Molekuliniai keliai, susiję su Cistanche Tubulosa ilgaamžiškumo skatinimu ir pažinimo tobulinimu Drosofiloje

Norėdami gauti daugiau informacijos:ali.ma@wecistanche.com

Wei-Yong Lin ir kt

Santrauka:

Fonas:Manoma, kad senėjimo procesas, įskaitant fizinę disfunkciją ir su amžiumi susijusį atminties sutrikimą (AMI), yra susijęs su kaupiamaisiais oksidaciniais pažeidimais ir insulino/IGF-1 signalizacijos keliais. Tikslas: šio tyrimo tikslas buvo išsiaiškinti in vivo poveikis lėtinant senėjimą ir gerinant AMI bei pagrindinius molekulinius mechanizmusCistanche tubulosa(CT), vaistažolė, naudojama tradicinėje kinų medicinoje seksualinei funkcijai gerinti ir inkstų disfunkcijai gydyti

Metodai:Musės, apdorotos ir neapdorotos KT(Cistanche Tubulosa), buvo stebima gyvenimo trukmė, atsparumas oksidaciniam stresui naudojant H2O2 arba parakvatą, badavimo tyrimas, kognityvinis elgesys naudojant T labirintą ir tikslinių genų transkripto lygiai naudojant kiekybinę RT-PGR.

Rezultatai:KT administravimas(Cistanche Tubulosa)prailgino vidutinę ir maksimalią gyvenimo trukmę bei padidino musių atsparumą oksidaciniam stresui. KT(Cistanche Tubulosa)papildymas taip pat pagerino jaunų musių atminties formavimąsi ir slopino AMI senėjimą. Nustatyta, kad keli genai ir signalizacijos keliai, įskaitant mechaninį rapamicino (mTOR) ir Notch tinklų taikinį, sukelia šį farmakologinį poveikį ir glutamato receptorių genų ekspresijos pokyčius.

Išvada:Mūsų rezultatai rodo, kad CT(Cistanche Tubulosa)papildai gali padėti sulėtinti senėjimo fenotipus ir sušvelninti musių pažinimo ir elgsenos nuosmukį, o tai rodo galimą pritaikomumą gerinant žmonių sveikatą ir mažinant jautrumą su amžiumi susijusiems sutrikimams.

Raktiniai žodžiai:Senėjimas,Cistanche tubulosa,Kognityvinis elgesys, Herb

Spustelėkite, kad pamatytumėte Cistanche stiebo gaminius

Įvadas

Pasaulyje didėjant senyvo amžiaus gyventojų skaičiui, sveiko senėjimo ir ilgaamžiškumo palengvinimas tampa vis svarbesniu visuomenės sveikatos susirūpinimu mokslui, visuomenei ir medicinos priežiūros sričiai. Buvo pasiūlyta, kad senėjimo procesą valdo sudėtingi mechanizmai, kuriuos lemia plati genetinių ir aplinkos veiksnių sąveika. Dėl laipsniško pažeidimo ląstelių ir audinių lygiu, amžius yra rizikos veiksnys ir labai koreliuoja su polinkiu sirgti lėtinėmis ligomis, tokiomis kaip vėžys, taip pat širdies ir kraujagyslių bei neurodegeneracinės ligos (Kenyon, 2005). Senėjimas taip pat sumažina sinapsinį aktyvumą, naujų baltymų sintezę ir pažinimo funkciją. Šie funkciniai pokyčiai prisideda prie su amžiumi susijusių atminties sutrikimų (AMI) (Burke ir Barnes, 2010; Schimanski ir Barnes, 2010). Todėl vaistų, skirtų su amžiumi susijusiai patologijai ir pažinimo senėjimui atitolinti, kūrimas gali būti naudingas žmogaus gyvenimo kokybei. Šiame tyrime mes panaudojome Drosophila melanogaster, kuris yra idealus organizmas in vivo senėjimo tyrimams dėl savo trumpo gyvenimo trukmės, kad įvertintume vaistų veiksmingumą ir ištirtume senėjimo ir AMI gerinimo molekulinius mechanizmus.

Herbacistanche, taip pat žinomas kinišku pavadinimu Rou CongRong, yra parazitinis augalas, daugiausia paplitęs šiaurės vakarų Kinijos dykumose. Dvi Cistanche rūšys, Cistanche deserticolaY. C. Ma irCistanchekanalėlių(Schrenk) Wight yra įtrauktas į Kinijos farmakopėją (2005 m. leidimas) dėl panašių cheminių ingredientų ir farmakologinės veiklos. Jų stiebo ekstraktas buvo plačiai naudojamas tūkstančius metų kaip tonizuojanti priemonė, daugiausia gydant įvairius simptomus, įskaitant nepakankamą inkstų funkciją, impotenciją, nevaisingumą ir katarsiui palengvinti, kaip aprašyta senovės kinų medicinos knygose. Išskirta daug cheminių sudedamųjų dalių, įskaitant eterinius aliejus, feniletanoidinius glikozidus (PhG), iridoidus, lignanus ir sacharidus.Cistancherūšys ir du pagrindiniai PhG komponentai, akteozidas ir andechinakozidas, paprastai pasirenkami kaip žymenys Herba cistanche kokybei įvertinti dėl jų reikšmingo farmakologinio poveikio (Wang ir kt., 2012).

Cistanche tubulosa(KT) ekstraktai atlieka įvairias biologines funkcijas, įskaitant imuninio aktyvumo moduliavimą, seksualinės funkcijos gerinimą, plaukų augimo skatinimą ir kitus antioksidacinius, hepatoprotekcinius, antiosteoporozinius ir priešnavikinius efektus (Li ir kt., 2016; Seok ir kt., 2015). Wang ir kt., 2012). Be to, in vitro tyrimas atskleidė, kad Herbacistancheekstraktas gali apsaugoti į dopaminą panašius neuronus nuo H2O2-sukeliamų oksidacinių pažeidimų ir žymiai padidinti nervų augimo faktoriaus bei smegenų kilmės neurotrofinio faktoriaus kiekį (Lin ir kt., 2013). Echinakozidas apsaugojo nuo dopamino neuronų mirties Parkinsono ligos MPTP pažeistų pelių modelyje (Zhao ir kt., 2010). Be to, CT(Cistanche Tubulosa)ekstraktas pagerino pažinimo sutrikimus, nes sumažino amiloido nusėdimą ir padidino acetilcholino bei dopamino kiekį Alzheimerio ligos (AD) žiurkės modelyje (Wu ir kt., 2014). Nors terapinis Herba poveikiscistanchevis dar reikalaujama patvirtinti, mažo dydžio, ne placebu kontroliuojamą klinikinį KT tyrimą(Cistanche Tubulosa)glikozidų ekstraktai parodė, kad vaistas gali gydyti pacientus, sergančius lengvu ar vidutinio sunkumo AD, ir yra gana lengvas nepageidaujamas poveikis, net ir po ilgalaikio vartojimo (Guo ir kt., 2013). Šie duomenys rodo, kad glikozidų ekstraktai Herbojecistancheturi neuroprotekcinį ir antidemencijos poveikį. Nepaisant įvairių KT privalumų(Cistanche Tubulosa)Jo molekuliniai mechanizmai ir poveikis senėjimo stabdymui ir AMI gerinimui nebuvo išaiškinti. Šiame tyrime KT poveikis(Cistanche Tubulosa)žymiai pailgėjus gyvenimo trukmei, pagerėjo atsparumas aplinkos stresui ir buvo ištirtas su amžiumi susijęs pažinimo sutrikimas, siekiant nustatyti galimą klinikinį KT naudą.(Cistanche Tubulosa)lėtinant senėjimo procesą.

Medžiagos ir metodas

Žolelių vaistas

Kilmės identifikavimasCistanche tubulosa(Schrenk) Wight (Orobanchaceae) (CT) buvo patikrintas Ko Da PharmaceuticalCo. Ltd. (Taoyuan, Taivanas), kurioje buvo laikomi kvito pavyzdžiai (10 603 205) ir gaminamas CT koncentruotas augalinis vaistas. Trumpai tariant, džiovintas mėsingas CT stiebas buvo ekstrahuotas 12- kartus virintame vandenyje 1 valandą, po to filtruojamas. Filtratai buvo surinkti ir 1 valandą veikiami vakuume ir sumažinto slėgio koncentracijoje, kad būtų gauti ekstraktai. CT ekstraktai buvo sumaišyti su krakmolu santykiu 1:1 (m/w) ir purškiami granuliuoti, kad būtų gauti CT milteliai.

Skrydžių atsargų priežiūra ir gyvavimo trukmės matavimas

Šiame tyrime naudota laukinio tipo muselių linija buvo CantonS, gauta iš Bloomington Drosophila Stock Center. Musės buvo auginamos ir laikomos standartinėje kukurūzų miltų terpėje 25 laipsnių temperatūroje, esant 50–60 procentų santykinei oro drėgmei 12-h šviesos-tamsos ciklu. Išnykusios suaugusios musės buvo surinktos per 24 valandas ir atskirtos pagal lytį. Nuo ankstyvo pilnametystės musės buvo papildytos KT. KT(Cistanche Tubulosa)milteliai buvo ištirpinti vandenyje ir dedami į kukurūzų miltų terpę 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml koncentracijomis, kurios buvo proporcingos veiksmingai paros dozei, skirtai žmonėms vartoti per burną. Atliekant gyvenimo trukmės analizę, maisto buteliuke su KT arba be jo buvo užauginta nuo dvidešimt iki trisdešimt musių(Cistanche Tubulosa); kiekvienam gydymui buvo atlikta mažiausiai 250 musių. Maisto buteliukai buvo keičiami kas 3–4 dienas ir tuo metu buvo skaičiuojamos negyvos musės

Atsparumo stresui tyrimai

Suaugusios musės buvo surinktos ir iš anksto apdorotos kontroline dieta be KT(Cistanche Tubulosa)ir eksperimentinės dietos, papildytos 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml CT 20 dienų 25 laipsnių temperatūroje. Atliekant bado analizę, musės buvo laikomos buteliukuose tik su šlapiu popieriumi ir įvertino jų ištvermę nuo bado sukelto oksidacinio streso. Atliekant oksidacinio streso tyrimus, muselės buvo perkeltos į nevalgomus buteliukus, kuriuose buvo filtravimo popierius su vandenilio peroksidu (H2O2) (Sigma Aldrich) 5 procentų gliukozės tirpale, siekiant įvertinti musių atsparumą H2O2-sukeltam hidroksilo radikalui (OH). −) stresas. Panašiai muselės buvo perkeltos į buteliukus su filtravimo popieriumi, prisotintu 10 mM parakvato (Sigma-Aldrich), kuris generuoja superoksido anijonus (O2-), kurie sukelia oksidacinę žalą gyvūnams. Musių mirtingumas buvo vertinamas mažiausiai tris kartus per dieną, kol visos nugaišo. Vieno gydymo metu buvo atlikta mažiausiai 250 musių. Norint lipti, kaip sakoma, musės, veikiamos parakvatu 0 ir 16 valandų, buvo įdėtos į plastikinį buteliuką ir švelniai bakstelėjo į dugną. Musių skaičius buteliuko viršuje buvo suskaičiuotas po 18 sekundžių kopimo.

Vaisingumo vertinimas

Tiek mergaičiai patinai, tiek patelės buvo šeriami 5,4 ir 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)20 dienų tarnavo kaip eksperimentinės grupės. Dešimt eksperimentinių patelių buvo susiporavusios su tiek pat mergaičių patinų, kurie buvo 9-dienų amžiaus ir kuriems nebuvo atlikta KT. Panašiai eksperimentiniai patinai buvo suporuoti su tos pačios būklės nekaltomis patelėmis. Po to susiporavusios muselių patelės buvo perkeltos į naują buteliuką kiaušiniams dėti 24 valandoms, o bendras buteliukuose padėtų kiaušinių skaičius buvo suskaičiuotas rankiniu būdu. Vaisingumo anindeksas buvo apskaičiuotas kaip vidutinė vienos patelės kiaušinėlių gamyba per dieną. Vienam gydymui buvo atlikti bent penki buteliukai, o bendras musių skaičius n=50–80.

Uoslės asociatyvus mokymasis ir atmintis

Musės buvo surinktos po eklozijos ir iš anksto apdorotos 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml CT(Cistanche Tubulosa)tarnavo kaip eksperimentinės grupės, o kontrolinės musės nebuvo gavusios KT(Cistanche Tubulosa)5 ir 2 0 dienas 25 laipsnių temperatūroje. Pagal ankstesnį tyrimą buvo atliktas vienas treniruočių bandymas (Dubnau ir kt., 2001). Trumpai tariant, maždaug 100 musių paeiliui buvo veikiami dviejų kvapų: 3-oktanolio (OCT, Sigma-Aldrich) arba 4-metilcikloheksanolio (MCH, Sigma-Aldrich). Musės, patyrusios pirmąjį kvapą (sąlyginis stimulas, CS plius ), buvo suporuotos su 80 V elektros smūgiais, o po to gavo antrą kvapą (CS-) be smūgių. Mokymosi gebėjimai buvo nustatyti iškart po treniruotės ir 3- bei {{ gebėjimai 12}}h atmintis atliko testų potreniruočių procedūrą atitinkamai 3 ir 24 valandas. Norint atlikti testą, dresuotos musės buvo įstrigusios pasirinktame T formos labirinto taške, kuriame jos buvo vienu metu veikiamos UŠT ir MCH. Buvo apskaičiuotas efektyvumo indeksas (PI), kuris atspindi sąlyginio kvapo vengimą. Nulinis PI rodė 50:50 pasiskirstymą, o 100 aPI rodė 0:100 pasiskirstymą nuo CS plius kvapo.

Transkripto lygių matavimai naudojant kiekybinę PGR realiuoju laiku (qPCR)

Musės buvo surinktos po eklozijos ir iš anksto apdorotos 5,4 ir 10,8 mg/ml CT(Cistanche Tubulosa)20 dienas 25 laipsnių temperatūroje buvo eksperimentinės grupės, o kontrolinės musės nebuvo gautos KT. Visa RNR buvo išgauta naudojant RNeasy Mini rinkinį (Qiagen), o cDNR buvo susintetinta iš visos RNR per atvirkštinės transkripcijos reakciją, naudojant didelės talpos cDNR atvirkštinę transkripciją (Thermo Fisher Scientific). Tikslinių genų transkripto lygiai buvo kiekybiškai įvertinti naudojant realaus laiko kiekybinę polimerazės grandininę reakciją (Applied Biosystems ViiATM 7 Real-Time PCR System), naudojant FastStart SYBR Green Master (Roche) pagal gamintojo instrukcijas. Santykinis transkripto gausumas buvo normalizuotas naudojant lyginamąjį ciklo slenksčio metodą, vidinį standartą naudojant ahousekeeping geną RpLP0. Eksperimentinių grupių tikslinių genų santykiniai raiškos skirtumai buvo normalizuoti iki kontrolinės grupės ir pateikti kaip kartotinis pokytis. Tikslinių genų pradmenys yra išvardyti 1 papildomoje lentelėje.

Tinklo konstravimas ir analizė

Norint išanalizuoti funkcinį aiškinimą ir biologinius procesus, kuriuos sąlygoja skirtingai išreikšti genai, kuriuos nustatėme, anotacijų, vizualizavimo ir integruoto atradimo duomenų bazė (DAVID) buvo naudojama anotuoti ir analizuoti Kioto genų ir genomo enciklopedijos (KEGG) kelio ir genų praturtinimą. Šių genų ontologija (Jiao ir kt., 2012). Norint išanalizuoti tiesioginę ir netiesioginę skirtingai išreikštų genų sąveiką, genų sąrašas taip pat buvo įkeltas į sąveikaujančių genų / baltymų paieškos įrankį (STRING), kad būtų galima gauti sąveikos informaciją ir generuoti baltymų sąveikos tinklus (Franceschini ir kt., 2013).

Statistinė analizė

Visi eksperimentai buvo atlikti su mažiausiai trimis nepriklausomais pakartojimais, o statistinė analizė buvo atlikta naudojant SigmaStat v3.5 programinę įrangą (Systat Software, Inc., IL). Gyvenimo trukmės pailginimo ir oksidacinio streso iššūkių duomenys buvo atlikti su bendru musių skaičiumi nuo 25{9}} iki 350, o log-rank testas buvo įvertintas atliekant skirtingas analizes. Grupių palyginimai vaisingumo įvertinimui ir pažinimo testui buvo vertinami taikant vienpusę dispersijos analizę (ANOVA), po to Dunnett post-hoc testą. Kiti eksperimentiniai palyginimai buvo atlikti atliekant Stjudento t testą, lyginant su kontroline grupe. Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SEM, o p reikšmė < 0,05="" buvo="" laikoma="">

Rezultatai

CT (Cistanche Tubulosa) papildai padidina musių gyvenimo trukmę

Ištirti, ar KT(Cistanche Tubulosa)papildymas gali pailginti musių gyvenimo trukmę, eksperimentinių procedūrų metu musės buvo papildytos 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml CT iš karto po eklosijos 25 laipsnių kampu. Mūsų duomenys parodė, kad CT(Cistanche Tubulosa)papildai gali pailginti musių patinų ir patelių gyvenimo trukmę. Kaip parodyta pav. 1A, musių patinų gyvenimo trukmė pailgėjo visomis KT dozėmis(Cistanche Tubulosa). Vidutinė gyvenimo trukmė grupių, papildytų 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml KT, reikšmingai padidėjo atitinkamai 18,9 proc., 10,3 proc. ir 9,9 proc. KT(Cistanche Tubulosa)taip pat žymiai padidino maksimalią visų KT grupių gyvenimo trukmę, palyginti su kontroline grupe, nuo 88 iki 102, 98 ir 102 dienų po gydymo 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml KT.(Cistanche Tubulosa), atitinkamai. Moterims KT(Cistanche Tubulosa)žymiai padidino vidutinę KT grupių gyvenimo trukmę, palyginti su kontroline grupe (1B pav.). Vidutinė gyvenimo trukmė padidėjo iki 18,8 proc., naudojant 5,4 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)ir 5,5 proc. ir 6,7 proc. atitinkamai 10,8 ir 21,6 mg/mlof KT. Taip pat pastebėjome, kad gydant 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml KT, maksimali gyvenimo trukmė žymiai pailgėjo nuo 91 dienos (kontrolė) iki 109, 98 ir 102 dienų.(Cistanche Tubulosa), atitinkamai; didžiausias maksimalios gyvenimo trukmės padidėjimo dydis buvo 19,8 proc., kai KT yra 5,4 mg/ml(Cistanche Tubulosa). Mūsų rezultatai rodo, kad CT(Cistanche Tubulosa)dietos papildymas žymiai prailgina musių patinų ir patelių gyvenimo trukmę. Kurkuminas (10 μM) buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė ir veiksmingas gyvenimo trukmės pratęsimas, kaip parodyta papildomame 1 pav.

CT papildymas padidina atsparumą badui ir oksidaciniam stresui

Gyvenimo trukmės pailgėjimas dažnai siejamas su padidėjusiu atsparumu oksidaciniam stresui senėjimo proceso metu. Mes įvertinome, ar CT(Cistanche Tubulosa)papildai padidina atsparumą oksidaciniam stresui. Musės patinai ir patelės buvo iš anksto apdorotos skirtingomis KT dozėmis(Cistanche Tubulosa)20 dienų ir įvertintas jų išgyvenamumas po bado (2A pav.). Vidutinis išgyvenamumo laikas ir maksimali gyvenimo trukmė abiejų lyčių, palyginti su kontrolinės grupės, reikšmingai pailgėjo 5,4 ir 10,8 mg/ml KT grupėse, bet ne 21 .6 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)grupė. Taip pat buvo įvertintas iš anksto apdorotų musių išgyvenimas po H2O2 ir parakvato, kurie gamina reaktyviąsias deguonies rūšis (ROS), kad paskatintų ląstelių senėjimą ir ląstelių mirtį. Mes nustatėme, kad CT(Cistanche Tubulosa)apsaugojo muses patinus ir pateles nuo H2O2 toksiškumo ir pailgino vidutinę ir maksimalią jų gyvenimo trukmę (2B pav., p < 0.01 ir 0,001, esant 5,4 ir 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa), atitinkamai). Taip pat buvo pastebėta panaši tendencija, rodanti padidėjusį atsparumą parakvato iššūkiui. Patinai musės šeriami visomis KT dozėmis, o patelės, ypač su 5,4 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa) (Cistanche Tubulosa), išgyveno ilgiau nei kontroliniai (3A pav., p < 0.001).="" kalbant="" apie="" gebėjimą="" lipti,="" tiek="" patinams,="" tiek="" patelėms="" buvo="" skirta="" 10,8="" mg/ml="">(Cistanche Tubulosa)pasireiškė susilpnėjusi parakvato sukelta lokomotorinė disfunkcija praėjus 16 val. po parakvato užkrėtimo (3B pav., visi p < 0,05).="" šie="" rezultatai="" rodo,="" kad="" kt="" papildymas="" pagerina="" atsparumą="" tam="" tikram="" oksidaciniam="" stresui,="" o="" tai="" rodo,="" kad="">(Cistanche Tubulosa)- sukeltas gyvenimo trukmės pailgėjimas yra susijęs su padidėjusia antioksidacine apsauga.

CT (Cistanche Tubulosa) poveikis reprodukciniam pajėgumui

Kadangi senėjimo teorija rodo, kad senėjimo procesas neigiamai veikia reprodukciją, ištyrėme, ar KT(Cistanche Tubulosa)paveikė reprodukcinį pasirengimą, analizuojant suaugusių muselių gebėjimą dėti kiaušinėlius. Suaugusios musės buvo surinktos po eklozijos, atskirtos pagal lytį ir sušvirkštos 5,4 ir 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)20 dienų. Mergelės vyriškos arba moteriškos lyties muselės, kurioms buvo paskirta KT(Cistanche Tubulosa)buvo kergiamos su 9-dienų senomis muselėmis, kurioms nebuvo atlikta KT(Cistanche Tubulosa). Pastebėjome nuo dozės priklausomą padidėjusį kiaušinėlių skaičių per dieną vienai patelei, ty 30,3 proc. ir 57,2 proc. pažeistų musių, gydomų 5,4 ir 10,8 mg/ml KT.(Cistanche Tubulosa), atitinkamai, lyginant su kontroliniais (4 pav., p < 0.05).="" šie="" duomenys="" rodo,="" kad="">(Cistanche Tubulosa)papildymas galėtų pagerinti pagyvenusių moterų reprodukcinį pajėgumą, bet greičiausiai ne vyresnio amžiaus patinams.

CT (Cistanche Tubulosa) papildymas pagerina pažinimo gebėjimus

Nustatėme, ar KT(Cistanche Tubulosa)papildymas turi teigiamą poveikį mokymosi ir atminties gebėjimams, buvo atliktas vienas uoslės asociacijos mokymo ciklas. Vertiname mokymosi našumą, taip pat 3- ir 24-h atmintį, kuri buvo laikoma atitinkamai tarpine ir ilgalaike atmintimi. Pirmiausia musės buvo papildytos įvairiomis CT dozėmis(Cistanche Tubulosa)5 dienoms. Mokymosi gebėjimai buvo panašūs tiek KT, tiek kontrolinėje grupėse (5A pav.). Kalbant apie 3-h atmintį, 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)grupė turėjo didesnį efektyvumo indeksą (PI) nei kontrolinės grupės (5B pav., 51,5 ± 3,2, palyginti su 42,6 ± 2,1), nors reikšmingo skirtumo nėra. Be to, 5,4 ir 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)žymiai pagerino musių {{0}}h atmintį, palyginti su kontroline medžiaga (5C pav., PI=41.6 ± 3,6 ir 45,9 ± 3.0, palyginti su 29,6 ± 2,9). , p < 0,05="" ir="" 0,01).="" šie="" rezultatai="" parodė,="" kad="" ct="" papildymas="" pagerina="" jaunų="" musių="" atminties="" formavimąsi.="" antra,="" o="">(Cistanche Tubulosa)papildai padidino musių ilgaamžiškumą ir atsparumą oksidacijai, toliau nustatėme, ar papildai taip pat gali pagerinti senų musių pažintinį elgesį.Musėms buvo duodama standartinio maisto su 5,4, 10,8 ir 21,6 mg/ml KT arba be jo.(Cistanche Tubulosa)20 dienų, kad imituotų senėjimą; musių, papildytų šiomis KT dozėmis(Cistanche Tubulosa)turėjo žymiai didesnius mokymosi PI (atitinkamai 67,6 ± 1,9, 72,5 ± 0,5 ir 75,2 ± 1,3) nei kontrolinių (58.0 ± 2.{15}}; 5D pav. , p < 0.001), o tai rodo, kad KT(Cistanche Tubulosa)turi teigiamą poveikį atitolinant su amžiumi susijusį mokymosi mažėjimą. Panašūs rezultatai taip pat atskleidė, kad 5,4 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)grupėje buvo efektyvesnis atminties išsaugojimas per {{0}}h (5E pav., 47,5 ± 1,9, palyginti su kontroline37.{{10}} ± 2,9, p < 0,05)="" ir="" 24-="" h="" atminties="" testai="" (5f="" pav.,="" 31,8="" ±="" 3,8,="" palyginti="" su="" kontroline="" 19,3="" ±="" 2,4,="" p="">< 0,01).="" šie="" rezultatai="" rodo,="" kad="">(Cistanche Tubulosa)papildai ne tik pagerina jaunų musių atminties formavimąsi, bet ir atitolina kognityvinio elgesio sutrikimą bei išlaiko veiksmingesnius mokymosi ir atminties gebėjimus su amžiumi.

Molekuliniai keliai, susiję su ilgaamžiškumo skatinimu ir KT papildymo pažinimo gerinimu

KT(Cistanche Tubulosa)papildai slopina AMI ir pailgina gyvenimo trukmę. Todėl manėme, kad su AMI ir ilgaamžiškumu susiję genai gali būti nustatyti įvertinus skirtingą ekspresiją tarp kontrolinės ir 5, 4 ir 10, 8 mg / ml CT grupių naudojant qPCR. CT gydytų musių genų ekspresijos pokyčiai buvo lyginami su kontrolinės grupės pokyčiais, parodyti 6A pav. Sureguliuota kelių tikslinių genų, įskaitant Sirt6, Sir2, Sod, p38b ir Sirt2, ekspresija gali būti susijusi su senėjimo procesu. S6k, raptor, Psn, Rpd3 ir N transkripto lygiai taip pat padidėjo, o tai rodo, kad CT(Cistanche Tubulosa)papildymas keičia jų TOR ir Notch takų signalo perdavimą. Be to, CT papildymas reikšmingai paveikė Nmdar1, Nmdar2 irSkpA mRNR ekspresiją. Siekiant pabrėžti KT svarbias baltymų sąveikas, kurios prailgina gyvenimo trukmę ir pagerina mokymąsi bei atmintį, buvo sukurtas literatūroje pagrįstas qPCR patikrintų genų baltymų sąveikos tinklas (6B pav.). Kiekvienas mazgas reiškia vieną baltymą, o kiekvienas kraštas reiškia vieną literatūra pagrįstą sąveiką. Mazgai suskirstyti į grupes pagal KEGG kelią ir genų ontologijos biologinį procesą (GOBP). Kaip parodyta 6B pav., GOBP neuroaktyvių ligandų ir receptorių sąveika, kuri turi įtakos mokymuisi ir atminčiai, ir kitas GOBPof senėjimas, kuris yra susijęs su gyvenimo trukme, yra susiję su Notch signalizacijos keliu. Be to, senėjimo GOBP turi įtakos mTOR signalizacijos kelias. KT sukeltos genų per didelės ekspresijos reikšmė šiems GOBP ir keliams aprašyta Diskusijų skyriuje.

6 pav. Skirtingai išreikštų genų tinklo analizė. Musės, iš anksto apdorotos 5,4 ir 10,8 mg/ml KT(Cistanche Tubulosa)ir kontrolinės dietos 25 laipsnių temperatūroje 20 dienų buvo renkamos siekiant kiekybiškai įvertinti diferencinę genų ekspresiją. (A) Santykiniai tikslinių genų transkripto lygiai iki kontrolinių grupių buvo kiekybiškai įvertinti naudojant qPCR. n=4 kiekvienai grupei. (B) Sureguliuoti genai, susiję su ląstelių signalo perdavimu, ir jų sąveikos tinklas. Mazgai atstovauja genams. Genai, kurių ekspresija yra pernelyg didelė, apibrėžiami žaliai. Kraštai rodo sąveiką tarp genų produktų. Sąveikos tipai paveiksle pažymėti skirtingomis spalvomis. (Norėdami išaiškinti nuorodas į spalvą šioje paveikslo legendoje, skaitytojas kreipiasi į šio straipsnio internetinę versiją.)

Diskusija

Disbalansas tarp laisvųjų radikalų susidarymo ir pašalinimo endogeninėmis antioksidacinėmis apsaugos sistemomis gali sukelti oksidacinę žalą audiniams su amžiumi; Taigi spėjama, kad laisvieji radikalai vaidina svarbų vaidmenį senstant (Dato ir kt., 2013). Čia mes parodėme, kad CT(Cistanche Tubulosa)musių papildai prailgina gyvenimo trukmę ir lemia aukštą atsparumą oksidacinei žalai, kurią sukelia H2O2 ir parakvatas, abiejų lyčių atstovams. Tyrimai koreliavo su KT(Cistanche Tubulosa)ir senėjimą stabdantys, yra mažiau tyrinėjami, tačiau C. deserticola ekstraktai gali pailginti į senėjimą linkusių pelių 8 (SAM-P8) pelių gyvenimo trukmę (Zhang ir kt., 2014) ir echinakozidą, vieną iš pagrindinių KT junginių. , turi teigiamą poveikį C. elegans gyvenimo trukmės pailgėjimui ir atsparumui stresui (Wang ir kt., 2015).

Naujausi tyrimai su gyvūnais parodė, kad echinakozidas turi apsauginį poveikį nuo bisfenolio A sukelto toksiškumo sėklidėms ir stiprina testosterono biosintezę, indukuodamas sėklidžių steroidgeninius fermentus, įskaitant CYP11A1, 3 -HSD ir CYP17A1 (Jiang ir kt., 2016). KT(Cistanche Tubulosa)etanolio ekstraktas taip pat skatina žiurkių spermos gyvybingumą ir kokybę (Wang ir kt., 2016). Nors koreliacija tarp KT(Cistanche Tubulosa)ir estrogeną vis dar reikia ištirti, vienas tyrimas pranešė, kad echinakozidas žymiai padidina estrogenų receptorių ekspresiją, panašiai kaip estradioliu gydytų žiurkių, kurių kiaušidės pašalintos, grupėje (Li ir kt., 2013). Kadangi reprodukcinis pajėgumas neigiamai koreliuoja su amžiumi (Kenyon, 2005), ištyrėme, ar KT yra naudinga senoms musėms. Reprodukcinis tinkamumas paveiktas KT(Cistanche Tubulosa)buvo pastebėtas tik patelėms, o tai rodo, kad muselių patelės gali labiau reaguoti į KT(Cistanche Tubulosa)papildymas. Šie rezultatai rodo, kad KT gali turėti į lytinius hormonus panašų poveikį ir uždelsti reprodukcinį senėjimą, atitinkantį klinikinį KT naudojimą.(Cistanche Tubulosa)žmonių seksualinei disfunkcijai gydyti.

Akteozidas gali paaiškinti apsauginį poveikį, mažinantį neuronų apoptozę ir atminties praradimą senstančios pelės modelyje, kurį sukelia D-galaktozės ir AlCl3 derinys, o tai rodo, kad CT gali turėti neuroprotekcinių ir atminties stiprinimo savybių (Gao ir kt., 2015); Peng ir kt., 2015). Mūsų duomenys parodė, kad atminties formavimasis pagerėjo jaunoms muselėms, papildytoms KT. Todėl įvertinome, ar KT(Cistanche Tubulosa)Papildymas yra naudingas atminties išsaugojimui senstant, nes žinoma, kad senstant kognityvinės funkcijos silpnėja. Mūsų rezultatai atskleidė, kad KT gali palengvinti kelių tipų AMI, įskaitant mokymąsi, 3- ir 24-h atmintį.(Cistanche Tubulosa)papildymas 20 dienų.Pagal anksčiau minėtus rezultatus, KT(Cistanche Tubulosa)papildymas gali turėti teigiamą poveikį ilgaamžiškumui ir atminties formavimuisi, taip pat pakankamai atitolinti AMI.

Naudojant gyvūnų modelius, lengviau nustatyti galimus mechanizmus ir KT priklausomybę nuo kelio(Cistanche Tubulosa)sulėtinti smegenų senėjimą ir atidėti AMI ląstelių lygiu. Mes sutelkėme dėmesį į molekulinius mechanizmus, kuriais grindžiamas senėjimas, neuronų perdavimas ir oksidacinis stresas, ir nusprendėme, kad su AMI ir ilgaamžiškumu susijusius genus galima nustatyti tiriant skirtingą ekspresiją tarp kontrolės ir CT grupių naudojant qPCR. Notch signalizacijos kelias yra labai konservuotas tarp rūšių nuo Drosophila iki žmonių; jis pasireiškia suaugusiųjų centrinėje nervų sistemoje dėl nervų plastiškumo ir reguliuoja nervų diferenciaciją kartu su jo slopinimu vystymosi metu (Presente ir kt., 2001). Pelėms, turinčioms heterozigotinę Notch mutaciją, trūksta erdvinio mokymosi ir atminties (Costa ir kt., 2003). Presenilinas (Psn) reikalingas norint suaktyvinti Notch skilimą į Notch intraląstelinį domeną, o Psn išjungimas sukelia sinapsinio plastiškumo ir atminties formavimosi sutrikimą (Saura ir kt., 2004). Mūsų duomenys atskleidė nuo dozės priklausomą Notch ir Psn reguliavimą KT(Cistanche Tubulosa)papildytos musės, kurių išraiškos lygis nepakitęs, nutirpęs, o tai reiškia, kad Notch signalizacijos kelias yra stiprus atminties gerinimo mechanizmas papildant KT. Be Notch signalizacijos, N-metil-D-aspartato receptorių (NMDAR), glutamato ir D-serino varomų jonų kanalų neuronuose, kontroliuoja sinapsinį plastiškumą ir atminties funkciją (Furukawa ir kt., 2005). Drosophila genome yra du NMDAR subvienetai, Nmdar1 ir Nmdar2, ir abu yra labai svarbūs atminties funkcijai. Nmdar1 numušimas Drosophila pablogina mokymąsi ir atmintį (Xia ir kt., 2005), o Nmdar2 per didelis ekspresija pelėse pagerina mokymąsi ir atmintį (Tang ir kt., 2001). Mūsų duomenys parodė, kad nuo dozės priklausomas Nmdar1 ir Nmdar2 reguliavimo padidėjimas KT papildytose muselėse, o tai rodo kitą galimą atminties pagerinimo mechanizmą naudojant KT.(Cistanche Tubulosa)papildymas.

Forkhead box transkripcijos faktoriaus (FoxO) kelio O klasė yra išsaugota tarp rūšių ir labai svarbi medžiagų apykaitai, atsparumui stresui ir gyvenimo trukmės pailgėjimui (Lehtinen ir kt., 2006). Potransliacinės modifikacijos, įskaitant fosforilinimą, acetilinimą ir ubikvitiliavimą, reguliuoja FoxOs aktyvumą (van der Horst ir Burgering, 2007). Tylusis informacijos reguliatorius 2 (Sir2; žinduolių homologas žinomas kaip SIRT1) reguliuoja FoxO aktyvumą per deacetilinimą ir daro įtaką gyvūnų gyvenimo trukmei, susijusiai su insulino tipo augimo faktoriaus (IGF) keliu (Lemieux ir kt., 2005). Sirt6 defosforilina FoxO, kad pailgintų pelių patinų gyvenimo trukmę (Kanfi ir kt., 2012). Mūsų duomenys atskleidė „Sir2“ ir „Sirt6“ padidintą reguliavimą CT papildytose musėse, o tai reiškia, kad „FoxO“ reguliavimas marškinėliais gali būti stiprus CT gyvenimo trukmės pailginimo mechanizmas.(Cistanche Tubulosa)papildymas. Laisvieji radikalai, susidarantys medžiagų apykaitos procesų metu, pažeidžia DNR ir baltymus, todėl sutrumpėja gyvenimo trukmė. Sir2 taip pat yra oksidacinio streso atsako genas (Whitaker ir kt., 2013), o per daug išreikšta superoksido dismutazė (SOD), kuri, naudodama katalazę ir glutationo peroksidazę, paverčia O2− į H2O2 ir galiausiai į H2O, prailgina musių gyvenimo trukmę. Le Bourg, 2001). Mūsų duomenys atskleidė nuo dozės priklausomą Sod ir Sir2 reguliavimą KT papildytose musėse, o tai rodo, kad antioksidaciniai keliai gali būti stiprus KT gyvenimo trukmės pailginimo mechanizmas.(Cistanche Tubulosa)papildymas.

Kitas svarbus senėjimo būdas yra reguliuojamas mTOR kompleksų mTORC1 ir mTORC2, kurie abu skatina organizmo formavimąsi evoliuciniu konservatyviu būdu. Signalai iš insulino receptoriaus aktyvina mTORC1 per fosfoinozitido 3-kinazės – Akt kelią, kad skatintų baltymų sintezę ir uždegimą bei slopintų autofagiją ir glikolizę, naudojant skirtingus baltymus pasroviui (Johnson ir kt., 2013). Baltymų sintezę suaktyvina ribosomų baltymo S6 kinazė (S6K), kuri sudaro neigiamą grįžtamojo ryšio kilpą, kad slopintų insulino receptorių signalizaciją (Hands ir kt., 2009). Slopinamasis mTORC1 taikinys yra Drosophila baltymas, panašus (sima), kurio homologas žinduoliuose yra žinomas kaip hipoksijos indukuojamas faktorius 1 alfa (HIF1). HIF1 atlieka apsauginį vaidmenį nuo amžiaus priklausomų kraujagyslių ir motorinių neuronų pažeidimų (Oosthuyse ir kt., 2001; Rivard ir kt., 2000). Mūsų duomenys atskleidė nepakitusią mTOR kompleksinių subvienetų, įskaitant Tor, rictor ir raptor, ekspresijos lygį. kadangi CT(Cistanche Tubulosa)Nuo dozės priklausomas papildymas padidino S6K ir sima reguliavimą, o tai reiškia apsauginį CT vaidmenį(Cistanche Tubulosa)prieš mTOR aktyvumą.

Išvados

Nepaisant to, kad buvo nustatyti kai kurie susiję būdai, ilgaamžiškumas ir aukštas intelektas prisidėjo prie KT(Cistanche Tubulosa)intervencija gali būti apoligeninis bruožas, paveiktas kelių genų sąveikos, o kiti genetiniai veiksniai, kurių mes neišsiaiškiname, taip pat gali moduliuoti senėjimo procesą. Vyresnio amžiaus žmonėms, norint atidėti demenciją ir lėtines ligas arba jų išvengti, svarbu išlaikyti pageidaujamą fizinį pasirengimą ir pažintinius gebėjimus iš senėjimo tyrimų. Kadangi CT(Cistanche Tubulosa), žinomas kaip "dykumos ženšenis", turi ryškų gydomąjį poveikį inkstų yang stiprinimui, kuris maitina visus organus ir papildo gyvybiškai svarbią tradicinės kinų medicinos esmę, manome, kad mūsų tyrimas pateikia įrodymų, patvirtinančių klinikinį KT gydymą.(Cistanche Tubulosa)ir gali suteikti vertingos informacijos kuriant naujus vaistus ar maisto priedus, kurie ne tik sulėtintų senėjimą ir su amžiumi susijusias ligas, bet ir pagerintų žmonių gyvenimo kokybę.

Interesų konfliktas

Autoriai pareiškia, kad neturi interesų konfliktų.

Padėkos

Šį darbą palaikė Kinijos medicinos universitetas (CMU103-S-25); Kinijos medicinos universiteto ligoninė (DMR-101-065, DMR-103-099); Taivano mokslo ir technologijų ministerija (NSC 102-2632-B-039-001-MY3, MOST 104-2632-B-039-002) ​​ir iš dalies Taivano sveikatos ir gerovės ministerijos klinikinių tyrimų ir tyrimų centras tobulumo (MOHW105-TDU-B-212-133019).

Papildomos medžiagos

Papildomą medžiagą, susijusią su šiuo straipsniu, galite rasti internetinėje versijoje adresu doi:10.1016/j.phymed.2017.01.006.

Iš: „Molekuliniai keliai, susiję su ilgaamžiškumo skatinimu ir pažinimo gerinimuCistanche tubulosaDrosofiloje'Wei-Yong Lin ir kt

--W.-Y. Lin ir kt. / Fitomedicina 26 (2017) 37–44

Nuorodos

Burke, SN, Barnes, CA, 2010. Senescinės sinapsės ir hipokampo grandinės dinamika. Neurosci tendencijos. 33, 153–161.

Costa, RM, Honjo, T., Silva, AJ, 2003. Mokymosi ir atminties trūkumai Notch mutantų pelėse. Curr. Biol. 13, 1348–1354.

Dato, S., Crocco, P., D'Aquila, P., de Rango, F., Bellizzi, D., Rose, G., Passarino, G., 2013. Genetinio kintamumo ir gyvenimo būdo vaidmuo oksidaciniame atsakas į stresą sveikam senėjimui ir ilgaamžiškumui. Tarpt. J. Mol. Sci. 14, 16443–16472.

Dubnau, J., Grady, L., Kitamoto, T., Tully, T., 2001. Neurotransmisijos sutrikimas Drosophila grybų kūne blokuoja atmintį, bet ne įsisavina atmintį. Gamta 411, 476–480.

Franceschini, A., Szklarczyk, D., Frankild, S., Kuhn, M., Simonovic, M., Roth, A., Lin, J., Minguez, P., Bork, P., von Mering, C. , Jensen, LJ, 2013. STRING v9.1: baltymų ir baltymų sąveikos tinklai su didesne aprėptimi ir integracija. Nucleic Acids Res. 41, D808–D815.

Furukawa, H., Singh, SK, Mancusso, R., Gouaux, E., 2005. Subvienetų išdėstymas ir funkcija NMDA receptoriuose. Gamta 438, 185–192.
Gao, L., Peng, XM, Huo, SX, Liu, XM, Yan, M., 2015. Akteozido (Verbascoside) atminties stiprinimas senstančių pelių modelyje, kurį sukelia D-gal ir AlCl3 derinys. Fitoteris. Res. 29, 1131–1136.
Guo, Q., Zhou, Y., Wang, CJ, Huang, YM, Lee, YT, Su, MH, Lu, J., 2013. Atviras, ne placebu kontroliuojamas tyrimasCistanche tubulosaglikozidų kapsulės (Memoregain((R))), skirtos vidutinio sunkumo Alzheimerio ligai gydyti. Esu. J. Alzheimerio liga. Kiti Demenai. 28, 363–370.
Hands, SL, Proud, CG, Wyttenbach, A., 2009. mTOR vaidmuo senstant: baltymų sintezė ar autofagija? Senėjimas (Albanis, NY) 1, 586–597.
Jiang, Z., Wang, J., Li, X., Zhang, X., 2016. Echinakozidas irCistanche tubulosa(Schenk) R. Wightas pagerino bisfenolio A sukeltą sėklidžių ir spermos pažeidimą žiurkėms, naudodamas lytinių liaukų ašies reguliuojamus steroidogeninius fermentus. J. Ethnopharmacol 193, 321–328.
Jiao, X., Sherman, BT, Huang da, W., Stephens, R., Baseler, MW, Lane, HC, Lempicki, RA, 2012. DAVID-WS: nuolatinė žiniatinklio paslauga, palengvinanti genų / baltymų sąrašo analizę. Bioinformatika 28, 1805–1806.
Johnson, SC, Rabinovitch, PS, Kaeberlein, M., 2013. mTOR yra pagrindinis senėjimo ir su amžiumi susijusių ligų moduliatorius. Gamta 493, 338–345.
Kanfi, Y., Naiman, S., Amir, G., Peshti, V., Zinman, G., Nahum, L., Bar-Joseph, Z., Cohen, HY, 2012. Sirtuinas SIRT6 reguliuoja vyrų gyvenimo trukmę pelėms. Gamta 483, 218–221.
Kenyon, C., 2005. Senėjimo plastiškumas: ilgaamžių mutantų įžvalgos. 120 langelis, 449–460.
Le Bourg, E., 2001. Drosophila melanogaster oksidacinis stresas, senėjimas ir ilgaamžiškumas. FEBS Lett. 498, 183–186.
Lehtinen, MK, Yuan, Z., Boag, PR, Yang, Y., Villen, J., Becker, EB, DiBacco, S., de la Iglesia, N., Gygi, S., Blackwell, TK, Bonni, A., 2006. Konservuotas MST-FOXO signalizacijos kelias tarpininkauja oksidacinio streso atsakams ir prailgina gyvenimo trukmę. Ląstelė 125, 987–1001.
Lemieux, ME, Yang, X., Jardine, K., He, X., Jacobsen, KX, Staines, WA, Harper, ME, McBurney, MW, 2005. Sirt1 deacetilazė moduliuoja į insuliną panašų augimo faktoriaus signalizacijos kelią žinduoliai. Mech. Aging Dev. 126, 1097–1105.
Li, F., Yang, X., Yang, Y., Guo, C., Zhang, C., Yang, Z., Li, P., 2013. Echinakozido antiosteoporozinis aktyvumas žiurkių kiaušialąstėse. Fitomedicina 20, 549–557.
Li, Z., Lin, H., Gu, L., Gao, J., Tzeng, CM, 2016. Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): viena geriausių tradicinės kinų medicinos farmacijos dovanų. Front Pharmacol. 7, 41.
Lin, S., Ye, S., Huang, J., Tian, ​​Y., Xu, Y., Wu, M., Wang, J., Wu, S., Cai, J., 2013. Kaip veikia kinų kalba inkstus tonizuojantys vaistai slopina dopaminerginių neuronų apoptozę? Neuroninis Regenas. Res. 8, 2820–2826.

Oosthuyse, B., Moons, L., Storkebaum, E., Beck, H., Nuyens, D., Brusselmans, K., Van Dorpe, J., Hellings, P., Gorselink, M., Heymans, S. , Theilmeier, G., Dewerchin, M., Laudenbach, V., Vermylen, P., Raat, H., Acker, T., Vleminckx, V., Van Den Bosch, L., Cashman, N., Fujisawa, H., Drost, MR, Sciot, R., Bruyninckx, F., Hicklin, DJ, Ince, C., Gressens, P., Lupu, F., Plate, KH, Robberecht, W., Herbert, JM, Collen , D., Carmeliet, P., 2001. Hipoksijos atsako elemento ištrynimas kraujagyslių endotelio augimo faktoriaus promotoriuje sukelia motorinių neuronų degeneraciją. Nat. Genet. 28, 131–138.

Peng, XM, Gao, L., Huo, SX, Liu, XM, Yan, M., 2015. D-gal ir AlCl3 derinio sukeltas akteozido (Verbascoside) atminties stiprinimo mechanizmas senosios pelės modelyje. Phytother, Res. 29, 1137–1144.
Presente, A., Andres, A., Nye, JS, 2001. Reikalavimas Notch suaugusiems neurologinei funkcijai ir ilgaamžiškumui. Neuroreport 12, 3321–3325.
Rivard, A., Berthou-Soulie, L., Principe, N., Kearney, M., Curry, C., Branellec, D., Semenza, GL, Isner, JM, 2000. Nuo amžiaus priklausomas kraujagyslių endotelio augimo defektas faktoriaus ekspresija yra susijusi su sumažėjusiu hipoksijos sukeliamu 1 faktoriaus aktyvumu. J. Biol. Chem. 275, 29643–29647.
Saura, CA, Choi, SY, Beglopoulos, V., Malkani, S., Zhang, D., Rao, Shankaranarayana, Chattarji, BS, Kelleher, S., 3rd, RJ, Kandel, ER, Duff, K., Kirkwood , A., Shen, J., 2004. Praradus presenilino funkciją, pablogėja atmintis ir sinapsinis plastiškumas, o vėliau atsiranda nuo amžiaus priklausoma neurodegeneracija. Neuron 42, 23–36.
Schimanski, LA, Barnes, CA, 2010. Nervų baltymų sintezė senstant: poveikis plastiškumui ir atminčiai. Priekinės senėjimo neurozės. 2. Seok, J., Kim, TS, Kwon, HJ, Lee, SP, Kang, MH, Kim, BJ, Kim, MN, 2015. VeiksmingumasCistanche Tubulosair Laminaria Japonica ekstraktai (MK-R7) papildo, kad išvengtų raštuoto plaukų slinkimo ir pagerintų galvos odos sveikatą. Clin. Nutr. Res. 4, 124–131.
Tang, YP, Wang, H., Feng, R., Kyin, M., Tsien, JZ, 2001. Diferencinis sodrinimo poveikis mokymuisi ir atminties funkcijai NR2B transgeninėse pelėse. Neurofarmakologija 41, 779–790.
van der Horst, A, Burgering, BM, 2007. FoxO baltymų vaidmens pabrėžimas gyvenimo trukme ir ligose. Nat. kun. Mol. Ląstelė. Biol. 8, 440–450.
Wang, T., Chen, C., Yang, M., Deng, B., Kirby, GM, Zhang, X., 2016 m.Cistanche tubulosaetanolio ekstraktas tarpininkauja žiurkių lytinių hormonų lygiui indukuodamas sėklidžių steroidgeninius fermentus. Pharm. Biol. 54, 481–487.
Wang, T., Zhang, X., Xie, W., 2012 m.Cistanche deserticolaYC Ma, „Dykumos ženšenis“: apžvalga. Esu. J. Chinas. Med. 40, 1123–1141.
Wang, X., Zhang, J., Lu, L., Zhou, L., 2015. Echinakozido ilgaamžiškumo poveikis Caenorhabditis elegans, tarpininkaujant daf-16. Biosci. Biotechnol. Biochem. 79, 1676–1683.
Whitaker, R., Faulkner, S., Miyokawa, R., Burhenn, L., Henriksen, M., Wood, JG, Helfand, SL, 2013. Padidėjusi Drosophila Sir2 ekspresija prailgina gyvenimo trukmę priklausomai nuo dozės. Senėjimas (Albanis, NY) 5, 682–691.
Wu, CR, Lin, HC, Su, MH, 2014. Vandeninių ekstraktų panaikinimasCistanche tubulosadėl elgesio trūkumų į Alzheimerio ligą panašiame žiurkės modelyje: svarba amiloido nusėdimui ir centrinio neurotransmiterio funkcijai. BMC papildymas. Altern. Med. 14, 202.
Xia, S., Miyashita, T., Fu, TF, Lin, WY, Wu, CL, Pyzocha, L., Lin, IR, Saitoe, M., Tully, T., Chiang, AS, 2005. NMDA receptoriai tarpininkauja uoslės mokymasis ir atmintis Drosofiloje. Curr. Biol. 15, 603–615.
Zhang, K., Ma, X., He, W., Li, H., Han, S., Jiang, Y., Wu, H., Han, L., Ohno, T., Uotsu, N., Yamaguchi, K., Ma, Z., Tu, P., 2014. Cistanche deserticola ekstraktai gali antagonizuoti imunosenescenciją ir pailginti senėjimo pagreitintos pelės gyvenimo trukmę
Palinkusios 8 (SAM-P8) Pelės. Evid. Remiantis papildymu. Alternatyva. Med. 2014 m., 601383.
Zhao, Q., Gao, J., Li, W., Cai, D., 2010. Echinakozido neurotrofinis ir neurogelbėjimo poveikis poūmiame Parkinsono ligos MPTP pelės modelyje. Brain Res. 1346, 224–236.