CWC). Dvejetainis etanolio ir vandens (60:40, v·v−1) mišinys buvo naudojamas kaip žaliųjų tirpiklių sistema. HDQ įvertinimas buvo atliktas esant 291 nm. Dabartinis RP-HPTLC tyrimas buvo tiesinis 20–2400 ng juostos–1 diapazone. Dabartinis analizės metodas buvo labai jautrus, remiantis aptikimo ir kiekybinio įvertinimo duomenimis. Kiti patvirtinimo parametrai, tokie kaip tikslumas, tikslumas ir tvirtumas, taip pat buvo tinkami HDQ nustatyti. Didžiausi HDQ kiekiai buvo gauti CWC A (1,23 % w·w−1), po to CWC C (0,81 % w·w−1), CWC D (0,43 % w·w−1) ir CWC B (0,37 % m. w−1). Šio analizės metodo analitinio ŽALUMO (AGREE) balas buvo įvertintas kaip 0,91, o tai rodo puikias ekologiškesnes dabartinio RP-HPTLC tyrimo charakteristikas. Šie rezultatai rodo, kad dabartinis analizės metodas yra labai jautrus ir ekologiškai tvarus HDQ kiekybiniam įvertinimui komercinėse formulėse.

Raktiniai žodžiai:susitarti;hidrochinonas; ekologiškai tvarus RP-HPTLC; patvirtinimas

Cistanche ekstraktasgali sunaikinti laisvuosius radikalus ir užkirsti kelią tirozinazės kaupimuisi.

Spustelėkite norėdamiCistanche poveikis balinimui

1. Įvadas

Hidrochinonas(HDQ) yra natūralus junginys, kurio yra keliose komercinėse odos tonizuojančiose kompozicijose, skirtose melazmai (ligai, kurią sukelia per didelis melanino kaupimasis žmogaus odoje) gydyti [1,2]. Tai stipri depigmentuojanti medžiaga ir naudojama kaip alternatyva tirozinazei [3]. Tai viena iš dažniausiai naudojamų priemonių žmogaus odos hiperpigmentacijai gydyti [4,5]. Efektyvi HDQ koncentracija komercinėse odą tonizuojančiose kompozicijose svyruoja nuo 1,5 iki 2.{11}} % w·w−1[6]. Didelė HDQ koncentracija (daugiau nei 5 procentai w·w−1) sukelia vietinį žmogaus odos dirginimą ir leukodermiją [5,6]. Dėl prieštaringų šalutinių poveikių daugelis šalių uždraudė HDQ kaip abalinimasagentas vietinio poveikio preparatuose [7]. Nepaisant to, keli klinikiniai tyrimai parodė įvairius apsauginius poveikiusHDQgydant įvairius odos hiperpigmentinius sutrikimus, tokius kaip melasma, strazdanos, lentiginiai ir kt. [8,9]. Atsižvelgiant į HDQ naudą ir riziką, būtina atlikti jo kiekybinę analizę įvairiose komercinėse odos tonizuojančiose formulėse.

HDQ kiekybiniam įvertinimui naudojami skirtingi farmaciniai tyrimai atskirai arba kartu su kitaisbalinimasagentai parduodamuose balinamuosiuose kremuose (CWC). Buvo dokumentuoti įvairūs ultravioletinės (UV) spektrometrijos metodais pagrįsti tyrimai, skirti kiekybinei HDQ analizei komerciniuose balinimo produktuose (CWP) ir farmaciniuose preparatuose [10–13]. Buvo dokumentuota daugybė aukštos kokybės skysčių chromatografijos (HPLC) pagrįstų tyrimų, skirtų HDQ ir jo eteriams nustatyti įvairiuose CWC ir CWP [14–23]. Taip pat buvo sukurti įvairūs voltamperiniai metodai, skirti vienu metu nustatyti HDQ ir jo eterio darinius CWP [24–29]. Taip pat buvo nustatyti kai kurie kiti analitiniai tyrimai, tokie kaip srauto įpurškimo elektrocheminė [30], micelinė elektrokinetinė chromatografija [31], kapiliarinė elektrochromatografija [32] ir nanokompozitiniai [33] tyrimai.HDQanalizė kartu su jos eterio dariniais ir ktbalinimasagentai CWP. Taip pat buvo pranešta apie kai kuriuos elektrocheminius nanosensorius HDQ analizei [34, 35]. Kokybinei ir kiekybinei HDQ analizei CWC mūsų tyrimų grupė taip pat taikė vieną normalios fazės didelio efektyvumo plonasluoksnės chromatografijos (HPTLC) metodą [1].

Atlikus išsamią HDQ analizės esė analizę, buvo pastebėta, kad literatūroje pateiktų farmacinių metodų saugumas ir ekologinis tvarumas nebuvo įvertintas arba svarstomas. Be to, ekologiški/ekologiškai tvarūs atvirkštinės fazės HPTLC (RP-HPTLC) tyrimai dar nebuvo panaudoti nustatantHDQsavo CWC. Ekologiškai tvarūs / ekologiški HPTLC pagrįsti tyrimai suteikia daug privalumų, tokių kaip paprastumas, ekonomiškumas, mažos eksploatacijos išlaidos, trumpas analizės laikas, lygiagreti kelių mėginių analizė, aptikimo aiškumas ir toksiškumo aplinkai sumažinimas, palyginti su HPLC ir kitais analizės metodais [36–39]. Atitinkamai, šiam tyrimui buvo pasirinktas RP-HPTLC metodas HDQ nustatymui. Farmacinių tyrimų žalumo profiliui įvertinti naudojami skirtingi metodai [38–43]. Nepaisant to, tik analitinis GREENness (AGREE) metrinis metodas taiko visus 12 žaliosios analitinės chemijos (GAC) principų žalumo vertinimui [42].

Pateikto RP-HPTLC metodo žalumo vertinimui buvo taikomas AGREE metrinis metodas [42]. Todėl šis darbas buvo atliktas siekiant sukurti labai jautrų ir ekologišką/ekologiškai tvarų RP-HPTLC metodą, skirtą įvertintiHDQketuriuose skirtinguose CWC. Dabartinio RP-HPTLC metodo žalumo profilis buvo gautas naudojant AGREE: analitinį žalumo skaičiuotuvą. Šis HDQ analizės analitinis tyrimas buvo patvirtintas pagal Tarptautinės derinimo tarybos (ICH) Q2 (R1) gaires [44].

2. Medžiagos ir metodai

2.1. Medžiagos

Etaloninis HDQ standartas (grynumas: 99 proc.) buvo įsigytas iš Fluka Chemica (Darmštatas, Vokietija). HPLC klasės metanolis (MeOH) ir etanolis (EtOH) buvo įsigyti iš Alfa Aesar (Tewksbury, MA, JAV). HPLC klasės vanduo (H2O) buvo surinktas iš Milli-Q vandens valymo sistemos (E-Merck, Darmstadt, Vokietija). Kiti naudojami tirpikliai ir reagentai buvo analitinės kokybės. 2021 m. birželio mėn. iš Al-Kharj, Saudo Arabijos, farmacijos rinkos buvo gauti keturi skirtingi HDQ CWC.HDQbuvo laikomas vėsioje ir tamsioje vietoje 22 ◦C temperatūroje iki eksperimentų pradžios. CWC buvo saugomi maždaug vieną mėnesį iki eksperimentų pradžios.

2.2. Chromatografija

RP-HPTLC densitometrinis HDQ kiekybinis įvertinimas jo etaloniniame standarte ir keturiuose skirtinguose CWC buvo atliktas naudojant HPTLC prietaisą (CAMAG, Muttenz, Šveicarija). Kiekybinė HDQ analizė buvo atlikta 10 × 20 cm2 stiklinėmis plokštelėmis, iš anksto padengtomis RP silikagelio 60 F254S plokštelėmis (E-Merck, Darmstadt, Vokietija). Mėginiai ant TLC plokštelių buvo pastebėti kaip 6 mm juostos. naudojant automatinį mėginių ėmiklį 4 (ATS4) (CAMAG, Ženeva, Šveicarija). Mėginio aplikatorius buvo aprūpintas CAMAG mikrolitriniu švirkštu (Hamilton, Bonaduz, Šveicarija). Taikymas kiekybinei analizeiHDQbuvo palaikomas pastovus 150 nL s−1. Plokštelės buvo sukurtos automatinėje ryškinimo kameroje 2 (CAMAG, Muttenz, Šveicarija) 80 mm atstumu. Žalioji tirpiklių sistema HDQ analizei buvo EtOHH2O (60:40, v·v−1). Išvystymo kamera anksčiau buvo prisotinta judriosios fazės garais 30 minučių 22 ◦C temperatūroje. HDQ buvo aptiktas ties 291 nm. Plyšio matmenys buvo 4 × 0,45 mm2, o nuskaitymo greitis buvo 20 mm s-1. Kiekvienas eksperimentas buvo atliktas trimis egzemplioriais. Duomenų apdorojimui naudota programinė įranga „WinCAT“ (v. 1.4.3.6336, CAMAG, Muttenz, Šveicarija).

2.3. HDQ kalibravimo kreivė ir kokybės kontrolės mėginių paruošimas

Nurodytas kiekis HDQ (10 mg) buvo išpilstytas į 100 ml EtOH-H2O (60:40, v·v-1) žalių tirpiklių sistemose, kad būtų gautas pradinis tirpalas, kurio koncentracija 100 µg mL-1. Skirtingi pradinių tirpalų tūriai buvo toliau skiedžiami naudojant EtOH-H2O (60:40, v·v−1) sistemas, kad būtų pasiekta HDQ koncentracija 20–2400 ng juostos–1 diapazone. Gauti tirpalai išHDQsu skirtingomis koncentracijomis buvo dėmėtos HPTLC plokštelės. HPTLC smailės plotas HDQ buvo gautas kiekvienam HDQ tirpalui, naudojant šį farmacinį tyrimą. HDQ kalibravimo kreivė buvo sukurta braižant HDQ koncentracijas pagal HPTLC plotą. Be to, trys skirtingos kokybės kontrolės (QC) pavyzdžiai, pvz., žemos kokybės kontrolės (LQC; 20 ng juosta-1), vidutinės kokybės kontrolės (MQC; 600 ng juostos-1) ir aukštos kokybės kokybės kontrolės (HQC; 2400 ng band-1) mėginiai. , buvo gauti atskirai, siekiant nustatyti skirtingus šio farmacinio tyrimo patvirtinimo parametrus.

2.4. Mėginių apdorojimas HDQ nustatymui CWC

HDQ buvo išgautas iš keturių skirtingų CWC, taikant literatūroje aprašytą procedūrą [1]. Tiksliai pasverti (5{2}} g) keturių skirtingų CWC kiekiai, įskaitant A, B, C ir D, buvo perkelti į dalijamąjį piltuvą atskirai. Kiekvienas CWC buvo sukratytas dalijamajame piltuvėlyje su MeOH (3 x 70 ml) 30 minučių 22 °C temperatūroje. Kiekvieno CWC MeOH ekstraktai buvo sujungti ir atskirai išgarinami iki sausumo sumažintame slėgyje, naudojant rotacinį vakuuminį garintuvą. Gautos liekanos buvo atkurtos 10 ml MeOH ir laikomos šaldytuve iki tolesnio įvertinimo. Gauti mėginiai buvo tiriami HDQ, naudojant dabartinį analizės metodą esant 291 nm.

2.5. Patvirtinimo parametrai

Šis HDQ analizės RP-HPTLC tyrimas buvo patvirtintas skirtingiems patvirtinimo parametrams, vadovaujantis ICH-Q2 (R1) gairėmis [44]. TheHDQtiesiškumas buvo įvertintas braižant HDQ koncentracijas pagal išmatuotą smailės plotą. Šiam farmaciniam tyrimui HDQ tiesiškumas buvo įvertintas 11 skirtingų QC mėginių, kurių 20, 40, 60, 100, 200, 300, 400, 500, 600, 1200 ir 2400 ng juostos. Sistemos efektyvumo parametrai šiam analizės metodui buvo įvertinti pagal sulėtėjimo koeficientą (Rf), asimetrijos koeficientą (As) ir teorinių plokščių skaičių metre (N m−1). Rf, As ir N m-1 buvo gauti esant MCQ (600 ng juosta-1), kaip aprašyta anksčiau literatūroje [45].

Šio RP-HPTLC metodo tikslumas buvo nustatytas kaip atkūrimo procentas. Procentinis atstatymas buvo gautas esant LQC (20 ng juosta-1), MQC (600 ng juosta-1) ir HQC (2400 ng juosta-1). dabartinis analizės metodas.

Šio analizės metodo tikslumas buvo įvertintas kaip intra-/interday precizits. Dienos tikslumas buvo nustatytas analizuojant HDQ LQC, MQC ir HQC tą pačią dieną šiam analitiniam tyrimui. Dienos tikslumas buvo nustatytas analizuojant HDQ LQC, MQC ir HQC trimis skirtingomis dabartinio analitinio tyrimo dienomis [44]. Kiekvienas tikslumas buvo matuojamas šešis kartus (n=6).

Patvarumas buvo įvertintas įvedant keletą nedidelių žaliųjų tirpiklių sistemos pakeitimų dabartiniam RP-HPTLC metodui. Siekiant įvertinti patikimumą, pradinė EtOH H2O (60:40, v·v−1) tirpiklių sistema buvo pakeista į EtOH-H2O (62:38, v·v−1) ir EtOHH2O (58:42, v·v−1). ) tirpiklių sistemos, o specifinis HPTLC atsakas ir Rf reikšmės buvo įrašytos ir interpretuotos [44].

Šio analizės metodo jautrumas buvo įvertintas kaip aptikimo (LOD) ir kiekybinio įvertinimo (LOQ) ribos, naudojant standartinio nuokrypio metodą. Šio analizės metodo HDQ LOD ir LOQ buvo apskaičiuoti, kaip nurodyta literatūroje [44, 45].

Didžiausias grynumas / specifiškumas buvo įvertintas lyginant HDQ Rf vertes ir UV spektrus CWC A, B, C ir D su standartinio HDQ dabartiniam farmaciniam tyrimui.

2.6. Kiekybinė HDQ analizė CWC

Gauti CWC A, B, C ir D mėginiai buvo pastebėti HPTLC plokštelėse, o jų TLC atsakai buvo pažymėti. Piko plotas, skirtasHDQbuvo įrašytas CWC. HDQ turinys CWC buvo apskaičiuotas naudojant HDQ kalibravimo kreivę dabartiniam analitiniam metodui.

2.7. Žalumo įvertinimas

Šio analizės metodo žalumo charakteristikos buvo gautos naudojant AGREE metrinį metodą [42]. Dabartinio analizės metodo AGREE balai (0.0–1.{4}}) buvo užfiksuoti naudojant AGREE: The Analytical Greenness Calculator (versija0.5, Gdansko universitetas). Technologijos, Gdanskas, Lenkija, 2020).

3. Rezultatai ir aptarimas

3.1. Metodo kūrimas

Remiantis literatūros analizės metodais, nustatyta, kad komercinėje kosmetikoje trūksta ekologiškai tvaraus gebančio/žaliojo RP-HPTLC metodo HDQ analizei. Todėl šis tyrimas buvo atliktas siekiant sukurti greitą, labai jautrią ir ekologiškai tvarią. RP-HPTLC metodas HDQ analizei CWC.

HDQ RP-HPTLC analizei naudojamos skirtingos EtOH ir H2O proporcijos, įskaitant EtOH-H2O (50:50, v·v-1), EtOH-H2O (60:40, v·v-1), EtOH-H2O. (70:30, v·v-1), EtOH H2O (80:20, v·v-1) ir EtOH-H2O (90:10, v·v-1) buvo įvertinti kaip žaliųjų tirpiklių deriniai. patikimos juostos HDQ analizei sukūrimas. Tirpiklių mišiniai buvo sukurti kameros prisotinimo sąlygomis. Iš įrašytų duomenų buvo pastebėta, kad EtOH-H2O (50:50, v·v-1), EtOH-H2O (70:30, v·v-1), EtOH-H2O (80:20, v·v-1) 1), o EtOH-H2O (90:10, v·v-1) žalių tirpiklių mišinių chromatograma buvo prastaHDQsu nepriimtina As reikšme (As {{0}}.29). Tačiau EtOH-H2O (60:40, v·v-1) žaliųjų tirpiklių derinys parodė, kad HDQ atRf=0,83 ± 0,02 chromatograma yra gerai išskirta su priimtina As verte (As {{). 12}}.03) (1 pav.). Todėl EtOH H2O (60:40, v·v−1) buvo optimizuotas kaip žaliųjų tirpiklių mišiniai HDQ analizei CWC. Šio RP-HPTLC metodo UV spektrinės juostos buvo užregistruotos densitometriškai, o didžiausias HPTLC atsakas buvo nustatytas esant 291 nm dabartiniam RP-HPTLC metodui. Todėl visa HDQ analizė buvo atlikta esant 291 nm.

3.2. Patvirtinimo parametrai

Šis farmacinis HDQ kiekybinio nustatymo tyrimas buvo patvirtintas pagal tiesiškumo diapazoną, sistemos efektyvumo parametrus, tikslumą, tikslumą, tvirtumą, jautrumą ir didžiausią grynumą / specifiškumą, vadovaujantis ICH rekomendacijomis [44]. 1 lentelėje pateikti HDQ kalibravimo kreivės mažiausių kvadratų regresinės analizės rezultatai šiuo RP-HPTLC metodu.HDQkalibravimo kreivė buvo tiesinė 20–2400 ng juostos diapazone, o šio analizės metodo nustatymo koeficientas buvo 0,9997. šie duomenys rodo gerą HDQ koncentracijos ir jos atsako tiesiškumą.

Šio farmacinio metodo sistemos efektyvumo parametrai buvo ištirti naudojant MQC (600 ng juosta−1), o rezultatai pateikti 2 lentelėje. Rf, As ir N m-1 reikšmės dabartinis analizės metodas buvo prognozuojamas atitinkamai 0,83 ± 0,02, 1,03 ± 0,03 ir 4987 ± 2,87. Šie rezultatai parodė, kad dabartinis analizės metodas buvo patikimas HDQ analizei CWC.

Šio analitinio metodo tikslumo analizės rezultatai pateikti 3 lentelėje. Procentinis HDQ atkūrimas pagal dabartinį RP-HPTLC metodą buvo nustatytas kaip 101,80 proc., 98,16 proc. ir 99,38 proc. LQC, MQC ir HQC. . Didelės procentinės atkūrimo vertės parodė dabartinio RP-HPTLC metodo HDQ analizės tikslumą CWC.

Tikslumas buvo nustatytas kaip variacijos koeficiento procentas (procentais CV), o rezultatai pateikti 4 lentelėje. Procentiniai HDQ CV šiam analizės metodui buvo numatyti kaip 0.91, 0. 59 ir 0,26 proc. atitinkamai LQC, MQC ir HQC dienos tikslumui. Procentiniai HDQ CV pagal dabartinį RP-HPTLC metodą buvo numatyti kaip 0,98,{{10}},69 ir 0,32 proc. atitinkamai LQC, MQC ir HQC, tarpdieninis tikslumas. Žemos procentinės CV reikšmės parodė dabartinio RP-HPTLC metodo HDQ analizei CWC tikslumą.

Šio analitinio metodo patikimumo analizės rezultatai pateikti 5 lentelėje. Procentiniai CV patikimumo analizei buvo numatyti kaip 0,59–0,66 procentai esamam analitiniam metodui. HDQ Rf reikšmės buvo rastos 0.82–0.84 diapazone, taikant prezentanalitinį metodą. Siaurūs HDQ Rf reikšmių ir mažesnių procentų CV pokyčiai parodė dabartinio HDQ kiekybinio CWC analizės metodo patikimumą.

Šio analizės metodo jautrumas buvo įrašytas kaip "LOD ir LOQ", o jų fizinės reikšmės pateiktos 1 lentelėje. Numatyta, kad dabartinio analizės metodo "LOD ir LOQ" yra 6,91 ± 0.23 ir 2 0.73 ± 0,68 ng juosta−1, atitinkamaiHDQkiekybinis įvertinimas. Šios fizinės „LOD ir LOQ“ vertės, skirtos dabartiniam analizės metodui, parodė HDQ analizės jautrumą CWC.

Didžiausias šio analizės metodo grynumas / specifiškumas buvo įvertintas lyginant HDQ UV spektrus keturiuose skirtinguose CWC su standartiniais HDQ. Standartinių HDQ ir HDQ UV spektrai, esantys keturiuose skirtinguose CWC, yra parodyti 2 paveiksle. Didžiausias HDQ chromatografinis atsakas standartiniuose HDQ ir tirtuose CWC buvo stebimas esant 291 nm, naudojant šį analizės metodą. Identiški UV spektrai, Rf vertės ir HDQ bangos ilgis standartiniuose HDQ ir CWC parodė šio analizės metodo didžiausią grynumą / specifiškumą.

3.3. HDQ turinio analizė CWC

Šio analitinio tyrimo pritaikomumas buvo patikrintas kiekybiškai įvertinant HDQ CWC. ChromatogramaHDQiš CWC buvo identifikuotas palyginus jo TLC dėmę esant Rf {{0}},83 ± 0.02 su standartinio HDQ tašku dabartiniam analizės metodui. HDQ chromatogramos CWC A ir B, skirtos šiam analitiniam tyrimui, apibendrintos 3 paveiksle. HDQ HPTLC chromatogramos CWC buvo identiškos gryno HDQ chromatogramoms. Kai kurios papildomos smailės taip pat atsirado CWC chromatogramose, kurios gali būti susijusios su skirtingomis CWC pagalbinėmis medžiagomis. Ekologiškai tvarus HPTLC metodas buvo selektyvus HDQ analizei esant Rf=0,83 be kitų CWC sudedamųjų dalių trukdžių. Nustatyta, kad HDQ Rf vertė (0.83) CWC yra identiška standartinio HDQ ({{20}}.83), o tai rodo, kad nebuvo sąveikos tarp HDQ ir CWC ingredientai. Taigi preparato sudedamosios dalys neturėjo įtakos HDQ chromatogramos kokybei, LOD ir dabartinio HDQ analizės HPTLC metodo efektyvumui. Papildomų smailių buvimas CWC chromatogramose parodė, kad dabartinis RP-HPTLC metodas buvo patikimas HDQ įvertinimui, kai yra vaisto sudedamųjų dalių. HDQ kiekis CWCs buvo nustatytas pagal HDQ kalibravimo kreivę, o rezultatai įtraukti į 6 lentelę. 6 lentelėje taip pat apibendrinamas pažymėtas HDQ kiekis ir jo sudėties ingredientai. HDQ kiekis buvo didžiausias CWC A (1,23 proc. w·w-1), po to CWC C (0,81 proc. w·w-1), CWC D (0,43 proc. w·w) −1), ir CWC B (0,37 proc. w·w−1). Įrašytas HDQ turinys buvo daug mažesnis nei pažymėtas HDQ kiekis (200 procentai w·w−1) tirtuose CWC. HDQ turinys dviejuose skirtinguose CWC (A ir B) buvo užregistruotas atitinkamai kaip 0,69 % w·w−1 ir 0,34 % w·w−1, naudojant normalios fazės HPTLC metodą literatūroje [1]. Praneštas HDQ kiekis taip pat buvo daug mažesnis nei literatūroje nurodytas HDQ kiekis (200 % w·w−1) [1]. Keletas CWC arba CWP parduodami su teiginiu, kad jie yra visiškai natūralūs. Tačiau dažnai kai kurios sintetinės cheminės medžiagos yra sumaišytos, turinčios tokį patį poveikį, koks yra tokių CWC ar CWP kaip sukčiavimas. Šiame darbe ir literatūroje užfiksuotas HDQ kiekis parodė, kad tirti CWC turi mažą HDQ kiekį ir neatitiko etiketės teiginių [1]. Taigi tikimasi, kad tirtuose CWC yra kai kurių sintetinių cheminių medžiagų, kaip klaidinimo medžiagų. Apskritai, šis analitinis tyrimas gali būti naudojamas HDQ analizei kosmetikos ir farmacijos preparatuose.

3.4. Žalumo įvertinimas

Farmacinių tyrimų žalumo įvertinimui naudojami įvairūs metodai [38–43]. Tačiau tik AGREE metodas naudoja visus 12 GAC principų žalumui įvertinti [42]. Todėl šio analizės metodo žalumo profilis buvo gautas naudojant AGREE skaičiuotuvą. Numatomas AGREE balas, naudojant 12 skirtingų GAC principų šiam analitiniam tyrimui, pateiktas 4 paveiksle. Skirtingų GAC principų AGREE balas buvo užfiksuotas taip: Mėginio apdorojimas: 0.61 Analizės prietaiso padėtis: 1.{{ 9}}Mėginio paruošimo veiksmai: 1.00Automatizavimo laipsnis: 0.80Išvestinių formavimas: 1.00Atliekų kiekis: 1.{17} }Analizės pralaidumas: 1.00Energijos sąnaudos: 1.00Mėginio apdorojimas: 0,51 Reagento šaltinis: 1.{25}}Tirpiklių toksiškumas: 1.00 Operatoriaus sauga: 1.{29}}

Bendras šio analizės metodo AGREE balas buvo įrašytas kaip 0.91, o tai rodo puikų žaliąjį analizės metodąHDQkiekybinis įvertinimas.

4. Išvada

RP-HPTLC-densitometrijos metodas buvo sukurtas HDQ analizei keturiuose skirtinguose HDQ CWC. Šis RP-HPTLC tyrimas buvo patvirtintas skirtingiems patvirtinimo parametrams. Dabartinis analizės metodas buvo labai jautrus, greitas ir ekologiškai tvarusHDQanalizė. Šio analizės metodo AGREE balas pasiūlė puikų HDQ kiekybinio įvertinimo analitinį tyrimą. Dabartinis RP-HPTLC metodas buvo tinkamas HDQ analizei keturiuose skirtinguose CWC. Šie rezultatai parodė, kad šis analitinis tyrimas gali būti taikomas HDQ analizei skirtinguose kosmetikos ir farmacijos preparatuose.