Ⅱ dalis Qi Sui Zhu Shui tinkas slopina AQP1 ir MAPK signalizaciją sumažina kepenų pažeidimą, kurį sukelia cirozės ascitas

Rezultatai

1. Cirozės ascito pažeidimai.

Kaip parodyta 1 paveiksle (a), branduolys yra nudažytas hematoksilinu ryškia mėlyna spalva. Citoplazmos ir ekstraląstelinės matricos komponentai buvo nudažyti eozinu skirtingais raudonos atspalviais. Visiems modelio grupės hepatocitams buvo nustatyta steatozė, pseudolobulinės struktūros buvo akivaizdžios ketvirtosios savaitės mėginiuose, o šeštos savaitės mėginiuose buvo sklerozinės nekrozinės savybės su netvarkingu hepatocitų išsidėstymu, hepatocitų degeneracija ir nekroze, akivaizdžiu pluoštinio jungiamojo audinio proliferacija. , ir platus pseudolobulinių struktūrų susidarymas. Po dešimties savaičių ir trijų dienų anglies tetrachlorido ir alyvuogių aliejaus injekcijos, pavyzdinės grupės žiurkės lėtai didino savo kūno svorį, o po pirmos savaitės kontrolinės ir pavyzdinės grupės pradėjo matytis reikšmingas kūno svorio skirtumas ( P < 0,001), buvo apskaičiuotas pilvo apimties koeficientas (pilvo apimtis/kūno svoris) ir nustatyta, kad kontrolinės grupės žiurkės normaliai padidino savo pilvo apimtį ir kūno svorį. Priešingai, pavyzdinių žiurkių pilvo apimtis laikui bėgant didėjo. Pilvo apimties padidėjimas modelio grupėje buvo žymiai didesnis nei kontrolinėje grupėje 3 savaitę (1 paveikslas (b)). Taigi, cirozės ascitas gali sukelti nenormalų pilvo apimties padidėjimą ir didelį kepenų pažeidimą žiurkėms.

2. QSZSP palengvina vidaus organų pažeidimus, kuriuos sukelia cirozės ascitas.

Kaip parodyta 2 paveiksle, cirozės modelio grupėje buvo sutrikdyta kepenų struktūra ir galima pastebėti plačią į vakuolę panašią degeneraciją, inkstų audinio pažeidimą, glomerulų hipertrofiją, tilakoidinės srities stromos padidėjimą, uždegiminių ląstelių infiltraciją, glomerulų epitelį. ląstelių atsiskyrimas, o inkstų kanalėliai buvo išsiplėtę; padaugėjo pilvaplėvės mezotelio ląstelių, sustorėjo submezotelinė stroma, sustorėjo pilvaplėvės audinys. Po keturių savaičių gydymo didelėmis QSZSP dozėmis kepenų audinio struktūra buvo nepažeista, su centre esančiais branduoliais ir raudonai nudažyta citoplazma; dauguma glomerulų turėjo normalią struktūrą ir normalius kanalėlius; pilvaplėvės mezotelio ląstelės išsiskyrė, o pilvaplėvės audinio storis sumažėjo, palyginti su modelio grupe

3. QSZSP reguliuoja su kepenų funkcija susijusius veiksnius žiurkių, sergančių ciroze, ascitu.

Kaip parodyta 3 paveiksle, TBiL, AST, ALT, Cr, BUN, K, Na ir Ca koncentracijos modelių grupėje buvo žymiai didesnės (P < 0.0{{5} }1) nei kontrolinėje grupėje ir žymiai sumažėjo po gydymo didelėmis QSZSP dozėmis. ALB koncentracijos modelio grupėje buvo žymiai mažesnės (P < 0,001) nei kontrolinėje grupėje, o jų koncentracijos reikšmingai padidėjo (P < 0,001) po gydymo didele QSZSP doze. Sujungus aukščiau pateiktus du rezultatus, galima nustatyti, kad QSZSP gali modifikuoti su kepenų funkcija susijusius veiksnius, kad sumažintų kepenų, inkstų ir pilvaplėvės pažeidimus, kuriuos sukelia cirozės ascitas.

4. QSZSP reguliuoja AQP1 baltymų ekspresiją kepenyse, inkstuose ir pilvaplėvėje.

Kaip parodyta 4 paveiksle, cirozės ascitas sukelia neįprastai didelę AQP1 baltymo ekspresiją žiurkių kepenyse, inkstuose ir pilvaplėvėje (P < 0.001). Palyginti su modelio grupe, AQP1 baltymo ekspresija sumažėjo po gydymo maža QSZSP doze ir žymiai sumažėjo (P < 0,001) po gydymo didele QSZSP doze, tačiau AQP1 baltymo ekspresija kepenyse, inkstuose ir pilvaplėvėje vis tiek buvo. didesnis nei šiuo metu kontrolinėje grupėje. QSZSP sugebėjo slopinti AQP1 baltymo aukštą ekspresiją, kurią sukėlė cirozės ascitas.

5. QSZSP slopina MAPK signalizacijos kelią.

Kaip parodyta 5 paveiksle, modelio grupėje p-ERK, p-JNK ir p-p38 aktyvacija buvo aptikta vienu metu kepenyse, inkstuose ir pilvaplėvėje. P-ERK, p-JNK ir p-p38 baltymų ekspresija sumažėjo po gydymo QSZSP, o p-ERK, p-JNK ir p-p38 baltymų ekspresijos lygiai buvo žymiai mažesni (P < 0). 001) po gydymo didelėmis QSZSP dozėmis nei pavyzdinėje grupėje.

6. QSZSP sukelia pilvo apimtį žiurkių, sergančių ciroze, ascitu.

Kaip parodyta 6 paveiksle, po keturių gydymo savaičių pavyzdinės grupės žiurkės kūno svoris visada yra mažesnis nei kitų trijų grupių, o po gydymo QSZSP didelėmis dozėmis žiurkių, sergančių ciroze ascitu, kūno svoris labai padidėjo ir žiurkių kūno svoris QSZSP mažos dozės gydymo grupėje taip pat buvo didesnis nei pavyzdinės grupės (6 pav. a)). Įdomu tai, kad QSZSP didelės dozės grupės žiurkės parodė pilvo apimties mažėjimo tendenciją kartu su kūno svorio padidėjimu, o po keturių gydymo savaičių QSZSP didelės dozės grupės žiurkės buvo žymiai mažesnės nei pavyzdinės grupės. Kartu su HE dažymo rezultatais tai gali reikšti, kad QSZSP sumažino cirozinio ascito sukeltą organų pažeidimą ir sumažino nenormalų pilvo apimties augimą.

Diskusija

Cirozė ascitas yra patologinis skysčių kaupimosi pilvo ertmėje reiškinys, kurį sukelia veiksnių derinys dekompensuotos cirozės fazės metu ir yra labiausiai paplitęs pirmasis reiškinys dekompensuotoje cirozės fazėje. Tai ne tik sukelia nepakeliamą skausmą pacientams, sergantiems kepenų ligomis ir žymiai sumažina gyvenimo kokybę, bet ir sukelia vandens elektrolitų sutrikimus bei organizmo vidinės aplinkos pablogėjimą, o tai gali sukelti rimtų komplikacijų, tokių kaip kepenų encefalopatija, kraujavimas iš viršutinės virškinamojo trakto dalies ir kt. hepatorenalinis sindromas ir yra vienas iš pagrindinių veiksnių, lemiančių pacientų, sergančių kepenų liga, mirtį [31, 32]. Tyrimai parodė, kad pacientų, sergančių ciroze ascitu, 3-metų sergamumas ir mirtingumas yra 50 proc., o 5-metų išgyvenamumas yra tik 5–10 proc. [33]. Šis tyrimas ne tik nustatė, kad cirozės ascitas sukėlė sunkų kepenų, pilvaplėvės ir inkstų pažeidimą, bet ir nustatė, kad žiurkių, sergančių ciroze, svorio padidėjimas sulėtėjo ir pilvo apimtis per daug išaugo (1 pav.). Po 4 gydymo savaičių žiurkės pradėjo priaugti svorio ir sumažėjo jų pilvo apimtis (6 pav.).

Spustelėkite čia, kad gautumėteCistanche privalumai

Tie ir kt. [29] nustatė, kad prostatos vėžio ląstelėse hipoksijos sukeltas AQP1 baltymo reguliavimas priklausomu būdu, kad AQP1 buvo sukeltas hipoksijos transkripcijos lygiu ir kad AQP1 reguliavimas PC-3M priklausė kalciui, PKC ir p38MAPK, taip pat deguonies įtampai. AQP1 yra plačiai ekspresuojamas limfinėse kraujagyslėse, kapiliaruose ir mažų venų endotelio ląstelėse ir yra pasiskirstęs kepenyse, pilvaplėvėje, inkstuose, pleuroje, kvėpavimo takuose, virškinamajame trakte nuo stemplės iki storosios žarnos, širdies raumenyse, lygiuosiuose raumenyse ir smegenyse. 24]. Huebert ir kt. [34] nustatė, kad ankstyvosiose kepenų fibrozės stadijose AQP1 ekspresija kepenų audinio ląstelių membranose atitinkamai padidėjo, progresuojant kepenų fibrozės laipsniui. Liu ir kt. [30, 35] nustatė, kad peptidoglikanas yra p38 MAPK transdukcijos kelio inhibitorius, o lipopolisacharidas yra p38/JNK/ERK kelio inhibitorius, galiausiai veikiantis AQP1 geną, dėl kurio sumažėja AQP1 ekspresija žmogaus pleuros mezotelio ląstelėse ir kad sumažinimas. AQP1 ekspresija priklauso nuo dozės ir laiko. Šiame tyrime QSZSP sugebėjo slopinti didelę AQP1 baltymo ekspresiją, kurią sukelia cirozinis ascitas žiurkių cirozės ascito „kepenų pilvaplėvės-inkstų“ ašyje. QSZSP sugebėjo slopinti didelę AQP1 baltymo ekspresiją, kurią sukelia cirozės ascitas, o MAPK signalizacijos kelias „kepenų pilvaplėvės-inkstų“ ašyje taip pat buvo slopinamas. Tai parodė, kad MAPK signalizacijos kelio suaktyvinimas buvo susijęs su organų pažeidimu cirozės ascito žiurkių „kepenų-pilvaplėvės-inkstų“ ašyje ir buvo susijęs su AQP1. Galiausiai buvo nustatyta, kad gydytų žiurkių Cr ir TBiL ir žymiai didesnis ALB serume, o tai kartu su kūno svorio padidėjimu po gydymo parodė, kad QSZSP turėjo tam tikrą poveikį gyvenimo kokybei gerinti.

Cistanche ekstraktas

Tačiau gydant ciroziniu ascitu sergančius pacientus, vaistai padidins vandens suvartojimą, o tai prieštarauja vandens ribojimo principui sergant šia liga; ypač pacientams, kuriems yra daug ascito, vaistų vartojimas dar labiau padidins paciento pilvo pūtimo simptomus, o jų laikymasis yra prastas. Kinų medicina yra svarbus išorinis TCM gydymo metodas, galintis išspręsti prieštaravimą tarp tradicinės kinų medicinos ir cirozinio ascito gydymo su vandens apribojimu ir galintis tiesiogiai veikti sergančią vietą. Ankstesniame etape buvo baigtas QSZSP gelio formos formulavimo procesas, kokybės standartas ir saugumas [36–39].

Ankstesni tyrimai dėl ascito susidarymo mechanizmo sergant ciroze daugiausia buvo skirti patologiniam kepenų ir inkstų vaidmeniui, pavyzdžiui, vartų hemodinamikos pokyčiams dėl cirozės, vandens ir natrio sulaikymo inkstuose arba hormoniniams pokyčiams, kuriuos sukelia abu veiksniai. , nepaisant pilvaplėvės vaidmens ir kepenų-pilvaplėvės-inkstų, kaip organinės visumos, vaidmens formuojant ascitą sergant ciroze.

Cistanche milteliai

Remiantis ankstesniu tyrimu, šiame tyrime buvo pradėtas patologinis vandens apykaitos sutrikimo pobūdis sergant ciroze ascitu ir buvo pirmasis, kuris pasiūlė hipotezę, kad ašis "kepenys-pilvaplėvė-inkstai" yra funkcinė vandens apykaitos ašis. dalyvauja pilvaplėvės skysčio „gamyboje-absorbcijoje-išeikvojime“ su akvaporinų baltymu kaip bendra medžiaga ir vaidina pagrindinį vaidmenį formuojant cirozinį ascitą. Buvo įrodyta, kad QSZSP gali slopinti MAPK signalizacijos kelio aktyvavimą ir apsaugoti kepenų funkciją žiurkių, sergančių ciroze, ascitu, ir buvo nustatyta, kad ašies „kepenys-pilvaplėvės-inkstai“ AQP1 vaidina palengvinantį vaidmenį ascito procese sergant ciroze. ascitas. Tyrimas taip pat parodė, kad QSZSP reguliuoja AQP1 ekspresiją "kepenų-pilvaplėvės-inkstų" ašyje, taip pasiekiant terapinį ascito blokavimo poveikį. QSZSP slopina AQP1 ekspresiją kepenyse, pilvaplėvėje ir inkstuose, todėl sumažėja pilvo apimtis. Šis procesas yra susijęs su MAPK kelio aktyvavimo slopinimu QSZSP.

Daugelis tyrimų parodė, kad MAPK signalizacijos kelias yra susijęs su ascito reguliavimu sergant ciroze. Šiame tyrime mes nustatėme, kad MAPK signalizacijos kelio aktyvacija buvo slopinama po gydymo QSZSP, tačiau ar QSZSP nukreiptas į MAPK signalizacijos kelią gydant cirozinį ascitą, šiame tyrime nežinoma. Kaip šio tyrimo apribojimas, galbūt MAPK signalizacijos kelio nukreipimo ryšys QSZSP gydant cirozinį ascitą bus patikrintas in vitro būsimuose kepenų tyrimuose.

Išvada

QSZSP slopina MAPK aktyvaciją ir AQP1 baltymo ekspresiją "kepenų-pilvaplėvės-inkstų" ašyje, kad sumažintų ascito sužalojimą sergant ciroze.

Cistanche poveikis

Cistanche tubulosa poveikis kepenų pažeidimui, kurį sukelia cirozės ascitas

Cirozė yra lėtinė kepenų liga, kuri gali sukelti įvairių komplikacijų, įskaitant ascitą, kuris reiškia skysčių kaupimąsi pilvo ertmėje. Cirozinis ascitas dažnai sukelia kepenų pažeidimą, dėl kurio padidėja sergamumas ir mirtingumas. Cistanche tubulosa (CT) yra tradicinis kinų augalinis vaistas, kuris daugelį metų buvo naudojamas kepenų ir inkstų ligoms gydyti. Naujausi tyrimai parodė, kad CT ekstraktas gali turėti įvairių gydomųjų savybių, tokių kaip priešuždegiminis, antioksidacinis ir imunomoduliuojantis poveikis. Be to, buvo nustatyta, kad KT ekstraktas turi apsauginį poveikį keliems organams, tokiems kaip kepenys ir širdis. Todėl mokslininkai ištyrė, ar CT ekstraktas gali turėti gydomąjį potencialą esant cirozės ascito sukeltam kepenų pažeidimui. Preliminarūs tyrimai su gyvūnų modeliais parodė, kad gydymas KT ekstraktu žymiai sumažino kepenų pažeidimo žymenis ir pagerino kepenų funkcijos rodiklius. KT ekstraktas gali daryti šį teigiamą poveikį dėl savo gebėjimo sumažinti uždegimą ir oksidacinį stresą, taip pat skatinti audinių regeneraciją. Tačiau reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant nustatyti KT ekstrakto saugumą ir veiksmingumą atliekant bandymus su žmonėmis.

Nuorodos

[28] E. McCoy ir H. Sontheimer, „MAPK sukelia AQP1 ekspresiją astrocituose po sužalojimo“, Glia, vol. 58, Nr. 2, 209–217 p., 2010 m.

[29] L. Tie, N. Lu, XY Pan ir kt., „Hipoksijos sukeltas akvaporino -1 baltymo padidėjimas prostatos vėžio ląstelėse nuo ap38- priklausomu būdu“, Cellular Physiology and Biochemistry: International Journal of Experimental Cellular Physiology, Biochemistry, and Pharmacology, vol. 29, Nr. 1-2, p. 269–280, 2012 m.

[30] L. Liu ir C. Xie, „Aquaporin1 downregulation by peptidoglican and lipopolysaccharidas with MAPK pathways in MeT-5A cell“, Lung, vol. 189, Nr. 4, 331–340 p., 2011 m.

[31] J. Uriz, A. C´ardenas ir V. Arroyo, "Ascito patofiziologija, diagnostika ir gydymas sergant ciroze", Best Practice & Research Clinical Gastroenterology, t. 14, Nr. 6, p. 927–943, 2000 m.

[32] W. Hou ir AJ Sanyal, "Ascitas: diagnostika ir valdymas", Medical Clinics of North America, t. 93, Nr. 4, p. 801–817, 2009 m.

[33] BS Sandhu ir AJ Sanyal, "Ascito valdymas sergant ciroze", Clinics in Liver Disease, t. 9, Nr. 4, 715–732 p., 2005 m.

[34] RC Huebert, MM Vasdev, U. Shergill ir kt., „Aquaporin{1}} palengvina angiogeninę invaziją į patologinę neovaskuliaciją, kuri lydi cirozę“, Hepatology, vol. 52, Nr. 1, 238–248 p., 2010 m.

[35] L. Liu, L. Du, Y. Chen ir kt., „Aquaporin1 (AQP1) reguliavimas peptidoglikanu per p38 MAPK kelius pirminėse žiurkės pleuros mezotelio ląstelėse“, Experimental Lung Research, vol. 40, Nr. 4, 145–153 p., 2014 m.

[36] QH Yuehong, "Qisui Zhushui gelio kremo etanolio ekstrahavimo proceso tyrimas", Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine, t. 30, Nr. 10, 150–152 p., 2014 m.

[37] MD Qiu Hua, X. Liu ir Y. Guo, „Qisui Zhushui gelio tepalo vandens ekstrahavimo technologijos tyrimas“, Tradicinės kinų medicinos ir farmacijos vadovas, t. 21, Nr. 2, 60–63 p., 2015 m.

[38] WN Qiu Hua, X. Liu, D. Mao, X. Xing ir Y. Guo, „Qishui Zhushui gelio tepalų kokybės standarto tyrimai“, Liaoningo tradicinės kinų medicinos universiteto žurnalas, t. 18, Nr. 3, 540–544 p., 2016 m.

[39] MD Qiu Hua, X. Liu ir Y. Guo, „Qishui Zhushui gelio tepalų matricinė formulė, optimizuota atliekant ortogonalinį testą“, Guangxi Tradicinės kinų medicinos žurnalas, t. 37, Nr. 5, p. 2014 m. 4 d.

Rong Zhen Zhang 1 Yin Liu 1 Min Li 2 Yong Lin Huang 3 ir Zhen Heng 3 daina

1 Hepatologijos skyrius, pirmoji susijusi kinų medicinos Guangxi universiteto ligoninė, Naningas, Kinija

2 Medicinos laboratorijos skyrius, pirmoji kinų medicinos Guangxi universiteto dukterinė ligoninė, Naningas, Kinija

3 Guangxi kinų medicinos universiteto hepatologijos skyrius, Naningas, Kinija