2 DALIS Akteozido ir jo darinių antioksidacija ir citoprotekcija: palyginimas ir mechaninė chemija

2 dalis Kaip Cistanche Acteoside antioksidantas apsaugo ląsteles?

Spustelėkite čia, norėdami pamatyti 1 dalį

Norėdami gauti daugiau informacijos, kreipkitės:Joanna.jia@wecistanche.com

Cistanche deserticola turi daug efektų, spustelėkite čia, kad sužinotumėte daugiau

3. Diskusija

Yra žinoma, kad natūralių fenolio junginių antioksidacinis poveikis yra susijęs su elektronų perdavimu (ET) [18, 19]. Taigi, kai kurie ET pagrįsti metalą redukuojantys tyrimai buvo plačiai naudojami fenolių antioksidantų lygiui įvertinti, pavyzdžiui, FRAP ir CUPRAC tyrimai. FRAP tyrimo gairės turi būti įvykdytos, kai pH yra mažesnis nei 3,6. Tokia rūgštinė aplinka sėkmingai slopino H plius jonizaciją iš fenolių; taigi, FRAP tyrimas laikomas tik ET procesu [20,21]. Veiksmingumasakteozidoir jo dariniai FRAP tyrime reiškia, kad kai akteozidas ir jo dariniai veikia kaip antioksidantai, jie gali naudoti ET kelią savo antioksidaciniam poveikiui atlikti.

Be to, mes taip pat atlikome CUPRAC tyrimą pH 7,4 buferyje. Kaip matyti iš Suppl. 1,akteozidoir jo dariniai, priklausomai nuo dozės, padidino jų Cu^{2 plius}- sumažina galios procentus, o tai rodo, kad jie gali išlikti ET potencialu esant fiziologiniam pH. Tačiau jų ET potencialai sumažėjo tokia tvarka:akteozido> forsitozidas B > poliumosidas (1 lentelė). Ši dinamika aiškiai rodo, kad apiosilo fragmentas forsitozide B ir ramnozilo fragmentas poliumoside sumažino ET potencialą.

Siekiant patikrinti galimybę, kad ET atsiranda jų radikalų šalinimo procesų metu, tyrime buvo pristatytas deguonies centre esantis laisvasis radikalas PTIO・. Ciklinės voltamperometrijos duomenys atskleidė, kad PTIO・ pašalinimas žemiau pH 5.0 yra viena elektronų redokso reakcija. Pastebėjimas, kadakteozidoir jo dariniai galėtų veiksmingai pašalinti PTIO・ radikalą, kai pH 4,5, rodo ET galimybę radikalų šalinimo procesų metu. Akivaizdu, kad ši išvada dar labiau patvirtina pirmiau minėtus FRAP ir CUPRAC tyrimų rezultatus ir ankstesnius rezultatus, kad donorinis elektronas (e) yra fenolinių antioksidantų savybė [23].

Tačiau esant fiziologiniam pH 7,4, PTIO・ pašalinimo esė yra ne tik ET kelias, bet ir protonų (H plius ) perdavimo būdas. Proceso metu PTIO・ buvo pasiūlyta priimti H^pliusasiš fenolių, kad susidarytų produkto smailė ([PTIO-H]^pliusas). Kadangi H^pliusas-perkėlimas visada lydimas ET pakopiniais arba sinchroniniais mechanizmais [24], realus (arba galutinis) produktas yra [PTIO-H] molekulė [22]. PTIO・ pašalinimas esant pH 7,4 (1 priedas) reiškia, kadakteozidoir jo dariniai taip pat turi H plius perdavimo potencialą. IC50 reikšmės (1 lentelė) parodė, kad santykinis H^pliusas-perdavimo potencialai buvo mažėjančia tvarkaakteozido>forsitozidas B > poliumosidas. Akivaizdu, kad apiosilo ir ramnozilo dalys taip pat susilpnino H^pliusas- perdavimo potencialas antioksidacinio proceso metu.

Kaip aptarta anksčiau, fenolių antioksidacinio proceso metu ET paprastai lydi protonas (H^pliusas) pernešimas, kad susidarytų keli antioksidaciniai mechanizmai [24], tokie kaip vandenilio atomo perkėlimas (HAT) [23, 25-27], nuoseklus elektronų ir protonų perdavimas (SEPT) [26,27], nuoseklus protonų praradimas vieno elektrono. perdavimo (SPLET) [26] ir protonų susietų elektronų perdavimo (PCET) [24-26,28]. Pavyzdžiui, buvo įrodyta, kad pastaruoju metu H plius lygis paveikė ABTS plus • -scavenging, reakcija, kurioje dominuoja vieno elektrono perdavimas (SET) [29]. Todėl ABTS plus • – pašalinimas yra daugiafunkcinis antioksidantų tyrimas [21,31]. Tai, kadakteozidoo jo dariniai gali sunaikinti ABTS plius ・ radikalus, tai rodo, kad jų antioksidacinis poveikis taip pat gali būti tarpininkaujamas įvairiais būdais. Šią hipotezę dar patvirtina įrodymai, gauti iš DPPH・ pašalinimo tyrimo, reakcijos, apimančios kelis HAT, ET, SEPT ir PCET kelius [26, 32]. Tačiau kiekybine analize pagrįsta IC₅₀vertės (1 lentelė) atskleidė, kad kelių kanalų ABTS plius --valymo ir DPPH* pašalinimo aspektai,akteozidobuvo pranašesnis už jam tinkamą forsitozidą B ir ramnosidą poliumosidą. Taigi galima daryti išvadą, kad apiolio ir ramnozilo dalys ilgainiui trukdo kelių takų potencialams (ypač ET ir H^pliusas-perkėlimas) laisvųjų radikalų šalinimo proceso metu.

Kaip pažymėjo autoriai ir kiti [14, 26], antioksidacinio proceso metu taip pat gali įvykti RAF reakcija. Tačiau norint patikrinti RAF galimybę, trys fenilpropanoido glikozidai kartu su kavos rūgštimi buvo ištirti naudojant UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS analizę. Nustatyta, kad kavos rūgštis sudaro dimerinį produktą, o trys fenilpropanoido glikozidai nesukūrė RAF produkto smailės. Šis atradimas aiškiai rodo, kad trys fenilpropanoidiniai glikozidai negali atlikti RAF kelio, kad galėtų atlikti savo antioksidacinį poveikį. Kadangi trys fenilpropanoidiniai glikozidai gali būti laikomi kavos rūgšties esteriais (1 pav.), toks kavos rūgšties ir kavos rūgšties esterių skirtumas taip pat rodo, kad didžiulė dalis gali trukdyti susidaryti RAF.

Kartu paėmus laisvųjų radikalų šalinimo aspektą,akteozidoir jo dariniai gali paveikti daugybę antioksidacinių veiksmų. Šie antioksidantų keliai bent jau yra susiję su ET ir H plius perdavimu (bet ne RAF). Mūsų išvadas iš dalies patvirtina teorinis tyrimas, kurisakteozidogali turėti antioksidacinį poveikį per SPLET kelią. Šio proceso metu akteozidas pirmiausia gali deprotonuotis (H^pliusas-pernešimas) gauti anijoną. Manoma, kad deprotonacija vyksta silpno rūgštingumo katecholinėse dalyse. Vėliau anijonas paaukojo elektronus, kad susidarytų fenoksiradikalo forma [33]. Tačiau fenoksi radikalai su pn konjugacija tam tikru mastu yra stabilūs. Žinoma, šiuo atžvilgiu ateityje reikia tolesnio eksperimentinio darbo.

Verta paminėti, kad ląstelių oksidacinis stresas taip pat gali kilti dėl pereinamųjų metalų (ypač Fe^{2 plius}). Fe^{2 plius}tačiau jonas gali transformuoti H₂O₂molekulė virsta kenksmingiausiais •OH radikalais per Fentono reakciją (Fe²plius plius H2O2 T Fe³plius plius ・OH plius OH^-). Todėl Fe slopinimas²plius lygis gali veiksmingai slopinti · OH radikalus, kad pašalintų ląstelių oksidacinį stresą. Tiesą sakant, geležies chelatų sudarymas natūraliais fenoliniais antioksidantais dabar buvo sukurtas kaip veiksmingas gydymas kai kurioms oksidacinio streso ligoms [34, 35].

Šiame tyrime akteozidas ir jo dariniai buvo pasiūlyti kaip veiksmingi Fe^{2 plius}-chelatoriai pagal spektroskopijos ir tirpalo spalvų pokyčius (2 pav.). Nepaisant to, akteozidas yra prastesnis už du gliukozidus chelatinėje Fe^{2 plius}o forsitozidas B su apiosilo fragmentu yra prastesnis už poliumosidą su ramnozilo fragmentu. Remiantis jų pirmenybinių konformacijų palyginimu (1 pav., dešinėje), siūloma, kad apiosilo (arba ramnosilo) fragmentas gali padėti pagrindiniam ligandui (fenilpropanoido grupei) sudaryti Fe chelatą.^{2 plius}. Toks sinerginis poveikis neabejotinai sustiprina Fe^{2 plius}- chelatinis gebėjimas ir padidina UV spindulių smailes. Tačiau ramnozilas yra veiksmingesnis už apiosilą savo Fe^{2 plius}- chelatinis gebėjimas. Skirtumas gali būti siejamas su tuo, kad ramnozilas yra egzociklinės formos (ty aL-ramnopiranozilas), o apiosilas yra pentaciklinės formos (ty pD-apiofuranzilas). Yra žinoma, kad egzociklinė forma yra didesnė ir stabilesnė. Taigi, egzociklinis ramnozilas yra efektyvesnis, palyginti su pentacikliniu apiosilu savo Fe^{2 plius}- chelatinis gebėjimas.

Norėdami patikrinti, ar akteozidas ir jo dariniai gali sunaikinti ROS, atlikome pirogalolio autoksidacijos tyrimą. Kaip matyti iš Suppl. 1, visi galėtų veiksmingai pašalinti radikalą, tipišką ROS, atsirandantį ląstelėse. Tačiau santykinis biologinis aktyvumas sumažėjo poliumosidas > forsitozidas B >akteozido. Ši tvarka taip pat yra lygiagreti citoprotekcinio poveikio tvarkai (2 lentelė). Šis atradimas rodo, kad bendras ramnozilo fragmento arba apiosilo dalies poveikis yra sustiprinti ROS šalinimo arba citoprotekcinį poveikį.

4. Medžiagos ir metodai

4.1. Chemikalai ir gyvūnai

Akteozidas (CAS numeris: 61276-17-3, 97 proc.), forsitozidas B (CAS numeris: 81525-13-5,97 proc.) buvo gautas iš BioBioPha (Kunmingas, Kinija, 3 priedas). Poliumosidą (CAS numeris: 94079-81-9, 97 proc.) mūsų komanda išskyrė iš tradicinės kiniškos žolėsCallicarpa periHT Chang (3 priedas). DPPH・,(±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilchromano-2-karboksirūgštis (Trolox), 2,9-dimetil{{ 9}},10-fenantrolinas (neokuproinas), 2,4,6-tripiridiltriazinas (TPTZ) ir pirogalolis buvo įsigyti iš Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co. (Šanchajus, Kinija). (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis (3-etilbenzen-tiazolino-6-sulfonrūgšties diamonio druska)] buvo gautas iš Amresco Chemical Co. (Solonas, OH, JAV). PTIO・radikalas buvo nupirktas iš TCI Development Co., Ltd. (Šanchajus, Kinija). Kavos rūgštis pirkta iš Nacionalinio farmacijos ir biologinių produktų kontrolės instituto (Pekinas, Kinija). Dulbecco modifikuota Eagle terpė (DMEM), vaisiaus galvijų serumas (FBS) ir tripsinas buvo įsigyti iš Gibco (Grand Island, NY, JAV).AnneksinV/propidžio jodido (PI) tyrimo rinkinys buvo įsigytas iš Invitrogen (Karlsbadas, CA, JAV). Visi kiti reagentai buvo analitinės kokybės.

4 savaičių amžiaus Sprague-Dawley (SD) žiurkės buvo gautos iš Guangdžou kinų medicinos universiteto gyvūnų centro. Šio eksperimento protokolas buvo atliktas prižiūrint Kinijos Guangdžou universiteto (patvirtinimo numeris 20170306A) Instituciniam gyvūnų etikos komitetui.

4.2. Metalo mažinimo tyrimai (FRAP& CUPRAC)

Metalą redukuojantys tyrimai apima Fe^{3 plius}- sumažinimo galios tyrimas ir Cu^{2 plius}- sumažinimo galios tyrimas. Fe^{3 plius}- redukcinį tyrimą sukūrė Benzie ir Strain ir jis oficialiai pavadintas FRAP [20]. Šio tyrimo eksperimentinis protokolas buvo aprašytas ankstesnėje ataskaitoje [9]. Trumpai tariant, FRAP reagentas buvo paruoštas šviežiai sumaišant 10 mM TPTZ, 20 mM FeCl_3,ir {{0}},25 M acetatinio buferio santykiu 1:1:10, kai pH 3,6. Tiriamasis mėginys (x=4-20 L, 0,05 mg/mL) buvo įpiltas į (20–x) 95 procentų etanolio, po to 80 RL FRAP reagento. Po 30-min. inkubacijos aplinkos temperatūroje absorbcija buvo išmatuota esant 595 nm, naudojant mikroplokštelių skaitytuvą (Multiskan FC, Thermo Scientific, Šanchajus, Kinija). Santykinė mėginio redukcinė galia buvo apskaičiuota pagal šią formulę:

kur_maksbuvo didžiausia reakcijos mišinio absorbcija su mėginiu, o A_minyra mažiausia absorbcija atliekant bandymą. A yra mėginio absorbcija.

Cu^{2 plius}- redukcinė galia taip pat gali apibūdinti antioksidantų lygį, todėl ji vadinama CUPRAC. Šis tyrimas buvo atliktas pagal anksčiau paskelbtą metodą [36]. Trumpai tariant, 12 RL CuSOq vandeninio tirpalo (10 mmol/L), 12 RL neokuproino etanolio tirpalo (7,5 mmol/L) ir (75–x) RL CH₃COONH₄buferinis tirpalas ({{0}},1 mol/L, pH 7,5) buvo įpiltas į duobutes su skirtingais mėginio tūriais (0,05 mg/mL, 4-20 |^L). Absorbcija esant 450 nm po 30 minučių buvo išmatuota naudojant pirmiau minėtą mikroplokštelių skaitytuvą. Santykinė CUPRAC galia buvo apskaičiuota naudojant FRAP formulę. A_maksbuvo didžiausia reakcijos mišinio absorbcija su mėginiu, o A_minyra mažiausia absorbcija atliekant bandymą. A yra mėginio absorbcija.

4.3. PTI0・- Išvalymo tyrimas

PTIO* pašalinimo tyrimai (esant pH 4,5 arba pH 7,4) buvo atlikti remiantis mūsų metodu [16]. Trumpai tariant, tiriamojo mėginio tirpalas (x=0-20 ^L, 1 mg/mL, kai pH 4,5 ir {{10}},5 mg/mL, kai pH 7,4) buvo pridėtas į (20 — x) rL 95 procentų etanolio, po to 80 RL vandeninio PTIO* tirpalo. Vandeninis PTIO* tirpalas buvo paruoštas naudojant fosfato-sviesto tirpalą (0,1 mM, pH 4,5 arba pH 7,4). Mišinys buvo palaikomas 37 laipsnių temperatūroje 2 valandas, o absorbcija buvo matuojama esant 560 nm, naudojant pirmiau minėtą mikroplokštelių skaitytuvą. PTIO* slopinimo procentas buvo apskaičiuotas taip:

kur A laipsnis yra kontrolinės medžiagos absorbcija be mėginio, o A yra reakcijos mišinio su mėginiu absorbcija.

4.4. ABTSpliusas*- Valymas ir DPPH*- Išvalymo tyrimai

ABTS*^pliusas-siurbimo aktyvumas buvo įvertintas pagal metodą [37]. ABTS plus * buvo pagamintas sumaišius 0,2 ml ABTS diamonio druskos (7,4 mmol/L) su 0,2 ml kalio persulfato (2,6 mmol/L). Mišinys 12 valandų buvo laikomas tamsoje kambario temperatūroje, kad būtų baigtas radikalų susidarymas, o po to praskiedžiamas distiliuotu vandeniu (santykiu maždaug 1:20), kad jo absorbcija prie 734 nm būtų { {16}}.35 土 0.01 naudojant pirmiau minėtą mikroplokštelių skaitytuvą. Norint nustatyti plovimo aktyvumą, tiriamasis mėginys (x=4-20 RL, 0,05 mg/mL) buvo įpiltas į (20 - x) RL distiliuoto vandens, po to 80 RL ABTS plius * reagento, o absorbcija esant 734 nm buvo išmatuotas praėjus 3 minutėms po pradinio sumaišymo, kaip tuščią mėginį naudojant distiliuotą vandenį.

DPPH* radikalų šalinimo aktyvumas buvo nustatytas taip, kaip aprašyta anksčiau [18]. Trumpai tariant, 75 RL DPPH* tirpalo (0,1 rM) buvo sumaišyti su nurodytos koncentracijos mėginiu (0,025 mg/mL, 5-25 RL), ištirpintu metanolyje. Mišinys buvo palaikomas kambario temperatūroje 30 minučių, o absorbcija buvo matuojama esant 519 nm, naudojant pirmiau minėtą mikroplokštelių skaitytuvą.

ABTS plius • valymo aktyvumo ir DPPH* šalinimo aktyvumo procentai buvo apskaičiuoti pagal formulę, pateiktą 4.3 skyriuje.

4.5. UPLC—ESI– Q-TOF—MS/MS PPH analizė* Reakcijos produktai

Šis metodas buvo pagrįstas mūsų ankstesniu tyrimu [25]. Akteozido tirpalas metanolyje buvo sumaišytas su DPPH* radikalų tirpalu metanolyje, esant moliniam santykiui 1:2, ir gautas mišinys inkubuojamas 24 valandas kambario temperatūroje. Tada produktų mišinys buvo filtruojamas per 0.22-Rm filtrą ir analizuojamas naudojant UPLC sistemą su C18 kolonėle (2.0 mm id x 100 mm, 1,6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, JAV). Mobilioji fazė buvo naudojama sistemos eliuavimui, kurią sudarė metanolio (A fazė) ir vandens (B fazė) mišinys. Kolonėlė eliuuojama 0,3 ml/min srauto greičiu, naudojant tokią gradiento eliuavimo programą: 0-10 min., 60-100 proc. A; 10-15 min., 100 proc. A. Mėginio įpurškimo tūris buvo nustatytas 1 RL, kad būtų atskirti skirtingi komponentai. ESI-Q-TOF-MS/MS analizė buvo atlikta naudojant Triple TOF 5600pliusasMasės spektrometras (AB SCIEX, Framingham, MA, JAV), turintis ESI šaltinį, kuris buvo paleistas neigiamos jonizacijos režimu. Nuskaitymo diapazonas buvo nustatytas 100-2000 Da. Sistema buvo paleista šiais parametrais: jonų purškimo įtampa, –4500 V; jonų šaltinio šildytuvas, 550 laipsnių C; užuolaidų dujos (CUR, N2), 30 psi; purškimo dujos (GS1, Oras), 50 psi; Tis dujos (GS2, Oras), 50 psi. Deklasteravimo potencialas (DP) buvo nustatytas ties –100 V, o susidūrimo energija (CE) –40 V, o susidūrimo energijos sklaida (CES) – 20 V. RAF produktai

buvo kiekybiškai įvertinti iš suminės jonų chromatogramos ištraukiant atitinkamą molekulinę formulę (2 priedas).

Anksčiau minėtas eksperimentas buvo pakartotas naudojant forsitozidą B, podiumo pusę ir kavos rūgštį. Atitinkamasm/zsmailės buvo išskirtos iš atitinkamos molekulinės formulės iš suminės jonų chromatogramos (2 priedas).

4.6. Fe UV-Vis-spektro analizė^{2 plius}- Chelatiniai produktai

Fe^{2 plius}- chelatiniai akteozido-Fe reakcijos produktai^{2 plius}buvo įvertinti naudojant UV-Vis-spektroskopiją [13]. Eksperimentui 300 metanolio akteozido tirpalo (0,24 mM) buvo pridėta į 700 rL vandeninio FeCl tirpalo. 4H2O (168 mM). Tada tirpalas buvo intensyviai maišomas. Vėliau gautas mišinys buvo nuskaitytas naudojant UV-Vis spektrofotometrą po valandos (Unico 2600A, Šanchajus, Kinija) nuo 200-850 nm.

Pirmiau minėtas eksperimentas buvo pakartotas naudojant forsitozidą B arba podiumo pusę, o ne akteozidą.

4.7. Pirogalolio autooksidacijos tyrimas superoksido anijonui nustatyti (•O2~) Valymas

Superoksido anijonų (・.{0}}) valymo aktyvumo matavimas buvo pagrįstas mūsų metodu [17]. Trumpai tariant, mėginys buvo ištirpintas 1 mg/ml etanolyje. Mėginio tirpalas (x rL) buvo sumaišytas su Tris-HCl buferiu (980 - x rL, 0,05 M, pH 7,4), turinčiu EDTA (1 mM). Kai buvo pridėta 20 RL pirogalolio (60 mM 1 mM HCl), mišinys nedelsiant suplakamas kambario temperatūroje. Mišinio absorbcija ties 325 nm buvo išmatuota (Unico 2100, Šanchajus, Kinija) prieš Tris-HCl buferį kaip tuščias mėginys kas 30 s 5 minutes. Valymo gebėjimas buvo apskaičiuotas taip:

4.8. Citoprotekcinis poveikis oksidacinio streso patiriantiems bmMSC (MTT tyrimas)

BmMSC buvo auginami pagal mūsų ankstesnes ataskaitas [38] su nedideliais pakeitimais. Trumpai tariant, kaulų čiulpai buvo gauti iš žiurkės šlaunikaulio ir blauzdikaulio. Smegenų čiulpų mėginiai buvo atskiesti DMEM (mažas gliukozės kiekis), turinčiu 1 0 procentų FBS. BmMSC buvo paruošti gradientu centrifuguojant 900 g 30 minučių esant 1, 073 g / ml Percoll. Paruoštos ląstelės buvo atskirtos apdorojant 0,25 procento tripsino ir perkeltos į kultivavimo kolbas 1 x 104 / cm². BmMSC, esantys 3 pasėjime, buvo įvertinti dėl auginamų ląstelių homogeniškumo, naudojant CD44 aptikimą naudojant MTT tyrimą [39].

MTT tyrimas buvo naudojamas akteozido ir jo darinių citoprotekciniam poveikiui bmMSC įvertinti [40]. Sužalojimo modelis buvo sukurtas remiantis ankstesniu tyrimu [41]. Eksperimento protokolas trumpai parodytas 3 paveiksle.

4.9. Statistinė analizė

Kiekvienas eksperimentas 4 skyriuose.{1}}.4 ir 4.7 buvo atliktas trimis egzemplioriais, o MTT tyrimo eksperimentas buvo atliktas penkių egzempliorių. Duomenys buvo įrašyti kaip vidurkis土SD (standartinis nuokrypis). Dozės ir atsako kreivės buvo nubraižytos naudojant Origin 6.{2}} profesionalią programinę įrangą (OriginLab, Northampton, MA, JAV). IC50 vertė buvo apibrėžta kaip galutinė 50 procentų radikalų slopinimo koncentracija (santykinė redukcijos galia) [42]. Statistiniai palyginimai buvo atlikti naudojant vienpusį ANOVA, siekiant nustatyti reikšmingus skirtumus, naudojant SPSS 13.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, JAV), skirtą Windows.p< 0.05 buvo laikomas statistiškai reikšmingu.

5. Išvados

Trys natūralūs fenilpropanoidiniai glikozidai, būtent akteozidas, forsitozidas B ir podiumo pusė, gali būti įtraukti į daugybę antioksidacinio poveikio būdų, įskaitant ET, H plius pernešimą; ir Fe^{2 plius}- chelatiniai, bet ne RAF. ET ir H^pliusas-pernešimo kelius gali trukdyti ramnozilo fragmentas arba apiosilo fragmentas; tačiau Fe^{2 plius}-chelatinį kelią gali sustiprinti cukraus likučiai (ypač ramnozilo dalis). Bendras ramnozilo fragmento arba apiosilo fragmento poveikis yra sustiprinti su keliais keliais susijusius ROS pašalinimo gebėjimus. Taigi, forsitozidas B ir poliumosidas yra pranašesni už akteozidą citoprotekciniu poveikiu.

Papildomos medžiagos:Papildomą medžiagą galima rasti internete. 1. Dozės ir atsako kreivės; 2. HPLC-MS spektrai; 3. Akteozido, forsitozido B ir poliumosido analizės sertifikatai.

Padėkos:Šį darbą rėmė Kinijos nacionalinis mokslo fondas (81573558, 81603269), Guangdongo mokslo ir technologijų projektas (2017A050506043) ir Guangdongo provincijos gamtos mokslų fondas (2 017A030312009, 2015A0303104).

Autoriaus indėlis:Xian Li ir Dongfeng Chen sumanė ir sukūrė eksperimentus; Aichi Wu paruošė poliumosidą; Yulu Xie, Qian Guo ir Penghui Xue atliko antioksidantų eksperimentus; Ke Li ir Wei Zhao atliko MTT eksperimentus; Hong Xie išanalizavo duomenis; Jiasong Guo atliko eksperimentą 2D paveiksle; Xian Li parašė dokumentą. Visi autoriai perskaitė ir patvirtino galutinį rankraštį.

Interesų konfliktai:Autoriai pareiškia, kad nėra interesų konflikto.

akteozidoincistanche

A santrumpos

ABTS plus • 2,2'-azinobis (3-etilbenzotiazolino-6-sulfonrūgštis) radikalas

bmMSCs kaulų čiulpų kilmės mezenchiminės kamieninės ląstelės

CUPRAC varį mažinantis antioksidacinis pajėgumas

dAMP 2'-deoksiadenozino-5'-monofosfato radikalas

DMEM Dulbecco modifikuota Eagle terpė

dGMP 2^/-deoksiguanozino-5'-monofosfato radikalas

DPPHe 1,1-difenil-2-pikrilhidrazino radikalas

ET elektronų perdavimas; FBS: galvijų vaisiaus serumas

FRAP geležies jonų mažinanti antioksidacinė galia;

HAT vandenilio atomo perkėlimas

MTT 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenilas

PCET su protonais susietų elektronų perdavimas

PTIOe 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolino-1-oksilo 3-oksilo radikalas

RAF radikalų addukto susidarymas

ROS reaktyviosios deguonies rūšys

SCNT somatinių ląstelių branduolio perkėlimas

SEPT nuoseklus elektronų-protonų perdavimas

SPLET nuoseklus protonų praradimo vieno elektrono perdavimas

TPTZ 2,4,6-tripiridilo triazinas

Trolox (±)-6-hidroksil-2,5,7,8-tetrametilchromanas-2-karboksirūgštis

Nuorodos

1. Kubica, P.; Szopa, A.; Ekiert, H. Verbascoside ir fenolio rūgščių gamyba Verbena Officinalis L. (verbos) biomasėje, auginamoje skirtingomis in vitro sąlygomis. Nat. Prod. Res. 2017, 31, 1663-1668.

2. Lee, JH; Chun, JL; Kimas, KJ; Kim, EY; Kimas, DH; Lee, BM; Hanas, KW; Parkas, KS; Lee, KB; Kim, MK Akteozido, kaip ląstelių apsaugos priemonės, poveikis gaminant klonuotą šunį. PLoS ONE 2016,11, e0159330.

3. Vangas, būstinė; Xu, YX; Yang, J.; Zhao, XY; Saulė, XB; Zhang, YP; Guo, JC; Zhu, CQ Acteoside apsaugo žmogaus neuroblastomos SH-SY5Y ląsteles nuo |3-amiloido sukelto ląstelių pažeidimo. Brain Res. 2009, 1283, 139-147.

4. Yang, JH; Yan, Y.; Liu, HB; Wang, JH; Hu, JP Apsauginis akteozido poveikis nuo rentgeno spindulių sukeltos žalos žmogaus odos fibroblastams. Mol. Med. Rep. 2015, 12, 2301-2306.

5. Liu, CH; Liu, TS; Luo, CQ; Zhang, J.; Zengas, XY; Cui, L.; Xie, LJ Forzitiazido B ir poliumosido nustatymas skirtingos kilmės ir dalių iš Callicarpa kwangtungensis. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 2013, 38, 3324-3326.

6. Jiang, WL; Tianas, JW; Fu, FH; Zhu, HB; Hou, J. Forsitozido B neuroprotekcinis veiksmingumas ir terapinis langas: Ina žiurkės smegenų išemijos ir reperfuzijos pažeidimo modelis. Euras. J. Pharmacol. 2010, 640, 75-81.

7. Panas N.; Hori, H. Antioksidacinis akteozido ir jo analogų poveikis lipidų peroksidacijai. Redox Rep. 1996, 2, 149-154.

8. Zheng, RL; Shi, YM; Jia, ZJ; Zhao, CY; Zhang, Q.; Tan, XR greitas DNR radikalų taisymas. Chem. Soc. Rev. 2010, 39, 2827-2834.

9. Li, XC; Mai, WQ; Chen, DF Myricitrino apsauginio poveikio nuo hidroksilo sukelto DNR pažeidimo ir antioksidacinio mechanizmo cheminis tyrimas. J. Chinas. Chem. Soc. 2014, 61, 383-390.

10. Ši, YM; Wang, WF; Huangas, CY; Jia, ZJ; Yao, S.; Zheng, RL Greitas oksidacinio DNR pažeidimo dėl fenilpropanoidų glikozidų ir jų analogų taisymas. Mutagenesis 2008, 23, 19-26.

11. Jiang, Q.; Li, XC; Tianas, YG; Linas, QQ; Xie, H.; Lu, WB; Chi, YG; Chen, DF liofilizuoti vandeniniai Mori Fructus ir Mori Ramulus ekstraktai apsaugo mezenchimines kamienines ląsteles nuo eOH apdorotų pažeidimų: biologinis tyrimas ir antioksidacinis mechanizmas. BMC papildymas. Altern. Med. 2017, 17, 242.

12. Vangas, TT; Zengas, GC; Li, XC; Zeng, HP In vitro tyrimai dėl 2-pakeistų-8-hidroksichinolino darinių antioksidacinio ir apsauginio poveikio H2O2-sukeltam oksidaciniam stresui BMSC. Chem. Biol. Drug Des. 2010, 75, 214-222.

13. Liu, JJ; Li, XC; Linas, J.; Li, YR; Vangas, TT; Jiang, Q.; Chen, DF Sarcandra Glabra (Caoshanhu) apsaugo mezenchimines kamienines ląsteles nuo oksidacinio streso: biologinis įvertinimas ir mechaninė chemija. BMC papildymas. Altern. Med. 2016, 16, 423.

14. Li, XC; Han, L.; Li, YR; Zhang, J.; Chen, JM; Lu, WB; Zhao, XJ; Lai, YT; Chenas, DF; Wei, G. Sinapino apsauginis poveikis nuo hidroksilo radikalų sukeltos žalos mezenchiminėms kamieninėms ląstelėms ir galimi mechanizmai. Chem. Pharm. Bull. 2016, 64, 319-325.

15. Bertolo, A.; Capossela, S.; Franklis, G.; Baur, M.; Potzel, T.; Stoyanov, J. Oksidacinis statusas numato žmogaus mezenchiminių kamieninių ląstelių kokybę. Stem Cell Res. Ten. 2017, 8, 3.

16. Li, XC 2-fenil-4,4,5,5-tetrametilimidazolino-1-oksilo 3-oksido (PTIOe) radikalų šalinimas: naujas ir paprastas antioksidantas Tyrimas In vitro. J. Agrič. Food Chem. 2017, 65, 6288-6297.

17. Li, X. Patobulintas pirogalolio autoksidacijos metodas: patikimas ir pigus superoksido pašalinimo tyrimas, tinkantis visiems antioksidantams. J. Agrič. Food Chem. 2012, 60, 6418-6424.

18. Li, XC; Jiang, Q.; Vangas, TT; Liu, JJ; Chen, DF Kvercitrino ir izokvercitrino antioksidacinio poveikio palyginimas: 6〃-OH grupės vaidmens supratimas. Molekulės 2016, 21,1246.

19. Leopoldinis, M.; Marino, T.; Russo, N.; Toscano, M. Fenolinių junginių antioksidacinės savybės: H atomo ir elektronų perdavimo mechanizmas. J. Phys. Chem. A 2004,108, 4916^922.

20. Benzie, IFF; Padermė, JJ. Plazmos geležies redukcinis gebėjimas (FRAP) kaip „antioksidacinės galios“ matas: FRAP tyrimas. Anal. Biochem. 1996, 239, 70-76.

21. Gulcin, I. Maisto sudedamųjų dalių antioksidacinė veikla: apžvalga. Arch. Toksikolis. 2012 m., 86, 345-391.

22. Goldstein, S.; Russo, A.; Samuni, A. PTIO ir karboksi-PTIO reakcijos su ・NO, ・NO2 ir O2. J. Biol. Chem. 2003, 278, 50949-50955.

23. Li, X.; Han, WJ; Mai, WQ; Wang, L. Tetrahidroamentoflavono antioksidacinis aktyvumas ir mechanizmas in vitro. Nat. Prod. Komun. 2013, 8, 787-789.

24. Zhang, HY; Wu, W.; Mo, YR Protonų sujungtų elektronų perdavimo (PCET) tyrimas su keturiomis aiškiai išreikštomis diabetinėmis būsenomis ab initio lygiu. Comput. Theor. Chem. 2017, 1116, 50-58.

25. Linas, J.; Li, XC; Chen, L.; Lu, WZ; Chen, XW; Han, L.; Chen, DF Apsauginis poveikis prieš hidroksilo radikalų sukeltą DNR pažeidimą ir [6]-gingerolio antioksidacinis mechanizmas: cheminis tyrimas. Bull. Korėjos Chem. Soc. 2014, 35, 1633-1638.

26. Iuga, C.; Alvarez-Idaboy, JR; Russo, N. Trans-Resveratrolio antioksidacinis aktyvumas hidroksilo ir hidroperoksilo radikalų atžvilgiu: kvantinės cheminės ir skaičiavimo kinetikos tyrimas. J. Org. Chem. 2012, 77, 3868-3877. [CrossRef] [PubMed]

27. Li, XC; Hu, QP; Jiang, SX; Li, F.; Linas, J.; Han, L.; Honkongas, YL; Lu, WB; Gao, YX; Chen, DF Flos Chrysanthemi Indici Antioksidaciniu mechanizmu apsaugo nuo hidroksilo sukeltų DNR ir MSC pažeidimų. J. Saudi Chem. Soc. 2015, 19, 454-460.

28. Amicas, A.; Markovičius, Z.; Markovičius, JMD; Stepanikas, V.; Liučikas, B.; Amic, D. Flavonoidų laisvųjų radikalų pašalinimo potencialo geresnio prognozavimo link: dvigubų PCET mechanizmų reikšmė. Food Chem. 2014, 152, 578-585.

29. Lee, CH; Yoon, JY UV Tiesioginė 2,2'- ir bis(3-etilbenzotiazolino-6-sulfonato) (ABTS) fotolizė vandeniniame tirpale: kinetika ir mechanizmas. J. Photochem. Photobiol. A 2008, 197, 232-238.

30. Aliaga, C.; Lissi, EA 2,2'-Azinobis (3-Etilbenzotiazolino-6-Sulfono rūgšties (ABTS) išvestinių radikalų reakcija su hidroperoksidais. Kinetika ir mechanizmas. Int. J. Chem. Kinet. 1998, 30, { {8}}.

31. Osmanas, AM; Wongas, KKY; Fernyhough, A. ABTS Radikalų sukelta polifenolių oksidacija: kovalentinių adduktų išskyrimas ir struktūrinis išaiškinimas. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 2006, 346, 321-329.

32. Osman, AM Keli 2,2-difenilo-1-pikrilhidrazilo radikalo (DPPHe) reakcijos su (plius )-katechinu būdai: kovalentinio adukto tarp DPPHe ir oksiduotos formos susidarymo įrodymai polifenolio. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 2011, 412, 473-478.

33. Lopez-Munguia, A.; Hernandez-Romero, Y.; Pedraza-Chaverri, J.; Miranda-Molina, A.; Regla, I.; Martinezas, A.; Castillo, E. Fenilpropanoido glikozido analogai: fermentinė sintezė, antioksidacinis aktyvumas ir jų laisvųjų radikalų šalinimo mechanizmo teorinis tyrimas. PLoS ONE 2011, 6, e20115.

34. Perronas, NR; Brumaghim, JL. Polifenolio junginių, susijusių su geležies surišimu, antioksidacinių mechanizmų apžvalga. Ląstelių Biochem. Biofizė. 2009, 53, 75-100.

35. Devos, D.; Moreau, C.; Devedžianas, JC; Kluza, J.; Perrault, M.; Laloux, C.; Jonneaux, A.; Ryckewaert, G.; Garkonas, G.; Rouaix, N.; ir kt. Chelatinės geležies taikymas kaip Parkinsono ligos gydymo būdas. Antioksidas. Redokso signalas. 2014, 21, 195-210.

36. Čekičius, SD; Baskanas, KS; Totemas, E.; Apak, R. Modifikuoto vario redukcinio antioksidacinio pajėgumo (CUPRAC) tyrimas, skirtas išmatuoti tiolio turinčių baltymų antioksidacinį pajėgumą maišant su polifenoliais. Talanta 2009, 79, 344-351.

37. Li, XC; Chenas, DF; Mai, Y.; Wen, B.; Wang, XZ Antioksidacinės veiklos in vitro ir Astragali šaknų cheminių komponentų (Huangqi) suderinamumas. Nat. Prod. Res. 2012, 26, 1050-1053.

38. Chenas, DF; Li, XC; Xu, ZW; Liu, XB; Du, SH; Li, H.; Džou, JH; Zengas, HP; Hua, ZC heksadekano rūgštis iš Buzhong Yiqi nuoviro sukėlė kaulų čiulpų mezenchiminių kamieninių ląstelių dauginimąsi. J. Med. Maistas 2010, 13, 967-975.

39. Li, X.; Liu, JJ; Linas, J.; Vangas, TT; Huangas, JY; Linas, YQ; Chen, DF Apsauginis dihidromiricetino poveikis nuo »OH sukelto mezenchiminių kamieninių ląstelių pažeidimo ir mechaninės chemijos. Molekulės 2016, 21, 604.

40. Vangas, GR; Li, XC; Zeng, HP Synthesis, (E)-9-p-tolil-3-2-(8-hidroksichinol- 2-il)vinilkarbazolo ir (E){{8 antioksidacinis aktyvumas }}(p-anizilas)-3-2-(8-hidroksichinol-2-il)vinilkarbazolas ir jų indukcija mezenchiminių kamieninių ląstelių dauginimuisi. Acta Chim. Nuodėmė. 2009, 67, 974-982.

41. Li, X.; Wei, G.; Wang, X.; Liu, D.; Dengas, R.; Li, H.; Zhou, J.; Li, Y.; Zengas, H.; Chen, D. Atraktilenolidų nukreipimas į Shh kelią skatina chondrogeninę mezenchiminių kamieninių ląstelių diferenciaciją. Biol. Pharm. Bull. 2012, 35, 1328-1335.

42. Li, XC; Gao, YX; Li, F.; Liangas, AF; Xu, ZM; Bai, Y.; Mai, WQ; Han, L.; Chen, DF Maclurin apsaugo nuo hidroksilo radikalų sukeltos žalos mezenchiminėms kamieninėms ląstelėms: antioksidantų įvertinimas ir mechaninė įžvalga. Chem. Biol. Bendrauti. 2014, 219, 221-228.

Mėginio prieinamumas: junginio poliumosido pavyzdį galite gauti iš autorių.

© 2018 autorių. Licenciatas MDPI, Bazelis, Šveicarija. Šis straipsnis yra atviros prieigos straipsnis, platinamas pagal Creative Commons Attribution (CC BY) licencijos sąlygas (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z).