T ląstelių kilmės interleukinas{1}} skatina CD155 ekspresiją vėžio ląstelėse, kad slopintų NK ląstelių funkciją ir skatintų metastazes
Oct 10, 2023
SANTRAUKA
Nors T ląstelės gali turėti stiprų priešnavikinį imunitetą, T pagalbinių (Th) ląstelių, gaminančių interleukiną -22 (IL-22) krūties ir plaučių navikuose, pogrupis yra susijęs su liūdnais paciento rezultatais. Čia mes ištyrėme mechanizmus, kuriais šios T ląstelės prisideda prie ligų. Pelių plaučių ir krūties vėžio modeliuose konstitucinė ir specifinė Il22 ištrynimas T ląstelėms sumažino metastazes, nepaveikdamas pirminio naviko augimo. IL-22 receptoriaus ištrynimas vėžio ląstelėse sumažina metastazes panašiai kaip ir pelėms, kurioms trūksta IL-22-. IL-22 sukėlė didelę CD155 ekspresiją, kuri prisijungė prie aktyvuojančio receptoriaus CD226 NK ląstelėse. Dėl per didelio aktyvavimo sumažėjo CD226 kiekis ir sutriko NK ląstelės, o tai padidino metastazių naštą. IL-22 signalizacija taip pat buvo susijusi su CD155 ekspresija žmonių duomenų rinkiniuose ir su prastais pacientų rezultatais. Apibendrinant, mūsų išvados atskleidžia imunosupresinę grandinę, kurią aktyvuoja iš T ląstelių gautas IL-22, skatinantis metastazes plaučiuose.
Cistanche tubulosa-Antitumor pranašumai
ĮVADAS
Pagrindinis neoplastinio progresavimo požymis ir pagrindinė su vėžiu susijusio mirtingumo priežastis yra vėžio ląstelių gebėjimas išplisti į antrines vietas ir formuoti metastazes.1,2 Metastazių susidarymo galima išvengti taikant imuninę priežiūrą, kurioje dalyvauja natūralus žudikas (NK), citotoksinis. , ir T pagalbinės (Th) 1 ląstelės.3,4 Priešingai, reguliuojančios T ląstelės (Treg), cirkuliuojantys monocitai ir iš Th ląstelių gautas IL-17A sudaro imunosupresinę mikroaplinką, leidžiančią pabėgti imuninei sistemai ir skatinti metastazes. 4–6 Todėl labai svarbu nustatyti signalizacijos kaskadas, kurios apibrėžia priešnavikinių imuninių ląstelių funkciją.7,8 Interleukinas-22 (IL-22) yra citokinas, kurį gamina Th17. o žmonėms – taip pat Th1 pogrupis, skatinantis vėžinių ląstelių augimą, skatinantis migraciją, apsaugantis nuo apoptozės, skatinantis epitelio-mezenchiminį perėjimą ir palaikomas piktybinių ląstelių kamienas.9–13 Jis taip pat skatina ankstyvą kancerogenezę, veikdamas. ant pirmtakų pažeidimų arba nesubrendusių vėžio kamieninių ląstelių.14–18 IL-22-gaminančių ląstelių, daugiausia Th ląstelių, bet taip pat ir gama delta (gd) T ląstelių, nekintamų natūralių žudikų T (iNKT) ląstelių ir įgimtų limfoidinių ląstelių (ILC). ), buvo aptikti esant pirminiams vėžio pažeidimams.19–24 IL-22 išreiškiamas biologiškai svarbiu lygiu sergant krūties, gaubtinės žarnos, plaučių, skrandžio ir kepenų ląstelių karcinoma.9,11,12,25,26 Daugumoje tyrimų , jo ekspresija yra susijusi su prasta prognoze, aukštesne ligos stadija ir greitesniu naviko progresavimu.13,22–24,27–29 IL-22 veikia tik per IL-22 receptorius (IL{{40). }}R), susidedantis iš dviejų subvienetų: IL-22RA1 ir IL-10RB.30,31 Išskiriamo IL-22 veikimą moduliuoja inhibitorius IL{{47} } surišantis baltymas (IL-22BP, IL-22RA2), IL-22RA1 homologas, kurį daugiausia gamina mieloidinės ląstelės.32,33 Pastovios būsenos sąlygomis IL -22 yra esminis homeostatinis citokinas, esantis epitelio barjeruose, tokiuose kaip žarnynas, plaučiai ir oda.34,35 Šiose vietose IL-22 skatina apsaugą, regeneraciją ir taisymą, kad išlaikytų barjero vientisumą36, 37, o jo nebuvimas sustiprina uždegimo sukeltą kancerogenezę.13,38 Kartu šie duomenys pabrėžia plačias, nuo konteksto priklausomas IL-22 funkcijas tiek fiziologinėmis, tiek patologinėmis sąlygomis. Prisijungus prie receptorių, IL-22 suaktyvina Janus kinazes Jak1 ir Tyk2, kad fosforiluotų STAT3, STAT1 arba STAT5, tačiau IL-22 gali inicijuoti kitus tolesnius kelius, įskaitant mitogenų aktyvuotų proteinkinazių (MAPK) kaskadą. arba PI3K-AktmTOR signalizacija, atsižvelgiant į ląstelių kontekstą.13, 36, 39–44 Šią signalizacijos kelių įvairovę atspindi daugybė fiziologinių poveikių, susijusių su IL-22 signalizacija, įskaitant aprašytuosius aukščiau, taip pat apsauga nuo genotoksinių pažeidimų ir antibakterinių peptidų, gleivių, priešuždegiminių ir priešuždegiminių citokinų bei chemokinų indukcijos.36,38,39,45,46 Vėžio ląstelės skatina IL gamybą-22 iš Th ląstelių krūties ir plaučių vėžiu sergantiems pacientams.12, 47, 48 NLRP3 uždegiminis IL-1b išsiskyrimas sukelia IL-22 gamybą iš naviko T ląstelių ir abiejų IL-22+ Th ląstelių ir NLRP3-IL-1b parašą galima rasti krūties ir plaučių vėžio navikų mėginiuose.48,49 Čia mes siekiame apibūdinti mechanizmą, kuriuo IL{102}} skatina krūties ir plaučių vėžio progresavimas. Mes nustatėme, kad IL{103}} skatina metastazių plitimą į plaučius, atskleidžiant grandinę, kurioje IL-22 tarpininkauja imunosupresijai metastazavusioje nišoje, skatindamas CD155 ekspresiją vėžio ląstelėse, kuri buvo susijusi su sumažėjusia CD226 ekspresija. NK ląstelėse ir sumažino interferono-g (IFNg) gamybą. Klinikiniai duomenys rodo, kad tokių būdų aktyvinimas yra susijęs su pacientų rezultatais.
REZULTATAI
cistanche papildo privalumai - padidina imunitetą
IL-22 veikia išplitusias vėžio ląsteles singeniniuose pelių plaučių ir krūties karcinomos modeliuose
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 arba išopėjimas), plaučiai buvo pagrindinė metastazavusi vieta mūsų modelyje, kartais metastazių aptikta kitur (neparodyta). Il22 / pelėms, naudojant skirtingus metastazių aptikimo metodus, sumažėjo metastazavusių Line-1 ir 4T1 ląstelių sklaida plaučiuose, palyginti su laukinio tipo gyvūnais, nepriklausomai nuo pirminio naviko dydžio (1B, 1C ir S1A pav.). Mes taip pat stebėjome panašų metastazavusį fenotipą ortotopiniame krūties vėžio modelyje, kai 4T1 ląstelės buvo implantuotos į krūties riebalų pagalvėlę (S2B pav.). Visi naudojami aklojo makroskopinio skaičiavimo, klonogeninių tyrimų ar histologijos metodai parodė didelį nuoseklumą nustatant mažesnę metastazavimo naštą Il22 / gyvūnams (1B, 1C ir S1C paveikslai). Tai reiškia pagrindinį IL-22 vaidmenį metastazavimo procese. Tada mes privertėme metastazes per intraveninę vėžio ląstelių injekciją, kuri apeina audinių atsiskyrimo ir invazijos poreikį (1D pav.). Abiejų ląstelių linijų intraveninės (iv) injekcijos atspindėjo poodinio modelio fenotipą. Iš tiesų galėtume patvirtinti mažesnę metastazinę apkrovą Il22 / pelėms (1E ir 1F paveikslai). Šie rezultatai rodo specifinį IL-22 vaidmenį cirkuliuojančiose išplitusiose ląstelėse. Norėdami nustatyti specifinį padermės poveikį, naudojome E0771 krūties vėžio modelį (1G pav.).50,51 Intraveninė E0771- GFP ląstelių injekcija atskleidė sumažėjusią metastazių naštą Il22 / gyvūnams, patvirtintus srauto citometrija (1H pav. S1D). Panašiai mes pastebėjome mažesnę metastazavusią naštą pelių kepenyse, kai E0771-GFP ląstelės buvo sušvirkštos intraspleniškai (S1E pav.). Visas kairysis E0771-GFP sušvirkštų pelių plautis buvo optiškai išvalytas pagal iDISCO protokolą metastazių kiekybiniam kiekiui nustatyti naudojant šviesos lakšto mikroskopiją in situ (1I pav.).52 Čia Il22/pelėms buvo mažesnis polinkis vystytis metastazėms. , tuo tarpu vizualizuotų metastazių dydis nesiskyrė ir neturėjo specifinio jų lokalizacijos modelio (1J pav.). Apibendrinant galima pasakyti, kad IL-22 veikė išplitusias vėžio ląsteles, sukeldamas krūties ir plaučių vėžio metastazes į plaučius.
T ląstelės yra svarbus IL{0}} šaltinis metastazavusioje plaučių nišoje
Anksčiau identifikavome CD{0}} T ląsteles kaip pagrindinį IL-22 šaltinį pirminiuose žmogaus plaučių navikuose ir bronchoalveolių plovimo mėginiuose.12,47,48 Norėdami apibūdinti IL-22 šaltinį savo modelių plaučius, į Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP reporterinius gyvūnus į veną suleidome E0771 ląsteles ir kiekybiškai įvertinome IL-22+ ląsteles naudojant srauto citometriją (2A ir S2A pav.).53 Populiacijos buvo apibrėžtos kaip CD4+, CD{15} }} ir dvigubai neigiamų (DN) (CD4 , CD8 ) ab T ląstelių (CD3+ gdTCR NK1.1 ), gd T ląstelių (CD3+ gdTCR+ NK1.1 ) ir CD{{ 26}} NK1.{28}} ir CD3 NK1.1+ ląstelės (2B ir S2B pav.). Pastebėjome CD4+, CD{8+ T ląstelių ir NK11+ ląstelių, gaminančių IL-22 auglių sušvirkštų gyvūnų plaučiuose, padidėjimą. 2C, S2C ir S2D paveikslai). Čia CD4+ ir CD8+ T ląstelės sudarė daugumą IL-22- gaminančių ląstelių auglių turinčiose pelėse (2C pav.). Be to, nustatėme, kad tokios CD4+ T ląstelės gamina IL-22, bet ne IL-17A (2D pav.). Šių ląstelių CD44 ekspresija buvo žema, o tai patvirtina jų atminties fenotipą, atitinkantį mūsų ankstesnius stebėjimus (S2E pav.).48 Norėdami toliau tirti šiuos atradimus įvairiuose modeliuose, naudojome tarpląstelinį dažymą, kad įvertintume IL-22 gamybą linijoje{ {56}} sc modelis, kuris davė panašius rezultatus, išskyrus sumažėjusią CD8+ T ląstelių IL-22 gamintojų dalį (S2F–S2I pav.). Taip pat galėjome nustatyti, kad IL-22+ ląstelės neekspresavo IFNg, o tai išskiria pelės IL-22 gamintojus iš Th1 pogrupio (2G pav.).49 Be to, tiksliai pjaunant naudojome konfokalinę mikroskopiją. gyvūnų reporterių plaučių griežinėliai, kad būtų galima ištirti jų erdvinį pasiskirstymą pelių, kurioms buvo sušvirkštas navikas, plaučiuose. Čia galėtume nustatyti, kad tokie IL-22 ir IL-17A gamintojai lokalizuojasi beveik vien tik metastazavusiuose židiniuose (2E pav.). Kaip parodė srauto citometrija, neradome jokios koreliacijos tarp IL-22 ir IL-17A gamybos iš reporterių ląstelių metastazavusiuose židiniuose, o tai rodo, kad IL-22 ir IL-17 iš tikrųjų yra gaminami dviejų skirtingų ląstelių pogrupių. Taip pat patvirtinome, kad didelė dalis IL-22-gaminančių ląstelių yra CD4+ T ląstelės (2E pav.). Kadangi šie duomenys rodė vyraujantį T ląstelių vaidmenį IL-22 gamyboje, mes sukūrėme pelę Il22floxCd4cre su sąlyginiu Il22 ištrynimu visose subrendusiose T ląstelėse (2F pav.). Užkrėtus E0771-GFP ląstelėmis, pelėms Il22floxCd4cre sumažėjo polinkis vystytis metastazėms plaučiuose, o tai primena fenotipą, pastebėtą pasauliniame Il22 / gyvūnams (2F pav.). Tačiau taip pat galime patvirtinti, kad CD4 promotoriui kontroliuojama kre-rekombinazė visiškai panaikino IL-22 gamybą ne tik CD4+, bet ir CD8+ T ląstelėse, išskirtose iš blužnies. Il22floxCd4cre pelių, todėl šis modelis negalėjo būti panaudotas norint tiksliai nustatyti konkretų IL-22 šaltinį (S2J pav.). Siekdami patvirtinti Th ląstelių, kaip esminio IL-22 šaltinio vaidmenį mūsų modelyje, perkėlėme laukinio tipo ir Il22 / CD4+ T ląsteles į Rag1 / II22/ gyvūnus, kurie vėliau gavo E{{ 104}} GFP ląstelės iv (2G pav.). Čia galime patvirtinti, kad IL-22 gamybos, naudojant adaptyviai perkeltas CD4+ T ląsteles, pakanka, kad mūsų modelyje būtų skatinamos metastazės plaučiuose, tačiau jos panaikintos, kai naudojamos CD4+ T ląstelės, išskirtos iš II22 / gyvūnų. (2G pav.). Svarbu tai, kad metastazių skirtumus paveikė T ląstelių įsisavinimas po perkėlimo (S2K pav.). Apibendrinant, mes nustatėme, kad Th ląstelės yra pakankamas IL-22 šaltinis, skatinantis metastazes auglių turinčių pelių plaučiuose, ir toliau siekėme nustatyti atitinkamą tikslinę ląstelę.
1 pav. IL-22-numušimas sumažina metastazių plaučiuose skaičių, bet neturi įtakos naviko augimui singeniniuose plaučių ir krūties karcinomos modeliuose.
2 pav. T ląstelės yra pagrindinis IL-22 šaltinis auglių turinčių pelių plaučiuose
IL-22RA1 ekspresija naviko ląstelėse yra būtina metastazių susidarymui
IL-22RA1 ekspresija apsiriboja ne hematopoetinėmis ląstelėmis ir yra ribojantis IL-22 signalizacijos veiksnys. Norėdami ištirti jo įtaką metastazavusiam fenotipui, mes sukūrėme stabilų Il22ra1 deleciją 4T1 ir Line -1 ląstelėse (3A pav.). Remiantis mūsų ankstesniais duomenimis, 4T1 Il22ra1 ląstelių auglio augimas iš esmės nebuvo paveiktas, palyginti su 4T1 kontrolinėmis ląstelėmis (3B pav.). Tačiau pelėms, kurioms buvo sušvirkštos 4T1 Il22ra1 ląstelės sc arba iv, plaučiuose buvo mažiau makroskopinių ir klonogeninių metastazių, palyginti su kontrolinėmis 4T1 ląstelėmis (3B ir 3C paveikslai). Siekdami patvirtinti, kad šis poveikis nepriklauso nuo klono, sukūrėme ir išanalizavome tris linijos -1 Il22ra1 klonus ir išbandėme juos su trimis kontroliniais klonais, kurie davė panašius rezultatus (3D ir 3E pav.). Tai patvirtina, kad IL-22RA1-išreiškiančios vėžio ląstelės yra svarbus IL-22 taikinys skatinant metastazes plaučiuose. Norėdami atmesti netikslų metodologijos poveikį, IL-22BP slopinome IL-22 signalizaciją. Sukūrėme 4T1 ir Line-1 ląstelių linijas, kurios iš esmės išskyrė IL-22BP (Il22ra2+) (S3A pav.). Sušvirkštus po oda, Line{44}} Il22ra2+ ląstelės augo panašiai kaip ir kontrolinės ląstelės implantavimo vietoje, kaip anksčiau buvo matyti Il22ra1 modeliuose ir Il22 / pelėse, nors 4T1 Il22ra2+ ląstelės augo lėčiau (S3B pav.). Čia 4T1 Il22ra2+ ląstelės turėjo labai sumažintą metastazių skaičių, kai buvo suleistos po oda (S3B ir S3C pav.). Nepaisant didesnio kintamumo, Line-1 Il22ra2+ ląstelės taip pat susidarė mažiau metastazių, kai buvo sušvirkštos sc arba iv (S3D ir S3E pav.). Taigi IL-22 neutralizavimas per IL-22BP iš esmės imitavo fenotipą, pastebėtą naudojant Il22ra1 ląsteles ir Il22/peles, patvirtindamas citokino svarbą metastazavusiam procesui.
cistanche papildo privalumai - padidina imunitetą
IL-22 kontroliuoja naviko ląstelių augimą ankstyvoje metastazavusio įsisavinimo stadijoje
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) ir atskiros ląstelės vienam mm2 plaučių audinio (S4B pav.). Negalėjome aptikti skirtumų praėjus 12 valandų po injekcijos, o tai rodo, kad IL-22 sėjimui gali neturėti didelės įtakos (S4C ir S4D paveikslai). Tačiau 48-h laiko momentu GFP+ ląstelių ir kolonijų skaičius sumažėjo Il22 / pelių plaučiuose (S4C ir S4D paveikslai). Tai rodo IL{12}} vaidmenį skatinant ankstyvas metastazes plaučiuose. Norėdami įvertinti proliferacijos greitį, pelėms kartu sušvirkštėme 5-etinil-20 -deoksiuridino (EdU) likus 4 valandoms iki tyrimo 12, 24, 48 val. ir 7 dienas po naviko injekcijos (S4E pav.). . Panašiai kaip ir skaičiuojant mikroskopu, GFP + ląstelių skaičiaus skirtumų neaptikome anksčiau nei praėjus 48 valandoms po injekcijos (S4F – S4G paveikslai). Priešingai, mes galėjome aptikti EdU įtraukimo skirtumus, o tai rodo didesnę besidalijančių ląstelių dalį tik 7 dieną po injekcijos (S4G pav.). Taigi manome, kad IL-22 paveikto plaučių naviko naštos skirtumus, pastebėtus jau po 48 val., lemia mechanizmas, nepriklausomas nuo proliferacijos.
3 pav. IL-22RA1 ekspresija naviko ląstelėse yra būtina metastazių susidarymui
IL-22 reguliuoja CD155 ekspresiją naviko ląstelėse ir taip skatina metastazes
Remdamiesi mūsų išvadomis, kad IL-22 veikia IL-22ra1+ vėžio ląsteles, skatindamas metastazę, atlikome 4T1 ląstelių, apdorotų IL-22, masinę RNR seką, kad būtų galima tiksliau nustatyti. pagrindinis mechanizmas (GEO: GSE202314) (4A pav.). Mes atradome 147 genus, kurie buvo skirtingai reguliuojami. Iš jų 133 genų ekspresija padidėjo, o 14 sumažėjo po gydymo IL-22 (4B ir S5A pav.). Mes patvirtinome Pvr (polioviruso receptorių, Pvr) kaip vieną iš labiausiai padidintų taikinių naudojant qPCR (S5B pav.). Tai pastebima, nes CD155, Pvr produktas, yra per daug ekspresuojamas sergant įvairiais vėžiniais susirgimais ir turi naviką skatinančių savybių, įskaitant metastazes.54–56 Norėdami patvirtinti savo išvadas, įvertinome CD155 raišką IL-22-stimuliuojamame 4T1, Line-1 ir E0771 ląstelės srauto citometrija (4C pav.). Mes nustatėme CD155 ekspresijos padidėjimą visose ląstelių linijose per 72 valandas (4D ir 4E paveikslai), tačiau šio poveikio nebuvo ląstelėse, kuriose trūko IL-22RA1 (S5C pav.). Tada įvertinome IL-22 poveikį CD155 ekspresijai E0771-GFP ląstelėse iš pelių, turinčių navikų, plaučių (4F pav.). Čia galėtume patvirtinti, kad ląstelės, implantuotos į Il22 / peles, turėjo mažesnę CD155 ekspresiją, kuri koreliavo su mažesne E0771-GFP ląstelių dalimi, aptikta srauto citometrijos metodu (4G ir 4H paveikslai). Norėdami patikrinti CD155 vaidmenį metastazėse, sukūrėme Pvr Line-1 ir 4T1 ląstelių linijas (4I, S5D ir S5G pav.). Nors tai turėjo mažai įtakos jų gebėjimui augti po oda (S5E ir S5F paveikslai), tai panaikino gebėjimą formuoti metastazes plaučiuose (4J ir S5H paveikslai). Šį procesą galėtume pakeisti konstitucine CD155 ekspresija Pvr ląstelėse, nepriklausomai nuo IL-22-sukeliamo reguliavimo (Pvr+).
4 pav. IL-22 signalizacija padidina CD155 ekspresiją naviko ląstelių paviršiuje ir suteikia atsparumą metastazių kontrolei
Tokiu atveju galėtume sukelti metastazes Il22 / pelių plaučiuose, pabrėždami ryšį tarp šių dviejų molekulių ir jų, kaip metastazavusio proceso tarpininkų, vaidmenį (4K ir S5I paveikslai).
CD155 ant naviko ląstelių yra susijęs su sumažėjusia CD226 ekspresija NK ląstelėse ir sumažėjusia IFNg gamyba
CD155 vaidina esminį vaidmenį vėžio ląstelių proliferacijoje ir adhezijoje, 54–57. Mes nenustatėme linijos -1 Pvr ląstelių proliferacijos trūkumų in vitro (duomenys nerodomi). Svarbu tai, kad CD155 atlieka išorinį ląstelėms metastazuojantį vaidmenį, nes prisijungia prie imunomoduliuojančių receptorių CD96, CD226 arba TIGIT NK ir T ląstelių paviršiuje.54–56,58,59 Norėdami tiksliai nustatyti CD155 surišimo partnerius, išanalizavome. priešnavikiniai atsakai pelių, turinčių 4T1-luciferazės+ ląstelių (4T1-Luc) plaučiuose (5A pav.). Naudodami in vivo vaizdo gavimo sistemą (IVIS), patvirtinome, kad laukinio tipo ir Il22 / pelėms auglio ląstelės buvo pasėtos panašiai 5 dieną po injekcijos, o naviko naštos skirtumai padidėjo per dvi savaites (5B ir 5C paveikslai). . Iš tiesų, NK ląstelių, bet ne kitų ląstelių tipų, IFNg gamybos defektas parodė humoralinių efektorių mechanizmų praradimą (5D, 5E ir S6A paveikslai) ir koreliavo su didesne naviko našta (S6B pav.). Šis efektas nuolat buvo aptiktas „Line-1 sc“ modelyje (S6C–S6E pav.). Ištirti lusto citometrija, 60 mėginių iš 4T1-plaučių metastazių turinčių pelių parodė padidėjusią CD155 ekspresiją WT metastazavusiuose židiniuose, bet ne Il22/gyvūnuose (5F ir S6F pav.). Mes nustatėme didesnį NK ląstelių infiltraciją į metastazavusius Il22 / bet ne WT gyvūnų židinius, o tai rodo didesnį aktyvavimą ir patvirtina priklausomybę nuo NK ląstelių kaip priešnavikinių efektorių ląstelių (5F pav.). CD226, bet ne TIGIT ar CD96, skirtingai ekspresavo NK ląstelės ir, kiek mažesniu mastu, CD8+ T ląstelės laukinio tipo ir Il22 / gyvūnų plaučiuose (5G ir S6G – S6H paveikslai). CD226 yra bendras receptorius, būtinas NK ir CD8 T ląstelių efektorinėms funkcijoms aktyvuoti. Todėl savo modelyje ėmėmės ištirti jo patofiziologinę reikšmę.61–64
cistanche tubulosa - stiprina imuninę sistemą
CD226 blokada panaikina antimetastazinį IL-22-trūkusių gyvūnų fenotipą
Pernelyg didelis CD{0}}signalinis signalas, esantis naviko mikroaplinkoje, gali paskatinti CD226 internalizavimą ir degradaciją efektorinėse ląstelėse.61,63 Siekdami apibūdinti pernelyg didelės CD155 ekspresijos vaidmenį CD226 ir vėlesnį priešnavikinį atsaką, suleidome 4T1 kontrolę ir Pvr+ ląstelės IV pelėms Il22/, o dvi grupės taip pat gavo anti-CD226 blokuojančių antikūnų (480.1) (6A pav.). Tiek Pvr + ląstelės, tiek CD226 blokada gali panašiai skatinti Il22 / pelių plaučių metastazes, ir šie poveikiai nesusidarė (6B pav.). Panašiai kaip ir ankstesniuose laukinio tipo gyvūnų stebėjimuose, to pakako, kad slopintų NK ląstelių IFNg gamybą (6C pav.). Galiausiai, Pvr+-švirkštose pelėse, palyginti su kontrolinėmis ląstelėmis, nustatėme CD226 ekspresijos sumažėjimą NK ląstelėse. Tai koreliavo su sumažėjusiu šių NK ląstelių gebėjimu gaminti IFNg (6D pav.). Be to, mes ištyrėme agonistinio TIGIT antikūno (IG9) potencialą slopinti NK ląstelių aktyvaciją Il22 / gyvūnams ir CD96 blokadą (3.3), kad būtų išvengta NK ląstelių funkcijos slopinimo (6E pav.). Nei TIGIT agonistas, nei CD96 antagonistas nepakeitė metastazių skaičiaus, lyginant su Il22 / gyvūnais, kurie gavo atitinkamai kontrolines arba Pvr+ 4T1 ląsteles (6F pav.). Kai suaktyvinta, TIGIT gali slopinti IFNg gamybą iš CD8+ T, bet ne iš NK ląstelių (6G pav.). Taigi, IL-22- CD155 ašis sukelia sumažėjusią CD226 ekspresiją NK ląstelėse ir daro jas inertiškas naviko mikroaplinkoje.
CD155 ekspresija papildo IL-22 geno parašą krūties ir plaučių vėžiu sergantiems pacientams
Galiausiai įvertinome CD155 klinikinę reikšmę IL-22-IL-22RA1 ašies kontekste. Vien CD155 ekspresija yra susijusi su nepalankia įvairių vėžio subjektų prognoze.54 Išanalizavome vėžio genomo atlaso (TCGA) plaučių adenokarcinomos (TCGA: LUAD, n=504) ir HER2- RNR sekos nustatymo duomenis. teigiamų pacientų mėginių iš invazinės krūties karcinomos (TCGA: BRCA, n=110) duomenų rinkinių. Mes sutelkėme dėmesį į pagrindinius IL-22-susijusius genus: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ir PVR. Norėdami suskirstyti pacientų grupes, panaudojome aglomeracinį klasterizavimą, neprižiūrimą klasterizacijos metodą, dėl kurio susidarė trys pagrindinės grupės (7A ir 7B pav.). Tai atskleidė išskirtinius genų ekspresijos modelius: klasteris 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), 1 klasteris (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) ir 2 klasteris (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (7C pav.). Šios grupės buvo tolygiai paskirstytos šiose dviejose grupėse (7D pav.). 0 klasterio ir 2 grupės LUAD duomenų rinkinio pacientų išgyvenamumas buvo blogesnis nei 1 grupės pacientų (7E pav.). 1 ir 2 grupių išgyvenamumas abiejose grupėse nesiskyrė (7E pav.). Be to, apskaičiavome ribotą vidutinį išgyvenamumo laiką (RMST) 0 ir 1 klasteriams, kad įvertintume numatomo išgyvenimo laiko skirtumą iki penkerių stebėjimo metų, todėl LUAD – 361,18 dienos, o BRCA – 93,23 dienos (7F pav.). 0 ir 1 klasteriai turėjo patologinių ligų stadijų dažnio skirtumus LUAD, bet ne BRCA kohortoje (7G pav.). Svarbu tai, kad tokie išgyvenamumo skirtumai tarp grupių (IL22RA1hiPVRhi) ir 1 (IL22RA1loPVRlo) daugiausia atsiranda dėl pacientų, kuriems diagnozuota ankstyvoje (I ir II), bet ne pažengusioje ligos stadijoje (III ir IV) (S7A pav.). Norėdami įvertinti kiekvieno geno įtaką išgyvenimui, naudojome Cox proporcingų pavojų modelį. Tiek IL22RA1 (pavojaus santykis [HR]=1.23), tiek PVR (HR=1.28) turi įtakos išgyvenamumui, o IL22RA2 ir IL10RB nepakeitė pavojaus LUAD grupėje (S7B pav.). Be to, tik CD226 (p=0.06), bet ne TIGIT ar CD96, turėjo įtakos išgyvenimui, atsižvelgiant į mūsų išvadas ikiklinikiniuose modeliuose (S7B pav.). LUAD kohortoje naudojome CIBERSORTx dekonvoliucijos algoritmą, kad įvertintume, ar mūsų grupių genų ekspresijos modeliai turi įtakos pacientų imuninių ląstelių infiltracijai.65 Įdomu tai, kad 1 klasteryje aktyvuotų NK ląstelių CIBERSORTx vienetų skaičius padidėja, palyginti su klasteriais. 0 ir 2 pacientams, sergantiems LUAD, tuo tarpu ramybės būsenos NK ląstelių ar aktyvuotų CD4+ atminties T ląstelių skirtumų (S7C pav.), panaši tendencija BRCA grupėje (S7D pav.). Kartu šie klinikinių grupių rezultatai rodo reguliavimo ryšio tarp T ląstelių kilmės IL-22 ir CD155 svarbą.
5 pav. CD226 ekspresija yra didesnė Il22–/– pelių NK ląstelėse
DISKUSIJA
Šiame tyrime atradome mechanizmą, pagal kurį T ląstelės gamina IL{0}}, skatinančią metastazes plaučiuose plaučių ir krūties vėžio modeliuose. Mechaniškai T ląstelės metastazavusių židinių plaučiuose, daugiausia CD4+, gamina IL-22, kuris signalizuoja tiesiogiai per savo receptorių, ekspresuojamą vėžio ląstelėse, skatindamos metastazavusios molekulės CD155 ekspresiją.{{ 5}},58,59 Nepaisant gerai ištirtos CD155 raiškos visos vėžio formos ir jos vidinio bei išorinio vaidmens vėžio progresavime54, kelias, atsakingas už CD155 reguliavimą piktybinėse ląstelėse, lieka sunkiai suprantamas.66–68 Mes parodėme, kad IL{{ 15}} padidino CD155 ekspresiją plaučių ir krūties vėžio ląstelių linijose in vitro ir in vivo, o jo konstitucinė ekspresija įgalino metastazes Il22 / pelėse, palyginti su kontrolinėmis ir nepakankamomis ląstelėmis. Padidėjusi CD155 ekspresija naviko plaučių mikroaplinkoje sumažino kostimuliuojančios molekulės CD226 kiekį NK ląstelėse, sumažindama jų lokalizaciją iki metastazių ir IFNg gamybą, o tai koreliavo su didesne naviko našta. Ankstesniuose tyrimuose aptikome IL-22-gaminančių T ląstelių kaupimąsi nesmulkialąstelinės plaučių karcinomos (NSCLC) pacientų navikų mėginiuose.12,48 Įrodėme, kad vėžio ląstelės sukelia NLRP3- priklausoma IL-1b sekrecija, kuri sukelia tokią IL-22 gamybą daugiausia iš Th ląstelių.18 Verta paminėti, kad žmonėms dėl Th ląstelių citokinų profilių skirtumų IL{{ 31}} taip pat indukuojamas Th1 ląstelėse. Galima manyti, kad tai gali susilpninti priešnavikinį imuninį atsaką. Svarbu tai, kad tokie Th1 variantai gali iš dalies paaiškinti vėžio hiperprogresiją aktyvavus T ląsteles po kontrolinio taško blokados.69 Vadovaudamiesi ankstesniais stebėjimais, patvirtinome IL{36}}gaminančių CD4+ ir CD{{38} kaupimąsi. } T ląstelės, bet ir NK1.{40}} ląstelės metastazavusioje nišoje gyvūnų, kuriems buvo sušvirkštas navikas, plaučiuose. Svarbu pažymėti, kad mūsų modeliuose pastebėjome, kad tokių IL-22-gaminančių CD8+ T ląstelių kaupimasis skiriasi nuo padermių. Tačiau, panaikinus IL-22 gamybą visose subrendusiose T ląstelėse, pakako, kad būtų galima apibendrinti poveikį, kurį stebėjome gyvūnams, kuriems trūksta IL-22-.70 Be to, CD4+ T ląstelių perkėlimas į Rag / II22 / pelių pakako plaučių metastazėms sukelti, tiksliai nurodant Th ląstelių, kaip IL šaltinio, vaidmenį -22. Ir atvirkščiai, mūsų ankstesni išvados rodo, kad nepaisant CD8+ T ląstelių kaupimosi naviko mėginiuose, jų indėlis į IL-22 fondą yra nedidelis.48 Bet kokiu atveju tokio CD{53 apibūdinimas. }} IL-22-gaminančios T ląstelės yra būtinos norint atidžiai įvertinti jų priešnavikines ar priešnavikines savybes, nes atsiranda naujų duomenų apie šią subpopuliaciją.71,72 Be to, pagrindinis NK ir NKT ląstelių vaidmuo kontroliuojant naviką yra didesnis už jų vaidmenį. galimas indėlis į metastazių susidarymą per IL-22, kuris buvo pastebėtas Rag / II22 / įvaikintų perkėlimo eksperimente, naudojant gyvūnus, neturinčius subrendusių T ląstelių, bet turinčius funkcines NK ląsteles.37 Šią hipotezę dar labiau patvirtina mūsų išvados apie metastazavimą židiniai, kuriuose NK ląstelių buvo rasta daugiau nei citotoksinių T ląstelių, išryškinant NK ląsteles kaip svarbias naviko kontrolės dalyvius, kai nėra IL-22. Svarbu pažymėti, kad mes sutelkėme dėmesį į IL-22 gamintojus metastazavusiuose židiniuose plaučiuose, bet neatsižvelgėme į jų kilmę, kloniškumą ar pasiskirstymą kraujyje ar limfoidiniuose organuose. Be to, įvairūs IL-22 šaltiniai skatina naviko progresavimą priklausomai nuo konteksto, kurį sąlygoja pleiotropinis šio citokino veikimas. Be to, panašios IL{66}}gaminančios ląstelės įvairiuose skyriuose (plaučių, blužnies ir limfmazgių) gali skirtingai paveikti auglį skatinančius fenotipus arba neveikti, priklausomai nuo konteksto, o tai turės būti toliau tiriama. Vėžio tyrimai ne kartą praneša, kad IL-22 turi įtakos pirminių navikų vystymuisi ir augimui, o galiausiai ir neoplastiniam progresavimui.26,73–76 Ši sąvoka daugiausia pateisinama gebėjimu skatinti vėžinių ląstelių migraciją, invaziją ir kamieniškumą. in vitro ir taip skatinant metastazių susidarymą.76,77 Svarbu tai, kad IL-22 abliacija gali palengvinti imunosupresinę mikroaplinką Kras mutantiniame plaučių karcinomos modelyje.14 Dabartiniame tyrime parodėme, kad padidėjusi metastazavimo našta tiesioginis IL-22 poveikis išplitusioms IL-22RA1+ naviko ląstelėms, dėl ko padidėjo kolonijų augimas. Svarbu tai, kad mūsų duomenys oficialiai neatmeta poveikio ne navikinėms ląstelėms. Giannou ir kt.78 plačiai pabrėžia IL-22 įtaką naviko ląstelių sklaidai dėl vidinio endogeniškai išreikšto IL-22R poveikio.
6 pav. CD226 signalizacija yra būtina IFNg gamybai iš NK ląstelių
Įrodėme, kad Pvr yra vienas iš genų, kurių vėžio ląstelių ekspresija padidėja po gydymo IL-22. Šiame kontekste CD155-trūkumo turinčios ląstelės sudarė keletą metastazių tiek laukinio tipo, tiek Il22 / pelėse, ir, svarbiausia, CD155 pakartotinis įvedimas leido mums atkurti metastazavusį fenotipą. Esminis CD155 vaidmuo vėžio ląstelėse buvo gerai ištirtas ir žinoma, kad jis turi įtakos sėjimui, naviko ląstelių proliferacijai ir migracijai.56,57 Tačiau Pvr ląstelėse nebuvo slopinamas proliferacija ar migracija mūsų rankose ir auglio ląstelių sėjimas. nebuvo paveiktas Il22 / pelėms. Iš pradžių identifikuotas antigeną pristatančiose ląstelėse, CD155 tarnauja kaip išorinis naviko progresavimo promotorius, kuris slopina NK ir T ląstelių funkcijas, prisijungdamas prie CD96 ir TIGIT jų paviršiuje ir skatina CD226 internalizavimą ir sumažinimą. Dėl savo imunosupresinės funkcijos CD155 vėžio ir šeimininko ląstelėse turi metastazavusių savybių ir yra siūlomas kaip kontrolinio taško slopinimo blokados taikinys.61,86 NK ląstelės gauna kostimuliacinį signalą iš antigenus pristatančių ląstelių per CD226. 87 Tačiau per didelis CD226 stimuliavimas naviko mikroaplinkoje sukelia internalizaciją ir degradaciją.63 Tai paprastai neutralizuoja CD96 ir TIGIT, kurie su CD155 jungiasi didesniu afinitetu.58 Įdomu tai, kad žinoma, kad 4T1 ląstelės sukelia CD226 slopinimą infiltruojant naviką. limfocitus ir slopina IFNg gamybą.88 Čia parodėme, kad IL-22 trūkumas išsaugojo CD226 ekspresiją NK ir CD8+ T ląstelėse. Tačiau tik NK ląstelės turėjo žymiai didesnes IFNg gamybos galimybes ir atvirkščiai koreliavo su metastazavusia našta. Įdomu tai, kad TIGIT signalizacijos aktyvinimas mūsų tyrime slopino IFNg gamybą iš CD8+ T, bet ne NK, ląstelių ir nebuvo pakankamas, kad padidėtų metastazavimo našta. Panašiai kitas CD155 receptorius, CD96, nebuvo nei skirtingai reguliuojamas Il22 / pelėse, nei jo slopinimas neužkirto kelio metastazėms, o tai rodo, kad CD155 neslopina NK ląstelių per CD96 mūsų modelyje. Tai pabrėžia specifinį ląstelių tipui CD155 ir įvairių jo surišimo partnerių priešnavikinių atsakų reguliavimą.
cistanche papildo privalumai – kaip stiprinti imuninę sistemą
Spustelėkite čia norėdami pamatyti Cistanche Enhance Immunity produktus
【Klauskite daugiau】 El. paštas:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Nustatyta CD155 įtaka prognozei ir jo vaidmeniui plaučių, krūties, storosios žarnos ir kitų vėžio tipų patogenezėje.79–85 Yra daug įrodymų apie IL-22 ir su juo susijusių genų prognostinę reikšmę. įvairiuose vėžio subjektuose.10,21,27,75,89–91 Tačiau kai kurie tyrimai neparodė jokios IL-22 raiškos įtakos išgyvenamumui.12 Nors šie neatitikimai gali atsirasti dėl heterogeniškumo pacientų populiacijos, mėginių ėmimo ir ataskaitų teikimo problemos, daugelis šių tyrimų sutelkia dėmesį į vieną geną, susijusį su IL-22 signalizavimu. Čia mes panaudojome aglomeracinį grupavimą, kad išsiaiškintume IL22RA1, IL22RA2, IL10RB ir PVR ekspresijos modelius LUAD ir BRCA grupėse TCGA ir susietume jas su klinikiniais duomenimis. Čia mes nustatėme tris šių genų ekspresijos modelius: 0 modelį (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), 1 modelį (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) ir 2 modelį (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Mes nustatėme, kad aukšta IL22RA1 ekspresija sutapo su didele PVR ekspresija, o tai taip pat lėmė prastus bendrus išgyvenamumo rezultatus, ypač pacientams, kuriems diagnozuota ankstyva (I ir II), bet ne pažengusi (III ir IV), patologinės stadijos. specifinis šio mechanizmo vaidmuo. Ir atvirkščiai, didelė IL22RA2, dar vadinama IL-22BP, ekspresija buvo koreliuojama su mažesne PVR ekspresija ir geresniu išgyvenimu.18,34 Trečiasis modelis atitiko visiškai žemą ekspresiją ir reiškė imunologiškai šaltus navikus.92 Taip pat. CIBERSORTx dekonvoliucija parodė, kad 1 klasteris, pasižymintis aukšta IL22RA2 ekspresija, turi aktyvuotų, bet ne ramybės būsenos NK ląstelių geno parašą, palyginti su kitomis grupėmis. Įrodyta, kad CD226 ekspresija suskirsto pacientus pagal rezultatus keliuose NSCLC klinikiniuose tyrimuose.93 Tačiau dėl dvejopo CD226 reguliavimo prieš ir po transliacijos raiška ne visada atsispindi mRNR sekos nustatymo duomenyse.94 Taigi tyrimai, kuriuose pagrindinis dėmesys skiriamas apie CD226 potransliacinį reguliavimą įvertinkite jo ekspresiją klinikiniuose mėginiuose, naudodami dažymą antikūnais.63 Vis dėlto, tiriant TCGA duomenų rinkinį apie CD155 surišančių partnerių ryšį su išgyvenimu, tik CD226 prognozė buvo geresnė (log (HR) {{57) }}.24, p=0.06), tuo tarpu TIGIT ir CD96 neparodė jokio ryšio su išgyvenimu. Svarbu tai, kad naviko ląstelės, sukurtos išskirti IL-22BP, suformavo mažiau metastazių, išryškindamos IL-22 kelio potencialą tikslinei terapinei intervencijai. Tai galėtų neutralizuoti auglio CD155 per didelę ekspresiją, nes tiesioginis nukreipimas į jį tebėra sudėtingas dėl sudėtingo bendro receptorių tinklo. Dar reikia pažymėti, kad ilgalaikis IL-22 neutralizavimo poveikis metastazėms nėra žinomas, tačiau gali turėti tiesioginės įtakos terapiniam T ląstelių vertinimui arba pateikti IL-22 neutralizavimo, naudojant antikūnus su naudingas saugumo profilis, pvz., fezakinumabas (tyrimas NCT01941537) arba sukurtas IL-22 su struktūra pagrįstu dizainu.39,95 Apibendrinant, nustatėme, kad IL-22-sukelta CD155 per didelė ekspresija naviko ląstelėse yra mechanizmas, naudingas metastazavusiam augimui. Šis esminis vaidmuo prognozuojant pabrėžė IL-22, kaip vėžio gydymo taikinio, potencialą. Iki šiol IL-22 neutralizavimas siūlomas daugiausia kaip autoimuninių ligų gydymo strategija.31,49 Mūsų duomenys apie IL-22BP kaip IL-22 neutralizatorių, kuris nukopijavo visuotinis IL-22 trūkumas, sustiprino terapinį potencialą nukreipti į IL-22-IL-22R1 ašį ir turėtų būti toliau tiriamas atliekant ikiklinikinius ir klinikinius tyrimus.
NUORODOS
1. Hanahan, D. ir Weinberg, RA (2011). Vėžio požymiai: nauja karta. Ląstelė 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massagu', J. ir Obenauf, AC (2016). Metastazavusi kolonizacija cirkuliuojančiomis naviko ląstelėmis. Gamta 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK ir Kroemer, A. (2014). KLRG1(+) natūralios žudikų ląstelės apsaugo nuo metastazavusios plaučių ligos imuninės sistemos pagalba. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S. ir Pantel, K. (2017). Cirkuliuojančios ir išplitusios naviko ląstelės – imuninės priežiūros ir pabėgimo mechanizmai. Nat. Kunigas Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA ir Kobold, S. (2021). Interleukinai sergant vėžiu: nuo biologijos iki terapijos. Nat. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ ir Pollard, JW (2015). Imuninių ląstelių metastazių skatinimas. Nat. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J. ir Bruni, D. (2020). Naviko imunologija ir naviko evoliucija: susipynusios istorijos. Imunitetas 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD ir kt. (2018). Tarptautinis sutarimo „Imunoscore“ gaubtinės žarnos vėžio klasifikavimo patvirtinimas: prognostinis ir tikslumo tyrimas. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. ir Wei, S. (2017). IL-22 skatina krūties vėžio progresavimą reguliuodamas HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S. . ir kt. (2014). IL-22(+) CD4(+) T ląstelės skatina gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio kamieną, aktyvindamos STAT3 transkripcijos faktorių ir indukdamos metiltransferazę DOT1L. Imunitetas 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X. ir Sun, B. (2011). Interleukinas -22 skatina žmogaus kepenų ląstelių karcinomą aktyvuodamas STAT3. Hepatologija 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ viršutinis, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heideggeris, S. ir kt. (2013). Interleukinas -22 dažnai pasireiškia mažų ir didelių ląstelių plaučių vėžiu ir skatina chemoterapijai atsparių vėžio ląstelių augimą. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K. ir Diefenbach, A. (2018). Laimikis-22: interleukinas-22 ir vėžys. Euras. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, ir kt. (2018). IL22 skatina Kras mutantinį plaučių vėžį, sukeldamas protumoro imuninį atsaką ir apsaugodamas kamienines savybes. Vėžio imunolis. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B ir Yin, C. (2019). MiR-486-5p slopina IL-22- sukeltą krūties vėžio ląstelių epitelio-mezenchiminį perėjimą, slopindamas Dock1. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC ir Choi, HS (2014). Interleukinas -22 skatina epitelio ląstelių transformaciją ir krūties navikų atsiradimą aktyvindamas MAP3K8. Kancerogenezė 35, 1352–1361. https://doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S. ir Beaman, KD (2020). Interleukinas-22 skatina piktybinių pakitimų vystymąsi spontaniško krūties vėžio pelių modelyje. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ ir kt. (2012). IL-22BP reguliuoja uždegimas ir moduliuoja naviko atsiradimą žarnyne. Gamta 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., ir kt. (2020). TGFbeta signalizacija Th17 ląstelėse skatina IL-22 gamybą ir su kolitu susijusį gaubtinės žarnos vėžį. Nat. Komun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H. ir Bruns, F. (2012). Langerhanso ląstelių kaukolės pagrindo histiocitozė: ar mažos dozės radioterapija veiksminga? Byla Rep. Oncol. Med. 2012 m., 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T. ir kt. (2012). Padidėjęs intratumorinis IL-22- gaminančių CD4(+) T ląstelių ir Th22 ląstelių kiekis koreliuoja su skrandžio vėžio progresavimu ir prognozuoja prastą paciento išgyvenamumą. Vėžio imunolis. Imunitetas. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s{11}}.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. ir Zhang, H. (2018). T-pagalbininkų 22 ląstelių, interleukino-22 ir mieloidinių supresorių ląstelių kaupimasis skatina skrandžio vėžio progresavimą vyresnio amžiaus pacientams. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.{12}}.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA ir Mahmoudi, M. (2018). Th22, Th17 ir CD4(+) ląstelių, kurios kartu gamina IL-17/IL-22 skirtingose žmogaus gaubtinės žarnos vėžio stadijose, analizė. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y . ir kt. (2020). Intratumorinės IL22-gaminančios ląstelės apibrėžia imunoevazinio potipio raumenis invazinį šlapimo pūslės vėžį (2017). Apsauginė IL-22BP funkcija išemijos-reperfuzijos ir acetaminofeno sukelto kepenų pažeidimo atveju. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L . ir Sun, B. (2013). IL-22 yra susijęs su žmogaus gaubtinės žarnos vėžio vystymusi aktyvinant STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J . ir kt. (2014). IL-22, kurį gamina su vėžiu susiję fibroblastai, skatina skrandžio vėžio ląstelių invaziją per STAT3 ir ERK signalizaciją. Br. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N . ir kt. (2012). Padidėjęs cirkuliuojančių Th22 ir Th17 ląstelių kiekis yra susijęs su naviko progresavimu ir paciento išgyvenimu sergant žmogaus skrandžio vėžiu. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringgressi, MN, Pini, A. . ir kt. (2016). Vidaus naviko IFN gama gaminančios Th22 ląstelės koreliuoja su TNM stadija ir blogiausiais kasos vėžio rezultatais. Clin. Sci. 130, 247–258. https:// doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. ir Wang, H. (2014). Padidėjęs intratumorinis interleukino 22 lygis ir interleukiną 22-gaminančių CD4+ T ląstelių dažnis koreliuoja su kasos vėžio progresavimu. Kasa 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.{10}}.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnichenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP ir Pestka, S. (2001). Funkcinio interleukino-22 (IL-22) receptorių komplekso identifikavimas: IL-10R2 grandinė (IL-10Rbeta) yra bendra abiejų IL{{7 }} ir IL-22 (IL- 10-susijęs su T ląstelėmis indukuojamas faktorius, IL-TIF) receptorių kompleksai. J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. ir O'Garra, A. (2019). IL-10 Šeimos citokinai IL-10 ir IL- 22: nuo pagrindinių mokslų iki klinikinio vertimo. Imunitetas 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M. ir kt. (2020). IL22BP tarpininkauja priešnavikiniam limfotoksino poveikiui nuo gaubtinės ir tiesiosios žarnos navikų pelėms ir žmonėms. Gastroenterologija 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnichenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP ir Pestka, S. (2001). Naujo tirpaus receptoriaus, kuris jungiasi su IL-22 ir neutralizuoja jo aktyvumą, identifikavimas, klonavimas ir apibūdinimas. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM ir van den Brink, MRM (2015). Interleukinas{2}}: imunobiologija ir patologija. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K. ir Sabat, R. (2004). IL-22 padidina įgimtą audinių imunitetą. Imunitetas 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. ir Wolk, K. (2014). IL-22-IL-22R1 sistemos terapinės galimybės. Nat. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. ir Flavell, RA (2008). Įgimtas ir prisitaikantis interleukinas{2}} apsaugo peles nuo uždegiminės žarnyno ligos. Imunitetas 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F. ir kt. (2019). Interleukinas{2}} apsaugo žarnyno kamienines ląsteles nuo genotoksinio streso. Gamta 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM ir Garcia, KC (2021). Audinius apsaugines interleukino-22 funkcijas galima atsieti nuo uždegimą skatinančių veiksmų, naudojant struktūra pagrįstą dizainą. Imunitetas 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. ir Renauld, JC (2000). IL-10-susijusio su T ląstelėmis indukuojamo faktoriaus (IL-TIF), naujo citokino, struktūriškai giminingo IL-10 ir indukuojamo IL-9, klonavimas ir apibūdinimas. J. Immunol. 164, 1814–1819 m. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ ir Renauld, JC (2002). Interleukinas-22 (IL-22) aktyvina JAK/STAT, ERK, JNK ir p38 MAP kinazės kelius žiurkės hepatomos ląstelių linijoje. Keliai, kurie bendrinami su IL ir skiriasi nuo IL-10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S. ir de Waal Malefyt, R. (2004). Interleukinas-22 aktyvuoja STAT3 ir indukuoja IL-10 gaubtinės žarnos epitelio ląstelėse. Tarpt. Imunofarmakolas. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK ir Raychaudhuri, SP (2012). IL-22-sukeltas ląstelių proliferaciją reguliuoja PI3K/Akt/mTOR signalizacijos kaskada. Citokinas 60, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J. ir M€ uhl, H. (2013). IFNalpha paverčia IL-22 citokinu, efektyviai aktyvuojančiu STAT1 ir jo pasroviui taikinius. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ ir Ouyang , W. (2008). Interleukinas{2}} tarpininkauja ankstyvoje šeimininko gynyboje nuo prisitvirtinančių ir pašalinančių bakterinių patogenų. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A. ir kt. (2005). Interleukinas-22, IL-10 pošeimos narys, sukelia storosios žarnos subepitelinių miofibroblastų uždegiminius atsakus. Gastroenterologija 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL ir kt. (2016). Plaučių vėžiu ir kitomis plaučių ligomis sergančių pacientų interleukino -22 kiekis yra padidėjęs. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., ir kt. (2017). Vėžio ląstelės skatina interleukino{2}} gamybą iš atminties CD4(+) T ląstelių per interleukiną-1, kad paskatintų naviko augimą. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.{11}}.
49. Markota, A., Endres, S. ir Kobold, S. (2018). Interleukino{2}} taikymas vėžio gydymui. Hum. Vakcina. Imunitetas. 14 d., 2012–2015 m. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. ir Ehrke, MJ (2005). Tolima metastazė iš poodinės E0771 medulinės krūties adenokarcinomos. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K. ir Stock, CC (1952). Naviko spektro tyrimai. I. Metil-bis(2-chloretil)amino ir 3-bis(2-chloroetil)aminometil-4-metoksimetil-5-hidroksi{{7} veikimo palyginimas }metilpiridinas dėl įvairių pelių ir žiurkių navikų augimo. Vėžys 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P. ir Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: paprastas, greitas būdas imuniniu būdu pažymėti didelius audinių mėginius tūrio vaizdavimui. Ląstelė 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E. ir kt.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY ir Smyth, MJ (2020). CD1 naviko vidinės ir išorinės imuninės funkcijos
55. Seminas. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. ir Paolini, R. (2020). CD155: daugiafunkcė naviko progresavimo molekulė. Tarpt. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. ir Zhao, C. (2017). CD155, onkoimunologinė molekulė žmogaus navikuose. Cancer Sci. 108, 1934–1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y. ir Imai, T. ( 2008). Vėžinių ląstelių sąveika su trombocitais, tarpininkaujant Necl-5/polioviruso receptoriams, padidina vėžio ląstelių metastazes į plaučius. Onkogenas 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM ir Smyth, MJ (2014). Receptoriai CD96 ir CD226 priešinasi vienas kitam reguliuodami natūralių žudikų ląstelių funkcijas. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS ir Colonna, M. (2004). Pažangiausias kraštas: CD96 (lytėjimo) skatina NK ląstelių tikslinių ląstelių adheziją, sąveikaudamas su poliomielito viruso receptoriumi (CD155). J. Immunol. 172, 3994–3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. ir Busch, DH (2022). ChipCytometry, skirtas multipleksiniam baltymų ir mRNR žymenų aptikimui žmogaus FFPE audinių mėginiuose. STAR protokolas. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., ir kt. (2020). IL15 stimuliavimas su TIGIT blokada panaikina CD155-sukeliamą NK ląstelių disfunkciją sergant melanoma. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie', N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G. ir kt. (2020). Nuo emų priklausomas kartu aktyvuojančio receptoriaus CD226 praradimas riboja CD8(+) T ląstelių priešnavikines funkcijas ir riboja vėžio imunoterapijos veiksmingumą. Imunitetas 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.06.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., ir kt. (2020). CD155 ant naviko ląstelių skatina atsparumą imunoterapijai, skatindamas CD8(+) T ląstelių aktyvuojančio receptoriaus CD226 degradaciją. Imunitetas 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, ir kt. (2020). Naviko CD155 ekspresija yra susijusi su atsparumu antiPD1 imunoterapijai esant metastazavusiai melanomai. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D. ir kt. (2019). Ląstelių tipo gausos ir ekspresijos nustatymas iš masinių audinių naudojant skaitmeninę citometriją. Nat. Biotechnol. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., ir kt. (2009). Nuo ATM-ATR priklausomas daugybinės mielomos ląstelių DNR -1 ir NKG2D ligandų reguliavimas terapiniais preparatais padidina NK ląstelių jautrumą ir yra susijęs su senstančiu fenotipu. Blood 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.