2 dalis Cistanche Deserticola feniletanozido poveikis amiloidinio baltymo ekspresijai APP / PS1 transgeninių pelių hipokampe

2 dalis Veiksmingi Cistanche ingredientai: gydomasis visofeniletanoidiniai glikozidaiir Akteozidai nuo Alzheimerio ligos

Spustelėkite čia, norėdami pamatyti 1 dalį

Norėdami gauti daugiau informacijos, susisiekite su ali.ma@wecistanche.com

Spustelėkite Cistanche DHT Alzheimerio ligai gydyti

4 . Išvada

Alzheimerio ligadaugiausia atsiranda centrinėje nervų sistemoje ir yra sukeltas daugelio veiksnių. Kol kas jo patogenezė vis dar neaiški, tačiau tyrimų esmė vis dar yra apie A. Kaip pagrindiniai peptidai, kuriuos smegenyse išskiria APP, nenormalus A 1-42 ir A 1-40 nusėdimas negali tiesiogiai sukelti neuronų degeneracijos. Etiologijos požiūriu, A 1-42 gaminami tirpūs oligomerai ADDL sukelia smegenis Tikroji neuronų degeneracijos priežastis. Tačiau šių dviejų baltymų ekspresijos tyrimas taip pat gali atspindėti AD smegenų pažeidimų mastą realiuoju laiku, netiesiogiai parodyti tirpių oligomerų ADDL ekspresiją ir tada dinamiškai stebėti neuronų pažeidimus smegenyse nuo šaltinio, suteikdamas ligų prevencijos ir gydymo nuoroda. Atsižvelgiant į tai, A 1-42 ir A 1-40 tapo pagrindiniais AD patogenezės tyrimo taikiniais. Hipokampas yra pagrindinė smegenų dalis, skirta įvertinti gebėjimą mokytis ir atmintį. Jos neuronų pažeidimas yra pagrindinė kognityvinės disfunkcijos priežastis sergant AD. Hipokampo CA1 sritis yra viena iš pagrindinių AD patologinio pažeidimo dalių. Šioje eksperimento dalyje naudojamas HE. Dažymo metodas parodė, kad normalios grupės hipokampo CA1 srities neuronai buvo išsidėstę tvarkingai ir sandariai, pasiskirstę tolygiau ir turėjo aiškius sluoksnius. Modelių grupėje pelės hipokampo CA1 sritis parodė degeneracinius pokyčius, tokius kaip neuronų ląstelių apoptozė dėl sužalojimo. Po skirtingų dozių Cistanche fenetilo alkoholio glikozidų grupių įsikišimo, hipokampo CA1 srities ląstelių morfologija.

Visi turi skirtingą pagerėjimo laipsnį, o tai rodoCistanche feniletanoidiniai glikozidaigali turėti įtakos neuronų apsaugai ir jų apoptozės slopinimui, tačiau kadangi HE dažymas nėra specifinis ląstelių apoptozei ir neuronų praradimui, vėlesniame etape vis tiek būtina nukreipti apoptozei būdingas molekules. Atitinkamas žymenų aptikimas.

Išankstinis tiriamo audinio apdorojimas yra tiesiogiai susijęs su dažymo rezultatu. Eksperimento metu autorius išsiaiškino, kad kadangi transgeninių pelių hipokampas yra giliai vidinėje telencefalono laikinosios skilties dalyje, jis yra mažo dydžio ir sunkiai atskiriamas audinys. Dėl nedidelio neatsargumo jis sukels mechaninius pažeidimus, todėl patologinių pokyčių nebus galima veiksmingai stebėti. Tuo pačiu metu, kadangi genetiškai modifikuotos pelės yra brangios, o eksperimentinis dozavimo ciklas ilgas, mėginių praradimas gali turėti įtakos bendrai tyrimų eigai. Todėl, kai pele baigia širdies perfuziją, visos smegenys išimamos ir fiksuojamos paraformaldehidu, skalpelio ašmenys pašalinami uoslės lemputei, o likęs smegenų audinys dehidratuojamas ir įterpiamas. Pjūvio storis kontroliuojamas nuo 3 iki 5 μm, siekiant užtikrinti, kad hipokampas būtų nepažeistas. Veiklos proceso optimizavimo prielaida gerina tyrimų efektyvumą. Atlikdamas Western blot aptikimą autorius nustatė, kad dėl mažos A 1-42 ir A 1-40 baltymų molekulinės masės ekspresijos juostas nėra lengva blotuoti, todėl būtina patikrinti jų SDS. -PAGE gelio koncentracija, elektroforezės laikas ir perdavimo laikas. Jei atskyrimo gelio koncentracija per maža, elektroforezės juostos migruos ir baltymo aktyvacija bus nepilna; per ilgas elektroforezės laikas lems juostos pasislinkimą iš gelio sluoksnio; atitinkamas perdavimo laikas padarys Western blot neryškų, taip paveikdamas pirminio antikūno inkubaciją. Sujunkite su antriniais antikūnais. Atsižvelgiant į tai, šis tyrimas buvo atliktas atliekant preliminarius eksperimentus ir galiausiai buvo pasirinktas 15 procentų atskyrimo gelis, atlikta elektroforezė ir perkelta membrana 2 valandoms, kad būtų atliktas Western blotingas A 1-42 ir A 1-40, siekiant ištirti jų ekspresiją. .

Tarp techninių metodų, šiuo metu naudojamų baltymų reguliavimui, Western blot metodas daugiausia naudojamas kiekybiniam nustatymui, siekiant ištirti specifinę susijusių baltymų ekspresiją. Imunohistochemijos metodas prasideda kokybiniu požiūriu. Viena vertus, jis gali intuityviai parodyti specifinio baltymo ir antikūno surišimo laipsnį, kita vertus, gali palaikyti kiekybinius rezultatus. Kadangi imunohistochemija turi aptikti baltymų ekspresiją surišant antikūnus prie antigeninių vietų ant histopatologinių pjūvių, histopatologinių pjūvių paruošimas yra ypač svarbus. Skyrius nėra lengva būti per storu. Užbaigus pjūvį, reikia pasirūpinti, kad ji būtų išsaugota, kad būtų išvengta išorinių audinių pjūvio pažeidimų; prieš apdorojimą reikia tinkamai deparafinuoti, o laikas neturėtų būti trumpesnis nei 2 valandos; pasirinkite citrinų rūgšties buferį su švelniomis sąlygomis ir mažiau atsitiktinio antigeno pažeidimo Atlikite taisymą, pašalinkite katalazę, visiškai atskleiskite antigeninę vietą ir pasirūpinkite, kad pirminis antikūnas visiškai atitiktų vietą. Pirmiau minėti du metodai, kaip dažniausiai naudojami aptikimo metodai molekulinėje biologijoje, papildo vienas kitą ir teikia techninę paramą baltymų reguliavimo tyrimams.

Šiame tyrime buvo naudojamas HE ir kiti metodai, siekiant ištirti hipokampo pažeidimus ir su A susijusių baltymų ekspresiją smegenyse. Rezultatai parodė, kad po įsikišimoCistanchefeniletanoidas , hipokampo CA1 srities ląstelių morfologija AD modelio pelių smegenyse pagerėjo įvairiais laipsniais. A 1-42 ir A 1-40 išraiškos lygiai buvo žymiai sumažinti. Be to, buvo nustatyta, kad verbascoside intervencijos grupės apsauginis neuronų poveikis buvo geresnis nei bendrasfeniletanoidiniai glikozidaigrupė. Bendras glikozidų kiekisCistanche feniletanoidiniai glikozidaituri didelį potencialą pagerinti patologinius AD modelio pelių smegenų srities pokyčius ir tada daryti antagonistinį poveikį AD. Ateityje reikės toliau tirti konkretų veikimo mechanizmą. Šis tyrimas užbaigia tyrimo duomenis apie mechanizmąCistancheprieštarauja AD žvelgiant iš A perspektyvos, ir tuo pat metu sudaro tyrimų pagrindą tolesniam veiksmingų komponentų arba aktyvių monomerų mechanizmui išsiaiškinti.Cistancheprieš AD vėlesniu laikotarpiu.