Naujausi pažanga erkių antigenų atradimo ir vakcinos nuo erkių kūrimo srityje 2 dalis

2.4. Su Malpighianu susiję antigenų kandidatai

Gyvuose organizmuose 50 -nukleotidazės yra plačiai paplitusi įvairių rūšių erkių fermentų grupė. Tarp erkių 50 -nukleotidazės ir stuburiniuose gyvūnuose esančių fermentų yra daug panašumų, o šie fermentai atlieka daugybę numanomų funkcijų, įskaitant dalyvavimą purino gelbėjimo keliuose [108]. Tarp erkių šios grupės fermentų yra daugelyje skirtingų audinių, pavyzdžiui, žarnyne, seilių liaukose ir kiaušidėse.

Tačiau jų daugiausia yra Malpigijos kanalėliuose, ypač Malpigijos kanalėlių ir kiaušidžių ląstelių paviršiuje. 50 -Nukleotidazių savybės rodo, kad jos yra potencialus antikūnų taikinys [109]. Hope ir kt. ištyrė 50 -nukleotidų galimą dalyvavimą imunizuojant šeimininką ir nustatė, kad vien tik rekombinantinės 50 -nukleotidazės injekcijos avims sukėlė reikšmingą antinukleozidazės antikūnų reguliavimą, o tai rodo, kad jie gali būti geras antigenas avims. vakcinos kūrimas [104].

Tačiau kai ta pati tyrėjų grupė išanalizavo jų, kaip antigenų, funkcijas galvijams, antikūnų kiekis nepadidėjo. Todėl 50 -nukleotidazės nebuvo toliau tiriamos kaip vakcinos kūrimo antigenai. Tačiau neseniai kitos mokslininkų grupės atliktas tyrimas parodė, kad po maitinimo O. erraticus padidėja 50 -nukleotidazės/apirazės gamybos lygis [110]. Be to, jie teigė, kad apirazės funkcijos blokavimas imunizuojant šeimininką rekombinantiniu apirazės baltymu gali stipriai sumažinti O. moubata erkių maitinimąsi, o tai rodo, kad 50 -nukleotidazės/apirazės yra potencialiai perspektyvūs antigenai kandidatai, norint sukurti antierkes. vakcina [110 111].

Nukleotidazė yra fermentas, galintis katalizuoti nukleotidų hidrolizės reakciją, skaidydamas nukleotidus į nukleozidus ir neorganinius fosfatus. Nukleotidai atlieka svarbias biologines funkcijas organizmuose, įskaitant DNR ir RNR konstravimą, saugojimą ir perdavimą, energijos perdavimą ir ląstelių signalų perdavimą. Todėl nukleotidazės vaidina svarbų vaidmenį gyvuose organizmuose. Imunitetas – tai organizmo gebėjimas atsispirti patogenams išorinėje aplinkoje, apimantis įvairius biologinius procesus, įskaitant imuninių ląstelių plėtimąsi, diferenciaciją ir reguliavimą. Keletas tyrimų parodė, kad nukleotidazės gali paveikti imuninės sistemos funkciją, taigi ir imunitetą.

Pavyzdžiui, kai kurie nukleotidazių variantai buvo susieti su autoimuninių ligų išsivystymu. Be to, nukleotidazė taip pat gali paveikti imuninių ląstelių dauginimąsi ir aktyvaciją bei skatinti imuninių ląstelių funkciją. Todėl tarp nukleotidazės ir imuniteto yra tam tikras ryšys. Šiuo požiūriu didelį dėmesį turime skirti imuniteto gerinimui. Cistanche turi didelį poveikį imuniteto gerinimui. Mėsos pelenuose yra įvairių biologiškai aktyvių medžiagų, tokių kaip polisacharidai, du grybai, Huang Li ir kt. Šie ingredientai gali stimuliuoti imuninę sistemą. Įvairių tipų ląstelės sistemoje padidina jų imuninį aktyvumą.

Click cistanche tubulosa privalumai

2.5. Su erkiniu cementu susiję antigenų kandidatai

Erkių cementas yra glikolio ir lipoproteinų mišinys, išskiriamas į šeimininką per erkės seiles netrukus po prisitvirtinimo prie šeimininko, ir yra vertingas iš erkių gaunamų antigenų šaltinis kuriant vakciną [112]. Įrodyta, kad erkių cementas ne tik prilimpa prie šeimininko odos [113], bet ir kaip B. burgdorferi sensu lato (sl) ir erkinio encefalito viruso sandėlis [114,115]. Iki šiol iš erkių cemento buvo nustatyti ir apibūdinti įvairūs antigenai, kurie taip pat buvo veiksmingi kovojant su erkių užkrėtimu ir erkių platinamais ligomis.

Sutrumpintos 64P (64TRPs), 15 kDa cemento baltymo, kurį išskiria Rhipicephalus apendiculatus seilių liaukos, konstrukcijos parodė kryžminę apsaugą nuo Rhipicephalus sanguineus ir Ixodes ricinus, nukreipdamos į antigenus vidurinėje žarnoje ir seilių liaukose, sukeldamos suaugusių žmonių mirtingumą. Anksčiau erkių nesergančių šeimininkų vakcinacija rekombinantiniu 64P žymiai sumažino nimfų ir suaugusių erkių užkrėtimų skaičių, todėl 48 procentai nimfa ir iki 70 procentų suaugusiųjų mirtingumas, o tai taip pat turėjo įtakos prisitvirtinimo svoriui ir kiaušinėlių masei [116].

Iš šių rezultatų matyti, kad šis baltymas yra plataus spektro vakcinos antigenas ir yra veiksmingas prieš suaugusių ir nesubrendusių skirtingų erkių rūšių, įskaitant I. ricinus, stadijas [100]. Šis cemento antigenas atliko dvejopą funkciją: i) kaip vakcina žiurkėnų, jūrų kiaulyčių ir triušių modeliuose, pablogindamas prisirišimą ir maitinimąsi, ir ii) kryžmiškai reaguodamas su „paslėptais“ vidurinės žarnos antigenais, galiausiai sukeldamas užsikimšusių erkių mirtį. [100 117]. Šis antigenas ne tik padidina antikūnų titrus, reaguodamas į erkių užkrėtimą, bet ir turi kryžminį reaktyvumą su skirtingais erkės audiniais; todėl jame derinami ir „paslėptų“, ir „eksponuotų“ antigenų privalumai [118].

3. Vakcinų nuo erkių tipai

Erkės yra labiausiai paplitę nariuotakojų parazitai, mintantys žmonėmis ir gyvuliais bei pernešantys ligas [19]. Zoonozinės ligos sudaro daugiau nei 60 procentų visų infekcinių ligų, kuriomis serga žmonės, ir manoma, kad 22,8 procento šių infekcijų perduodamos erkių pernešėjais [131]. Pasaulyje gyvulių augintojai taip pat patiria didžiulių ekonominių nuostolių dėl erkių pernešamų ligų, kurios pažeidžia jų gyvulius [132,133].

Todėl norint sumažinti socialinę ir ekonominę naštą, svarbu kontroliuoti erkes. Erkių kontrolė tapo sudėtinga, nes erkės gali išsiugdyti atsparumą parduodamiems akaricidams [134–136]. Novatoriškos aplinkai nekenksmingos kontrolės technologijos reikalingos dėl susirūpinimo akaricidų sauga darbuotojams, maistui ir aplinkai bei didėjančių išlaidų, susijusių su akaricidų atradimu, kūrimu ir rinkodara. Vakcinos turi daug pranašumų, palyginti su akaricidais, nes jos paprastai yra netoksiškos, neteršiančios ir pigesnės, palyginti su cheminėmis medžiagomis.

Tačiau jie dažniausiai būna labai specifiniai rūšiai. Farmacijos pramonė gali atlikti lemiamą vaidmenį remiant mokslinius tyrimus siekiant sukurti vakciną, kuri užtikrintų maksimalią šeimininko apsaugą ir būtų veiksminga nuo daugelio erkių rūšių [133,137]. Įvairiose šalyse vykdomos vakcinų tyrimų programos, o likusioje šio straipsnio dalyje dėmesys bus skiriamas naujų ir jau prieinamų vakcinų technologijų pažangai (2 pav.).

Kaip ir naudojant chemines medžiagas, atsparumo vakcinoms negalima ignoruoti, o esamas vakcinas galima modifikuoti naudojant sekos nustatymo ir klonavimo procedūras, siekiant išskirti naujus antigenus arba pakeisti esamus antigenus, kad būtų atkurtas jų veiksmingumas. Taip pat į vieną vakcinos produktą galima įtraukti du ar daugiau nesusijusių antigenų, kad sumažėtų atsparumo bet kuriam vienam antigenui ar antigeno determinantui išsivystymo rizika.

3.1. DNR pagrįstos vakcinos nuo erkių

DNR vakcinos išradimas ir jos naudojimas sukėlė susirūpinimą dėl saugumo; visų pirma galimybė stabiliai transfekuoti genetinę medžiagą (DNR) į somatines ar net lytines ląsteles, dėl ko gali pasikeisti genų ekspresija ir mutacijos. Ekstrachromosominę plazmidę koduojančią luciferazės vektorių buvo galima aptikti skeleto raumenyse daugiau nei 19 mėnesių po gydymo į raumenis (138). Be to, injekcija į raumenis po elektroporacijos labai padidino bendrą transfekcijos greitį. Vektorinės DNR chromosomų integracija atsitiktinėse vietose yra susijusi su bet kokiu transfekcijos greičio padidėjimu (139). Remiantis šiais tyrimais, integracijos dažnis buvo gerokai mažesnis už spontaninių genų mutacijų skaičių.

Tačiau Manam ir kt. nustatė, kad didžioji dalis plazmidinės DNR, suleistos į skirtingų graužikų skeleto raumenis, liko injekcijos vietoje. Nedidelės frakcijos taip pat buvo aptiktos lytinėse liaukose, tačiau jos nebuvo integruotos į genomą (140). Pakartotinis luciferazę koduojančio reporterio vektoriaus įvedimas į raumenis primatams sukėlė ilgalaikę reporterio ekspresiją, bet nesukėlė antikūnų prieš DNR (141 142). Nepaisant to, reikėtų pažymėti, kad pirmiau minėtus ir papildomus saugumo klausimus, susijusius su DNR vakcinomis, reikėtų atsižvelgti į jų pritaikymą klinikinėje praktikoje (143).

Per pastaruosius du dešimtmečius įvairios tyrėjų grupės daugiausia dėmesio skyrė DNR vakcinos, skirtos kontroliuoti erkių užkrėtimą, kūrimui, ir iki šiol buvo pristatytos kelios DNR vakcinos, skirtos imunizuoti šeimininkus (130 144 145). DNR vakcinos, kurios skiriasi nuo tradicinių baltymų pagrindu pagamintų vakcinų tuo, kad yra pagrįstos bakterijų plazmidėmis, koduojančiomis antigeninius baltymus, o transkripciją kontroliuoja veiksmingi eukariotų promotoriai, turi paprasto dizaino, didelio stabilumo ir saugaus vartojimo privalumus (143). ]. Manoma, kad skiepijant DNR plazmidės DNR molekulės aktyviai patenka į branduolį ir lieka ten visą gyvenimą kaip epizominė DNR, nuolat generuodamos apsauginius antigenus tol, kol ląstelė gyva (146). Pakartotinio pastiprinimo problema didelis antikūnų titras gali būti išspręstas nuolat sintezuojant, apdorojant ir pristatant antigenus T ląstelėms in vivo DNR vakcinuotuose gyvūnuose.

Be to, kadangi DNR vakcinoje yra tik plazmidinė DNR ir joje nėra užterštų baltymų, atrodo tikėtina, kad daugkartinė ar pakartotinė vakcinacija nesukeltų imuninės reakcijos į vektoriaus DNR (147). Išreikštą antigeną gali pateikti I klasės MHC ir kompleksai, kurie gali sukelti CD4 plius ir CD8 plius T ląsteles, atitinkamai stimuliuodami ląstelinį ir humoralinį imuninį atsaką (148).

Įrodymai gauti iš De Rose ir kt. [144], kurioje merino mišrūnės buvo imunizuotos nuo B. micro plus naudojant DNR vakciną. Kai plazmidė, turinti viso ilgio Bm86 genų seką, buvo skiriama atskirai arba su plazmide, turinčia citokinų, granulocitų-makrofagų kolonijas stimuliuojančio faktoriaus (GM-CSF) arba interleukino (IL) genus, -1beta sukėlė palyginti žemą apsaugos nuo vėlesnio erkių užkrėtimo lygį. Be to, kartu skiepijus Bm86 ir GM-CSF plazmidėmis, statistiškai reikšmingai sumažėjo erkių vaisingumas. Visose grupėse, kurioms buvo suleista Bm{10}} DNR vakcina, antikūnų prieš Bm86 titrai buvo žemi. Be to, šiose grupėse pasireiškė mažas periferinio kraujo limfocitų antigenui specifinės stimuliacijos lygis. Tačiau vakcinacija DNR sukėlė stiprų antikūnų atsaką po vienos rekombinantinio Bm86 baltymo injekcijos adjuvante. Tačiau antikūnų gamyba pasirodė šiek tiek mažiau efektyvi nei po dviejų vakcinacijų su rekombinantiniais baltymais.

Be to, daugelis kitų mokslininkų ištyrė DNR antigenų veiksmingumą imunizuoti šeimininkus nuo erkių užkrėtimo. Pavyzdžiui, Sayed ir kt. [149] išskyrė DNR iš Argas persicus kiaušinių ir panaudojo ją viščiukams imunizuoti 200–800 µg DNR/kg viščiuko kūno svorio dozėmis. Rezultatas buvo palankus, nes erkių maitinimosi sėkmė sumažėjo 74,64 proc. (50 µg DNR/kg viščiuko kūno svorio) ir 89,39 proc. (100 µg DNR/kg viščiuko kūno svorio), kai jos buvo veikiamos DNR imunizuotomis vištomis. Be to, autoriai pranešė, kad DNR imunizuotų viščiukų serumas veikia prieš A. precious žarnyno baltymus; tačiau tolesnė analizė naudojant kitas erkių rūšis parodė, kad serumo aktyvumas yra specifinis rūšiai. Imunizuoto vištienos serumo elektroforezinis modelis parodė tris naujas baltymų juostas, kurios, kaip manoma, yra susijusios su vištos imuninės gynybos nuo erkių vystymu [149]. Vėliau daugelis tyrimų buvo skirti antigenui specifinei DNR vakcinacijai; tačiau jų apsaugos lygis skyrėsi priklausomai nuo skirtingų antigenų tipų. Buvo įrodyta, kad BALB/c pelėms, kurioms buvo sušvirkštas plazmidės pBMC2-koduojantis antigeną Bm86, buvo nustatytas atsparumas Boophilus microplus.

Didesnė vakcinacijos sukelta anti-Bm86 antikūnų gamyba ir didesnis interleukino (IL) kiekis (IL-4, IL-5 ir IL-12 (p40)) ir gama interferono (IFN-) lygiai pelių, imunizuotų pBMC2, serume. Pelės, imunizuotos pBMC2, parodė antigenui specifinę splenocitų stimuliaciją pagal bromodeoksiuridino įtraukimą ir IFN g sekreciją. Šios vakcinos panaudojimas gyvuliams sukėlė antikūnų gamybą, o tai rodo, kad Bm86 DNR vakcinacija sukelia stiprų imuninį atsaką prieš B. micro plus [150]. Kitame tyrime buvo įvertinta imuninė apsauga, kurią triušiams sukėlė rekombinantinės plazmidės, koduojančios H. longicornis (pcDNA3.1( plus )-Pmy) paramioziną (Pmy). Triušiams išsivystė aukštas IgG lygis, o tai rodo, kad vakcinacija sukelia humoralinį imuninį atsaką. Kai kurios erkės (27,31 proc.), kurios maitinosi vakcinuotais triušiais, nugaišo, o likusių erkių vidutinis įsisiurbimo svoris ir suaugusių patelių kiaušinėlių atsiradimas sumažėjo atitinkamai 36 ir 39 proc.

Taigi, atrodo, kad Pmy DNR vakcina gali sukelti veiksmingą humoralinį imuninį atsaką, kad ir kaip būtų, ir iš dalies apsaugo triušius nuo H. longicornis infekcijos [151]. Įdomu tai, kad kelių epitopų DNR vakcina, apimanti ir CD4 plius, ir CD8 plius citotoksinius T limfocitų epitopus, laboratorinėmis sąlygomis suteikė 100 procentų avių apsaugą nuo Ehrlichia ruminantium. Tačiau lauko sąlygomis rezultatai nebuvo pakartoti. Šiame tyrime pLamp vartojimas kartu su MPL į raumenis, be vietinio vartojimo, apsaugojo avis nuo erkių iki 60 procentų, nes suaktyvino atminties T ląstelių atsaką [152].

Keletas kitų antigenų, tokių kaip Salp14 ir lipokalinai, atskirai arba kartu su kitais antigenais, neseniai buvo įvertinti kaip DNR vakcinos, o tai dar labiau suteikia vilties sukurti DNR vakciną nuo erkių [130, 153]. Įrodyta, kad salp14 DNR vakcina sukėlė eritemą erkės įkandimo vietoje po užkrėtimo erke [153]. Panašiai, lipokalinų (LIP) vakcina, apimanti rekombinantinę plazmidę pcDNA3.{7}}H. longicornis (HlLIP) LIP homologo HlLIP buvo panaudota imunizuoti triušio šeimininką. Nors šis pritaikymas sukėlė humoralinį šeimininko imunitetą, taip pat turėjo įtakos H. longicornis svoriui, kiaušinėliams ir išsiritimui, veiksmingumas buvo per mažas, o tai rodo, kad šis antigenas netinka vakcinoms, nes suteikia dalinai šeimininko apsaugą [130] ].

Galiausiai, pagrindinis DNR vakcinos kūrimo tikslas turėtų būti sukurti tokią vakciną, kad ji poliarizuotų šeimininko imuninį atsaką į Th2 atsaką, nes humoralinis imuninis atsakas vaidina pagrindinį vaidmenį erkių imunitetui. Nustatyta, kad galvijų, kurie buvo vakcinuoti B. micro plus vidurinės žarnos antigenais, specifinio IgG1, kurį moduliuoja Th2 ląstelės, lygiai koreliuoja su apsauga. Yra tikimybė, kad jei sekrecijos signalo seka yra tinkamai pasroviui nuo tikslinio geno, taikinio antigenas gali būti išskirtas į tarpląstelinį skyrių ir sukelti didesnį humoralinį imuninį atsaką. Taip pat tikėtina, kad Th2 ląstelių atranka būtų palankesnė, jei jos būtų kartu užkrėstos kitais imunomoduliuojančiais genais, tokiais kaip IL4 ir IL10.

3.2. mRNR vakcina

Pastaraisiais metais buvo atlikta daug bandymų atrasti naujus apsauginius antigenus, kuriuos būtų galima panaudoti kuriant vakciną nuo erkių, su daugybe patobulinimų. Norint patikrinti kandidato į vakciną veiksmingumą, rekombinantiniai baltymai, neatsižvelgiant į tai, ar jie yra susiję su kitais baltymais ar adjuvantais, buvo pasirinkta platforma jų veiksmingumui tirti naudojant pavyzdinius organizmus.

Dėl to, kad DNR ir mRNR vakcinų platformas galima lengvai sukurti, pastaraisiais metais įvyko reikšmingų genetinių (DNR ir mRNR) vakcinų platformų naudojimo pokyčių [130,145]. MRNR vakcina, koduojanti erkių seilių baltymų kokteilį, sukėlė „erkių imunitetą“ jūrų kiaulytėms ir taip labai sumažino erkių pernešamos Borrelia burgdorferi, Laimo ligos (boreliozės) sukėlėjo, perdavimą. Nors buvo įrodyta, kad daugelis erkių antigeno kandidatų sukelia šeimininko imuninį atsaką, kol kas nepavyko atkurti tvirto erkės imuniteto naudojant vakcinaciją. Gali būti, kad taip gali būti todėl, kad skirtingais maitinimosi etapais erkių seilių baltymų sudėtis gali dinamiškai keistis, galbūt dėl ​​to, kad būtų galima valdyti vidinius šeimininko pokyčius. Tokia informacija buvo pateikta neseniai atliktame tyrime, kurio metu mokslininkų grupė nustatė ir racionaliai atrinko 19 juodakojų erkių I. scapularis seilių baltymų, kurie yra dažnas Laimo ligos pernešėjas žmonėms. Jie sukūrė nukleozidais modifikuotas mRNR, kurios koduoja šiuos baltymus.

Norint pagaminti mRNR-LNP vakciną 19ISP (19 Ixodes seilių baltymus), jie buvo vienodais kiekiais kapsuliuojami į lipidų nanodaleles (LNP). Siekiant įvertinti vakcinos poveikį I. scapularis šėrimo elgsenai, jūrų kiaulytės buvo imunizuotos intraderminiu būdu tris kartus 4-savaičių intervalais, o tai sukėlė tvirtą antikūnų atsaką į mažiausiai dešimt koduotų antigenų. Kitame eksperimento etape gyvūnai buvo užkrėsti neužkrėstomis I. scapularis nimfomis. Vakcinuotiems gyvūnams per 24 valandas išsivystė didelė eritema.

Be to, erkės ant gyvūnų, kurie buvo blogai šeriami ir pradėjo atsiskirti po 48 valandų, o 80 procentų erkių atsiskyrė nuo vakcinuotų gyvūnų po 96 valandų, palyginti su 20 procentų gyvūnų, kurie nebuvo vakcinuoti. Siekiant toliau tirti, ar pakitęs maitinimosi elgesys turi įtakos patogenų pernešimui, B. burgdorferi užkrėstos I. scapularis nimfos buvo dedamos ant jūrų kiaulyčių, kurios buvo vakcinuotos arba 19ISP, arba mRNR vakcina, koduojančia ugniagesių luciferazę. Kiekvienas iš šių gyvūnų gavo tris užsikrėtusias erkes. Atsižvelgiant į tai, kad žmonės greičiausiai pašalins erkę, sukeliančią su eritema susijusį niežulį, erkės buvo atskirtos dvigubai aklu būdu, kai tik atsirado paraudimas.

Iš viso 46 procentai kontrolinių gyvūnų buvo užsikrėtę B. burgdorferi praėjus trims savaitėms po užkrėtimo, tuo tarpu nė vienas iš vakcinuotų gyvūnų nebuvo užsikrėtęs šiuo patogenu. Genų ekspresijos analizė parodė, kad vakcina suaktyvino kelis imuninius kelius, įskaitant T ir B ląstelių receptorius, chemokiną, FcεRI ir IL-17 signalizaciją, taip pat natūralų žudikų ląstelių sukeliamą toksiškumą. Be to, įkandimo vietos analizė taip pat parodė, kad vakcina sukėlė T ląstelių atsaką [154].

Tuo pačiu metu ta pati mokslininkų grupė naudojo Salp14 kaip pavyzdinį antigeną, kad ištirtų erkių imunitetą, naudodama mRNR lipidų nanodaleles (LNP), plazmidinę DNR arba rekombinantinių baltymų platformas [153]. Šiame tyrime vakcinacija, įskaitant nukleozidais modifikuotas mRNR lipidų nanodaleles, koduojančias (mRNR-LNP) Salp14, buvo švirkščiama į odą po du kartus kas 4 savaites. Salp14-specifinių antikūnų susidarymas buvo lyginamas tarp skirtingų imunizacijos strategijų. Salp14 mRNR imunizacija buvo platforma, kuri sukėlė stipriausią humoralinį atsaką, palyginti su DNR ir baltymų vakcinacija. Jūrų kiaulytės, imunizuotos salp14 mRNR, sukėlė stipriausią ir intensyviausią eritemą, pastebėtą įkandimo vietoje visose imunizacijos grupėse; tačiau tai neturėjo įtakos erkės atsiskyrimo greičiui ir nepakeitė išsipūtimo svorio [153]. Vakcina nuo erkės turėtų paskatinti eritemą, kad būtų veiksminga, o vienas iš būdų pakeisti vėlesnius erkių maitinimosi aspektus, įskaitant prisitvirtinimą ir užsikimšimą, yra naudoti vakciną, kurioje yra keletas seilių erkių antigenų [154].

Todėl atrodo, kad imunizacija su nukleozidais modifikuotu mRNALNP salp14, kuris gali būti naudojamas kaip potencialus vakcinos kandidatas, gali sukelti aukštesnius antikūnų titrus ir ankstesnį bei didesnį paraudimo laipsnį nei imunizacija DNR arba baltymu, o tai rodo, kad Salp14 galėtų būti tinkamas kandidatas į vakciną, vienas su optimizavimu arba kartu su kitais kandidatais antigenais [154].

Apskritai atrodo, kad daugiavalentė mRNR vakcina gali sukelti atsparumą erkėms laboratoriniams gyvūnams, pvz., jūrų kiaulytėms, ir užkirsti kelią erkių užkrėtimui bei erkių pernešamai infekcijai, tikriausiai apribodama erkių maitinimosi savo šeimininku trukmę. Taip pat buvo pasiūlyta, kad mRNR-LNP formulė, kuri leidžia lėtai ir nuolat tiekti antigeną, gali imituoti natūralų erkių įkandimą. Jei šią strategiją būtų galima pritaikyti žmonėms, tai būtų pirmoji vakcina, kuri nėra tiesiogiai nukreipta į patogeną ar mikrobą, o į jo vektorių. Be to, kadangi vis dar kuriamos vakcinos nuo erkių, kurios padėtų žmonėms užkirsti kelią erkių platinamų ligų plitimui, todėl reikia atsižvelgti į imunizacijos strategiją ir imunizuoti antigenų parinkimą.

3.3. Baltymų pagrindu pagamintos vakcinos

Kai kurios baltymų pagrindu pagamintos vakcinos yra parduodamos ir veiksmingos. Vakcinų programa pirmą kartą buvo pradėta septintajame dešimtmetyje, kai mokslininkai pradėjo eksperimentuoti su dviejų skirtingų tipų vakcinų formulėmis, kad imunizuotų šeimininką nuo erkės (D. Anderson). Pirmoji apėmė antigenus, gautus iš žarnyno ir kiaušidžių, o į antrąjį – visus vidinius organus, išskirtus iš pusiau užsikimšusių D. Anderson patelių.

Šis tyrimas atskleidė, kad antikūnų sukeltas imuninis atsakas suaktyvėja prieš erkės žarnų audinį, kai galvijų šeimininkas pasėjamas ekstraktais, gautais iš suaugusių R. microplus patelių [155]. Šis pradinis tyrimas, skirtas įvertinti vakcinos formulės veiksmingumą, paskatino mokslininkus visame pasaulyje sutelkti dėmesį į vakcinos, skirtos kontroliuoti erkes ir erkių platinamas ligas, kūrimą. Taigi devintajame dešimtmetyje dvi atskiros tyrėjų grupės atliko pirmuosius mokslinius tyrimus, naudodamos vakcinų formules, siekdamos analizuoti galvijų imuninį atsaką prieš R. microplus [156].

Atlikus pirmiau minėtus tyrimus, buvo nustatyta, kad su erkės žarnyne susijęs glikoproteinas gali sukelti šeimininko imuninę apsaugą [157]. Vėlesniame tyrime ta pati tyrimų grupė išskyrė 89 kDa molekulinės masės glikoproteiną, kuris buvo pavadintas Bm86 ir, kaip pranešta, yra susijęs su R. microplus žarnyno ląstelėmis [158,159]. Bm86 rekombinantinis baltymas buvo gaminamas dideliu mastu, naudojant mielių ekspresijos sistemą.

Kol kas tik Bm{0}}pagrįsta vakcina parduodama su skirtingais prekių pavadinimais, pavyzdžiui, Australijoje ji parduodama su TickGARD® prekės ženklu, o Kuboje - Gavac® [160 161]. Šios vakcinos yra plačiai naudojamos įvairiose šalyse, siekiant sumažinti erkių spaudimą galvijams. Įrodyta, kad naudojant šias vakcinas erkių populiaciją galima sumažinti iki 74 proc., o bendras jų veiksmingumas svyruoja nuo 51 iki 91 proc., o tai priklauso nuo erkių populiacijos ir galvijų mitybos būklės [160–163]. Yra įrodymų, kad kai kurios Kolumbijos, Meksikos ir Brazilijos R. micro plus erkių padermės pasižymi mažesniu bendru veiksmingumu, palyginti su Kubos ir Australijos R. micro plus erkių padermėmis, ir net Argentinos R. micro plus padermė A yra atspari vakcinacijai su Bm86 [34 164]. Buvo atlikta tolesnė vakcinos Bm86 veiksmingumo skirtumų analizė tos pačios rūšies erkių populiacijoms skirtingose ​​pasaulio dalyse ir buvo padaryta išvada, kad skirtingos erkių populiacijos greičiausiai turi Bm{ polimorfizmą. {12}} antigeno genų, atsižvelgiant į geno aminorūgščių seką, ir tai yra pagrindinė priežastis, kodėl esamos Bm{13}}pagrįstos vakcinos nėra tokios veiksmingos.

Pavyzdžiui, erkių populiacijose Argentinoje buvo nustatytas geno, homologinio Bm86 (žymimas kaip Bm95), polimorfizmas, dėl kurio skiriasi Bm86 seka tarp erkių populiacijų, pvz. rasta Kuboje ir Australijoje, o tai gali paaiškinti, kodėl Bm86 vakcina nebuvo tokia veiksminga nuo Argentinos erkės [34]. Atsižvelgdami į Bm{5}} vakcinos atsparumo problemas, mokslininkai sukūrė rekombinantinę Bm95 vakciną, kuri pasirodė esanti labai efektyvi. Bendras veiksmingumas Kuboje ir Argentinoje yra 89 proc., o Indijoje – 81 proc. [34,102,120,165].

Be pirmiau minėtos komercinės vakcinos ir jos veiksmingumo bandymo, daugelis kitų tyrimų buvo skirti tolesniam Bm86-pagrįstos vakcinos veiksmingumo gerinimui. Kai kuriuose naujausiuose tyrimuose buvo susintetinti peptidai, įskaitant SBm4912, SBm7462® ir SBm19733, kurie buvo gauti iš Bm86, taip pat buvo sukurtas rSBm7462® rekombinantinis peptidas ir analizuojamas jų veiksmingumas. Šių peptidų procentinis veiksmingumas svyravo nuo 35,87 iki 81,05 procento, o tai rodo, kad šie peptidai, ypač SBm7462® ir rSBm7462®, vaidina lemiamą vaidmenį skatinant šeimininko imunitetą ir gali būti parduodami, nes yra labai veiksmingi mažinant erkių skaičių. užkrėtimas [121 122]. Be to, siekdama pagerinti Bm86 rekombinantinės baltymų vakcinos veiksmingumą, Lapisa SA neseniai Meksikoje pristatė Bm86-pagrįstą vakciną Bovimune Ixovac®. Tačiau šios vakcinos veiksmingumas nuo erkių netirtas; todėl reikia atlikti tyrimus, siekiant nustatyti jo poveikį skirtingoms erkių populiacijoms, siekiant nustatyti jo veiksmingumą.

Atrodo, kad tinka Bm86 homologų pagrindu pagaminta vakcina (TickGard), nes ši vakcina plačiai pritaikoma ir gali sukelti kryžmiškai reaktyvius antikūnus įvairiose erkių rūšyse, pvz., Rhipicephalus sanguineus, Hyalomma anatolicum anatolicum, Rhipicephalus (Boophilus). ) decoloratus, Rhipicephalus (Boophilus) annulatus ir Hyalomma dromedary [166–168]. Tačiau ši vakcina negali sukelti kryžminės reakcijos kai kurių kitų rūšių erkių (pvz., Rhipicephalus appendiculatus, Amblyomma variegatum ir Amblyomma cajennense) [169,170]. Įdomu pastebėti, kad vakcina Bm86 turi 100 procentų veiksmingumą prieš R. annulatus, todėl yra veiksmingesnė nei pranešta apie homologinės vakcinos su R. microplus veiksmingumą. To priežastis gali būti fiziologiniai veiksniai (pvz., mažesnis kraujo pritekėjimas ir mažesnis proteazių aktyvumo lygis organizme) arba erkių genetiniai veiksniai. Šie veiksniai gali turėti įtakos BM86 baltymų kiekiui arba erkių fiziologiniams procesams, tokiems kaip maitinimasis ir baltymų skaidymas, todėl antikūnų ir antigenų sąveika gali būti efektyvesnė [171]. Bm86 vakcinacija suteikia puikią apsaugą nuo R. microplus erkių, tačiau sudėtinga šią patirtį ekstrapoliuoti į Ixodes erkių vakciną.

Priešingai nei I. ricinus ir I. scapularis, R. microplus yra viena erkė šeimininkė, minta tik galvijais [168]. Jis taip pat turi trumpą gyvavimo ciklą, nelyja ir randa naują šeimininką, kai baigiasi kraujo miltai. Vakcinos Bm86 veiksmingumas buvo tiriamas su karvėmis, kurios buvo paveiktos R. microplus erkių lervų, ir buvo išmatuoti parametrai, susiję su erkės imunitetu, kai suaugusios patelės iškrito po vakcinacijos. Taigi, išmatuota apsauga yra įtakos dviem lydymosi laikotarpiams ir trims slinkimo etapams suma. Įrodyta, kad R. microplus vakcinacija Bm86 sukelia žalą ir sumažina suaugusių erkių patelių prisitvirtinimo svorį [172]; nepaisant to, santykinė vakcinacijos Bm86 įtaka nesubrendusiems R. microplus gyvenimo etapams nėra tiksliai žinoma. Bm86 homologai taip pat buvo išskirti ir identifikuoti iš Ixodes erkių. I. ricinus turi du homologus Bm86, Ir86-1 ir Ir-86-2, o I. scapularis taip pat turi du homologus Is86-1 ir Is{{10} } [173]. Vėlesnis tyrimas ištyrė, kad vakcinacija nuo rekombinantinių Ir{12}} baltymų padidino serumo IgG titrus prieš rekombinantinius Ir86 baltymus; tačiau antikūnai nepajėgė apsaugoti triušių nuo I. ricinus užkrėtimo; nebuvo sumažintas nei prisitvirtinusių erkių skaičius, nei erkių svoris [174].

Todėl vakcinacija nuo Bm86 homologų Ixodes nelaikoma veiksmingu metodu Ixodes ricinus populiacijoms kontroliuoti, nors Bm86 vakcinacija turi aiškų poveikį R. microplus. Nors Bm86 vakcina buvo labai sėkminga, labai svarbu suprasti, kad vakcina greičiausiai nepakeis akaricidų, nes neturi su akaricidais siejamo „išmušimo efekto“. Nepaisant to, lauko patirtis parodė, kad naudojant Bm86 labai sumažėja poreikis naudoti akaricidą lauke. Pavyzdžiui, Kuboje griežtai reguliuojant erkių kontrolės programą, šalyje naudojamų akaricidų kiekis sumažėjo 87 proc., o tai panašu į neseniai Venesueloje atlikto tyrimo rezultatus [161 175 176].

Be to, vakcinos Bm{0}} naudojimas taip pat žymiai sumažino erkių platinamų ligų, įskaitant galvijų anaplazmozę ir galvijų babeziozę, skaičių. Šios vakcinos taikymas taip pat padidino gyvulių, pvz., galvijų, produktyvumą ir dėl to sumažino ūkininkų ekonominius nuostolius [160]. Aukščiau pateikti Bm86 vakcinacijos aspektai rodo, kad tai yra labai ekonomiškas metodas, palyginti su cheminėmis medžiagomis kovojant su erkių užkrėtimu. Iš esmės ši vakcina gali būti labai naudinga mažinant erkių platinamas ligas, taip pat gerinant erkių protrūkių valdymą gyvulininkystės ūkiuose, siekiant sumažinti erkių platinamų ligų skaičių.

4. Baigiamosios pastabos

Erkės vystymuisi, augimui ir dauginimuisi maitinasi krauju, jos yra atsakingos už įvairių erkių platinamų ligų perdavimą. Pavyzdžiui, iksodinės erkės perneša daug patogenų, įskaitant bakterijas, pirmuonis ir virusus. Svarbu pažymėti, kad vakcinos nuo erkių sumažina erkių įsisiurbimą ir apsaugo nuo patogenų perdavimo, be to, yra saugesnės nei cheminė kontrolė, kuri gali turėti neigiamą šalutinį poveikį. Buvo nustatyti keli nauji antigenai iš įvairių audinių ir (arba) organų, o jų veiksmingumas buvo ištirtas su laboratoriniais gyvūnais, todėl buvo padaryta didelė pažanga kuriant vakciną nuo erkių, kurios nepastebėtas šalutinis poveikis. Bm86 baltymo vakcinos buvo parduodamos įvairiose šalyse, o jų naudojimas nuo R. microplus parodė, kad vakcinacija nuo erkių gali būti veiksmingai naudojama. Tačiau Bm86-pagrįstos vakcinos nėra vienodai veiksmingos nuo kitų rūšių erkių, pvz., Ixodes erkių. Įrodyta, kad vakcinacija I. ricinus Bm86 homologu neturi jokios įtakos erkių maitinimui [174].

Be to, kadangi R. micro plus minta tik vienu šeimininku, karvėms užkrėsti buvo naudojamos lervos, todėl suaugusios erkės patelės visiškai įsisuko, o tai ne tik sumažino erkių skaičių, bet ir turėjo reikšmingos įtakos visiems trims gyvavimo etapams. varnele. Priešingai nei R. microplus, Ixodes erkės keičia šeimininkus per visą savo gyvavimo ciklą, todėl vakcinuojant nuo Ixodes erkių reikia veiksmingai užkirsti kelią erkių prisitvirtinimui ir (arba) maitinimuisi vieno šeimininko kraujo valgio metu. Nepaisant to, vakcinacija nuo Ixodes erkių atrodo įmanoma ir realu. Todėl svarbu pažymėti, kad naudojant šio tipo vakciną kryžminė šeimininko apsauga gali būti sudėtinga užduotis. Be Bm86, yra ir kitų baltymų, kurie taip pat gali turėti terapinį poveikį kaip imunosupresiniai arba antikoaguliantai [39,61].

Naujausi genomikos ir proteomikos pažanga leido mums atrasti naujus antigenus ir panaudoti molekulinius metodus, kad būtų galima manipuliuoti nustatytais baltymais ir išbandyti naujas vakcinas daug greičiau ir ekonomiškiau nei anksčiau. DNR vakcinacija taip pat yra puiki galimybė; tačiau apskritai tokio tipo vakcinacija gali lemti tik žemą antigeno ekspresijos lygį ir riboja neprofesionalių antigeną pateikiančių ląstelių, aktyvuojančių CD4 ir T pagalbines ląsteles, MHC II klasės keliu [177]. Tačiau DNR vakcinacija ne tik suteikia didelę apsaugą šeimininkui, bet ir laikoma kryžmine apsauga nuo erkių, jei po jos skiepijama chimerine vakcina arba rekombinantiniais baltymais [178].

Be to, mRNR-LNP gali padėti sukelti eritemą erkės įkandimo vietoje, kuri yra vienas iš svarbiausių ankstyvųjų įgyto atsparumo erkėms rodiklių. mRNR-LNP, kuriuose yra erkių genų, yra naudinga platforma kuriant vakcinas, kurios gali užkirsti kelią pasirinktoms erkių platinamoms ligoms [153, 154]. Atrodo, kad tiek DNR, tiek mRNR vakcinacija yra veiksmingos strategijos, todėl ateityje yra vilties, kad bus sukurta mRNR arba DNR vakcinacija, skirta erkių užkrėtimo ir erkių platinamų ligų kontrolei, taip pat užtikrinti kryžminę apsaugą. Tačiau iki šiol vakcina nebuvo parduota, o tai rodo, kad reikia atlikti tolesnius tyrimus, siekiant nustatyti vis daugiau antigenų, skirtų juos naudoti kuriant DNR arba mRNR vakciną, veiksmingumą. Naujų erkių vakcinų kandidatų identifikavimas ir apibūdinimas gali užkirsti kelią erkių maitinimuisi ir patogenų perdavimui. Šių antigenų naudojimas naminių gyvūnų ir laukinių gyvūnų, jau nekalbant apie žmones, vakcinose išlieka iššūkiu.

Autoriaus indėlis:

MNA, MAJ ir MK sukūrė straipsnio struktūrą. Visi autoriai atliko literatūros paiešką ir rašė rankraščio dalis / rinko duomenis. MNA ir IM sukūrė ir redagavo figūras. ID ir MK atliko kritinius pataisymus ir perskaitė rankraštį. Visi autoriai perskaitė ir sutiko su paskelbta rankraščio versija.

Finansavimas:

MK gavo finansavimą iš Čekijos Respublikos Grant Agency (subsidijos {{0}}S) ir ERD fondų, projekto CePaVip OPVVV (nr. 384 CZ.02.1.01 /0.0/0.0/16_019/0000759). Finansuotojai neturėjo jokio vaidmens kuriant tyrimą, renkant duomenis ir analizuojant, priimant sprendimą publikuoti ar rengiant rankraštį.

Institucinės peržiūros tarybos pareiškimas: Netaikoma.

Informuoto sutikimo pareiškimas: Netaikoma.

Duomenų prieinamumo pareiškimas: Netaikoma

Interesų konfliktai: autoriai pareiškia, kad tyrimas buvo atliktas nesant jokių komercinių ar finansinių santykių, kuriuos būtų galima suprasti kaip galimą interesų konfliktą.

Nuorodos

1. de la Fuente, J.; Kocan, KM Apsauginių antigenų, skirtų rekombinantinėms vakcinoms nuo erkių užkrėtimo, identifikavimo ir apibūdinimo pažanga. „Expert Rev. Vaccines“, 2003, 2, 583–593. [CrossRef]

2. Weaver, GV; Andersonas, N.; Garrettas, K.; Thompsonas, AT; Yabsley, M. J. Erkės ir erkių platinami patogenai naminiuose gyvūnuose, laukinėse kiaulėse ir aplinkos mėginių ėmimas už šeimininko ribų Guame, JAV. Priekyje. Vet. Sci. 2022, 8, 803424. [CrossRef] [PubMed]

3. Jonesas, KE; Patel, NG; Levy, MA; Storeygard, A.; Balkas, D.; Gittleman, JL; Daszak, P. Pasaulinės naujų infekcinių ligų tendencijos. Gamta 2008, 451, 990–993. [CrossRef]

4. Beugnet, F.; Marié, J.-L. Naujos nariuotakojų platinamos gyvūnų kompanionų ligos Europoje. Vet. Parazitolis. 2009, 163, 298–305. [CrossRef] [PubMed]

5. Petras, SG; Kariuki, HW; Aboge, GO; Gakuya, DW; Maingi, N.; Mulei, CM. Pieninius galvijus užkrečiančių erkių ir jų patogenų paplitimas smulkiuose ūkininkų ūkiuose Nairobio, Kenijos miesto apylinkėse. Vet. Med. Tarpt. 2021, 2021, 9501648. [CrossRef]

6. Grafas, J.-F.; Gogolevskis, R.; Leach-Bing, N.; Sabatini, GA; Molento, MB; Bordinas, EL; Arantes, GJ Erkių kontrolė: pramonės požiūriu. Parazitologija 2004, 129, S427–S442. [CrossRef] [PubMed]

7. de la Fuente, J. Vakcinos vektorių kontrolei: įdomios ateities galimybės. Vet. J. 2012, 194, 139–140. [CrossRef] [PubMed]

8. Sparagano, O.; Földvári, G.; Derdáková, M.; Kazimírová, M. Nauji erkių ir erkių platinamų ligų keliami iššūkiai. Biologia 2022, 77, 1497–1501. [CrossRef]

9. Dūlanas, DL; Apte, SH; Proietti, C. Genomu pagrįstos vakcinos dizainas: pažadas nuo maliarijos ir kitų infekcinių ligų. Tarpt. J. Parasitol. 2014, 44, 901–913. [CrossRef]

10. Bragazzi, NL; Gianfredi, V.; Villarini, M.; Rosselli, R.; Nasr, A.; Husseinas, A.; Martini, M.; Behzadifar, M. Vakcinos atitinka didelius duomenis: naujausia technika ir ateities perspektyvos. Nuo klasikinės 3Is ("Isoliate-inactive-Inject") Vaccinology 1.{10}} iki Vaccinology 3.0, Vaccinomics and Beyond A Historical Review. Priekyje. Visuomenės sveikata, 2018, 6, 62. [CrossRef]

11. Zepp, F. Vakcinos kūrimo principai – pamokos iš gamtos. Vakcina, 2010, 28 (3 priedas), C14–C24. [CrossRef]

12. Bouazzaoui, A.; Abdellatif, A.; Al-Allaf, F.; Bogari, N.; Al-Dehlawi, S.; Qari, S. Vakcinavimo strategijos: įprastiniai vakcinų metodai, palyginti su naujos kartos strategijomis derinant su adjuvantais. Pharmaceutics 2021, 13, 140. [CrossRef] [PubMed]

13. D'Argenio, DA; Wilson, CB Vakcinų dešimtmetis: imunologijos ir vakcinologijos integravimas siekiant racionalaus vakcinų projektavimo. Imunitetas 2010, 33, 437–440. [CrossRef]

14. Merino, O.; Antūnas, S.; Mosqueda, J.; Moreno-Cid, JA; de la Lastra, JMP; Rosario-Cruz, R.; Rodríguezas, S.; Domingosas, A.; de la Fuente, J. Vakcinacija baltymais, dalyvaujančiais erkių ir patogenų sąveikoje, sumažina vektorių užkrėtimą ir patogenų infekciją. Vakcina 2013, 31, 5889–5896. [CrossRef] [PubMed]

15. Balta, AL; Gaff, H. Apžvalga: Erkių kontrolės technologijų taikymas juodosioms, vienišoms žvaigždėms ir amerikietiškoms šunų erkėms. J. Integr. Pest Manag. 2018, 9, 12. [CrossRef]

16. Willadsen, P. Vakcinos nuo erkių. Parazitologija 2004, 129, S367–S387. [CrossRef]

17. de la Fuente, J.; Merino, O. Vaccinomics, naujas kelias į vakcinas nuo erkių. Vakcina 2013, 31, 5923–5929. [CrossRef] 18. Hill, CA; Wikel, SK Ixodes scapularis genomo projektas: galimybė tobulinti erkių tyrimus. Tendencijos Parasitol. 2005, 21, 151–153. [CrossRef]

19. Medina, JM; Abbas, MN; Bensaoud, C.; Hakenbergas, M.; Kotsyfakis, M. Ixodes ricinus Long NonCoding RNR bioinformatinė analizė numato jų gebėjimą surišti šeimininko miRNR. Tarpt. J. Mol. Sci. 2022, 23, 9761. [CrossRef]

20. Valle, MR; Guerrero, FD Vakcinos nuo erkių omikos eroje. Priekyje. Biosci. (Elite Red.) 2018, 10, 122–136. [CrossRef]

21. Logullo, C.; Vaz, IDS; Sorgine, MHF; Paiva-Silva, GO; Faria, FS; Zingali, RB; DE Lima, MFR; Abreu, L.; Oliveira, EF; Alvesas, EW; ir kt. Asparto proteinazės pirmtako išskyrimas iš kietosios erkės Boophilus microplus kiaušinėlio. Parazitologija 1998, 116, 525–532. [CrossRef]

22. Kurlovas, AH; Li, J.; Cheng, D.; Zhong, J. Ixodes pacificus erkės palaiko embriogenezę ir kiaušinių perėjimą po riketsijos endosimbionto gydymo antibiotikais. PLoS ONE 2014, 9, e104815. [CrossRef] [PubMed]

23. Sappington, TW; Hays, AR; Raikhel, AS Uodų vitellogenino receptorius: valymas, vystymasis ir biocheminis apibūdinimas. Vabzdžių Biochem. Mol. Biol. 1995, 25, 807–817. [CrossRef] [PubMed]

24. Vaz, IDS; Logullod, C.; Sorgine, M.; Velloso, FF; de Lima, MFR; Gonzalesas, JC; Masuda, H.; Oliveira, PL; Masudaa, A. Galvijų imunizavimas asparto proteinazės pirmtaku, išskirtu iš Boophilus microplus kiaušinių. Vet. Immunol. Imunopatolis. 1998, 66, 331–341. [CrossRef]

25. Leal, AT; Seiksas, A.; Pohl, kompiuteris; Ferreira, Kalifornija; Logullo, C.; Oliveira, PL; Farias, SE; Termignoni, C.; Vaz, IDS; Masuda, A. Galvijų vakcinacija rekombinantiniu Boophilus Yolk pro-Cathepsin. Vet. Immunol. Imunopatolis. 2006, 114, 341–345. [CrossRef]

26. Leal, AT; Pohl, kompiuteris; Ferreira, Kalifornija; Nascimento-Silva, MC; Sorgine, MH; Logullo, C.; Oliveira, PL; Farias, SE; Vaz, IDS; Masuda, A. Dviejų rekombinantinių Boophilus microplus trynio pro-katepsino formų, išreikštų inkliuziniuose kūnuose, gryninimas ir antigeniškumas. Protein Expr. Purif. 2006, 45, 107–114. [CrossRef] [PubMed]

27. Jamašita, O.; Indrasith, LS trynio baltymų metaboliniai likimai nariuotakojų embriogenezės metu. (Nariuotakojai / embriogenezė / trynio baltymai / ribota proteolizė / proteazė). Dev. Augimo skirtumas. 1988, 30, 337–346. [CrossRef]

28. Tellamas, R.; Kemp, D.; Jojimas, G.; Briscoe, S.; Smith, D.; Sharpas, P.; Irvingas, D.; Willadsen, P. Sumažėjęs Boophilus microplus kiaušialąstės, maitinančios vitellinu paskiepytas avis. Vet. Parazitolis. 2002, 103, 141–156. [CrossRef]

29. Boldbaatar, D.; Umemiya-Shirafuji, R.; Liao, M.; Tanaka, T.; Xuan, X.; Fujisaki, K. Keli vitellogeninai iš Haemaphysalis longicornis erkės yra labai svarbūs kiaušidžių vystymuisi. J. Insect Physiol. 2010, 56, 1587–1598. [CrossRef]

30. Seiksas, A.; Dos Santos, kompiuteris; Velloso, FF; Vaz, IDS; Masuda, A.; Hornas, F.; Termignoni, C. Boophilus microplus vitelliną ardanti cisteino endopeptidazė. Parazitologija 2003, 126, 155–163. [CrossRef]

31. Seiksas, A.; Leal, AT; Nascimento-Silva, MCL; Masuda, A.; Termignoni, C.; Vaz, IDS Erkių vitelliną skaidančio fermento (VTDCE) vakcinos potencialas. Vet. Immunol. Imunopatolis. 2008, 124, 332–340. [CrossRef] [PubMed]

32. Jarmey, J.; Jojimas, G.; Pearsonas, R.; McKenna, R.; Willadsen, P. Karboksidipeptidazė iš Boophilus microplus: „Paslėptas“ antigenas, panašus į angiotenziną konvertuojantį fermentą. Vabzdžių Biochem. Mol. Biol. 1995, 25, 969–974. [CrossRef] [PubMed]

33. Willadsen, P.; Smith, D.; Cobon, G.; McKenna, RV Lyginamoji galvijų vakcinacija nuo Boophilus microplus su rekombinantiniu antigenu Bm86 atskirai arba kartu su rekombinantiniu Bm91. Parazitų imunolis. 1996, 18, 241–246. [CrossRef]

34. García-García, JC; Montero, C.; Redondo, M.; Vargas, M.; Kanalesas, M.; Boue, O.; Rodríguez, M.; Joglaras, M.; Machado, H.; Gonzálezas, IL; ir kt. Imunizacijai Bm86 atsparių erkių kontrolė galvijams, paskiepytiems rekombinantiniu antigenu Bm95, išskirtu iš galvijų erkės Boophilus microplus. Vakcina 2000, 18, 2275–2287. [CrossRef]

35. Lambertz, C.; Čongkasikit, N.; Jittapalapong, S.; Ganguly, M. Bos indicus galvijų imuninis atsakas prieš anti-erkinį antigeną Bm91, gautą iš vietinių Rhipicephalus (Boophilus) microplus erkių, ir jo poveikis erkių dauginimuisi esant natūraliam užkrėtimui. J. Parasitol. Res. 2012, 2012, 907607. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com