Pelės audiniuose gyvenantys pilvaplėvės makrofagai homeostazės, taisymo, infekcijos ir naviko metastazių 1 dalis

1. Įvadas

Pilvaplėvės ertmė, taip pat pleuros ir perikardo ertmės, susidaro iš embriono celomo, ertmės, susidariusios susidarius embriono kūno sienelei, kurią sudaro parietalinės plokštelės mezoderma ir ektoderma, ir žarnos sienelė, kurią sudaro visceralinis. plokštelinė mezoderma ir endoderma.

Embriono celomas yra svarbi struktūra embriono formavimosi procese, o jo išvaizda žymi embriono vystymąsi į blastocistos stadiją. Blastocistos stadijos metu embrionas sukuria skysčiu užpildytą maišelį, vadinamą koelomu.

Embrioninis koelomas vaidina labai svarbų vaidmenį embriono vystymesi. Jis sudaro aplinką embrionui maitintis ir kvėpuoti, taip pat gali pašalinti atliekas. Be to, embriono koelomas taip pat gali suteikti tam tikrą embriono apsaugą. Galima sakyti, kad be embriono kūno ertmės embrionas negali normaliai vystytis.

Kita vertus, imunitetas taip pat yra vienas esminių žmogaus vystymosi veiksnių. Imunitetas gali apsaugoti organizmą nuo išorinių mikrobų ir virusų, taip pat gali padėti mums kovoti su įvairiomis ligomis. Kadangi embrionų imuninė sistema dar nėra visiškai išsivysčiusi, embrionas remiasi motinos imunine sistema.

Nors embriono kūno ertmė ir imunitetas gali atrodyti nesusiję, tarp jų iš tiesų yra tam tikras ryšys. Keletas tyrimų parodė, kad embrioninio koelomo aplinka vaidina svarbų vaidmenį formuojant imunitetą. Pavyzdžiui, embriono kūno ertmėje yra tam tikrų augimo faktorių, kurie gali skatinti imuninės sistemos vystymąsi. Be to, embriono kūno ertmėje esantis skystis maitina ir apsaugo imunines ląsteles.

Apibendrinant galima pasakyti, kad ryšys tarp embriono celomo ir imuniteto yra labai glaudus. Embriono koelomas sudaro gerą aplinką embriono vystymuisi, taip pat sudaro palankias sąlygas imuninei sistemai vystytis. Todėl turėtume branginti embriono koelomo svarbą ir sutelkti dėmesį į savo imuniteto apsaugą ir skatinimą. Šiuo požiūriu turime stiprinti savo imunitetą. Cistanche gali ženkliai pagerinti imunitetą, nes mėsos pelenuose yra įvairių biologiškai aktyvių komponentų, tokių kaip polisacharidai, du grybai, Huang Li ir kt. Šie komponentai gali stimuliuoti imuninę sistemą Įvairių tipų sistemos ląstelės, padidinti jų imuninį aktyvumą.

Spustelėkite cistanche naudą sveikatai

Procesas, kurio metu susidaro embrioninis celomas, buvo išsaugotas iš primityvios superfilos Protostomijos ir Deuterostomos, todėl Annelida, Mollusca, Echinodermata ir Tunicata genties bestuburiai turi celominę ertmę, anatomiškai ir vystymosi požiūriu lygiavertę embrioninei celomai[2] kuri sukuria pilvaplėvės, pleuros ir perikardo ertmes žinduolių embriono vystymosi metu.

Pilvaplėvės ertmę dengia pilvaplėvė – didžiausia kūno serozinė membrana, kurios paviršiaus plotas panašus į odos plotą, susidedantis iš mezotelio, mezoderminės kilmės epitelio, bazinės membranos ir submezotelinio jungiamojo audinio. 3]

Parietalinė pilvaplėvė iškloja vidinį pilvo sienos paviršių, o visceralinė pilvaplėvė integruojasi su intraabdominalinių organų seroziniais sluoksniais.

Dviguba pilvaplėvės raukšlė sudaro mezenteriją, kuri jungia pilvo virškinimo organus su pilvo sienele ir yra kraujagyslių, nervų ir limfos kanalas. Nedidelis pilvaplėvės skysčio kiekis, kurį išskiria mezotelio ląstelės, tarnauja kaip lubrikantas pilvaplėvės ertmėje ir apsaugo nuo mechaninės trinties tarp pilvo organų. Dviejuose naujausiuose pranešimuose nustatyta, kad pelių pilvaplėvės skysčio tūris pastovioje būsenoje yra apie 50–100 μL [4,5], ir teigiama, kad jis skiriasi tarp patinų ir patelių (≈20 μL ir ≈100 μL) ir, pastarosiose pasikeisti rujos ciklo metu.[6] Pilvaplėvės skysčio nutekėjimas į limfinę sistemą leidžia pilvaplėvės skysčiui recirkuliuoti[7] ir pasiekiamas per mezotelio angas, vadinamas stomatomis, kurios daugiausia yra diafragmoje ir omentumoje.[3]

Omentum yra visceralinis riebalinis audinys, kuris išsivysto peraugant mezenterijai ir turi specializuotą kraujagyslių sistemą bei organizuotą limfoidinį audinį, kuris, kaip teigiama, vaidina svarbų vaidmenį saugantis nuo pilvaplėvės infekcijos.[8] Per diafragmą nutekėjęs pilvaplėvės skystis susirenka į subperitoninius limfinius plyšius, kad pasiektų diafragmą, surenkančią limfagysles, kurios nuteka į tarpuplaučio limfmazgius, o pilvaplėvės skystis, nutekėjęs per omentumą, kaupiasi pilvaplėvės limfmazgiuose, kurie savo ruožtu kaupiasi į žarnyno limfmazgius. jungiasi su krūtinės ląstos lataku per cisterna chyli.[3] Pilvaplėvės ertmės drenažas leidžia kontroliuoti pilvaplėvės homeostazę ir leukocitų recirkuliaciją, tačiau padidina patogeno ir metastazavusių naviko ląstelių plitimo riziką.

Pilvaplėvės ertmę veikia dvi pagrindinės patologijos – infekcija ir naviko metastazės, paprastai susijusios su dideliu mirtingumu, nes patogenai arba naviko ląstelės lengvai plinta po pilvo organus, ir dėl anatominių pilvaplėvės ertmės ypatybių, kurios labai trukdo veiksmingų šių ligų gydymo būdų kūrimas. Nors pilvaplėvės ertmė yra uždara erdvė, kuri nėra lengvai veikiama patogeninių mikroorganizmų, pavyzdžiui, prasiskverbiančių per odą, plaučius ar žarnyną, pilvaplėvės infekcijos gali atsirasti dėl žarnyno sienelės vientisumo praradimo (dėl opų, išvaržų pasmaugimo). , apendicitas ar naviko augimas), kepenų cirozė, atsitiktiniai pilvo sužalojimai, pilvo operacija arba peritoninė dializė.

Pilvaplėvės ertmę taip pat veikia parietalinės ar visceralinės pilvaplėvės traumos, sukeltos traumos, infekcijos ar pilvo operacijos, dėl kurių gali atsirasti pilvaplėvės sąaugų. Papildomos pilvaplėvės ertmės patologijos yra pilvaplėvės endometriozė, apimanti negimdinio kraujagyslinio endometriumo audinio susidarymą pilvaplėvėje, susijusią su lėtiniu uždegimu; pilvaplėvės autoimuninis serozitas, lėtinis pilvaplėvės uždegimas, kurį sukelia autoimuninės ligos, pvz., Krono liga ir pooperacinis. pilvaplėvės sąaugų.[3,9,10]

Imuninė apsauga nuo pilvaplėvės infekcijų ir naviko metastazių priklauso nuo pirmosios vietinės gynybos linijos, kurią palaiko nuolatinės pilvaplėvės imuninės ląstelės, esančios pilvaplėvės ertmėje esant pastoviai būsenai, pasižyminčios įgimtomis imuniteto jutimo ir atsako savybėmis. Antrąją imuninės gynybos liniją pilvaplėvės ertmėje užtikrina funkciniai limfoidinio audinio vienetai, susieti su riebaliniu audiniu, esančiu omentum, mezenterijoje arba lytinių liaukų riebaluose, vadinamais riebalais susietais limfoidiniais klasteriais (FALC) arba pieninėmis dėmėmis, skirtomis tepaliniams FALC. [8] FALC turi struktūrinę struktūrą, panašią į tą, kuri yra antriniuose limfoidiniuose organuose, įskaitant tinklinių ląstelių stromą, B ir T ląstelių skyrius ir specializuotas kraujo ir limfos kraujagysles, leidžiančias leukocitams migruoti į pilvaplėvės ertmę ir iš jos.[8]

Rezidentinės pilvaplėvės imuninės ląstelės apima audiniuose gyvenančius pilvaplėvės makrofagus, paprastai vadinamus dideliais pilvaplėvės makrofagais (LPM) ir B1 ląstelėmis. Naujausi eksperimentiniai įrodymai atskleidė, kad, be pagrindinės fagocitinės funkcijos, LPM atlieka skirtingas homeostazines, taisymo ir imunologines gynybos funkcijas, kurios atspindi anksčiau netikėtą funkcinį plastiškumą.[11] Pilvaplėvės B1 ląstelės laikomos įgimtomis panašiomis B ląstelėmis, kurios iš esmės gamina natūralų IgM, užtikrindamos vietinę imuninę apsaugą nuo įvairių patogenų.

Be to, B1 ląstelės aktyviai gamina IgM, reaguodamos į virusus, bakterijas, grybelius ir parazitus.[12] Pirmoji žinduolių pilvaplėvės ertmės imuniteto linija, pagrįsta fagocitiniais ir antikūnų tarpininkaujamais gynybos mechanizmais, palaikomais LPM ir B1 ląstelių, primena primityvius gynybos mechanizmus, kuriuos palaiko skirtingos bestuburių celomocitų populiacijos. 13–15] Todėl imuninės gynybos strategijos celominės ertmėse buvo labai konservuotos per visą evoliuciją nuo bestuburių iki aukštesnių stuburinių.

Šioje apžvalgoje aptariame naujausius įrodymus, praplėtusius mūsų žinias apie LPM biologiją, aprašydami reziduojančių embrioninių LPM pakeitimo iš kaulų čiulpų monocitų gautais LPM (moLPM), dėl kurių atsiranda fenotipinis ir funkcinis LPM seksualinis dimorfizmas, mechanizmus ir atskleidžiama, kaip LPM, laisvi skystoje aplinkoje, esant pastoviai būsenai, atlieka taisymo ir imuninės gynybos funkcijas, formuodami į trombą panašias struktūras, reaguodami į pilvaplėvės pažeidimą, o po bakterinės infekcijos su mezoteliu suriša dinaminius LPM agregatus.

Be to, naujausi eksperimentiniai įrodymai patvirtina, kad pilvaplėvės navikai gali sutrikdyti LPM metabolizmą, todėl gali įgyti naviką skatinančių funkcijų, kurios vis dėlto gali būti pakeistos eksperimentinėmis strategijomis, blokuojančiomis naviko sukeltą LPM funkcijos pavertimą, o tai galėtų būti vystymosi pagrindas. naujų imunoterapinių metodų prieš pilvaplėvės naviko metastazes, pagrįstus makrofagų perprogramavimu.

2. Didelio pilvaplėvės makrofagų tapatybė

LPM yra ilgaamžiai, audiniuose gyvenantys makrofagai, susidarę embriono gyvenimo metu, vystymosi ir funkcionalumo požiūriu apsiribojantys pilvaplėvės ertmėje, priešingai nei kitos pilvaplėvės imuninių ląstelių populiacijos, kurios yra įtraukiamos į pilvaplėvės ertmę ir recirkuliuoja į kitas vietas esant pastoviai būsenai, ir patologinėmis sąlygomis. Tai yra pastovios būsenos B1 ląstelės, kurios kartu su LPM sudaro didžiąją dalį ląstelių, surinktų pilvaplėvės plovimu, ir mažas procentas iš monocitų gaunamų SPM (mažiems pilvaplėvės makrofagams), B2 ląstelės, T ląstelės, NK ląstelės. , įgimtos limfoidinės ląstelės ir putliosios ląstelės.[11]

Kaip išsamiai aptarta šioje apžvalgoje, per pastaruosius metus atlikti tyrimai parodė, kad LPM ne tik atlieka pilvaplėvės homeostatines funkcijas, bet ir yra susiję su uždegimo ir infekcijų sukeltų audinių pažeidimo taisymu bei apsauga nuo mikrobinės infekcijos. Be to, LPM prisideda prie daugumos pilvaplėvės patologijų, ypač prie pilvaplėvės naviko metastazių, taip pat prie pilvaplėvės endometriozės, autoimuninio serozito ir pooperacinių sąaugų.

Rezidentinės embrioninės LPM yra CD11b ir F4/80hi MHC-II− ląstelės, ekspresuojančios daugybę žymenų, apibūdinančių audiniuose reziduojančius makrofagus, tokius kaip CD14, CD64 ir MerTK.[16,17]

Be to, atrodo, kad audiniuose reziduojantys makrofagai, esantys serozinėse kūno ertmėse, kuriuos sudaro LPM ir audiniuose reziduojantys makrofagai, esantys pleuros ir perikardo ertmėse, turi vienodą transkripcijos faktoriaus GATA6, gaudyklės receptoriaus Tim4 ir M ekspresiją. -CSF receptorius CFSR1.[11,18] Be to, embrioniniams LPM rezidentams būdinga kelių ląstelių paviršiaus receptorių, atspindinčių LPM homeostatinę, taisymo, reguliavimo ir gynybos funkcijas, ekspresija, įskaitant molekules, dalyvaujančias LPM adhezijoje ir lokalizacijoje, pvz., ICAM. -2 (CD102), CD11b, CD49f, CD73 ir CD62P,[19] atpažįsta ir pašalina negyvas ląsteles, pvz., CD36, CD93, CD163, Tim4, MerTK, MARCO ir MSR1,[4,16,20 –22] neigiamas makrofagų aktyvacijos reguliavimas, užtikrinantis neuždegiminį apoptozinių ląstelių, tokių kaip V-set imunoglobulino domenas, turintis 4 (VSIG4) klirensą,[23] jungiantis patogenus, pvz., CD14, CD36 ir SIGN-R1 (CD209b). )[11,24] ir atsakas į patogenus, tokius kaip TLR4 ir TLR7.[25,26] Tipiškiausios ląstelės paviršiaus molekulės, išreikštos embrioniniais LPM, apibendrintos 1 paveiksle.

LPM priklauso audinyje gyvenančių makrofagų šeimai, kuri dalijasi su pagrindine linija susijusių genų ekspresija, nustatyta embriono gyvenimo metu, bet įgyja specifinių audinių transkripcijos ir funkcinių savybių, nustatytų veikiant audiniams būdingus mikroaplinkos signalus, per audinių ekspresiją. -specifiniai transkripcijos faktoriai.[16,27] Šiuo atžvilgiu transkripcijos faktorius GATA6 yra būtinas specifiniam LPM genų ekspresijai, proliferacijai ir LPM išlikimui.[19,28,29] Vadinasi, homeostatinis, taisomasis ir gynybinis LPM. pelėms, kurioms mieloidinėse ląstelėse trūksta GATA6, funkcijos buvo pažeistos.[5,19,30] GATA6 ekspresija palaikoma ne ląstelės autonominiu būdu[27,31] ir, remiantis eksperimentais in vitro, buvo pasiūlyta ją aktyvuoti vitamino A metabolitas retinoinė rūgštis per retinoinės rūgšties branduolinius receptorius.[19]

Taigi GATA6 raišką moduliuotų vietinis retinoinės rūgšties prieinamumas, o tai patvirtintų koncepciją, kad GATA6-sukelta LPM transkripcijos programa yra grįžtama[17], o tai būtų LPM funkcinio plastiškumo pagrindas, leidžiantis LPM, kad prireikus perjungtų iš homeostatinių į taisymo arba imuninės gynybos funkcijas.

Šiuo atžvilgiu LPM, perkeltos į alveolių erdvę, sumažino GATA6 reguliavimą ir įgijo alveolių makrofagų transkripcijos profilį [27]. Teigiama, kad retinoinė rūgštis, aktyvinanti GATA6 LPM, gaminama omentinės ir pilvaplėvės stromos ląstelėse.[19] Remiantis šiais stebėjimais, buvo teigiama, kad Wilmso naviko 1 (WT1) transkripcijos faktoriaus ekspresija mezotelio ir fibroblastinėmis stromos ląstelėmis, kurios skatina dviejų greitį ribojančių fermentų, kontroliuojančių retinolio metabolizmą, RALDH1 ir RALDH2, ekspresiją [32]. kontroliuoja GATA6 ekspresiją LPM ir GATA6 plius nuolatiniuose makrofaguose, esančiuose pleuros ir perikardo ertmėse, nes WT1 plius ląstelių išeikvojimas lėmė didelį šių makrofagų pogrupių sumažėjimą, kartu su Raldh1 ir Raldh2 transkriptų sumažėjimu [18]. toliau remia retinoinės rūgšties vaidmenį palaikant GATA6 ekspresiją, tačiau tai dar reikia oficialiai įrodyti.

Faktas, kad GATA{0}}trūkumo turinčiose pelėse CD11b plius makrofagai susikaupė pieno dėmėse, o LPM sumažėjo pilvaplėvės ertmėje[19], patvirtina hipotezę, kad retinoidinė rūgštis, kurią išskiria stemplės stromos ląstelės, palaiko GATA{ {3}}varoma transkripcijos programa LPM, ir tai reikštų, kad LPM nuolat cirkuliuoja per omentumą, tačiau tai dar reikia oficialiai įrodyti.

Retinoinė rūgštis yra retinoidinių X receptorių (RXR), kurie yra nuo ligandų priklausomų transkripcijos faktorių branduolinių receptorių superšeimos nariai, kurie kontroliuoja lipidų ir gliukozės metabolizmą ir atlieka pagrindinį vaidmenį uždegiminiuose ir autoimuniniuose sutrikimuose, ligandas.[33] Įdomu tai, kad pelėms, kurioms trūko RXR 𝛼 ir 𝛽, pasireiškė didelis naujagimių LPM išplitimo trūkumas ir sumažėjęs suaugusiųjų LPM išgyvenamumas dėl lipidų kaupimosi, dėl kurio atsiranda apoptozė, o tai atskleidžia, kad RXR prisideda prie LPM išplitimo ir palaikymo.[34] ATAC-seq analizės atskleidė, kad Gata6 lokusas parodė sumažintą chromatino prieinamumą RXR trūkumo turinčiose LPM, o tai koreliavo su mažesne Gata6 geno ekspresija, o tai patvirtina, kad RXR reguliuoja nuo GATA 6-priklausomą LPM transkripcijos programą.

Makrofagų kolonijas stimuliuojantis faktorius (M-CSF arba CFS1) kontroliuoja įsipareigojimą makrofagų linijai, todėl LPM diferenciacija priklauso nuo CFS1, kaip parodyta osteopetrozės (Csf1 op/op) pelėms, turinčioms Cfs1 geno mutaciją, dėl kurios atsiranda sugedusi LPM plėtra.[35] Be to, remiantis in vitro tyrimais, buvo pranešta, kad mezotelio ląstelės išskiria CSF1, kuris palaikė LPM proliferaciją mezotelio ląstelių ir LPM bendrose kultūrose; transwell tyrimai atskleidė, kad LPM proliferacija žymiai sumažėjo, kai buvo užkirstas kelias mezotelio ir LPM sąveikai, o tai rodo, kad ląstelių kontaktas prisidėjo prie LPM proliferacijos.[36] Koncepciją, kad LPM priežiūrai reikalingas iš mezotelio gautas CSF1, dar labiau patvirtina neseniai paskelbta ataskaita, rodanti, kad pelėms, kurių WT1 plius ląstelėse trūko CFS1, LPM buvo labai sumažėjęs.[37] Dar reikia ištirti, ar iš mezotelio ląstelių gautas CSF1 prisideda prie pastovaus LPM atsinaujinimo ir (arba) prie LPM proliferacijos uždegimo metu.

3. Didelių pilvaplėvės makrofagų kilmė ir pakeitimas homeostazėje

LPM diferencijuojasi embriono gyvenimo metu ir palaiko save in situ atsinaujindami suaugusiųjų gyvenime. Esant pastoviai būsenai, embrioniniai LPM palaipsniui, tačiau iš dalies, nuo vėlyvųjų embriono vystymosi stadijų pakeičiami nuolatiniais kaulų čiulpų molupais, kurie įgyja nuolatinį embriono LPM tapatumą, tačiau išlaiko kai kurias su jų kilme susijusias transkripcijos ir funkcines savybes.[38,39] ] Embrioninių LPM kilmė tebėra prieštaringa, nes buvo pranešta, kad jie atsiranda dėl dvigubo trynio maišelio makrofagų ir vaisiaus kepenų monocitų [40] arba tik iš vaisiaus kepenų monocitų[41]. Integruotas LPM kilmės ir pakeitimo modelis parodytas 2 paveiksle.

Kaip pranešė dr. F. Ginhoux laboratorija, embriono pakeitimas kaulų čiulpų monocitų kilmės audiniuose reziduojančiais makrofagais, esant pastoviai būsenai, aprašytas visose audiniuose gyvenančiose makrofagų populiacijose, išskyrus mikroglijas, Langerhanso ląsteles ir Kupfferio ląsteles. , naudojant likimo kartografavimo modelius, pagrįstus Ms4a3 geno, specifiškai išreikšto granulocitų-monocitų pirmtakų, ekspresija.[42] Atrodo, kad kaulų čiulpų monocitų kilmės makrofagais pakeitimo laipsnį iš esmės lemia nišos prieinamumas ir prieinamumas.[43] Nė viena iš audinių reziduojančių makrofagų populiacijų visiškai nepakeičiama kaulų čiulpų monocitų kilmės makrofagais, o tai rodo, kad kiekviename organe pasiekiama pusiausvyra tarp kaulų čiulpų monocitų prisitraukimo ir embrioninių bei kaulų čiulpų monocitų kilmės makrofagų proliferacijos ir išgyvenimo. [42]

Todėl suaugusiojo gyvenimo metu nuolatinis LPM baseinas palaikomas pastovioje būsenoje, derinant nuolatinių embrioninių LPM atsinaujinimą ir nuolatinių moLPM diferenciaciją bei savaiminį atsinaujinimą. Todėl šiame rankraštyje, jei nenurodyta kitaip, terminas LPM reiškia suaugusiųjų LPM populiaciją, kuri, esant pastoviai būsenai, apima nuolatinius embrioninius LPM ir nuolatinius moLPM. Įdomu tai, kad po lytinės brandos embriono LPM pakeitimo greitis yra didesnis vyrams, kurių LPM pasižymi didesniu proliferaciniu aktyvumu, kaip parodė dr. F. Ginhoux ir dr. S. Jenkins laboratorijose atliktos genetinės likimo analizės. pranešė apie pakeitimo dažnio skirtumus.[39,42] Ginhoux ir jo kolegos[42] nustatė didesnę moLPM dalį vyrams 8 savaičių ir 20 savaičių amžiaus (≈25 proc., palyginti su 10 proc. ir ≈50 proc., palyginti su 25 proc. , atitinkamai).

Priešingai, Jenkinsas ir jo kolegos[39] pranešė, kad ≈30 procentų nuolatinių moLPM buvo aptikta ir vyrams, ir moterims po 4 savaičių, tuo tarpu 16 savaičių vyrams buvo didesnė nuolatinių moLPM dalis (≈60 procentų, palyginti su 30 procentų). Seksualinį dimorfinį pakeitimą nuolatiniais moLPM buvo pasiūlyta kontroliuoti pilvaplėvės mikroaplinkos pokyčiais, atsirandančiais lytinio brendimo metu, nepriklausomai nuo estrogenų lygio ir pilvaplėvės riebalinio audinio [39], dėl kurių LPM populiacijos nevienalytiškumas skiriasi. Su lytimi susiję skirtumai tarp LPM populiacijos heterogeniškumo, taip pat lyčių skirtumai pilvaplėvės mikroaplinkoje, lemia reikšmingus transkripcijos ir funkcinius skirtumus tarp LPM populiacijos pelių patinų ir patelių, nors RNR-seq analizės vienos ląstelės lygiu atskleidė. lygiavertės klasterių tapatybės vyrų ir moterų LPM.

RNA-seq analyses, at the population level, of 10- to 12-week-old male and female mice LPMs indicated that 486 mRNA transcripts were differentially expressed (>1.{1}}kartas) tarp moterų ir vyrų LPM. 148 mRNR nuorašai, labiau išreikšti moterų LPM populiacijos lygiu, apėmė genus, susijusius su lipidų įsisavinimu ir transportavimu, pvz., Apoe, Apoc1, Saa2 ir Saa3, taip pat genus, susijusius su imunine gynyba. Pastarieji apėmė Timd4, Cxcl13, Tgfb2, komplemento komponento genus C1qa, C3 ir C4b bei C tipo lektino receptorių genus Cd209a, Cd209b ir Clec4g. [39] Priešingai, vyrų genai, labiau išreikšti LPM, buvo susiję su proliferacija ir su ląstelių ciklu susijusiais procesais, tokiais kaip Cdk1, E2f2 ir Mki67.

Įdomu tai, kad pelių patelės buvo atsparesnės ūminiam peritonitui, kurį sukėlė B grupės streptokokai[44] arba Streptococcus pneumoniae infekcija[39]. Kadangi CD209 (SIGN-R1) yra labai svarbus išgyvenimui užsikrėtus S. pneumoniae infekcija, nes skatina veiksmingą bakterijų fagocitozę ir klirensą[24], teigiama, kad nuo lyties priklausomas atsparumas bakteriniam peritonitui atsiranda dėl didesnės moterų LPM ekspresijos. CD209 ir, papildomai, komplemento komponentų ir B1 ląsteles verbuojančio chemokino CXCL13.[39] Šiuo atžvilgiu teigiama, kad didesnis moterų ir kūdikių atsparumas per kraują plintančioms infekcijoms koreliuoja su padidėjusia nuo CXCL{12}}priklausoma natūralių antikūnų B1 ląstelių gamyba.

4. Didelis pilvaplėvės makrofagų pakeitimas, sukeltas uždegimo

Buvo pranešta, kad dėl sterilių uždegiminių dirgiklių, [5,39,42,45,46] pilvo operacijos [39] arba bakterinės infekcijos[47] sukeltos uždegiminės pilvaplėvės ertmės reakcijos sukelia LPM ląstelių mirtį, dėl kurios sumažėjo rezidentiniai LPM (įskaitant nuolatinius embrioninius LPM ir nuolatinius moLPM), kurių mastas koreliuoja su uždegimo sunkumu.[42,46] Pradinis LPM telkinys atsigauna dauginantis likusiems nuolatiniams LPM[45] ir pakeičiant LPM, gautais iš uždegimo. monocitai (toliau – ii-moLPM, skirti uždegimo sukeltoms moLPM), kaip parodyta naudojant įvairias eksperimentines strategijas, pagrįstas likimo kartografavimo modeliais [42], nuo audinių apsaugotomis kaulų čiulpų chimerinėmis pelėmis ir įvaikinimo perdavimo eksperimentais.[39,46]

Naudojant eksperimentinį modelį, pagrįstą lengvo uždegimo, kurį sukelia mažos zimozano dozės (10 µg vienai pelei) sukėlimu, arba didelio uždegimo, kurį sukelia didelės dozės zimozano (1000 ug vienai pelei) sukeltas sunkus uždegimas, ir pritaikymo perkėlimo eksperimentai ii-moLPM sekti. ir įvertinti, kaip uždegiminė aplinka kontroliuoja jų diferenciaciją, Jenkinsas ir kolegos pasiūlė, kad nuolatinių LPM pakeitimo ii-moLPM laipsnis ir tai, kiek vėliau jie įgyja nuolatinių LPM tapatybę ir funkciją, priklauso nuo uždegimo sunkumo. procesas ir LPM mirties dydis[46] (2 pav.).

ii-moLPM, susidarę po lengvo uždegimo, ilgą laiką egzistavo kartu su likusiais nuolatiniais LPM, tačiau konkurencija su nuolatiniais LPM ir pilvaplėvės aplinkos pokyčiai išlaikė juos nenormalioje aktyvacijos būsenoje ir užblokavo nuolatinio LPM fenotipo įgijimą. Priešingai, stiprus uždegimas gali sukelti visišką vietinių LPM abliaciją, kurią galiausiai pakeičia ii-moLPM, kurios įgijo nuolatinį LPM tapatumą, tačiau išlaikė transkripcijos ir funkcinių skirtingų savybių, nulemtų jų kilmę, pilvaplėvės uždegimą ir laiką. -rezidentūra.[46] Buvo pasiūlyta, kad ii-moLPM fenotipas apimtų vidinius žymenis, nulemtus pagal jų kilmę, pvz., CD62L ir Semaphorin 4a, žymenis, kurių ekspresiją kontroliuoja konkurencija su nuolatiniais LPM, bet yra perprogramuojama laikui bėgant, pvz., GATA6, MHCII ir CCR5, ir žymekliai, susiję su buvimo laiku, nepriklausomi nuo konkurencijos su rezidentais LPM, tokiais kaip Tim4, CD209b ir VSIG4. Atrodo, kad nemaža dalis genų, skirtingai ekspresuojamų nuolatinių LPM ir ii-moLPM, yra tiesiogiai arba nuo GATA priklausomo retinoinės rūgšties signalų skirtumų kontroliuojami.[46]

ii-moLPM pasižymi didesniu proliferaciniu aktyvumu nei nuolatiniai LPM [38, 46], o tai, kaip manoma, koreliuoja su padidėjusiu pirmųjų gebėjimu daugintis reaguojant į mezotelio ląstelių gaminamą CSF1 [36]. Be to, ii-moLPM pasižymėjo mažesniu gebėjimu fagocituoti bakterijas ir įsisavinti mirštančias ląsteles, todėl nepavyko pagaminti CXCL13.[46] Nors pilvaplėvės B1 ląstelių skaičius didėja su amžiumi esant homeostazei, pilvaplėvės uždegimas lėmė netinkamą B1 ląstelių kaupimąsi[46], nes, kaip minėta pirmiau, LPM gamina CXCL13 kontroliuoja B1 ląsteles, patenkančias į pilvaplėvės ertmę[48]. Todėl faktas, kad LPM populiacijos vystymosi ir funkcinis nevienalytiškumas priklauso nuo lyties ir amžiaus, turi svarbių pasekmių sprendžiant LPM vaidmenį taisant, apsaugant ir sukeliant pilvaplėvės naviko metastazes, į kurias reikia atsižvelgti atliekant būsimus tyrimus.

Svarbu pažymėti, kad monocitai, patekę į pilvaplėvės ertmę uždegiminių reakcijų, susijusių su neinfekciniu pilvaplėvės pažeidimu, infekcija ar metastazavusiu naviko augimu, metu, gali diferencijuotis į monocitų kilmės ląsteles, kurios atlieka specifines atstatymo, gynybos ar naviko augimą skatinančias funkcijas. bet gali neįgyti fenotipinių ar funkcinių LPM savybių, todėl neturėtų būti laikomos ii-moLPM. Tačiau ląstelių, atskirtų nuo monocitų, įdarbintų į uždegiminę pilvaplėvę, tapatybės apibrėžimas gali būti prieštaringas, nes daugumoje ataskaitų, kuriose pagrindinis dėmesys skiriamas pilvaplėvės monocitų kilmės ląstelių funkcinei svarbai, išlikimo laikui ir (arba) šių ląstelių LPM savybių įgijimui. monocitų kilmės ląstelės nebuvo nagrinėjamos ir, atvirkščiai, ataskaitose apie nuolatinį LPM pakeitimą uždegimo metu ii-moLPM funkcija nebuvo nuodugniai ištirta.

Remiantis hipoteze, kad konkurencija dėl tam tikros fizinės nišos, kurią apibrėžia ląsteliniai ir molekuliniai mikroaplinkos veiksniai, lemia monocitų indėlį į audiniuose gyvenančius makrofagus[43], buvo pasiūlyta biocheminė niša pilvaplėvės makrofagams[46]. ] Atitinkamai, konkurencija dėl signalų ir ląstelių tarpusavio sąveikos, kontroliuojančios LPM išlikimą, dauginimąsi ir funkciją, kontroliuotų pusiausvyrą tarp nuolatinių LPM ir ii-moLPM, taip pat brandaus rezidento LPM tapatybės įgijimą iimoLPM.

5. Didžiųjų pilvaplėvės makrofagų vaidmuo pilvaplėvės homeostazėje

LPM atlieka esminį vaidmenį išvalant apoptozines ląsteles esant pastoviai būsenai, o tai būdingas audinyje gyvenančių makrofagų požymis, kuris yra labai svarbus norint išlaikyti savarankišką toleranciją [49], nes jie išreiškia specifinius gaudytojus receptorius, įskaitant CD36, CD93, CD163 Tim4. , ir MerTK.[16,20–22] Įdomu tai, kad efektyvus apoptotinių ląstelių internalizavimas naudojant LPM buvo pasiūlytas remiantis pradiniu fosfatidilserino prisijungimu prie Tim4, kurį veikia apoptozinės ląstelės, o vėliau MerTK tarpininkauja įsisavinimas.[20] LPM yra užprogramuoti pilvaplėvės mikroaplinkos, kad efektyviai pašalintų apoptotines ląsteles, išvengiant uždegimo, kurį sukelia TLR sukeliamas savaiminio nukleorūgščių atpažinimas, kartu išlaikant gebėjimą reaguoti į infekciją.[25]

Teigiama, kad į Kruppel panašūs transkripcijos faktoriai 2 ir 4 skatina LPM programavimą imunologiškai tyliam apoptozinių ląstelių pašalinimui, kontroliuodami apoptotinių ląstelių atpažinimo receptorių genų, tokių kaip Timd4, Marco ir Olr1, ekspresiją ir genus, veikiančius kaip neigiami reguliatoriai. TLR signalizacijos, pvz., Hes1, Socs3, Pdlim2, Ptpn6 ir Tnfaip3, todėl padidėja aktyvavimo slenkstis.[25] Remiantis šiais stebėjimais, LPM išreiškia VSIG4, su B7 šeima susijusį receptorių, kuris, kaip pranešama, sumažina makrofagų aktyvaciją per PDK{14}}tarpininkaujantį mitochondrijų piruvato oksidacijos ir ROS gamybos perprogramavimą.[23]

LPM vaidina pagrindinį vaidmenį palaikant pilvaplėvės B1 ląstelių homeostazę. Iš tiesų, pilvaplėvės B1 ląstelės, kurios iš esmės gamina natūralų IgM, suteikdamos pirmąją vietinę gynybos liniją nuo įvairių patogenų[12], priklauso nuo chemokino CXCL13, kurį gamina LPM ir stromos ląstelės, kad jos būtų įtrauktos iš kraujotakos ir nukreiptos į vietą. į pilvaplėvės ertmę; CXCL13 taip pat reikalingas, kad B1 ląstelė patektų į omentumą.[48] Be to, po pastovios migracijos į žarnyno lamina propria, pilvaplėvės B1 ląstelės išskiria natūralius IgA antikūnus, kad užtikrintų imuninę žarnyno mikrobiotos kontrolę.[12] Įdomu tai, kad IgA klasės keitimą pilvaplėvės B1 ląstelėse, taigi ir B1 ląstelių sukeltą žarnyno IgA sekreciją, kontroliuoja retinoinės rūgšties/GATA{13}}priklausoma TGF-𝛽 gamyba, kurią sukelia LPM.[19] Remiantis šiuo stebėjimu, retinoinė rūgštis ir TGF-👌 sukuria sinergetinį poveikį IgA klasės perjungimui pilvaplėvės B1 ląstelėse in vitro.[50]

Papildoma LPM funkcija, susijusi su pilvaplėvės homeostaze, yra stebėjimas siekiant nustatyti sterilų pilvaplėvės pažeidimą, kuris, nebent jis būtų greitai ištaisytas, gali sukelti pilvaplėvės sąaugų susidarymą, kurios gali virsti sunkia pilvaplėvės liga, įskaitant žarnyno nepraeinamumą ir moterų nevaisingumą. 10] Pilvaplėvės pažeidimo ar infekcijos aptikimo stebėjimą iš esmės atlieka LPM ir reikalingas aktyvus pilvaplėvės paviršiaus patruliavimas. Šiuo atžvilgiu neseniai paskelbtoje ataskaitoje, kurioje pilvaplėvės ertmės vaizdavimas per nepažeistą pilvo sieną buvo atliktas intravitaline mikroskopija, buvo įrodyta, kad LPM pasyviai juda, priklausomai nuo kvėpavimo ir atsitiktinai, esant pastoviajai būsenai su greičiu. iki 800 μm s−1. [4] LPM vaidmuo pilvaplėvės audinių taisymui ir sukibimo formavimuisi aptariamas kitame skyriuje.

6. Didžiųjų pilvaplėvės makrofagų vaidmuo taisant pilvaplėvės pažeidimą

Pilvo ar visceralinės pilvaplėvės pažeidimą gali sukelti sterilus sužalojimas, atsiradęs dėl atsitiktinės traumos ar pilvo operacijos, arba dėl pilvaplėvės patologijų, tokių kaip infekcija, kepenų ar žarnyno ligos arba metastazavęs naviko augimas. Naujausi tyrimai, aptarti toliau, atskleidė mechanizmus, susijusius su sterilaus pilvaplėvės pažeidimo taisymu, ir LPM vaidmenį šiame procese.[10] Priešingai, kaip vėliau atkuriama pilvaplėvės, pažeistos pilvaplėvės infekcijos ar naviko metastazių, dar reikia išsamiai ištirti.

Pažeidimas pilvaplėvės gleivinėje nustatomas atpažįstant su pavojumi susijusius molekulinius modelius (DAMP), kuriuos išskiria pažeistos ląstelės, įskaitant mezotelio ląsteles, ląsteles, esančias submezoteliniame jungiamajame audinyje, ir galbūt tas, kurios sudaro pagrindinius audinius. DAMP apima konstitutyviai išreikštus DAMP, tokius kaip branduolinė ir mitochondrijų DNR, branduoliniai ir mitochondrijų baltymai (HMGB1, histonai, citochromas c), ATP, K plius jonai arba S100 kalcį surišantys baltymai, indukuojami DAMP, tokie kaip šilumos šoko baltymai, defenzinai. , galektinai ir IL{5}}𝛼 bei tarpląsteliniai DAMP, pvz., hialuronanas arba heparano sulfatas.[51] DAMP aktyvuotos mezotelio ląstelės sukelia pilvaplėvės uždegimą, išskirdamos priešuždegiminius citokinus ir chemokinus, kurie skatina leukocitų pritraukimą į pažeistas vietas ir komplemento aktyvavimą, todėl atsiranda papildomas uždegimas. Ši uždegiminė reakcija sukelia nuo audinių faktoriaus priklausomą fibrino polimerizaciją dėl fibrinogenezės ir fibrinolizės disbalanso, dėl kurio susidaro fibrino matrica, kuri yra žaizdos taisymo karkasas.

Pastarasis apima leukocitų, atliekančių taisymo funkciją, įskaitant LPM, neutrofilus, monocitus ir iš monocitų gautus makrofagus, pritraukimą į submezotelinį skyrių, mezenchiminių pirmtakų įdarbinimą, ekstraląstelinės matricos nusodinimą, nervų ir kraujagyslių įaugimą ir reabilitaciją. pažeistos pilvaplėvės.[10] Užsitęsus pilvaplėvės uždegimui, gali susidaryti per didelis fibrino nusėdimas ir galiausiai tarp priešingų pilvaplėvės paviršių susidaryti skaiduliniai tilteliai, kuriuose yra nervų ir kraujagyslių, vadinamų pilvo sąaugomis.[52] Sukibimas dažniausiai atsiranda dėl pilvo chirurgijos, bet taip pat gali atsirasti dėl infekcijos, endometriozės, radioterapijos ar peritoninės dializės, taip pat yra susijęs su dideliu sergamumu, kuris gali sukelti gyvybei pavojingų komplikacijų.[52]

Elektroninė mikroskopinė pilvaplėvės gijimo analizė po eksperimentinio chirurginio sužalojimo, atskleidusi, kad makrofagai prilipo prie pažeisto audinio praėjus 24 valandoms po sužalojimo, o vėliau migravo į žaizdą[53], suteikė pirmuosius įrodymus apie galimą makrofagų vaidmenį pilvaplėvėje. traumų taisymas. Šią hipotezę dar labiau patvirtino dr. P. Kubes laboratorijos intravitaliniai mikroskopiniai tyrimai, rodantys, kad po lazerio sukelto kepenų kapsulės pažeidimo F4/80high GATA6 ir LPM buvo įtraukiami į pažeistas vietas ir migravo per mezotelį į kepenų pažeidimai, per 1 val. po lazerio sukeltos traumos.[30]

LPM pajuto pažeistą audinį atpažindami ATP, kurį išskiria kepenų nekrozinės ląstelės per DAMP receptorių PX27, ir įsiskverbė į kepenų parenchimą per CD44-, tarpininkaudamos prisijungimui prie pažeistose vietose esančio hialuronano. Įdomu tai, kad įdarbinimas į sužalotą audinį sukėlė LPM proliferaciją ir molekulių, susijusių su alternatyviu aktyvuotu / atkuriamuoju fenotipu, pvz., CD206, CD273 ir arginaze 1, reguliavimą. Atitinkamai, įdarbinti LPM aktyviai prisidėjo prie nekrozinių ląstelių pašalinimo, o tai, kaip teigiama, yra labai svarbus veiksnys. revaskuliarizacijai ir audinių atstatymui, kaip patvirtina eksperimentai, rodantys, kad sužalotų vietų gijimas buvo atidėtas pelėms, kurioms buvo prikrauta liposomų LPM išeikvota arba GATA{8}}trūksta.[30]

Panašus ATP sukeltas prisitraukimas ir nuo CD{1}}priklausoma migracija į pažeistą F4/80 didelio GATA6 ir LPM plotą buvo aprašyti žarnyno terminio pažeidimo modelyje.[54] Klodronato sukeltos liposomų sukeltos LPM išeikvojimo eksperimentai taip pat patvirtino koncepciją, kad LPM prisidėjo prie sužaloto žarnyno atstatymo šioje eksperimentinėje aplinkoje. Tačiau ar, kaip aprašyta šioje ataskaitoje, po žarnyno epitelio pažeidimo LPM yra įtraukiami į žarnyno serozę, reikėtų toliau tirti, nes vis dar įmanoma, kad šis reiškinys buvo artefaktinis, jei šiuose eksperimentuose žala neapsiribojo žarnyno luminalinis paviršius, bet paveikė žarnyno gleivinę ir pogleivinę, atsižvelgiant į eksperimentinę strategiją, taikytą sprendžiant šią problemą šiame tyrime.

Kita vertus, kalbant apie LPM išeikvojimo eksperimentus apdorojant liposomomis, kuriose yra klodronato, siekiant išsiaiškinti LPM vaidmenį kepenų ar žarnyno serozinio audinio atstatyme [30, 54], ar klodronatu gydomose pelėse pastebėtas uždelstas žaizdų gijimas. negalima atmesti, bent iš dalies dėl to, kad pilvaplėvės monocitų kilmės makrofagai ir audiniuose gyvenančios makrofagų populiacijos, esančios omentumoje, pilvaplėvės membranoje arba kepenų kapsulėje, išeikvotos. Iš tiesų buvo įrodyta, kad monocitai įdarbinami į pilvaplėvės sužalotas vietas, kur jie diferencijuojasi į monocitų kilmės makrofagus, kurie gali skatinti audinių atstatymą.[55]

Remiantis šiais stebėjimais, koncepcija, kad po to, kai LPM prisitvirtina prie pažeisto mezotelio, jie migruoja į serozinius sužalojimus ir atlieka kritinę atkūrimo funkciją, buvo užginčyta neseniai paskelbtoje ataskaitoje, kurioje genetinis likimo žemėlapis leido atsekti vietinius LPM po sterilaus kepenų pažeidimo. [56] Šie tyrimai atskleidė, kad GATA6 plius nuolatiniai LPM susikaupė ant pažeisto kepenų paviršiaus, tačiau minimaliai įsiveržė į nekrozinę kepenų parenchimą. Be to, naudojant nuo difterijos toksino priklausomą G6Mø-CreER; R26-tdTomato/iDTR pelės linija, kuri leido genetiškai abliuoti daugumą GATA6 plius nuolatinių LPM, autoriai padarė išvadą, kad GATA6 ir nuolatinių LPM nebuvimas neturėjo reikšmingos įtakos kepenų žaizdų gijimui, taigi, GATA6 plius rezidentas. LPM nebuvo labai svarbūs pažeisto serozinio audinio regeneracijai. Todėl reikia atlikti papildomus tyrimus, siekiant nustatyti, ar ir galiausiai kaip LPM prisideda prie pilvaplėvės gijimo.

Įdomu tai, kad naujausia daktaro P. Kubes laboratorijos ataskaita, pagrįsta pilvaplėvės ertmės vaizdavimu po lazeriu sukelto židininio terminio pilvaplėvės pažeidimo, atliekant intravitalinę mikroskopiją per nepažeistą pilvo sieną, patvirtina tiesioginį LPM vaidmenį serozinės liaukos atstatyme. [4] Iš tiesų, rezidentai GATA6 ir LPM buvo pirmosios ląstelės, įdarbintos mezotelio sužalojimams – procesui, kuriam reikėjo pilvaplėvės skysčio šlyties srauto. Įdarbinti LPM, pritvirtinti prie pažeistos pilvaplėvės ir visiškai uždengti pažeidimus praėjus 15 minučių po sužalojimo, sudarydami į trombą panašias struktūras, o tai atspindi trombocitų agregaciją reaguojant į kraujagyslių pažeidimą. LPM agregacija priklausė ne nuo kanoninių adhezijos molekulių ar fibrino polimerizacijos, o nuo šalinimo receptorių, turinčių scavenger receptorių cisteino turtingus (SRCR) domenus, tokius kaip MARCO arba MSR1, kurie jungiasi su daugybe polianijoninių ligandų ir yra labai konservuoti evoliucijos metu. nuo bestuburių. Tiesą sakant, dygiaodžiuose, tokiuose kaip jūros ežiukas, sužalojus celomo ertmę susikaupė celomocitai, išreiškiantys SRCR turinčius homologus, kurie užsandarino pažeistas vietas.[57,58] Teigiama, kad LPM prisideda prie židinio atstatymo. pilvaplėvės pažeidimai, fiziškai užsandarinant pilvaplėvės sužalojimus, nes makrofagų agregacijos blokada lėmė sužeistos parietalinės pilvaplėvės gijimą.[4]

Priešingai, naudojant eksperimentinį pilvaplėvės sukibimo formavimosi, sukelto chirurginio sterilaus sužalojimo, modelį, apimantį pilvaplėvės mygtuko formavimąsi susiuvant dalį pilvaplėvės sienelės, buvo įrodyta, kad per 3 valandas po operacijos prie sagų prisitraukia daug LPM. [4] Šioje jatrogeninėje aplinkoje makrofagai sudarė didelius agregatus, kurie skatino fibrino nusėdimą ir rando audinio augimą, todėl per 7 dienas po operacijos susiformavo pilvaplėvės sukibimas.

Įdomu tai, kad pelėms, kurioms LPM sumažėjo likus 24 valandoms iki operacijos, pilvaplėvės adhezijų skaičius ir išsivystymas buvo žymiai sumažintas, o tai patvirtina, kad LPM prisidėjo prie pilvaplėvės sukibimo susidarymo. Įdomu tai, kad naudojant panašų eksperimentinio adhezijos formavimo modelį, buvo įrodyta, kad LPM sudaro ląstelių barjerą virš fibrino krešulių, susidariusių pažeistose mezotelio srityse, o tai sukelia adhezijos formavimąsi, jei makrofagų barjero nepakanka fibrino krešuliui padengti, tačiau neleido susidaryti adhezijai, jei makrofagų barjeras visiškai apsaugojo fibrino krešulius.[59] Iš tiesų, IL-4-tarpininkaujantis makrofagų barjero sutvirtinimas užkirto kelią sukibimo formavimuisi ir galėtų būti pagrindas kuriant naujoviškus gydymo būdus, siekiant išvengti pooperacinių sukibimų. Todėl, nors atrodo, kad pirminis makrofagų pritraukimas ir agregacija kartu su fibrino nusėdimu yra reikalingas teisingam seroziniam atstatymui, tai taip pat gali sukelti patogeninius randus, dėl kurių susidaro sukibimas, o tai buvo koreliuojama su mažu mezotelio fibrinoliziniu aktyvumu[52]. ]

Apibendrinant galima pasakyti, kad LPM vaidmuo sterilaus pilvaplėvės pažeidimo atstatyme daugiausia priklauso nuo sužalojimo sunkumo. LPM skatina sukibimo susidarymą po didelio pilvaplėvės pažeidimo, tačiau atlieka esminę greito židinio mezotelio traumų atstatymo funkciją, primenančią primityvius remonto mechanizmus, išsaugotus per visą evoliuciją (3 pav.). Kita vertus, LPM potencialas įsiskverbti į giliai pažeistą submezotelinį audinį ir prisidėti prie jo atkūrimo kartu su monocitų kilmės makrofagais ir neutrofilais vis dar yra prieštaringas, todėl jį reikia toliau tirti. Šiuo atžvilgiu dar reikia ištirti, ar, kaip aprašyta kitų makrofagų populiacijų atveju, LPM gamina gilius gydomuosius tarpininkus, tokius kaip trombocitų kilmės augimo faktorius, į insuliną panašus augimo faktorius 1, TGF-𝛽1 arba VEGF-𝛼 [60]. .

For more information:1950477648nn@gmail.com