Nepaisant geresnio biologinio suderinamumo, hemodializė padidina oksidacinį stresą per anglies centrus

Leukocitų aktyvacija ir jos rezultatasoksidacinis stresassukeltasbiologiškai nesuderinamų medžiagųmetuhemodializės poveikispacientų prognozė. Nepaisant daugybės pažangoshemodializės dializatoriai,hemodializės prognozėpacientams, kuriems yra giliai susijusių komplikacijųoksidacinis stresas, toks kaipdiabetas cukrinis diabetas išlieka skurdus. Taigi mes iš naujo įvertinome poveikįhemodializėkelių reaktyviųjų deguonies rūšių, naudojant elektronų sukimosi rezonansu pagrįstus metodus tolesniam tobulėjimuibiologinis suderinamumasinhemodializė. Mes įtraukėme 31 stabilios būklės pacientą, kuriam buvo atliekama hemodializė naudojant didelio srauto polisulfoninius dializatorius. Hemodializės poveikis reaktyviosioms deguonies rūšims buvo įvertintas dviem metodais: MULTiS, kuris įvertina serumo pašalinimo aktyvumą prieš kelias hidrofilines reaktyviąsias deguonies rūšis, ir i-STrap, kuris aptinka lipofilinius anglies centro radikalus. Panašiai kaip ir ankstesniuose tyrimuose, mes nustatėme, kad po hemodializės žymiai pagerėjo hidroksilo radikalų šalinimo aktyvumas serume. Skirtingai nuo ankstesnių tyrimų, mes nustatėme, kad po to žymiai sumažėjo alkoksilo radikalų šalinimo aktyvumashemodializė. Be to, pacientams, sergantiems cukriniu diabetu, po hemodializės sumažėjo serumo pašalinimo aktyvumas prieš alkilperoksilo radikalus ir padidėjo lipofilinių anglies centro radikalų kiekis. Šie rezultatai rodo, kad nepaisant didelių dializatoriaus membranų patobulinimų, formosreaktyviosios deguonies rūšyskurios gali būti pašalintos dializės metu, yra ribotos, o hemodializės metu daug reaktyviųjų deguonies rūšių išlieka padidėjęs.

Pagrindiniai žodžiai:hemodializė, biologinis suderinamumas, alkilperoksilo radikalo elektronų sukimosi rezonansas, MULTiS, i-STRap

SPAUSKITE ČIA, KAD GAUTI NATŪRALĮ ORGANIŠKŲ CISTANČIŲ EKSTRAKTĄ, SU 25% ECHINAKOZIDU IR 9% AKTEOZIDU, TURINČIŲ INKSTU FUNKCIJĄ

„Wecistanche“ – didžiausio cistansų eksportuotojo Kinijoje – pagalbinė tarnyba:

El. paštas:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp / Tel:+86 15292862950

Įsigykite daugiau specifikacijų:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-parduotuvė

Lėtinė inkstų liga(CKD) yra susijęs sudidelis oksidacinis stresas. (-4)Ureminio toksino kaupimasiss, turinčios prooksidacinių savybių, dėl kurių atsirandamikrouždegimassukeltasPadidėjęs priešuždegiminis citokinassyra pagrindinis bruožasCKD patofiziologija. (s-, hemodializė (HD), plačiai taikoma pakaitinė inkstų terapija, veikia kaip dviašmenis kardas, mažinantis oksidacinį stresą pacientams, sergantiems LIL. Polimorfonuklearinių leukocitų aktyvacija, dėl sąlyčio su membrana ar kitais dirbtiniais paviršiais HD grandinėse. , yra pagrindinė HD sukelto oksidacinio streso priežastis.s-) Priešingai, pašalinus prooksidacinius ureminius toksinus, ypač mažos molekulinės masės hidrofilinius junginius, tokius kaip trimetilamino oksido arba guanidino junginiai, gali pagerėti antioksidacinis HD pobūdis, dėl to ilgalaikis išgyvenamumo rodiklis ir gyvenimo kokybė gerėjapacientų, sergančių CKD. (2,13) ​​Be to, koreguojant acidozę vėl suaktyvinami antioksidaciniai fermentai ir sumažėja tūrio perteklius, todėl užkertamas kelias širdies veiklai. kraujagyslių komplikacijos yra antioksidaciniai mechanizmai. (4 Taigi. HD medžiagoms būtina, kad būtų sumažintas leukocitų aktyvavimas ir padidintas antioksidacinis poveikis. Siekiant įveikti šią probleminę antioksidacinę ir biologiškai suderinamą HD medžiagą, kurios pavyzdys yra vitaminu E padengtas dializatorius. (si7) Tačiau, nepaisant daugybės HD dializatorių pažangos, HD sergančių pacientų, ypač sergančių cukriniu diabetu (DM) – liga, kuri skatina stiprią oksidacinę būseną, prognozė išlieka nepatenkinama. (8) Šie susirūpinimą kelia iš dalies dėl labai įvairių ir sudėtingų in vivo detalių.su oksidaciniu stresu susijusios reakcijosnebuvo pakankamai išanalizuoti. Taigi šiuo tyrimu buvo siekiama išsiaiškinti HD poveikį reaktyviųjų deguonies rūšių (ROS) dinamikai, kaip oksidacinio streso reakcijų įvykiams, remiantis koncepcija, kad kiekviena tikslinė oksidacinių ir antioksidacinių reakcijų vieta organizme turi būti biochemiškai aprašyta. konkrečiame laike ir erdvėje. Vienas iš to paaiškinimų yra adetalios analizės trūkumassu oksidaciniu stresu susijusių reakcijų, kurios skatina šias ląstelių reakcijas, prieš srovę. Dėl didelio reakcijos greičio ir sudėtingų reakcijų grandinių sunku nustatyti ROS, kurios veikia kaip oksidacinio streso reakcijų arba sąveikos tarp ROS stimuliatoriai, generuojantys oksidacinius stimuliatorius. Kadangi ROS nėra vienodos ir atskiros ROS turi specifinių savybių in vivo reakcijų metu, reikia atlikti kelių ROS analizę. (9-2n Taigi, norint pagerinti biologinį suderinamumą, pagrįstą antioksidacinių ir biologiškai suderinamų medžiagų naudojimu, reikia suprasti HD sukeliamus ROS dinamikos pokyčius.

Norėdami ištirti ROS dinamiką HD metu, panaudojome du naujai sukurtus elektronų sukimosi rezonanso (ESR) metodus. daugialypis hidrofilinių laisvųjų radikalų pašalinimo tyrimas (MULTIS) ir lipofilinių radikalų aptikimo viso kraujo tyrimas (i-STrap) Nors ESR ROS pašalinimo aktyvumo tyrimai nėra išsamūs, tai išlieka vienintelis būdas nustatyti tipą ir ištirti dinamiką. iš ROS. Metodas sujungia didelio efektyvumo skysčių chromatografijos tipo srauto sistemą su ESR sistema ir naudoja 5-(2,2-dimetil-1.3-propoksiciklofosforilą)-5- metil-1-pirolino oksidas (CYPMPO) kaip sukimosi gaudyklė. MULTIS užtikrina didesnį ROS pašalinimo matavimo jautrumą ir stabilumą nei įprasti ESR tyrimai.{11}}) Vienas iš mūsų bendraautorių anksčiau pranešė apie MULTIS išmatuotą ROS šalinimo veiklą pacientams, sergantiems 5 stadijos ŠKL. Tačiau jie neįvertino HD poveikio.e2) Be to, i-STrap metodas yra ESR pagrįstas metodas, kuris aptinka ROS visame kraujyje naudojant 2-difenilfosfinoil-2-metilą-3,{ {20}}dihidro-2H-pirolio N-oksidas DPhPMPO) kaip sukimosi gaudyklė ir matuoja ESR po organinės ekstrahavimo, taip atspindėdamas lipofilinius ROS.2s.26 Šiame tyrime nustatėme, kad kelių ROS lygiai buvo padidino ir nepašalina HD, o tai rodo, kad radikalios grandininės reakcijos vis dar nėra tinkamai kontroliuojamos po HD. Tai gali turėti įtakospacientų, sergančių LIL, prognozė.

Medžiagos ir metodai

Dalykai ir informuotas sutikimas. Visos procedūros, atliktos su žmonėmis, buvo atliktos gavus individualų raštišką sutikimą. Naudotą protokolą patvirtino Tsukuba technologijos universiteto komitetas (leidimo Nr. 201809). Tai yra stebėjimo tyrimas; todėl pacientams buvo atliekamos intervencijos. Iš viso į tyrimą buvo įtrauktas 31 stabilus HD pacientas. Gavome ir įrašėme klinikinę ir demografinę informaciją apie kiekvieną pacientą. Visi pacientai buvo gydomi didelio srauto polisulfono membraniniais dializatoriais (Toray Medical Co., Ltd., Tokijas, Japonija) su įvairiais membranos paviršiaus plotais, pritaikytais prie kiekvieno žmogaus kūno sudėjimo. Pacientai buvo suskirstyti į dvi grupes, atsižvelgiant į jų galutinės stadijos inkstų ligos priežastį: nesergančių diabetu (ne DM grupė, n=17) ir diabetikų grupę, n=14).

Pavyzdžių rinkinys. Kraujo mėginiai buvo paimti dializės pradžioje ir pabaigoje iš mėginių ėmimo, esančio HD grandinės arterinėje pusėje. MULTIS matavimams serumai buvo atskirti ir laikomi šaldiklyje {{0}} laipsnių temperatūroje (kol buvo atliktas matavimas, i-STrap matavimams. Viso kraujo mėginiai buvo paimti į heparinu padengtus mėgintuvėlius, kurie buvo leidžiami. prieš matavimus stovėti vieną valandą. Daugkartinio laisvųjų radikalų pašalinimo aktyvumo serume matavimai Hidrofiliniai ROS surišimo aktyvumai buvo išmatuoti MULTIS metodu, naudojant anksčiau aprašytus protokolus su nedideliais pakeitimais.2227) Valymo aktyvumas prieš penkis ROS, būtent hidroksilo radikalą(OH) , buvo išmatuotas superoksido (0,"), alkoksilo radikalo (RO"), alkilperoksilo radikalo (ROO") ir vienkartinio deguonies ('0,) kiekis. X juostos ESR spektrometras ( RR-Xl ESR: Radical Research Inc., Tokijas, Japonija), naudota 100 kHz lauko moduliacija ir WN-RAD operacinė programinė įranga (Radical Research Inc.). Naudoti ESR sukimosi gaudymo reagentai buvo CYPMPO, skirta " OH, O, RO' ir ROO' ir 4-hidroksi-2,2,6,6-tetrametilpiperidinas (TEMP) reiškia „O. Tipiniai spektrometro nustatymai buvo tokie: lauko moduliacijos plotis.0.1 mT; mikrobangų galia, 10 mW; lauko skenavimo plotis ir greitis+7.5 mT/2 min; ir laiko konstanta, 0,1 s. Kiekvienas ROS buvo sukurtas apšviečiant vietoje UV / matoma šviesa iš iliuminatoriausRUVF-203SR UV iliuminatoriaus, Radical Research Inc.), turinčio 200 W vidutinio slėgio gyvsidabrio / ksenono lanko lempą ir kvarcinis šviesos kreiptuvas, prijungtas prie rezonatoriaus ertmės. Šviesos šaltiniai, apšvietimo laikas, pirmtakai ir fotosensibilizatoriai, naudojami ROS gamybai, yra apibendrinti 1 lentelėje. ROS pašalinimo aktyvumas buvo apskaičiuotas pagal anksčiau aprašytą metodą22) ir konvertuojamas į vienetą, atitinkantį žinomus grynus valymo įrenginius: glutationą (GSH) OH. ir „O, superoksido dismutazė (SOD) O, 6-hidroksi-2, 5,7, 8-tetrametilchromano-2-karboksirūgštis (Trolox), skirta RO“, ir -lipoinė rūgštis, skirta ROO'MULTIS, kiekvienos ROS matavimai buvo atlikti trimis egzemplioriais.

Lipofiliškumo matavimas

Ros skalbimo veikla visame kraujyje naudojant i-Strap. Lipofilinis RO pašalinimo aktyvumas buvo matuojamas naudojant i-STrap ESR matavimo ki (Dojin-Glocal/Dojindo, Kumamoto, Japonija), remiantis gamintojo protokolu ir ankstesne ataskaita.2s Šis metodas pagrįstas konkurencine reakcija tarp antioksidantų visame kraujyje ir DPhPMPO. su tret-butilo hidroperoksidu (BuOOHradical. Viso kraujo mėginiai buvo inkubuojami su DPhPMPO (1{{10}} mM) ir bandomuoju-BuOOH (10 mM) 30 min kambario temperatūroje. Po inkubacijos suk aduktai organinėje fazėje buvo ekstrahuojami naudojant chloroformo ir metanolio tirpalus; ESR matavimai buvo atlikti naudojant šiuos organinius mėginius. Matavimo sąlygos buvo tokios pačios kaip ir atliekant MULTISmatavimą, išskyrus lauko skenavimo plotį ir greitį, nustatytą +5 .0 mT/2 min., i-STrap matavimui nebuvo specifinių antioksidantų, todėl valymo aktyvumas buvo išreikštas kaip 10/-1 reikšmė, kur "0" reiškia signalo intensyvumą be pavyzdžio, o "" reiškia signalą intensyvumas su mėginiu (28)Reagentai. CYPMPO buvo gautas iš RR INC. (Japonija); riboflavinas, 2,2'-azobis (2-amidinopropanas) dihidrochloridas (AAPH), text-BuOOH, dimetilsulfoksidas (DMSO) ir rožė Bengalijos buvo įsigyti iš Sigma-Aldrich Japan (Tokijas, Japonija), o TEMP buvo nupirktas iš Tokijo chemijos pramonės (Tokijas, Japonija). Vandenilio peroksidas ir buferiai buvo gauti iš WakoChemical Co. (Osaka, Japonija).Statistinė analizė."Statistinė analizė buvo atlikta naudojant Prism 6, skirtą Mac OS X kompiuterių programinei įrangai (GraphPad SoftwareInc., La Jolla, CA). Duomenys buvo tikrinami naudojant Student's suporuotas t testas Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinės vertės su 95 % pasikliautinuoju intervalu (95 % PI.