Apsauginis Cistanche bendrojo glikozidų poveikis pelių miokardo toksiškumui, kurį sukelia adriamicinas

Daugiau informacijos:ali.ma@wecistanche.com

Julija Yiming

[Projektas, remiamas Sindziango Uigūro autonominio regiono mokslo ir technologijų komisijos Gamtos mokslų fondo (96814)]

[Autoriaus profilis Eliya Yiming (1964-), moteris (uigūras), meistrė. Lektorius, Tyrimo kryptis: Širdies ir kraujagyslių farmakologija. ],

Wang Xiaowen, Wang Xuefei, Heiliman Yilahong 2, Xie Yaoyun 2, Du Niansheng 3

(Sindziango medicinos universitetas|Farmakologijos katedra, Farmacijos mokykla, Elektroninės mikroskopijos katedra, Pagrindinių medicinos mokslų mokykla, Natūralių vaistų chemijos katedra, Farmacijos mokykla, Urumčis 830054, Sindziangas)

Santrauka:Ištirti apsauginį poveikį ir mechanizmąCistanche glikozidai(GC) dėl doksorubicino (Dox) sukelto pelių miokardo pažeidimo. Fang Xie: Miokardo superoksido dismutazės (SOD) aktyvumui nustatyti buvo naudojamas ūminio miokardo pažeidimo, kurį sukėlė intraperitoninė Dox (17,5 mg/kg) injekcija NIH pelėms, modelis; seleno-glutationo peroksidazės (Se-GSH-Px) aktyvumas; malondialdehidas (MDA) turi serumo kreatinfosfokinazės (CPK) aktyvumo. Elektroninė mikroskopija tiria kardiomiocitų ultrastruktūrinius pokyčius. Rezultatai: praėjus 48 valandoms po intraperitoninės Dox injekcijos, pelių miokardas gali smarkiai pakenkti. Sumažėjo miokardo SOD ir Se-GSH-Px aktyvumas, padidėjo MDA kiekis, padidėjo CPK aktyvumas serume, buvo pažeista miokardo audinio ultrastruktūra. Cistanche glikozidai(62,5, 125.{3}}, 25 0,0 mg/kg)gali padidinti miokardo SOD, Se-GSH-Px aktyvumą. Sumažinkite MDA kiekį ir sumažinkite CPK išsiskyrimą. Sumažinti miokardo ultrastruktūros pažeidimus.Jie Leng: Cistanche bendrieji glikozidaituri tam tikrą apsauginį poveikį nuo doksorubicino sukelto miokardo pažeidimo. Jo mechanizmas gali būti susijęs su jo apsauga nuo miokardo SOD ir Se-GSH-Px aktyvumo, laisvųjų radikalų pašalinimu ir lipidų peroksidacijos prevencija.

Raktažodžiai: doksorubicinas; bendras cistanche glikozidas; kardiotoksiškumas; lipidų peroksidacija; kreatino kinazė; ultrastruktūra

Doksorubicinas (Dox) yra svogūnų antibiotikas, gerai veikiantis įvairius piktybinius navikus, tačiau dėl ūminio ir lėtinio toksiškumo miokardui riboja platų Dox taikymą klinikinėje praktikoje. Yra žinoma, kad Dox priešnavikinis poveikis turi įtakos DNR replikacijai ir RNR sintezei, o jo kardiotoksiškumas yra susijęs su lipidų peroksidacijos pažeidimu, kurį sukelia pusiau adriamicinas. Todėl svarbu rasti laisvųjų radikalų gaudytojų ir antioksidantų, kurie stabdytų Dox kardiotoksiškumą, išlaikant jo priešnavikinį aktyvumą. Iš visoekstraktai iš Cistancheyra veikliosios medžiagos, išgautos išCistanche. Atitinkami tyrimai parodė, kad Cistanche glikozidai turi antioksidacinį poveikį pelių audiniams, Cistanche glikozidaigali žymiai sumažinti lipofuscino kiekį (3), Cistanche glikozidaituri apsauginį poveikį nuo žiurkių miokardo išemijos(3) ir Cistanche glikozidaituri antilipidų peroksidaciją ir antiradiacinį poveikį. Ištirti apsauginį poveikį ir mechanizmą Cistanche glikozidaiapie Dox sukeltą pelių miokardo pažeidimą.

Spustelėkite, kad sužinotumėte apie Cistanche tubulosa privalumus ir šalutinius poveikius

1 Medžiaga ir metodai

1.1 Vaistai ir reagentai

Cistanche glikozidaiyra išgauti išCistanche žolėšiauriniame Sindziange, o pagrindinės sudedamosios dalys yra ežiuolė, skalsių etoksilatai ir kt. (pateikiama Sindziango medicinos universiteto Farmacijos mokyklos Natūralios medicinos chemijos katedros); tetrametoksipropanas (TMP Sigma Company); Adriamicinas (Dox, Zhejiang Hisun Pharmaceutical Co., Ltd.); Vitaminas E (Vit E, Šanchajaus Yan'an farmacijos fabrikas); kiti reagentai gaminami šalies viduje.

1.2 Eksperimentinė įranga

721 tipo spektrofotometras (Šanchajaus Nr. 3 analitinių prietaisų gamykla); OLYMPUS mikroskopas (pagamintas Japonijoje); JEM-100CXII perdavimo elektronų mikroskopas (pagamintas Japonijoje)? PHS-250 tipo rūgštingumo matuoklis (Šanchajaus Lei magnetinių instrumentų gamykla).

1.3 Gyvūnų grupavimas ir administravimas

NIH peles teikia Sindziango endeminių ligų instituto gyvūnų eksperimentinis centras. Medicininio laboratorinio gyvūno sertifikato numeris yra Nr. {{0}}. Buvo atrinktos 138 NIH pelės, sveriančios (24±2) g, pusė patinų ir pusė patelių. Atsitiktinai suskirstyta į 6 grupes (po 23 kiekvienoje grupėje): (1) kontrolinė grupė: normalus fiziologinis tirpalas (NS) 20 ml/kg; (2) Dox traumų grupė: NS 20 ml/kg; (3) Vit E grupė: Vit E 100 mg/kg; (4) GCs i grupė: GC 62,5 mg/kg; (5) GCs i grupė: GC 125,0 mg/kg; (6) GCS1 grupė: GC 25,0 mg/kg, kiekviena iš pirmiau minėtų grupių Visos buvo skiriamos į skrandį vieną kartą per dieną. Dox traumų grupė, Vit E grupė, GC|grupė, GCs I grupė, GCs I grupė į pilvaplėvės ertmę buvo suleisti Dox 17. 5 mg/kg 4 dieną po NS ir GC suleidimo 48 valandas, buvo paimti akių obuoliai ir paimtas kraujas, paruoštas serumas ir nedelsiant. gyvūnai buvo paaukoti, kad būtų išimta širdis, nuplauti NS, nusausinti filtravimo popieriumi ir pasverti. Povandeninės vonios sąlygomis miokardo homogenatas buvo paruoštas su NS, centrifuguojamas 3 500 aps./min., 30 min., o supernatantas buvo paimtas biocheminiams rodikliams matuoti. Kiekvienoje grupėje buvo 3 pelės, o širdys buvo paimtos elektroninio mikroskopo mėginiams gaminti.

1.4 Biocheminių rodiklių nustatymas

Miokardo superoksido dismutazės (SOD) aktyvumui nustatyti taikytas pirogalolio autoksidacijos metodas; miokardo seleno-glutationo peroksidazės (Se-GSH-Px) aktyvumui nustatyti naudotas DTNB metodas. Miokardo lipidų peroksidacijos produkto malondialdehido (MDA) kiekiui nustatyti naudoti TBA metodą; Baltymų kiekybiniam įvertinimui naudojamas CBB-SDS metodas, vadinamas CPK metodu, siekiant nustatyti kreatinfosfokinazės (CPK) aktyvumą serume.

1.5 Miokardo audinio elektroninė mikroskopija

Širdies viršūnė buvo fiksuota 4 procentais glutaraldehido ir 1 procento rūgšties, dehidratuota acetonu, įterpta į Epon 812 ir stebima per perdavimo elektronų mikroskopą, dažant švino-urano elektronais JEM-100CX I.

1.6 Statistinis apdorojimas

Visus duomenis atstovauja Wang Shi s. Išbandžius eksperimentinių duomenų dispersijos homogeniškumą, statistiniam apdorojimui naudojami F testas ir q testas. Patikrinimo lygis a=0.05.

2 rezultatai

2.1 PoveikisCistanche glikozidaiDox pažeisto miokardo biocheminiai rodikliai pateikti 1 lentelėje.

2. 1- 1 PoveikisCistanche glikozidaiapie Dox pažeisto miokardo SOD aktyvumą.

Palyginti su kontroline grupe, Dox traumos grupė sumažino miokardo SOD aktyvumą 41,1 proc. (PV0.01). Palyginti su Dox traumų grupe, jis padidėjo 30,9 proc., 33,2 proc., 36,5 proc. ir 34,9 proc.<0.01), the="" gcs1="" group="" was="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0.05), o likusios grupės buvo mažesnės nei kontrolinės grupės.

2.1.2 GC poveikis Dox pažeistam miokardo Se-GSH-Px aktyvumui.

Palyginti su kontroline grupe, Dox traumos grupėje miokardo Se-GSH-Px aktyvumas sumažėjo 26,2 proc.<0.01), gcs,="" gcs,="" compared="" with="" the="" dox="" injury="" group,="" the="" gcs,="" group,="" and="" vit="" e="" group="" increased="" by="" 19.2%,="" 21.1%,="" 25.0%,="" and="" 26.1%="" respectively=""><0.01), which="" were="" all="" close="" to="" the="" control="" group="" (p="">0 . 05).

2.1.3 PoveikisCistanche glikozidai on the MDA content of the Dox-injured myocardium was reduced by 16.7%, 17.3%, 18.6%, and 17.3% respectively compared with the Dox-injured group (Fall V0.01), which were all close to the Control group (P>0.05).

2.1.4 GC poveikis serumo CPK aktyvumui Dox sužeistose pelėse.

Serumo CPK aktyvumas Dox traumų grupėje padidėjo 87,3 proc.<0.01),>Cistanche glikozidai I, Cistanche glikozidaigrupė, ir Vit Palyginti su Dox traumų grupe, E grupė sumažėjo 26,6 proc., 33,1 proc., 37,4 proc. ir 36,7 proc. (visi F<0.01), which="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" control="">

2.2 Pelės miokardo elektroninė mikroskopija

2.2.1 Kontrolinėje grupėje miokardo skaidulų sarkoma buvo nepažeista, miofibrilės išsidėsčiusios tvarkingai, sarkomerų juostos buvo aiškios struktūros, mitochondrijos tvarkingai išsidėsčiusios, struktūra normali, branduolio struktūra normali.

2.2.2 Dox traumų grupė

Matyti, kad yra akivaizdūs miokardo skaidulų ultrastruktūros pokyčiai, paburksta miokardo ląstelės, auga intracitoplazminis sarkomeras, platėja ryški juosta, kai kuriose vietose atsiranda nenormalių susitraukimų juostų, padaugėja Z linijos medžiagos. Mitochondrijos buvo difuziškai patinusios, hiperplastinės, retai išsidėsčiusios, sulaužytos ir vakuolizuotos. Plečiasi sarkoplazminis tinklas, padaugėja antrinių lizosomų, matyti židinio degeneracija. Padidėja branduolio tūris ir plečiasi perinuklearinė erdvė.

2. 2.3 Miokardo skaidulų patinimas Cistanche glikozidaiI grupė buvo sumažinta.

Sarkomero struktūra iš esmės yra normali, tačiau sarkomeras vis tiek platesnis nei kontrolinė grupė. Sumažėjo mitochondrijų patinimas, padidintas matricos tankis, padidėjęs mitochondrijų tankis, o atskiros mitochondrijos vis dar pasikeitė. Padidėja antrinės lizosomos citoplazmoje.

2.2.4 Miokardo skaidulų struktūra Cistanche glikozidaiAš, aš grupė iš esmės atsigavo normaliai.

Miofibrilės išsidėsčiusios tvarkingai, sarkomero struktūra normali, o mitochondrijų struktūra normalizuojamas.

3 Diskusija

Dox yra svogūnų antibiotikas, turintis platų priešnavikinį spektrą ir stiprų poveikį. Tačiau Dox gali sukelti sunkų toksinį poveikį miokardui, pvz., įvairias aritmijas ankstyvoje gydymo stadijoje, priklausomą nuo dozės ir stazinį širdies nepakankamumą vėlyvoje stadijoje, o tai riboja jo klinikinį taikymą. Pagrindinis Dox mechanizmas, sukeliantis toksinį poveikį miokardui, yra per didelis reaktyvių deguonies laisvųjų radikalų, sukeliančių miokardo pažeidimą, gamyba. Dox afinitetas su miokardo audiniu yra žymiai didesnis nei kitų audinių. Patekęs į miokardo ląsteles, Dox virsta pusiau doksu, kuris veikia deguonies molekules, paversdamas jas superoksido anijonų laisvaisiais radikalais (Oxid), lydi vandenilio peroksido (H2O2) gamyba. Ol ir H2O2 MDA kiekis Haber-Weiss Dox traumų grupėje padidėjo 25,8 proc., palyginti su kontroline grupe (P<0.01), and="" the="">Cistanche glikozidai |, Cistanche glikozidai 1, Cistanche glikozidai group, and Vit E group were reduced by 16.7% compared with the Dox injury group. , 17. 3%, 18. 6% and 17. 3% (Fall V0.01), which are all close to the control group (P>{{0}}.05). Reakcijos arba Fentono reakcijos metu susidaro hidroksilo radikalai (OH • ). 0$ ir OH • Didelis kaupimosi kiekis gali sukelti lipidų peroksidaciją audiniuose ir ląstelių membranose bei pažeisti biologines makromolekules.

Eksperimento metu buvo pastebėta, kad po 48 valandų intraperitoninės Dox (17,5 mg/kg) injekcijos pelėms SOD ir Se-GSH-Px aktyvumas pelių miokarde žymiai sumažėjo, o lipidų peroksidacijos produkto kiekis. MDA žymiai padidėjo. Didelis, serumo CPK aktyvumas didėja. Elektroniniu mikroskopu buvo pažeista širdies raumens ultrastruktūra, pasireiškusi akivaizdžiu mitochondrijų pabrinkimu, mitochondrijų plyšimu, vakuolių degeneracija, matricos tankio sumažėjimu, sarkoplazminio tinklo išsiplėtimu.

Visos GC dozių grupės gali žymiai padidinti laisvuosius radikalus šalinančių fermentų SOD ir Se-GSH-Px aktyvumą Dox pažeistų pelių širdies raumenyje, sumažinti MDA kiekį ir sumažinti CPK išsiskyrimą. Siūloma, kadCistanche glikozidai gali sumažinti Dox sukeltą lipidų peroksidacijos žalą, padidindamas laisvuosius radikalus sulaikančių fermentų aktyvumą organizme. Cistanche glikozidai, grupės žymiai apsaugo miokardo skaidulų ultrastruktūrą nuo Dox pažeidimo.Aptikta in vitro naudojant šiuolaikinę chemiliuminescencinės analizės technologiją ir nustatė, kadCistanche glikozidaigali būti veiksmingai pašalintos. Tinkami tik aktyvūs deguonies radikalai, tokie kaip OH • ir H2O2. Gangliono sugeriantis poveikis yra ypač reikšmingas "⑵. Manoma, kad Cistanche glikozidai gali išvalyti miokardo pusiau dokso sukeltą OR, taip nutraukdami grandininę laisvųjų radikalų reakciją ir blokuodami lipidų peroksidacijos grandinę.

Šiame eksperimente vitaminas E buvo naudojamas kaip teigiama kontrolė. Rezultatai parodė, kad vitaminas E turi tam tikrą apsauginį poveikį nuo Dox sukelto ūminio pelių miokardo pažeidimo. Jis gali sumažinti miokardo MDA kiekį ir padidinti SOD bei Se-GSH-Px aktyvumą. Remiantis literatūra [13], ataskaitos yra nuoseklios.

Pagrindinis komponentas Cistanche glikozidaiyra fenetilaminas, o jo struktūra panaši į Vit E, tai yra, turi fenolio hidroksilo grupę ir hidroksilo grupę. Todėl spėjama, kad Cistanche glikozidaigali pateikti savo molekulinės struktūros fenolio hidroksilo grupės vandenilio atomus lipidų radikalui (LOO -), kuris paverčia jį lipo hidroperoksidu (LOOH), kuris vėliau GSH-Px suskaidomas į netoksišką hidroksilą. Jis apsaugo nuo nesočiųjų riebalų rūgščių peroksidacijos bioplėvelėje laisvųjų radikalų, taip sumažindamas Dox žalą kardiomiocitams. Mechanizmas dar turi būti nuodugniai ištirtas.

Nuorodos:

[1]Baser RL, Green MD. Gydymo komplikacija: antraciklinų kardiotoksiškumo prevencijos strategijos [J]. Cancer Tread Rer, 1993,19; 57.

[2]Doroshow JH. Antraciklino antibiotikų poveikis deguonies radikalų susidarymui žiurkėse, girdimas [J] Cancer Res, 1983, 43; 460.

[3] Wang Xiaowen, Li Linlin, Mu Hu Yati ir kt. Antioksidacinis Roxuanrong poveikis pelių audiniams]·Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1998, 23(9):554-556.

[4] Mao Xinming, Wang Xiaowen, Li Linlin ir kt. Apsauginis Rou Nu Rong Xi poveikis žiurkių miokardo išemijai □], Chinese Herbal Medicine, 1999, 30(2): 118-120.

[5] Li Linlin, Wang Xiaowen, Wang Xuefei ir kt. Bendros mėsos pelenų pastos antilipidų peroksidacija ir antiradiacinis poveikis [J]. Chinese Journal of Chinese Materia Medica, 1997, 22(6): 364-367.

[6] Zou Guolin, Gui Xingfen, Zhong Xiaoling ir kt. SOD nustatymo metodas – pirogalolio savaiminio oksidacijos metodo tobulinimas [J]. Biochemijos ir biofizikos pažanga, 1986, 4:17,

[7] Xia Yiming, Zhu Lianzhen. Glutationo peroksidazės aktyvumo kraujyje ir audiniuose nustatymas. Method one DTNB tiesioginis metodas [J], Hygiene Research, 1987, 16(4): 29-32.

[8] Chen Shunzhi, Jin Youyu. Trijų lipidų peroksido TBA spalvos kūrimo metodų palyginimas. Klinikinių laboratorijų mokslo žurnalas. 1984, 2(4); 8-10.

[9]Macart M♦ Gerbaut L. Coomassie mėlynojo dažų surišimo metodo patobulinimas, užtikrinantis gerą jautrumą varas baltymams: taikymas smegenų skystyje [J ], Clin Chem Acta, 1982, 112:93.

[10] Xu Shuyunas, Bian Ruyuan, Chen Xiu, Farmakologinio eksperimento metodika [M]. 2-asis leidimas, Pekinas: Liaudies medicinos leidykla, 1991.922.

[11]Halliwell B, Gutteridge JMC. Laisvieji radikalai biologijoje ir medicinoje CM J. 2nd ed. New York Oxford University Press * 1989.543-550.

L12] Wang Xiaowen, Jiang Xiaoyan, Eliya Yiming ir kt. Laisvųjų radikalų šalinimas ir apsauginis poveikis DNR pažeidimams, kuriuos sukelia OH -[J]. Kinijos farmacijos žurnalas, 2001, 36(1):29 -31.

[13]Wu Yuling, Xu Guangyuan. Eksperimentinis tyrimas dėl ūminio kardiotoksiškumo ir Vit E apsauginio poveikio pelėms, sukeltas adriamicino [J]. Daliano medicinos universiteto žurnalas, 1991, 13(1): 22-27.