Numatykite LncRNR vaidmenį inkstų senėjimui remiantis RNR sekos nustatymu Ⅱ

LncRNR Gm43360 ir jos galimų tikslinių mRNR koreliacija

LncRNA Gm43360 buvo pasirinktas tyrimui, nes jis sujungė du lncRNR-mRNR koekspresijos tinklus. Adra1a ekspresijos lygis buvo teigiamai koreliuotas (rho=0.8650, p=0.026) su Gm43360, Csnk1a1 (kazeino kinazė 1A1) buvo neigiamai koreliuotas (rho{{12). }}.8084, p=0.0084) (5a pav.). Siekiant toliau patikrinti lncRNR Gm43360 ir jos galimų tikslinių mRNR Adra1a ir Csnk1a1 koreliaciją, šiame tyrime buvo sukurta lncRNR Gm43360 pernelyg didelės ekspresijos plazmidė. Csnk1a1 ekspresija sumažėjo, kaip tikėtasi, o Adra1a ekspresija taip pat sumažėjo, bet ne reikšmingai. Tada siRNR numušėme lncRNA Gm43360, kad nustatytų, ar buvo paveikta tikslinių mRNR ekspresija. Kaip ir tikėtasi, Csnk1a1 padidėjo lncRNA Gm43360 numušimo ląstelėse, palyginti su siRNR neigiama kontroline grupe (5b pav.). Dešimt, mes nustatėme lncRNA Gm43360 vaidmenį ląstelių cikle. Ląstelių skaičiavimo rinkinio-8 (CCK-8) rezultatai parodė, kad lncRNR Gm43360 skatino ląstelių gyvybingumą (5c pav.). Rezultatai parodė, kad lncRNR Gm43360 padidino S fazės ląstelių procentą ir sumažino G1 fazės ląstelių procentą, palyginti su neigiama kontrole (5d pav.). Te p53 ir p21 baltymai dalyvavo reguliuojant ląstelių ciklą ir todėl buvo ląstelių senėjimo ženklai. P53 ir p21 ekspresijos lygiai buvo žymiai sumažėję pernelyg didelės ekspresijos grupėje, palyginti su kontroline grupe. P53 ir p21 ekspresijos lygiai buvo žymiai padidėję siRNR grupėje, palyginti su siRNR kontroline grupe (5e pav.). Per didelis lncRNR Gm43360 ekspresija sumažino SA- -gal teigiamų ląstelių skaičių, o -gal teigiamų ląstelių padaugėjo transfekuoto Gm43360 grupėje (5f pav.). Visi šie rezultatai parodė, kad lncRNR Gm43360 slopino inkstų kanalėlių epitelio ląstelių senėjimąslopina Csnk1a1 ekspresiją.

SPUSTELĖKITE ČIA, KAD GAUTI NATŪRALIŲ EKOLOGIŠKŲ CISTANČIŲ EKSTRAKTĄ, SU 25% ECHINAKOZIDU IR 9% AKTEOZIDU, TURINČIŲ INKSTU FUNKCIJĄ

Diskusija

Šiame tyrime įvertinome jaunų ir senų pelių inkstų mRNR ekspresijos duomenis ir atlikome biologinės informacijos analizes, kurios atskleidė aberrantiškai išreikštų mRNR funkcijas. Mes stebėjome 347 padidintas mRNR ir 355 sumažintas mRNR, taip pat 130 padidintų lncRNR ir 91 sumažintą lncRNR.senų pelių inkstus, palyginti su jaunų pelių inkstais. Be to, buvo įrodyta, kad šios mRNR dalyvauja su senėjimu susijusiuose keliuose, pvzoksidacinis fosforilinimas, AMPK signalizacijos kelias, Wnt signalizacijos kelias, Rap1 signalizacijos kelias ir su amžiumi susijusi liga, kurios parodė skirtingai išreikštų mRNR funkcijas inkstų senėjimo patogenezėje.

Ilga nekoduojanti RNR NEAT1 yra apsauginis veiksnys progresuojant inkstų fibrozei inkstų kanalėlių epitelio ląstelėse [21]. Atsitiktinai mūsų sekos rezultatuose lncRNA NEAT1 buvo išreikštas mažesniu lygiu senų pelių inkstuose nei jaunų pelių, o tai atitinka ankstesnius duomenis. LincRNA-Gm4419 pagreitina uždegimą ir fibrozę dėl NF-kB/NLRP3 uždegimo sukeltų mechanizmų sergant diabetine nefropatija [22]. Savo sekos rezultatuose taip pat nustatėme, kad Gm4419 ekspresija senų pelių inkstuose buvo didesnė nei jaunų pelių, tačiau reikšmingo skirtumo nebuvo. LncRNA Gm43360 yra 5 chromosomoje (Chr5: 122494022–122 494 908, 2887 bp). Remiantis UCSC genomo naršykle, Gm43360 yra baltymus koduojančio geno Atp2a2 introne. Tačiau iki šiol nebuvo pranešimų apie lncRNA Gm43360 dalyvavimą ligose. Šiame tyrime lncRNA Gm43360 numušimas paskatino inkstų kanalėlių epitelio ląstelių senėjimą. Be to, sekos rezultatuose nustatėme daug skirtingai išreikštų lncRNR ir juos ištyrėme.

LncRNR buvo suskirstyti į cis reguliavimą arba transreguliavimą, remiantis lncRNR reguliavimo mechanizmais. Cis veikiančios lncRNR gali turėti įtakos gretimų genų ekspresijai, priklausomai nuo cis veikiančių elementų, tokių kaip promotoriai, stiprikliai ir reguliavimo sekos, kurios yra mažesni nei 100 kb atstumai tarp lncRNR ir mRNR. Trans-veikiančios lncRNR reiškia lncRNR, paliekančias transfekcijos vietą ir veikiančias tolimose vietose (ty atstumas tarp lncRNR ir mRNR yra didesnis nei 100 kb) [23]. LncRNR MAAT padidina gretimo geno Mbnl1 ekspresiją per cis reguliavimo modulį [24]. LncRNR Pnky vaidina trans-veikiantį žievės vystymosi reguliatoriaus vaidmenį [25]. Šiame tyrime tarp lncRNA Gm43360 ir Csnk1a1 buvo transreguliacinis ryšys. Csnk1a1 yra naviką slopinantis genas [26], koduojantis baltymą, dalyvaujantį ląstelių cikle ir ląstelių dalijimosi procese [27]. Csnk1a1 sumažinimas sukeliasu senėjimu susijęs uždegimasatsakas su augimo sustabdymu gaubtinės ir tiesiosios žarnos navikų atveju [26]. Csnk1a1 buvo sumažintas, kai Gm43360 buvo padidintas; taigi, tikėtina, kad lncRNA Gm43360 dalyvaujainkstų senėjimaspateikėreguliuojant Csnk1a1 išraišką.

Išvados

Mūsų tyrimas apie lncRNR-mRNR koekspresijos tinkląinkstų senėjimasatskleidė, kad lncRNR, lncRNA Gm43360, gali atlikti apsauginį vaidmenį senstant inkstams ir išplėtė mūsų supratimą apie mechanizmus, susijusius suinkstų senėjimas

medžiagos ir metodai

Jaunų (3-mėn.) ir senų (24-mėn.) C57BL/6J pelių patinų mėginiai buvo įsigyti iš Siameno universiteto Eksperimentinių gyvūnų centro ir buvo auginami standartinėje aplinkoje. Visos pelės turėjo laisvą prieigą prie maisto ir vandens. Pelės buvo aklimatizuotos prie naujos patalpos mėnesį, kol jos buvo paaukotos. Prieš imant mėginius, pelės buvo anestezuotos uretanu, suleidžiant į pilvaplėvės ertmę 750 mg/kg doze. Jaunos ir senos pelės buvo paaukotos tą pačią dieną.Likęs pelės inkstasaudinys buvo naudojamas sekos nustatymui kiekviename tyrime. Buvo atlikta RNR seka ir histopatologijaatskiri inkstaiiš tos pačios pelės. Inkstų audinys buvo paimtas iš pelių. Vienas inkstas buvo nedelsiant panardintas į 10% neutralų buferinį formaliną, kad būtų galima įterpti sekciją, o kitas inkstas buvo padalintas į kelis audinius ir nedelsiant patalpinamas į skystą azotą, o po to laikomas -80 laipsnių temperatūroje. Tyrimą palaikė Xi'an Jiaotong universiteto (Šansi, Kinija) pirmosios dukterinės ligoninės (Nr. 2018-G-164) etikos komitetas. Visi metodai buvo atlikti pagal gyvūnų etikos gaires ir taisykles. Šis tyrimas buvo atliktas laikantis ARRIVE gairių.

Inkstų histopatologija

Jaunų ir senų pelių inkstų audinių mėginiai buvo fiksuoti 10% paraformaldehido tirpale per naktį. Dešimt sekcijų buvo dehidratuotos, įterptos į parafiną ir padalintos 4- µm storio. PAS ir Massono trichromatinis dažymas buvo atliktas naudojant standartinius protokolus. Vaizdai buvo užfiksuoti fotoaparatu ir buvo išmatuotas teigiamas dažymo plotas. Histopatologijos kameros vaizdų plotas buvo apskaičiuotas naudojant Image-Pro Plus 6.0.

SA-gal dažymas

SA{{0}}gal aktyvumas buvo analizuojamas naudojant SA- -gal dažymo rinkinį (Cell Signaling Technology Nr. 9860) pagal gamintojo protokolą. Buvo išmatuotas teigiamo dažymo plotas, o SA- -gal-teigiamos ląstelės buvo apskaičiuotos naudojant Image-Pro Plus 6.0.

RNR ekstrahavimo bibliotekos konstravimas ir sekos nustatymas

Samples (each 5 mice in young and old mice) were used for lncRNA and mRNA expression analyses. Young mice were numbered 3M1, 3M2, 3M3, 3M4, and 3M5, and old mice were numbered 24M1, 24M2, 24M3, 24M4, and 24M5. Total RNA was extracted using Trizol reagent (thermofsher, 15,596,018) following the manufacturer's instruction. The total RNA quantity and purity were analyzed of Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent, CA, USA, 5067−1511), and high-quality RNA samples with RIN number>7.{1}} buvo naudojami sekos bibliotekai sukurti. Ištraukus visą RNR, mRNR buvo išgryninta iš bendros RNR (5 ug), naudojant Dynabeads Oligo (dT) (Thermo Fisher, CA, JAV), su dviem gryninimo etapais. Po gryninimo mRNR buvo padalinta į trumpus fragmentus naudojant dvivalečius katijonus aukštoje temperatūroje (magnio RNR fragmentacijos modulis (NEB, kat. e6150, JAV) žemesnėje nei 94 laipsnių 5-7 min.). Tada suskaldyti RNR fragmentai buvo atvirkštiniu būdu transkribuoti, kad būtų gauta kDNR naudojant SuperScript™ II atvirkštinę transkriptazę (Invitrogen, kat. 1 896 649, JAV), kuri vėliau buvo panaudota U raide pažymėtoms antrosios grandinės DNR sintezei su E. coli DNR polimeraze I ( NEB, cat.m0209, JAV), RNase H (NEB, cat.m0297, JAV) ir dUTP tirpalas (Termo Fisher, kat.R0133, JAV). Tada A-bazė buvo pridėta prie kiekvienos krypties bukių galų, paruošiant juos surišimui su indeksuotais adapteriais. Kiekviename adapteryje buvo T-bazės iškyša, skirta adapteriui prijungti prie A formos fragmentuotos DNR. Dviejų indeksų adapteriai buvo susieti su fragmentais, o dydžio pasirinkimas buvo atliktas naudojant AMPureXP granules. Po karščiui nestabilaus UDG fermento (NEB, kat.m0280, JAV) apdorojimo U-žymėtomis antrosios grandinės DNR, surišti produktai buvo amplifikuoti PGR tokiomis sąlygomis: pradinė denatūracija 95 laipsnių temperatūroje 3 min.; 8 denatūravimo ciklai 98 laipsnių temperatūroje 15 s, atkaitinimo 60 laipsnių temperatūroje 15 s ir pratęsimo 72 laipsnių temperatūroje 30 s; ir tada galutinis pratęsimas 72 laipsnių kampu 5 min. Vidutinis galutinių cDNR bibliotekų intarpo ilgis buvo 300 ± 50 bp. Galiausiai atlikome 2 × 150 bp porinio galo sekvenavimą (PE150) naudodami Illumina Novaseq™ 6000 (LC-Bio Technology CO., Ltd., Hangdžou, Kinija) pagal gamintojo protokolą [28].

Bioinformatinė analizė Švarių skaitymų seka ir filtravimas

cDNR biblioteka, sukurta technologija iš sujungtos RNR išinkstų mėginiaipelių buvo sekvenuotos ir paleistos su Illumina NovaseqTM 6000 sekos platforma. Naudodami Illumina suporuoto galo RNR-seq metodą, mes suskirstėme transkriptą, iš viso sugeneruodami milijonus 2 × 150 bp porinio galo skaitymų. Nuskaitymai, gauti iš sekos nustatymo mašinų, apima neapdorotus skaitymus, kuriuose yra adapterių arba žemos kokybės bazių, kurios turės įtakos tolesniam surinkimui ir analizei. Taigi, norint gauti aukštos kokybės švarius skaitymus, skaitymus toliau filtravo Cutadapt [29] (https://cutadapt.readthedocs.io/en/stable/, version:cutadapt-1.9). Parametrai buvo tokie:

1) nuskaitymų, kuriuose yra adapterių, pašalinimas;

2) nuskaitymų, kuriuose yra poliA ir poli, pašalinimas;

3) nuskaitymų, kuriuose yra daugiau nei 5 % nežinomų nukleotidų (N), pašalinimas;

4) pašalinti žemos kokybės rodmenis, kuriuose yra daugiau nei 20% žemos kokybės (Q vertė Mažiau nei 20) bazių.

Dešimties sekų kokybė buvo patikrinta naudojant FastQC [30] (http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/, 0.11.9). įskaitant švarių duomenų Q20, Q30 ir GC turinį. Po to iš viso buvo pagaminta G bp išvalytų, suporuotų galų rodmenų. Neapdoroti sekos duomenys buvo pateikti NCBI Gene Expression Omnibus (GEO) duomenų rinkiniams, kurių registracijos numeris GSE154223.

Atskaitos genomas / anotacija buvo Mus{0}}musculus.GRCm38. Analizėms naudotos geno anotacijos šaltinis ir versija buvo Ensembl_v88.

Nuorašų surinkimas

Pirma, Cutadapt [29] buvo naudojamas norint pašalinti rodmenis, kuriuose buvo adapterio užteršimas, žemos kokybės bazės ir neapibrėžtos bazės. Dešimties sekų kokybė buvo labai užtikrinta naudojant FastQC (//www.bioinformatics.Babra ham.ac.uk/projects/fastqc/). Mes panaudojome Bowtie2 [31] ir Hisat2 [32], kad susietume skaitymus su pelės genomu. Kiekvieno mėginio atvaizduoti rodmenys buvo surinkti naudojant StringTie [33]. Dešimt, visi nuorašai išinkstų mėginiaibuvo sujungti, kad būtų galima atkurti išsamų transkriptą naudojant Perl scenarijus. Sukūrus galutinį transkriptą, visų nuorašų ekspresijos lygiams įvertinti buvo naudojami StringTie [33] ir edgeR [34].

LncRNR identifikavimas

Visų pirma, buvo atmesti nuorašai, kurie sutapo su žinomomis mRNR, ir trumpesni nei 200 bp nuorašai. Tada mes panaudojome CPC [35] ir CNCI [36], kad prognozuotume nuorašus, turinčius kodavimo potencialą. Visi nuorašai su CPC balu<-1 and CNCI score<0 were removed. The remaining transcripts were considered as lncRNAs.

Diferenciališkai išreikštų analizės genų (DGE) analizė

StringTie [33] was used to perform expression levels for mRNAs and lncRNAs by calculating FPKM [37]. Genes differential expression analysis was performed by DESeq2 software between two different groups (and by edgeR between two samples) [34, 38]. The genes with the parameter of q value below 0.6 and absolute fold change>2 buvo laikomi skirtingai išreikštais genais.

Tikslinių genų numatymas ir lncRNR funkcinė analizė

Norėdami ištirti lncRNR funkcijos funkciją, mes numatėme lncRNR cis tikslinius genus. LncRNR gali atlikti cis vaidmenį veikdamos kaimyninius tikslinius genus. Šiame tyrime pagal Perlo scenarijų buvo atrinkti koduojantys genai 100, 000 prieš srovę ir pasroviui. Tada mes parodėme lncRNR tikslinių genų funkcinę analizę, naudodami scenarijus BLAST2GO [39]. Visa komandų nuoroda į viešąjį domeną buvo Jie-Li/README.md adresu main · dandan-li/Jie-Li (github.com).

Genų ontologijos (GO) kategorijos ir Kioto genų ir genomų enciklopedijos (KEGG) analizė

RNR sekos nustatymo bioinformatinė analizė buvo atlikta naudojant „OmicStudio“ įrankius (//www.omicsudio.cn/tool). Numatytų tikslinių genų biologinėms funkcijoms analizuoti buvo panaudota genų ontologijos (GO) funkcinio praturtinimo analizė ir Kyoto genų ir genomų enciklopedija (KEGG) [37–39]. GO analizė paaiškina pagrindinius biologinius procesus trimis aspektais: ląstelių sudėtį, molekulines funkcijas ir biologinius procesus (http://www.geneontology.org/). Pirmoji analizė įtraukia visus skirtingai išreikštus genus ir foninius genus į GO duomenų bazę. Kiekvienas elementas yra susietas, apskaičiuojamas kiekvieno elemento genų skaičius, o hipergeometrinis skirstinys naudojamas hipotezės testavimui, siekiant gauti sodrinimo rezultato P reikšmę. Kuo mažesnė P reikšmė, tuo reikšmingesnis sodrinimo rezultatas. KEGG yra duomenų bazės šaltinis, kuris analizuoja skirtingai išreikštas mRNR pagal genetinę biologiją, kad ištirtų svarbius būdus, susijusius su tiksliniais genais (https://www.genome.jp/kegg/). Rezultatai išreiškiami p reikšmėmis; kuo mažesnė p reikšmė, tuo reikšmingesnis sodrinimo rezultatas.

qRT-PGR

GAPDH buvo naudojamas kaip endogeninė kontrolė. Tada buvo apskaičiuoti nežinomų genų santykiniai ekspresijos lygiai. Visi pradmenys buvo sukurti ir susintetinti specialiai šiam eksperimentui. GAPDH gruntai buvo parduoti. Adra1a ir Csnk1a1 pradmenų specifiškumas buvo nustatytas pagal vieną lydymosi kreivės smailę.

Sukurkite mRNR-lncRNR koekspresijos tinklą

Transreguliavimas buvo pagrįstas tyrimais, o tada buvo apskaičiuota transenergija. Kuo mažesnė trans energija, tuo didesnė surišimo galimybė. Tada taip pat buvo apskaičiuotas mRNR-lncRNR koreliacijos koeficientas. mRNR-lncRNR tinklas buvo sukonstruotas pasirinkus Spearman koreliacijos koeficientą, viršijantį 0.9. mRNR-lncRNR koekspresijos tinklas buvo sukurtas naudojant Cytoscape programinę įrangą (v3.7.1).

Ląstelių kultūros

Pelės inkstų proksimalinės kanalėlių epitelio ląstelės (MRPT-EpiC) buvo kultivuojamos epitelio ląstelių terpėje-gyvūno (EpiCM-a, kat. Nr. 4131), turinčioje 2% galvijų vaisiaus serumo (FBS, kat. Nr. 0010) ir Epitelio ląstelių augimo papildą - gyvūną. (EpiCGS-a, Kat. Nr. 4182) be antibiotikų drėgname inkubatoriuje 37 laipsnių temperatūroje ir 5 % CO2. Auginimo terpė buvo keičiama kas 2–3 dienas. Ląstelės logaritminėje augimo fazėje buvo subkultūros, kai augimas pasiekė 90%. Ląstelių suspensija, suardyta tripsinu, buvo pasėta į 6-šulinėlių plokšteles su 2*104 -5*104 ląstelėmis kiekvienoje duobutėje. Visos transfekcijai naudotos ląstelės buvo nuo 2 iki 5 kartų.

Plazmidžių konstravimas ir ląstelių transfekcija

LncRNA Gm43360 per didelės ekspresijos plazmidę sukūrė GeneChem (Šanchajus, Kinija). Plazmidės pagrindas buvo GV658, o CMV promotorius skatino lncRNR ekspresiją. Klonuotų nukleotidų seka pateikta papildomoje medžiagoje. Kad lncRNA Gm43360 būtų numuštas, trys lncRNA ENS PRIVALO00000197656-nukreipti siRNR (lncRNA Gm43360- siRNA1, 5'-CCUUCACUCCAGCUGGUAATT-3'; lncRNA Gm43360-siRNA2, 5'-CCCUGUCACUCA UGAAGUUTT-3' ir lncRNA Gm43360-siRNA3, 5'-GGUCAAAUAACUCAAUGGGTT-3') buvo sukurti ir susintetinti „GenePharma“ (Šanchajus, Kinija). Pagal gamintojo protokolą ląstelės buvo transfekuotos 2500 ng plazmidės arba 100 pmol siRNR su 6 µl Lipofectamine™ 2000 transfekcijos reagento (Invitrogen, JAV) vienoje duobutėje. RNR ir baltymų ekspresijos lygiai buvo nustatyti praėjus 48 valandoms po transfekcijos, ir kiekvienas eksperimentas buvo pakartotas mažiausiai tris kartus. Realaus laiko kiekybinė PGR buvo naudojama lncRNA Gm43360 per didelės ekspresijos ir numušimo efektyvumui patvirtinti.

Western blot analizė

Kultivuotos ląstelės buvo plaunamos lediniu PBS, pridėta 120 µl RIPA buferio (širdis, Kinija) ir proteazės inhibitorius bei PMSF (širdis, Kinija) 30 minučių ant ledo. Surinkus ląsteles į skirtingus mikrocentrifugos mėgintuvėlius, baltymų koncentracija buvo kiekybiškai įvertinta. Į kiekvieną mėginį buvo pridėtas įkrovimo buferis ir virinamas 7 min. Trisdešimt mikrogramų mėginio buvo atskirti 12% SDS-PAGE (Beyotime, Kinija) ir perkelta į PVDF membranas (Thermo Fisher, JAV). Tada membranos buvo užblokuotos 5% pieno. Membranos buvo inkubuojamos su specifiniais pirminiais antikūnais: anti-p21 (1:1000, Abcam, ab109199), anti-p53 (1:1000, Proteintech, 10442-1-AP) ir anti-GAPDH (1:3000, Profintech). , 60004-1-Ig) naktį 4 laipsniai . Po plovimo TBST membranos buvo inkubuojamos su antriniu antikūnu 1 valandą kambario temperatūroje. Baltymų juostos buvo stebimos naudojant chemiliuminescencijos rinkinį (Millipore, JAV). GAPDH ekspresija buvo naudojama baltymų kiekiui normalizuoti.

Ląstelių proliferacijos tyrimas

Ląstelių dauginimosi pajėgumas buvo nustatytas naudojant ląstelių skaičiavimo rinkinio-8 (CCK-8) tyrimą. Praėjus keturiasdešimt aštuonioms valandoms po transfekcijos, į kiekvieną šulinėlį buvo įpilta 90 µl naujos terpės ir 10 µl CCK-8 tirpalo (Beyotime, C0042). Ląstelės buvo inkubuojamos 1–4 valandas 37 laipsnių temperatūroje 5% CO2 ir matuojamos esant 450 nm universaliu mikroplokštelių skaitytuvu (Bio-Tek, JAV).

Srauto citometrinė analizė

Ląstelės buvo dedamos į 6-šulinėlių plokšteles dieną prieš transfekciją. Praėjus keturiasdešimt aštuonioms valandoms po transfekcijos, ląstelės buvo tripsinuotos ir 5 minutes centrifuguojamos 1000 aps./min. Tada ląstelės buvo fiksuotos 70% etanolyje 4 laipsnių temperatūroje mažiausiai 4 valandas. Po centrifugavimo į ląsteles buvo pridėta RNazės A ir propidžio jodido (PI) dažymo tirpalo, o po to ląstelės buvo inkubuojamos 30 minučių kambario temperatūroje tamsoje. Te dažytos ląstelės buvo analizuojamos naudojant ACEA NovoCyte (Biosciences, JAV).

Statistinė analizė

Matavimo duomenys pagal normalųjį pasiskirstymą pateikiami kaip vidurkis±SD. Skirtumas tarp dviejų skirtingų grupių buvo nustatytas naudojant dvipusius nesuporuotus Stjudento t testus, o p reikšmė < 0,05 buvo laikoma statistiškai reikšminga. Visi skaičiavimai buvo atlikti naudojant GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc., JAV).

Nuorodos

1. Docherty MH, O'Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Ląstelių senėjimas inkstuose. J Am Soc Nephrol. 2019;30(5):726–36.

2. Partridge L, Deelen J, Slagboom PE. Susidūrimas su visuotiniais senėjimo iššūkiais. Gamta. 2018;561(7721):45–56.

3. Pan JX. LncRNA H19 skatina aterosklerozę reguliuodamas MAPK ir NF-kB signalizacijos kelius. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2017;21(2):322–8.

4. Wasson CW, Abignano G, Hermes H, Malaab M, Ross RL, Jimenez SA, Chang HY, Feghali-Bostwick CA, Del Galdo F. Ilga nekoduojanti RNR HOTAIR skatina EZH2-priklausomą miofibroblastų aktyvavimą sisteminėje aplinkoje sklerozė dėl nuo miRNR 34a priklausomo NOTCH aktyvavimo. Ann Rheumatic Dis. 2020;79(4):507–17.

5. Luo J, Wang K, Yeh S, Sun Y, Liang L, Xiao Y, Xu W, Niu Y, Cheng L, Maity SN ir kt. LncRNA-p21 keičia antiandrogeno enzalutamido sukeltą prostatos vėžio neuroendokrininę diferenciaciją moduliuodamas EZH2 / STAT3 signalizaciją. Nat Commun. 2019;10(1):2571.

6. Wang Y, Yang L, Chen T, Liu X, Guo Y, Zhu Q, Tong X, Yang W, Xu Q, Huang D ir kt. Nauja lncRNR MCM3AP-AS1 skatina kepenų ląstelių karcinomos augimą, nukreipdama į miR-194-5p/FOXA1 ašį. Mol Vėžys. 2019;18(1):28.

7. Wu YY, Kuo HC. Nekoduojančių RNR funkciniai vaidmenys ir tinklai neurodegeneracinių ligų patogenezėje. J Biomed Sci. 2020;27(1):49.

8. Li Z, Wang Z. Inkstų senėjimas ir su senėjimu susijusios ligos. Adv Experiment Med Biol. 2018;1086:169–87.

9. Wang X, Vrtiska TJ, Avula RT, Walters LR, Chakkera HA, Kremers WK, Lerman LO, taisyklė AD. Amžius, inkstų funkcija ir rizikos veiksniai yra skirtingai susiję su inksto žievės ir meduliariniu tūriu. Kidney Int. 2014;85(3):677–85.

10. Lin Q, Hou S, Dai Y, Jiang N, Lin Y. LncRNA HOTAIR taikosi miR-126-5p, kad skatintų Parkinsono ligos progresavimą per RAB3IP. Biol Chem. 2019;400(9):1217–28.

„Wecistanche“ – didžiausio cistansų eksportuotojo Kinijoje – pagalbinė tarnyba:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp / Tel:+86 15292862950

Įsigykite daugiau specifikacijų:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-parduotuvė