Cistanches Herba vandeninio ekstrakto poveikis kaulų praradimui žiurkėms, kurių kiaušidės pašalintos

Susisiekite: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Haidong Liang 1,*, Fang Yu 2, Zhihong Tong 1 ir Zaiguo Huang 3

1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn

2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn

3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com

Santrauka:Siekiant įvertinti tradicinės kinų medicinos Cistanches Herba ekstrakto (CHE) gebėjimą užkirsti kelią kaulų retėjimui žiurkėms, kurioms pašalinta kiaušialąstė (OVX), Cistanches Herba ekstraktas (CHE) buvo skiriamas žiurkėms į skrandį. Žiurkių patelės buvo anestezuotos natrio pentobarbitaliu (40 mg kg-1, ip), o jų kiaušidės buvo pašalintos abipusiai. Grupės žiurkėms, kurioms buvo atlikta fiktyvi operacija, buvo atlikta anestezija, atlikta laparotomija ir susiūtos jų nepašalinus kiaušidžių. Po 1 savaitės atsigavimo po operacijos OVX žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į tris grupes ir 3 mėnesius buvo gydomos H2O (OVX grupė) arba CHE (100 arba 200 mg kg-1 per parą). Apgaulingai operuota grupė (n=8) buvo gydoma per burną H2O. Po 3 mėnesių buvo ištirtas bendras kaulų mineralų tankis (KMT), kaulų mineralų kiekis (KMC), kaulų biomechaninis indeksas, mineralų kiekis kraujyje ir kraujo antioksidantų fermentų aktyvumas žiurkėms, kurioms buvo atlikta fiktyviai operuota, pašalinta kiaušidės ir gydytos Cistanches Herba ekstraktu. Rezultatai parodė, kad gydymas Cistanches Herba ekstraktu, priklausomai nuo dozės, žymiai padidino kaulų mineralų tankį (KMT), kaulų mineralų kiekį (KMC), maksimalią apkrovą, poslinkį esant maksimaliai apkrovai, įtempimą esant maksimaliai apkrovai, apkrovą automatinio lūžio metu, poslinkį automatiškai lūžus. , ir stresas auto pertraukos metu, ir kraujo antioksidacinių fermentų aktyvumas, sumažėjęs Ca, Zn ir Cu kiekis kraujyje, lyginant su OVX grupe. Šis eksperimentas rodo, kad Cistanches Herba ekstrakto skyrimas žiurkėms, kurių kiaušialąstės pašalintos, sumažina kaulų retėjimą ir apsaugo nuo osteoporozės.

Raktiniai žodžiai:kiaušidžių pašalinimas; žiurkė; kaulas; antioksidantas; Cistanches Herba

Cistanches Herba

1. Įvadas

Osteoporozė yra senėjimo liga, susijusi su kaulų retėjimu, kuri dažnai pasireiškia be simptomų, kol mikroarchitektūros pablogėjimas tampa toks reikšmingas, kad kaulų lūžiai visada įvyksta toje vietoje, kur kaulų masės sumažėjimas yra mažesnis nei būtina kaulo vientisumui. Osteoporozė turi didelę reikšmę sveikatos apsaugai. Nors kaulų masė sumažėjusi, mineralizacijos požiūriu kaulai yra normalūs, tačiau histologiškai mažėja žievės storis ir stambaus spuoguoto kaulo trabekulių skaičius ir dydis [1–3].

Pastaraisiais metais atlikta daugybė šios ligos tyrimų. Kaupiami duomenys rodo, kad estrogeno praradimas menopauzės metu yra pagrindinis ligos patogenezės veiksnys, nes šis hormonas yra pagrindinis neigiamas osteoklastų aktyvumo reguliatorius [4–6], o osteoklastai yra pagrindinės ląstelės, atsakingos už kaulų remodeliavimąsi sergant osteoporoze. [7].

Osteoporozė po menopauzės yra dažniausia metabolinė kaulų liga, kuriai būdingas greitas mineralizuoto kaulinio audinio nykimas, trabekulinės kaulo architektūros sutrikimas, mineralų sankaupų kristalinių savybių pokyčiai, dėl kurių atsiranda struktūrinis kaulų lūžis (lūžimas). vietose, kuriose gausu akytųjų kaulų, pavyzdžiui, slanksteliai, klubas ir distalinis dilbis [8–11]. Estrogenų trūkumas laikomas pagrindiniu moterų po menopauzės kaulų retėjimą lemiančiu veiksniu. Žiurkių ir šunų kiaušidžių pašalinimas buvo plačiai naudojamas osteoporozės modeliams. 1996 m. buvo pranešta apie ibandronato poveikį šunims, kuriems buvo pašalintos kiaušidės [12].

Cistanches Herba (CH), holoparazitinis Cistanche deserticola YC Ma augalas, Rytų tradicinėje medicinoje yra klasifikuojamas kaip tonizuojantis agentas ir dažniausiai naudojamas užmaršumui, klausos praradimui, nevaisingumui ir lėtiniam vidurių užkietėjimui gydyti. CH pasižymi įvairiu farmakologiniu poveikiu, įskaitant antinociceptinį, priešuždegiminį ir imunitetą stiprinantį poveikį [13, 14]. Ankstesniame tyrime buvo pranešta, kad Cistanches Herba gali paskatinti kaulų mezenchimines kamienines ląsteles (BMSC) diferencijuotis į osteoblastus, o tai žada palankią osteoporozės ir kaulų lūžių gydymo perspektyvą [15]. Chen ir kt. [16] pranešė, kad Cistanches Herba polisacharidai gali skatinti kaulų čiulpų ląstelių ciklo perėjimą ir kraujodaros funkcijos atsigavimą kaulų čiulpų depresijos turinčiose anemijos pelėse, pagreitinti hematogenezę rubrum ir makrobranduolių padermėse.

Šiame tyrime buvo tiriamas kaulų mineralinis tankis (KMT), kaulų mineralų kiekis (KMC), kaulų biomechaninis indeksas, mineralų kiekis kraujyje ir antioksidacinių fermentų aktyvumas žiurkėms, kurioms buvo atlikta fiktyvi operacija, kiaušidžių pašalinimas ir Cistanches Herba gydytos žiurkės, siekiant ištirti gydymo poveikį. su Cistanches Herba ekstraktu gerina kaulų kokybę.

Tradicinė kinų medicina Cistanches Herba ekstraktas (CHE)

2. Medžiagos ir metodai

2.1. Cistanches Herba vandeninių ekstraktų paruošimas

Cistanches Herba buvo surinktas iš dykumos Nei Monggol (Vidinė Mongolija) autonominio regiono Alksos lygoje 2010 m.

Džiovintas Cistanches Herba stiebas buvo ekstrahuotas distiliuotu vandeniu 100 laipsnių temperatūroje 2 valandas. Tirpalas centrifuguojamas 4000 aps./min. greičiu 10 min. Likučiai buvo pašalinti filtruojant, o sujungtas filtratas išgarinamas kaitinant, kad būtų gauta norima koncentracija (2,1 g sauso augalinio ekvivalento ekstrakto/ml). Ekstrahavimo išeiga buvo 13,7 proc. (m/m). Vandeninis ekstraktas buvo laikomas 2–8 laipsnių temperatūroje.

2.2. Gyvūnai

Tyrimui buvo panaudotos trisdešimt dvi 3 mėnesių amžiaus Wistar žiurkių patelės, kurios eksperimento pradžioje svėrė nuo 240 iki 270 g. Jie buvo palaikomi standartinėmis laboratorinėmis sąlygomis su 12 valandų šviesos ir tamsos ciklu, laisva prieiga prie standartinio laboratorinio žiurkių maisto ir vandens iš čiaupo.

2.3. Eksperimentai su gyvūnais.

Žiurkių patelės buvo anestezuotos natrio pentobarbitaliu (40 mg kg-1, ip), o jų kiaušidės buvo pašalintos abipusiai. Grupės žiurkėms, kurioms buvo atlikta fiktyvi operacija, buvo atlikta anestezija, atlikta laparotomija ir susiūtos jų nepašalinus kiaušidžių. Po 1 savaitės atsigavimo po operacijos OVX žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į tris grupes (kiekvienoje grupėje n=8) ir intragastriniu būdu gydomos H2O (OVX grupė), Cistanches Herba ekstraktu (CHE) (100 arba 200 mg kg). -1 per dieną) 3 mėnesius. Apgaulingai operuota grupė (n=8) buvo gydoma per burną H2O.

Paskutinę tyrimo dieną gyvūnai buvo pasverti ir paaukoti, kartu paimti kraujo mėginiai. Šlaunikauliai buvo išpjaustyti ir atskirti nuo minkštųjų audinių, kad būtų galima išmatuoti biomechaninius tyrimus.

Visi eksperimentai buvo atlikti pagal tyrimų protokolus, kuriuos nustatė Kinijos gyvūnų priežiūros komitetas.

2.4. Kaulų densitometrija

Šlaunikaulio kaulo mineralų kiekis (KMC) ir kaulų mineralinis tankis (KMT) buvo nustatyti naudojant Hologic QDR{{0}}W DXA. Prietaisas buvo pritaikytas itin didelės raiškos režimui, kurio atstumas tarp eilučių yra 0.0254 cm, skiriamoji geba 0,0127 cm, o kolimatorius 0,9 cm skersmens. Kaulai buvo dedami į Petri lėkštelę. Norint imituoti kaulus supančių minkštųjų audinių tankį, aplink kaulus buvo pilamas vanduo iš čiaupo, kad būtų pasiektas 1 cm gylis. Pateikiami BMC ir išmatuoto ploto rezultatai. Šios srities KMT apskaičiuojamas kaip KMC, padalytas iš ploto. Be viso šlaunikaulio rezultatų, distalinė ir vidurinė šlaunikaulio sritis buvo analizuojama kaip subregionai [17].

2.5. Kaulų biomechaninis tyrimas

Šlaunikaulio kaulai buvo laikomi 4 laipsniais, kol buvo nustatytas lūžimo stiprumas naudojant 5-kN lankstumo tvirtinimą, sukonfigūruotą trijų taškų lenkimo bandymams atlikti ir pritvirtintą prie Instron Universal Testing Machine Model 4502 su 10- kN apkrovos elementas (Instron, Canton, MA, JAV), kaip aprašyta anksčiau [18]. Kryžminio galvutės greitis buvo 50 mm/min, o duomenų atrankos greitis – 10 mėginių/s. Maksimali apkrova, įtempis esant maksimaliai apkrovai, apkrova gedimo metu ir įtempis gedimo metu buvo nustatyti šlaunikaulyje naudojant IX seriją, v 8.08.{11}} programinę įrangą (Instron).

2.6. Biocheminė analizė

Ca, Zn ir Cu kiekis kraujyje buvo matuojamas atominės absorbcijos spektrofotometrija.

Remiantis King ir Armstrong metodu [19], šarminės fosfatazės (ALP) aktyvumas buvo tiriamas naudojant dinatrio fenilfosfatą kaip substratą. Išsivysčiusi spalva buvo nuskaityta esant 510 nm UV spindulių spektrofotometru po 10 min. ALP aktyvumas buvo išreikštas IU/L.

Malondialchehiche (MDA) koncentracija kraujyje buvo nustatyta naudojant Jain ir kt. aprašytą metodą. [20], remiantis TBA reaktyvumu. Trumpai tariant, 0,2 mL eritrocitų granulių arba supernatanto, gauto iš audinių, 0,8 mL fosfato buferio (pH 7,4), 0.025 mL BHT ir { {19}}.5 ml 30 procentų TCA buvo įpilta į mėgintuvėlius ir sumaišyta. Po 2 valandų inkubacijos –20 laipsnių temperatūroje mišinys centrifuguojamas (4000 × g) 15 min. Po to į kiekvieną mėgintuvėlį buvo paimtas 1 ml supernatanto, o po to - 0,075 ml 0,1 M EDTA ir

0.25 ml 1 procento TBA buvo pridėta. Šie mėgintuvėliai su teflonu padengtais užsukamaisiais dangteliais buvo inkubuojami 90 laipsnių vandens vonioje 15 minučių ir atšaldomi iki kambario temperatūros. Optinis tankis buvo išmatuotas esant 532 MDA koncentracijai kraujyje.

Glutationo peroksidazės (GSH-Px) aktyvumas nustatytas Lawrence ir Burk metodu [21]. Tyrimo mišinį sudarė 2.0 mL 75 mM fosfatinio buferio (pH 7.0), 50 μL 60 mM glutationo, {{15} },1 ml 30 vienetų/ml glutationo reduktazės, 0,1 ml 15 mM EDTA, 0,1 ml 3 mM NADPH ir atitinkamas audinių supernatanto kiekis iki galutinio 3,0 ml tūrio . Reakcija buvo pradėta pridedant 0,1 ml 7,5 mM H2O2. Absorbcijos kitimo greitis, kai NADPH virsta NADP plius, buvo užfiksuotas spektrofotometriškai esant 340 nm 3 minutes. GSH-Px aktyvumas audiniams buvo išreikštas μmoliais NADPH, oksiduoto iki NADP ir min-1 mg-1 baltymo.

Superoksido dismutazės (SOD) aktyvumas kraujyje nustatytas Sun ir kt. metodu. [22]. Metodo principas pagrįstas nitromėlynojo tetrazolio (NBT) redukcijos slopinimu, naudojant ksantino-ksantino oksidazės sistemą kaip superoksido generatorių. Aktyvumas buvo įvertintas 10000 g metanolio/chloroformo (5/3, v/v) audinių homogenatų ekstraktų (10 proc.) supernatantuose. Vienas SOD vienetas buvo apibrėžtas kaip fermento kiekis, sukeliantis 50 procentų NBT mažinimo greičio slopinimą.

Katalazės (CAT) aktyvumas buvo matuojamas Abei [23] metodu. Serumas buvo pridėtas į kiuvetę, kurioje yra 2,89 ml 50 mmol/L fosfato buferio (pH 7.0). Reakcija buvo pradėta pridedant 0,1 ml šviežiai paruošto 30 mmol/L H2O2, kad galutinis tūris būtų 3,0 ml 25 laipsnių temperatūroje. Spektrofotometru 5 minutes matuojamas H2O2 skilimo greitis esant 240 nm. Vienas CAT vienetas (U) buvo apibrėžtas kaip fermento kiekis, reikalingas suskaidyti 1 nmol H2O2 per minutę, esant 25 laipsnių temperatūrai ir pH 7,8.

2.7. Statistinė analizė

Eksperimento rezultatai buvo išreikšti kaip vidutinis ± SD kiekvienoje grupėje aštuoniems gyvūnams. Biocheminiai parametrai buvo statistiškai analizuojami naudojant vienpusę dispersijos analizę ANOVA, po to Dunnett daugkartinio palyginimo testą (DMCT). P vertė<0.05 was="" considered="" statistically="">

3. Rezultatai

Dviejų gyvūnų galiojimo laikas baigėsi tyrimo metu. Vadinasi, grupių skaičiai tyrimo išvadose buvo: 8 fiktyvioje kontrolėje; 7 OVX grupėje; 7 CHE gydymo grupėje (100 mg kg-1 per parą) ir 8 CHE gydymo grupėje (200 mg kg-1 per parą). Praėjus dviem dienoms po operacijos, žiurkių maisto ir vandens suvartojimas buvo šiek tiek mažesnis nei prieš operaciją. Nė vienas gyvūnas nenukentėjo nuo infekcijos ir anabiozės. Kliniškai akivaizdaus nepageidaujamo poveikio žiurkėms nepastebėta.

Prieš operaciją reikšmingo (p > {0}}.01) žiurkių kūno svorio skirtumo tarp grupių nebuvo. OVX grupės kūno svoris buvo reikšmingai (p < 0.01)="" mažesnis="" nei="" fiktyvių="" asmenų="" (1="" lentelė).="" cistanches="" herba="" ekstrakto="" vartojimas="" 100="" ir="" 200="" mg/kg="" per="" parą="" dozėmis="" reikšmingai="" (p="">< 0,05)="" padidino="" žiurkių="" kūno="" svorį="" che="" gydytų="" grupėje="" (100="" ir="" 200="" mg/kg="" per="" parą).="" iš="" gyvūnų="" gauti="" duomenys="" parodė,="" kad="" buvo="" statistiškai="" reikšmingų="" skirtumų="" tarp="" ovx="" grupės="" ir="" fiktyvios="" kontrolės="" kmt="" ir="" kmc="" (p="">< 0,01).="" kaip="" ir="" buvo="" tikėtasi,="" 200="" mg/kg="" cistanches="" herba="" ekstrakto="" dozė="" reikšmingai="" padidino="" che="" gydytų="" grupių="" kmt="" ir="" kmc="" (p="">< 0,05;="" p=""><>

4. Diskusija

Osteoporozė yra viena iš labiausiai paplitusių sutrikimų, susijusių su estrogenų trūkumu ir senėjimu. Menopauzė sukelia padidėjusį kaulų apykaitą, kaulų formavimosi ir kaulų rezorbcijos disbalansą ir grynąjį kaulų retėjimą. Dėl estrogenų trūkumo kaulų nykimas pirmiausia atsiranda dėl padidėjusios osteoklastinės kaulų rezorbcijos tiek žmonėms, tiek eksperimentiniams gyvūnams [24].

Nors osteoporoze serga ir vyresni vyrai, ir moterys, moterys po menopauzės buvo pagrindinis osteoporozės židinys [25,26]. Dramatiškas moteriškų hormonų trūkumas yra svarbiausias moterų po menopauzės osteoporozės veiksnys. OVX žiurkės modelis dažniausiai naudojamas tiriant pomenopauzinę osteoporozę [27, 28], kai kiaušidžių pašalinimas sukelia kaulų rezorbcijos perteklių, palyginti su kaulų formavimu, ir sukelia kaulų retėjimą. OVX operacija žymiai padidina kūno svorį, o tai gali būti orientyras vertinant operacijos sėkmę [29]. Šio tyrimo pabaigoje OVX grupės kūno svoris buvo žymiai sumažintas, palyginti su fiktyviąja grupe, o gydymas Cistanches Herba ekstraktu visiškai apsaugojo nuo šio sumažėjimo. Manome, kad OVX sukėlė didelį fiziologinį diskomfortą, kuris paveikė žiurkių maisto suvartojimą. Vėliau OVX grupės kūno svoris buvo žymiai sumažintas.

Kaulų mineralinis tankis buvo apibūdintas kaip tik pakaitinis kaulų stiprumo matas [30]; tačiau mikroarchitektūrinės savybės yra naujai atsiradęs žymuo, leidžiantis įvertinti tikrąjį gydymo poveikį trabekulinio kaulo kokybei. Nors maža kaulų masė yra pagrindinis lūžių rizikos veiksnys [31], trabekulinio kaulo architektūros išsaugojimas labai prisideda prie kaulų stiprumo ir gali sumažinti lūžių riziką, neskaitant KMT ir KMC, kaip rodo daugybė tyrimų, kuriuose buvo pranešta apie glaudų ryšį tarp mikrostruktūrų. kaulų savybės ir biomechaninis stiprumas [32,33]. Šiame darbe buvo nustatyta, kad KMT ir BMC labai skiriasi tarp fiktyvių ir pašalintų kiaušidžių grupių. Gydymas Cistanches Herba ekstraktu žymiai padidino OVX žiurkių KMT ir BMC. Be to, vartojant Cistanches Herba ekstraktus, vis dar reikšmingai, priklausomai nuo dozės, padidėjo maksimali apkrova, poslinkis esant maksimaliai apkrovai, įtempis esant maksimaliai apkrovai, apkrova esant automatiniam pertraukimui, poslinkis automatiškai pertraukos metu ir įtempis automatiškai įsilaužus CHE gydytų grupių. palyginti su OVX grupe. Šie rezultatai parodė, kad žiurkių, maitinamų Cistanches Herba ekstraktu, šlaunikaulio kaulai turėjo didesnę apkrovą gedimo metu ir todėl gali būti atsparesni lūžiams dėl streso. Be to, OVX grupės žiurkėms buvo didesnis Ca, Zn ir Cu kiekis kraujyje nei fiktyvių. Cistanches Herba ekstrakto vartojimas sumažino Ca, Zn ir Cu kiekį kraujyje OVX žiurkėms.

Nuomonė, kad oksidacinė būklė yra svarbi osteoporozei, atitinka stiprų epidemiologinį ryšį tarp osteoporozės ir aterosklerozės, ligos, kurioje oksidacinis stresas vaidina svarbų vaidmenį. Be to, neseniai buvo pastebėta, kad moterims yra ryšys tarp oksidacinio streso (matuojamas pagal oksidacinio streso biologinį žymeklį, 8-izo-PGF2-) [34], antioksidantų kiekį [35] ir kaulų mineralinis tankis. Klinikiniai tyrimai, ištyrę ryšį tarp mitybos ir (arba) papildomo askorbato ir žmonių kaulų masės, taip pat rodo ryšį su padidėjusia kaulų mase [36].

Kadangi MDA pasižymi dideliu reaktyvumu aminogrupių atžvilgiu, jis slopina nukleorūgščių ir baltymų sintezę, taip pat deaktyvuoja fermentus [37,38]. Taigi, po OVX pastebėtas šlaunikaulio antioksidantų fermentų sumažėjimas gali būti dėl padidėjusios lipidų peroksidacijos. Antioksidaciniai fermentai dalyvauja gynybos sistemoje nuo laisvųjų radikalų sukeliamų audinių ar ląstelių pažeidimo. Jie metabolizuoja laisvuosius radikalus arba reaktyvius deguonies tarpinius produktus į neradikalius produktus. Šie fermentai apima nuo glutationo priklausomų fermentų šeimą [39]. Šiame tyrime pranešame apie reikšmingą antioksidantų fermentų kiekio sumažėjimą, ty. SOD, GSH-Px, CAT žiurkių, kurių kiaušialąstės pašalintos, kraujyje. Šie atradimai rodo, kad kiaušidžių hormonų trūkumas koreliuoja su nesugebėjimu kovoti su oksidaciniu stresu. Cistanches Herba ekstraktų vartojimas nuo dozės žymiai padidino SOD, GSH-Px ir CAT aktyvumą kraujyje OVX žiurkėms. Atrodo, kad šie rezultatai rodo geresnį Cistanches Herba ekstrakto apsauginį poveikį nuo oksidacinio streso, sukelto OVX metu.

Apibendrinant galima teigti, kad Cistanches Herba ekstraktas veiksmingai užkerta kelią kaulų retėjimui, kurį sukelia kiaušidžių hormonų trūkumas, kaip matyti iš šlaunikaulio KMT, BMC verčių ir Ca, Zn ir Cu koncentracijos kraujyje. Kadangi osteoporozė yra susijusi su oksidaciniu stresu, tokio pobūdžio tyrimai patvirtina antioksidantų gydomųjų savybių svarbą. Manome, kad Cistanches Herba ekstraktas pagerina kaulų kokybę galbūt iš dalies dėl OVX žiurkių antioksidacinių fermentų aktyvumo ir kaulų mineralinių elementų mažinimo.

Cistanches Herba ekstraktas: užkerta kelią kaulų retėjimui

Nuorodos

1. Kanalis, E.; Giustina, A.; Bilezikian, JP Osteoporozės anabolinės terapijos mechanizmai. N. Engl. J. Med. 2007, 357, 905–916.

2. Heaney, RP; Reckeris, RR; Saville, PD Menopauzės pokyčiai kaulų remodeliavime. J. Lab. Clin. Med. 1978, 92, 964–970.

3. McNamara, LM; Ederveen, AGH; Lionas, CG; Kaina, C.; Schaffer, MB; Weinans, H.; Prendergast, PJ Normalių, pašalintų kiaušidžių ir vaistais gydytų žiurkių akytinio kaulo trabekulinio audinio stiprumas senstant. Bone 2006, 39, 392–400.

4. Compston, JE Pakaitinė hormonų terapija. Clin. Reumatolis. 1997, 11, 583–596.

5. Meiner, SE Plečiantis kraštovaizdis osteoporozė: gydymo galimybės šiandien. Adv. Slaugytojo praktika.1999, 7, 26–31.

6. Aubinas, JE; Bonnelye, E. Osteoprotegerinas ir jo ligandas: nauja osteoklastogenezės ir kaulų rezorbcijos reguliavimo paradigma. Osteoporozė. Tarpt. 2000, 11, 905–913.

7. Roodman, GD Kaulų biologijos pažanga: osteoklastas. Endokr. Rev. 1996, 17, 308–332.

8. Kaštonas, CH, III. Vaistų terapija: kalcitoninas, bisfosfonatai ir anaboliniai steroidai. Sergant osteoporoze: etiologija, diagnostika ir valdymas; Riggs, BL, Melton, LJ, III, red.; Lippincott-Raven: Filadelfija, PA, JAV, 1995 m.

9. Quan, Q.-M.; Wu, W.; Li, Y.-X.; Cai, Q.-R. Barrenwort rūšių ikariino ir flavonoidų kiekio kitimas. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1176–1181.

10. Du, XG; Pan, HZ; Zhang, CY; Zhang, HY; Liu, HM; Chen, ZY; Zeng, XY Zingiber officinale ekstraktas moduliuoja g-spindulių sukeltą imunosupresiją pelėms. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1647–1655.

11. Paschalis, EP; Betts, F.; DiCarlo, E.; Mendelsohn, R.; Boskey, AL FTIR mikrospektroskopinė žmogaus klubinės dalies biopsijų analizė iš neapdoroto osteoporozinio kaulo. Kalcif. Tissue Int. 1997, 61, 487–492.

12. Motoie, H.; Kanoh, H.; Ogata, S.; Kawamuki, K.; Shikama, H.; Fujikura, T. Kaulų praradimo prevencija bisfosfonatu YM175 šunims, kuriems pašalinta kiaušialąstė ir ribojamas kalcio kiekis. Jpn. J. Pharmacol. 1996, 71, 239–246.

13. Linas, LW; Hsieh, MT; Tsai, FH; Wang, WH; Wu, CR Antinocicepcinis ir priešuždegiminis aktyvumas, kurį sukelia Cistanche deserticola graužikams. J. Ethnopharmacol. 2002, 83, 177–182.

14. Wu, XM; Gao, XM; Tsim, KW; Tu, PF Arabinogalaktanas, išskirtas iš Cistanche deserticola stiebų, skatina kultivuotų limfocitų dauginimąsi. Tarpt. J. Biol. Macromol. 2005, 37, 278–282.

15. Zengas, JC; Ventiliatorius, YG; Liu, JR; Zeng YR; Yi, CZ; Liang Y. Eksperimentinis kaulų mezenchiminių kamieninių ląstelių (BMSC) diferenciacijos į osteoblastus tyrimas, vadovaujamas serumo turinčia cistanche deserticola. Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606–608.

16. Chen, Z.-W.; Zhu, B.-D.; Xu H.-Y. Eksperimentinis dykumose gyvenančių cistanche polisacharidų tyrimas dėl reguliuojamos hematogenezės pelių, sergančių kaulų čiulpų depresijos anemija. Smakras. Arch. Tradit. Smakras. Med. 2007, 25, 1473–1474.

17. Prakasamas, G.; Taip, JK; Chen, M.-M.; Castro-Magana, M.; Liang, CT; Aloia, JF Augimo hormono ir testosterono poveikis žievės kaulų formavimuisi ir kaulų tankiui senyvoms žiurkėms, kurioms buvo pašalintos kiaušidės. Bone 1999, 24, 491–497.

18. McClung, JP; Stahl, CH; Marchitelli, LJ; Moralesas-Martinezas, N.; Makinas, KM; Youngas, AJ; Scrimgeour, AG Dietinės fitazės poveikis kūno svorio padidėjimui, kūno sudėčiai ir kaulų biomechanikai augančioms žiurkėms, maitinančioms mažai cinko turinčią dietą. J. Nutr. Biochem. 2006, 170, 190–196.

19. Karalius, EJ; Armstrong, AR Patogus serumo ir tulžies fosfatazės aktyvumo nustatymo metodas. Gali. Med. doc. J. 1934, 31, 376–381.

20. Jain, SK; McVie, R.; Duett, J.; Herbst, JJ Eritrocitų membranos lipidų peroksidacija ir glikozilintas hemoglobinas sergant diabetu. Diabetas 1989, 38, 1539–1543.

21. Lawrence, RA; Burk, RF Glutationo peroksidazės aktyvumas žiurkių kepenyse, kuriose trūksta seleno. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 1976, 71, 952–958.

22. Saulė, Y.; Oberlis, Los Andželas; Ying, L. Paprastas superoksido dismutazės klinikinio tyrimo metodas. Clin. Chem. 1988, 34, 497–500.

23. Abei, H. Katalazė in vitro. Metodai Enzymol. 1988, 10, 121–126.

25. Mozaffari, Z.; Azarnia, M.; Abdolhamid Angaji, S. Trigonella foenum-graecum lapų vandeninio ekstrakto toksinio poveikio žiurkės vaisiaus ilgojo kaulinio audinio vystymuisi įvertinimas. J. Med. Plants Res. 2010, 4, 1148–1155.

25. Buencamino, MCA; Sikonas, AL; Jainas, A.; Thacker, HL Stebėjimo tyrimas dėl osteopenijos gydymo gairių laikymosi. J. Moterų sveikata 2009, 18, 873–881.

26. Schmittas, MN; Schmittas, J.; Dören, M. Fizinio aktyvumo vaidmuo osteoporozės prevencijai moterims po menopauzės – atnaujinimas. Maturitas 2009, 63, 34–38.

28. Lelovas, PP; Xanthos, TT; Tomas, SE; Dainos žodžiai, GP; Dontasi, IA Laboratorinė žiurkė kaip gyvūnų modelis osteoporozės tyrimams. Komp. Med. 2008, 58, 424–430.

28. Ncango, DM; Pohl, CH; van Wyk, PWJ; Kock, JLF Nesteroidiniai vaistai nuo uždegimo (NVNU) slopina mielių patogenų augimą. Afr. J. Microbiol. Res. 2011, 5, 1123–1125.

29. Fazliana, M.; Nazaimoon, WMW; Gu, HF; Ostenson, CG Labisia pumila ekstraktas reguliuoja kūno svorį ir adipokinus žiurkėms, kurioms pašalintos kiaušidės. Maturitas 2009, 62, 91–97.

30. Bourrin, S.; Ammann, P.; Bonjour, JP; Rizzoli, R. Proksimalinio blauzdikaulio kaulų mineralinio tankio ir stiprumo atkūrimas, bet ne akytojo kaulo architektūra, po ilgalaikio gydymo bisfosfonatais arba selektyviu estrogenų receptorių moduliatoriumi senyvoms žiurkėms. Bone 2002, 30, 195–200.

31. Bora, B.; Dufresne, TE; Chmielewski, PA; Grosas, GJ; Prengeris, MC; Phipps, RJ Risedronate išsaugo trabekulinę architektūrą ir padidina kaulų stiprumą minikiaulių, iš kurių buvo pašalintos kiaušidės, slankstelio, matuojant trimatėje mikrokompiuterinėje tomografijoje. J. Kaulininkas. Res. 2002, 17, 1139–1147.

32. Miuleris, R.; Hannan, M.; Smithas, SY; Bauss, F. Protarpinis ibandronatas išsaugo kaulų kokybę ir kaulų stiprumą juosmeninėje stuburo dalyje po 16 mėnesių gydymo su cynomolgus beždžionės kiaušidėmis, pašalinta kiaušidėmis. J. Kaulininkas. Res. 2004, 19, 1787–1796.

33. Lane, NE; Kumer, JL; Majumdaras, S.; Chanas, M.; Lotz, J.; Stevensas, RE; Kleinas, R.; Phelps, KV Sintetinių konjuguotų estrogenų (Cenestin) poveikis trabekulinio kaulo struktūrai ir stiprumui žiurkių modelyje, pašalinto kiaušidės. Osteoporosis Int. 2002, 13, 816–823.

34. Basu, S.; Michaelsson, K.; Olofsson, H.; Johansson, S.; Melhus, H. Oksidacinio streso ir kaulų mineralinio tankio ryšys. Biochem. Biofizė. Res. Komun. 2001, 288, 275–279.

35. Maggio, D.; Barabani, M.; Pierandrei, M.; Cristina Polidori, M.; Catani, M.; Mecocci, P.; Seninas, U.; Pacifici, R.; Cherubini, A. Žymus antioksidantų kiekio plazmoje sumažėjimas vyresnio amžiaus moterims, sergančioms osteoporoze: skerspjūvio tyrimo rezultatai. J. Clin. Endokrinolis. Metab. 2003, 88, 1523–1527.

36. Mortonas, didžėjus; Barrett-Connor, EL; Schneider, DL Vitamino C papildų naudojimas ir kaulų mineralų tankis moterims po menopauzės. J. Kaulininkas. Res. 2001, 16, 135–140.

37. Paukštis, RP; Draper, HH Malonaldehido ir acetaldehido poveikis auginamoms žinduolių ląstelėms: augimo morfologija ir makromolekulių sintezė. J. Aplinka. Sveikata 1980, 6, 811–823.

38. Abdelhalim, MAK Galima didelio cholesterolio kiekio dietos sukelto oksidacinio streso įtaka triušių raudonųjų kraujo kūnelių sudėčiai ir savybėms. Afr. J. Microbiol. Res. 2010, 4, 836–843.

39. Chaudiere, J.; Ferrari-Illiou, R. Tarpląsteliniai antioksidantai nuo cheminių iki biocheminių mechanizmų. Food Chem. Toksikolis. 1999, 37, 949–962.