Hipokampo teta virpesių optogenetinis dažnio maišymas atskiria darbinę atmintį iš hipokampo erdvėlaikio kodų 2 dalis

Derinant MS optogenetinę stimuliaciją ir hipokampo kalcio vaizdavimą

Norėdami ištirti teta manipuliacijų poveikį hipokampo erdviniams ir laiko kodams, CA1 sujungėme MS optogenetinę stimuliaciją su kalcio vaizdavimu. Ši eksperimentinė paradigma iškelia du potencialiai svarbius klausimus: GRIN lęšių implantai yra susiję su audinių pažeidimais, kurie gali pakeisti teta virpesių fiziologinę būseną, o sužadinimo šviesos diodo, naudojamo GCaMP6f sužadinti, bangos ilgio spektras gali sutapti su opsino, esančio ant GABAerginio MS pluošto galinių skaidulų. hipokampas.

Hipokampas yra labai svarbi smegenų struktūra. Jis daugiausia atsakingas už atminties informacijos saugojimą ir apdorojimą. Kaip visi žinome, atmintis yra svarbi žmogaus intelektinės veiklos dalis ir svarbus būdas mums bendrauti bei bendrauti su mus supančia aplinka. Todėl hipokampo funkcija yra labai svarbi mūsų gyvenimui.

Hipokampo erdvė yra būdas apibūdinti, kaip mūsų smegenyse apdorojama erdvinė informacija. Tai reiškia aktyvią mūsų smegenų neuronų grupės, kuri apdoroja erdvinę informaciją, sritį. Ši sritis vadinama parahipokampine zona ir yra glaudžiai susijusi su jūrų arkliuku. Tyrimai rodo, kad šalia hipokampo esanti sritis apdoroja su erdve ir atmintimi susijusią informaciją ir yra pagrindinė mūsų atminties proceso dalis.

Konkrečiai, hipokampo erdvinės informacijos apdorojimas daugiausia apima du aspektus. Pirmasis aspektas yra mūsų krypties pojūtis ir gebėjimas orientuotis. Kai vaikštome, hipokampas registruoja mūsų žingsnius ir padėtį, išlaikydamas orientaciją erdvėje. Jei mūsų hipokampas yra pažeistas, tai gali sukelti problemų, tokių kaip dezorientacija arba negalėjimas rasti kelio namo.

Kitas aspektas yra atminties gebėjimas. Žmonės naudojasi hipokampo teikiama erdvine informacija, kad padėtų žmonėms atsiminti. Jei mes patiriame ką nors tam tikroje vietoje, hipokampas išsaugos šią informaciją ir mes galime sužinoti apie šias patirtis ar žmones prisimindami.

Mokydamiesi nuolat stipriname savo atminties galimybes, o hipokampas atlieka lemiamą vaidmenį šiame procese. Dėl hipokampo svarbos turime atkreipti dėmesį į jo sveikatą ir apsaugoti jį tam tikrais būdais. Sudoku, bėgimas, naujų įgūdžių mokymasis ir kt. gali pagerinti mūsų atmintį ir apsaugoti mūsų hipokampo sveikatą.

Todėl dieta, mankšta ir geras miegas gali padėti apsaugoti mūsų hipokampą ir pagerinti atmintį. Kai turime aiškų protą ir stiprią atmintį, galime geriau suprasti pasaulį ir susikurti geresnį gyvenimą. Matyti, kad reikia pagerinti atmintį. Cistanche deserticola gali žymiai pagerinti atmintį, nes Cistanche deserticola taip pat gali reguliuoti neurotransmiterių pusiausvyrą, pvz., padidinti acetilcholino ir augimo faktorių kiekį. Šios medžiagos labai svarbios atminčiai ir mokymuisi. Be to, mėsa taip pat gali pagerinti kraujotaką ir skatinti deguonies tiekimą, o tai gali užtikrinti, kad smegenys gautų pakankamai maistinių medžiagų ir energijos, taip pagerinant smegenų gyvybingumą ir ištvermę.

Norėdami pagerinti atmintį, spustelėkite žinokite papildus

Norėdami patikrinti, ar GRIN lęšio implantai pakeitė teta fiziologiją, pirmiausia į dešinįjį hipokampą implantavome peles su GRIN lęšiu, o kairiajame ir dešiniajame hipokampe – du elektrodus ir abiejuose pusrutuliuose radome panašius teta signalus (3a pav.). Palyginome teta virpesius atvirame lauke tyrinėjant pelėms su GRINlens ir prijungtu LFP elektrodu, su pelėmis tik su elektrodais ir neradome jokių reikšmingų skirtumų tarp abiejų grupių (3b pav.). Neradome jokio reikšmingo skirtumo tarp santykinės teta galios pelėms, implantuotoms su GRIN objektyvu ir LFP elektrodu (0.14 ± 0.007), palyginti su tik anelektrodu ( 0,154 ± 0,008; t testas, t54=1,060, p=0,29).

Nors ankstesnėse ataskaitose buvo aprašyta, kad derinant optogenetinę ChrimsonR stimuliaciją ląstelių kūnuose su GCaMP inneuronų vaizdavimu netoli terminalų įmanoma su minimaliu perkalbėjimu53, mes stebėjome bet kokį galimą opsinų aktyvavimą MS terminaluose hipokampe, įrašydami CA1- LFP skleidžiant sužadinimo šviesą su mūsų miniskopu per GRIN objektyvą. Sukalibravę mini taikiklio šviesos išėjimo galią (3c pav.), neradome mini-scope mėlynos sužadinimo šviesos poveikio endogeninei teta galiai (1ANOVA, F(4,295)= 0.7729, p=0.5435 3d pav.) Kadangi buvo pranešta, kad mažos apimties sužadinimo šviesa gali sukelti nedidelę ChrimsonR53 transfekuotų gnybtų depoliarizaciją, galinčią trukdyti tolesnei optogenetinei sukeltai depoliarizacijai, toliau taikėme MSoptogenetinę stimuliaciją vaizduodami su ~0,3 mW. /mm2 mini taikinio šviesos diodo galią ir galėjo žymiai sutrikdyti arba pagreitinti teta naudojant atitinkamai užšifruotą arba 8 Hz stimuliaciją (Friedmano testas χ2=6.000,p=0.0278; 3e pav.) .

Teta ritmo sutrikimas moduliuoja nedidelę CA1 ląstelių dalį

Tada atlikome fazines (5 s ĮJUNGTA, 5 s IŠJUNGTA) optogenetines MS stimuliacijas, registruodami CA1 piramidines ląsteles, kai pelės laisvai tyrinėjo atvirą lauką (4a pav.). Mes nustatėme, kad dalis įrašytų ląstelių buvo nuosekliai sužadintos tokiomis sąlygomis, o kitos buvo slopinamos (4b pav.; žr. metodus). Piramidinių ląstelių aktyvumas stimuliacijos metu apskritai buvo mažesnis, palyginti su pradiniu, abiejų maišytų stimuliacijų bėgimo metu (Pearson koreliacija, R2=0.567, p Mažiau arba lygi 0.0 0{{20}}1) ir poilsio (R2=0.521, p Mažiau arba lygu 0,0001) laikotarpiais, taip pat 8 Hz stimuliacijai (R{{ 14}}.6, p Mažesnis arba lygus 0,0001 poilsio laikotarpiams; R2=0,632, p Mažesnis arba lygus 0,0001 veikimo laikotarpiams; n=1849 langelių, N=5 pelėms; 4c pav.). Iš viso ~ 6,42 ± 0,52 % visų ląstelių buvo reikšmingai moduliuotos sumaišytos optogenetinės stimuliacijos (4d pav.). Iš tų moduliuotų ląstelių 50,56 ± 6,38 % buvo slopinamos, o 49,43 ± 6,38 % buvo sužadintos (n=1849 ląstelių, N=5 pelių; 4e pav.).

Toliau išanalizavome optogenetinės stimuliacijos poveikį hipokampo neuronų erdviniam derinimui, kai pelės laisvai tyrinėjo atvirą lauką. Šiuo tikslu apskaičiavome aktyvumo greičio žemėlapius, naudodami epochas stimuliacijos laikotarpiais arba už jų ribų (pradinei sąlygai įtraukėme epochas, kurios buvo tokios pačios 5 s ĮJUNGTAS, 5 s OFF modelis, naudojamas faktinei stimuliacijai; 4f pav.). Tada stabilumas buvo apskaičiuotas kaip koreliacija tarp bazinės linijos ir stimuliacijos epochų greičio žemėlapių. Nepaisant pirmiau minėtų bendros veiklos pokyčių, greičio žemėlapiai neparodė erdvinio stabilumo pasikeitimo nei maišant, nei 8 Hz stimuliuojant (Kruskal-Wallis H3=3.5, p=0.1773; 4g pav.).

MS optogenetinė stimuliacija keičia elgesį, bet ne erdvėlaikinius kodus

Norėdami įvertinti teta sutrikimo poveikį laiko ir erdviniams kodams, stebėjome CA1 piramidinių neuronų aktyvumą 3-tono linijiniame takelyje (5a pav.). Čia mes išnaudojame vieną iš pagrindinių kalcio vaizdavimo pranašumų, ty galimybę registruoti įrašytas ląsteles per kelias dienas, kai tam tikromis dienomis atliekame koduotą arba 8 Hz stimuliaciją (5b, c pav., apatinis skydelis). Savo analizę sutelkėme į dienų poras, kai tarp bandymų yra toks pat laikas (48 val.) (5c pav., viršutinė dalis). Kiekvienai būklei įvertinome visų ląstelių, reikšmingai koduojančių vieną ar kelis kintamuosius, dalį ir neradome nei 8 Hz, nei užšifruotos stimuliacijos poveikio erdviniam ir laiko kodavimui (RM-ANOVA; F2=0.807, p {{11). }}.453 – pagrindiniam stimuliacijų poveikiui; F6=1.283, p=0.285 – stimuliacijos ir užkoduoto kintamojo sąveikai, n=5 pelių; 5d pav.).

Nors ląstelių dalis stimuliacijos sąlygomis nepasikeitė, mes įvertinome MS stimuliacijos poveikį vietos, laiko ir atstumo moduliuojamų ląstelių derinimo kreivių stabilumui. Šiuo tikslu buvo stebimi neuronai per dienas (5c pav.; žr. Metodai) ir apskaičiuojamas vietos ir laiko laukų stabilumas kaip porinė koreliacija tarp laukų per 48 valandas. Kadangi žinoma, kad CA1 rodomas ryškus pertvarkymas per dienas, mes taip pat panaudojome porą dienų be stimuliacijos, kad apskaičiuotume pradinį stabilumo balą, kuris bus naudojamas kaip nuoroda (5e–g pav.). Neradome stabilumo pokyčių MS stimuliacijos metu vietoje moduliuotų ląstelių (1ANOVA, F2=1.907, p=0.1511; n=205 ląstelių porų, sujungtų iš N=5 nepriklausomos pelės; 5h pav.), laiko moduliuotos ląstelės (1ANOVA, F2=2.201, p=0.113; n=227 ląstelių porų, sujungtų iš N=5nepriklausomų pelės; 5i pav.) ir atstumo moduliuotos ląstelės (1ANOVA,F2=0.6962, p=0.5024; n=64 ląstelių porų, sujungtų iš N=5 nepriklausomų pelėms; 5j pav.). Tą pačią analizę taip pat išplėtėme į konjunktyvinius neuronus (ty neuronus, kurie gali koduoti daugiau nei vieną kintamąjį; papildomas 5a–f pav.) ir nenustatėme jokio optogenetinės stimuliacijos poveikio konjunktyvinio erdvinio stabilumui (1ANOVA, F2=3.731, p=0.0661;N=4 nepriklausomos pelės; papildomas 5g pav.), laikinas (1ANOVA,F2=1.993, p=0.8228; N {{47) }} nepriklausomos pelės; papildomas 5h pav.) ir atstumo ląstelės (1ANOVA, F2=0.469, p=0.6400; N=4 nepriklausomos pelės; papildomas 5i pav.).

Toliau įvertinome erdvinių ir laiko kodų kokybę, naudodami anayvų Bajeso klasifikatorių, kad iškoduotume vietą (6a, b pav.), laiką (6cd pav.) ir nuvažiuotą atstumą (6e pav., f), naudodami atsitiktinius įkrovos pavyzdžius (n {{3). }} įkrovos pavyzdžiai, n=160 langelių viename pavyzdyje). Dekodavimo klaidos buvo sistemingai mažesnės nei sumaišytų pakaitalų, įskaitant 8 Hz arba užšifruotą vietos stimuliavimą (2ANOVA, F5=2172, p Mažiau arba lygu 0.0001; n=50 įkrovos pavyzdžiai iš vienos reprezentacinės pelės; 6a pav.), laikas (2ANOVA, F5=1292, p Mažesnis arba lygus 0,0001;n=50 įkrovos pavyzdžiai iš vienos reprezentacinės pelės; 6c pav.) ir atstumas (2ANOVA, F5=1964, p Mažiau arba lygus 0,0001; n=50 įkrovos pavyzdžiai iš vienos reprezentacinės pelės; 6e pav.), rodantys, kad stimuliuojant buvo išsaugoti erdvėlaikiniai kodai. Norint įvertinti tarpindividualinę erdvėlaikio kodų reikšmę, naudojant wez balų dekodavimo klaidą, naudojant tiek faktinius, tiek sumaišytus rezultatus (žr. Metodus) kiekvienai pelei kiekvienai pelei (6b, d, f pav.). MS optogenetinė kontrolė nepadėjo. žymiai pakeičia vietos kodavimą (1ANOVA, F2, 11=2.2332, p=0.1432; N=5 pelių; efekto dydis η2=0.29; 6b pav.), laikas (1ANOVA, F2, 11=0.4561, p=0.6452; N=5pelių; efekto dydis η2=0.07; 6d pav.) arba atstumas ( 1ANOVA,F2, 11=0.6102, p=0.5606; N=5 pelių; efekto dydis η2=0.09; 6f pav.).

Elgsenos paradigmoje, naudojamoje neuronų aktyvumo laikinajam moduliavimui analizuoti, pelės yra suplanuotos vandeniu ir apmokytos rinkti atlygį. Remdamiesi šia prielaida, grąžinimų į tuščią atlygio svetainę skaičių įvertinome kaip klaidas ir apskaičiavome teisingų bandymų procentą nuo visų bandymų kaip našumo tarpinį rodiklį (6g pav.). Esant tokioms sąlygoms, nustatėme reikšmingą optogenetinės stimuliacijos poveikį našumui per dienas (Friedmano testasχ2=6.000, p=0.0278) ir ypač reikšmingą našumo skirtumą tarp pradinio lygio. (78,70 ± 2,45 %) ir sumaišyta stimuliacija (44,44 ± 5,56 %; daugkartiniai palyginimai, p=0.0429; N=3 pelės; 6h pav.). Į šią analizę buvo įtrauktos tik ne mažiau kaip 12 kartų atlikusios pelės. Dėl šios užduoties apribojimų (mažas kognityvinis krūvis ir mažas tirtų pelių skaičius), mes toliau siekėme įvertinti MS optogenetinės stimuliacijos poveikį standartizuotose atminties užduotyse.

Teta signalų sutrikimas pablogina erdvinį atpažinimą ir darbinės atminties atkūrimą

Norėdami patikrinti teta signalų vaidmenį erdvinėje atmintyje, naudojome tam skirtą pelių grupę, kurioms buvo sušvirkštas ChrimsonR ir implantuotas optinis pluoštas į MS (7a pav., kairiajame skydelyje). Pelėms buvo atlikta naujoviško objekto atpažinimo (NPOR) užduotis (7a pav., dešinysis skydelis). Norėdami įvertinti teta virpesių vaidmenį koduojant ir atkuriant atmintį, žr. 7|MS optogenetinės stimuliacijos sutrikdo techninę priežiūrą ir atkūrimą, tačiau nepastebi epizodinės ir darbinės atminties kodavimo. a Pelės buvo implantuotos pluošto optika MS po transfekavimo ChrimsonR (viršuje). Tada jiems buvo atlikta nauja objekto vietos atpažinimo užduotis (apačioje, žr. Metodai). b Atliekant šią užduotį, koduotos (raudonos) ir 8 Hz (mėlynos) stimuliacijos paieškos metu, taip pat 8 Hz (žalios), bet ne koduotos (geltonos) stimuliacijos sutrikdė atminties veikimą (2ANOVA, F4, 31=3). 283 pagrindiniam gydymo poveikiui, p=0.0097; poveikio dydis pagrindiniam grupės poveikiui, η2p=0.306; N=12 pelių). c

Toliau tiriant MS stimuliacijos poveikį atminties kodavimui, priežiūrai ir atkūrimui, pelės buvo mokomos atlikti uždelstą neatitikties mėginiui (DNMTS) užduotį automatiniame T labirinte. d Pelės, transfekuotos ChrimsonR (raudona) arba YFP (juoda), buvo treniruojamos (nesant stimuliacijos) pasirinkti tinkamą, nesuderinamą armuntą, kol našumas viršijo 0.8 teisingo pasirinkimo kriterijų per dieną. bent dvi dienas iš eilės (žalia juostelė; RM-ANOVA, F8=8.738,p Mažiau arba lygu 0.0001 pagrindiniam treniruočių dienų efektui; porinis Tukey kelis palyginimo testus tarp grupių, p=0.420; N=17 pelių). pvz., Veikimas stimuliacijos metu skirtingose ​​užduoties fazėse pelėms, kurioms buvo sušvirkšta ChrimonR (viršuje) arba YFP kontrolė (apačioje). Raudonas atspalvis rodo stimuliuojamus labirinto regionus. e Vidutinis dienos našumas atliekant MS stimuliavimą tik koduojant (RMANOVA, F11=2.197, p=0.547; N=17 pelių). f Vidutinis dienos našumas atliekant MS stimuliacijas tik 10 s vėlavimo laikotarpiu (RM-ANOVA, F11=3.483,p=0.0495; pagrindinio gydymo poveikio efekto dydis, η2p {{ 25}}.109; N=17 pelių).g Vidutinis dienos našumas atliekant MS stimuliavimą tik paieškos metu (RM-ANOVA, F11=3.265, p=0.050; N { {33}} pelių).

Visi stulpeliai ir linijiniai grafikai rodo mažiausiai trijų nepriklausomų eksperimentų vidurkį ± SEM.Straipsnis https://doi.org/10.1038/s41467-023-35825-5Nature Communications|(2023) 14:410 10atliko optogenetines stimuliacijas specialiai mėginio ėmimo ir tyrimo fazėse ir apskaičiavo atpažinimo indeksą (RI; žr. Metodus). Stimuliuojant gavimo metu, atminties našumas buvo žymiai sumažintas tiek užšifruotų (0.472 ± 0.048 RI, n {{10}} pelių) ir 8 Hz stimuliacijos (0.435 ± {{40}}.057 RI, n=6 pelių) grupes, palyginti su YFP kontrolėmis, kurios parodė reikšmingą objekto tyrinėjimo padidėjimą bandymo metu (0,61 ± 0,018 RI; 2ANOVA, F4, 31=3.283 pagrindiniam gydymo efektui, p=0.0097; poveikio dydis pagrindiniam grupės poveikiui, η2p=0.306; N {{30 }} pelių; 7b pav.). Kita vertus, užšifruota stimuliacija kodavimo metu nepablogino atminties bandymo metu (0,60 ± 0,034 RI, p=0.0157, n=6 pelės), tačiau 8 Hz stimuliacija kodavimo metu sumažino atminties našumą iki atsitiktinio lygio. (0,39 ± 0,074 RI, p=0.8740, n=6 pelių).

Norint ištirti MS optogenetinės kontrolės poveikį konkrečioms darbinės atminties funkcijos etapams (kodavimui, priežiūrai ir atkūrimui), pelės buvo transfekuotos ChrimsonR ir į MS implantuotos šviesolaidinės medžiagos bei apmokytos atlikti uždelsto neatitikimo mėginiui (DNMTS) užduotį. . Mėginio ėmimo fazėje pelės buvo priverstos atsitiktinai bėgti prie paskirtos rankos, kad gautų atlygį. Po delsos (10 s) jie galėjo bėgti priešinga ranka (teisingas pasirinkimas), kad gautų kitą atlygį, arba bėgti ta pačia, neapdovanota ranka (neteisinga ranka; 7c pav.). Šios užduoties pranašumas yra tai, kad galima atlikti kartotinį testavimą, konkrečią užduoties fazių (mokymo, delsimo, testavimo) izoliaciją ir subjekto kontrolę. Pelės buvo mokomos atlikti šią užduotį be stimuliacijos, kol buvo pasiektas 0,8 kriterijų (tinkamų bandymų dalis) bent dvi dienas. Tiek ChrimsonR, tiek YFP kontrolinės pelės laikui bėgant žymiai pagerėjo (RM-ANOVA, F8=8.738,p Mažiau arba lygu 0.00{{21} }1 pagrindiniam treniruočių dienų efektui). Svarbu tai, kad neradome mokymosi greičio skirtumų tarp dviejų grupių (poromis Tukey;p=0.420; 7d pav.). Kai pelės išmoko su DNMTS užduotimi susietą taisyklę, įvertinome našumą teikdami koduotą (0.792 ± 0.045) arba 8 Hz (0). 850 ± 0.036) optogenetinė stimuliacija tik kodavimo fazėje (priverstinis pasirinkimas) ir nepastebėta jokio veikimo skirtumo, palyginti su pradiniu lygiu (0,825 ± 825 ± 825). 0.030, RMANOVA, F11=2.197, p=0.547, N=17; 7e pav.). Kai stimuliuojama tik uždelsimo laikotarpiu, tik užšifruotos stimuliacijos žymiai sumažino atminties našumą (0,733 ± 0,057), palyginti su pradiniu lygiu (0,825 ± 0,030, RM-ANOVA, F11=3.483, p=0.0495; efekto dydis pagrindiniam gydymo efektui η2p=0.109; 7f pav.). Priešingai, kai buvo stimuliuojama gavimo metu, 8 Hz stimuliuojamos pelės žymiai sumažino atminties našumą (0,675 ± 0,049), palyginti su pradine (0,825 ± 0,030, RM-ANOVA, F11=3.265, p=0). 050; 7g pav.). Priešingai, YFP kontrolinės pelės nebuvo paveiktos stimuliacijos kodavimo metu (RM-ANOVA, F2=0.1314, p=0.8781), delsos periodo (RMANOVA, F2=0.2020, p=0.8197), arba gavimas (RM-ANOVA, F2=0.0454,p=0.9557; poveikio dydis pagrindiniam gydymo efektui, η2p=0 .196) darbinės atminties.

Optogenetinė MS neuronų kontrolė nekeičia judėjimo

Svarbu tai, kad anksčiau buvo pranešta, kad stimuliuojantys teta virpesiai gali sumažinti judėjimo greitį ir jo kintamumą10, o tai bent iš dalies gali paaiškinti optogenetinių stimuliacijų poveikį darbui ir epizodinei atminčiai. Norėdami nuodugniai įvertinti MS optogenetinės stimuliacijos specifiškumą atminčiai, atlikome papildomus eksperimentus, siekdami atmesti tiesioginį optogenetinių stimuliacijų poveikį lokomotoriniam greičiui. Pelių, kurioms buvo sušvirkštas ChrimsonRand, implantuotas optinis pluoštas MS, taip pat LFP elektrodai CA1, buvo leista laisvai tyrinėti atvirą lauką, joms buvo taikoma 5 s ON, 5 s OFF optogenetinė stimuliacija (papildomas 6a pav.). 8 Hz stimuliacija. lėmė nuoseklų hipokampo virpesių stimuliavimą tokiu dažniu (papildomas 6b pav.). Šios stimuliacijos nebuvo susijusios su jokiais akivaizdžiais lokomotorinio elgesio pokyčiais (papildomas 6c pav.), įskaitant vidutinį greitį (nesuporuotas, dvipusis ttestas, t116=0.4140, p=0.6796; papildomas pav.). 6d) ir greičio variacijos koeficientas (CV; nesuporuotas, dviejų krypčių t testas, t116=0.8296,p=0.4095, n=59 stimuliacijos epochos; papildomas 6e pav.) . Panašiai dėl maišytos stimuliacijos teta svyravimai nuolat buvo panaikinti (papildomas 6f pav.), bet jokių akivaizdžių judėjimo elgsenos pokyčių (papildomas 6g pav.), įskaitant vidutinį greitį (nesuporuotas, dviejų uodegų t testas, t118=0).2268 , p=0.8210; n=60 stimuliacijos epochos; papildomas 6h pav.) ir greičio CV (nesuporuotas, dvipusis t testas, t118=1.838, p {{36) }}.686; n=60 stimuliavimo epochos; papildomas 6i pav.).

Nors natūralus teta dažnis ir judėjimo greitis yra susiję59, tiksli priežastinio ryšio tarp šių kintamųjų kryptis tebėra menkai suprantama. Norėdami atsakyti į šį klausimą, atlikome optogenetinę stimuliaciją naudodami 5s ON, 5s OFF paradigmą ir kiekvienai stimuliacijos epochai buvo pasirinktas atsitiktinis dažnis (papildomas 6j pav.). Šie stimuliavimo dažniai apėmė visą juostos spektrą (papildomas 6k pav.). Kaip ir tikėtasi, nustatėme, kad natūralūs teta virpesių dažniai yra tiesiogiai koreliuojami su vienos pelės pavyzdžio veikimo greičiu (R2=0.1114, p Mažiau arba lygu 0.0001; papildomas 6l pav.). Svarbu tai, kad kai teta virpesių dažnis atsiranda dėl MSoptogenetinės kontrolės, koreliacija nukrenta žemiau atsitiktinio lygio (R2=0.0006779, p=0.6244; papildomas 6m pav.), o tai rodo, kad judėjimas diktuoja teta dažnį, bet ne priešingas. Sistemingai pakartojome šiuos rezultatus su pelėmis ir pastebėjome, kad sumažėjo koreliacija tarp teta dažnio ir judėjimo greičio neoptogenetinės stimuliacijos kontrolės (suporuotas t testas, t3=3.922, p=0.0295;N {{20) }} pelių; papildomas 6n pav.). Apskritai šie rezultatai patvirtina, kad mūsų optogenetinė stimuliacija nekeičia lokomotorinio elgesio, o tai labai svarbu kitiems elgesio tyrimams.

For more information:1950477648nn@gmail.com